氨基糖苷类抗生素有关物质检查中的几个问题
氨基糖苷类抗生素有关物质检查中的几个问题
审评三部 冯杰 张哲峰
摘要：本文简要介绍了氨基糖苷类抗生素有关物质检查中杂质种类、检测方法比较以及限度确定等方面的几个问题，并例举了技术审评中遇到的几个问题，并对此进行了简要讨论。
关键词：氨基糖苷类抗生素 有关物质 检测方法
氨基糖苷类（aminoglycosides）抗生素是一类抗需氧革兰氏阴性杆菌,假单胞菌属,结核杆菌属和葡萄球菌的抗生素。此类抗生素的共同特点是由氨基环醇与氨基糖通过氧桥连接成苷类抗生素。氨基糖苷类抗生素都是无色、溶于水，含多羟基、多氨基的化合物。因含有氨基或其他碱性基团，故显碱性，可与无机酸和有机酸形成结晶性的盐，具有亲水性。该类抗生素分子量较小，均在300-800之间。大部分是含水的无定形物，无特征性熔点，无紫外和红外的特征吸收峰。游离碱具有不同程度地吸收二氧化碳的能力。
根据氨基糖苷类抗生素的抗菌特性及结构特点，此类抗生素可分为三个发展阶段。以卡那霉素为代表的第一代氨基糖苷类抗生素，其结构特点是完全羟基化的氨基糖与氨基环醇相结合，不抗绿脓杆菌；第二代以庆大霉素为代表，其结构中均含有脱氧氨基糖并具有抗绿脓杆菌的特点；第三代则是氨基环醇上氮位取代衍生物,品种有阿米卡星、阿司米星和我国创新的一类新药依替米星等，其特点是保留了母体的抗菌活性，耳肾毒性小，抗耐药性等。根据氨基糖数目分为假三糖类和假二糖类，氨基含量越多，抗菌能力越强。（见表1）。
表1 氨基糖苷类抗生素的分类
产生菌 化学 第1 代 第2 代 第3 代
链霉菌
小单孢菌
假三糖类:链霉素类
假三糖类:新霉素类
假三糖类:卡那霉素类
假三糖类:庆大霉素类
假三糖类: 西索米星类
假二糖类:阿司米星类 链霉素
新霉素
巴龙霉素
核糖霉素
卡那霉素
妥布霉素
地贝卡星
庆大霉素
小诺米星
西索米星
阿米卡星
阿贝卡星
异帕米星
依替米星
奈替米星
阿司米星 达地米星
1、氨基糖苷类抗生素中的有关物质及其检测方法
有关物质检查是本类抗生素质量控制的重要项目之一，同氨基糖苷类药物一样，其杂质最可能的毒副作用多为耳毒性，而这方面缺乏动物毒性试验模型，在药理毒理研究中难以发现，因此标准控制更为重要，各国药典均对其有关物质严加控制，表2、表3、表4对比三个氨基糖苷类抗生素有关物质CP2005、BP2004、EP5、USP27、JP14的检验方法、限度要求和主要杂质及其结构。
表2 各国药典对硫酸阿米卡星有关物质控制情况
CP2005 BP2004 EP5
USP27 JP14
剂型 原料药
注射剂 原料药 原料药 原料药
注射剂 原料药
检查方法 TLC HPLC法
（柱后衍生） HPLC法
（柱后衍生） 无有关物质检查项 TLC
限度 限度2.0％ 杂质A不得过1.0%；单个杂质峰（除杂质A）不得过0.5%；杂质峰之和不得过1.5% 杂质A不得过1.0%；单个杂质峰（除杂质A）不得过0.5%；杂质峰之和不得过1.5% 限度1.0％
主要杂质 杂质A 杂质A、B、C、D 杂质A、B、C、D
硫酸阿米卡星的主要杂质结构
杂质A： R1 = R3 = H, R2 = acyl，化学名称：4-O-(3-氨基-3-脱氧-a-D-葡吡喃糖基)-6-O-(6-氨基-6-脱氧-a-D-葡吡喃糖基)- 1-N-[(2S)-4-氨基-2-羟基丁酰基]-2-脱氧-L-链霉胺
杂质B： R1 = R2 = acyl, R3 = H，化学名称：4-O-(3-氨基-3-脱氧-a-D-葡吡喃糖基)-6-O-(6-氨基-6-脱氧-a-D-葡吡喃糖基)-1,3-N-双[(2S)-4-氨基-2-羟基丁酰基]-2-2-脱氧-L-链霉胺
杂质C： R1 = R2 = H, R3 = acyl R1 = R2 = H, R3 = acyl，化学名称：4-O-(6-氨基-6-脱氧-a-D-葡吡喃糖基)-6-O-[3-[[(2S)-4-氨基-2-羟基丁酰基]氨基]-3-脱氧-a-D-葡吡喃糖基]-2-脱氧-D-链霉胺
杂质D： R1 = R2 = R3 = H: 卡那霉素.
