噬菌体及其研究进展
工程噬菌体：重塑生物科技与感染治疗的未来
工程噬菌体：重塑生物科技与感染治疗的未来引言在生物科技不断发展的今天，我们见证了多种新型技术的涌现，其中最具潜力和挑战性的就是工程噬菌体。
作为一种天然的生物工具，噬菌体在许多重要领域展示出其独特的优势，包括生物制造、感染治疗以及生物防御等。
本文将深入探讨工程噬菌体的研究进展、应用前景以及未来挑战。
图1图1工程噬菌体：重塑生物科技与感染治疗的未来一、工程噬菌体的研究进展噬菌体的生物学特性与功能噬菌体是一类专性吸附在细菌上的病毒，通过侵入细菌内部并利用其复制机制来产生新的病毒颗粒。
根据其宿主范围，噬菌体可分为广谱噬菌体和窄谱噬菌体。
此外，根据其生命周期，噬菌体还可分为烈性噬菌体（virulent phage）和温和噬菌体（temperate phage）。
工程噬菌体的改造与优化工程噬菌体是通过对野生型噬菌体进行遗传改造而获得的。
改造的主要目标是提高噬菌体的宿主范围、感染效率以及稳定性等。
通过基因敲除、基因置换、基因修饰等方式，我们可以对野生型噬菌体进行改造，从而获得适用于不同应用场景的工程噬菌体。
三、工程噬菌体的应用前景感染治疗工程噬菌体在感染治疗中具有巨大的潜力。
例如，通过特异性地靶向并裂解病原菌，工程噬菌体可以有效地治疗由耐药性细菌引起的感染。
此外，通过基因工程技术，我们还可以将药物分子编码到噬菌体基因中，从而开发出新型的基因疗法。
生物制造工程噬菌体在生物制造领域也展现出巨大的应用潜力。
例如，利用噬菌体的生物合成能力，我们可以生产出许多难以通过传统方法生产的生物分子。
此外，通过遗传改造，我们还可以提高噬菌体的生产效率，从而降低生产成本。
生物防御在生物防御领域，工程噬菌体可以作为一种有效的生物武器来对抗病原菌的传播。
例如，通过开发具有高度特异性以及高效感染力的工程噬菌体，我们可以将其用于防御由细菌引起的流行性疾病。
此外，工程噬菌体还可以用于开发新型的生物检测方法，从而实现对病原菌的快速检测与预警。
噬菌体治疗细菌感染的研究新进展
噬菌体治疗细菌感染的研究新进展1. 引言1.1 噬菌体治疗的背景介绍噬菌体治疗是一种利用噬菌体（又称噬菌体、细菌病毒）来治疗细菌感染的新兴疗法。
噬菌体是一种能够感染细菌并在其内复制的病毒，可通过注射、喷雾或口服等方式送达感染部位，对细菌进行特异性攻击。
相较于传统抗生素，噬菌体治疗具有快速、高效、低耐药性等优势，极大地提升了治疗效果。
噬菌体治疗的历史可以追溯到上个世纪初，但由于抗生素的广泛应用和效果显著，噬菌体疗法逐渐被边缘化。
随着细菌耐药性的日益严重和抗生素疗法的限制，噬菌体治疗再次受到关注并被认为是一种潜在的替代疗法。
目前，噬菌体治疗在动物实验中显示出了很好的效果，但在临床应用中还存在许多挑战需要克服。
随着近年来对噬菌体治疗的深入研究和技术改进，人们对其在细菌感染治疗领域的应用前景充满期待。
【2000字】1.2 噬菌体在细菌感染治疗中的作用噬菌体在细菌感染治疗中扮演着重要的角色。
噬菌体是一种可以攻击并杀死特定细菌的病毒，在治疗细菌感染方面具有巨大潜力。
与抗生素不同，噬菌体可以高度特异性地选择性地杀死感染细菌，而不会对人体的有益菌群造成伤害，从而降低了治疗过程中的副作用和抗药性风险。
