红辣椒中色素的分离与鉴定
提取辣椒色素实验报告
一、实验目的1. 了解辣椒色素的提取原理和方法。
2. 掌握辣椒色素提取过程中的关键步骤。
3. 评估不同提取方法对辣椒色素提取效率的影响。
二、实验材料与仪器1. 材料：- 成熟的干燥红辣椒- 丙酮、正己烷、异丙醇、正己烷等有机溶剂- 水浴锅- 索氏提取器- 烘箱- 离心机- pH计- 色谱仪2. 仪器：- 分析天平- 超声波清洗器- 移液器- 滤纸- 烧杯- 试管三、实验方法1. 红辣椒预处理：将红辣椒去蒂、去籽，然后粉碎成粉末状。
2. 提取方法：- 方法一：丙酮提取法1. 称取一定量的辣椒粉末，加入适量的丙酮，混合均匀。
2. 将混合物置于索氏提取器中，在90℃下进行提取。
3. 提取完成后，将提取液过滤，滤液用离心机分离固体杂质。
- 方法二：正己烷提取法1. 称取一定量的辣椒粉末，加入适量的正己烷，混合均匀。
2. 将混合物置于索氏提取器中，在90℃下进行提取。
3. 提取完成后，将提取液过滤，滤液用离心机分离固体杂质。
3. 精制过程：- 将提取得到的辣椒红粗产品用一定量的丙酮进行溶解。
- 将溶液在90℃、0.09MPa的条件下进行减压蒸馏浓缩，同时回收丙酮。
- 使用pH计监测溶液pH值，调节至中性。
- 将中性溶液过滤，滤液用离心机分离固体杂质。
4. 色素含量测定：- 使用色谱仪对提取得到的辣椒色素进行含量测定。
四、实验结果与分析1. 丙酮提取法：- 提取率：根据辣椒红粗产品重量与提取液重量之比计算，提取率约为15%。
- 纯度：提取得到的辣椒色素纯度较高，颜色鲜艳。
2. 正己烷提取法：- 提取率：根据辣椒红粗产品重量与提取液重量之比计算，提取率约为12%。
- 纯度：提取得到的辣椒色素纯度较高，颜色鲜艳。
3. 精制过程：- 通过减压蒸馏浓缩，辣椒色素的纯度得到进一步提高，颜色更加鲜艳。
4. 色素含量测定：- 使用色谱仪对提取得到的辣椒色素进行含量测定，结果显示辣椒色素含量较高。
五、实验结论1. 丙酮和正己烷均可作为辣椒色素的提取溶剂，其中丙酮提取率更高。
实验：从红辣椒中分离红色素
目前世界各国均批准使用辣椒红色素,国际国内市 场潜力很大,前景乐观。辣椒红是目前世界销量最 大的天然色素,也是最走俏的产品。国外主要生产 国有西班牙、印度等国,目前供不应求。美国一年 需4000t 天然色素,其中辣椒红色素约1000t ,日本 每年需辣椒红约500t ,加拿大、澳大利亚、新加坡、 西欧市场的需求量也很大。世界每年对辣椒红色 素的需求量约8000t ,国际市场潜力很大。我国辣 椒资源十分丰富,供大于求,南北均有种植,我国每 年大量出口韩国、日本、欧共体等。辣椒红色素 国内市场需求很大,国内三资企业出口产品和婴幼 儿食品生产厂、饮料厂均使用天然辣椒红色素。
试剂 ：干燥红辣椒；二氯甲烷；石油醚；乙酸乙
酯
4. 薄层色谱分析色素
1.5 g 干燥辣椒粉，去籽后放入烧瓶中，加 入10mL的二氯甲烷，沸石，水浴60℃加热 回流20min。 将回流的烧瓶升高，离开水浴锅恢复至室 温后。 常压过滤除去不溶物，水浴60℃蒸馏浓缩 滤液至1-2mL，得到粗的色素粘稠液，将 粘稠液收集到干净干燥的试管中待用。
从红辣椒中分离红色素
（综合化学实验）
1. 实验目的
了解提取天然产物的原理和实验方法 进一步掌握薄层层析和柱层析技术
2. 实验原理
辣椒红色素是一种存在于成熟红 辣椒果实中的四萜类橙红色色素。其 中极性较大的红色组分主要是辣椒红 素和辣椒玉红素，占总量的50 %～60 % ，另一类是极性较小的黄色组分， 主要成分是β- 胡萝卜素。
4. 薄层色谱分析色素
去少量色素粗品加入2~3滴二氯甲烷使其溶 解，在 薄板上点样，以二氯甲烷为展开剂 在展缸中薄层分析； 计算每种色素的Rf比移值。
