白术多糖的分离纯化与结构表征
不同产地白术多糖含量考察
不同产地白术多糖含量考察目的分析测定浙江、安徽、河北不同产地白术的多糖含量。
方法用乙醇除去干扰物质后采用水浸提法提取多糖，以苯酚-硫酸比色法测定多糖的含量。
结果多糖含量最高的为浙江白术，其次为安徽白术，再次为河北白术。
结论浙江、安徽、河北三产地白术原药材中多糖含量有存在明显的差异。
标签：白术；多糖；苯酚-硫酸比色法菊科植物白术有健脾益气，燥湿利水，止汗，安胎等功效，常用于治疗脾虚食少，腹胀泄泻，痰饮眩悸，水肿，自汗，胎动不安[1]。
白术主要含挥发油、内酯类和多糖类成分[2]。
由于多糖具有独特疗效的物质基础，白术多糖在抗肿瘤、抗衰老、增强机体免疫力、降血糖等方面的均有作用[3～5]。
白术多为人工栽培品，分布广泛，主产于浙江、安徽、湖南、湖北、江西、河北等地。
其中，浙江的于潜、新昌、天台等地为传统的地道产区。
已有研究表明，白术随生长期或者生长地不同，药材中活性成分的含量不同[6]。
近年来，国内外对白术的需求量大增，传统产地的白术供不应求，因此不同地区的白术培植得到了大力发展。
研究不同产地白术中的活性成分对于白术的研究与医用具有重要的意义。
本文将采用硫酸-苯酚比色法测定产地为浙江、安徽和河北的白术多糖的含量，为评判不同产地白术品质及合理用药提供科学依据。
1 材料与方法1.1仪器与试药采用的主要仪器为双光束紫外-可见分光光度计IU-1901（日本岛津）。
使用的药品试剂包括：80%乙醇、硫酸锌、氢氧化钡、硫酸、苯酚（均为分析纯）、浙江白术、安徽白术、河北白术（由天津中医药大学提供）、葡萄糖对照品（中国药品生物制品检定，批号：110833-200503）。
1.2方法1.2.1供试品溶液的制备称取浙江、安徽、河北三产地白术药材粉末各0.5g，置于平底烧瓶中，分别加入80%乙醇50ml，加热微沸，计时1h停止，放置室温时滤过，滤渣中加入80℃水10ml，浸提1h，取出，趁热滤过，所得滤渣与第一次滤渣合并，加80℃水10ml，继续浸提1h，取出趁热过滤，合并2次所得滤液。
多糖的分离纯化及性质表征共62页
1、身就是 讲道理 ……法 律，也 ----即 明示道 理。— —爱·科 克
3、法律是最保险的头盔。——爱·科 克 4、一个国家如果纲纪不正，其国风一 定颓败 。—— 塞内加 5、法律不能使人人平等，但是在法律 面前人 人是平 等的。 ——波 洛克
6、最大的骄傲于最大的自卑都表示心灵的最软弱无力。——斯宾诺莎 7、自知之明是最难得的知识。——西班牙 8、勇气通往天堂，怯懦通往地狱。——塞内加 9、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。——赫尔普斯 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。——笛卡儿
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多糖的分离纯化
多糖的提取和纯化多糖的提取和纯化摘要本文较详细地介绍了多糖的提取和纯化方法，为多糖的研究和生产提供参考依据。
