辣椒红色素的分离提取

合集下载

提取辣椒色素实验报告

提取辣椒色素实验报告

一、实验目的1. 了解辣椒色素的提取原理和方法。

2. 掌握辣椒色素提取过程中的关键步骤。

3. 评估不同提取方法对辣椒色素提取效率的影响。

二、实验材料与仪器1. 材料:- 成熟的干燥红辣椒- 丙酮、正己烷、异丙醇、正己烷等有机溶剂- 水浴锅- 索氏提取器- 烘箱- 离心机- pH计- 色谱仪2. 仪器:- 分析天平- 超声波清洗器- 移液器- 滤纸- 烧杯- 试管三、实验方法1. 红辣椒预处理:将红辣椒去蒂、去籽,然后粉碎成粉末状。

2. 提取方法:- 方法一:丙酮提取法1. 称取一定量的辣椒粉末,加入适量的丙酮,混合均匀。

2. 将混合物置于索氏提取器中,在90℃下进行提取。

3. 提取完成后,将提取液过滤,滤液用离心机分离固体杂质。

- 方法二:正己烷提取法1. 称取一定量的辣椒粉末,加入适量的正己烷,混合均匀。

2. 将混合物置于索氏提取器中,在90℃下进行提取。

3. 提取完成后,将提取液过滤,滤液用离心机分离固体杂质。

3. 精制过程:- 将提取得到的辣椒红粗产品用一定量的丙酮进行溶解。

- 将溶液在90℃、0.09MPa的条件下进行减压蒸馏浓缩,同时回收丙酮。

- 使用pH计监测溶液pH值,调节至中性。

- 将中性溶液过滤,滤液用离心机分离固体杂质。

4. 色素含量测定:- 使用色谱仪对提取得到的辣椒色素进行含量测定。

四、实验结果与分析1. 丙酮提取法:- 提取率:根据辣椒红粗产品重量与提取液重量之比计算,提取率约为15%。

- 纯度:提取得到的辣椒色素纯度较高,颜色鲜艳。

2. 正己烷提取法:- 提取率:根据辣椒红粗产品重量与提取液重量之比计算,提取率约为12%。

- 纯度:提取得到的辣椒色素纯度较高,颜色鲜艳。

3. 精制过程:- 通过减压蒸馏浓缩,辣椒色素的纯度得到进一步提高,颜色更加鲜艳。

4. 色素含量测定:- 使用色谱仪对提取得到的辣椒色素进行含量测定,结果显示辣椒色素含量较高。

五、实验结论1. 丙酮和正己烷均可作为辣椒色素的提取溶剂,其中丙酮提取率更高。

辣椒红色素的提取方法有哪些

辣椒红色素的提取方法有哪些

辣椒红色素的提取方法有哪些辣椒红色素的提取方法有哪些辣椒红色素的提取方法有哪些?各有什么优缺点?1、油溶法油溶法是在常温下用呈液状的食用油( 如棉籽油、豆油、菜籽油等) 浸渍辣椒果皮或干辣椒粉, 使辣椒红色素溶解在食用油中, 然后通过一定的方法从油中提取出辣椒红素的一种方法[8]。

目录1.辣椒红色素的提取方法有哪些2.哪种人要少吃或不吃辣3.吃辣椒的好处 4.吃辣椒辣了怎么办呢 5.辣椒属于什么类蔬菜1辣椒红色素的提取方法有哪些1、油溶法油溶法是在常温下用呈液状的食用油( 如棉籽油、豆油、菜籽油等) 浸渍辣椒果皮或干辣椒粉, 使辣椒红色素溶解在食用油中, 然后通过一定的方法从油中提取出辣椒红素的一种方法[8]。

工艺流程: 辣椒→浸提→蒸馏→辣椒油树脂→水解→ 过滤→ 固型物→ 浸泡→ 减压过滤→ 提取液→减压蒸馏→浓缩精制色素→烘干→粉末状辣椒色素。

用油溶法提取辣椒红色素时, 油与色素的分离较困难,使得辣椒红色素物质提取率低,难以得到色价高的产品,现已基本停止使用。

2、溶剂法这是辣椒红色素的常规生产方法: 将去除坏椒、梗、籽的干辣椒磨成粉后, 用有机溶剂( 如丙酮、乙醚、氯仿、三氯乙烷、正己烷等) 进行浸提, 将浸提液浓缩得到初辣椒油树脂, 减压蒸馏得产品[9]。

