二十种常见实验动物模型

合集下载

动物医学专业的实验动物模型与研究方法

动物医学专业的实验动物模型与研究方法

动物医学专业的实验动物模型与研究方法动物医学是一门研究动物生理、病理和药物治疗等方面的学科,而实验动物模型是在此领域中广泛应用的一种工具。

本文将介绍动物医学专业中常用的实验动物模型及其相关研究方法。

一、大鼠(Rat)大鼠是最常用的实验动物之一,其体型适中、繁殖力强、易于饲养和管理,并且具备较高的遗传稳定性,使其成为广泛应用于动物医学研究的理想模型。

在临床研究中,常用大鼠模型研究治疗药物的效果、疾病机制的探究以及手术操作的训练等。

二、小鼠(Mouse)小鼠是另一个常用的实验动物模型,其基因组与人类相似度较高,使其成为研究人类疾病发生机制和治疗方法的重要工具。

小鼠模型广泛应用于药物筛选、疾病模拟、基因功能研究等方面。

不仅如此,小鼠的生命周期短、易于培育和繁殖,也成为其被广泛应用于动物医学实验中的原因之一。

三、猪(Pig)猪作为大型哺乳动物,在体型、解剖结构以及药物代谢等方面与人类更为接近,因此在某些研究领域中,猪也是极为重要的实验动物模型。

在外科手术、器官移植、创伤模拟等研究中,猪模型的应用能够更准确地预测人体的反应和疗效,因此其在动物医学研究中的地位不可忽视。

四、绵羊(Sheep)绵羊是另一种常用的大型实验动物模型,其体型、恒温机制和某些生理特征与人类较为相似。

绵羊模型广泛应用于心脑血管疾病、生殖医学、癌症研究等方面。

由于绵羊的心血管系统与人体更为接近,因此在心血管病理机制及药物研究方面的应用具有重要意义。

五、猴(Monkey)猕猴、恒河猴等灵长类动物在动物医学研究中也扮演着重要的角色。

研究发现,由于灵长类动物与人类基因结构、解剖和生理方面具有更高的相似度,因此猴模型在神经学、免疫学、疫苗研究等领域具有不可替代性。

除了实验动物模型的选择,研究方法的合理应用也是动物医学研究的关键之一。

1. 细胞培养法细胞培养法是一种常用的体外实验方法,通过将动物的细胞分离培养,可以研究细胞的生长、分化和药物效应等。

实验动物学——第七章动物模型

实验动物学——第七章动物模型
3.抗疾病型动物模型(Negative Animal Model) 抗疾病型动物模型是指特 定的疾病不会在某种动物身上发生,从而可以用来探讨为何这种动物对该疾病有 天然的抵抗力。如哺乳动物均易感染血吸虫病,而居于洞庭湖流域的东方田鼠却 不能复制血吸虫病,因而可用于血吸虫感染的机制和抗病的研究。
4.生物医学动物模型(Biomedical Animal Model) 生物医学动物模型是指利 用健康动物生物学特征来提供人类疾病相似表现的疾病模型。兔甲状旁腺分布比 较分散,位置不固定,有的附着在主动脉弓附近,摘除甲状腺不影响甲状旁腺功 能,是摘除甲状腺实验较理想的动物模型;如沙鼠缺乏完整的基底动脉环,左右 大脑供血相对独立,是研究中风的理想动物模型;鹿的正常红细胞是镰刀形的, 多年来被供作镰刀形红细胞贫血研究;兔胸腔的特殊结构用于胸外手术研究比较 方便。但这类动物模型与人类疾病存在着一定的差异,研究人员应加以分析比较。
诱发性动物模型的特点在于制作方法简便,实验条件容易控制,复制的模型 符合研究目的,短时间内可以复制大量的动物模型,特别适用于药物筛选。但其 不足之处是诱发性动物模型与自然疾病存在着某些不同,例如诱发性肿瘤与自发 性肿瘤对抗癌药物的敏感性不同。而且有些人类疾病不能用人工方法诱发成功。
2.自发性动物模型(Spontaneous Animal Model) 自发性动物模型是指实验 动物未经任何人工处置,动物自然发生的疾病,或由于基因突变,通过遗传育种 保留下来的动物模型。主要包括突变系的遗传疾病模型和近交系的肿瘤疾病模 型。
(1)遗传疾病动物模型。 突变系的遗传疾病很多,可分为代谢性疾病、分子 性疾病、特种蛋白合成异常性疾病等,如裸鼠、肥胖小鼠、高血压小鼠等。
(2)肿瘤疾病动物模型。 近交系肿瘤动物模型随实验动物种属、品种不同, 肿瘤的发生类型和发病率有很大差异。

