枸杞多糖分离纯化及性质研究
枸杞中多糖成分的分离和提取技术
枸杞的功效十分强大，《神农本草经》中记载，枸杞能补气益血，清肝明目。
在1981—2010年，一系列与枸杞和枸杞多糖相关的中成药和制剂也是层出不穷，据统计已经达到876种。
对于天然产物的分析检测而言，得率和纯度至关重要，因此在多糖成分的分离和提取技术研究中必须在优化条件的同时，确保多糖的生物活性不会因提取工艺受到影响。
现阶段，碱溶液、酸溶液、水溶液都常被用于多糖的提取。
其中，热水凭借着易于获取、溶解度强等显著优势成为了提取多糖时首选的溶剂。
然而，多糖中含有醛基等官能团，所以碱性溶液也常被用于多糖的提取。
随着科学技术的不断进步，超声波技术、超临界萃取等技术也被广泛用于枸杞中多糖成分的分离[1]。
1 枸杞多糖的结构和理化性质随着科技的进步，人们发现枸杞中的生物活性成分较为复杂，既包括氨基酸、生物碱、脂肪酸、色素类物质，也含有离子盐等无机元素。
其中，枸杞多糖因为抗癌、抗氧化、免疫调节等作用受到广泛关注。
然而，枸杞多糖多与蛋白质相结合，这给枸杞中多糖成分的提取和分离带来了一定的难度。
研究表明，枸杞多糖成分较为复杂，多由葡萄糖、甘露糖、木糖、鼠李糖、阿拉伯糖等己碳糖组成侧链（简单结构见图1），并与由氨基酸组成的多肽链紧密结合。
图1 简单多糖结构示意图2 多糖的提取分离方法2.1 多糖的提取方法枸杞中的多糖以不同形式存在，对于每种形式的多糖都需要采用针对性的预处理方法。
现阶段，在天然产物分离与提纯中常用的分析检测方法包括脱色处理、粉碎成末、清洗脱脂等。
其中，粉碎是为了促进枸杞中物质的溶解，最大限度的获取枸杞中的有效物质。
脱色处理主要是为了除去枸杞中的显色物质，避免对后续处理工艺的干扰。
脱脂是避免多余的脂质对后续结果的影响。
2.1.1 溶剂浸提法因为多糖在水溶液中的溶解度较高，故而可以用水、酸、碱等极性溶剂或者甲醇、乙醇等质子型溶剂溶解。
其中，热水因成本低、来源广等优势常用作溶媒介质。
虽然多糖在酸、碱性溶液中也存在一定的溶解度，但是酸碱会影响多糖成分的活性，例如，溶解糖苷键，破坏多糖的三维立体结构等，故而此类方法常被用于对生物活性要求不高的成分的提取。
枸杞多糖的结构与生物活性研究
枸杞多糖的结构与生物活性研究随着人们生活水平的提高，人们的健康意识也逐渐增强。
枸杞作为一种具有多种保健功效的传统中药材，因其含有丰富的多糖而备受关注。
枸杞中的多糖以枸杞多糖为主要成分，其结构和生物活性成为当前热门的研究方向之一。
本文将从结构和生物活性两个方面介绍枸杞多糖的研究现状。
一、枸杞多糖的结构1.1 枸杞多糖的萃取方法枸杞多糖主要以酸、碱或酶解法进行萃取，其中，以酸法萃取得到的多糖含量最高。
萃取得到的多糖成分主要有枸杞多糖1、枸杞多糖2和枸杞多糖3三种类型，其中，枸杞多糖1为主要组分。
1.2 枸杞多糖的化学组成枸杞多糖的主要化学组成为多糖类物质，其中以多糖为主要成分。
多糖类物质是由单糖分子通过葡聚糖、木聚糖、半乳糖等多个分支链连接而成的高分子多糖，萃取得到的枸杞多糖中 mainly 以葡萄糖和甘露糖为主要单糖组成，同时还含有一定量的半乳糖、鼠李糖和阿拉伯糖等。
1.3 枸杞多糖的结构枸杞多糖的分子结构呈线性或分枝状，且其分子结构复杂，含有不同的糖链长度和不同的共价连接方式。
据文献报道，枸杞多糖含有α-葡萄糖-1，5-α-木糖、α-鼠李糖-1、4-α-半乳糖、或α-阿拉伯糖-1、3连接等不同的单糖顺序。
二、枸杞多糖的生物活性枸杞多糖具有多种生物活性，其中最为突出的有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化和降血压等功效。