关键词多糖；提取；纯化；活性炭多糖（polysacharides，PS），又称多聚糖，是由10个以上的单糖通过苷键连接而成的，具有广泛生物活性的天然大分子化合物。
它广泛分布于自然界高等植物、藻类、微生物（细菌和真菌）与动物体内。
20世纪60年代以来，人们逐渐发现多糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能[1]：(1)多糖可作为广谱免疫促进剂，具有免疫调节功能，能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病，甚至能抗AIDS病毒[2]。
如甘草多糖具有明显的抗病毒和抗肿瘤作用[10]，黑木耳多糖、银杏外种皮多糖和芦荟多糖可抗肿瘤和增强人体免疫功能[3-5]。
(2)多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质的生物合成作用。
如柴胡多糖具有抗辐射，增强免疫功能等生物学作用[6]，麦冬多糖具有降血糖及免疫增强作用[7-8]，动物黏多糖具有抗凝血、降血脂等功能[9]。
(3)多糖能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰老。
如爬山虎多糖具有抗病毒和抗衰老作用[10]，银杏外种皮粗多糖具有抗衰老、抗过敏、降血脂、止咳祛痰、减肥等功能[11]。
另外，多糖作为药物，其毒性极小，因而多糖的研究已引起人们极大的兴趣。
由于多糖具有的生物活性与其结构紧密相关，而多糖的结构又是相当复杂的，所以在这一领域的研究相对缓慢。
但人们在多糖的分离提取与纯化方面已做出了不少工作。
1. 多糖的提取[12]1.1 热水浸提法：1.1.1多糖提取条件的优选根据文献报道[13]：影响热水浸提多糖的因素主要有提取时间、提取次数、溶剂体积、浸提温度、pH值、醇析浓度和植物颗粒大小等。
在试验前对上述多种因素利用正交实验法做出优选，才能选出最佳提取方案。
1.1.2其步骤为：原料→粉碎→脱脂→粗提（2－3次）→吸滤或离心→沉淀→洗涤→干燥首先除去表面脂肪。
植物多糖提取、分离纯化及鉴定方法的研究进展
然而，本研究仍存在一定的不足之处，例如实验范围较窄，未能全面考虑各 种因素对多糖提取、分离纯化及分析鉴定的影响。未来可以进一步拓展研究范围， 探讨更加高效、环保的多糖提取方法和纯化技术，同时深入研究多糖的结构与功 能关系，为多糖的应用提供更多理论依据和技术支持。
一、植物多糖概述
植物多糖是由植物细胞壁和细胞间层组成的复杂碳水化合物，具有调节植物 生理功能、增强免疫力等多种生物活性。近年来，随着生物技术的不断发展，植 物多糖在医药、保健、农业等领域的应用价值逐渐被挖掘出来，引起了广泛。
在分析鉴定方面，采用光谱分析法可以获得多糖的结构信息，而电化学分析 法则可以快速、准确地测定多糖的含量。
结论
本次演示对多糖的提取、分离纯化及分析鉴定方法进行了详细的研究，得出 了各种方法的相关优缺点。实验结果表明，乙醇提取法是一种高效、环保的多糖 提取方法；沉淀法和吸附法相结合可以获得高纯度的多糖；光谱分析法可以提供 多糖的结构信息，而电化学分析法则可以快速、准确地测定多糖的含量。