噬菌体还具有良好的生物相容性和生物分解性，能够通过口服、皮下注射等多种途径进入人体，并在感染部位选择性地繁殖和扩散，直接与目标细菌相互作用，有效清除感染灶。
由于噬菌体在细菌感染治疗中的高度特异性和效果显著，越来越多的研究者将目光投向了这一领域，希望通过进一步开发和利用噬菌体，为细菌感染患者带来更好的治疗效果。
噬菌体在细菌感染治疗中的作用机制清晰明了，具有很高的治疗潜力和广阔的应用前景，对于细菌感染的治疗有着重要意义。
随着进一步研究的开展和技术的不断创新，相信噬菌体治疗将在未来发展出更多的应用方法和新型治疗方案，为临床治疗带来新的突破和希望。
1.3 研究的背景和意义随着抗生素滥用和耐药菌株的不断增加，细菌感染已经成为全球公共卫生领域的重要挑战。
噬菌体治疗鸡大肠杆菌病研究进展
噬菌体治疗鸡大肠杆菌病研究进展任晚霞1，陈玉武21.山东省寿光市稻田镇畜牧兽医工作站，山东寿光 262706；2.山东省寿光市洛城街道畜牧兽医工作站，山东寿光 262705摘要噬菌体治疗鸡大肠杆菌病是当前研究的一个热点。
本文综述了近年来该领域的研究进展，介绍了鸡大肠杆菌病的病原性及其对养殖业的危害，详细阐述了噬菌体的特点及其在鸡大肠杆菌病治疗中的应用潜力。
噬菌体具有高度专一性、低毒性和广泛的宿主范围，可以针对不同的大肠杆菌菌株进行定向治疗。
尽管噬菌体治疗鸡大肠杆菌病在实践中仍面临稳定性、安全性和规模化生产等问题，但作为1种新型治疗方法，它具有广阔的应用前景。
关键词噬菌体；大肠杆菌；抗生素；治疗近年来，大肠杆菌病在养殖业中呈现严重的流行趋势。
大肠杆菌是1种革兰氏阴性菌，它在动物体内能引发多种疾病，包括泌尿生殖道感染、呼吸系统感染以及消化系统感染等。
特别是在家禽和畜牧业中，大肠杆菌病已成为1种常见的疾病，给动物健康带来了极大的危害[1]。
对于家禽而言，大肠杆菌病通常表现为腹泻、贫血和死亡等症状。
家禽感染大肠杆菌后，该菌可在家禽的消化系统中持续存活数周甚至数月，难以完全根除。
同样地，在畜牧业中，大肠杆菌病也会导致动物消瘦和死亡等问题。
传统药物在治疗大肠杆菌病方面存在一些局限性。
大肠杆菌病原体具有高度的变异性，容易产生耐药菌株，且许多传统药物在治疗大肠杆菌病时效果存在较大差异，长期使用抗生素还会引发药物耐受性和环境污染等问题。
除了传统药物治疗，科学家们正在积极探索其他治疗手段，如预防性接种、新型抗生素开发以及微生物代谢工程等方法都得到了广泛研究。
此外，一些养殖业者也开始采用生物技术手段来提高动物的免疫力，增强其对病原体的抵抗能力。
通过这些新的治疗手段，能有效克服传统药物治疗的局限性，并更好地应对大肠杆菌病的挑战。
这些方法的研究和应用将为大肠杆菌病的防控提供新的途径和可能性，有助于减少药物耐受性的发展，并降低环境污染的风险。
噬菌体治疗细菌感染的临床进展
噬菌体治疗细菌感染的临床进展在医学的临床治疗上，细菌感染是经常遇到的情况，不及时地采取措施对其进行处理，将会给患者带来更大的危机和痛苦，随着医学的不断研究，细菌感染的治疗取得了不错的进展，但是耐药细菌的出现又给临床治疗带来新的难题。
噬菌体运用于临床治疗上，是临床细菌感染治疗的又一项重大突破。
噬菌体的治疗方案广泛的被运用在临床治疗中。
噬菌体是一种依赖细菌的病毒，它在细菌感染的治疗上，能够取得非常好的疗效，尤其是针对耐药性细菌感染，它比一般的药物能起到更好地疗效。