常用实验动物模型

常用实验动物模型

【模型评价】
EMP实验利用啮齿类动物对新异环境的探究特性和对高悬敞开 臂的恐惧心理,形成矛盾的心理应激,较好地模拟了焦虑样症状。 该模型操作简单,能够简单直观地反映动物的焦虑状态,是一种 较为成熟经典的焦虑动物模型。
2.创伤后应激障碍(PTSD)
【实验动物】
雄性SD大鼠,200g左右。
【操作方法】
【操作方法】
大鼠每日腹腔注射D-半乳糖400mg/kg,连续8周;小鼠每日 颈背部皮下注射D-半乳糖溶液120mg/kg,连续注射6~8周 (各报道略有不同)。
【模型评价】
使用Morris水迷宫,染色及生化指标等,可测试出该模型小鼠 的学习和记忆缺陷、胆碱能系统变化,以及脑组织神经元的丢失 和线粒体膨胀呈空泡样变性的现象,这与老年动物的生理表现一 致。该模型造价低廉、操作简便、可重复性高、模拟损伤较为全 面。
结扎左侧颈总动脉,同时从右侧颈总动脉放血,可选择在放血 后30min、60min、90min及120min解除左侧颈总动脉结扎, 同时结扎右侧颈总动脉停止放血。可将放出的血液经股静脉输回 体内,以继续观察。
【模型评价】
本手术全部在直观下进行,一边从右侧颈动脉放血,一边将放 出的血液从股静脉输入,既能直接观察,又能方便地控制分流量 和速度,较为实用。
【操作方法】
测试前把动物放于盛水玻璃缸中游泳15min,要确保动物不能 逃脱。15min后将动物取出置于加热的环境(32℃)中干燥 15min,再放回各自的笼子。24h后再次将动物分别放入水缸中, 强迫游泳6min。当动物停止挣扎漂浮在水中,只做必要的轻微 动作保持头在水面上的时候,被认为是不动。记录后4min的不 动时间。在抑郁症的药理学和行为学的干预存在下不动时间将会 明显减少。

医药实验常用动物模型及特殊实验技巧

医药实验常用动物模型及特殊实验技巧
泪、视网膜、脉络膜、虹膜
大鼠颈静脉、十二指肠双插管模型(JVC&DC)
大、小鼠神经采集
大、小鼠视神经损伤模型
荷瘤鼠实验、肿瘤原位构建或移植模型(PDOX 模型)
大鼠心肌缺血再灌注
活体成像;荷瘤鼠活体成像实验
犬、大鼠:血清、血浆(K2抗凝)、胆汁
大、小鼠尾静脉插管infusion及其样品采集
大鼠颈动脉插管模型(CAC)
大、小鼠足背静脉给药及尾静脉采血
大鼠股静脉插管模型(FVBiblioteka )大、小鼠下颌静脉连续微量采血
大鼠肝门静脉插管模型(PVC)
大、小鼠perfusion及其脏器采集
大鼠十二指肠插管模型(DC)
大鼠、小鼠、家兔的CSF采集
大鼠胆管插管模型(BDC)
戊四唑惊厥(抗惊厥)
绝经期抑郁症
坐骨神经结扎
鱼藤酮诱导帕金森模型
癫痫模型
大、小鼠视神经损伤模型
内分泌及代谢性疾病模型
STZ诱导诱导I型糖尿病
STZ、高脂饲料诱导诱导II型糖尿病
高尿酸血症
IgA大鼠肾病
毒理试验
啮齿类急性毒性试验
啮齿类亚急毒试验
专业模型动物以及特殊技术服务
模型动物
特殊技术服务
大、小鼠颈静脉插管模型(JVC)
大、小鼠胆汁/粪便/尿液等代谢产物的收集
大鼠淋巴插管模型(LVC)
大、小鼠鼻腔滴注实验
大鼠颈静脉、股静脉双插管模型(JVC&FVC)
大、小鼠空肠局部给药实验
大鼠颈静脉、肝门静脉双插管模型(JVC&PVC)
大、小鼠胶囊灌胃实验(肠溶,含进口仪器及胶囊)
大鼠颈静脉、颈动脉双插管模型(JVC&CAC)

