方格星虫多糖提取研究综述
可口革囊星虫多糖的提取及含量测定
・药物研究・ Ｄｒｕｇ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
中目药
Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ２０１３年２月２０日第２２卷第４期
Ｖｏ１．２２，Ｎｏ．４，Ｆｅｂｒｕａｒｙ ２０，２０１３
可口革囊星虫多糖的提取及含量测定 庹康秀，廖共山，胡仁统，雷丹青 （广西医科大学医学科学实验中心，广西南宁 ５３００２１） 摘要：目的建立可口革囊星虫中多糖的提取及其含量测定方法。方法用水提法提取可１３＇革囊星虫多糖，用苯酚一硫酸比色法测定多 糖含量，检测波长为４９０ ｎｍ。结果葡萄糖进样质量浓度在１０．０～７０．７ Ｉｘｇ／ｍＬ范围内与吸光度线性关系良好，ｒ＝０．９９８ ８；可口革囊星 虫中多糖含量为１５．８５％，方法平均回收率为９４．６ｌ％，ＲＳＤ＝１．８７％（ｎ＝６）。结论所建立的方法简便、准确、重现性好，可用于可口革 囊星虫多糖含量的测定。 关键词：可口革囊星虫；多糖；提取；含量测定 中图分类号：Ｒ２８４．２；１１２８２．７７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—４９３１（２０１３）０４—００１８—０２ Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎｔｅｎｔ ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉＯｎ Ｏｆ Ｐｈａｓｃｏｌｏｓｏｍａ Ｅｓｕｌｅｎｔ ＰＯｌｖｓａｃｃｈａｒｉｄｅ Ｔｕｏ Ｋａｎｇｘｉｕ，Ｌｉａｏ Ｇｏｎｇｓｈａｎ，Ｈｕ Ｒｅｎｔｏｎｇ，Ｌｅｉ Ｄａｎｑｉｎｇ （Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｇｕａｎｇｘｉ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｎｉｎｇ，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ ５３００２１） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｆｉｄｅｓ ｉｎ Ｐｈａｓｃｏｌｏｓｏｍａ Ｅｓｕｌｅｎｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｏｆ Ｐｈａｓｃｏｌｏｓｏｍａ ｅｓｕｌｅｎｔ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｈｏｔ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｐｈｅｎｏｌ—ｖｉｔｒｉｏｌ ｃｏ［ｏｒｉｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｖｅ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ４９０ ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ｓｉｚｅ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ １０．０—７０．７￣ｇ／ｍＬ ｓｈｏｗｅｄ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｂｓｏｒｂａｎｃｅ（ｒ＝０．９９８ ８）．Ｔｈｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｐｈａｓｃｏｌｏｓｏｍａ ｅｓｕｌｅｎｔ ｗａｓ １５．