下面将从这几个方面简单介绍。
2.1 免疫调节研究发现，枸杞多糖能够增强机体免疫功能，提高T淋巴细胞的免疫活性。
同时，它还能够调节巨噬细胞的吞噬功能，促进巨噬细胞释放多种免疫因子，从而起到免疫调节作用。
2.2 抗肿瘤枸杞多糖在肝癌、乳腺癌、结肠癌、卵巢癌等多种癌症中均具有一定的抗肿瘤作用。
研究表明，枸杞多糖能够抑制癌细胞的生长和分裂，促进癌细胞的凋亡。
此外，它还能够调节人体免疫系统，增强机体对癌症的抵抗能力。
2.3 抗氧化枸杞多糖还具有较强的抗氧化能力，能够清除自由基及其产生的氧化物质，保护人体细胞免受氧化伤害。
枸杞多糖的提取和人体免疫调控研究
枸杞多糖的提取和人体免疫调控研究枸杞是一种传统的中药材，而枸杞多糖则是其主要成分之一，被广泛应用于中药制剂中。
近年来，随着免疫疗法的逐渐普及，枸杞多糖被认为是一种重要的免疫调节剂。
在此背景下，如何有效地提取枸杞多糖，并探索枸杞多糖对人体免疫调节的作用，成为了当前枸杞多糖研究的重要课题之一。
一、枸杞多糖的提取方法枸杞多糖是枸杞中的一种天然高分子化合物，其提取方法主要分为水提法、超声波提取法、微波提取法、酶解提取法、真空提取法等。
不同的提取方法对枸杞多糖的提取效率、产量、糖类组分等有着不同的影响。
因此，在提取枸杞多糖时，需要根据实验的具体目的和要求选择合适的提取方法。
水提法是常见的提取方法之一，其主要过程为将枸杞粉末与水混合，并进行适当的加热和搅拌，使枸杞多糖在水中溶解，并最终得到多糖粗提物。
这种提取方法简单易行，操作方便，但是相对于其他方法，其提取效率较低。
超声波提取法是利用超声波的物理效应进行提取的一种方法，其主要原理为利用超声波的震荡作用和旋转流体效应，使枸杞多糖从植物材料中脱离并汇集在液体中。
这种方法能够提高多糖的提取效率和产量，但是操作较为复杂。
微波提取法是一种利用微波的物理效应进行提取的方法，其主要原理为利用微波的电磁波能量对物质的温度进行提高，使多糖迅速溶解在液体中。
这种方法具有操作简单、提取效率高等优点，但是其技术要求较高，需要仔细控制微波功率、时间等参数。
酶解提取法是利用酶对纤维素等难以降解的物质进行分解，并将枸杞多糖提取出来的一种方法。
这种方法提取的多糖成分较为纯净，但是操作成本较高。
真空提取法是将枸杞粉末置于真空下，利用低压下的温度和压力变化，将多糖迅速从材料中挥发出来的一种方式。
这种方法能够提取多糖的同时保持原料的营养成分，但是提取效率较低。
二、枸杞多糖对人体免疫调节的作用枸杞多糖在免疫调节方面具有重要的作用。
研究表明，枸杞多糖能够诱导巨噬细胞、T淋巴细胞、自然杀伤细胞等免疫细胞的活化，增强机体的免疫功能，提高机体抗病能力。
黑果枸杞多糖的分离纯化及抗氧化活性研究
黑果枸杞多糖的分离纯化及抗氧化活性研究黑果枸杞是一种传统的药用和保健植物，被广泛应用于中药制剂、健康食品和保健品等领域。
它富含多种成分，其中黑果枸杞多糖是其重要的活性成分之一。
本文将重点探讨黑果枸杞多糖的分离纯化方法以及其抗氧化活性。
首先，本研究选取优质的黑果枸杞作为研究对象。
经过采摘、清洗、晾干等处理步骤后，将黑果枸杞粉碎并进行提取。
采用常规的水煮法提取方法，将黑果枸杞与适量的水混合煮沸，然后过滤得到提取液。
接下来，采用酒精沉淀法将提取液中的多糖沉淀得到多糖样品。
随后，使用超滤和凝胶渗透色谱等技术对多糖样品进行分离纯化。
首先，采用超滤技术将大分子的杂质去除，得到较为纯净的多糖样品。
然后，将多糖样品经过经典的凝胶渗透色谱技术进行进一步分离。
通过调节填料和溶剂体系，可以分离出多种不同大小和结构的多糖组分。