5. 柱色谱分离提取色素
称量8~9g的300目活化的硅胶，湿法二氯 甲烷装柱，二氯甲烷做洗脱机。 用胶头滴管加入0.5mL的粗色素二氯甲烷 溶液，加样时要使样品均匀滴加到硅胶柱 上。 用二氯甲烷淋洗，分出黄、红、深红三条 色带，用干燥的试管收集不同颜色的产物。 不同颜色的洗液在旋转蒸发仪上浓缩得到 色素。
红辣椒色素实验报告
红辣椒色素实验报告红辣椒色素实验报告引言：红辣椒是我们日常饮食中常见的调味品之一，它不仅能为食物增添香辣的味道，还能给菜肴增添美丽的红色。
这种红色来自于红辣椒中的一种化合物，即红辣椒色素。
本次实验旨在通过提取红辣椒中的色素，并观察其性质和特点，以深入了解红辣椒色素的结构和应用。
实验材料和方法：材料：1. 红辣椒2. 酒精3. 滤纸4. 烧杯5. 水6. 试管7. 称量器具方法：1. 将红辣椒切成小块，加入适量的酒精中，搅拌均匀。
2. 将搅拌好的红辣椒酒精溶液过滤，收集滤液。
3. 将滤液倒入烧杯中，加入适量的水，使溶液稀释。
4. 取一定量的溶液倒入试管中，进行观察和性质测试。
实验结果和讨论：在实验过程中，我们发现红辣椒酒精溶液经过过滤后，滤液呈现出醒目的红色。
这说明红辣椒中的色素成功地被提取出来了。
我们进一步观察了红辣椒色素的性质。
首先，我们发现红辣椒色素在酒精中溶解性较好，而在水中溶解性较差。
这是因为红辣椒色素是一种脂溶性物质，而酒精是有机溶剂，与红辣椒色素有较好的相容性。
而水是无机溶剂，与红辣椒色素的相容性较差。
此外，我们还进行了红辣椒色素的稀释实验。
我们将红辣椒酒精溶液稀释后，发现颜色逐渐变淡，直至透明。
这说明红辣椒色素的颜色是与其浓度有关的，浓度越高，颜色越鲜艳。
红辣椒色素具有一定的稳定性。
在实验中，我们将红辣椒色素溶液暴露在阳光下，发现颜色并没有明显的变化。
这表明红辣椒色素对光的稳定性较好，不易受到光的破坏。
红辣椒色素在食品工业中有着广泛的应用。
它可以用于调味品、食品着色剂等方面。
红辣椒色素不仅能提供食物所需的香辣味道，还能增加食物的色彩，使其更加诱人。
因此，红辣椒色素在食品工业中有着重要的地位。
结论：通过本次实验，我们成功提取了红辣椒中的色素，并观察了其性质和特点。
红辣椒色素具有良好的溶解性，浓度与颜色有关，对光稳定。
红辣椒色素在食品工业中有着广泛的应用。
通过这次实验，我们对红辣椒色素有了更深入的了解，也增加了我们对食品科学的兴趣。
辣椒红色素的分离提取及测定
实验七辣椒红色素的分离提取及测定综述：辣椒红色素为深红色粘性油状液体，是以辣椒为原料，用石油醚、丙酮、正己烷等有机溶剂提取得到的天然色素。
主要由辣椒红素、辣椒玉红素、辣椒酮、辣椒红呋喃素、玉米黄质等化合物组成，，依据来源和制法的不同，因含有辣椒碱而具有不同程度的辣味。
辣椒红素几乎不溶于水，可任意溶解于丙酮、乙酸乙酯、正己烷，易溶于乙醇，稍难溶于丙三醇。
紫外光可以使辣椒红素褪色，但辣椒红素对热稳定，160℃加热两小时几乎不褪色，Fe3+、Cu2+可使之褪色。
pH对色素色度无影响。
辣椒红素一、实验目的：本实验为自主设计实验，要求学生几人一些小组，自己查阅文献、制定实验方案、在教师指导下讨论通过后进行实验。
通过对辣椒红色素的提取、分离及测定，初步了解和掌握食品中某些成分的提取技术、分离技术以及测定方法，从而对食品有效成分的分析有比较系统的认识，为能灵活运用食品化学的研究方法打下良好的基础。
本次实验还拟通过这种方式，使同学们了解一个研究性试验的基本过程，从而提高对科学研究的兴趣，为今后创新性实验的开发奠定一定的能力基础，同时也在于培养大家团队协作的团队精神。
二、实验原理辣椒红色素为脂溶性色素，选用适当的方法提取后，可采用不同的分离技术对色素进行分离。