表3 各国药典对硫酸西索米星有关物质控制情况
CP2005 BP2004 EP5 USP27 JP14
剂型 原料药
注射剂 未收载 未收载 原料药
注射剂 原料药
检查方法 无有关物质检查项 无有关物质检查项 TLC
限度 限度6.0％
主要杂质
表4 各国药典对硫酸奈替米星有关物质控制情况
CP2005 BP2004 EP5 USP27 JP14
剂型 原料药
注射剂（无有关物质检查项） 原料药 原料药 原料药
注射剂 原料药
检查方法 TLC HPLC（电化学检测器） HPLC法
（柱后衍生） 无有关物质检查项 TLC
限度 最大不得过2.0%，其余不得过1.0% 杂质A不得过1.0%；杂质B不得过1.0%；单个杂质峰（除杂质A）不得过1.0%；杂质峰之和不得过2.0% 杂质A不得过1.0%；单个杂质峰（除杂质A）不得过0.5%；杂质峰之和不得过1.5% 限度6.0％
主要杂质 杂质A、B 、C、D 杂质A、B、C、D
硫酸奈替米星的主要杂质结构：
杂质A： R1 = R2 = R3 = H。化学名称：2-脱氧-4-O-[3-脱氧-4-C-甲基-3-(甲氨基)-b-L-阿拉伯糖吡喃糖基-6-O-(2,6-二氨基-2,3,4,6-四脱氧-a-D-甘油基--4-烯己吡喃糖基)-L-链霉胺
杂质C：R1 = R3 = C2H5, R2 = H。化学名称：4-O-[6-氨基-2,3,4,6-四脱氧-2-(乙氨基)-a-D-甘油基--4-烯己吡喃糖基]-2-脱氧-6-O-[3-脱氧-4-C-甲基-3-(甲氨基)-b-L-阿拉伯糖吡喃糖基]-1-N-乙基-D-链霉胺(2¢-N-乙基奈替米星)
杂质D： R1 = H, R2 = R3 = C2H5。化学名称：4-O-[2-氨基-2,3,4,6-四脱氧-6-(乙氨基)-a-D-甘油基--4-烯己吡喃糖基]-2-脱氧-6-O-[3-脱氧-4-C-甲基-3-(甲氨基)-b-L-阿拉伯糖吡喃糖基]-1-N-乙基-D-链霉胺(6¢-N-乙基奈替米星)
杂质B： 2-脱氧-6-O-[3-脱氧-4-C-甲基-3-(甲氨基)-b-L-阿拉伯糖吡喃糖基]-1-N-乙基-D-链霉胺(1-N-乙基加纳糖胺).
2、技术审评中的几个问题
（1）未建立有关物质检查或检查方法的分离效果、灵敏度欠佳。在审评中发现氨基糖苷类抗生素注射剂有关物质检查较多采用TLC法，《中国药典》2005年版收载的l2种氨基糖苷类抗生素中有8种采用薄层色谱鉴别方法。TLC法的灵敏度尚不能满足对注射剂质量控制的要求，并对杂质尚不能有效分离，尤其大容量注射液，主药浓度低，可能难以有效检出其中的杂质，有时氯化钠还会造成斑点拖尾，因此其可行性值得考虑。氨基糖苷类抗生素无特征紫外吸收，不能直接采用传统HPLC(紫外)分析，也有用衍生化技术进行分析，但由于衍生化方法实验结果影响因素多，无法判断该法检测到的杂质来源，而且衍生方法操作繁锁，反应复杂，时间长都会影响测定结果的准确性。
（2）在灭菌工艺条件筛选的评价指标中未列入有关物质检查或检查方法不能量化表达灭菌前后的有关物质变化情况。目前，对于部分氨基糖苷类抗生素的热稳定性尚不明确，评价指标中有关物质项有采用TLC法的，评价结论为未检出杂质或杂质斑点颜色未明显加深，加之TLC分离效能不足，且仅能考察单个杂质而不能控制杂质总量，特别是对含量较小的杂质无法检出，对于灭菌前后杂质的种类变化情况和杂质的量的变化不能准确表达，造成对灭菌工艺可行性评价缺乏客观、准确的数据支持，为药品安全性埋下了隐患。