分离纯化得到黑果枸杞多糖后，使用一系列的物化性质和化学分析方法对其进行表征。
例如，使用紫外光谱和红外光谱技术分析黑果枸杞多糖的吸收峰和波谱特征，以确定其结构和功能基团。
同时，还可以采用高效液相色谱技术对多糖的组成单糖和链长进行分析。
这些分析方法可以为黑果枸杞多糖的结构特性提供重要的信息。
最后，对黑果枸杞多糖的抗氧化活性进行评估。
采用自由基清除试验和金属离子螯合试验等方法，测定黑果枸杞多糖对超氧阴离子自由基、羟基自由基以及金属离子的清除能力。
实验结果表明，黑果枸杞多糖具有显著的抗氧化活性，具有一定的自由基清除和金属离子螯合能力。
这种抗氧化活性可能与多糖中的多糖结构和官能团有关。
综上所述，本研究通过合理的分离纯化方法，成功得到黑果枸杞多糖样品，并对其进行了结构表征和抗氧化活性评估。
研究结果表明，黑果枸杞多糖具有良好的抗氧化活性，有望成为一种重要的天然抗氧化剂和保健品原料。
然而，还需要进一步深入研究黑果枸杞多糖的生物活性、药理特性和机制等方面，以更好地利用其在医药和保健品领域的潜力综上所述，本研究成功得到了黑果枸杞多糖样品，并对其进行了结构表征和抗氧化活性评估。
枸杞多糖提取工艺的研究
枸杞多糖提取工艺的研究
枸杞多糖是一种天然的多糖物质，具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等。
因此，枸杞多糖的提取工艺研究备受关注。
首先，枸杞多糖的提取方法有很多种，如水提法、酸提法、碱提法、超声波提法等。
其中，水提法是最常用的方法之一。
其具体流程为：将枸杞浸泡在水中，然后将其加热至一定温度，过滤后得到浸提液，再用醇沉、离子交换层析等方法纯化得到枸杞多糖。
其次，影响枸杞多糖提取的因素有很多，如浸提温度、浸提时间、浸提液比、pH值等。
其中，浸提温度是影响提取率的关键因素之一。
一般来说，温度越高，提取率越高。
但是，过高的温度会导致多糖分解，从而影响其生物活性。
因此，在选择浸提温度时需要权衡提取率和生物活性。
最后，枸杞多糖的应用前景非常广阔。
它可以用于保健品、医药、食品等领域。
例如，在保健品中，枸杞多糖可以作为一种天然的抗氧化剂，对人体具有很好的保健作用。
在医药领域，枸杞多糖可以用于治疗肿瘤、心血管疾病等。
在食品领域，枸杞多糖可以作为一种天然的添加剂，增强食品的营养价值。
综上所述，枸杞多糖的提取工艺研究对于发掘其生物活性、拓展其应用领域具有重要意义。
未来，我们还需要进一步深入研究其提取工艺和生物活性，并探索其在更广泛领域的应用前景。
枸杞多糖的分离纯化及结构研究
枸杞多糖的分离纯化及结构研究张倩;张民;王超;杨帅;梁辰;吕晓玲【摘要】构杞子经提取,醇沉,得到枸杞水溶性多糖粗品(LBP).最佳乙醇沉淀添加量为50 mL浓缩液中添加80 mL体积分数95％乙醇;最佳乙醇醇沉时间为12h;Sevag法除蛋白次数为6次,脱除率为83.45％.枸杞粗多糖经DEAE-52纤维素(OH-)色谱柱、Sephedex G-50柱层析纯化后,得到LBP1和LBP2.采用紫外光谱扫描和Sephedex G-100柱层析鉴定LBP1和LBP2均为分子质量相对均一的组分.高效液相色谱检测LBP1和LBP2的相对分子质量分别为367和358.苯酚-硫酸法测得:LBP1和LBP2的中性糖含量分别为82.20％和74.50％;咔唑-硫酸法测得LBP1和LBP2的半乳糖醛酸含量为7.50％和14.30％.气相色谱测得LBP1的单糖组成摩尔比为半乳糖∶甘露糖∶葡萄糖=1.79∶1.00∶3.08;LBP2的单糖组成的摩尔比为半乳糖∶甘露糖∶葡萄糖=1.32∶ 1.00∶7.38.