三、实验材料与设备1.材料：干红辣椒2.试剂：石油醚、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、氯仿、甲醇、柱层析用硅胶、薄层层析用硅胶、0.5%羧甲基纤维素钠等。
3.设备：粉碎机、超声波清洗机、旋转蒸发仪、薄层层析板、柱层析、层析缸等。
四、实验步骤1.色素的提取：称取1-2g 干红辣椒，掰开去籽，放入粉碎机中粉碎。
将粉碎好的粉末倒入一干燥洁净的三角瓶，加入50-100ml 丙酮，用保鲜膜封口，并在保鲜膜上扎几个眼儿。
将三角瓶放入超声清洗机20-30min ，过滤后放入旋蒸瓶内旋蒸，直至完全蒸干。
向内壁附着有辣椒红色素的旋蒸瓶内加入3-4ml 左右的石油醚，轻摇将辣椒红色素溶解在石油醚中，最后把石油醚倒入小试管，密封好放入冰箱保存。
从红辣椒中提取红色素实验报告
从红辣椒中提取红色素实验报告红辣椒是我国一种常见的调味品，也是一种常用的蔬菜。
它不仅可以为菜肴增添辣味，还富含丰富的维生素C和胡萝卜素等营养物质。
而红辣椒的红色素正是由胡萝卜素组成的。
本实验旨在通过提取红辣椒中的红色素，了解胡萝卜素的提取方法及其特性。
实验步骤：1. 实验前准备：a. 准备红辣椒、酒精、石油醚、无水硫酸钠、滤纸等实验器材。
b. 红辣椒切成细碎的颗粒，使得红辣椒中的红色素更容易提取出来。
2. 提取红色素：a. 将切碎的红辣椒放入一个容器中。
b. 加入足够的酒精，使红辣椒完全浸泡在酒精中。
c. 用玻璃棒轻轻搅拌，促使红色素与酒精充分混合。
d. 将混合液静置一段时间，待红色素充分溶解在酒精中。
e. 使用滤纸等过滤器将混合液过滤，使得提取出的红色素分离出来。
3. 分离红色素：a. 将过滤后的提取液倒入一个蒸发皿中。
b. 加入少量的石油醚。
c. 用玻璃棒轻轻搅拌，使石油醚与酒精中的红色素充分混合。
d. 将蒸发皿放置在通风处，使石油醚缓慢蒸发。
e. 待石油醚完全蒸发后，可以观察到蒸发皿中残留的红色素。
实验结果：通过本次实验，我们成功地从红辣椒中提取到了红色素。
红色素在酒精中溶解度较高，但在石油醚中溶解度较低，因此通过加入石油醚并蒸发石油醚，我们成功地将红色素分离出来。
实验探究：胡萝卜素是一种植物可溶性黄色颜料，具有很强的抗氧化作用。
在红辣椒中，胡萝卜素的含量较高，因此红辣椒呈现出鲜艳的红色。
胡萝卜素的提取方法有很多种，本实验采用了酒精提取法。
酒精具有较好的溶解性，能够有效地溶解红辣椒中的胡萝卜素。
而石油醚则是一种较好的分离剂，通过蒸发石油醚，可以将红色素分离出来。
这种方法简单易行，且提取效果较好。
总结：通过本次实验，我们成功地从红辣椒中提取到了红色素。
胡萝卜素是红辣椒中的主要成分之一，具有丰富的营养价值和抗氧化作用。
了解红辣椒中红色素的提取方法和特性，有助于我们更好地利用红辣椒的营养价值，并在日常生活中合理饮食。
辣椒红色素的分离提取及测定
辣椒红色素的分离提取及测定辣椒红素综述辣椒辣椒红色素又名辣红素，是从辣椒中提取的一种天然色素，属于叶黄素类共轭多烯烃含氧衍生物，主要成分为辣椒红素、辣椒玉红素、玉米黄质一胡萝卜素、隐辣质等，辣椒红色素作为从成熟辣椒果皮中提取的天然红色素的主要成分，是目前国际上公认的最好的红色素。
我国早在“七五”期间就将辣椒红色素列为重点开发的4种天然色素之一。
理化性质：纯品为深红色液体，无辣味，其显色强度强于其他天然色素。
辣椒红色素不溶于水，易溶于乙醇、酮、油脂等有机溶剂，因其极性较强，在超临界二氧化碳中几乎不溶解。
具有如下稳定性：1.光对稳定性的影响在室内光线下，稳定性较好，放置4周，色素无褪色现象。
但如直接暴露在室外强光之下则很容易褪色。
2.温度对稳定性的影响温度对辣椒红色素有一定影响。
温度越高色素损失愈多，加热至70℃以上则损失更明显。
3. pH值对稳定性的影响辣椒红色素的耐酸、耐碱性好。