100例动物仿生设计

100例动物仿生设计

100例动物仿生设计1. 鸟类仿生设计: 高效飞行机器人2. 蜘蛛仿生设计: 粘性爪足机器人3. 蚂蚁仿生设计: 自组织机器人4. 萤火虫仿生设计: 光控灯具5. 海豚仿生设计: 水下机器人6. 蝴蝶仿生设计: 自由飞行机器人7. 蛇仿生设计: 灵活机器人8. 熊猫仿生设计: 可爱智能玩具9. 蚊子仿生设计: 无声风扇10. 马仿生设计: 高速交通工具11. 蝙蝠仿生设计: 夜视装置12. 鲸鱼仿生设计: 海洋清扫机器人13. 孔雀仿生设计: 装饰性顶盖材料14. 毛毛虫仿生设计: 移动机器人15. 蜜蜂仿生设计: 自动采蜜机器人16. 鳄鱼仿生设计: 机器人底盘设计17. 猫仿生设计: 柔软机器人控制技术18. 蝴蛾仿生设计: 高效光伏电池板19. 蟋蟀仿生设计: 超声波传感器20. 螃蟹仿生设计: 自适应机器人手爪21. 蜘蛛猴仿生设计: 灵活运动机器人22. 火箭虾仿生设计: 水下推进器23. 刺猬仿生设计: 防爆材料24. 马鞍螺仿生设计: 软体机器人25. 犀牛仿生设计: 装甲车设计26. 鳄鱼皮仿生设计: 防水涂层材料27. 珊瑚仿生设计: 高效过滤装置28. 蝠鲼仿生设计: 高效船体设计29. 雏菊仿生设计: 生态建筑设计30. 百灵鸟仿生设计: 声学材料31. 乌龟仿生设计: 增强型防护壳32. 海胆仿生设计: 自动清洁机器人33. 孔雀蛇仿生设计: 弯曲性传感器34. 蜜蜂虾仿生设计: 微型水下探测器35. 海星仿生设计: 粘附材料36. 姬鱼仿生设计: 水下通信设备37. 猫头鹰仿生设计: 高清红外摄像机38. 刺鼠仿生设计: 防刺高温手套39. 瓢虫仿生设计: 粘性抓取机器人40. 螳螂仿生设计: 自动调整机器人身体41. 象鼻虫仿生设计: 抓取动作优化机器人42. 长颈鹿仿生设计: 高空工作机器人43. 青蛙仿生设计: 弹性跳跃机器人44. 蜜蜂猴仿生设计: 树木攀爬机器人45. 蚌仿生设计: 高强度材料46. 蛤蜊仿生设计: 水下钻探机器人47. 信天翁仿生设计: 高效蓄电池技术48. 鲸鱼胸骨仿生设计: 高张力建筑材料49. 星鼠仿生设计: 灵敏的机器人眼睛50. 海狮仿生设计: 水下侦查机器人51. 雄鹿角仿生设计: 高强度骨材料52. 盾虫仿生设计: 自动消防机器人53. 海豚耳朵仿生设计: 高灵敏度声波传感器54. 比目鱼仿生设计: 底部清扫机器人55. 青蛙腿仿生设计: 弹性跳跃机器人56. 飞鱼仿生设计: 高速水中滑翔机器人57. 斑马仿生设计: 捷足先登的机器人腿部设计58. 圆蛛仿生设计: 高强度特种丝材料59. 雁形飞行仿生设计: 群体飞行机器人60. 灾难蜡螟仿生设计: 原子力反应堆核辐射检测机器人61. 