结核分枝杆菌复合群检测在AIDS合并结核病诊断中的应用

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分子生物学技术在结核病诊断中的应用分析

分子生物学技术在结核病诊断中的应用分析摘要：目的对分子生物学技术在结核病诊断中的应用实施分析。

方法本次研究中共计选择了2020年1月至2020年12月期间在我中心初诊为肺结核疑似病例或临床病例的371例患者为对象，371例患者均为痰涂片阴性病例，对其全部开展DNA实时荧光恒温扩增检测和交叉引物恒温扩增检测技术和改良罗氏培养进行诊断。

结果所有参与本次研究的371例初诊为肺结核疑似病例或临床病例，通过DNA实时荧光恒温扩增检测和交叉引物恒温扩增检测技术进行诊断之后，最终有63例患者确诊为分子生物学阳性病例、47例为培养阳性病例。

DNA实时荧光恒温扩增检测和交叉引物恒温扩增检测阳性率比涂片镜检和改良罗氏培养更高。

结论在对肺结核疑似病例或临床病例实施诊断期间，对患者采取实时DNA实时荧光恒温扩增检测和交叉引物恒温扩增检测具有比较高的诊断效果，值得推广。

关键词:分子生物学技术；结核病；诊断；价值结核病是由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染病,是全球最具威胁的传染病之一。

据世界卫生组织统计,我国患结核病人数居世界第2位,是全世界22个结核病流行严重的国家之一[1]。

结核病实验室检查是结核病诊断、治疗方案制定和治疗效果评估的重要依据。

目前我国大多数实验室广泛采用细菌学检查方法,包括抗酸杆菌痰涂片镜检和分枝杆菌分离培养。

涂片检查简便、易行,但阳性检查率较低[2];分离培养法是目前结核病诊断的金标准,具有很高的灵敏度,但至少需要3~8周的时间,但耗时较长,不能满足结核病早期诊断的要求。

随着分子生物学的发展,近年来涌现出很多方法用于结核分枝杆菌的快速诊断及鉴定[3]。

本文正是基于此，选择了2020年1月至2020年12月期间在我中心初诊为肺结核疑似病例或临床病例的371例患者为对象，对分子生物学技术在结核病诊断中的应用进行分析，具体的研究情况报道如下。

1资料与方法1.1一般资料本次研究中共计选择了2020年1月至2020年12月期间在我中心初诊为肺结核疑似病例或临床病例的371例患者为对象，对所有患者共计742份痰标本进行诊断。

肺结核的诊断与治疗2

织）
• 第三阶段：治疗3－6月或8－9月，杀灭极少数持续菌
现在是54页\一共有76页\编辑于星期五
统一标准化学治疗方案
I类病人
2EHRZ/6HE 2EHRZ/4HR 2EHRZ/4H3R3 2SHP/10HP
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统一标准化学治疗方案
II类病人
2SEHRZ/1HREZ/5H3R3E3
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肺结核的诊断
• 临床表现
发热盗汗体重下降疲乏、无力超敏感症候群
37-80％ 63％ 85％ 77％ 10-20％
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诊断
肺结核诊断流程图
发现肺结核可疑者留取晨痰3份涂片找AFB菌
阳性
肺内有可疑结核病灶
拍摄X线胸片阴性
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病灶中生长速度不同的结核分枝杆菌菌群
• A群：生长繁殖旺盛，存在于细胞外，致病力强，传染性大，多在疾病的早期活动性病灶内，空洞壁内或空洞内，易被抗结核药物所杀灭，尤以异烟肼效果最好，起主要杀菌作用，链霉素及利福平亦有效，但不及前者。
现在是3页\一共有76页\编辑于星期五
继发型肺结核
• 多位于两肺上叶尖后段或下叶背段
• 包括浸润性肺结核，干酪样肺炎，结核球，纤维空洞性肺结核等
现在是29页\一共有76页\编辑于星期五
浸润性肺结核
• 渗出性病变 – 呈小斑片状，密度不均，边缘模糊不清，或为毛玻璃样渗出，周边有小的播散性结节，沿支气管血管束分布
– 局部肺小叶间隔的增厚、支气管血管束增粗和支气管管壁增厚
第一线抗结核药