噬菌体裂解酶是近年来比较热门的研究项目，它和传统的抗生素相比较有着独特的性能。
该文主要讲述的就是噬菌体治疗细菌感染的临床进展[1]，借此对噬菌体治疗细菌感染有所总结，望未来有更好地突破。
该文主要阐述噬菌体治疗细菌感染的临床运用和其进展。
标签：噬菌体治疗；细菌感染；临床进展随着时代的不断进步，医疗不断发展的同时，细菌也在不断地发展与增殖，普通的细菌尚可以用传统的抗生素抵抗，但是随着耐药性的细菌不断增多，传统的抗生素已经不足以帮助人们治疗细菌感染，这在临床治疗上造成了不小的难题。
噬菌体治疗是在耐药性细菌感染逐渐不受控制时渐渐被运用到临床治疗上的。
耐药性的细菌感染对于临床治疗而言十分棘手，并且一度出现无药可医、束手无策的现象。
因其耐药的性质，一般药物对于这类细菌来说基本无用，而噬菌体是一种对特异性感染的细菌、真菌、放线菌等微生物的病毒[2]。
噬菌体遗传物质和结构简单，一般需要寄生在细菌真菌等宿体内。
该研究对噬菌体治疗细菌感染的临床进展作出研究，基于被动治疗与主动治疗的方式开展实验，现已取得不错的效果，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料细菌感染从古至今都是人与动物的常见疾病，在从前细菌感染是致死的主要原因之一，由此可见细菌感染治疗的重要性。
噬菌体是英国和法国于1915、1917先后发现，并实际运用于细菌感染治疗上。
1934年美国报道噬菌体抗肠球菌感染成率高到百分之八十。
噬菌体研究与应用的前沿成果
噬菌体研究与应用的前沿成果随着生物学研究的不断深入，噬菌体作为一种广泛存在于自然界并具有研究和应用价值的生物，受到了越来越多的关注。
在过去的二十年里，关于噬菌体的研究和应用已经取得了许多重大的突破和成就，这些进展不仅对于医学领域有着重要的意义，对于食品工业和环境保护等领域也具有重要的应用价值。
本文旨在介绍噬菌体研究与应用的前沿成果，以期能够让读者了解噬菌体的神奇之处，并在未来的应用中发挥更大的作用。
一、噬菌体研究的历史与现状噬菌体是一种能够感染和破坏细菌的病毒，属于噬菌体科，是一种特殊的病原体。
噬菌体最早被发现于1915年，当时被称为“微生物病原体”，随后又被称为“细菌噬咬器”和“噬菌体”等。
在过去的一个世纪里，随着科学技术的不断发展，对噬菌体的研究逐渐深入，目前已经形成了一整套完善的研究和应用体系。
目前，噬菌体的研究主要分为三个领域：基础研究、应用研究和工程研究。
基础研究主要关注噬菌体的生物学特性、进化历史、感染机理等方面；应用研究主要关注噬菌体在各种领域中的应用，例如医学、食品工业、环境保护等；工程研究则主要关注如何通过人工手段改变噬菌体的性质，优化其应用效果。
二、噬菌体在医学领域中的应用噬菌体作为一种可以选择性灭菌的生物，在医学领域中具有非常广泛的应用价值。
近年来，围绕着噬菌体的应用在医学领域中进行了大量的实验和研究，并取得了许多重要的成果。
1.临床应用在临床应用方面，噬菌体可以作为一种独特的抗菌药物针对细菌感染进行治疗。
相比于传统的抗生素，噬菌体有以下几个优势：（1）选择性强：噬菌体只针对特定的细菌进行感染和杀灭，而不会对其他微生物和宿主产生影响。
（2）生物安全性高：噬菌体是一种天然存在于自然界中的生物，对人体具有很好的生物相容性和安全性。
