常见的微生物消毒与灭菌方法
微生物学第三章消毒与灭菌(共60张PPT)
介质的性质
细菌在非水介质中，比水作介质时对热 的抵抗力大
水分、2~4℃石炭酸、油类、干焦空气
不同介质对微生物抗热力的影响
2、低温抑菌法
低温可降低微生物代谢的速度。 大多数微生物对低温有很强的抵抗力 一般的：4-10℃ 淋球菌、脑膜炎球菌、流行感冒杆菌敏感，
伤寒杆菌、白喉杆菌耐低温 冷冻干燥：采用迅速冷冻和抽真空除水。
消毒（Disinfection）：杀灭物体上的病原微生物的方法，
叫消毒。消毒只要求达到消灭传染性的目的，而对非病原微 生物及其芽孢、孢子并不严格要求全部杀死。
防腐(Antisepsis)或抑菌：指阻止或抑制物品上微生物 生长繁殖的方法，微生物不一定死亡。
无菌（asepsis）：指没有活的微生物的状态。
夜培养，残余的芽孢发芽为繁殖体；
第三天：100℃-30分钟，杀死所有微生物。
巴氏消毒法
常用于牛乳及一些饮料
最大限度地消灭病原体，尽可 能少地损害食品的营养物质
•低温维持巴氏消毒法（LTH)： •63～65℃-30分钟； •高温短时间巴氏消毒法(HTST):
•71～72℃-15秒， •超高温巴氏消毒法(UHT): •132℃-1～2秒
•巴氏消毒法
•高压蒸气灭菌法
干热灭菌法
火焰灭菌法
以火焰直接灼烧杀死物 体中的全部微生物的方 法。
灼烧 焚烧
酒精灯
热空气灭菌法
适用于高温下不损坏、 不变质的物品，需在 160℃维持1－2小时，才
能达到杀死所有微生物 及其芽孢、孢子的目的。
干烤箱
湿热灭菌法
煮沸灭菌
100℃，煮沸10～20分钟，可杀死所有细 菌繁殖体，芽孢常需煮沸1－2h才能杀死。
噬菌体（phage）：是指寄生于微生物 （细菌、霉形体、螺旋体、放线菌以及 蓝细菌等）中的病毒。
消毒和灭菌的区别以及常用的消毒、灭菌方法
消毒和灭菌两个词在实际使用中常被混用，其实它们的含义是有所不同的。
消毒是指应用消毒剂等方法杀灭物体表面和内部的病原菌营养体的方法，而灭菌是指用物理和化学方法杀死物体表面和内部的所有微生物，使之呈无菌状态。
物理方法1温度利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。
高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。
1)干热灭菌法：a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。
此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。
b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160℃，恒温1小时即可。
此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。
2)湿热灭菌法：在同样的温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。
另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。
a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。
该法一般在62℃，30分钟即可达到消毒目的。
此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。
b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。
若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。
此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。
c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做到完全无菌。