肺结核的诊断和治疗ppt课件【86页】

全世界约三分之一的人群感染了结核分枝杆菌，《2012年全球结核病报告》显示，在2011年有870万新发病例， 140万人死于结核病
活动性结核与潜伏性结核
新发TB病例来自潜伏性结核感染人群
潜伏性结核感染（hidden epidemic）人群数量巨大— —“定时炸弹”
活动性TB – 全球每年900万新发病
５．结核菌素试验检出结核分枝杆菌感染，而非检出结核
病。对儿童、少年及青年的结核病诊断有参考意义。不能区分自然感染或是卡介苗接种的免疫反应。方法：结核菌素纯蛋白衍生物（PPD_RT23)。左侧前臂屈侧中上部1/3处， 0.1ml(5IU)皮内注射，26号10cm一次性短斜面针头和和1cm注射器。
肺结核诊断
５．结核菌素试验 48—72小时观察及判断结果。测量硬结
的横径及纵径，平均直径（横径+纵径） /2。＜4mm为阴性 5—9mm弱阳性 10—19mm阳性＞20mm或虽＜20mm但局部出现水泡和淋巴管炎为强阳性
肺结核诊断
５．结核菌素试验
阴性反应结果的儿童，一般表明未受过结核分枝杆菌的感染，可除外结核病。
ＴＳ）
我国疫情
高感染率高肺结核患病率高耐药率死亡人数多递降率低中青年患病多地区患病率差异大实施ＤＯＴＳ项目的地区患病率低
结核分枝杆菌
种属放线菌目、分枝杆菌科、分枝杆菌属。分类人型、牛型、非洲型和鼠型４类。
生物学特性
１．多形性：细长稍弯曲两端圆形，痰标本中可呈T、V、Ｙ形，及丝状、球状、棒状。
２．传播途径：飞沫传播：通过咳嗽、喷嚏、大笑、大声谈话产生微滴排到空气中传播
结核病在人群中的传播
３．易感人群自然抵抗力：与遗传因素、生活贫困、居住拥挤、营养不良有关。婴幼儿、老年人、HIV感染者、免疫抑制剂使用者、慢性疾病患者易患。获得性特异性抵抗力：来自自然或人工感染。山区及农村居民移居城市易感。

IS6110基因缺失结核分枝杆菌感染的肺结核一例

• 302 •中国防痨杂志2021 年 3 月第 43 卷第3 期Chin J Antituben^M arch 2021，V〇1. 43,No. 3•病例报告•L SW iO基因缺失结核分枝杆菌感染的肺结核一例谈小文王媛崔晓利党丽云雷静任斐赵国连分子生物学检测方法因其具有检测敏感度高、特异性强和时效性高等特点，成为结核病快速珍断的重要检测手段。

对于分子生物学检测，寻找检测效率高且存在特异性的靶基因尤为重要，分子检测靶基因的种属特异性和多拷贝序列是确保检测结果准确性和高效性的重要因素。

结核病分子生物学病原诊断常用的诊断靶标有rfiiV A jqB 和基因等，以上基因均属于管家基因。

其中IS6n〇为多拷贝基因，其用于病原学诊断敏感度高于单拷贝基因，但是基因并非存在于所有结核分枝杆菌中，有的菌株/S6]〗0基因缺失，可能造成假阴性结果2。

本研究对西安市胸科医院收治的1例基因零拷贝菌株感染的结核病患者病原学诊断过程及分离株测序结果进行分析，旨在为临床诊断工作提供借鉴。

临床资料患者，男，50岁。

因间断咳嗽、咳痰、胸闷、气促10个月，伴发热1周，于2020年6月13日入住西安市胸科医院。

患者5年前无明显诱因出现咳嗽、咳白色黏痰，未行特殊处理。

2019年8月27日患者因胸闷、气促，就诊于当地医院，诊断为“尘肺”，给予对症治疗后症状稍有好转，但活动后仍感到气促，休息后可缓解，随着病程进展，气促症状逐渐加重。