（3）适应性强：由于细菌的变异和抵抗，传统抗生素出现耐药性是一个难以避免的问题；而噬菌体具有较强的适应性，不会因为细菌的变异而失去杀灭作用。
在临床应用中，最常见的是采用噬菌体针对难治性细菌感染进行治疗，例如病毒性感冒病毒、肺炎链球菌等。
噬菌体在基因工程技术领域中的应用研究进展
噬菌体在基因工程技术领域中的应用研究进展噬菌体（phage）是一类寄生于细菌体内的病毒，它们以细菌为宿主，通过感染细菌并进行复制繁殖来完成自己的生命周期。
噬菌体在基因工程技术领域中具有广泛的应用前景。
不仅可以用于基因传递和基因治疗，还可以在基因工程中作为模型组织来研究基因功能和调控。
本文将重点探讨噬菌体在基因工程技术领域中的应用研究进展。
噬菌体在基因工程中的一项重要应用是基因传递。
噬菌体可以作为载体传递外源基因到细菌中，实现基因的插入、表达和产物的生产。
常见的噬菌体载体有T7、lambda和M13等。
通过对这些噬菌体载体进行修饰，可以构建目标基因的克隆，实现目标基因的表达和功能分析。
此外，噬菌体还可以被用于将外源基因传递到其他生物中，如植物、动物细胞和真核微生物等。
这些应用丰富了基因工程技术在不同领域的研究内容，并促进了基因工程技术的快速发展。
另一个噬菌体在基因工程中的应用是基因治疗。
基因治疗是利用基因工程技术来修复或替代患者体内缺陷基因的一种新型治疗方法。
噬菌体可以通过转导获得的基因带入人体细胞，使其表达函数性蛋白质，以治疗基因缺陷带来的疾病。
噬菌体可以作为基因传递载体，将目标基因传递到人体细胞中，使其发挥治疗作用。
这种基因治疗方法具有靶向性、高效性和安全性等优势，且可以应用于众多遗传病的治疗，为基因工程技术开辟了新的研究和应用领域。
此外，噬菌体还可以在基因工程中作为模型组织来研究基因功能和调控。
通过研究噬菌体的基因组、基因调控和其与细菌宿主的相互作用，可以深入了解细菌感染和噬菌体复制的机理。
噬菌体的复制过程中涉及的调控因子和蛋白质可以为其他生物的基因调控研究提供参考。
此外，噬菌体还被广泛应用于基因工程中的分子生物学研究，如DNA测序、PCR扩增和基因克隆等。
通过对噬菌体的研究，可以不断优化和改进基因工程技术，以满足不同研究领域的需求。
噬菌体在基因工程技术领域中的应用受到了广泛关注，然而也面临着一些挑战。
噬菌体治疗细菌感染的研究新进展
噬菌体治疗细菌感染的研究新进展噬菌体治疗的原理是利用噬菌体感染细菌并破坏其细胞壁，最终导致细菌死亡。
相比传统抗生素，噬菌体的疗效更加针对性，不仅可以杀灭特定的细菌，而且不会影响人体的正常菌群，减少了对人体的不良影响。
噬菌体治疗在治疗耐药细菌感染、慢性感染等方面具有独特的优势。
近年来的研究表明，噬菌体治疗在耐药细菌感染方面取得了一些突破。
随着抗生素的过度使用和滥用，一些细菌已经产生了对抗生素的耐药性，导致传统抗生素难以对其产生疗效。
而噬菌体治疗能够通过感染并杀死这些耐药细菌，为治疗这些感染提供了一种新的选择。
在一些临床实验中，噬菌体治疗已经显示出了对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、产生了广泛耐药的肠球菌等耐药细菌产生了显著的治疗效果。
噬菌体治疗在慢性感染的治疗方面也表现出了潜在的优势。
一些慢性感染，特别是由生物膜包裹的感染，对抗生素具有一定的耐受性，难以完全清除。