工艺流程: 辣椒粉末→有机溶剂提取→减压回收溶剂→油状红色素→有机溶剂萃取→减压回收溶剂→产品采用有机溶剂提取辣椒红素有四种方法: 浸渍法、渗漉法、回流提取法、索氏提取法。

目前国内外生产辣椒红色素的厂家绝大多数都采用溶剂法提取, 但以上各种提取方法无论采用那种生产,在提取前均需将辣椒粉碾成粉末,操作费用较高。

此外, 由于提取后的残渣中还残留有相当量的红色素[10], 所得出品的杂质含量高,精制费用昂贵,残渣的可利用性差,给生产带来困难。

伍明等谈到在天然辣椒红色素的提取新工艺时, 提到采用热逆流法提取辣椒红色素的新工艺[11]。

工艺流程:辣椒干→去籽切碎→提取辣味素→除辣→提取红色素→减压浓缩→真空干燥→红色素↓残渣深加工→副产品其优点主要表现在三个方面: 1) 提取时间短,溶剂用量少, 收率高, 色价高; 2) 原料在提取前不需要粉碎成粉末, 操作费用降低, 残渣的利用价值大。

2组-3.辣椒红色素的提取

2组-3.辣椒红色素的提取
组 长: 范丽娟
组 员: 王思予
李嘉桐
艾比拜
实验申请
实验项目:辣椒红色素的提取与分离 实验原料:干辣椒粉
组长:范丽娟 组员:艾比拜
李嘉桐 王思予 C: E: Q: 指导教师:李春斌 2012 . 9. 22
LXZW-
实验仪器:水浴锅(80℃),索氏提取器,旋转蒸发仪,真空
泵,层析柱

剂:丙酮 ,石油醚, 硅胶
falw -2
操作步骤:
取红辣椒干粉2g
实验记录
操作说明及记录:
用丙酮 100mL,80℃索氏提取
浸提液减压蒸馏(40℃) (同时配制展开剂,
V石油醚:V丙酮=10:1)
得到色素浓缩液
纸层析点样, 跑样 取10mL硅胶和20ml展开剂 混匀装柱
将浓缩液上样,跑样
量大的时候,可以分别收集色素
组长:范丽娟 组员:艾比拜
李嘉桐 王思予 C: E: Q: 指导教师:李春斌 2012 . 9. 22
LXZW-
21.用毛细管取色 22.放在展开剂
点在薄板上

23.色素开始随 展开剂跑样
24.跑样速度很快
25.色素逐渐分 离
26.展开剂全部 浸湿薄板
27.色素层析完全 28.展开剂与硅胶 2:1 形成的胶柱
29.把色素均匀 滴在硅胶平面 上
当被提取物溶媒共同处于微波场下时目标组分分子受到高频电磁波的作用产生剧烈振荡分子本身获得了巨大的能量以挣脱周边环境的束缚当环境存在一定的浓度差时可以在非常短的时间内实现分子自内向外的迁移达到一个平衡点这就是微波可以短时间内实现提取色素的原因
生 化 分 离 工 程 实 验 报 告
班 级:食 质 101 指导老师:李春斌

辣椒红色素的分离提取及测定

辣椒红色素的分离提取及测定

实验七辣椒红色素的分离提取及测定综述:辣椒红色素为深红色粘性油状液体,是以辣椒为原料,用石油醚、丙酮、正己烷等有机溶剂提取得到的天然色素。

主要由辣椒红素、辣椒玉红素、辣椒酮、辣椒红呋喃素、玉米黄质等化合物组成,,依据来源和制法的不同,因含有辣椒碱而具有不同程度的辣味。

辣椒红素几乎不溶于水,可任意溶解于丙酮、乙酸乙酯、正己烷,易溶于乙醇,稍难溶于丙三醇。

紫外光可以使辣椒红素褪色,但辣椒红素对热稳定,160℃加热两小时几乎不褪色,Fe3+、Cu2+可使之褪色。

pH对色素色度无影响。

辣椒红素一、实验目的:本实验为自主设计实验,要求学生几人一些小组,自己查阅文献、制定实验方案、在教师指导下讨论通过后进行实验。

通过对辣椒红色素的提取、分离及测定,初步了解和掌握食品中某些成分的提取技术、分离技术以及测定方法,从而对食品有效成分的分析有比较系统的认识,为能灵活运用食品化学的研究方法打下良好的基础。