患者于2020年6月5日出现发热，最高体温37.9。

，午后明显.无畏寒、寒颤，就诊于山阳县中医医院，行胸部CT 示双肺出现病灶并形成空洞，不排除肺结核可能，遂来我院做进一步诊断治疗。

患病期间，患者无咯血，无胸痛和心慌，无恶心和呕吐，体质量6个月减轻10 kg。

人院时体格检查:体温37 °C，脉搏92次/m in,呼吸频率开放科学（资源服务）标识码（OSID)的开放科学计划以二维码为入口，提供丰富的线上扩展功能，包括作者对论文背景的语音介绍、该研究的附加说明、与读者的交互问答、拓展学术圈等。

肺结核诊断标准

肺结核诊断标准(WＳ288－２008)1、范围本标准规定了肺结核诊断依据、诊断原则与鉴别诊断。

本标准适用于全国各级医疗卫生机构及其工作人员对肺结核得诊断、报告。

2、诊断依据２.1 流行病学结核患者发病时,大多不易查出其传染来源。

当易感者与具传染性得肺结核患者密切接触时被感染。

２。

２临床表现2、２、1 症状咳嗽、咳痰≥2周,或咯血为肺结核可疑症状。

多数起病缓慢,部分患者早期可无明显症状,随着病变进展,患者可表现咳嗽、咳痰、咳血痰或咯血,盗汗,疲乏,间断或持续午后低热,背部酸痛,食欲不振,体重减轻,女性患者可伴有月经失调或闭经,部分患者可有反复发作得上呼吸道症状,儿童还可表现发育迟缓等。

少数患者起病急剧,特别就是在急性血行播散性肺结核、干酪性肺炎以及结核性胸膜炎时,多伴有中、高度发热,胸痛与不同程度得呼吸困难等、当有支气管结核时,咳嗽较剧,持续时问较长;支气管淋巴瘘形成并破人支气管阻塞气道或支气管结核导致气管或支气管狭窄,可伴有气喘与呼吸困难。

当肺结核合并肺外结核时,还可表现肺外器官相应症状。

当肺结核合并其她病原菌感染时,多有中、高度发热,咳痰性状则会有相应变化,如咳黄、绿色痰等。

少数患者还可伴有结核变态反应引起得过敏表现,包括:结节性红斑、疱疹性结膜炎与结核风湿症等。

患者可以以一个或多个症状为主要表现,有少部分患者即使肺内已形成空洞也无自觉症状,仅靠胸部影像学检查时发现。

2.2、2 体征早期肺部体征不明显,当病变为大叶性干酪性肺炎时,局部叩诊呈浊音,听诊可闻及管状呼吸音,有空洞合并感染或合并支气管扩张时,可闻及干或湿性啰音。

少部分患者延误诊治时间较长或合并一侧肺不张时,可表现气管向患侧移位,患侧胸廓塌陷、肋间隙变窄、叩诊为浊音或实音、听诊呼吸音减弱或消失;健侧胸廓饱满、肋间隙增宽、叩诊为过清音等。

当病情严重时,患者除呼吸系统体征外,还可表现面色萎黄,结膜、甲床与皮肤苍白以及消瘦等相应部位体征。

当肺结核合并结核性胸膜炎时,早期于患侧可闻及胸膜摩擦音,随着胸腔积液得增加,患侧胸廓饱满,肋间隙增宽,气管向健侧移位,患侧叩诊呈浊音至实音,听诊呼吸音减弱至消失。

三种检测技术鉴别结核分枝杆菌复合群与非结核分枝杆菌的效能评价

•240 •结核与肺部疾病杂志 2020 年12 月第1卷第3 期J Tuberc Lung Dis，December 2020, Vol. 1，No. 3•论著.三种检测技术鉴别结核分枝杆菌复合群与非结核分枝杆菌的效能评价易俊莉杨新宇张洁田丽丽丁北川武文清【摘要1目的评价对硝基苯甲酸/噻吩-2-竣酸肼（PNB/T C H)生长试验法、结核分枝杆菌抗原（MPB64)检测法、PCR-荧光探针法在结核分枝杆菌复合群(MTBC)与非结核分枝杆菌(N TM)鉴别中的应用价值。