而噬菌体能够穿透生物膜、感染细菌并破坏其细胞壁，因此可能在这些慢性感染的治疗中发挥重要作用。
已有的研究表明，噬菌体治疗可以有效清除生物膜内的细菌，为慢性感染的治疗提供了新的思路。
基因编辑技术的发展也为噬菌体治疗的进一步优化提供了可能。
通过基因编辑技术，可以对噬菌体进行改造，使其具有更强的感染能力，更广泛的杀菌谱，从而提高其治疗效果。
基因编辑技术还可以使噬菌体更加安全、稳定，减少其在治疗中可能出现的风险。
基因编辑技术的应用为噬菌体治疗的进一步研究和应用提供了新的动力。
临床研究也为噬菌体治疗的应用提供了一些实质性的进展。
一些临床试验已经证实了噬菌体治疗的安全性和有效性，为其在临床上的应用奠定了基础。
一些初步的临床试验结果也表明，噬菌体治疗在一些特定的感染治疗中具有潜在的优势，例如在创面感染、肺部感染、尿路感染等方面。
这些临床研究结果为噬菌体治疗的进一步推广提供了重要的支持。
噬菌体治疗细菌感染在近年来取得了一些新的进展，特别是在耐药细菌感染和慢性感染的治疗方面表现出了潜在的优势。
噬菌体在基因工程技术领域中的应用研究进展
噬菌体在基因工程技术领域中的应用研究进展引言：近年来，基因工程技术的不断发展和突破为人们解决了许多生物学上的难题。
其中，噬菌体作为一种具有特殊生物学特性的病毒，被广泛应用于基因工程技术的领域。
本文将以噬菌体在基因工程技术中的应用研究进展为主题，对噬菌体的特点、应用及未来的发展进行综述。
一、噬菌体的特点噬菌体是一种寄生性病毒，可以侵染并感染革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。
与其他病毒相比，噬菌体具有以下几个特点：1. 寄生性：噬菌体需要依赖宿主细菌的代谢过程进行复制。
2. 简单结构：噬菌体一般由头、颈和尾部组成。
头部存储基因组，颈部连接头部和尾部，尾部用于将噬菌体注入宿主细菌。
3. 宿主范围广泛：噬菌体可以感染多种不同种类的细菌，包括耐药菌株。
二、基因工程技术中的噬菌体应用1. 噬菌体展示技术噬菌体展示技术是一种利用噬菌体颗粒表面展示外源蛋白质的方法。
这种技术可以将外源蛋白质与噬菌体表面蛋白进行融合，从而使得外源蛋白质能够在噬菌体表面展示。
噬菌体展示技术被广泛应用于抗原呈递、抗体库构建和新药筛选等领域，对于研究蛋白质结构与功能具有重要意义。
2. 噬菌体基因库构建噬菌体基因库是指将大量的外源DNA片段插入噬菌体的基因组中，形成一个具有多样性的基因库。
通过筛选和分离，可以从中获得对应所需特定功能的基因或蛋白质。
噬菌体基因库构建被广泛应用于药物发现、基因功能研究和酶工程等领域，加速了基因工程技术的发展。
3. 噬菌体介导的基因传递噬菌体可以作为基因传递的载体，将外源基因导入宿主细菌中，从而实现遗传物质的传递与表达。
这种方式在基因工程技术中具有重要的应用，例如基因修饰、基因治疗和基因工程生物的制备等。
三、噬菌体在基因工程技术中的应用进展1. 军用应用噬菌体在军事领域的应用已经取得了一些进展。
例如，利用噬菌体展示技术，可以设计出具有特定功能的蛋白质，用于生物传感器和生物武器检测。
另外，噬菌体还可以用于疫苗的开发，提高军队在传染病防控中的能力。
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3、噬菌体在食品产业中的应用