狒狒臀部仿生设计: 进阶型机器人底盘设计62. 神鹿仿生设计: 高武器系统装甲设计63. 地瓜田鼠仿生设计: 土块剥离动作优化机器人手臂64. 狐狸仿生设计: 植物生物感应器件65. 信天翁洗澡行为仿生设计: 水上清洁机器人66. 后拖鱼仿生设计: 极速水面滑行机器人67. 海带藻仿生设计: 太阳能电池板68. 燕子核心仿生设计: 灵活紧凑安全电瓶包69. 梅花鹿仿生设计: 目标检测与跟踪系统设计70. 萤虫尾巴仿生设计: 高亮度照明系统设计71. 浪花翼仿生设计: 高稳定运动控制系统设计72. 雨燕翅膀仿生设计: 高效升力翼型设计73. 狐狸耳朵仿生设计: 高灵敏度声音刺激传感器设计74. 壁虎趾端仿生设计: 高粘附力摩擦材料设计75. 鸳鸯种羽仿生设计: 羽翼颜色变化机制设计76. 热带鱼尾巴仿生设计: 高灵活性水下推进系统设计77. 七彩鸟喉管仿生设计: 高保真声音发射器件设计78. 鳄鱼皮纹仿生设计: 高稳定性摩擦防滑面设计79. 高傲公牛头角仿生设计: 高耐压碰撞材料设计80. 鸵鸟腿部仿生设计: 高刚性高柔韧动力传输设计81. 鱼鳞片层仿生设计: 高灵敏度压力传感系统设计82. 玲珑蜗牛壳仿生设计: 高强度材料83. 螳螂虾钳部仿生设计: 高力保持高速振动剪断系统设计84. 野猪皮毛仿生设计: 高耐磨、高阻尼振动吸收体设计85. 蟾蜍吸盘趾端仿生设计: 高粘附力、高稳定附着体设计86. 蜡螟亮光引诱行为仿生设计: 高功率、大范围、高安全红外波段激光发射设备设计87. 鹦鹉嘴部仿生设计: 高灵敏度、高耐用性声音、触摸、颜色识别传感器设计88. 长腿鹬蚌足部仿生设计: 高远距离、高精度动力传输与定位系统设计89. 熊猫大眼仿生设计: 高感光度、高分辨率、超广角监控影像传感器设计90. 巴布亚毒蛙皮肤仿生设计: 高化学品清洁能力、高抗紫外线诱变性材料设计91. 秘鲁蓝螳螂翅膀仿生设计: 高稳定紧凑卷曲柔性整平翅膀设计92. 丹尼尔汤姆逊仿生设计: 高抗压衬垫材料93. 缅甸天鹅粳稻仿生设计: 高产性、高耐盐碱地稻种设计94. 特罗索瓦尔传感行为仿生设计: 高帧率、高清晰度、自适应设计95. 牙脂鱼雷舰、救援仿生设计: 高速潜航、高载重、自修复材料设计96. 南极海冰王仿生设计: 高稳定性、高沉降速度、低海底地会材料设计97. 纹饰盾甲游击队仿生设计: 高强度、高韧性、高可调节冰、石子、球体防护材料设计98. 阿尔巴尼亚包层蜂巢电源仿生设计: 高容量、高输出、无线充电电池设计99. 玫瑰鹿长喉口鼻部仿生设计: 高无线电接收性能、高传感性、高体积、高定位精确度传感器设计100. 金头挂科蛤组织仿生设计: 高透明度、高防摔、高适应性蓝光屏材料设计。