方法11株标准菌株包括M T B标准株H37R v及10株N T M标准菌株均来源于国家结核病参比实验室。

238株临床分离株为北京结核病控制研究所2019年1一 12月门诊患者培养阳性冻存菌株，经涂片抗酸染色均为阳性。

应用 PNB/T C H生长试验法、MPB64检测法、PCR-荧光探针法及微阵列基因芯片法对11株标准菌株及238株临床分离株进行鉴定;以微阵列基因芯片法菌种鉴定结果为参照，评价PNB/T C H生长试验法、MPB64检测法、PCR-荧光探针法鉴别M T B C与N T M的效能。

结果以微阵列基因芯片法菌种鉴定结果为参照，PNB/T C H生长试验法、MPB64检测法、PGR-荧光探针法检测M T B C的敏感度分别为100_ 0%(206/206)、98. 5%(203/206)、100. 0% (206/206);特异度分别为 96. 9%(31/32)、100. 0%(32/32)、100. 0%(32/32);符合率分别为 99. 6%(237/238)、98. 7%(235/238)、100. 0%(238/238); K冲/« 值分别为 0• 98、0. 95、1.00。

PN B/TC H生长试验法、MPB64 检测法、PCR-荧光探针法检测周期分别为28 d、0. 5 h、0. 5 d，检测平均成本分别为20、40、60元。

结核感染T细胞检测(T-SPOT.TB)简介与临床应用

结核菌的特性和临床检测的现状又是如何？
1、结核病疫情严重
全球 • 20亿人口感染结核 • 现有活动性结核病患者2000万 • 新增活动性结核病人约900万/年 • 每年200-300万患者死亡
我国
结核病高负担国家之一，患者人数仅次于印度，居全球第二位
• 约5.5亿人口感染过结核菌 • 现有活动性肺结核患者450万 • 新发患者145万/年 • 死亡人数13万/年
- 胸部的 X-光或 CT 扫描显示异常
- 肺外结核难以诊断 (特别是儿童)
活动性结核
• 新发TB病例来自潜伏性结核感染人群
• 潜伏性结核感染（latent TB Infection, LTBI）人群数量巨大——“定时炸弹”
全面性
目前检测方法是否满足临床需求？
• 细菌学 • 免疫学
灵敏度性能不稳定
结核感染T细胞检测（T-SPOT.TB）简介与临床应用
什么是结核病
• 结核病是由结核杆菌感染引起的慢性传染病。结核菌能侵入全身各个器官，但80% 发生在肺部，常称肺结核。
• 结核病又称为“痨病”和“白色瘟疫”，是一种古老的传染病。
• 人与人之间呼吸道传播是本病传染的主要方式。传染源是接触排菌的肺结核患者，而肺外结核病则不具有传染性。
暴露程度不足，结核杆菌被机体免疫力清除
- 没有症状,结核杆菌仍旧存在而不能被侦测
- X-光/ CT 扫描显示正常
- 没有抗体应答
- 诊断困难
- 传统的结核感染检测只有 TST（PPD）
机体被感染
受机体免疫力抑制没有临床症状
终身处于感染状态
潜伏感染
5%
5%
再次激活
有临床症状具有传染性