本次实验还拟通过这种方式,使同学们了解一个研究性试验的基本过程,从而提高对科学研究的兴趣,为今后创新性实验的开发奠定一定的能力基础,同时也在于培养大家团队协作的团队精神。

二、实验原理辣椒红色素为脂溶性色素,选用适当的方法提取后,可采用不同的分离技术对色素进行分离。

三、实验材料与设备1.材料:干红辣椒2.试剂:石油醚、丙酮、乙酸乙酯、乙醇、氯仿、甲醇、柱层析用硅胶、薄层层析用硅胶、0.5%羧甲基纤维素钠等。

3.设备:粉碎机、超声波清洗机、旋转蒸发仪、薄层层析板、柱层析、层析缸等。

四、实验步骤1.色素的提取:称取1-2g 干红辣椒,掰开去籽,放入粉碎机中粉碎。

将粉碎好的粉末倒入一干燥洁净的三角瓶,加入50-100ml 丙酮,用保鲜膜封口,并在保鲜膜上扎几个眼儿。

将三角瓶放入超声清洗机20-30min ,过滤后放入旋蒸瓶内旋蒸,直至完全蒸干。

向内壁附着有辣椒红色素的旋蒸瓶内加入3-4ml 左右的石油醚,轻摇将辣椒红色素溶解在石油醚中,最后把石油醚倒入小试管,密封好放入冰箱保存。

从红辣椒中提取红色素实验报告

从红辣椒中提取红色素实验报告

从红辣椒中提取红色素实验报告红辣椒是我国一种常见的调味品,也是一种常用的蔬菜。

它不仅可以为菜肴增添辣味,还富含丰富的维生素C和胡萝卜素等营养物质。

而红辣椒的红色素正是由胡萝卜素组成的。

本实验旨在通过提取红辣椒中的红色素,了解胡萝卜素的提取方法及其特性。

实验步骤:1. 实验前准备:a. 准备红辣椒、酒精、石油醚、无水硫酸钠、滤纸等实验器材。

b. 红辣椒切成细碎的颗粒,使得红辣椒中的红色素更容易提取出来。

2. 提取红色素:a. 将切碎的红辣椒放入一个容器中。

b. 加入足够的酒精,使红辣椒完全浸泡在酒精中。

c. 用玻璃棒轻轻搅拌,促使红色素与酒精充分混合。

d. 将混合液静置一段时间,待红色素充分溶解在酒精中。

e. 使用滤纸等过滤器将混合液过滤,使得提取出的红色素分离出来。

3. 分离红色素:a. 将过滤后的提取液倒入一个蒸发皿中。

b. 加入少量的石油醚。

c. 用玻璃棒轻轻搅拌,使石油醚与酒精中的红色素充分混合。

d. 将蒸发皿放置在通风处,使石油醚缓慢蒸发。

e. 待石油醚完全蒸发后,可以观察到蒸发皿中残留的红色素。

实验结果:通过本次实验,我们成功地从红辣椒中提取到了红色素。

红色素在酒精中溶解度较高,但在石油醚中溶解度较低,因此通过加入石油醚并蒸发石油醚,我们成功地将红色素分离出来。

实验探究:胡萝卜素是一种植物可溶性黄色颜料,具有很强的抗氧化作用。

在红辣椒中,胡萝卜素的含量较高,因此红辣椒呈现出鲜艳的红色。

胡萝卜素的提取方法有很多种,本实验采用了酒精提取法。

酒精具有较好的溶解性,能够有效地溶解红辣椒中的胡萝卜素。

而石油醚则是一种较好的分离剂,通过蒸发石油醚,可以将红色素分离出来。

这种方法简单易行,且提取效果较好。

总结:通过本次实验,我们成功地从红辣椒中提取到了红色素。

胡萝卜素是红辣椒中的主要成分之一,具有丰富的营养价值和抗氧化作用。

了解红辣椒中红色素的提取方法和特性,有助于我们更好地利用红辣椒的营养价值,并在日常生活中合理饮食。

辣椒红色素的分离提取及测定

辣椒红色素的分离提取及测定

辣椒红色素的分离提取及测定辣椒红素综述辣椒辣椒红色素又名辣红素,是从辣椒中提取的一种天然色素,属于叶黄素类共轭多烯烃含氧衍生物,主要成分为辣椒红素、辣椒玉红素、玉米黄质一胡萝卜素、隐辣质等,辣椒红色素作为从成熟辣椒果皮中提取的天然红色素的主要成分,是目前国际上公认的最好的红色素。

我国早在“七五”期间就将辣椒红色素列为重点开发的4种天然色素之一。

理化性质:纯品为深红色液体,无辣味,其显色强度强于其他天然色素。

辣椒红色素不溶于水,易溶于乙醇、酮、油脂等有机溶剂,因其极性较强,在超临界二氧化碳中几乎不溶解。

具有如下稳定性:1.光对稳定性的影响在室内光线下,稳定性较好,放置4周,色素无褪色现象。

但如直接暴露在室外强光之下则很容易褪色。

2.温度对稳定性的影响温度对辣椒红色素有一定影响。

温度越高色素损失愈多,加热至70℃以上则损失更明显。

3. pH值对稳定性的影响辣椒红色素的耐酸、耐碱性好。

pH值在3—12之间时色泽稳定不变。

4.金属离子对稳定性的影响cu、Fe对辣椒红色素具有明显的破坏作用,Sn、A1+在浓度较高,即大于400 mg/kg时对红色素的色价有影响,而Fe3+、Na+、K+、M矿等对红色素的影响可以忽略。

