蛋白酶水解酪蛋白透明圈初筛方法的条件探索与应用效应
蛋白质酶解技术及其在药物研究中的应用
蛋白质酶解技术及其在药物研究中的应用在药物研究领域中，蛋白质酶解技术是一项非常重要的技术。
通过蛋白质酶解技术可以将复杂的蛋白质结构分解成小分子的氨基酸，揭示蛋白质的结构和功能，从而为药物研究提供了更丰富的信息。
本文将详细介绍蛋白质酶解技术及其在药物研究中的应用。
一、蛋白质酶解技术简介蛋白质酶解技术是一种将蛋白质分解成氨基酸的技术。
它可以通过化学、酶法、微生物发酵等不同方式来实现。
其中，酶法是一种常用的蛋白质酶解方法。
目前，常用的蛋白酶包括胰蛋白酶、胃蛋白酶、丝氨酸蛋白酶等。
蛋白质酶解技术的实现需要注意的是酶解的条件。
酶解的条件包括酶解酶的种类、酶解时间、酶解温度和pH值等。
这些条件的选择需要根据不同的蛋白质种类和要研究的问题进行确定。
二、蛋白质酶解技术在药物研究中的应用（一）蛋白质药物的研究在蛋白质药物的研究中，蛋白质酶解技术可以用来揭示蛋白质的结构和活性区域，为药物研究提供重要依据。
例如，通过蛋白质酶解技术可以将降钙素原酶解成活性的降钙素，揭示其生物活性和作用机制，为药物研究提供重要参考。
此外，蛋白质酶解技术还可以用于评价蛋白质药物的品质和稳定性。
通过蛋白质酶解技术可以分析蛋白质药物的氨基酸序列、糖基化状态和空间结构等信息，为蛋白质药物制备和品质控制提供重要参考。
（二）蛋白质质量分析蛋白质酶解技术还可以用于蛋白质的质量分析。
蛋白质酶解后的氨基酸序列可以通过质谱分析等技术进行鉴定和定量分析，从而获得蛋白质的分子量、氨基酸组成和糖基化状态等信息。
这些信息对于深入研究蛋白质的结构和功能以及药物研究具有重要意义。
（三）蛋白质互作研究蛋白质酶解技术还可以用于研究蛋白质的互作。
利用蛋白质酶解技术可以将蛋白质分解成多个片段，然后通过质谱分析等技术确定不同片段中的氨基酸序列和质量。
通过这些信息可以确定蛋白质片段之间的互作关系，为研究蛋白质互作提供了新的手段。
三、结语综上所述，蛋白质酶解技术在药物研究中具有重要的应用价值。
碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最适宜条件
碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最适宜条件
孙浩;蔡兴旺
【期刊名称】《大连工业大学学报》
【年(卷),期】2003(022)001
【摘要】蛋白质酶解是改善蛋白质特性,便于人体吸收的有效途径.我们对富含于乳制品中的酪蛋白,采用碱性蛋白酶进行水解实验.通过对主要影响因素的分析及回归方法,确定碱性蛋白酶对酪蛋白水解的最佳工艺条件:温度55 ℃,酶-底物比为7%,底物质量分数为6%,pH值为8.
【总页数】3页(P25-27)
【作者】孙浩;蔡兴旺
【作者单位】大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034;大连轻工业学院,生物与食品工程学院,辽宁,大连,116034
【正文语种】中文
【中图分类】TQ925.2
【相关文献】
1.利用2709碱性蛋白酶水解酪蛋白制备CPPs的研究 [J], 庞广昌;胡志和;陈庆森;刘剑虹
2.不同条件对胰蛋白酶水解酪蛋白水解度的影响 [J], 于传瑞;杜开书;吴菲;申文鹏;娄伟强;丁凯;李淑梅
3.碱性蛋白酶水解豆粕制备ACE抑制肽水解条件的优化 [J], 田中原;王亚萍;刘屾;任毅;冯欣;孙建华
4.不同条件对胰蛋白酶水解酪蛋白水解度的影响 [J], 于传瑞;杜开书;吴菲;申文鹏;娄伟强;丁凯;李淑梅;
5.碱性蛋白酶水解劣质干酪素制备酪蛋白磷酸肽的研究 [J], 郑丽娜;张兰威
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酪蛋白磷酸肽的酶水解条件研究
酪蛋白磷酸肽的酶水解条件研究轩诗海;张铁涛【摘要】本研究主要是以粗制的干酪素为原料,采用单因素分析和四因素三水平L9(34)正交试验.确定用碱性蛋白酶从水解的原料-劣质干酪素中提取酪蛋白的最佳条件是温度55℃、pH9.0、时间2.5 h、原料浓度为15%.【期刊名称】《生命科学仪器》【年(卷),期】2011(009)001【总页数】3页(P59-61)【关键词】酪蛋白磷酸肽;干酪素【作者】轩诗海;张铁涛【作者单位】黑龙江省完达山乳业股份有限公司;琼州学院化学系【正文语种】中文近年来，生物活性肽作为保健食品市场的新生力量显示出了强大的市场潜力。