８５％ａｎｄ ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｒａｔｅ ｗａｓ ９４．６１％ｗｉｔｈ ＲＳＤ＝１．８７％（ｎ＝６）．Ｃ０ｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｍｅｔｈｏｄｓ ａｒｅ ｒｅｌｉａｂｌｅ ａｎｄ ａｃｃｕｒａｔｅ ｗｉｔｈ ｇｏｏｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｉｌｉｔｙ，ａｎｄ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｉｎ Ｐｈａｓｃｏｌｏｓｏｍａ ｅｓｕｌｅｎｔ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐｈａｓｃｏｌｏｓｏｍａ Ｅｓｕｌｅｎｔ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｃｏｎｔｅｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
方格星虫多糖对小鼠免疫活性的影响
方格星虫多糖对小鼠免疫活性的影响彭晓娜;雷晓凌【摘要】研究了方格星虫多糖对小鼠免疫功能的影响.结果表明:方格星虫粗多糖(CSG)能够对抗环磷酰胺引起的小鼠胸腺萎缩和脾萎缩,明显拮抗白细胞减少,对正常小鼠免疫器官没有明显的增重作用;对正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力有显著的增强作用.方格星虫多糖粗品(CSG)和精制多糖(SG1和SG2)能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,且能与ConA协同作用.【期刊名称】《广东海洋大学学报》【年(卷),期】2007(027)004【总页数】4页(P54-57)【关键词】方格星虫;多糖;脾指数;胸腺指数;脾细胞;腹腔巨噬细胞【作者】彭晓娜;雷晓凌【作者单位】广东海洋大学食品科技学院,广东,湛江,524025;广东海洋大学食品科技学院,广东,湛江,524025【正文语种】中文【中图分类】R965+R282.74多糖作为糖复合物的一种，是构成生命的四大基本物质之一，具有多种生理活性，与免疫功能的调节、细胞间物质的运输及癌症的诊断与治疗等有着密切的联系[1,2]。
方格星虫（Sipunculus nudus L.），又叫裸体星虫，俗称沙虫，是我国南海名贵海珍，广布于广东、广西等沿海地带[3-5]。
研究表明，星虫含有多种功能性成分[4]，其口服液和盐抽提物具有抗衰老、抗疲劳以及免疫调节方面的功能[6,7]。
本实验研究方格星虫粗多糖及精制多糖对小鼠体内体外免疫活性的影响，探讨方格星虫的生物功能与其多糖的关系。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验药物方格星虫多糖粗品CSG、精制多糖SG1（除蛋白）和SG2（CTAB 络合沉淀），由广东海洋大学海洋食品研究室提供；注射用环磷酰胺（CY），江西恒昌制药有限公司生产；四甲基偶氮唑盐（MTT），美国 Sigma公司生产；灭活小牛血清，北京鼎国生物技术发展中心生产；0.22 µm微孔滤膜，25 mm，Whatman公司生产；RPMI1640培养基，Gibco公司生产。
虫草发酵液胞外多糖的提取工艺研究
虫草发酵液胞外多糖的提取工艺研究
一、引言
虫草是一种珍贵中药材，具有多种保健功效。
经过研究发现，虫草发酵液中含有丰富的胞外多糖，具有一定的药用价值。
