香菇多糖提取实验汇报
蘑菇多糖提取实验报告
一、实验目的1. 学习蘑菇多糖的提取方法；2. 掌握蘑菇多糖的鉴定与检测技术；3. 研究蘑菇多糖的生物活性。
二、实验原理蘑菇多糖是一种生物活性物质，具有多种生物学功能，如抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等。
本实验采用水提醇沉法提取蘑菇多糖，并对其理化性质、结构特征和生物活性进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 蘑菇子实体：香菇、金针菇等；- 无水乙醇、丙酮、正己烷等有机溶剂；- 碘液、硫酸铜溶液等试剂；- pH计、紫外分光光度计等仪器。
2. 实验仪器：- 电子天平；- 磁力搅拌器；- 烘箱；- 冷冻离心机；- 超声波清洗器；- 离心管、烧杯等实验器材。
四、实验方法1. 蘑菇子实体的预处理将蘑菇子实体洗净，去除杂质，切碎，用蒸馏水浸泡过夜。
2. 蘑菇多糖的提取将浸泡好的蘑菇子实体加入蒸馏水中，搅拌提取2小时；将提取液过滤，收集滤液；将滤液用无水乙醇沉淀，离心分离；将沉淀物用蒸馏水溶解，重复上述沉淀、离心步骤，直至沉淀物基本溶解；将溶解后的沉淀物用丙酮沉淀，离心分离；将沉淀物用蒸馏水溶解，得蘑菇多糖粗品。
3. 蘑菇多糖的鉴定与检测（1）外观鉴定：蘑菇多糖粗品为白色粉末；（2）溶解性检测：蘑菇多糖粗品可溶于水、乙醇、丙酮等溶剂；（3）分子量测定：采用凝胶渗透色谱法（GPC）测定蘑菇多糖的分子量；（4）单糖组成分析：采用高效液相色谱法（HPLC）分析蘑菇多糖的单糖组成；（5）生物活性检测：通过体外抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等实验，检测蘑菇多糖的生物活性。
五、实验结果与分析1. 蘑菇多糖粗品的外观为白色粉末，可溶于水、乙醇、丙酮等溶剂。
2. GPC结果显示，蘑菇多糖的分子量在10-100 kDa之间。
3. HPLC分析表明，蘑菇多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖等单糖组成。
4. 生物活性检测结果显示，蘑菇多糖具有抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等生物活性。
六、实验结论本实验成功提取了蘑菇多糖，并通过鉴定与检测，证实了蘑菇多糖具有多种生物活性。
香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究
香菇多糖提取工艺和含量测定方法研究报告1. 研究目标本研究旨在探索香菇中多糖的提取工艺和含量测定方法，以提供一种高效、可行的工艺流程和准确的测定方法，为香菇多糖的应用开发提供科学依据。
2. 方法2.1 香菇多糖提取工艺研究2.1.1 提取试剂选择根据文献综述和前期实验结果，筛选出适合香菇多糖提取的试剂。
常用的试剂有热水、酶解液、强酸、强碱等，选择合适试剂对香菇进行水解提取。
2.1.2 提取工艺优化基于单因素实验和正交实验设计原理，优化香菇多糖提取的工艺参数，包括提取温度、提取时间、料液比等因素。
通过测定提取液中多糖的含量，确定最佳的提取工艺条件。
2.2 香菇多糖含量测定方法研究2.2.1 选择合适试剂反应根据香菇多糖的特性，选用适合的试剂进行反应。
常用的试剂有硫酸、酚硫酸、费林试剂等，可以选择适合的试剂。
2.2.2 建立标准曲线选取不同浓度的香菇多糖标准品，按照测定方法进行测定，记录各标准样品的吸光度或色素生成情况。
根据实验数据，建立标准曲线。
2.2.3 样品预处理将香菇样品经过适当的处理，如研磨、溶解等，使样品中的多糖保持在可测量范围内。