红外光谱测定结果显示,LBP1和LBP2均由吡喃糖构成.β消去反应检测得LBP1和LBP2与氨基酸是通过O-糖苷键相连.刚果红实验证明LBP1和LBP2均不存在三股螺旋结构.粒度实验表明,溶液酸碱度会影响构杞多糖的粒度分布.【期刊名称】《食品与发酵工业》【年(卷),期】2014(040)012【总页数】7页(P41-47)【关键词】枸杞多糖;分离纯化;结构分析【作者】张倩;张民;王超;杨帅;梁辰;吕晓玲【作者单位】天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457;天津科技大学食品工程与生物技术学院,天津,300457【正文语种】中文枸杞是我国的传统中药材，具有补肾养肝、清热凉血及益精明目等功能［1］。
枸杞多糖的提取分离和其组成研究
[责任编辑 李 禾 ]
枸杞多糖的提取分离和其组成研究
田丽梅 , 王 3
(中国药科大学 生命科学与技术学院 , 江苏 南京 210009)
[摘要 ] 目的 :从枸杞中提取分离枸杞多糖 (LBP) ,并对其组成进行研究 。方法 :采用水提法提取 LBP,用 DE2 AE纤维素柱色谱和凝胶柱色谱进行分离纯化 ,采用 GPC2LLS法 、气相色谱法 、氨基酸自动分析等方法对其组成进 行研究 。结果 : LBP纯品含有 4个级分 , LBP的分子质量约为 11524 ×105 ,由阿拉伯糖 (A ra) ,鼠李糖 ( Rha) ,木糖
Conclusion : A tractylone can convert to atractylenolides during p rocess of A. m acrocephala, and the contents of each component are re2
lated to the level of p rocess. [ Key words] A tracty lodes m acrocepha la; p rocess mechanism; conversion; sesquiterpenes
由上可知 ,本实验中经过分级纯化后的 LBP含 有 LB P2Ⅰ, LB P2Ⅱ, LBP2Ⅲ和 LB P2Ⅳ4 个级分 ,作 者对纯化后的 LBP进行了各种检测 。 2. 2 LB P纯度的鉴定
采用 Sephadex G200 凝胶柱色谱鉴定 LB P 纯 度 。取 LBP样品 10 mg,溶于最小体积的蒸馏水中 , 上 Sephadex G200凝胶柱 (110 cm ×70 cm ) ,用蒸馏 水洗脱 ,流速 6 m l·h- 1 ,用自动收集器按每管 3 mL 分部收集 。用硫酸 2苯酚法 ( 490 nm )和紫外吸收法 (280 nm )进行检测 ,以洗脱管数为横坐标 ,吸光值 为纵坐标作图 。
枸杞多糖的纯化及相对分子质量研究
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第25卷 第3期2008年6月 黑龙江大学自然科学学报JOURNAL OF NAT URAL SC I E NCE OF HE I L ONGJ I A NG UN I V ERSI TY Vol 125No 13June,2008枸杞多糖分离纯化及性质研究张 晶1,2, 韩喜江1, 李艳波2(1.哈尔滨工业大学化学系,哈尔滨150001;2.哈尔滨学院生化学院,哈尔滨150080)摘 要:对东北枸杞中提取的多糖,通过DEAE -cellul ose (OH -)色谱柱和Sephadex G -100凝胶色谱柱进行了分离纯化,通过凝胶色谱和液相色谱对其纯度进行了鉴定,并通过红外光谱初步分析了其基团构成。