提取方法比较:辣椒红素是从红辣椒果皮中得到的深红色天然红色素,色泽优良、性质稳定,广泛用于食品、化妆品、饲料等领域,另外还具有抗癌功能。

目前,辣椒红色素提取方法大致可归为油溶法、溶剂提取法、超临界CO2流体萃取法、超声波溶剂提取法、溶剂微波提取法和酶法提取六类。

国内外辣椒红色素的提取方法主要有油溶法、有机溶剂法和超临界CO 流体萃取法三种。

油溶法因油与色素难分离不易得到纯净的辣椒红色素,所以该种方法现已基本停止使用;溶剂法使用较普遍,通常用丙酮、乙醇、正己烷等有机溶剂浸提。

超临界CO2流体萃取法是一种新型的分离技术,工艺简单、能耗低、萃取溶剂无毒、易回收、所得产品具有非常高的纯度。

提取目的及社会需求:辣椒红色素在国内外市场需求量很大。

辣椒红色素的提取

辣椒红色素的提取

辣椒红色素的提取简介辣椒红色素是一种常见的天然染料,广泛用于食品、药品和化妆品等行业。

它具有良好的色泽和稳定性,在提高产品的色彩吸引力的同时,也有助于增强产品的市场竞争力。

本文将介绍辣椒红色素的提取工艺及相应的注意事项。

提取工艺材料准备•新鲜辣椒:选择红色辣椒,质地饱满且颜色鲜艳的辣椒。

•食用酒精:具备良好的溶解性能和安全性。

步骤1.辣椒的准备:将新鲜辣椒洗净,去除蒂头和籽,然后切成小块备用。

2.辣椒的浸泡:将辣椒块放入一个干净的容器中,倒入足够的食用酒精,使辣椒完全浸泡在酒精中。

3.辣椒的搅拌:用搅拌器将辣椒和酒精充分混合,以促进红色素的溶解和提取。

4.辣椒的静置:将混合液置于室温下静置一段时间(通常为24小时),以便红色素完全溶解。

5.液体的过滤:用滤纸或滤网过滤辣椒混合液,去除辣椒渣。

6.提取液的浓缩:将过滤后的液体放入一个瓶中,通过蒸发酒精的方法进行浓缩,直至获得辣椒红色素。

注意事项1.安全措施:在操作过程中要注意酒精的挥发性和易燃性,避免与明火和高温源接触,并确保通风良好的操作环境。

2.辣椒的处理:在选择辣椒时,要确保其品质良好,没有腐烂和变质的迹象。

3.时间控制:静置时间和浓缩时间的控制很关键,过久可能会影响提取效果,过短可能无法充分提取红色素。

4.存储条件:提取的辣椒红色素应存放在干燥、阴凉和避光的环境中,以保持其色泽和稳定性。

结论辣椒红色素的提取是一种简单而有效的工艺方法,可以通过酒精溶解和浓缩来获得纯净的红色素。

在实际操作中,我们需要注意安全、材料的选择和时间的控制,以确保提取的效果和质量。

这种天然染料的应用范围广泛,对于食品、药品和化妆品等行业来说是一种重要的资源。

相信通过本文的介绍,读者能够更好地理解辣椒红色素的提取过程和注意事项。

实验四-辣椒红色素的提取与分离