（3）对已知杂质研究不全面。在采用HPLC法（柱后衍生）或HPLC-ELSD法进行有关物质方法学研究时，对于已知的杂质未进行杂质种类研究，现BP等已明确了部分氨基糖苷类抗生素的杂质结构和色谱行为，申报资料中大多未进行对比研究，造成药品质量内在信息不能清晰、明确显示。
3、几点建议
（1）鉴于氨基糖甙类抗生素无特征紫外吸收，建议申请人采用HPLC-ELSD法。已有文献报道该方法测定硫酸阿米卡星及其有关物质，ELSD检测器为质量型检测器，它不依赖于样品的光学特征，能准确检测到不含发色团的化合物，ELSD的响应值与质量成正比，因此能用于测定硫酸阿米卡星的含量及有关物质。研究中需进行检测方法的验证，专属性验证除进行强制降解试验外，还需进行已知杂质的加入试验，并对其分离度等做出明确要求。 （2）灭菌工艺筛选考察指标，灭菌条件筛选中需考察有关物质的变化情况，以全面考察工艺的可行性。有关物质的检查方法建议采用HPLC-ELSD法，并进行相应方法学研究，以科学评价灭菌前后有关物质的变化情况，如有较大杂质产生，应研究该杂质的结构和毒性，以确保在灭菌保障的同时产品质量未发生改变。
氨基糖苷类的药物的萃取实验报告
氨基糖苷类的药物的萃取实验报告
氨基糖苷类药物是一类广泛应用于临床的抗生素药物，包括庆大霉素、阿米卡星等。由于其特殊的化学结构和生物活性，研究氨基糖苷类药物在药物提取过程中的方法和条件对于合理利用这类药物具有重要的意义。本实验通过对氨基糖苷类药物的萃取实验，探讨其在不同条件下的提取率以及提取效果。
首先，本实验选择了庆大霉素作为代表性的氨基糖苷类药物进行提取实验。实验所需的试剂和仪器设备有：氨基糖苷类药物庆大霉素、苯酚/氯仿（V/V=1:1）、甲醇、钠乙酸、氨水、取代甲苯（Triton X-100）、旋光仪等。
首先，取一定量的庆大霉素样品，粉碎并称取精确的质量。然后，将粉碎后的样品加入苯酚/氯仿混合溶剂中，在常温条件下搅拌浸泡。接下来，使用漏斗分离上清液和沉淀物，并将上清液转移到干净的容器中。利用旋光仪测定庆大霉素提取液的旋光度，并记录下来。
通过逐渐改变提取液的条件，对庆大霉素的提取率和提取效果进行比较。首先，我们尝试了不同的溶剂系统，包括苯酚/氯仿、甲醇、氨水等，比较它们对庆大霉素的提取效果。结果显示，苯酚/氯仿溶剂系统的提取效果最好，庆大霉素的提取率最高。
此外，我们也尝试了改变提取液的pH值对提取效果的影响。通过加入一定量的钠乙酸或氨水来调节提取液的pH值，并比较不同pH值下的庆大霉素提取效果。实验结果显示，在pH=4-6的范围内，庆大霉素的提取效果最好，提取率最高。 最后，我们通过添加一定量的取代甲苯（Triton X-100）来研究提取液中添加表面活性剂对提取效果的影响。结果显示，添加Triton X-100后，庆大霉素的提取效果明显改善，提取率也有所增加。
综上所述，通过对庆大霉素的萃取实验，我们发现苯酚/氯仿溶剂系统下，在pH=4-6范围内，并添加适量的Triton X-100，可以获得较好的庆大霉素提取效果和较高的提取率。本实验结果为氨基糖苷类药物的药物提取方法提供了参考，并对进一步研究和应用这类药物具有重要的意义。
氨基糖苷类抗生素练习试卷1(题后含答案及解析)
氨基糖苷类抗生素练习试卷1 (题后含答案及解析)
题型有：1. A1型题
1． 多黏菌素的抗菌谱包括：
A．立克次体和衣原体
B．革兰阳性及革兰阴性菌
C．结核杆菌
D．革兰阳性菌特别是耐药金黄色葡萄球菌E．革兰阴性杆菌特别是绿脓杆菌
正确答案：E 涉及知识点：氨基糖苷类抗生素
2． 关于阿卡米星的错误叙述项是：
A．用于对其他氨基糖苷类耐药菌株的感染
B．可被乙酰转移酶所钝化而耐药
C．是氨基糖苷类中抗菌谱较窄的抗生素