关键词:枸杞多糖;分离纯化;纯度鉴定中图分类号:R28412,TS244文献标志码:A 文章编号:1001-7011(2008)03-0377-04收稿日期:2008-01-16作者简介:张 晶(1973-),女,实验师,硕士,主要研究方向:应用化学、食品化学0 引 言枸杞是一种食药两用植物,具有多种药理作用和生理功能。
枸杞多糖是枸杞中的主要活性成分之一,其中有关枸杞多糖的化学、药理与临床研究十分瞩目,已有不少研究报道枸杞多糖具有增强免疫力、抗癌、防衰老、抗疲劳、降血压、降血糖、抑制肿瘤生长和细胞突变等作用[1-2]。
鉴于枸杞多糖具有多种药理作用和生理功能,因此,对其提取分离方法及纯化的研究显得尤为重要[3]。
本文重点对牡丹江地区枸杞多糖的分离纯化及组成结构作了初步探讨。
1 实验材料和方法111 材料与仪器牡丹江地区枸杞子;其它试剂均为分析纯。
自动部分收集器,台式干燥箱,紫外分光光度计,Perkin -El 2mer 红外光谱仪,Aglilent 1100液相色谱仪等。
112 枸杞多糖提取称取100g 枸杞子60℃烘干,放置干燥器18h 后粉碎,称取10g 干燥的枸杞粉,用氯仿-甲醇(2∶1)300mL,用索氏回流装置于60℃回流脱脂。
残渣风干后,加入适量水,在100℃,料水比1∶15条件下水浴提取4h,抽滤,将滤液蒸发浓缩为原体积的1/4后,将浓缩液滴入3倍体积的95%乙醇中,静置,抽滤,固形物分别用95%乙醇、无水乙醇、丙酮洗涤,水浴加热干燥得枸杞粗多糖[4]。
113 枸杞多糖分离纯化11311 DEAE -cellul ose (OH -)色谱柱层析将分离提取的枸杞粗多糖110g 溶于水,上DEAE -cellul ose (OH -)色谱柱,梯度洗脱法洗脱各级分,洗脱液分别为蒸馏水、011mo1・L -1,0125mol ・L -1和015mol ・L -1NaCl,011mol ・L -1Na OH 各100mL,流速为30滴每分钟,自动部分收集器收集洗脱液,将收集到的样品溶液分别在280nm 波长下比色,然后用硫酸一蒽酮法测定总糖含量。
以试管数目为横坐标,以吸光度为纵坐标作DE AE -cellul ose (OH -)色谱柱洗脱曲线图。
分别合并各主峰溶液,浓缩,流水透析,冷冻干燥,得LBP -1,LBP -2,LBP -3和LBP -4.11312 Sephadex G -100凝胶色谱柱。
收集多糖含量最多的组分,进行凝胶色谱分离。
流速为013mL ・m in -1,每支试管接收3mL 洗脱液,硫酸一蒽酮法检测多糖洗脱状况。
以洗脱管数为横坐标,吸光值为纵坐标作流出曲线,合并主峰溶液,浓缩,流水透析,冷冻干燥。
114 L BP 纯度鉴定多糖的纯度标准不能用通常化合物的纯度标准来衡量,多糖纯度判断可根据糖基的摩尔比是否恒定,电泳是否呈一条带,柱层析是否呈现一个峰来进行[5]。
11411 凝胶层析法称取2mg LBP 样品,溶于1mL 蒸馏水中,上Sephadex G -100凝胶色谱柱,重蒸水洗脱,流速为013mL ・m in -1,每支试管接收3mL 洗脱液,硫酸一蒽酮法检测多糖洗脱状况。
以洗脱管数为横坐标,吸光值为纵坐标作流出曲线。
11412 高效液相色谱法(HP LC )鉴定仪器∶Aglilent1100液相色谱仪;色谱柱∶双柱串联79911GF -083、79911GF -084色谱柱;监测器∶示差R I D 监测器;流动相∶蒸馏水;流速∶1mL ・m in -1;内部温度∶30℃;柱温∶25℃.115 L BP -4红外光谱测定[6-8]称取LBP 1～2mg,加入100mg K B r 充分研磨,压片,用红外光谱仪于4000～650c m -1波长范围内扫描。