实验四-辣椒红色素的提取与分离

实验四:辣椒红色素的提取与分离专业:生物工程班级:学号:姓名:指导教师:设计时间:实验项目:辣椒红色素的提取与分离实验原料:干辣椒若干实验仪器:水浴锅(80℃),干粉搅拌器,索式提取器,旋转蒸发仪,层析柱试剂:丙酮(石油醚95%乙醇)硅胶环己烷70%乙醇等耗材及辅助器材:滤纸脱脂棉试管若干圆底烧瓶一个玻璃棒1 支漏斗等。

参考文献:[1]谭天伟. 生物分离技术.北京:化学工业出版社.,2007.7[2]蒋本国,王艳颖,李春斌,刘秋.生物化学实验.大连民族学院。

2010.7[3]刘宝全. 生化分离工程实验讲义(内部试用版).大连民族学院生命科学院.2011.6[4] 刘国诠,生物工程下游技术,北京:化学工业出版社,2003。

[5] 陈来同,生物化学产品制备技术,北京:科学技术文献出版社,2004。

qtw-1操作步骤:操作说明及结果记录:取红辣椒干粉10g↓用95%乙醇300mL,80℃索式提取4h(或用其他溶剂如环已烷提取)↓浸提液减压蒸馏(40℃)↓浓缩液用少量环己烷溶解待用↓取8mL 硅胶和20ml 环己烷混匀装柱↓将浓缩液上样↙↓洗脱液1 环己烷↙↓洗脱液2 环己烷/丙酮(10:1)分部1 分部2 色素↓纸层析点样,跑样紫外光下观测qtw-2实验结果:1、取红辣椒干粉质量m=5.446g索氏提取数据记录表回流次数 1 2 3 4 5 时间9:18 9:39 9:55 10:13 10:28 颜色深橘红色深橘红色桔黄色桔黄色淡黄色(注:开始加热时间为8:05 ,结束时间为:10:28 ,历时2小时23分,水浴温度:99℃)2、索氏提取浸提液的理化特征:(1)第一、第二次回流液为深橘红色3(2)第三、第四次回流液为深桔黄色4(4)第五次回流后,粗体液呈深橘红色,清澈透明,颜色鲜艳,似干红颜色。

3、总的浸提液经旋转蒸发提纯后,梨形瓶内壁上附有一层粘稠的油状液体体,光亮透明。

闻上去有清香的辣椒味道。

5产品(注:开始旋转蒸发的时间为:10:56 ,结束时间为:11:10 ,历时14分钟)4、称重:空瓶质量:209.16 g 空瓶加产物质量:210.26 g最终产物质量= 210.26 g —209.16 g = 1.1 g%20.20%100446.51.1%100=⨯=⨯=原料样品质量最终产物质量产品的率5、样品的柱层析(1)柱层析所用样品的体积:0.3ml(2)样品经层析柱分离后产生三个色带,从上到下分别是:橙黄色 深红色 黄色,(3)其中黄色色带最长然后是橙黄色,最后为深红色。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