二十种常见实验动物模型

二十种常见实验动物模型

二十种常见实验动物模型一、缺铁性贫血动物模型缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA)是体内用来合成血红蛋白(HGB)的贮存铁缺乏,HGB合成减少而导致的小细胞低色素性贫血,主要发生于以下情况:(1)铁需求增加而摄入不足,见于饮食中缺铁的婴幼儿、青少年、孕妇和哺乳期妇女.(2)铁吸收不良,见于胃酸缺乏、小肠粘膜病变、肠道功能紊乱、胃空肠吻合术后以及服用抗酸和H2受体及抗剂等药物等情况.(3)铁丢失过多,见于反复多次小量失血,如钩虫病、月经量过多等.IDA是一种多发性疾病,据报道,在多数发展中国家,约2/3的儿童和育龄妇女缺铁,其中1/3患IDA,因此,研究IDA的预防和治疗具有重要的意义.在这些研究中,缺铁性贫血的动物模型(Animal model of IDA),又是实施研究的基础工具.常见的IDA动物模型的构建技术如下:实验动物:一般选用SD大鼠,4周龄,雌雄不拘,体重65g左右,HGB≥130g/L。

建模方法:低铁饲料加多次少量放血法。

低铁饲料一般参照AOAC 配方配制,采用EDTA浸泡处理以去除饲料中的铁,饲料中的含铁量是诱导SD大鼠形成缺铁性贫血模型的关键,现有研究表明,饲喂含铁量<15。

63mg/Kg的饲料35天,SD大鼠出现典型IDA表现,而饲喂含铁40。

30mg/Kg的饲料SD大鼠出现缺铁,但并不表现贫血症状。

建模时一般采用去离子水作为动物饮水,以排除饮水中铁离子的影响。

少量多次放血主要用于模拟反复多次小量失血导致的铁丢失,还可以加速贫血的形成。

放血一般在低铁饲料饲喂2周后进行,常用尾静脉放血法,1~1.5ml/次,2次/周。

模型指标:(1)HGB≤100g/L;(2)血象:红细胞体积较正常红细胞偏小,大小不一,中心淡染区扩大,MCV减小、MCHC降低;(3)血清铁(SI)降低,常小于10μmol/L,血清总铁结合力(TIBC)增高,常大于60μmol/L。

常用实验动物介绍ppt课件

常用实验动物介绍ppt课件
小鼠的使用: Robert Hooke: 1664, studied of the properties of air.
现代小鼠: • William Castle • Abbie Lathrop 1. Clarence C. Little,
小鼠的生物学特性及选择应用
一、生物学特性和解剖生理特点 小鼠属于脊椎动物门,哺乳纲,啮齿目,鼠科; 成熟早,世代间隔短,繁殖力强(6-15,6-9胎) 体形小,易于饲养管理;
二、小鼠的选择
1.首先要考虑小鼠是否符合国家标准. 2.按照实验目的和要求来选择. 3.不同季节和昼夜不同时间,动物机体反应性有一定
改变. 4.不同种、同种而不同品系的小鼠对同一实验处理反
应有很大差别.
5.年龄应尽可能一致,体重应大致相近,一般不应相 差10%。
6.小鼠性别,在实验研究中,如无特殊要求,一般宜 雌雄各半,以避免由于性别差异而造成的误差。有 些药物的作用不受性别影响,则可不分雌雄,任意 迭用一种性别。
(1)Wistar:1907年由美国Wistar研究所育成,使用 数量最多,遍及全世界。头部较宽。该种群性周期稳 定,繁殖力强,产仔多,生长发育快,性情温顺,对 传染病的抵抗力较强,自发肿瘤发生率低。
(2)SD:头部狭长,抗病能力尤以对呼吸系统疾病 的抵抗力强。自发肿瘤率较低。对性激素感受性高。 常用作营养学、内分泌学和毒理学研究。
常用实验动物
小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠(仓鼠)、兔、 犬、猴、猪
重点学习内容
生物学特性和解剖生理特点 主要品种和品系 在生物医学研究中的应用
小鼠 Mouse (Mus musculus)
实验小鼠起源
实验小鼠的前身: The oldest Chinese lexicon written in 1100 BC has a word for spotted mice. Interest gradually spread to the West,via the imperial courts of Japan.

模式动物

模式动物

一、果蝇中文学名:果蝇别称:fruit fly二名法:Drosophila melanogaster 界:动物界门:节肢动物门纲:昆虫纲亚纲:有翅亚纲目:双翅目亚目:长角亚目、短角亚目科:果蝇科属:果蝇属种:果蝇分布区域:全球温带及热带气候区节肢动物门、昆虫纲、有翅亚纲、双翅目、长角亚目、短角亚目、果蝇科、果蝇属、果蝇种优点:作为实验动物,果蝇有很多优点。

首先是饲养容易,第二是繁殖快。

果蝇只有四对染色体,数量少而且形状有明显差别;果蝇性状变异很多,比如眼睛的颜色、翅膀的形状等性状都有多种变异,这些特点对遗传学研究也有很大好处。

果蝇具有生活周期短、容易饲养、繁殖力强、染色体数目少而易于观察等特点,因而是遗传学研究的最佳材料。

用果蝇的染色体巨大且易于进行基因定位,尤其是成熟幼虫唾腺中最大的染色体,研究遗传特性和基因作用的基础。

研究:科学家不仅用果蝇证实了孟德尔定律,而且发现了果蝇白眼突变的性连锁遗传,提出了基因在染色体上直线排列以及连锁交换定律。

摩尔根1933年因此被授予诺贝尔奖。

1946年米勒证明X射线能使果蝇的突变率提高150倍,因而成为诺贝尔奖获得者。

一九七○年开始人们发现果蝇在胚胎发育图式的构建中具有特殊地位:它由14 个体节构成的躯干完全对称,一套基因控制了这些体节从上到下的发生过程,后来的研究证明,这套基因普遍存在于从昆虫到人的基因组中,是决定机体左右对称布局形成的最基本元素。