D．对肠道革兰阴性菌产生的钝化酶稳定E．是卡那霉素的半合成衍生物
正确答案：C 涉及知识点：氨基糖苷类抗生素
3． 下列氨基糖苷类抗生素中，耳肾毒性较高的是：
A．卡那霉素
B．庆大霉素
C．链霉素
D．阿米卡星E．西索米星
正确答案：A 涉及知识点：氨基糖苷类抗生素
4． 对庆大霉素的评价，哪点是不正确的：
A．对铜绿假单胞菌感染无效
B．对G-杆菌作用强大
C．长期使用可能引起耳毒性
D．口服吸收少E．主要以原形从肾脏排泄
正确答案：A 涉及知识点：氨基糖苷类抗生素
5． 氨基糖苷类抗生素中，耳肾毒性较低的是：
A．西索米星
B．阿米卡星
C．奈替米星
D．庆大霉素E．妥布霉素
正确答案：C 涉及知识点：氨基糖苷类抗生素
6． 有关西索米星的叙述错误的为：
A．抗绿脓杆菌作用较庆大霉素强2倍
B．对金葡菌作用近似庆大霉素
C．毒性比庆大霉素低2倍
D．抗菌谱和体内过程与庆大霉素相似E．对沙雷菌作用稍次于庆大霉素
正确答案：C
解析：本题考查西索米星的特点。西索米星对金葡菌作用近似庆大霉素，也较妥布霉素强，但毒性是庆大霉素的2倍，并非答案C中的所述”低2倍”。与庆大霉素相比，无显著优点，故临床应用不广。本题除C选项外均为西索米星的特点。 知识模块：氨基糖苷类抗生素
氨基糖苷类抗生素不良反应
氨基糖苷类抗生素不良反应
1.耳毒性
氨基糖苷类抗生素在耳蜗毛细胞中的主要积聚部位是线粒体和溶酶体。氨基糖苷类抗生素引起的细胞内氧自由基活动增强是毛细胞损害的重要因素之一，因此局部或者全身应用氧自由基清除剂可以保护耳蜗免受氨基糖苷类抗生素的损害。钙激活的蛋白酶在氨基糖苷类抗生素引起的毛细胞破坏过程中同样扮演了重要的角色，因此抑制钙激活蛋白酶的活性也能有效保护耳蜗毛细胞。急性氨基糖苷类抗生素耳中毒引起的毛细胞破坏大都死于细胞凋亡，其凋亡原因主要是因为线粒体被药物特异性结合并破坏后，其内部的细胞色素C被释放到细胞质中，因而刺激了Caspase－9并激发其下游的Caspase－3，从而导致毛细胞的程序化死亡。与此不同的是，慢性氨基糖苷类抗生素耳中毒引起的毛细胞破坏不仅包括细胞凋亡而且涉及细胞坏死。在氨基糖苷类抗生素引起的毛细胞坏死过程中，溶酶体的超载破裂最终造成毛细胞自溶性坏死是其典型特征。氨基糖苷类抗生素对螺旋神经节没有直接的毒性作用，但是在耳蜗毛细胞被破坏之后，螺旋神经节往往由于缺乏神经营养因子而发生延迟性神经元死亡。
2.肾毒性
氨基糖苷类与肾组织亲和力极高，大量集聚在肾皮质和髓质，使大量溶酶体肿胀破裂、减少能量产生；与钙离子络合，干扰了钙调节转动过程，引起肾小管肿胀，甚至急性坏死。肾功能减退又使氨基糖苷类血药浓度升高，进一步导致肾功能损伤。服用氨基糖苷类抗生素的5%--15%患者几天内出现肾功能失调，但及早停药可以恢复。临床可见蛋白尿、管型尿、尿中红细胞，严重者发生氮质血症及无尿。老年人、肾功能不全者慎用，忌与有肾毒性药物合用。多数肾功能损害是可逆的，但此损害导致肾排泄减弱而增加耳毒性。
3.过敏反应
过敏反应:即通常所谓变态反应，是各类药物都会出现的不良反应。
氨基糖苷类抗生素过敏反应主要于给药方式，合理用药和药物过敏史有密切关系。主要表现为皮疹，发热，血管神经性水肿，口周发麻剥脱性皮炎等症状，个别严重者会引起过敏性休克。氨基糖苷类用药过程至用药完成20分钟内属于出现过敏反应的高危时段。
氨基糖苷类药物的不良反应及综合防治对策
氨基糖苷类药物的不良反应及综合防治对策