pH值在3—12之间时色泽稳定不变。
4.金属离子对稳定性的影响cu、Fe对辣椒红色素具有明显的破坏作用，Sn、A1+在浓度较高，即大于400 mg／kg时对红色素的色价有影响，而Fe3+、Na+、K+、M矿等对红色素的影响可以忽略。
提取方法比较：辣椒红素是从红辣椒果皮中得到的深红色天然红色素，色泽优良、性质稳定，广泛用于食品、化妆品、饲料等领域，另外还具有抗癌功能。
目前，辣椒红色素提取方法大致可归为油溶法、溶剂提取法、超临界CO2流体萃取法、超声波溶剂提取法、溶剂微波提取法和酶法提取六类。
国内外辣椒红色素的提取方法主要有油溶法、有机溶剂法和超临界CO 流体萃取法三种。
油溶法因油与色素难分离不易得到纯净的辣椒红色素，所以该种方法现已基本停止使用；溶剂法使用较普遍，通常用丙酮、乙醇、正己烷等有机溶剂浸提。
超临界CO2流体萃取法是一种新型的分离技术，工艺简单、能耗低、萃取溶剂无毒、易回收、所得产品具有非常高的纯度。
提取目的及社会需求：辣椒红色素在国内外市场需求量很大。
实验七 红辣椒色素的提取及薄层色谱鉴定
2011-11-24
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3. 展开
薄层色谱的展开，需要在密闭容器中进行。为使 溶剂蒸气迅速达到平衡，可在展开槽内衬一滤纸。 在层析缸中加入配好的展开溶剂，使其高度不超 过1cm。将点好的薄层板小心放入层析缸中，点 样一端朝下，浸入展开剂中。盖好瓶盖，观察展 开剂前沿上升到一定高度时取出，尽快在板上标 上展开剂前沿位置。晾干，观察斑点位置，计算 Rf值。
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二、实验原理
薄层色谱(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示， 又称薄层层析，属于固－液吸附色谱。样品在薄层板 上的吸附剂（固定相）和溶剂（移动相）之间进行分 离。由于各种化合物的吸附能力各不相同，在展开剂 上移时，它们进行不同程度的解吸，从而达到分离的 目的。
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四、实验关键步骤
1、载玻片应干净且不被手污染，吸附剂在玻片上应 均匀平整。 2、点样不能戳破薄层板面，各样点间距1—1.5cm， 样点直径应不超过2mm。 3、展开时，不要让展开剂前沿上升至底线。否则， 无法确定展开剂上升高度，即无法求得Rf值和准 确判断粗产物中各组分在薄层板上的相对位置。
倾斜上行展开
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垂直上行展开
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4. 显色
被分离物质如果是有色组分，展开后薄层色谱板 上即呈现出有色斑点。 如果化合物本身无色，则可用碘蒸气熏的方法显 色。还可使用腐蚀性的显色剂如浓硫酸、浓盐酸 和浓磷酸等。 对于含有荧光剂的薄层板在紫外光下观察，展开 后的有机化合物在亮的荧光背景上呈暗色斑点。 本实验样品本身具有颜色，不必在荧光灯下观察。
2011-11-24
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2. 点样
红辣椒中辣椒红色素的提取工艺研究
红辣椒中辣椒红色素的提取工艺研究标题：红辣椒中辣椒红色素的提取工艺研究摘要：红辣椒是一种辣椒品种，具有辛辣的味道和丰富的营养价值。
其中的辣椒红色素是一种重要的天然色素，被广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。