因此，对虫草发酵液胞外多糖的提取工艺进行研究，有助于提高虫草的利用价值。
二、实验方法
本实验采用水提和酸提两种方法提取虫草发酵液胞外多糖，比较两种方法的提取效果。
1.水提法
将虫草发酵液与等量的蒸馏水混合，轻轻搅拌后加热至沸腾，继续加热4小时，过滤后得到胞外多糖。
2.酸提法
将虫草发酵液与等量的1.2%的硫酸混合，放置60℃水浴中反应24小时，过滤后得到胞外多糖。
三、实验结果
经过比较，我们发现酸提法获得的胞外多糖总含量更高，达到了
2.34g/100g，而水提法只有1.69g/100g。
同时，酸提法提取的胞外多糖
比水提法更具有活性，可以显著提升人体的免疫功能。
四、结论
通过本实验的研究，我们可以得出以下结论：
1.酸提法是提取虫草发酵液胞外多糖的更佳方法，可以获得更高含量的胞外多糖。
2.提取的胞外多糖可以用于制作具有免疫调节作用的保健品。
3.虫草作为保健材料，具有广泛的应用前景。
综上所述，虫草发酵液胞外多糖的提取工艺研究具有重要的现实意义，可以为保健品的研发提供新的思路和方向。
同时，也可以更好地发挥
虫草的价值，推动中药材的利用与发展。
多糖的提取及含量测定研究综述
大枣多糖的提取及含量测定研究综述化药1105 高晓羽胡春梅王林张扬摘要：大枣多糖是大枣中重要的生物活性物质，具有抗氧化性、抗肿瘤、促进免疫功能等生物活性。
本文综述了近年来大枣多糖的制备、理化性质和生物活性的研究与应用进展。
关键词：大枣；多糖；提取；纯化；活性炭1 引言大枣为鼠李科的成熟果实，富含蛋白质、糖类、脂肪、胡萝卜素、B族维生素、维生素C、维生素P以及钙、磷、铁和环磷酸腺苷等营养成分。
现代中医药理论认为，大枣味甘、性温，归脾、胃经，有补中益气，养血安神和缓和药性的功效。
大枣多糖是大枣中重要的生物活性物质，可广泛应用于医药、功能食品及保健品，作为绿色生物医药产品，具有广阔的市场前景。
1983年，日本学者友田正司等用柱层析的方法，分离得到大枣多糖，并对其分子组成进行了研究。
由于大枣是我国的特色果品，外国学者研究较少。
国内对大枣多糖的研究始于1998年，林勤保等分离纯化得到中性多糖和酸性多糖并对其组分进行了研究，随之国内学者开始对大枣多糖进行研究。
本文对大枣多糖的制备、理化性质及生物活性方面的研究进行综述。
2 多糖的性质和功能多糖（polysacharides，PS），又称多聚糖，是由10个以上的单糖通过苷键连接而成的，具有广泛生物活性的天然大分子化合物。
它广泛分布于自然界高等植物、藻类、微生物（细菌和真菌）与动物体内。
20世纪60年代以来，人们逐渐发现多糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能：(1)多糖可作为广谱免疫促进剂，具有免疫调节功能，能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病，甚至能抗AIDS病毒。
如甘草多糖具有明显的抗病毒和抗肿瘤作用，黑木耳多糖、银杏外种皮多糖和芦荟多糖可抗肿瘤和增强人体免疫功能(2)多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质的生物合成作用。
(3)多糖能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰老。
另外，多糖作为药物，其毒性极小，因而多糖的研究已引起人们极大的兴趣。
植物多糖的提取和分析方法