在分离纯化方面，除了传统的沉淀法、色谱法和膜分离等方法外，一些新的 分离技术如分子印迹技术、电泳技术等也被应用于多糖的分离纯化。此外，一些 新型材料如聚合物材料、无机材料等也被用于制备分离纯化多糖的新型膜和填料， 取得了很好的效果。
在鉴定方面，除了传统的化学法和光谱法外，一些新的鉴定技术如质谱技术、 基因工程技术等也被应用于多糖的鉴定。此外，一些新的生物活性方法也被用于 测定多糖的生物活性，如细胞试验、动物试验等。
四、研究进展概述
随着植物多糖在各个领域的应用价值逐渐被挖掘出来，植物多糖提取分离纯 化的研究也取得了长足的进展。从早期的水提取法、酸碱提取法等传统方法，到 后来的离子交换法、色谱法等较为先进的方法，植物多糖的提取分离纯化技术不 断发展。同时，各种新技术的应用也使得植物多糖的得率、纯度和结构分析更加 准确可靠。
[生物学]多糖提取纯化以及结构解析
![[生物学]多糖提取纯化以及结构解析](https://img.taocdn.com/s3/m/94863372ad02de80d4d840ea.png)
2012.10.31
浙江中医药大学中药炮制中心
• 多糖的种类： 1）均一多糖(同多糖)： 由一种单糖缩合而成。
2012.10.31
浙江中医药大学中药炮制中心
• 不均一多糖(杂多糖)： 由不同类型单糖缩合 而成
2012.10.31
浙江中医药大学中药炮制中心
• 一：分子量及分子式的确定 质谱分析测定分子量和分子式。 苷类化合物一般极性较大，无挥发性，遇热气化时 易于分解，采用电子轰击质谱(EI—MS)常常不能获得分子 离子峰。 现多采用化学电离质谱(CI-MS)、场解吸质谱(FDMS)、快原子轰击质谱(FAB-MS)和电喷雾质谱(ESI-MS)等 方法来获得分子离子蜂，尤其是ESI-MS及FAB-MS两种质谱 法更是目前测定苷类分子量常用的方法。
脂、提高机体免疫和抗肿瘤、抗辐射方面
都具有很广泛的应用。
2012.10.31
浙江中医药大学中药炮制中心
糖的分类
单糖
寡糖
多糖 复合糖 衍生糖
•凡不能被水解为更小分子的糖称。 • 如：核糖、葡萄糖
•凡能被水解成少数（2—10个）单糖分子的糖称~。 • 如：蔗糖 葡萄糖+果糖 • 凡能被水解成多个单糖分子的糖称~。 • 如：淀粉 n葡萄糖 •与非糖物质结合的糖。 • 如：糖脂、糖蛋白(蛋白聚糖)、糖核苷酸等。 •糖的衍生物。 •如：糖醇、糖酸、糖胺、糖苷等
浙江中医药大学中药炮制中心
盐析法原理原理 利用不同多糖与金属离子成盐后在水溶液中的特异性 沉淀作用，用硫酸铵、乙酸钾、氯化钾等盐析剂，将 不同的多糖逐步析出。
金属配合物法原理： 利用不同多糖能与金属离子形成配合 物而沉淀下来，使用多种配位剂沉淀多 糖。
2012.10.31
药用白术的研究
湖北中医药大学本科生毕业论文题目：药用白术的研究姓名：李晓华学号： 20080305002专业：中药资源与开发年级： 2008 级实习单位：武汉市健恒药业有限公司指导老师：刘强完成日期： 2012 年 5 月 10日药用白术的研究白术为菊科植物白术（Atractylodes macrocephala Koidz.）的干燥根茎，为我国传统用药，始载于《神农本草经》，原名“术”，后因宋代林亿等人的极力推行，改为白术。
白术是道地药材“浙八味”之一。