乳源性生物活性肽是生物活性肽中最重要的一类，乳源性生物活性肽的种类繁多，目前已发现的有阿片肽、免疫促进肽、阿片拮抗肽、抗高血压肽、抗血栓肽、酪蛋白磷酸肽和其它一些生物活性肽［1,2］，其中酪蛋白磷酸肽（Casein Phosphopeptides，CPPs）是发现较早的一种，酪蛋白磷酸肽是蛋白酶水解酪蛋白后形成的一种含成簇磷酸丝氨酸基团的生物活性短肽，因其具有促进矿物质吸收，特别是钙质吸收等多种生物活性而倍受关注。
本研究主要是以粗制的干酪素为原料，采用四因素三水平L9（34）正交试验，确定碱性蛋白酶水解干酪素制备酪蛋白磷酸肽的最佳工艺条件［3,4,5］。
1 材料与方法1.1 原料与主要试剂本试验所用的原料是甘肃华羚乳品集团公司工业精一级干酪素，颜色呈淡黄色，其主要成分见表1-1，其它化学试剂均为分析纯。
1.2 碱性蛋白酶水解干酪素制备CPPs单因素试验为了确定正交试验各因素的水平范围，以水解度为指标，对影响蛋白酶水解的[E]/[S]、pH、温度和时间做单因素分析。
1.2.1 [E]/[S]对水解度影响固定底物浓度为15%，pH为9.0，温度为50℃，水解时间为2.0 h。
选取[E]/[S]为 400 u/g～2000 u/g（相差为400 u/g），对底物进行水解。
北京理工大学生物实验产蛋白酶菌种的分离与纯化
产蛋白酶菌种的分离与纯化--初筛一、目的要求1 学习蛋白酶产生菌的筛选方法。
2 掌握稀释涂布平板法从自然环境中分离纯化微生物的基本操作技术。
3 进一步熟练和掌握微生物无菌操作技术。
二、基本原理土壤是微生物生长的大本营，所含微生物无论是数量还是种类都是极其丰富的，因此土壤是微生物多样性的重要场所，是发掘微生物资源的重要基地，可以从中分离纯化得到许多有价值的菌株。
工业微生物菌种最初都来自于自然界。
但是自然界中微生物种类繁多，而且都是混居在一起的，要获得工业发酵菌株，首先必须把它们从混杂的微生物群体中分离出来。
从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。
常用的方法有：简单单细胞挑取法和平板分离法。
本实验用平板分离法。
平板分离法操作简便，普遍用于微生物的分离与纯化。
其基本原理包括两个方面：(1)选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养，酸碱度，温度和氧等或加入某种抑制剂造成只利于该微生物的生长，而抑制其他微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。
(2)微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体。
因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。
获取单个菌落的方法可通过稀释涂平板法或平板划线等技术完成。
值得指出的是从微生物群体中经分离生长在平板上的单菌落并不一定保证是纯培养。
因此纯培养的确定要经过一系列的分离与纯化过程和多种特征鉴定方能得到。
蛋白酶是一类重要的工业用酶制剂，它能将蛋白质分解成短肽甚至氨基酸。
根据三氯乙酸能将酪蛋白变性从而产生沉淀这一原理，可在平板培养基上直接筛选蛋白酶产生菌株。
产酶菌株能将酪蛋白水解成小分子物质，菌落周围不形成沉淀蛋白而出现透明圈，根据透明圈大小还能判断产酶活力。
三、实验器材与试剂1 样品土壤样品。
2 培养基酪素培养基配方如下：葡萄糖0.5gNaCl 5gK2HPO4 0.5gKH2PO4 0.5g干酪素10g蒸馏水1000ml琼脂20gpH 7.5115℃灭菌30min。
一株高产蛋白酶菌株的筛选及其产酶条件(
一株高产蛋白酶菌株的筛选及其产酶条件*林玩庄，林淑娜，陈汶聪，刘荣莲，黄可佳，黄丹敏，谢桂仁，陈宇豹，邓毛程，王瑶，李静广东轻工职业技术学院，广州，510300摘要：为了提高水产行业蛋白质资源的综合利用率，从南海海域大型鱼类的肠道中筛选蛋白酶高产菌株。
采用平板透明圈法和摇瓶发酵法进行筛选，获得一株蛋白酶高产菌株PE11。
通过菌体形态观察、生理生化实验和16S rDNA鉴定，菌株PE11被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。
通过摇瓶发酵试验，优选出可溶性淀粉和牛肉膏分别为最佳的碳源和氮源，并确定菌株PE11产蛋白酶的最佳条件为：温度30 °C、初始pH7.0、转速200 rpm和时间36 h。
在最佳的产酶条件下，发酵液中的蛋白酶活力可达376 U/mL。