在近代发育生物学研究领域中,果蝇的发生遗传学独领风骚。

1995年,诺贝尔奖再次授予三位在果蝇研究中辛勤耕耘的科学家。

果蝇为进一步阐明基因-神经(脑)-行为之间关系的研究提供了理想的动物模型。

二、线虫nematode亦称圆虫(roundworm)。

线虫动物门(Aschelminthes)线虫纲(Nematoda)所有蠕虫的通称。

线虫种类繁多,为害家畜的线虫分属于杆形目、圆形目、蛔虫目、尖尾目、旋尾目、丝虫目、毛首目、膨结目和驼形目。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

二十种常见实验动物模型一、缺铁性贫血动物模型缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA)是体用来合成血红蛋白(HGB)的贮存铁缺乏,HGB合成减少而导致的小细胞低色素性贫血,主要发生于以下情况:(1)铁需求增加而摄入不足,见于饮食中缺铁的婴幼儿、青少年、孕妇和哺乳期妇女。

(2)铁吸收不良,见于胃酸缺乏、小肠粘膜病变、肠道功能紊乱、胃空肠吻合术后以及服用抗酸和H2受体及抗剂等药物等情况。

(3)铁丢失过多,见于反复多次小量失血,如钩虫病、月经量过多等。

IDA是一种多发性疾病,据报道,在多数发展中国家,约2/3的儿童和育龄妇女缺铁,其中1/3患IDA,因此,研究IDA的预防和治疗具有重要的意义。

在这些研究中,缺铁性贫血的动物模型(Animal model of IDA),又是实施研究的基础工具。

常见的IDA动物模型的构建技术如下:实验动物:一般选用SD大鼠,4周龄,雌雄不拘,体重65g左右,HGB≥130g/L。

建模方法:低铁饲料加多次少量放血法。

低铁饲料一般参照AOAC 配方配制,采用EDTA浸泡处理以去除饲料中的铁,饲料中的含铁量是诱导SD大鼠形成缺铁性贫血模型的关键,现有研究表明,饲喂含铁量<15.63mg/Kg的饲料35天,SD大鼠出现典型IDA表现,而饲喂含铁40.30mg/Kg的饲料SD大鼠出现缺铁,但并不表现贫血症状。

建模时一般采用去离子水作为动物饮水,以排除饮水中铁离子的影响。

少量多次放血主要用于模拟反复多次小量失血导致的铁丢失,还可以加速贫血的形成。

放血一般在低铁饲料饲喂2周后进行,常用尾静脉放血法,1~1.5ml/次,2次/周。

模型指标:(1)HGB≤100g/L;(2)血象:红细胞体积较正常红细胞偏小,大小不一,中心淡染区扩大,MCV减小、MCHC降低;(3)血清铁(SI)降低,常小于10μmol/L,血清总铁结合力(TIBC)增高,常大于60μmol/L。

需要指出的是,以上模型不能用于铁吸收不良相关IDA的防治研究。

根据具体的研究需要,也可以适当调整建模方法。

二、白血病动物模型用免疫耐受性强的人类胎儿骨片植入重症联合免疫缺陷病(SCID)小鼠皮下,出于人类造血细胞与造血微环境均植入小鼠,建立具有人类造血功能的SCID小鼠模型称为SCID-hu小鼠。

再将髓系白血病患者的骨髓细胞植入SCID-hu小鼠皮下的人类胎儿骨片,植入的髓系白血病细胞选择性生长在SCID-hu小鼠体的人类造血微环境中,即为人类髓系白血病的小鼠模型。

SCID小鼠是由于其scid所致。

T、B 淋巴细胞功能联合缺陷,这种小鼠能接受人类器官移植物。

造模方法:(1) SCID-hu小鼠:CB-17 scid/scid 繁殖的近交小鼠(SCID),6~8周龄时用抗生素处理。

在无菌条件下,从19~23 妊娠周龄的胎儿取出股骨和胫骨,剪成5mm×5mm×l0mm的骨片,植入SCID小鼠皮下,并从每个胎儿供体制备胸腺细胞用于检测同种异体HLA。

(2) 白血病细胞注射:急性髓性白血病患者骨髓细胞(0.4~2) ×104个活细胞(常用冻存解冻后的细胞)悬浮于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液20 d,用微注射器将细胞悬液直接注射人6~8周前植入SCID-hu小鼠的人胎骨片。