野生白术主要产于浙江於潜、昌化、天目山一带，以於潜所产白术质量为佳，称“於术”，现多栽培，少有野生。
2005 年版《中国药典》中白术药材居全国大宗常用中药材之首，全国年需求量 7000t[1]。
白术性温，味苦甘，有补脾、益胃、燥湿、和中的功效，常用于脾胃气弱、不思饮食、腹胀泄泻、痰饮眩悸、水肿、自汗、胎动不安等症状，经典医书中就有“脾虚不健，术能补之，胃虚不纳，术能助之”的论断[2]。
1 白术的药用资源研究1.1 白术的鉴别1.1.1白术性状鉴别根茎规则的肥厚团块，长3-13cm，直径1.5-7cm。
表面灰黄构灰棕色，有瘤状突起及断续的纵皱和沟纹，并有须根痕，顶端有殖留茎基和芽痕。
质坚硬，不易折断；断面不平坦，黄白色至淡棕色，有棕黄色的点状油室散在，烘干者断面角质样，色较深或有裂隙。
茎下部叶羽状分裂，上部叶狭披针形。
秋季开紫花，全为管状。
气清香，味甘、微辛，嚼之略带粘性。
以个大、质坚实、断面黄白色、香气浓者为佳[3]。
1.1.2白术显微鉴别根茎横切面：木栓层为1-5列木栓细胞，其间夹有1-2列断续的石细胞带。
皮层、韧皮部及射线中散有油室，长径180-370μm，短径135-200μm。
表成层环明显。
木质部外侧的导管1-3列径向排列，基旁无木纤维束，内侧的导管周围有较发达的木纤维束。
薄壁细胞中含草酸钙会晶和菊糖[4]。
1.1.3 白术理化鉴别（1）取本品粉末1g，加乙醚5ml，振摇浸出15min，滤过。
活性多糖提取纯化及结构解析的研究进展
活性多糖提取纯化及结构解析的研究进展活性多糖是一类具有生物活性和药用价值的多糖类化合物，广泛存在于植物、菌类、藻类和动物等生物体中。
活性多糖具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节、抗炎、降血脂、抗凝血等功能，因此受到了广泛关注。
由于活性多糖在天然状态下存在于复杂的生物基质中，提取纯化及结构解析一直是制约其深入研究和应用的难点。
开展活性多糖的提取纯化及结构解析的研究具有重要的理论和应用价值。
活性多糖的提取纯化是活性多糖研究的基础和关键，其主要目的是将活性多糖从复杂的生物基质中分离出来，得到高纯度的活性多糖样品，为后续的结构解析和生物活性评价提供保障。
目前，活性多糖的提取纯化方法主要包括传统热水提取法、固态发酵提取法、酶解法、超声波辅助提取法、离子液体提取法等。
这些提取方法各有优缺点，有待于进一步的优化和改进。
（一）传统热水提取法传统热水提取法是目前活性多糖提取纯化的常用方法之一，其原理是利用水的高温和高压对生物基质中的活性多糖进行破坏和溶解，然后通过过滤、浓缩、沉淀等步骤得到纯化的活性多糖。
这种方法操作简单，成本低廉，但由于水的极性较小，对一些极性较强的活性多糖提取效果不佳，在提取过程中易导致活性多糖的破坏和降解。
（二）固态发酵提取法固态发酵提取法是利用微生物对生物基质中的多糖进行降解和转化，然后通过固态发酵液的提取和纯化得到活性多糖。
这种方法能够有效地提高活性多糖的产率和纯度，但由于微生物的种类和生长环境等因素的影响，提取效果不稳定，需要对发酵条件进行细致的控制和调整。
（三）酶解法（四）超声波辅助提取法超声波辅助提取法是利用超声波的机械作用和热效应对生物基质中的多糖进行破碎和溶解，然后通过超声波液的分离和纯化得到活性多糖。