关键词：蛋白酶；高产；筛选；产酶条件Study on screening and enzyme-producing conditions of a highprotease producing strainLING Wan-zhuang, LING Shu-Na, CHEN Wen-cong, LIU Rong-lian, HUANG Ke-jia, HUANG Dan-min, XIE Gui-ren, CHEN Yu-bao, DENG Mao-cheng, WANG Yao, LI Jing(Guangdong Industry Technical College, Guangzhou 510300)Abstract：In order to improve the comprehensive utilization rate of protein resources from aquatic industry, strains having the ability to produce protease were isolated and screened from the gastrointestinal tract of large fish of South China Sea. Using flat transparent circle and shake flask fermentation test, a high producing protease strain PE11 was obtained. The strain PE11 was identified as Bacillus amyloliquefaciens through the systematic investigations of morphology, physiological and biochemical characteristics and 16S rDNA sequences analysis. By means of shake flask fermentation tests, the optimal carbon resource and nitrogen resource for strain PE11 were soluble starch and beef extract, respectively. In addition, the best conditions for protease-producing were determined as temperature of 30 °C, initial pH of 7.0 and rotation speed of 200 rpm. At the optimal condition, the highest protease activity of fermentation broth reached 376 U/mL.Key words：protease；high producing；screening；enzyme-producing condition*基金项目：广东高校特色调味品工程技术开发中心建设项目（GCZX-B1103），广东省教育部产学研结合项目（2012B091000040），广东轻工职业技术学院自然科学启动基金项目（KJ201307），广东轻工职业技术学院自然科学启动基金项目（KJ201203）。
蛋白质酶解技术及其应用
蛋白质酶解技术及其应用蛋白质酶解技术是一种通过酶的作用来将蛋白质分解为较小的片段的方法。
这种技术在生物学和生物化学研究中得到了广泛的应用。
本文将介绍蛋白质酶解技术的原理和应用，并探讨其在生物研究领域的重要性。
一、蛋白质酶解技术的原理蛋白质酶解技术是通过酶的特异性作用来将蛋白质分解为较小的肽段或者氨基酸残基。
蛋白质酶是特异性酶，它们在特定的条件下作用于蛋白质分子，将其水解为比较小的片段。
常用的蛋白质酶有胃蛋白酶、胰蛋白酶、丝氨酸蛋白酶和蛇毒蛋白酶等。
每种蛋白质酶都有特定的作用靶点和作用条件。
例如，胃蛋白酶主要作用于具有芳香性氨基酸的肽键，胰蛋白酶则能够识别和水解含有碱性氨基酸的肽键。
二、蛋白质酶解技术的应用1. 蛋白质酶解在蛋白质分析中的应用蛋白质酶解技术在蛋白质分析中起到了至关重要的作用。
通过将蛋白质酶解成一系列肽段，可以方便地进行质谱分析和蛋白质定量。
此外，蛋白质酶解还可用于特定蛋白质的识别和富集，为蛋白质组学研究提供了有效的工具。
2. 蛋白质酶解在药物研发中的应用蛋白质酶解技术在药物研发中扮演着重要的角色。
药物的研发过程中，需要对目标蛋白质进行结构和功能研究。
蛋白质酶解可将蛋白质分解为较小的肽段，有助于进一步了解蛋白质的结构和功能。