摘要 查阅多方资料文献， 并结合实际的工作情况， 分析和总结氨基糖苷类药物的常见不良反应发现， 氨基糖苷类药物的常见不良反应主要有肾毒性、耳毒性、神经肌肉阻滞以及过敏反应等。因氨基糖苷类药物具有疗效好、价格低廉的优点， 是目前临床上广泛使用的抗菌药物。但如果不按照用药规定进行合理用药的话就会出现各种不良反应， 因此， 临床上必须要掌握氨基糖苷类药物的适应证， 对血药浓度进行监测， 并实行个体化给药， 以减少不良反应的发生。
关键词 氨基糖苷类药物；不良反应；防治对策
氨基糖苷类药物作为一种常见的抗菌类药物， 其分子结构中含有一个氨基醇环和一个或多个氨基糖分子， 且有配糖基相连接， 主要的作用是杀死细菌。近年来， 随着抗生素的广泛使用， 耐药菌株已经成为一种较为常见的病原菌，
而氨基糖苷类抗生素对于耐药菌株比较敏感， 具有较强的抗菌活性， 且在治疗呼吸道感染等疾病中都有显著疗效。但是该类药物在应用过程中治疗浓度范围比较窄， 且容易出现不良反应， 因此临床上不能广泛使用。本文详细介绍了氨基糖苷类药物的不良反应以及综合防治对策， 以减少不良反应的发生。
1 氨基糖苷类药物的特点及分类
1. 1 氨基糖苷类药物的特点 特点为：①氨基糖苷类药物的抗菌谱比较广，
对于需氧革兰阴性杆菌、葡萄球菌等都有很强的抗菌活性， 但是对于厌氧菌等无效。②氨基糖苷类药物对于静止期的细菌杀菌完全， 是属于药物浓度依赖性抗生素， 目前已经成为医院内治疗危重感染、院内感染等一种常用药物。③氨基糖苷类药物对细菌的作用机制主要是将核糖核酸与核糖体结合， 从而抑制蛋白质的合成， 最终起到杀菌的作用。④氨基糖苷类药物大多是有机碱， 水溶性比较好， 内服治疗肠道细菌性感染有一定的疗效。该药的持续性比较强， 一般给药1次， 其毒性比较低， 可以防止蓄积中毒。⑤该类药物具有较大的肾毒性以及耳毒性。
氨基糖苷类抗生素有关物质检查中的几个问题
氨基糖苷类抗生素有关物质检查中的几个问题
审评三部 冯杰 张哲峰
摘要：本文简要介绍了氨基糖苷类抗生素有关物质检查中杂质种类、检测方法比较以及限度确定等方面的几个问题，并例举了技术审评中遇到的几个问题，并对此进行了简要讨论。
关键词：氨基糖苷类抗生素 有关物质 检测方法
氨基糖苷类（aminoglycosides）抗生素是一类抗需氧革兰氏阴性杆菌,假单胞菌属,结核杆菌属和葡萄球菌的抗生素。此类抗生素的共同特点是由氨基环醇与氨基糖通过氧桥连接成苷类抗生素。氨基糖苷类抗生素都是无色、溶于水，含多羟基、多氨基的化合物。因含有氨基或其他碱性基团，故显碱性，可与无机酸和有机酸形成结晶性的盐，具有亲水性。该类抗生素分子量较小，均在300-800之间。大部分是含水的无定形物，无特征性熔点，无紫外和红外的特征吸收峰。游离碱具有不同程度地吸收二氧化碳的能力。
根据氨基糖苷类抗生素的抗菌特性及结构特点，此类抗生素可分为三个发展阶段。以卡那霉素为代表的第一代氨基糖苷类抗生素，其结构特点是完全羟基化的氨基糖与氨基环醇相结合，不抗绿脓杆菌；第二代以庆大霉素为代表，其结构中均含有脱氧氨基糖并具有抗绿脓杆菌的特点；第三代则是氨基环醇上氮位取代衍生物,品种有阿米卡星、阿司米星和我国创新的一类新药依替米星等，其特点是保留了母体的抗菌活性，耳肾毒性小，抗耐药性等。根据氨基糖数目分为假三糖类和假二糖类，氨基含量越多，抗菌能力越强。（见表1）。
表1 氨基糖苷类抗生素的分类
产生菌 化学 第1 代 第2 代 第3 代
链霉菌
小单孢菌
假三糖类:链霉素类
假三糖类:新霉素类
假三糖类:卡那霉素类
假三糖类:庆大霉素类
假三糖类: 西索米星类
假二糖类:阿司米星类 链霉素
新霉素
巴龙霉素
核糖霉素
卡那霉素
妥布霉素
地贝卡星
庆大霉素
小诺米星
西索米星
阿米卡星
阿贝卡星
异帕米星
依替米星
奈替米星
阿司米星 达地米星
1、氨基糖苷类抗生素中的有关物质及其检测方法