选择移植骨与白血病细胞的供体是HLA同种异型,便于追踪人肋骨移植片中细胞的来源。

白血病细胞的体传代:将已生长有白血病细胞的骨移植片再制备细胞悬液,取(0.5~2)×106个活细胞,注入第2个SCID-hu受体小鼠的移植骨片。

处理小鼠MHC-I(主要组织相容性复合体I类)抗原的单抗,直接与染料荧光素异硫氰化物或藻红蛋白结合,用流式细胞仪将细胞分类并分析细胞来源。

胎骨植入后2~3周时,骨片有坏死与纤维化,CFU-GM与BFU -E减少,未见造血中心;移植4~5周时,骨片出现由淋巴系与未成熟的髓系细胞组成的造血中心;6~8周后,植入胎骨片结构与正常胎儿造造血骨髓类似,并能维持正常造血达20周。

用MEM-43(人类细胞抗原的特异抗体)与Ly5.1(小鼠血细胞的特异抗体)检测,植入骨片的细胞中人类细胞占70%以上,而小鼠细胞仅占5%~20%。

胎儿骨片的人类基质细胞可刺激人的造血干细胞的增殖与分化,以维持正常造血。

将人的急性髓性白血病细胞注入SCID-hu小鼠的一块胎骨片,4~6周后,胎儿骨片的正常造血细胞被急性白血病细胞的增殖所取代,而且还选择性地转移到植入的其他胎骨片。

该模型是人类白血病细胞生长在小鼠体的人类造血微环境中,因此能更精确地用来研究人类自血病发病机制与对新疗法的评价,是目前研究白血病的最佳动物模型。

该模型的建立原理与方法也适用于其他白血病与恶性肿瘤动物模型的建立。

但应注意植入小鼠的胎儿骨片与成人骨舱造血钉些不同。

三、支气管哮喘动物模型支气管哮喘是一种由肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T细胞等参与的慢性气道炎症,伴有气道反应性增高及结构重建的疾病。