2.2.4 多糖含量测定根据建立的标准曲线和样品的吸光度值，计算出香菇中多糖的含量，并进行统计分析。
3. 发现3.1 香菇多糖提取工艺发现经过实验研究，发现采用热水提取是一种较为有效的香菇多糖提取工艺。
最佳提取条件为提取温度80℃，提取时间2小时，料液比1:10。
3.2 香菇多糖含量测定方法发现在已有的试剂中，硫酸试剂反应较为敏感，可以用于香菇多糖的含量测定。
建立的标准曲线表明，香菇多糖的浓度与吸光度呈现良好的线性关系。
4. 结论本研究通过对香菇多糖的提取工艺和含量测定方法进行深入研究，得出以下结论：1.香菇多糖的热水提取工艺在提取温度80℃，提取时间2小时，料液比1:10的条件下，可获得较高的提取产率。
2.硫酸试剂是一种适用于香菇多糖含量测定的试剂，建立的标准曲线可用于准确测定香菇多糖的含量。
2论文香菇菌柄基部多糖提取及其抗脂质过氧化作用分析
《香菇菌柄基部多糖提取及其抗脂质过氧化作用分析》摘要：使用香菇菌柄基部和纤维素酶为材料提取粉碎粒度为200目香菇菌柄基部中多糖，测定纤维素酶对粉碎粒度为200目香菇菌柄基部的多糖的提取率。
并且使用结晶紫法验证香菇菌柄基部的多糖有抗脂质过氧化。
实验结果表明：香菇菌柄基部中的多糖使用纤维素酶，酶解温度为35℃，酶解时间为3h,香菇菌柄基部多糖提取率为21.75%。
且用结晶紫方法验证了香菇菌柄基部中的多糖具有康脂质过氧化作用。
关键词：香菇菌柄基部多糖提取抗脂质氧化结晶紫前言：香菇素有"山珍之王"之称，是高蛋白、低脂肪的营养保健食品。
中国历代医学家对香菇均有著名论述。
现代医学和营养学不断深入研究，香菇的药用价值也不断被发掘。
其中香菇多糖有抗肿瘤、抗病毒、调节免疫功能等作用。
但由于食用习惯香菇的菌柄基部被大量丢弃，造成浪费。
从而证明香菇菌柄基部中含有多糖并且具有抗脂质过氧化作用有重大意义。
为合理开发香菇资源提供可能性和参考。
一、实验原理1.机体在生命活动的氧化代谢过程中不断产生各种活性氧自由基( ROS) , 它们独立存在, 近年来, 人们对多糖及复合物的抗氧化活性作用有了越来越深入的认识。
已有大量的研究表明, 一大部分从天然产物中分离得到的多糖类化合物具有清除自由基、抑制脂质过氧化作用、抑制亚油酸氧化等抗氧化作用。
【4】反应方程式如下：2.结晶紫分光光度法测·OH基本原理是: H2O2和Fe2+发生Fenton反应产生#OH。
·OH容易进攻高电子云密度点,会与结晶紫中具有高电子云密度的)C=C)基团发生亲电加成反应,而使结晶紫褪色。
通过测定结晶紫吸光度值的变化可间接测定出·OH的生成量。
Fe2++H2O2 Fe3++·OH+OH-3.酶解法：该法是根据食用菌细胞壁的构成,利用酶反应具有高度专一性的特点,选择相应的酶,将细胞壁的组成成分(纤维素、半纤维素和果胶质)水解或降解,破坏细胞壁结构,使细胞内的成分溶解、混悬或胶溶于溶剂中,从而达到提取的目的,且有利于提高成分的提取率;另一方面,由于许多食用菌中除了含有多糖外,还含有其他成分如淀粉、蛋白质、果胶、粘液质等,这些成分的存在往往使提取液呈混悬状态,而酶提取法可以根据提取液中杂质的种类、性质,有针对性地采用相应的酶,将这些杂质分解或除去,以改善提取液的澄清度,提高产品的稳定性。
3 王博 香菇多糖的提取
香菇多糖的提取一，实验目的：掌握热水侵泡法分离多糖类化合物的原理和方法。
二，实验原理：多糖溶于热水,不溶于60%以上乙醇，所以用热水提取,乙醇沉淀除去部分醇溶性杂质;因为热水也可以将蛋白类物质提取出来,所以用乙醇除去提取液中的蛋白.三，实验材料与设备：香菇，葡萄糖，乙醇，苯酚，浓硫酸，紫外可见分光光度计，恒温浴槽。