氨基糖苷类在临床用药中应注意的问题
氨基糖苷类在临床用药中应注意的问题
关 键 字:
氨基糖苷类 临床用药
摘 要:
氨基糖苷类抗生素（aminoglycosides）是由链霉菌或小单孢菌培育液中提取或以天然品为原料半合成制取而得的一类水溶性较强的碱性抗生素。要紧包括：链霉素、新霉素、庆大霉素、卡那毒素、妥布霉素和阿米卡星、奈替米星等。 氨基糖苷类抗生素对革兰阴性杆菌作用范围大，强而持久，且还具有较长的抗菌后效作用（Post
Antibiotic Effect PAE）。从抗菌作用的特点看，氨基糖苷类是一类较优良的抗生素，但是，该类药物的医治浓度范围窄，不良反映较常见，其中有些是不可逆毒性，这是限制它在临床普遍利用的要紧缘故。
氨基糖苷类抗生素（aminoglycosides）是由链霉菌或小单孢菌培育液中提取或以天然品为原料半合成制取而得的一类水溶性较强的碱性抗生素。要紧包括：链霉素、新霉素、庆大霉素、卡那毒素、妥布霉素和阿米卡星、奈替米星等。
氨基糖苷类抗生素对革兰阴性杆菌作用范围大，强而持久，且还具有较长的抗菌后效作用（Post Antibiotic Effect PAE）。从抗菌作用的特点看，氨基糖苷类是一类较优良的抗生素，但是，该类药物的医治浓度范围窄，不良反映较常见，其中有些是不可逆毒性，这是限制它在临床普遍利用的要紧缘故。
一、不良反映及临床表现
肾毒性
氨基糖苷类抗生素对肾的毒性要紧损害近曲肾小管上皮细胞，一样不阻碍肾小球，临床上要紧表现为蛋白尿、管型尿、红细胞尿等，而尿量不减少，严峻者致氮质血症，肾功能消退，药物肾小管的损害程度与剂量大小、疗效长短成正比，尿液转变一样在用药后3～6天发生，大多数为可逆性，停药后可慢慢恢复，应注意及时停药。
耳毒性
氨基糖苷类抗生素的耳毒性要紧临床表现可分为①前庭功能失调，多见于链霉素、卡那霉素、庆大霉素、妥布霉素，用药后其发生率依次为：卡那霉素＞链霉素＞庆大霉素＞妥布霉素。②耳蜗神经损害，多见于卡那霉素、阿米卡星、西索米星、庆大霉素等，用药后其发生率依次为：卡那霉素＞阿米卡星＞西索米星＞庆大霉素＞妥布霉素。但这两类病症并非绝对，有可能二者兼有。这些“亚临床性耳聋”反映的发生率约为10%-20%。但最近几年来奈替米星进入临床，实验证明耳毒性较小。同时很多医院采纳了血药浓度的监测，个体化给药。耳毒性发生率慢慢下降。
氨基糖苷类抗生素致患者中毒救治方法及要点
氨基糖苷类抗生素致患者中毒救治方法及要点
氨基糖苷类抗生素在分子结构中均含有一个氨基环醇环和一个或多个氨基糖分子，由糖苷键连接。本类抗生素种类较多，其常用品种如下。
链霉素、卡那霉素、卡那霉素B及庆大霉素、地贝卡星、阿米卡星、妥布霉素、核糖霉素、小诺米星、新霉素、巴龙霉素、西索米星、奈替米星、阿司米星、异帕米星、大观霉素。
【药理和毒理】
1.药理该类抗生素为广谱强效抗生素，特别对革兰阴性杆菌有很强的抗菌活性。该类药物影响蛋白合成的全过程，抑制70S始动复合物的形成，遗传密码的错译，使已合成的肽链不能释放，并阻止70S粒蛋白体的解离。此外还抑制细胞膜蛋白质的合成。
2.毒理
（1）过敏反应：链霉素能和血清蛋白质结合，形成全抗原，可发生过敏反应，甚至过敏性休克。
（2）耳毒性：系内耳淋巴液药物浓度持续较高，引起内耳柯蒂器内、外毛细胞损害所致。如前庭功能失调、耳蜗神经损害等。
（3）肾毒性：主要损害近曲小管上皮细胞。可引起蛋白尿、管型尿、尿中出现红细胞，严重者可产生氮质血症、肾功能减退。
（4）神经肌肉阻滞作用：本类药物可与Ca²+竞争和抑制乙酰胆碱释放，降低神经末梢运动终板对乙酰胆碱的敏感性，并可与Ca²+结合，使体液中Ca²+含量降低，产生神经肌肉阻滞作用，引起心肌抑制、血压下降和呼吸抑制。