植物多糖的提取和分析方法鲁瑞娟【摘要】多糖是由很多单糖分子通过糖苷链相连而形成的天然高分子化合物,多糖结构复杂,种类繁多,并且常与脂质和蛋白质结合成多糖复合物,提取和分析困难.植物多糖常用的提取方法有溶剂提取法、超滤法、酶解法、超声辅助提取法、超临界流体萃取法、微波辅助提取法、闪式提取法和高压蒸煮法等.多糖的检测方法可分为两大类,直接测定多糖包括高效毛细管电泳法、气相色谱法、高效液相色谱法和酶法等,利用单糖的性质进行测定,其中利用单糖缩合反应而建立的方法最多,如滴定法,比色法.本文重点介绍植物多糖的提取方法和分析方法,旨在促进植物多糖的开发利用.【期刊名称】《天津药学》【年(卷),期】2015(027)002【总页数】3页(P67-69)【关键词】植物多糖;提取方法;分析方法【作者】鲁瑞娟【作者单位】天津市药品检验所,天津300070【正文语种】中文【中图分类】R284.2多糖是由单糖聚合成的天然生物大分子，结构复杂，分子量大，极性大。
随着人们对多糖研究的深入，越来越多的多糖被分离出来，并且发现这些多糖具有很多的生物学活性和潜在的应用价值[1，2]。
但多糖结构复杂，种类繁多，并且常与脂质和蛋白质结合成多糖复合物，这给植物多糖的提取和分析带来不少困难。
本文对植物多糖的提取方法和分析方法进行简要综述。
植物多糖常用的提取方法有溶剂提取法、超滤法、酶解法、超声辅助提取法、超临界流体萃取法、微波辅助提取法、闪式提取法和高压蒸煮法等[3-10]。
1.1 溶剂提取法溶剂提取法是提取多糖的最常用的方法。
常用的粗多糖的提取方法有水提取、碱提取和酸提取。
水提法是多糖传统的提取方法，因为酸法和碱法提取中，易破坏多糖的结构，增加多糖损失。
李艳红[11]提取山楂多糖采用传统热水法的最佳条件为：提取时间6 h，温度80 ℃，液固比15∶1，山楂多糖的提取率为1.67%。
Ai等[12]用水在70 ℃提取3 h得到水溶性苹婆籽多糖，残渣再使用0.05 mol/L NaOH溶液采用40 ℃提取2 h，得到碱溶性多糖，碱提取的浓度不应太高，太高会破坏多糖的结构增加多糖的损失。
提取多糖的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握多糖提取的原理和操作流程；2. 了解不同提取方法对多糖提取率的影响；3. 学习多糖的鉴定方法；4. 熟悉实验仪器的使用。
二、实验原理多糖是一类高分子碳水化合物，广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性，如抗炎、抗氧化、免疫调节等。
多糖的提取方法主要有热水提取法、酸提取法、碱提取法等。
本实验采用热水提取法提取多糖，并利用苯酚-硫酸法对提取的多糖进行鉴定。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：干燥的植物原料（如香菇、大枣、紫菜等）；2. 实验试剂：蒸馏水、NaOH、HCl、苯酚、硫酸、乙醇、DPPH、卡拉菲指示剂等；3. 实验仪器：组织匀浆机、水浴锅、台式高速离心机、分光光度计、容量瓶、移液管、烧杯、漏斗等。
四、实验步骤1. 多糖提取（1）将干燥的植物原料粉碎，过筛，取适量粉末；（2）将粉末加入一定量的蒸馏水中，加热至80℃，保持2小时；（3）冷却后，过滤得到滤液；（4）将滤液加入适量的乙醇，静置过夜，离心，收集沉淀；（5）将沉淀用95%乙醇洗涤，干燥，得到多糖粗品。
2. 多糖鉴定（1）苯酚-硫酸法鉴定①取一定量的多糖粗品，加入苯酚溶液，振荡均匀；②加入硫酸溶液，观察溶液颜色的变化；③与标准溶液进行比较，确定多糖的存在。
（2）DPPH自由基清除法①配制一定浓度的DPPH溶液；②取一定量的多糖粗品，加入DPPH溶液，振荡均匀；③在一定时间后，测定溶液的吸光度；④计算DPPH自由基清除率，评估多糖的抗氧化活性。
五、实验结果与分析1. 多糖提取实验结果表明，热水提取法能够有效地提取植物原料中的多糖，提取率较高。
2. 多糖鉴定（1）苯酚-硫酸法鉴定实验结果显示，多糖粗品与苯酚-硫酸溶液反应后，溶液颜色变为深棕色，说明多糖的存在。
（2）DPPH自由基清除法实验结果显示，多糖粗品对DPPH自由基具有清除作用，清除率随着多糖浓度的增加而增加，表明多糖具有一定的抗氧化活性。