这种方法能够在较短时间内提取大量的活性多糖，但由于超声波对生物基质中的活性多糖有一定的破坏作用，提取过程中需要控制超声波的功率和时间。
（五）离子液体提取法以上提取方法各有优劣，目前的研究主要集中在提取条件的优化和提取效果的比较上，希望通过不断的改进和创新，找到更加高效和绿色的活性多糖提取纯化方法。
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是 由葡萄糖和半乳糖以摩尔 比３ ０ ：构成 的杂多糖．甲基化 分析 、高碘 酸氧化 、Ｓ ｔ ．１１ ｍｉ ｈ降解 、部分 酸水解 、 Ｎ ＭＲ和 Ｉ Ｒ等分析结果表 明， Ｍ具有多分支结构 ，主链 由卢 Ｄ １ 和 卢Ｄ一 ， 喃葡萄糖构成 ，每个 ＷＡ 一 一— 一 １ ６吡 重复单元具有一个支链 ， 支链 由口 Ｄ 半乳糖构成 ， 一一 连接在主链葡萄糖的 ６位碳 原子 上．
（ ．陕西师范大学食品工程与营养科学学院 ， １ ２ ．物理学与信息技术 学院 ， 生物物理与生物医学工程实验室 ， 西安 ７ ０ ６ ） １０ ２
摘要
采用 ｕ Ｉ Ｎ Ｖ， Ｒ， ＭＲ， Ｃ Ｍ ， Ｇ — Ｓ 高碘酸氧化和 Ｓ ｔ ｍｉ ｈ降解等物理化学方法对从 白术根茎提取的 白术多糖
Ｖｏ ． １３２
２１ ０ １年 １ ２月
高 等 学 校 化 学 学 报
Ｃ ＭＩ ＨＥ ＣＡＬ Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＣＨＩ ＮＥＳ Ｅ ＵＮＩ ＶＥＲＳＴＩ Ｉ ＥＳ
Ｎｏ １ ．２
２ １ ～２ ６ ８２ ８１
白术 多糖 的分 离纯 化 与 结构 表 征
伍 乐芹 张 ， 静 孙 润广 ， 绍芬 王艳丽 ， 晶晶 ， 姜 ， 戴
氧化、 降血糖及抗肿瘤等作用 ． 研究还发现 ， 多糖发挥其生物活性功能主要与其一级结构、 高级 结构 、 聚合度 、 取代度以及分子量 、 溶解度等有关； 如茯苓多糖由于支链过长而不具有抗肿瘤活性 ， 但
经过控制性氧化水解 ， 使其支链长度降低 ， 从而具有抗肿瘤活性 ； 灰树花多糖具有生物活性 ， 子量 分 般要大于 ４ ００ 若小于 １００ ５０ ， ００ 则其生物活性很低 ； 紫树胶 中漆多糖的取代度大于０ ８ ， ． 时 随着取代
伍乐芹等 ：白术 多糖的分 离纯化与结构表征
Ｈ ６９ 相色谱 一 ５７ 谱联 用 系统 ； 国 Ｂｕ ｅ 公 司 Ａ ａｃ ０ ｚ 导傅 里 叶数字 化核 磁共 Ｐ ８０气 ＨＰ９３质 德 ｒｋｒ ｖｎｅ３０ＭＨ 超 振 波谱仪 ；日本 岛津公 司 ＳＭ－５０３型 原子力 显微镜 ． Ｐ ９０ Ｊ
收稿 日期 ： ０ ０１ －７ ２ １—２２ ．
基金项 目： 国家 自然科学基金 （ 批准号 ： ０７ １８ 和陕西省 自 １ ８４ ０ ） 然科学基础研究计 划项 目（ 批准号 ： Ｊ８ １ ） Ｓ０ Ａ ６ 资助 联 系人简介 ： 张 静， ， 女 副教授 ， 主要从事天然产物化学研究． － ａ ： ｈ ｎｊ ＠ＳＩ ．ｄ ．ｎ Ｅ ｍ ｉ ｚ ｇｎ ｒ Ｕ ｅｕ ｃ ｌ ａ ｉ ｔ ｌ