【中毒症状】
1.过敏反应可表现为药物热、皮疹、嗜酸性粒细胞增多、血管神经性水肿等，严重者可发生过敏性休克。
2.耳毒性前庭功能失调；耳蜗神经损害。
3.肾毒性一般表现为蛋白尿、管型尿、血尿、尿中有红白细胞；严重者可产生氮质血症、肾功能减退。
4.神经肌肉阻滞作用可引起心肌抑制、血压下降和呼吸抑制，甚至死亡。
5.其他尚可出现嗜酸性粒细胞增多，中性粒细胞减少，贫血、血小板减少、发热、血压下降、血清转氨酶升高，面部及全身麻木、周围神经炎。鞘内注射较大剂量时，可引起头痛、眼球震颤、呕吐、抽搐、昏迷等症状。
【治疗要点】
抗生素微生物检定方法学验证中的常见问题分析
精品---
--精品 发布日期 20070423
栏目 化药药物评价>>化药质量控制
标题 抗生素微生物检定方法学验证中的常见问题分析
作者 审评三部
部门
正文内容 审评三部审评五室 刘英
摘要： 本文对抗生素微生物检定法中的管碟法在方法学验证中的常见问题如线性与范围中溶液浓度与直径的关系、精密度的测定方法等进行了分析，归纳其错误的问题，给出了正确的操作方法。
关键词： 抗生素微生物检定法 多组分抗生素 方法学验证
抗生素微生物检定法是国际上通用的、经典的抗生素测定方法。自20世纪40年代建立至今，在各国药典中被普遍采用。虽然伴随着HPLC等化学分析技术的发展，一些抗生素品种的效价已被化学分析法所取代，但由于①微生物检定法可直观、特异地反映出抗生素品种的抗菌活性；②多组分抗生素由于结构与不同活性组分生物活性的差异，化学测定结果难以准确表征组分组成、含量和生物活性间的关系；③许多抗生素品种由于各种原因如无特征紫外吸收等，目前没有适当的化学分析方法表征其活性，故抗生素微生物检定法目前在各国药典中仍占有重要的地位，且短期内化学分析法不可能完全取代微生物检定法。中国药典2005年版仍采用抗生素微生物检定法中的管碟法测定其效价，目前申报已有国家标准的该类制剂较多，在质量研究中存在诸多问题，现就常见的问题加以分析，希望对注册申请人有所帮助。
一、方法的建立
1、 供试品与标准品的同质性 抗生素微生物检定法的原理以供试品与标准品同质为前提，方精品---
--精品 法建立前，首先应确定供试品与标准品是否同质，包括化学结构、所含组分及组分比例的一致性，对于制剂还要考虑辅料的影响是否造成供试品与标准品不同质。
2、培养基、试验菌、缓冲液和培养条件的选择
可参照中国药典建立，在此不再赘述。
3、检定方法的确定
可采用一剂量法（标准曲线法）、二剂量法及三剂量法等。一般确定线性与范围采用一剂量法（标准曲线法），常规含量测定采用二剂量法，标准品标定采用三剂量法。
氨基糖苷类抗生素不良反应与防治对策
内容摘要：
随着抗生素的广泛使用，耐药菌株已成为引起临床感染较为常见的病原菌。一些专家提出抗生素循环（轮换）用药策略和策略性换药。使得氨基糖苷类抗生素对很多耐药菌株敏感［1］。然而，该类药物的 治疗 浓度范围窄，不良反应较常见，其中有些是不可逆毒性，这是限制它在临床广泛使用的主要原因。为合理的使用该药物，本文重点介绍以下氨基糖苷类抗生素的不良反应及其防治对策。
随着抗生素的广泛使用，耐药菌株已成为引起临床感染较为常见的病原菌。一些专家提出抗生素循环（轮换）用药策略和策略性换药。使得氨基糖苷类抗生素对很多耐药菌株敏感［1］。然而，该类药物的 治疗 浓度范围窄，不良反应较常见，其中有些是不可逆毒性，这是限制它在临床广泛使用的主要原因。为合理的使用该药物，本文重点介绍以下氨基糖苷类抗生素的不良反应及其防治对策。