四，制作标准曲线；采用苯酚硫酸法，以葡萄糖为标准物，称取105℃干燥至恒重的无水乙醇的葡萄糖14.8mg，置100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，分别取：0.0ml ,0.4ml ,0.6ml ,0.8ml ,1.0ml ,1.2ml ,1.4ml ,1.6ml ,1.8ml ,加水补充至2.0ml，再加1ml 5%的苯酚溶液，迅速加入5ml的浓硫酸，摇匀，静置20分钟，冷却至室温，以蒸馏水为空白，在490mm波长处测定吸光度，绘制标准曲线，得到回归方程为：y=0.006x +0.032,R=0.9991，线性范围是：0~266.4ug.标准曲线的绘制：假如葡萄糖0 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 1.6 1.8 溶液的量mlA490 0.005 0.016 0.020 0.019 0.029 0.031 0.041 0.044 0.049五，操作步骤：1 提取取干香菇粉粉碎，称取20g，置于250ml烧杯中，加入100ml蒸馏水在石棉网上加热至沸腾，并不断搅拌，30min后抽滤，滤渣在用100ml的蒸馏水溶液煮沸30min，合并两次滤液，加热浓缩至20ml，溶于95%乙醇中，搅拌并冷却至室温，静置1h，以4000r/min离心10min，沉淀，真空干燥，得到粗香菇多糖。
2 除蛋白粗糖50ml 100℃热水溶解，加sevage溶液10ml，剧烈震动10min，静置10min，4000r/min离心10min，取上清液，加sevage溶液反复操作5次。
3 纯化粗糖置于烧杯中，加蒸馏水50ml溶解，加入等体积的0.15mol/L 的CTAB与硼酸缓冲溶液，静置10min，4000r/min离心得沉淀用2mol/L的乙醇溶解，静置10min，4000r/min离心后取上清液加等体积的甲醇，静置24h。
香菇多糖的提取实验报告
香菇多糖的提取实验报告一、实验目的本实验旨在探索从香菇中提取多糖的有效方法，并对提取得到的香菇多糖进行初步的定性和定量分析。
二、实验原理香菇多糖是一种水溶性的大分子化合物，其在热水中具有一定的溶解性。
通过热水浸提的方法，可以使香菇中的多糖溶解到水中，然后经过离心、过滤等操作去除杂质，再通过醇沉的方法使多糖沉淀出来，最后经过干燥得到香菇多糖的粗品。
三、实验材料与仪器1、实验材料新鲜香菇（市售）、无水乙醇（分析纯）、丙酮（分析纯）、石油醚（分析纯）、葡萄糖标准品、浓硫酸（分析纯）、苯酚（分析纯）等。
2、实验仪器电子天平、恒温水浴锅、离心机、旋转蒸发仪、真空干燥箱、分光光度计、容量瓶、移液管、具塞刻度试管等。
四、实验步骤1、原料预处理将新鲜香菇洗净，去除杂质和根部，切成小块，置于通风处晾干。
然后用石油醚回流脱脂2 次，每次2 小时，以去除香菇中的脂类物质。
脱脂后的香菇用丙酮回流脱色 2 次，每次 2 小时，以去除香菇中的色素。
2、热水浸提将预处理后的香菇放入圆底烧瓶中，按料液比 1:20 加入蒸馏水，在90℃的恒温水浴锅中浸提 3 小时。
期间每隔 30 分钟搅拌一次，以提高提取效率。
3、离心分离浸提结束后，将提取液冷却至室温，然后在 4000 r/min 的转速下离心 15 分钟，取上清液。
4、过滤将上清液用滤纸过滤，去除其中的不溶性杂质。
5、醇沉向过滤后的上清液中缓慢加入 3 倍体积的无水乙醇，边加边搅拌，使多糖沉淀出来。
然后将溶液置于 4℃冰箱中静置过夜。
6、离心收集将醇沉后的溶液在 4000 r/min 的转速下离心 15 分钟，收集沉淀。
7、洗涤用无水乙醇和丙酮依次洗涤沉淀，以去除其中的杂质。
8、干燥将洗涤后的沉淀置于真空干燥箱中，在 60℃下干燥至恒重，得到香菇多糖的粗品。