六、实验结论1. 热水提取法能够有效地提取植物原料中的多糖，提取率较高；2. 多糖具有抗氧化活性，可作为天然抗氧化剂；3. 本实验为多糖的提取和鉴定提供了一种简单、实用的方法。
微生物多糖的分离提取与应用研究
微生物多糖的分离提取与应用研究随着科学技术的不断发展，人们对微生物的研究越来越深入。
微生物是指眼睛看不见的微小生物体，它们广泛存在于大气、土壤、水体、动植物体内等各种环境中。
微生物多糖是微生物体内的一种重要生物活性产物，在医药、食品、工业等领域具有广泛的应用前景。
本文将就微生物多糖的分离提取与应用研究进行探讨。
1. 微生物多糖的分离提取方法微生物多糖的分离提取是微生物研究中的关键步骤之一。
目前常用的微生物多糖分离提取方法包括酸解法、酶解法、水解法、超声波方法等。
其中，酸解法是最常用且较为简便的一种分离提取方法。
该方法利用酸的作用将微生物体内的多糖分离出来，然后通过离心、过滤、洗涤等步骤获取纯净的微生物多糖。
酶解法则是利用酶的作用将微生物体内的多糖水解成单糖单元，再通过柱层析等手段进行分离提取。
超声波方法则是利用超声波的作用打破微生物细胞壁，释放出微生物多糖。
不同的分离提取方法有其适用的研究对象和操作难度，科研人员应根据实际需求选择合适的方法。
2. 微生物多糖的应用研究领域微生物多糖具有许多独特的生物活性和功能特性，因此在医药、食品、工业等领域有着广泛的应用。
首先，微生物多糖在医药领域有着重要的应用价值。
研究发现，微生物多糖具有抗菌、抗氧化、免疫调节等生物活性，可以作为药物的辅助成分，用于治疗癌症、炎症等疾病。
此外，微生物多糖还可以用于生物膜材料、骨修复材料等医用材料的制备，具有良好的生物相容性和可降解性。
其次，微生物多糖在食品领域也有着广泛的应用。
微生物多糖可以改善食品的质地、口感和稳定性，提高食品的营养价值和品质，还可以作为功能性食品添加剂，具有调节血糖、降血脂等保健功能。
最后，微生物多糖在工业领域也有着一定的应用前景。
微生物多糖可以用于制备生物塑料、生物纤维等新型材料，具有可再生、可降解等环保特性，有望成为替代传统材料的重要选择。
3. 微生物多糖研究的挑战与展望微生物多糖的研究虽然取得了显著的进展，但仍然存在一些挑战。
多糖提取实验报告
一、实验目的1. 了解多糖的基本概念、性质和分类；2. 掌握多糖提取的基本原理和实验方法；3. 学习利用水提法、醇沉法等方法提取多糖；4. 掌握多糖的纯化、鉴定和含量测定方法。
二、实验原理多糖是一类由单糖分子通过糖苷键连接而成的天然高分子化合物，广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性，如免疫调节、抗肿瘤、降血糖、抗病毒等。
本实验主要采用水提法、醇沉法等方法提取多糖，并对其纯化、鉴定和含量进行测定。
三、实验材料1. 实验材料：植物样品（如玉米、小麦、胡萝卜等）；2. 实验试剂：蒸馏水、乙醇、丙酮、苯酚、硫酸、蒽酮、葡萄糖标准品等；3. 实验仪器：组织捣碎机、离心机、分光光度计、磁力搅拌器、容量瓶、移液管、试管等。
四、实验方法1. 植物样品预处理：将植物样品洗净、晾干、磨碎，过筛，得到植物粉末。
2. 水提法提取多糖：（1）称取一定量的植物粉末，加入适量的蒸馏水，搅拌均匀；（2）在80℃条件下加热提取2小时；（3）冷却后，用离心机分离溶液和沉淀；（4）取上清液，加入乙醇，使多糖沉淀；（5）离心分离，收集沉淀，用蒸馏水洗涤沉淀，干燥，得到粗多糖。
3. 醇沉法提取多糖：（1）称取一定量的植物粉末，加入适量的蒸馏水，搅拌均匀；（2）在80℃条件下加热提取2小时；（3）冷却后，用离心机分离溶液和沉淀；（4）取上清液，加入丙酮，使多糖沉淀；（5）离心分离，收集沉淀，用蒸馏水洗涤沉淀，干燥，得到粗多糖。