对于敏感的人群,这种炎症引起喘鸣反复发作、呼吸困难、胸闷和咳嗽,尤其好发于夜间或清晨。

这些症状常与广泛而有变动的气道阻塞相关,也可因气道对某些刺激物反应性增高而发生。

国目前使用的动物模型多数是卵蛋白致敏的豚鼠哮喘模型,卵蛋白作为致敏原进入动物体后,其可溶性抗原成分可以刺激机体产生IgE抗体,使机体致敏。

当动物再次接触卵蛋白时,由IgE介导发生抗原抗体反应,使炎症细胞脱颗粒,释放活性化学物质,作用于支气管引起哮喘。

实验对象:雄性豚鼠建模方法:1.抓取豚鼠,腹腔注射10%卵清蛋白1ml/只致敏(由实验技术室老师在实验进行前15天预先注射)。

2.致敏后第15天,雾化吸入1%卵清蛋白(最好是当天配制)60s激发,观察动物呼吸和一般情况,有无咳嗽、呼吸加深加快、烦躁不安等症状。

随后继续吸入10~30min,直至出现上述症状为止。

3.把动物放入含5g钠石灰的缺氧瓶中,用凡士林涂在瓶塞周围,塞紧瓶塞,连通水银检压计。

记录时间和室温度,每隔3min 记录水银面刻度1次,直至动物死亡。

记录死亡时间,计算出耗氧率。

4.迅速从缺氧瓶中取出动物,仰卧固定在大鼠手术台上。

在颈部正中做切口,用止血钳分离气管周围组织,下面穿线备用。

在气管甲状软骨下作倒“T”字型切口,插入连接三通管的气管插管并结扎固定。

5.用注射器抽取生理盐水4ml,从气管插管的三通管处注入肺部,改变豚鼠体位,尽可能使生理盐水冲洗到每一肺叶。

然后回抽,收集支气管-肺泡灌洗液。

6.将收集到的BALF放入小试管,2000r/min×5min离心。

弃去上清,用1ml生理盐水重新溶解沉淀,并轻轻摇晃混匀,进行白细胞和嗜酸性粒细胞计数。

观察指标:1.观察动物呼吸情况和一般状况,有无呼吸加深加快、咳嗽、呼吸困难和烦躁不安等。

2.BALF中白细胞和嗜酸性粒细胞计数。

3.测定豚鼠耗氧量。

四、感染性休克动物模型常见的感染性休克是由革兰氏阴性杆菌感染引起并通过大量产生的毒素导致休克。

本实验通过静脉注射毒素,导致动物急性感染性休克。

实验对象:家兔建模方法:1.抓取家兔并称重,3%戊巴比妥钠1ml/kg耳缘静脉麻醉,仰卧固定在家兔手术台上。

2.剪去颈部被毛,作颈正中切口,分离气管,做气管插管。

分离右侧颈总动脉和左侧颈外静脉,穿线备用。

3. 剪去下腹部被毛,切开皮肤,沿腹白线打开腹腔。

暴露膀胱,分离两侧输尿管,结扎尿道口并进行膀胱插管,连接上记滴器。

打开电脑,启动BL-420E生物机能记录系统,选择实验模块:“泌尿实验”中的“影响尿生成的因素”,进行每分钟尿量记滴。

4.从耳缘静脉注入1%肝素1ml/kg,进行全身肝素化。

5.在右侧腹直肌旁做纵形切口,钝性分离肌肉,打开腹腔。

将一段游离度较大的回肠袢轻轻拉出,平展于事先已注入37℃生理盐水的观察微循环的恒温灌流盒,用显微镜观察肠系膜微循环。

6.进行右侧颈总动脉插管,连接BL-420E生物机能系统1通道,记录血压。

7.进行左侧颈外静脉插管,插管约插入5~6cm。

通过三通管连接压力传感器,如果观察到压力数值降为负值且随呼吸上下波动,记录数值,为中心静脉压。

三通管另一侧连接静脉输液装置。

稳定5min,记录一段正常各项指标。

8.静脉注射精制毒素(E coli0111B4)1ml/kg或粗制毒素(灭活的大肠杆菌E)8000亿细菌/kg,观察并记录注射后5min、10min、15min、20min、30min、60min各指标变化。

9.60min后,快速从静脉输入生理盐水20ml/kg,并在生理盐水中加入654-25mg/kg,观察并记录各指标变化。

观察指标:呼吸频率与幅度、血压、皮肤粘膜颜色和小血管、中心静脉压、尿量、肠系膜微循环(包括:微循环中微血管的流速,口径和每个低倍镜视野下开放的毛细血管数目)。

五、肝硬化动物模型选体重150-200g的Wistar大鼠,将D-氨基半乳糖配制成10%的生理盐水溶液,用1NNaOH将pH调节至7.0,以250mg/kg的剂量行腹注射,每天一次,每周6天,约半年左右即可形成肝硬化。

在复制过程中,自股动脉取血作肝功能试验,包括血清蛋白测定、浊度试验、转氨酶、乳酸脱氢酶(LDH)、单胺氧化酶(MAO)、5'-核苷酸酶(5'-NA)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)及胆硷酯酶。

分批处死动物进行尸解,观察腹水,心、肝、脾、肺肾等器官形态,用4%甲醛溶液固定,石蜡包埋,切片厚5微米,进行HE、网状纤维(Gordon与Sweet法)、胶原纤维(Van Gieson法)及弹力纤维(Weiger法)染色。

在采用上述剂量D-氨基半乳糖长期多次注入大鼠腹腔时,动物耐受性较好。

逐渐出现进食活动减少,有时解稀糖大便,腹部较为膨隆。

半年与对照组相比,实验组体重平均增长显著延缓。

尸检时可见腹腔有腹水,0-20ml不等。

心、脾、肺、肾、无明显改变。

与对照组相比,早期肝明显增大、重量增加,色泽较灰黄,以后体积逐渐缩小,质地变硬,边缘较钝,肝表面可见弥漫性分布的细颗粒状结节,结节大小不一,直径约为0.5-1.5mm,结节间可见弥漫分布的纤维间隔,间隔一般较细小,其凹凸程度随病变而加深。

切片HE 染色、光镜下检查,在注射氨基半乳糖5个月后,肝小叶结构开始紊乱,形成大小不等的肝细胞团,有的仍见好的中央静脉,但其周围门脉区胆管上皮高度增生,其间夹有残留的个别肝细胞及少量单核多核白细胞及褐色素沉着。

随着病程的延长,增生的胆管及纤维母细胞向四周呈星芒状伸展,有的与中央静脉相连。

一般肝细胞变性坏死少见,大多呈增生表现。

Gordon与Sweet法染色显示肝细胞团中网状纤维少见而周围组织中存在着大量疏松的网状纤维。

胶原纤维及弹性纤维均未见增多。

相关文档
最新文档