9、多糖的定性分析（1）苯酚硫酸法：取适量的香菇多糖粗品，用蒸馏水溶解，制成一定浓度的溶液。
然后取 1 mL 溶液，加入 1 mL 5%的苯酚溶液和 5mL 浓硫酸，摇匀后在沸水浴中加热 15 分钟，冷却至室温后，在 490 nm 处测定吸光度。
香菇多糖提取实验汇报
超声波法提取香菇多糖研究背景：香菇多糖的性质：香菇多糖以β~1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能用途：抗肿瘤药。
为化、放疗辅助药。
主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。
生产技术状况：因为香菇多糖的用途广泛，提取比较方便，越来越多的人投身于这方面的研究，是的提取技术方面的大幅度提升。
状况良好。
操作过程：方案设计：香菇多糖的提取香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右）→提取45min（中间停顿2次，每次5min）→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min（中间超声波停2次，每次5min）→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用香菇多糖的测定：1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：将溶液PH 调节至8---9，加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5% (w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液。
2.制作标准曲线：准确吸取1mg/ ml 葡萄糖标准溶液1.0 、2.0 、3.0 、4.0 、5.0ml 置于50ml 容量瓶定容，准确吸取该系列溶液各2ml ，然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
3. 样品的测定：取去完蛋白的样液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度。
将吸光度控制在0.2-0.8人员分工：我们分成两组来完成实验，因为有两组待测夜要进行测定。
然后标准溶液是由第一大组完成。
由于操作比较简单，我们就一起完成。
1人对溶液进行去蛋白，2人制作待测液，1人对待测液进行测定，并记录数据。
实验现象：配置待测液时，加入浓硫酸后溶液变成橙黄色。
从而可来额定吸光度。
香菇多糖的提取实验报告
香菇多糖的提取实验报告1. 掌握香菇多糖的提取方法；2. 了解香菇多糖的物化性质；3. 研究香菇多糖的抗氧化活性。
实验原理：香菇多糖是一种高分子多糖，具有多种保健功效，如抗氧化、抗肿瘤、促免疫等。
香菇多糖的提取方法有多种，其中较为常用的是热水浸提法和酸碱法。
热水浸提法是指将香菇粉末加到一定的温度下的水中，随后进行浸提，加热时间和浸提时间是影响提取率和质量的关键因素。
酸碱法是指将香菇粉末加入一定比例的酸和碱溶液中，进行水解，随后用酒精沉淀，最后用稀酸或碱溶解，并用冷醇进行沉淀和洗涤，得到香菇多糖。
实验材料：香菇粉末、蒸馏水、NaOH、HCl、酒精、醋酸钠、DPPH、卡拉菲指示剂。
实验步骤：实验一：热水浸提法提取香菇多糖1. 取4g香菇粉末，加入200mL蒸馏水中，加热至80℃，并保持2h；2. 将提取液用纱布过滤，分别收集滤液；3. 将滤液浓缩至大约50mL，用三倍体积的酒精沉淀，过滤并收集沉淀；4. 重复上述步骤2和步骤3，直至香菇多糖的浓度达到所需浓度为止。