此外，蛋白质酶解还可用于药物的靶标识别和筛选，对于药物设计和优化具有重要意义。
3. 蛋白质酶解在食品工业中的应用蛋白质酶解技术在食品工业中有广泛的应用。
例如，酶解大豆蛋白可产生味道浓郁的酱油和豆酱；酶解鱼肉蛋白可用于生产鱼肉酱和鱼丸等食品；酶解牛奶蛋白可制作出口感细腻的酸奶和奶酪等。
4. 蛋白质酶解在环境保护中的应用蛋白质酶解技术在环境保护领域也发挥着重要作用。
例如，通过利用酶类对废水中的污染物进行降解，可以实现废水的净化和回收利用。
此外，蛋白质酶解还可用于生物能源的开发，通过酶解蔗糖等生物质材料，生产出生物能源如生物乙醇。
三、蛋白质酶解技术的前景蛋白质酶解技术以其独特的特异性和高效的分解能力在各个领域得到了广泛的应用，并取得了显著的成果。
酪蛋白酶解物体外抗氧化作用的研究
酪蛋白酶解物体外抗氧化作用的研究胡文琴;王恬;霍永久;张金霞【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2004(025)004【摘要】采用正交试验设计,以羟自由基清除率为衡量指标,筛选三种蛋白酶水解酪蛋白的最佳条件.试验结果表明,木瓜蛋白酶最佳酶解条件为pH7.5,酶浓度8%,温度45℃,反应时间90min,羟自由基清除率为71.28%,与同浓度维生素C、维生素E的清除率差异均不显著(p＞0.05);枯草杆菌蛋白酶(As1.398)最佳酶解条件为pH7.0,酶浓度2%,温度50℃,反应时间90min,羟自由基清除率为68.60%;胃蛋白酶最佳酶解条件为:pH1.4,酶浓度6%,温度37℃,反应时间30min,羟自由基清除率为66.53%.试验发现,不同的酪蛋白酶解物都有抗脂质过氧化作用,最大抑制率为59.28%.【总页数】5页(P158-162)【作者】胡文琴;王恬;霍永久;张金霞【作者单位】南京农业大学动物科技学院,江苏,南京,210095;南京农业大学动物科技学院,江苏,南京,210095;南京农业大学动物科技学院,江苏,南京,210095;南京农业大学动物科技学院,江苏,南京,210095【正文语种】中文【中图分类】R151.2【相关文献】1.牛乳酪蛋白酶解物的分离纯化及抗菌肽乳基料的制备研究 [J], 熊清权;李志成;童伟;郑晓莹;苏晋文;葛武鹏;任娇2.山羊乳酪蛋白酶解物制备及体外抗氧化活性研究 [J], 李志成;蒋爱民;熊清权;童伟;郑晓莹3.酪蛋白酶解物中抗菌肽的抑菌性及稳定性研究 [J], 杜军;袁永俊;侯恩娟;戴斌;胡丽丽;杨攀4.κ-酪蛋白酶解物对双歧杆菌的促生长效果研究 [J], 汤茜;李楠;成雪;毛学英;滕国新5.大米蛋白胃蛋白酶酶解物体外抗氧化作用的研究 [J], 王改琴;朱秋凤;张莉莉;王恬因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
木瓜蛋白酶水解β-酪蛋白膜的动力学研究
木瓜蛋白酶水解β-酪蛋白膜的动力学研究
左起亮;林锋;姚江武
【期刊名称】《口腔医学研究》
【年(卷),期】2011(27)10
【摘要】目的:采用消散因子石英晶体微天平(QCM-D)原位、实时和动态监测木瓜蛋白酶水解β-酪蛋白生物膜的动力学过程,比较不同浓度酶的水解效率。
方法:用β-酪蛋白在QCM-D上建立体外蛋白膜模型,采用不同浓度的木瓜蛋白酶水解膜,观察频率和厚度的改变,运用Boltzmann方程对实验数据进行拟合,单因素方差分析和SNK-q检验比较水解参数B、Δh、V50和C。
结果:随着酶浓度增大,膜的厚度Δh减薄,ΔF上升增多,水解参数B增大,C减小,V50缩短(P<0.05)。
结论:在一定浓度范围内水解蛋白生物膜时,酶的水解效率随浓度增大而提高。
【总页数】3页(P853-855)
【关键词】消散因子石英微天平;木瓜蛋白酶;β-酪蛋白;Boltzmann方程
【作者】左起亮;林锋;姚江武
【作者单位】福建医科大学口腔医学院修复科;福建医科大学厦门市口腔医院修复科
【正文语种】中文
【中图分类】R783.1
【相关文献】
1.木瓜蛋白酶水解制备乳酪蛋白肽工艺条件的研究 [J], 陈新峰;王君虹;洪狄俊;周利亘
2.3种条件下木瓜蛋白酶水解唾液膜的动力学和形态学研究 [J], 姚江武;林锋;左起亮
3.木瓜蛋白酶水解对β-酪蛋白膜的润湿性和构象的影响 [J], 姚江武;左起亮;林峰
4.木瓜蛋白酶水解对β-酪蛋白膜的形态和黏弹性的影响 [J], 张怡;姚江武
5.消散石英晶体微天平对木瓜蛋白酶水解唾液膜的动力学研究 [J], 李水根;林志明;姚江武
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