结核病的分子检测

• 其他自动化仪器包括 VersaTREK等
• 可自动孵育、自动检测、自动报告阳性或阴性结果
• 培养周期42天，MGIT系统平均报阳时间4-11天
比固体培养方法更为敏感－提高10%的阳性检出率可进行后续的菌型鉴定和药敏实验相较固体培养更短的报告时间：培养：10天 vs 28-42天药敏：11天 vs 28天缺陷：液体培养污染率更高。
自动染片机和显微扫描仪提高工作效率和结果的准确性
常用培养基：罗氏培养基，37℃培养培养周期：56天结果观察：培养第3天、第7天各观察1次，以后每周观察一次。发现有菌生长，立刻进行抗酸染色菌落特征：典型菌落为干燥、坚硬、表面呈颗粒状，乳酪色或淡黄色，形似菜花样。
•准确，灵敏度略高于涂片法； •可以鉴别死菌与活菌；优点 •可进一步进行菌种鉴定和药敏试验 •历史悠久，使用广泛（１９００年从 •Ｌｏｗｅｎｓｔｅｉｎ鸡蛋培养基开始使用）
临床问题及需求
临床问题
结核病疫情严重
结核病疫情严重，中国的结核病疫情全球位列第二位，仅次于印度。
结核病的现有诊断水平低下
传统的痰涂片抗酸染色阳性率仅16%，痰结核分枝杆菌培养阳性率30%-40%，但是耗时6-8周，时间太长！
新型的诊断工具缺乏分子生物学诊断技术比如普通DNA、RNA分子检测技术已经应用于临床，但存在污染，联合现有的DNA/RNA诊断技术快速诊断阳性率仅40%，且无法行耐药检测。 17
上海市结核病分级诊疗文件
21
第一类：结核杆菌种特异性的分子检测 • 实时荧光定量PCR检测DNA（IS6110、HSP65、rpoB等） • 半巢式全自动实时荧光定量PCR检测（Xpert MTB/RIF） • 环介导等温扩增法(LAMP） • 实时荧光核酸恒温扩增检测技术 • 交叉引物扩增技术（CPA） • 线性探针技术

结核分枝杆菌复合群四重PCR检测方法的建立及应用

ｔｎｏｇａｄｄｉｆＭｎＮＴＰｗｅｅｓｒｅｅ，ａｄｔｅｒａｔｏｏｄｔｎｗａｐｉｚｄＴｈｒｄｃｉｅｒ２ｐ，６１ｂｏｒｃｅｎｄｎｈｅｃｉｎｃｎｉｉｓｏｔｍｉｅ．ｏｅｐｏｕｔｓｚｓｗｅｅ８４ｂ２ｐ，４８１ｂｎ５ｐｒｓｅｔｅｙｔｅｒｓｎｏｕｅｃｌｓｓｍｙｏａｔｒｕ（ｎａｄｏ２ｐ，Ｂｐａｄ２４ｂｅｐｃｉｌｏｒｐｅｅｔｎｎｔｂｒｕｏｉｖｃｂｃｅｉｍｏｅｂｎｆ８４ｂ）ＣＧ（ｗｏｂｎｓｏ２ｐａｄｔａｄｆ８４ｂｎ６１ｂ）Ｍｙｏａｔｒｕｂｒｓ（ｈｅａｄｆ８４ｐ６１ｐａｄ２４ｂ２ｐ，ｃｂｃｅｉｍｏｉｔｒｅｂｎｓｏ２ｂ，２ｂｎ５ｐ）ａｄＭｙｏａｔｒｕｔｂｒｕｏｉ（ｌｈｏｒｎｃｂｃｅｉｍｕｅｃｌｓｓａｌｅｆｕｔ
ＰＲ需要多次反应才能完成分型鉴定全过程，仅Ｃ不耗时耗力，时也增加了不确定性。同
的引物组合。
１４不同样品的处理及Ｄ．ＮＡ抽提１４１细菌处理经纯化培养的结核分枝杆菌、．．
结核病是一种古老的、性消耗性人兽共患传慢染病。人结核主要由结核分枝杆菌

关于开展结核特异性细胞因子IFN-γ和IL-2联合检测的可行性报告

关于开展“结核特异性细胞因子IFN-γ和IL-2联合检测”项目可行性报告××医院×年×月×日目录一、项目背景介绍 (3)（一）结核病的现状 (3)（二）我国结核病临床诊断的痛点、难点 (3)（三）现有结核病诊断技术的优缺点 (5)二、项目的国内外研究进展 (6)（一）细胞因子IFN-γ、IL-2可作为“结核病辅助诊断”标志物 (6)（二）IL-2的联合检测，有助于弥补IGRA技术的不足 (6)三、项目开展的临床价值 (8)四、双因子试剂盒简介 (11)五、同类产品比较分析 (13)六、项目开展的效益分析 (15)七、项目开展的实验室设备要求 (16)八、迪澳生物简介 (17)九、参考文献 (18)一、项目背景介绍（一）结核病的现状结核病是一种严重危害人类健康的慢性呼吸道传染病，其病原体是结核分枝杆菌，是人类所知的最古老的一种传染病。