实验二：酸碱法提取香菇多糖1. 取4g香菇粉末，加入100mL0.1mol/L NaOH中，进行水解，保持100℃，2h；2. 加入等量的0.1mol/L HCl至酸度为2，用酒精沉淀；3. 用10%醋酸钠溶液洗涤沉淀，并用稀棕黑色指示剂观察，直至洗涤液呈现淡黄色；4. 用酒精洗涤沉淀，分别重复上述步骤2-3，将洗涤干燥的沉淀溶解后，混合，加热水浴，调节pH至7左右，沉淀多糖，洗涤，干燥得到香菇多糖。
实验三：测定香菇多糖的抗氧化活性1. 取一定量的DPPH溶液（30mg/L），加入1mL香菇多糖液体，反应30min；2. 测定吸收值，计算香菇多糖的抗氧化活性。
实验结果：通过实验一和实验二分别提取了香菇多糖，得出了两种不同的提取方法的多糖成品。
经过实验三，测得香菇多糖的抗氧化活性，根据吸收值的大小可以判断多糖的抗氧化强弱。
实验结论：热水浸提法和酸碱法提取香菇多糖都是有效的提取方法。
实验二：超声波提取香菇多糖
提取情景
• 4）结果与分析 按照上述的实验技术流程图路线，得出的实验结果，力求做到有理有 据，准确可靠。并且，通过查阅资料对自己的实验结果加以分析（即 使实验失败，也要说明失败原因，为下次实验总结经验教训），在对 实验结果进行分析后，还有必要进行更为深人的讨论，如对实验结果 的理论分析，对操作方法的科学性与局限性，实验结果的可靠程度与 适用范围等等作进一步阐述， 同时，大胆地提出对实验的改进意见 和质疑等。 另外，可以对实训课的组织与安排提出建议，以便老师在同类实训教 学中改进。 • 5）致谢 致谢对象应是对整个实训操作过程有实质性帮助的人，主要是实训合 作伙伴，以及实训教辅人员，并应写出被致谢者。
提取情景
超声波萃取对溶剂和目标萃取物的性质（如极性）关系不大。 因此，可供选择的萃取溶剂种类多、目标萃取物范围广泛。 减少能耗，由于超声萃取无需加热或加热温度低，萃取时间 短，因此大大降低能耗。
药材原料处理量大，成倍或数倍提高，且杂质少，有效成分 易于分离、净化。 萃取工艺成本低，综合经济效益显著
提取情景
超声波提取的原理
• 超声波在物质介质中的相互作用效应可分为热效应、空化 效应和机械传质效应。超声波的热效应、机械传质作用及 空化作用成为超声技术在提取应用中的三大理论依据。
1
2
3
超声波的热 效应
超声波的机械 效应
超声波的空化 效应
提取情景
超声波提取的特点
• 适用于中药材有效成份的萃取，彻底改变传统的水煮醇 提萃取方法的新方法，与常规提取工艺相比，超声波提 取具有如下突出特点：
按照产品规格，用水处理时 制备的姜淀粉和离心液调整 姜辣素含量
姜 辣 素 提 取 〔 滤 渣 用 6 倍 体 积 （ ml/g ） 50%乙醇60℃回流浸提120min,过滤，滤 液离心、合并提取液〕 提取液处理（低压浓缩回收乙醇，水 稀释浓缩物，低温静置待分层，取下层 沉淀浸膏，用β -CD包络）
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超声波法提取香菇多糖
研究背景：
香菇多糖的性质：香菇多糖以β~1，3葡聚糖为主，含有少量的木糖和甘露糖，具有抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能和刺激干扰素形成等功能
用途：抗肿瘤药。
为化、放疗辅助药。
主要用于胃癌、肺癌、乳腺癌。
生产技术状况：因为香菇多糖的用途广泛，提取比较方便，越来越多的人投身于这方面的研究，是的提取技术方面的大幅度提升。
状况良好。
操作过程：
方案设计：香菇多糖的提取