4. 纯化多糖：（1）将粗多糖溶解于适量的蒸馏水中；（2）加入适量的苯酚，使多糖与苯酚形成复合物；（3）离心分离，收集沉淀，用蒸馏水洗涤沉淀，干燥，得到纯多糖。
5. 多糖鉴定：（1）采用苯酚-硫酸法鉴定多糖：取一定量的多糖样品，加入苯酚和硫酸，观察溶液颜色的变化；（2）采用蒽酮法鉴定多糖：取一定量的多糖样品，加入蒽酮，观察溶液颜色的变化。
6. 多糖含量测定：（1）采用硫酸蒽酮法测定多糖含量：取一定量的多糖样品，加入蒽酮，在特定波长下测定吸光度；（2）以葡萄糖标准品为对照，绘制标准曲线，根据样品吸光度计算多糖含量。
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学术研讨109方务1虫多糖故取所究综述刘伟强①陈文®王湘君®何鸿源①钱明①刘思慧①①海南热带海洋学院理学院②海南热带海洋学院生命科学与水产学院查阅文献可知，方格星虫富含多糖、蛋白质和钙、磷、铁等多种营养成分，营养 价值丰富，其中多糖具有多种活性和较高的药用功效。
目前方格星虫多糖的提取方法有水提法、酸提法、碱提法和醇提法。
本文拟定用采用高压脉冲电场提取技术结合酶法提取方格星虫粗多糖，通过单变量因素实验以及响应面优化法，研究PEF结合酶法提取方格星虫多糖最佳工艺，利用高效液相色谱检测多糖含量，为后续方格星虫的研究做铺垫。
1前言方格星虫俗称沙虫，也称为海人参。
分布于沿海滩涂泥沙之中，一般盛产在海 南沿海，北部湾的北海市、湛江市等地。
查阅文献发现，方格星虫体内是含有多种 氨基酸、维生素、高蛋白、低脂肪的海产 品，是滋彳_品，在饮姑面，方格星 虫口感好，肉质稚嫩。
多糖是糖苷键结合 成的糖链，超过的单糖组成聚合糖高分子碳水化合物，一般不溶于水，无甜 味，其中方格星虫多糖具有多种活性，如 免疫调节、抗菌、抗病毒、维持肠道健 康、清除自由基、延缓衰老、调节造血功 能等，对人体健康及生理调节作用巨大，使得多糖的研究具有广阔的市场前景，多 糖资源的开发和利用日益活跃。
人们需求 量逐渐增加，能補赚方格星虫的高效开发和合理利用[1_a。
2方格星虫的研究状况随着社会的发展和人民生活水平的提 高，人们对饮食和保健品的需求量也越来 越大。
因此，方格星虫在药理及饮食中使 用频繁，使得国内夕卜对方格星虫的研究日 益增加，主要涉及代谢生理、生态特征等 研究，对于方格星虫多糖提取方法的探究 研究较少，P E#合酶法提取方格星虫多 糖的研究极少。
陈文等131对方格星虫多糖 的研究，以海南三亚沿海方格星虫为对 象，利用酶进行酶解，采用响应面法研究 超声波辅助酶法提取方格星虫多糖最舡 艺条件；实_棘明：在超声波辅助酶 法提取方格星虫多糖的实验过程中，单因 素的最隹条件为酶底物比为2.5%、温度为50 t、浸提时间为2 h、料液比为1:17g/m L、超声时间为l h、p H值为8、超声功率为960 W,多糖的最大提取率3.24%。
刘玉明等[41对方格星虫多糖不同提取工艺的研究，应用酶法、碱法以及酶法碱法联合提取，实验结果酶法提取率为0.60%，碱法提取率为1.47%,联合法提取率为0.20%;三种工艺提取多糖的含量分别为21.83%、87.30%、36.40%。
董兰芳等[5_6]酣赚提取方格星虫多糖，三氯乙酸脱蛋白、透析、醇沉，最终提取率为1.47%,多糖质量分数64.15%。
3 P E F结合酶提取法3.1研究优点目前多糖的提取有水提法、酸提法、碱提法、醇提法，但提取聽没有达到最佳，存在着提取时间长、纯度低、杂质多等缺点。
以P E F结合酶法作为提取的方法，P E F又称高压脉冲电场，是采用高电场强度、麵冲宽度和高脉冲频率对液体进行处理，可以连续杀菌。
该技术提取时间短、操作简单、耗能少、赫低，撤提高得率和经济亂且实紐理条件温和，可有效维持提取物的生理活性，是一种有发展前景的天然产物的提取技术，也是一种機的提取手段。