当结核病患者将细菌排入空气时，结核分枝杆菌就会传播，例如通过咳嗽等。

该疾病通常累及肺部（肺结核），但也可累及其他部位（肺外结核病）。

近10年来，由于高感染人群和高危人群的流动、结核杆菌耐药菌株的出现、卡介苗免疫效果偏低以及人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的蔓延等原因，结核病以极其迅猛的势头再次肆虐全球。

据世界卫生组织（WHO）《2020年全球结核病报告》显示，全球结核潜伏感染人群接近20亿。

2019年，全球新发结核病患者约996万，约有121万人死于结核病。

而我国结核病的流行形势亦非常严峻，我国是全球30个结核病高负担国家之一，位居全球第3位，每年新报告肺结核患者约83.3万例，位居甲乙类传染病第2位。

结核病的传染主要是发生在病人未被发现并进行治疗之前，1名结核病患者平均可传染15人，而目前全球普遍存在结核病诊断不足以及病例低报等现象。

为进一步遏制结核病流行，推进健康中国建设，2019年5月国家卫生健康委、国家发展改革委、教育部、科技部、民政部、财政部、国务院扶贫办和国家医保局联合制定了《遏制结核病行动计划（2019—2022 年）》，并指出：结核病的早期快速诊断是预防和控制结核病蔓延的关键。