本文通过实验研究红辣椒中辣椒红色素的提取工艺，探讨其最佳工艺条件，以期提供一定的理论和实践指导。
一、引言辣椒红色素是从辣椒中提取的一种红色天然色素，具有良好的色泽和稳定性。
它不仅能够提高食品的色彩鲜艳度，还具有一定的保健作用，如抗氧化、抗菌等。
因此，辣椒红色素在食品工业、医药工业等领域具有广泛的应用前景。
二、实验方法1.材料准备：选取新鲜的红辣椒作为实验材料，将其洗净，并切碎备用。
2.提取液制备：按照一定比例将无水乙醇和纯净水混合，制备合适浓度的提取液。
3.提取操作：将切碎的红辣椒与提取液混合，进行搅拌和浸泡，然后进行过滤，得到辣椒红色素提取液。
4.进一步纯化：采取某种纯化方法对提取液进行纯化处理，去除杂质，得到纯化的辣椒红色素。
三、实验结果与分析1.红辣椒中辣椒红色素的最佳提取条件：(1)提取液浓度：通过一系列实验，得出红辣椒中辣椒红色素的最佳提取液浓度为30%。
(2)提取时间：实验结果表明，辣椒红素的提取时间需要在30分钟左右，过长或过短时间均会导致提取效果下降。
(3)提取温度：提取温度对辣椒红素的提取效果有一定影响。
在本实验的条件下，辣椒红素的最佳提取温度为50℃。
2.辣椒红色素的纯化效果：(1)通过纯化方法的选择和优化，成功去除了提取液中的大部分杂质，得到了辣椒红色素的纯化产物。
(2)纯化后的辣椒红色素具有较高的纯度和稳定性，具备更好的应用性能。
四、结论与展望本研究通过实验研究，确定了红辣椒中辣椒红色素提取的最佳工艺条件，并对其进行了进一步纯化处理。
实验结果表明，该工艺条件下提取的辣椒红色素具有较高的纯度和稳定性。
然而，本研究还存在一些问题，如提取工艺的可行性和经济性等需要进一步研究和探索。
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红辣椒中色素的分离与鉴定
一：授课知识点
1.红辣椒中的主要成份、应用现状
红辣椒中含有多种色素，已知的有辣椒红色度、辣椒玉红素和β-胡萝卜素；
辣椒色素具有安全无毒、抗癌美容等功效，因而被广泛的应用于食品、医药和化妆品等领域。
辣椒红色度又名椒红素，分子式为C40H56O3，纯的辣椒红色度为深胭脂红针状晶体，熔点181~182℃，易溶于极性大的有机溶剂。
2.从天然产物中提取天然色素的方法、应用现状
由于合成色素的安全性问题，不少合成色素在各国允许使用的程度被大大限制，尤其是在食品、医药和化妆品行业，所以，天然色素的提取和应用是现在和未来发展的主要方向。
到目前为止，主要有以下几种提取方法：
A，有机溶剂提取法
这是目前从动植物中提取色素的一种普遍常用的方法。
有机溶剂提取法
萃取剂便宜，设备简单，操作步骤简单易行，提取率较高，其提取的某
些产品的质量较差，纯度低，有异味或溶剂残留，影响产品的应用范围。
B，碱提取法
主要是应用了碱对多种生物物质的影响作用。
由于碱提取法加工过程
需消耗大量酸碱，且废液较难回收，近年来对碱提取法的研究也较少。
C，微波萃取法
微波萃取是用微波加热，将待测物质组分从样品基体中提取出来的一种
方法，能在较短时间内完成多种样品组分的萃取，溶剂用量少，结果重
现性好，变现出良好的发展前景和巨大的应用潜力。
D，超临界二氧化碳流体萃取法
此方法工艺简单，能耗低，萃取剂便宜，提取的产品纯度高、溶剂残留
少、无毒副作用等优点，但一次性设备费用投入高。
3.红辣椒中色素提取方法；分离原理及方法
本实验采用有机溶剂提取红辣椒中的色素，主要是利用色素在二氯甲烷中具有良好的溶解性。
将红辣椒粉末和二氯甲烷放于圆底烧瓶中回流后用水浴浓缩混合色度，再用柱层析分离色素。
4.柱层析
A，原理：吸附柱层析法是利用各组分在吸附剂与洗脱剂之间的吸附和解吸能力的差异而达到分离的。