实验七辣椒红色素的分离提取辣椒红色素(水溶、油溶) 是以辣椒为原料,采用科学方法提取、分离、精制而成的天然色素。

主要成份为辣椒红素和辣椒玉红素(辣椒红素的分子式为C40H56O3,辣椒玉红素分子式为C40H56O4)为深红色油溶性液体,色泽鲜艳,着色力强,耐光、热、酸、碱,且不受金属离子影响;溶于油脂和乙醇,亦可经特殊加工制成水溶性或水分散性色素。

该产品富含β—胡萝卜素和维生素C,具保健功能。

广泛应用于水产品、肉类、糕点、色拉、罐头、饮料等各类食品和医药的着色。

没有辣味、色泽鲜艳、性能稳定,耐热性、抗光性良好,不受PH值变化的影响,对油脂产品染色力强。

本产品经反复除味、精制,虽有轻微的异味,添加在产品中,没有任何味道。

实验主要分为超声提取辣椒红素、柱层析提取辣椒红素、薄层层析提取辣椒红素三个板块。

超声提取辣椒红色素一.实验原理:1.辣椒红色素是从茄科植物红辣椒中提取出的天然色素。

因其色调鲜艳、安全可靠并具有药理作用, 不仅被认为是一种理想的天然食品着色剂,而且被广泛应用于制药行业, 。

但是辣椒粉是片状凹凸不平的纤维组织结构, 色素及其它脂溶性成分存在于纤维组织之内,, 采用传统的有机溶剂提取法需要耗费大量有机溶剂和时间才能提取完全。

超声提取过程产生强烈的振动,搅拌, 与传统提取方式比较具有收率高、生产周期短、无需加加热。

2.旋转蒸发仪的工作原理:通过电子控制,使烧瓶在最适合速度下,恒速旋转以增大蒸发面积。

通过真空泵使蒸发烧瓶处于负压状态。

蒸发烧瓶在旋转同时置于水浴锅中恒温加热,瓶内溶液在负压下在旋转烧瓶内进行加热扩散蒸发。

二.实验仪器与材料:材料:干红辣椒;仪器:粉碎机,超声波清洗器,旋蒸仪,冰箱,锥形瓶,小试管,漏斗,封口膜,滤纸,试管夹,量筒,电子天平;试剂:石油醚,丙酮。

三.实验步骤:干红辣椒(去籽)→粉碎→辣椒粉1至2克→150ml锥形瓶中→70ml丙酮→封口→戳几个小眼→试管夹夹住→超声20min→过滤→旋蒸→茄形瓶中加3至4ml石油醚→标记→冰箱储存;四.实验说明:1.丙酮容易挥发且有毒害,实验中注意避免吸入过多;2.超声提取中应保证锥形瓶直立,切勿斜倒让水流入;3.加入石油醚在茄形瓶后来回震荡,尽量溶解附着在壁上的辣椒红素;4.旋蒸的作用就是蒸去溶剂,比一般的方法效率高。

原理:一是靠减压;二是靠旋转时,使溶液形成液膜,扩大蒸发面。

5.操作旋蒸仪中注意:(1)安装接口部分要加少量矾士林,避免抽真空的时候,接口部分漏气真空度上不去。

(2)在盛装样品的茄型瓶顺利与旋蒸仪端口连接好后,应先开动旋转按钮检查一下旋转是否灵活,更重要是的看旋蒸样品是否全部或大部分浸没于水浴锅的液面内,这样才能保证旋蒸效率。