食源性疾病病原的检测技术 作为食品添加剂 噬菌体展示技术检测真菌毒素
3.3 噬菌体展示技术检测真菌毒素
噬菌体展示技术(Phage display technology)是20 世纪 80 年代逐步建立并发展起来的一项分子生物学新技术。 它以噬菌体或噬粒为载体, 使外源肽或蛋白基因与噬菌体 表面特定蛋白基因在其表面进行融合表达, 进而通过亲和 富集法筛选表达有特异肽或蛋白质的噬菌体。
现存的检测方法包括传统的细菌分离培养法、多聚酶链式反 应(PCR)法、生物芯片技术和免疫学方法等。 缺点：费时费力、价格昂贵、特异性或灵敏度低、国内试剂 供应不配套等，很难适应公共卫生事件应急处理快速反应的 需要。 有必要寻找一种简捷、快速、灵敏度高的检测食源性病原微 生物的方法以及技术平台。
检测方法
2、噬菌体的应用技术
测定辐射剂量 鉴定细菌分型
预防和治疗 传染性疾病
应用
检测基因 产物的活性
检测病原菌
筛选目的基因
3、噬菌体在食品产业中的应用
食源性疾病病原的检测技术 作为食品添加剂 噬菌体展示技术检测真菌毒素
3.1食源性疾病病原的检测技术
食源性疾病病原的检测技术是食源性疾病的预防与控制的关 健的技术环节。数据显示，每年大约有7600 万人因食用了 受污染的食物而患病，其中91% 是由于细菌污染造成。
该技术中，将一个报告基因通过噬菌体插入到目标菌体的 D N A 中，随着报告基因的表达，目标菌体便可快速得到 检测。 应用在这一技术的报告系统主要有原核生物和真核生物的 荧光素酶 (lux,luc) 基因，细菌冰核蛋白 (inaW) 基因， E.coliβ- 半乳糖苷酶(lacZ)基因和生物素亲和蛋白。报 告 噬 菌 体 已 经 能 够 成 功 检 测 许 多 菌 种 ， 如 E.coli,Salmonella.spp 等 。
利用噬菌体展示技术制备抗体、模拟抗原表位，不仅绕过 了细胞融合，而且可以以单克隆抗体（McAb ） 或单链抗 体（ ScFv）为靶分子筛选真菌毒素的模拟抗原表位，代 替真菌毒素的标准品，建立无毒 ELISA检测方法，保证实 验操作人员和相关研究人员的人身安全。 熊啸（2007 年）等选用抗黄曲霉毒素M1（antiAFM1,Aflatoxin M1,AFM1）单克隆抗体为筛选配基，从噬 菌体表面展示的随机 7 肽库中筛选出 AFM1 抗原的模拟表 位LTSFPRH 和MAPSSWR，为研制出安全无毒的 ELISA 试剂 盒奠定基础。
DNA噬菌体
少数为环状单链 多数为线状单链
RNA噬菌体
少数为线状双链
化学组成
核酸：DNA或RNA,基因组大小为2-200kb，某些噬菌体基因 组中还含有异常碱基。 大多数为线状双链
DNA噬菌体
少数为环状单链 多数为线状单链
RNA噬菌体
少数为线状双链
按与宿主的相互关系，噬菌体可以分为两种类型： 烈性噬菌体，温和噬菌体（溶原性噬菌体）
形态与结构
形态：蝌蚪形，微球形，细杆形
噬菌体颗粒在结构上有很 大差别，一般可分成三种 类型，即 无尾部结构的二十面体， 有尾部结构的二十面体和 线状体，迄今已知的噬菌 体大多数是有尾部结构的 二十面体。
头部
尾部
核酸：DNA或RNA,基因组大小为2-200kb，某些噬菌体基因 组中还含有异常碱基。 大多数为线状双链
噬菌体及其应用