若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。
具体做法是：将待灭菌的物品加热至100℃，15~30分钟，杀死其中的营养体。
然后冷却，放入37℃恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。
第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的。
食用菌灭菌常用方法
食用菌灭菌常用方法食用菌灭菌是指通过一系列处理方法，将食用菌种植环境中的有害微生物进行有效杀灭，以保证食用菌的安全和生长品质。
食用菌灭菌常用的方法有：1. 高温灭菌法：高温是一种常见的有效灭菌方法。
在菌棒生产中，可以使用高温箱将菌棒置于高温环境中进行灭菌。
常见的高温处理温度为60-80摄氏度，持续处理时间为2-4小时。
这种方法能够有效地杀灭霉菌、细菌和一些寄生虫，但对于孢子形式的病原菌可能效果较差。
2. 高压灭菌法：高压处理是一种常见的有效灭菌方法。
通过将食用菌种植基质置于高压容器中，进行高压处理，可以有效地杀灭各类微生物。
常见的高压处理条件为3-10兆帕，处理时间为20-60分钟。
这种方法可以同时杀灭孢子形式的病原菌和厌氧菌，是一种较为全面的灭菌方法。
3. 蒸汽灭菌法：蒸汽灭菌是一种常用的灭菌方法。
通过使用高温蒸汽进行灭菌，可以有效杀灭细菌、霉菌和一些病原体。
常见的蒸汽灭菌条件为115-121摄氏度，持续时间为15-30分钟。
这种方法适用于灭菌培养基、菌种和容器等物品。
4. 化学灭菌法：化学灭菌是一种常用的灭菌方法。
通过使用一些化学物质进行消毒，可以有效杀灭各类微生物。
常见的化学灭菌剂有过氧乙酸、乙醛、次氯酸钠等。
这种方法适用于灭菌培养基、菌种和器皿等物品。
5. 紫外线灭菌法：紫外线灭菌是一种无污染的灭菌方法。
通过使用紫外线进行辐照，可以破坏微生物的核酸结构，从而达到杀菌的目的。
常见的紫外线辐照条件为254纳米波长，辐照时间为15-30分钟。
这种方法适用于灭菌操作台、空气过滤器等设备。
食用菌灭菌的方法选择要根据具体需求和条件来确定。
不同的方法对不同的有害微生物有不同的杀灭效果，因此需要根据具体情况选择合适的方法。
在进行食用菌灭菌时，还要注意操作规范，避免交叉污染。
此外，选择合适的灭菌剂和处理条件也是保证灭菌效果的关键。
简述消毒灭菌的概念及其常见方法
简述消毒灭菌的概念及其常见方法
消毒灭菌是指通过物理或化学方法，杀死或去除物体、表面、空气中的病原体、有害微生物和其它有害物质的过程。
其目的是为了预防传染病的传播，保护人类健康。
常见的消毒灭菌方法包括：
1. 热消毒：利用高温杀灭病原体。
常见的方法有煮沸消毒、蒸汽消毒和热气消毒。
2. 物理消毒：通过物理手段，如辐射、过滤和紫外线照射，杀灭病原体。
3. 化学消毒：使用化学物质，如酒精、氯化物、过氧化氢等，去除病原体。
4. 厌氧消毒：创造无氧环境，杀死厌氧菌和微生物。
5. 硬表面消毒：使用消毒剂清洁硬表面，以杀死细菌、真菌、病毒和孢子。
6. 表面消毒：使用消毒剂对器械、设备和物品表面进行消毒。
7. 空气消毒：利用紫外线或化学物质除去空气中的病原体。
8. 水消毒：使用化学物质或物理方法净化水源，消除水中的细菌、病毒等。
消毒灭菌的方法选择取决于具体的消毒目标、应用场景和病原体的种类。
在临床医疗、食品加工、公共卫生等领域，消毒灭菌是重要的手段，有助于保障健康与安全。
化学的灭菌方法
化学的灭菌方法灭菌是指将物体中的微生物完全杀灭或去除，以防止其再生长和传播。
在许多领域中，如医疗保健、食品加工和实验室研究等，灭菌是非常重要的。
化学的灭菌方法基于使用化学物质来杀灭或去除微生物。
本文将介绍几种常见的化学灭菌方法。
一、气体灭菌剂气体灭菌剂是一种广泛应用于医疗保健、实验室和工业领域的化学灭菌剂。
常见的气体灭菌剂包括乙烯氧化物、氧化乙烯和过氧乙酸等。