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五、计学方法统
经培训的医护人员规范采集临床样本Ｊ，
ＡＤＩＳ组１７例样本均为痰液，照组２２对５例样本
中有３例灌洗液、３例术后痰、例支气管刷落物。１三、仪器和试剂
１．美国ＧＮＰＯＥＬＡＥ０化学发光Ｅ —ＲＢＥＤＲ５ｉ
（ＭＡ）接扩增结核分枝杆菌复合群（Ｄ）Ｔ直ＭＴ
具有以下入组标准１条以上症状者即可入组。（）１持续发热在３８℃ 左右超过２周者；２（）频繁咳嗽或阵发性咳嗽、咳痰超过３周者；３咳（）
学２１生月第２卷第６期Ｌｂｒｏｅｉｎ，ｕｅ０２Ｖｌ７ｏ０２７ａｏｔｙｄｉＪｎ１，ｏ２．ＮａｒＭｃｅ２６
结明显红、、肿痛并持续发热超过２周者；９胸、（）
腹水原因不明并持续发热超过２周者。２００９年７
ＴｈａｐｉａｉｎｏｙｏａｔｒｕｅｐｌｔｆＭｃｂｃｅｉｍｔｂｒｕｏｉｉｅｔｔｓｎｔｅｉｇｏｉｏＤＳＯｉｆｃｉｎｗｉｈｃｏｕｅｃｌｓｓｄｒｃｅｔｉｈｄａｎｓｓｆＡＩＣ－ｅｔｏｔｎ
血或伴有血痰者；４有盗汗者；５有咽痛、（）（）胸痛
超过２周者；６胸腔积液，部ｘ线检查异常（）胸
ＲＡ在ＡＤＮＩＳ合并结核病患者实验诊断的临床
应用
者；７头痛伴或不伴呕吐、识障碍者；８淋巴（）意（）
ｉｍｎｄｆｉｃｉｓＨＶ）ｉｆｔｎｗｒａａｚｄａｏｔｌｅｕｔＴｅｐｔｍｐｓｉｔｆｈ２ＩＳｍｕ０ｅｉｅｙｖｒ（Ｉｃｎｕｎｅｉｅｅｎｌｅｓｃｎｒｓｃｏｙｏ．Ｒｓｌｈｕｕｏｉｖｒｅｏｅ１７ＡＤｓｓｔｅａｓｔ
二、本种类样
能为ＭＴ重复试验以验证结果（复试验ＲＵＤ，重Ｌｓ＞３００００即可判为阳性）。要求同于检测的阳性比
Ｉ
质控ＲＵ ≥１００００阴性质控ＲＵ＜２０Ｌｓ００，Ｌｓ０００时实验成立。。
性，Ｌｓ３０阴性，０００～９９ＬｓＲＵ＜０００３０４９９９ＲＵ可
２５例，１，７例，男８例女年龄１７８～７岁，同期内为科住院和门诊非人类免疫缺陷病毒（Ｉ感染但ＨＶ）临床疑似结核病待诊患软件中，别采用ＰＳＰＳ１．分配对检验和Ｆｓｅ确切概率法对各组阳性检ｉｒｈ出率进行统计学分析，Ｐ＜００．５表示差异有统计
检验医学２１０２年６月第２７卷第６期
ＬｂｒｔｙＭｅｉｉｅＪｎ０２，ｏ２．Ｎａｏａｏｄｃ，ｕｅ２１Ｖｌ７ｏ６ｒｎ
文章编号：６３８４（０２０４４７０１７．６０２１）６）５－４
中图分类号：４６５Ｒ４．
获得性免疫缺陷综合征（ＩＳ合并结核病ＡＤ）时由于免疫缺陷导致常规抗酸染色阳性率低、结核菌素试验无反应Ｊ临床结核中毒表现不典、
一
材料和方法
、
研究对象
型＿、４结核分枝杆菌培养时问较长。临床诊疗迫切需要实验室提供早期、特异的病原学诊断信息。我们探讨了结核分枝杆菌转录酶主导基因扩增法
继续扩增３ｉ，入１０Ｌ杂交试剂混匀，００ｍｎ加０６
℃ 杂交１ｉ；５ｍｎ加入３０Ｉ０Ｌ筛选试剂混匀６ ℃ ｘ０
１ｎ取出置室温５ｉ后，ｌ５ｍｉ，ｍｎ在ｈ内用
月至２１００年６月共入组１２例疑似结核病待诊５患者。其中ＡＤＩＳ患者１７例，８２男４例，４女３例，年龄８～４岁。由云南省艾滋病关爱中心艾滋病７确证实验室采用免疫印迹法（ＷＢ）确证。对照组
６００，ｈｎ）５３１Ｃｉａ