Contents
1 2 3 4 噬菌体简介 噬菌体应用技术简介 噬菌体在食品产业中的应用
前景及展望
1、噬菌体简介
概念：噬菌体是感染细菌、 真菌、螺旋体、支原体、 立克次体及放线菌等微生 物的病毒,属非细胞微生 物。 特性： 个体微小，需用电镜观察， 可以通过细菌滤器； 没有完整的细胞结构，由 核酸和蛋白质组成； 专性活细胞内寄生,具有 严格的寄生特异1噬菌斑检测
原理：用噬菌体截获某种 病原菌，随后病原菌被噬 菌体感染，用杀毒剂将胞 外的剩余噬菌体杀死，然 后将噬菌体与被感染细胞 混合并在装有软琼脂的双 层培养基上培养，被感染 的细胞破裂释放出子代噬 菌休，在培养基中就会形 成空斑。
实验方法
标本采集后置于SC 增菌管中37 ℃ 增菌18 h左右, SS 平 板分离培养37 ℃ 过夜, 然后挑出具有沙门氏菌特征的单 个菌落划线接种于普通琼脂平皿上, 每块平板划格后可接 种8 个菌落左右。 在每格中央用灭菌的毛细滴管滴上O-I噬菌体, 待溶液干 后置37 ℃ 6-8 h 培养或过夜, 观察噬菌体裂解情况。
简例
蒋鲁岩等用此方法快速检测食品源沙门氏菌，检测灵敏度 达10 CFU/100μL;120份食品样品中沙门氏菌的O-I噬菌体 检测与生化鉴定结果的阳性率分别为9.17%和10%,符合率 为91.7%。表明用荧光标记的O-I噬菌体可以快速、直观、 准确、大量地检测食品中沙门氏菌。
3.1.3报告基因检测技术
简介
A图只有细菌,荧光视野里不见任何发光物质;B图中只有荧光标记O-I噬菌体,视野 下偶尔可见少量圆点状的荧光物质,不见菌形;C图是荧光标记O-I噬菌体和沙门氏 菌混合,可见大量杆状物,少量点状物,极少数彗星状杆状物,将杆状物质与沙门氏菌 的革兰氏染色形态进行比较,两者一致。 由此可推知,C图中杆形物是侵有荧光噬菌体的沙门氏菌,点状物是标记的O-I噬菌 体,结合B图可知彗星状杆形物是即将裂解的宿主菌。
3、噬菌体在食品产业中的应用
食源性疾病病原的检测技术 作为食品添加剂 噬菌体展示技术检测真菌毒素
3.2作为食品添加剂
美国食品和药物管理局批准了一种由噬菌体病毒混合而成的产 品，主要用于杀灭肉制品中的李氏杆菌。这是美国首次批准将 病毒用作食品添加剂。 美药管局专家称，该产品在制备过程中可能留有残毒，但试验 表明，这些微量的残毒不会引起任何健康问题。该产品包含6 种噬菌体病毒，可在熟肉片和香肠等包装前喷洒在这些肉制品 上，有效杀灭多种李氏杆菌，预防由这些细菌引起的食物中毒。 产品中所包含的噬菌体只会攻击李氏杆菌，对人体和植物细胞 都不会产生影响。
烈性噬菌体 : 能在宿主菌内复制增殖，产生许多子代噬菌
体，并最终裂解细菌。 温和噬菌体（溶原性噬菌体）：噬菌体基因组整合于宿主 菌染色体中，不产生子代噬菌体，也不引起细菌裂解，但 噬菌体 DNA 随细菌基因组的复制而复制，并随细菌的分裂 而分配至子代细菌的基因组中。
生物合成 装配 释放
烈 性 噬 菌 体 的 溶 菌 周 期
发现被O-I 噬菌体裂解的菌株, 马上挑取噬斑周围菌苔直 接做沙门氏菌A- F 多价血清凝集试验, 凝集阳性者即可 初步报告结果, 然后转种克氏双糖铁管作进一步鉴定分型。
简例