术 根茎 中通过 热水 浸提 、 分离 纯化 得到 的 白术 多糖 ＷＡ 的理 化性 质 和结 构 进 行 了表 征 ， 研究 白术 Ｍ 为
多糖 的生物活性与分子结构间的关系及从分子和受体水平研究其作用机制提供了有用信息．
１ 实验部分
１ １ 材料 、 剂 与仪器 ． 试
白术 购于 陕西 省西安 中药 材市 场 ， 地 安徽 ；Ｄ Ａ 一２购 自北 京 索莱 宝 科 技有 限公 司 ，Ｓｐａｅ 产 Ｅ Ｅ５ ｅｈｄｘ
Ｇ２０为 Ｐａ ａｉ公司产品； － ０ ｈｒ ｃ ｍ ａ 标准单糖为 Ｓ ｍ 公司产品 ； ｉ ａ ｇ 氢化钠 、 硼氢化钠和其余试剂均为 国产分
析 纯．
北京普析通用仪器有限公司 Ｔ ． １ Ｕ １ ０紫外一 ８ 可见分光光度计 ； 国 Ｎｃｌ 公司 Ａ ａ ｒ ６Ｅ ． ． 美 ｉｅ ｏｔ ｖｔ ０ ．Ｓ Ｐ ａ３ ＦＩ ＴＲ傅里叶变换红外光谱仪 ； 德国 Ｃ ｒｔ 司 Ａ Ｐ Ａ － ｈｉ 公 ｓ ＬＨ １ ２冷冻干燥机； 国 Ｗａ ｒ 高效液相色谱仪 美 ｔｓ ｅ （ 配备 Ｗｔ ｒ ２ １ ａ ｓ ４ ０示差折光 检测器 ） 美 国 Ａ ｉｎ 公 司 Ｇ ８０ ｅ ； ｇ ｅｔ ｌ Ｃ ６９Ｎ气相 色谱仪 ； 国 Ａ ｉ ｎ 公 司 美 ｇｅｔ ｌ
的纯度 、 理化性质和结构进行 了表征．以中药 白术 的根茎 为原料 ， 过热水 （０℃） 通 ８ 浸提和 乙醇醇沉得 到粗 多糖 ，再经 Ｄ Ａ －２阴离子交换 柱层析分离 和 Ｓ ｐａｅ －０ Ｅ Ｅ５ ｅｈｄｘＧ ２ ０凝胶柱层析 纯化 ， 到一 种水溶性 的白术 多 得 糖 （ Ｍ） ＷＡ ．经高效 液相 色谱 （ Ｐ Ｃ 分析 ， ＨＬ） 多糖 ＷＡ 是分 子量 约为 ３ ６ Ｍ ２ ３的均一多糖．Ｇ Ｃ分析表 明 ， Ｍ ＷＡ
关键词 白术 ； 多糖 ；分离 ； 纯化 ； 结构表征 中图分类号 ０ ２ ． ， ５９ ９ ６３ ６ ９ １ Ｑ ３ ，Ｑ ４ ． 文献标识码 Ａ 文章编号 ｏ ５ －７０ ２ １ ）２２ １－５ ２ １ ９ （０ １ １ —８２ ０ ０
白术 ， 别名于术、 冬术、 于潜白术 ， 为菊科多年生草本植物 白术（ ｔ ｃ ｌ ｅｍ ｃ ｃ ｈｌ Ｋ ｉ ） Ａｒ ｔｏ ｓ ａｒ ｅ ａ ｏ ｚ 的 ａ ｙ ｄ ｏｐ ａ ｄ 根茎 ， 其味甘苦 ， 性温， 具有健脾、 补气及利尿等功效．白术是我国常用的传统中药材 ， 用于治疗脾胃 虚弱 、自 汗和胎动不安等 ， 主产于我国的浙江 、 湖南 、 湖北和安徽等地 ．研究表明，白术 中除挥发 ｊ 油 、内酯等 化合 物具有较 强 的生物 活性外 －ｊ 其 多 糖 成分 也 同样 具 有 重要 的生 物活 性 和功 效 ，如抗 ４， 等 Ｊ 抗 ．因此 ，了解 多糖 的理 化性 质 和分 子结 构对 于 研究 其 生 物功 能及 作 用
机制具有重要意义．目前， 对白术多糖（ Ｍ） ＷＡ 的研究主要是其提取工艺和所具有的各种生物活性 ， 而 对 白术多糖生物活性与分子结构间的关系及生物活性的作用机制的探讨研究较少 ， 可能原因是其分子 结构不清楚． 本文采用 ｕ Ｉ Ｇ — Ｓ Ｎ Ｒ Ａ Ｍ， Ｖ，Ｒ， ＣＭ ， Ｍ ， Ｆ 高碘酸氧化和 Ｓ ｉ ｍｔ ｈ降解等物理化学方法对从白