(3)在茄型瓶中盛装的样品最多不要超过75%,否则在减压时会出现倒吸。

(4)减压过程中要调整好水浴锅内水的温度,使其与你所旋蒸的样品的沸点相适应,这可以从回流管的回流液状态看出,当回流液呈滴状而非呈水流时最佳。

(5)在旋蒸接近结束时,应先打开通气阀门,使旋蒸仪内外气压一致,然后关闭旋转开关,取下茄型瓶。

柱层析分离辣椒红色素一.实验原理:在吸附柱色谱中,吸附剂是固定相,洗脱剂是流动相,相当于薄层色谱中的展开剂。

吸附剂的基本原理与吸附薄层色谱相同,也是基于各组分与吸附剂间存在的吸附强弱差异,通过使之在柱色谱上反复迸行吸附、解吸、再吸附、再解吸的过程而完成的。

所不同的是,在进行柱色谱的过程中,混合样品一般是加在色谱柱的顶端,流动相从色谱柱顶端流经色谱柱,并不断地从柱中流出。

由于混合样中的各组分与吸附剂的吸附作用强弱不同,因此各组分随流动相在柱中的移动速度也不同,最终导致各组分按顺序从色谱柱中流出。

如果分步接收流出的洗脱液,便可达到混合物分离的目的。

一般与吸附剂作用较弱的成分先流出,与吸附作用较强的成分后流出。

二.实验仪器与材料:器材:色谱柱,滤纸片,剪刀,烧杯,小试管,量筒;试剂:柱层析硅胶,石油醚,丙酮;三.实验步骤:1.装柱:柱层析硅胶→一次加入色谱柱→振动管壁使其均匀下沉→表面敲平→滤纸片盖住表面→沿管壁缓缓加入洗脱剂石油醚→旋开活塞使洗脱剂缓缓滴出→缓缓加入石油醚→使其均匀润湿下沉在管内形成松紧适度的吸附层(应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面)。

2.样品加入:下口流出石油醚上口有石油醚→0.5~1ml样品;3.洗脱:上口即将干时→石油醚冲洗→石油醚:丙酮=10:1的洗脱剂→收集辣椒红色素;四.实验现象:结论:采用柱层析分离技术,选用吸附剂和混合洗脱液将辣椒色素中红、橙、黄色素进一步分离。

橙色的类胡萝卜素最先流下,其次是辣椒红色素,最后是黄色的辣素。

渐渐分离过程中不再是一个平面地同步分离,且辣椒红色素逐渐位于了最下端。

五.实验说明:1.色谱法按固定的状态可分为柱色谱、平板色谱和棒色谱三种而实验室中最常用的是柱层析和薄层层析,以及它们之间的配合应用。

2.除了干法装柱外,还有湿法装柱:将吸附剂与洗脱剂混合,搅拌除去空气泡,徐徐倾入色谱柱中,然后加入洗脱剂将附着管壁的吸附剂洗下,使色谱柱面平整。

等到填装吸附剂所用洗脱剂从色谱柱自然流下,液面和柱表面相平时,即加供试品液。

3.吸附剂,一般应满足下列几个基本要求:对样品组分和洗脱剂都不会发生任何化学反应,在洗脱剂中也不会溶解;颗粒形状均匀,大小适当,以保证洗脱剂能够以一定的流速 (一般为1.5 mL·min-1)通过色谱柱;材料易得,价格便宜而且是无色的,以便于观察。

可用于吸附剂的物质有氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙 (镁)、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。

4.样品在色谱柱中的移动速度和分离效果取决于吸附剂对样品各组分的吸附能力大小和洗脱剂对各组分的解吸能力大小,因此,吸附剂的选择和洗脱剂的选择常常是结合起来进行的:首先,根据待分离物质的分子结构和性质,结合各种吸附剂的特性,初步选择一种吸附剂。

然后根据吸附剂和待分离物质之间的吸附力大小,选择出认为适宜的洗脱剂。

最后,采用薄层色谱法进行试验。

根据试验结果,再进一步决定是调节吸附剂的活性,还是更换吸附剂的种类,或是改变洗脱剂的极性。

直到确定出合适的吸附剂和洗脱剂为止。

物质与吸附剂之间的吸附能力大小既与吸附剂的活性有关,又与物质的分子极性有关。

分子极性越强,吸附能力越大,分子中所含极性基团越多,极性基团越大,其吸附能力也就越强。

具有下列极性基团的化合物,其吸附能力按下列次序递增:-Cl,-Br,-I<-C=C-<-OCH3<-CO2R<-CO-<-CHO<-SH<-NH2<-OH<-COOH薄层层析分离辣椒红色素一.实验原理:薄层色谱是一种微量、快速和简便的色谱方法。