Ａｓｒｃ：ｊｃｖＴｎｅｔａｅｃｎｃｌａｐｃｔｎｏｃｂｃｒｍｔｂｒｕｓｉｃＭＤ）ｔｔｎｂｔｔ０ｂｅｔｅｏｉｖｓｇｔｔｌｉｐｌａｏｆａｉｉｅｈｉａｉｉＭｙｏａｔｉｕｅｌｉｄｒｔ（ＴｅｕｃｏｓｅｅｓｉｔｅｄａｎｓｆｃｕｅｍｕｅｄｆｉｃｙｄｏｅＡＤ）Ｃ— ｆｃｏｉｕｅｃｌｉ．ＭｅｏｓＴｅｓｕｕｈｉｇｏｉｏｑｉｄｉｎｅｃｎｙｓｎｒｍ（ＩＳＯｉｅｔｎｗｔｔｒｏｓｓａｒｍｉｅｎｉｈｂｕｓｔｄｈｐｔｈｍ
ｔｕｂｅｃｏｉＹｒｕｌｓｓＡＮＧＳｏｉＦＡＮ￣ｓａｎ，Ｌｉｉｈａｍｎ，ｈＩＨｕｑｎ，ＧＡＯＬｉＡＮＧｈｕ，ＺＨＡＮＧｉＬＺｈｎｌｎ，ＺＨＯＵ，ＹＢｉｉＭ，Ｉｅｇｕ
Ｚｎｑａ．ｅｇｕｎ
（ＩＳＣｒＣｎｅＬｂｒｔｙＹｎａｒｖｃｌＨｓｉｌｏｎｅｉｓＤｓｓ，ＹｎａｕｍｎＡＤａｅｅｔａｏａｏ，ｕｎｎＰｏｉｉｏｔｆＩｃｏｉａｅｕｎｎＫｎｉｇｒｒｎａｐａｆｔｕｅ
基金项目：国家“ 十一五 ” 科技重大专项综合示范区项目（０９Ｘ０４— ０）第４轮中国全球基金／２０Ｚ１０９２；中英艾滋病项目应用性研究项目（０９２０－
Ｇ — Ｙ４）ＦＳ２
作者简介：杨绍敏，，９７年生，女１５学士，主任技师，主要从事微生物检验工作。
ｓｍｐｅｆ１７ａｌｓｏ２ＡＩｐｔｅｔｓｐｃｅｏｔｂｅｃｏｉＣ —ｎｅｔｏｗｅｅＤＳａｉｎｓｕｓｅｔｄｆｕｒｕｌｓｓＯｉｆｃｉｎｒｄｅｅｍｉｄｙｔｒｎｅｂＭＴＤｔｓ，ＭｙｏａｔｒｕｅｔｃｂｃｅｉｍｔｂｒｕｏｉｕｌｕｉｎｃｄｆｓｔｉｅｔＳｔｕｅｃｌｓｓｃｔｒｎｇａｄａｉ —ａｔｓａｎｔｓ．ｐｕｕｍａｌｓｏ５ｉｐｔｅｔｕｐｃｅｆｔｅｃｏｉｔｏｔｈｕｎｓｍｐｅｆ２ｎａｉｎｓｓｓｅｔｄｏｕｂｒｕｌｓｓｗｉｈｕｍａ
文献标志码：Ａ
结核分枝杆菌复合群检测在ＡＤＩＳ合并结核病诊断中的应用
杨绍敏，樊移山，李惠琴，高丽，杨壁珲，张米，李正伦，周曾全
（云南省传染病专科医院艾滋病关爱中心检验科，云南昆明６００）５３１
ＬＡＥ０化学发光检测仪检测样本相对发光ＥＤＲ５ｉ
值（ｅａｖｇｔｎｔ，Ｌｓ样本被检测的同时ｒｌｉｌｈｉＲＵ），ｔｅｉｕｓ
ｒＮＲＡ也被淬灭。结果判断：Ｌｓ００ＲＵ ≥５０００阳
ｐａｉｎｓｗｅｅ２１，２２ｔｔｒ９．％ｅ５．％ａ８．ｎｄ１９％ｂｙＭＴＤｅｔｔｓ，Ｍｙｃｂｃｅｉｍｕｅｃｌｓｓｕｌｉｇａｃｄｆｓｔｉｅｔｏａｔｒｕｔｂｒｕｏｉｃｔｎｎｄａｉ —ａｔｓａｎｔｓ，ｕｒ
摘要：目的探讨结核分枝杆菌复合群（Ｄ）ＭＴ检测在获得性免疫缺陷综合征（ＩＳ合并结核分枝杆菌感ＡＤ）采用ＭＴ结核分枝杆菌培养及抗酸染色３种方法，１７例ＡＤＤ、对２ＩＳ合并疑似分
染实验诊断的临床应用。方法患者２。结果５例论
ｒｓｅｔｅｙｈｏｉｖａｅｆｈｏｔｏｓｗｒ４Ｏ．４０ａｄ４．％ｂＤｓ．Ｍｙｏａｔｉｍｕｅｃｌｓｅｐｃｉｌ．Ｔｅｐｓｔｅｒｔｓｏｅｃｎｒｌｅｅ４．％４．％ｎ００ｖｉｔｙＭＴｔｔｅｃｂｃｅｕｔｂｒｕｏｉｒｓ
枝杆菌感染患者的痰样本进行同步检测，对照组为同期住院非人类免疫缺陷病毒（Ｖ）ＨＩ感染的普通疑似结核病１７例ＡＤ２ＩＳ患者痰样本ＭＴＤ阳性率为２．％；９１结核分枝杆菌培养法阳性率为２．％；５２抗酸染色阳性率为１．％；照组ＭＤ和结核分枝杆菌培养法的阳性率均为４．％，酸染色阳性率为４．％。８９对Ｔ４０抗００结ＭＴＤ对ＡＤＩＳ合并结核病的诊断有较高的应用价值，在提高阳性率的同时可在１个工作日内提供结核分枝关键词：结核分枝杆菌复合群；获得性免疫缺陷综合征；结核病杆菌感染的实验诊断信息。