香菇预先烘干→称取干香菇15克→粉碎→圆底烧瓶→200ml热水70℃→超声波发生器（水预热在60℃左右）→提取45min（中间停顿2次，每次5min）→过滤→滤渣→等滤液体积热水70℃→提取30min（中间超声波停2次，每次5min）→过滤→合并滤液→抽滤→滤液→量体积标识贮藏备用
香菇多糖的测定：1.首先去掉香菇多糖溶液中的的蛋白质：采用氯化钙法：将溶液PH 调节至8---9，加热到85℃，加入氯化钙使浓度达5% (w/v)，搅拌，冷却至室温，过滤，得脱蛋白多糖液。
2.制作标准曲线：准确吸取1mg/ ml 葡萄糖标准溶液1.0 、2.0 、
3.0 、
4.0 、
5.0ml 置于50ml 容量瓶定容，准确吸取该系列溶液各2ml ，然后加入6%苯酚1.0ml 及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度，以2.0ml水按同样显色操作为空白，横坐标为多糖微克数，纵坐标为光密度值，得标准曲线。
3. 样品的测定：取去完蛋白的样液2ml，然后加入6%苯酚1.0ml及浓硫酸5.0ml,摇匀冷却，室温放置20分钟以后于490nm测光密度。
将吸光度控制在0.2-0.8
人员分工：我们分成两组来完成实验，因为有两组待测夜要进行测定。
然后标准溶液是由第一大组完成。
由于操作比较简单，我们就一起完成。
1人对溶液进行去蛋白，2人制作待测液，1人对待测液进行测定，并记录数据。
实验现象：配置待测液时，加入浓硫酸后溶液变成橙黄色。
从而可来额定吸光度。
（附照片）总结分析
实验结果：标准曲线
两组待测液所得的吸光度：稀释100倍后
组一：
平均吸光度：0.392 浓度：0.0492
组二
平均吸光度：0.345 浓度0.0423
实验遇到问题及解决方法
遇到问题：1.开始提取香菇多糖时对香菇要进行如何处理不是很懂。
经过学习知道要先对香菇进行粉碎，但是又不能多余粉碎。
过细的香菇会对后期的过滤产生一定的影响。
不易过滤。
2.在测定香菇多糖的含量之前要对香菇进行曲蛋白质，加入的是氯化钙，但对于要加多少的氯化钙不是很了解。
以为是每组多加一定的量的。
通过向老师询问，知道加入的量是根据原香菇多糖的溶液的多少，计算出的溶度应该是5% 即液体的总体积×5%
3.制作待测液时，当加入浓硫酸后，发现液体全部变为黑色了。
询问老师得知里面的香菇多糖全部碳化，因为其浓度过高，应稀释50-100倍。
我们就将其稀释了100倍在进行测定。
4.测定吸光度时，将待测液到入比色皿中时发现溶液变成了红色。
因为我们是第一组做的实验，比色皿中存在水分。
溶液遇到水时就变成了红色，对比色皿进行润洗几次，即可，否则会对实验照成较大影响。
5.测定其吸光度时发现有一个特别小，而另一组有一个特别大。
存在原因很多：特别小可能是因为比色皿中的水分将其稀释。
特别大可能是稀释过程中存在的误差。
也有可能仪器存在的误差。
计算时应避免这种数据。
收获建议
实训收获：
1.学会掌握用超声波法提取香菇多糖。
2.知道如何去除香菇多糖中的蛋白质，有多种方法。
3．团队协作能力的提升。
4．对于实验中碰到的一些小问题，能够自己进行解决。
5.对香菇多糖的作用有了一定的了解。
经验教训
1.因为疏忽大意，在配置待测液时，加浓硫酸时，将试管拿在了手里，加入的速度过快，
导致试管温度迅速上升，试管内液体差点喷出。
给我们组的人教训很大，以后在加入这些有毒，或强腐蚀性的液体时，一定要小心谨慎，代号手套，可将试管放在烧杯中，在安全的情况下仔细的加。
改进建议
1.苯酚是一种有毒的物质，是否有其他方法，或其他试剂代替苯酚。
可以使实验更具有
安全性。
2.用超声波提取香菇多糖时，对于各种影响因素是否是最合理的不是很清楚，可以进行
分组实验寻找最合理的因素。
3.对于去蛋白这步操作中，是否完全的去除了蛋白并不是完全的清楚，应该找一个方法
进行检测。