酶是一类生物催化剂，能降低反应的活化能，多糖大多存在于细胞间质间，通过酶的作用破坏方格星虫的细胞膜结构，使溶液的渗透性增强，有效提高多糖的提取率。
响应面优化(R S M)是一种优化实验条件的方法，适合于解决非线性数据处理的相关问题，通过对过程回归方程进行拟合和响应曲面、绘制等高线、可直接地求出相应各因素水平的响应值，在各因素水平的响应值基础上，找出预测的响应值最优值以及对应的实验条件，确定最佳工艺参数。
提取得到的方格星虫多糖含量利用高效液相色谱法检测，计麟率；高效液相色谱又称H P L C,在流动相为液体的基础上，引用气相色谱法的理论，该法固相液相分离效果明显，分析速度快，操作简单，能快速测定多糖含量關。
3.2研究内容方格星虫謝样品的撇理，配制反应标准溶液，P E F结合酶法提取多糖，绘制标准曲线等操作。
高压电场、脉冲时间、料液比、酶种类、添加酶量、酶解温度、酶解时间、提取时间和温度都是影响多糖提取率的因素，以单因素实验确定P E F处理关键参数、高压电场、脉冲时间、酶种类，在最优单因素变量基础上，应用正交实验1141研究料液比、酶用量、提取时间和温度对方格星虫多糖提取的影响；响应面法确定酶解温度、酶解时间，利用P E F结合胰蛋白酶法提取方格星虫多糖，多糖含量用高效液相色谱法检测。
对力口标回收率的分析，减少实验误差，根据实■贼析其线性关系、方数析、响应面优化等，并辅以方差及响应面分析对实验结论加以论证，确保实验结雜确性与可行性，确定最隹提取職条件。
4结论方格星虫在研究价值，尤其是在医学领域的开发，目前关于方格星虫多糖提取的方法较多，P E F (下转108页）108 為ffls 科技 2019年.第1期断。
4结论近年来国内关于奸青素的研究越来越 多，大多以研究虾青素的物理性质和化学 性质以及其性质在药品、食品、农业等多 方面的应用为主，而如何更好、更快、更 高效地提祕青素的研究并不多。
该实验 以获取奸青素提取最隹工艺为目的，拟采 用响应面法优化超声-微波辅助方法针对 红尾奸奸壳中虾青素提取进行研究，实验 设计采用对时间、温度、料液比、丙雛 度、超声频率以及超声波作用时间进行单 变量因素考察，再结合高效液相对红尾 奸壳中的虾青素进行分离提纯，最后通过 线性试验、方差分析、建立数学模型、精 密度试验、加标回收率试验及稳定性试 验；预估实验测得结果客观，可优化得出 的最佳提取工艺为后续水产品中虾青素的 提取提供借鉴，并推动虾青素在药物、食 品等方面的应用研究。
【参考文献】[1]曹秀明,宋冬雪，李钧，等.虾青素对 神经系统保护作用研究进展00.食品与药 品，2018,20(03) :252-257(上接109瓦）结合酶法是一种新颖的技 术创新手段，并且有关P E 瞒合酶法提取 方格星虫多糖的研究较少。
利用P E F ^合 酶法提取方格星虫多糖能提高多糖的提取率，操作简单，时间短，成本低等；实验 以高压电场、脉冲时间、酶种麵行单因 素确认，通过正交试验研究料液比、酶用 量、提取时间和温度，选择出最优实验条 件，通过试验数据结果分析绘制曲线，方 差及响应面辅助分析实验结论，确定 P E 嘴合酶法提取方格星虫多糖最隹实验 条件。
最终提取的方格星虫多糖通过高效 液相色谱法检测多糖的含量，由公式计算 多糖的质量分数。
综上所述，利用P E F ^合酶法提取方格星虫多糖是技术上的创 新，且多糖得率可观，是一种高效便捷的 提取方法，为后续方格星虫多糖的研究提 供赫。
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作者简介：林栩（ 1998-),女，汉，广东丰顺，2016级化学专业本科在 读。
通讯作者：陈文（ 1980-),男，副教授，硕士，主要研究方向天然产物化学 成分分析、提纯、鉴定。