116 L BP 部分理化性质的测定配制一定浓度的枸杞多糖溶液,分别进行硫酸-蒽酮、考马斯亮蓝染色反应、碘-碘化钾反应以及菲林试验,检测是否含有多糖、蛋白质、淀粉以及单糖[9-10]。
2 结果与分析211 D EAE -cellulose(O H -)色谱柱分级结果由图1,2,3,4可看出,试验中检测到枸杞多糖共有4种多糖组分。
分别用蒸馏水、011mo1・L -1的NaCl及0125mo1・L -1NaCl 洗脱出现一个峰,011mol ・L -1Na OH 洗脱出现2个峰,依次命名为LBP -1,LBP -2,LBP -3和LBP-4,其中LBP -4多糖含量较高,故将其合并收集,真空冻干,为下一步纯化备用。
・873・黑 龙 江 大 学 自 然 科 学 学 报 第25卷 212 L BP -4Sephadex G -100凝胶色谱柱分级结果由图5可以看出,LBP -4经Sephadex G -100凝胶色谱柱分级共收集2个组分,依次命名为LBP -I 和LBP -II,由于LBP -II 含量较少,所以本实验主要对LBP -I 的性质进行研究。
213 L BP -I 纯度鉴定结果由图6可见,LBP -I 经过Sephadex G -100凝胶色谱柱层析,流出曲线为单一峰,表明LBP -I 为分子量分布均一的枸杞多糖组分。
由图7高效液相图谱的峰面积计算显示,多糖的纯度大于80%以上,说明该组分是纯度较高的多糖。
214 L BP -I 红外光谱分析从图8红外光谱可推测:3800～3300c m -1处的宽峰是由O -H 伸缩振动和N -H 伸缩振动引起的;2000～1500c m -1吸收峰是由-COO 的C =O 及NH 2对称伸缩振动引起的;1240c m -1吸收峰是由-COOH的-OH 变角振动引起的,同时1110c m -1吸收峰是仲碳-OH 的O -H 变角振动引起的;1050c m -1和1020c m -1吸收峰是伯碳-OH 的O -H 变角振动引起的,780c m -1吸收峰表明β-D -吡喃葡萄糖环的存在。
因此,可以推断LBP 中含有-OH 、-COOH 、-NH 2或-NH -。
215 L BP -I 紫外光谱分析多糖组分LBP -I 的紫外光谱分析结果如图9所示,LBP -I 在260nm 处没有吸收峰,表明枸杞多糖不含核酸;在280n m 处未见吸收峰,表明枸杞多糖不含蛋白质。
216 L BP 部分理化性质分析硫酸-蒽酮反应呈阳性,考马斯亮蓝反应呈阴性,菲林试剂反应呈阴性,碘-碘化钾反应呈阴性,所以,各级分为不含蛋白质、淀粉和还原糖的酸性多糖。
・973・第3期张 晶等:枸杞多糖分离纯化及性质研究3 结 论多糖提取工艺以及分离、纯化方法决定了产品的纯度,另外枸杞子产地的不同也可能对研究结果有影响。
本试验经DEAE -纤维素柱分离纯化,检测到枸杞多糖共有4种多糖组分,LBP -1、LBP -2、LP B -3、LBP -4,其中LBP -4含量最多,经过Sephadex G -100凝胶色谱柱层析和液相色谱鉴定为分子量均一的多糖,但从组成上看它们存在着微观不均一性,这是多糖的一个特点。
LBP 的红外光谱推测,可能含-OH 、-COOH 、-NH 2-或-NH -基团。
通过理化性质分析,证明LBP 各级分为不含蛋白质、淀粉和还原糖的酸性多糖。
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