B，层析柱的选择
（1）活塞的芯最好是聚四氟乙烯制作，这样可以不涂真空油脂，以免污染产品；如果用玻璃活塞，则真空油脂要小心涂薄均匀。
（2）层析柱的尺寸根据被分离物的量来确定，其直径与高度之比则根据被分离混合物的分离难易而定，一般在1：8到1：50之间。
柱身细长，
分离效果好，但分离的量小，且分离所需的时间长；柱身短粗，分离
效果差，但一次可以分离较多的样品，且所需的时间短。
C,吸附剂的选择
（1）柱层析常用的吸附剂为氧化铝或硅胶，其用量与待分离样品的性质和吸附剂的极性有关，通常吸附剂用量为被分离样品量的30~50
倍，对于难分离的混合物，吸附剂的用量可达100倍或更高。
（2）氧化铝有酸性、碱性和中性之分。
酸性氧化铝是用1%的盐酸浸泡后，用蒸馏水洗到其浸出液的PH为4，适用用分离酸性物质；碱
性氧化铝PH值为9~10，用以分离胺类、生物碱及其他有机碱性
化合物；中性氧化铝的PH值为7.5，适用于醛、酮、醌、酯等化
合物。
（3）硅胶略带酸性（能与强碱性有机物发生作用），所以适用于酸性和中性有机化合物的分离。
（4）硅胶一般为80~200目，颗粒太粗，溶液流出太快，分离效果不好；
颗粒太细，表面积大，吸附能力高，但淋洗速度太慢，因此需根
据实际需要选择。
D, 淋洗剂的选择
（1）根据淋洗剂的极性和对分离物各组分的溶解度大小等因素选择
（2）根据在常温至沸点的温度范围内可与被分离物长期共存不发生任何化学反应，也不被吸附剂或被分离物催化而发生自身的化学反应
（3）毒性小，操作安全
（4）适当考虑价格是否合算，来源是否方便；
（5）回收溶剂一般不应作为最终纯化产物的淋洗剂；
（6）淋洗剂的用量往往比较大，故最好使用单一溶剂以利回收。
1，实验流程及操作注意点（具体操作参照实验教材P53）A，色素的萃取和浓缩
（1）控制回流速度（约1滴/秒）；
（2）有机溶剂的过滤，需控制真空度不能过高；
（3）蒸馏装置的安装（参照P147）
（4）浓缩至看不到液体为止。
B，薄层分析
使用活化硅胶板。
硅胶板活化：放在玻璃仪器干燥后进行。
一定要待烘箱冷至室温后再集中放入薄层板慢慢升温于105－110℃活化半小时，活化期间不得开启烘箱。
活化毕，在烘箱中冷至不烫时取出使用。
派一学生负责计时。
薄层分析安排在装好层析柱并用溶剂淋洗时进行。
注：如果样点分不开或严重拖尾，可酌减点样量或用少量二氯甲烷稀释样品C，柱层析分离
（1）硅胶浆需在实验前先用二氯甲烷浸泡起来（至少浸泡30min）；
（2）柱子不需要洗，也无需在活塞处涂凡士林，用少量二氯甲烷检漏及检验其流速。
用完后除去硅胶，不要用水洗交上来，统一由小丁处理。
打坏到411
室于海燕处登记。
（3）装柱时，要使柱子垂直（用两个自由夹固定），砂芯孔里及附近的空气要排除干净，硅胶尽量一次性加入，柱子装到3/4处，上部离磨口处约6cm左右；
（4）柱子装完后，表面要平整，无气泡、断层，然后加2min左右石英砂（用来防止淋洗剂冲洗柱子上表面）。
（5）加样：先打开柱下活塞放出柱中液体，待液面降至吸附剂顶端时关闭活塞，用滴管吸取混合色素的浓缩液沿柱壁滴加入柱顶。
（混合色度浓缩液应留出1~2滴作薄层检测用）
（6）淋洗和接收：控制流出速度为1滴/秒。
D，柱效和色带的薄层检测
用薄层层析鉴定每份洗脱液，每块板上点两个样点，其中一个是混合色素浓缩液，另一个分别是第一、第二色带，仍用二氯甲烷作展开剂。
（如果分离的不好，可将合并的红色素组分再进行一次柱层析）；
E,干净溶剂回收至干净的瓶中，黄、红色素各个单独分开，中间色素全班混合浓缩，回收二氯甲烷。
黄和红色素贴好标签保存在橱柜中。
F，实验完成后，用过的硅胶板，刮掉硅胶至垃圾桶，玻璃板洗净回收。
黄、红色素鉴定：第三周做UV、IR分析；
实验毕集体大扫除。