薄层色谱可适用小量样品(几到几十微克甚至0.01μg )的分离:也可用于多达500mg 样品的分离,是近代有机化学中用于定性,定量的一种重要手段。

特别适用于那些挥发性小的化合物,以及在高温下易发生化学变化而不能用气相色谱分析的物质。

薄层色谱常用TLC 表示,又称薄层层析,属于固-液吸附色谱。

样品在薄层板上的吸附剂(固定相)和溶剂(移动相)之间进行分离。

由于各种化合物的吸附能力各不相同,在展开剂上移时,它们进行不同程度的解吸,从而达到分离的目的。

由于小试管里提取的不是单一色素,包括辣椒红素、类胡萝卜素、辣素等。

各色素的极性不同,吸附能力不相同,在展开剂上移动,进行不同程度的解析,根据原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离,计算比移值(Rf );化合物的吸附能力与它们的极性成正比,具有较大极性的化合物吸附较强,因此Rf 值较小。

在给定的条件下(吸附剂、展开剂、板层厚度等),化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的,即Rf 值是化合物的物理常数,其大小只与化合物本身的结构有关,因此可以根据Rf 值鉴别化合物。

二.实验仪器与材料:器材:烘箱,干燥器,研钵,电子天平,量筒,载玻片,毛细管,广口瓶,胶头滴管,铅笔,尺子;试剂:羧甲基纤维素钠,石油醚,丙酮,乙醇,薄层层析硅胶;三.实验步骤:1. 铺板:10克薄层层析硅胶于研钵→35ml 羧甲基纤维素钠→调成均匀糊状→涂在载玻片上→上下轻微颠动→制成薄厚均匀、表面光洁平整的薄层板→室温放置0.5h →烘箱→缓慢升温至110℃(恒温0.5h )→取出冷却→干燥器;2. 点样:距一端5mm 处轻轻划一横线作为起始线→毛细管吸取样品→在起始线上小心点样;3. 展开:广口瓶内依次加入少量石油醚:丙酮(20:1,10:1,100:1)和石油醚:乙醇(10:1)的展开剂→点好试样的薄层板放入(点样的位置必须在展开剂液面之上) →展开剂上升到薄层的前沿或多组分已明显分开→取出薄层板放平→用铅笔划溶剂前沿的位置;4. 计算Rf 值:准确地找出原点,溶剂前沿以及样品展开后斑点的中心,分别测量溶剂前沿和样点在薄层板上移动的距离,求出其Rf 值。

距离溶剂前沿至原点中心的点中心的距离溶质最高浓度中心至原f R四.实验现象:A.柱层析分离后的辣椒红色素石油醚:丙酮=100:1 20:1 10:1 石油醚:乙醇=10:1 所以,辣椒红色素的Rf=2.3/6.4=0.36 类胡萝卜素的Rf=2.5/6.4=0.39 辣素的Rf=5.5/6.4=0.86B.未经柱层析分离后的辣椒红色素石油醚:乙醇=10:1 石油醚:丙酮=10:1结论:通过柱层析分离后所得的色素明显种类少了,于是在薄层层析中能分离出的色素带少了;从这四种展开剂的效果看,石油醚:丙酮=10:1的展开剂效果最好。

五、实验说明:1.实验注意事项:(1)研磨要细、调和均匀,铺板要注意避免气泡、厚薄均匀;(2)硅胶和羧甲基纤维素钠的比例要合适:2.5-4.5最佳.根据自己点样的粘稠度调节;(3)铺板时手要平稳,否则容易不均匀。

室内温度不能太潮湿;(4)活化不充分的话板易裂且斑点无法分开;(5)如需重复点样,则应待前次点样的溶剂挥发后方可重点,以防样点过大,造成拖尾、扩散等现象,影响分离效果;(6)若在同一块板上点几个样,样品点间距离为5mm以上。

点样时几个样点要在一条直线上,大小要合适(斑点直径一般不超过2mm);(7)薄层板侵入展开剂不能超过点样线,否则样品不在薄板上分离而直接溶入展开剂;(8)点样结束待样点干燥后,方可进行展开。

点样要轻,不可刺破薄层。

2. 在条件完全一致的情况,纯碎的化合物在薄层色谱中呈现一定的移动距离,称Rf值,所以利用薄层色谱法可以鉴定化合物的纯度或确定两种性质相似的化合物是否为同一物质。

但影响比移值的因素很多,如薄层的厚度,吸附剂颗粒的大小,酸碱性,活性等级,外界温度和展开剂纯度、组成、挥发性等。

所以,要获得重现的比移值就比较困难。

相关文档
最新文档