按药物来源分类可分为：（1）链霉菌属的培养滤液中提取者：如链霉素、新霉素、卡那霉素等。（2）小单孢菌属的培养滤液中提取者：如庆大霉素、西索米星等。（3）半合成抗生素：如阿米卡星、奈替米星等。氨基糖苷类药物是浓度依赖性杀菌剂，其治疗剂量和毒性剂量较接近，此类药物呈碱性，溶于水，胃肠道不吸收，肌肉注射吸收迅速且完全，30～90min达峰浓度。静脉给药其浓度高低随治疗剂量而不同，一般静滴20～30min血浆浓度与肌肉注射所达的浓度相同。氨基糖苷类与血浆蛋白结合率很低，主要分布在细胞外液，极性强，不易透过生物膜，在人体组织的细胞内含量极低。但肾皮质部近端肾小管由于特殊的转运机制氨基糖苷类药物浓度远远超过血浆过血浆或组织间液的水平。氨基糖苷类可进入内耳淋巴液，浓度高低与剂量成正比，半衰期10～12h内耳淋巴液药物的高浓度与蓄积性是引起耳毒性的主要原因［2］。
2 氨基糖苷类药物的不良反应与临床症状
21 神经肌肉阻滞 氨基糖苷类药物产生神经肌肉阻滞的机制是由于药物抑制突触前的乙酰胆碱（ach）释放与阻断突触后的ach受体所致。这一现象虽然少见，但危险性较大。临床表现为手足麻木，舌颤，甚至全身抽搐，有时很难与脑膜炎惊厥相区别。氨基糖苷类与肌肉松弛药安定等合用可加重反应，此类药物不宜静脉推注。
新药有关物质检查中的一些问题
新药有关物质检查中的一些问题
孔英梅 杨伯群
作为一个新药，对其纯度的检查是保证安全有效的重要指标之一，而纯度检查的内容，根据各个药物的性质和特点有些不同，但基本上均要涉及各自的“有关物质”检查研究。关于有关物质的检查，在国际上已早为“人用药品注册技术规范协调会(ICH)”所关注，国内在新药的有关文件中也提出了供参阅的一些具体要求，并逐渐引起研制新药者的重视。
由于一个新药从合成原料药到制备有关的制剂，再经贮藏、运输、使用，要经历一段较为复杂和漫长的过程，在此期间，每一过程都有可能产生有关的物质，如生产中可能带入起始原料、试剂、中间体、副产物和异构体等；在贮藏和运输过程中，可能产生降解产物、聚合物或晶型转变等特殊杂质。为保证药物的安全有效，同时也要考虑到生产实际情况，因此，国内外对药物的研究，可允许含有一定限量的无害或低毒性的有关物质，但对毒性较大，能危害人体健康的、无效的或能影响药物稳定性的有关物质则必须严格控制。
因有关物质的量微小，故检测方法至关重要，必须选择专属性强、灵敏度高、重复性好的方法。目前，首选的是色谱法，可根据新药的具体品种及其有关物质的性质采用TLC，HPLC及GC等，有的还应采用其他有关的色谱或波谱法。对于一、二类新药更应重视，必要时可采用HPLC/UV二极管阵列、HPLC/MS或GC/MS等联机技术，对有关物质进行定性定量分析。
现将有关物质检查中常见到的一些问题讨论如下。
1 未提供研究方法的专属性
申报资料中常见到有关物质检查的结论是“未检出有关物质”，甚至在稳定性各影响因素考察中，样品颜色已明显变化，但其结果仍是“未检出降解产物”，因而提供的TLC图上只有1个斑点，HPLC图上只有1个主药的峰。对于此类情况，应考虑方法的专属性，如采用的是HPLC，则在方法研究中可按中国药典附录的要求，进行系统适用性试验，考察方法的专属性，具体方法有：①如有关物质为已知的某中间体、副产物或降解产物，则可在原料药中加入该杂质适量进行试验，以证明能达到分离；②如有关物质为未知，可用含有杂质的粗品进行试验，以证明能达到分离；③将精制品经强光、高温、高湿、氧化剂或酸碱等分别处理，使样品光解、分解、氧化或水解后进行试验，以证明能分离出杂质。经上述方法试验能分离出杂质，即证明采用的方法具有一定的专属性。