O-I噬菌体是作用于沙门氏菌属特异性噬菌体,染色体为双 链DNA,受体是宿主细胞壁上核心多糖的乙酰氨基葡萄糖。 应用O-I噬菌体进行饮食行业及公共场所从业人员带菌调 查结果表明, 沙门氏菌检出率为0. 131%, 与广东省报道 的0. 134%检出率相近, 说明O- I 噬菌体应用对沙门氏菌 的诊断具有较高的特异性和敏感性, 不失为大量从业人员 沙门氏菌调查的较为理想快速诊断方法。
Masahito等将绿荧光蛋白(GFP)基因分别插入到T偶数型噬菌体PP01 的外壳蛋白(SOC)基因的C 末端和N 末端，构建成噬菌体PP01-GFP/SOC 和PP01-SOC/GFP，这种对E.coli O157:H7特异的噬菌体能够成功检测 菌体的可培养细胞，不可培养但可存活细胞(VBNC)及经过巴氏消毒过 的细胞，灵敏度高，检测时间仅为20min。
简介
利用荧光素酶基因作为报告基因的快速检测技术
对于细菌来说，发光机理可用下式表述：
F M N H 2+ R C H O + O 2 → F M N + H 2O + R C O O H + h ν(490nm)
反应是在荧光素酶的催化下进行的。细菌的荧光素酶是一个7 7 k D 的 二聚体，其中包含α亚基( 4 0 3 7 k D ) 和β亚基(37kD)。 目前，生物发光基因(lux,luc)在报告噬菌体检测技术中应用最为广泛。 Waddell 等利用转座子致突变，将lucA和lucB基因插入到E.coli O157:H7的温和噬菌体φ V 1 0 中，构建了一个荧光素酶转座噬菌体， 这一噬菌体能够使E.coli O157:H7 在1h 内被成功检测，并报告出结果。
以β- 半乳糖苷酶作为报告基因的快速检测技术
β-半乳糖苷酶(EC 3.2.1.23)是一种催化β-半乳糖苷水解 反应的糖苷酶。 β-半乳糖苷酶的作用特性是随着水解反应底物的不同而改 变，邻硝基苯β -D- 半乳糖苷是检测中常用的灵敏基质， 它被β - 半乳糖苷酶水解后产生蓝色沉淀，该技术可以使 检测的灵敏度达到生物发光荧光素酶检测的水平。 Goodridge等设计了一个带有lacZ基因的T4噬菌体，用这种 噬菌体感染待测样品，并用化学发光基质作为检测基质， 研究人员成功检测了肉汤培养基中的 E.coli ，检测限仅为 102CFU/ml。然后，研究人员将最大概率数(most probable number ，MPN) 法应用到食源性病原菌检测中，检测水平可 降至10CFU/ml，用时仅1h。
4、前景及展望
噬菌体检测技术具有快速、准确而直观特点,具有很强的 优势,应用前景广阔。 噬菌体大规模应用技术尚不成熟,有关噬菌体的各种研究 正在开展,但是这些研究仍限于动物模型,且缺少统一的评 定指标。噬菌体技术存在很多缺陷，比如:噬菌体携带一 些毒素基因;噬菌体裂解细菌高度特异,作用谱很窄。这些 问题会导致实际过程中治疗的不稳定性和不安全性。 所以目前噬菌体在实践中的应用相对较少,研究空间较大。 相信随着噬菌体技术的不断发展和改善, 它将在生命科学 等各个领域产生深远的影响。
3.1.2荧光染料标记法
原理 ： 选用一种合适的染色剂，噬菌体的核酸染色标记， 然后用标记过的噬菌体侵染相应的宿主菌，噬菌体吸附在 宿主菌表面后，随即将标记过的核酸注入宿主细胞，随着 越来越多的噬菌体核酸的注入，细胞内荧光随着荧光素的 增多而增强，借助荧光显微镜便能判定宿主菌的存在，从 而实现病原菌的检测。