这些气体灭菌剂具有较强的杀菌能力，可以在低温下杀灭各种微生物，包括细菌、真菌和病毒等。
气体灭菌剂通常以气体形式存在，通过将其释放到封闭的空间中，使其能够渗透到物体中的每个角落，从而达到灭菌的效果。
二、化学消毒剂化学消毒剂是一种常见的化学灭菌方法，广泛应用于医疗保健和食品加工等领域。
常见的化学消毒剂包括酒精、过氧化氢和次氯酸钠等。
这些化学消毒剂能够破坏微生物细胞的结构和功能，从而杀灭或去除微生物。
化学消毒剂可以通过喷洒、浸泡或擦拭等方式使用，具有方便快捷、广谱杀菌的特点。
三、臭氧消毒臭氧消毒是一种使用臭氧气体杀灭微生物的化学灭菌方法。
臭氧是一种高效的氧化剂，具有强烈的杀菌能力。
臭氧消毒通常通过将臭氧气体注入封闭的空间中，使其能够与空气和水接触，从而杀灭微生物。
臭氧消毒可以广泛应用于水处理、空气净化和食品加工等领域，具有高效、安全、无残留的特点。
四、紫外线消毒紫外线消毒是一种使用紫外线辐射杀灭微生物的化学灭菌方法。
紫外线具有较强的杀菌能力，可以破坏微生物的核酸结构，从而阻止其生长和繁殖。
紫外线消毒通常通过使用紫外线灯或紫外线装置，将物体暴露在紫外线辐射下，以达到灭菌的效果。
紫外线消毒广泛应用于医疗保健、实验室和食品加工等领域，具有快速、高效、无污染的特点。
总结起来，化学的灭菌方法是一种常见且重要的微生物控制手段。
气体灭菌剂、化学消毒剂、臭氧消毒和紫外线消毒都是常见的化学灭菌方法。
它们通过使用化学物质或辐射来杀灭或去除微生物，从而防止微生物的生长和传播。
5种化学灭菌的方法
5种化学灭菌的方法化学灭菌是一种常用的灭菌方法，通过使用化学物质杀灭或抑制微生物的生长繁殖，以达到灭菌的目的。
下面将介绍5种常见的化学灭菌方法。
1. 高温蒸汽灭菌法高温蒸汽灭菌法是一种常用的化学灭菌方法。
在高温高压条件下，水蒸气能够快速渗透到微生物的细胞内部，破坏细胞膜结构和酶系统，从而达到灭菌的效果。
蒸汽灭菌广泛应用于医疗器械、药品生产等领域。
2. 氧化剂灭菌法氧化剂灭菌法利用强氧化剂（如过氧化氢、臭氧等）对微生物进行氧化作用，破坏其细胞结构和代谢功能，从而达到灭菌的目的。
这种方法操作简单，广泛应用于水处理、食品加工等领域。
3. 消毒剂灭菌法消毒剂灭菌法是利用化学消毒剂对微生物进行灭菌。
常用的消毒剂包括酒精、氯化物、酚类化合物等。
这些消毒剂能够破坏微生物的细胞膜、蛋白质和核酸等结构，从而杀死微生物。
消毒剂灭菌法广泛应用于医疗卫生、食品加工等领域。
4. 辐射灭菌法辐射灭菌法利用辐射能对微生物进行灭菌。
常用的辐射源包括紫外线、γ射线和电子束。
辐射能能够破坏微生物的遗传物质，从而杀死微生物。
辐射灭菌法被广泛应用于医疗器械、食品保鲜等领域。
5. 膜过滤灭菌法膜过滤灭菌法是利用微孔膜对微生物进行灭菌。
微孔膜可以过滤掉微生物，从而达到灭菌的效果。
这种方法操作简单、快速，广泛应用于制药、饮料等领域。
总结起来，化学灭菌是一种常用的灭菌方法，能够有效地杀灭或抑制微生物的生长繁殖。
高温蒸汽灭菌、氧化剂灭菌、消毒剂灭菌、辐射灭菌和膜过滤灭菌是常见的化学灭菌方法。
不同的方法适用于不同的场合，选择合适的化学灭菌方法可以确保杀灭微生物，保障人们的健康和安全。
化学灭菌方法
化学灭菌方法化学灭菌方法是一种通过使用化学物质来杀灭或去除细菌、病毒和其他微生物的方法。
它在医疗、实验室和食品工业等领域得到广泛应用。
本文将介绍几种常见的化学灭菌方法及其原理。
一、酒精灭菌法酒精灭菌法是一种常见的化学灭菌方法，常使用70%的乙醇溶液进行消毒。
酒精能够破坏细菌的蛋白质结构和细胞膜，从而杀死细菌。
这种方法适用于表面消毒，但对于一些耐酒精的细菌和孢子可能不够有效。
二、过氧化氢灭菌法过氧化氢灭菌法是一种常用的化学灭菌方法，常使用3%的过氧化氢溶液。
过氧化氢能够产生氧自由基，对细菌的蛋白质、核酸和细胞膜产生氧化作用，从而杀死细菌。
这种方法广泛应用于医疗设备的消毒，但对于某些耐氧化作用的细菌可能不够有效。
三、氯化物灭菌法氯化物灭菌法是一种常见的化学灭菌方法，常使用含氯消毒剂如次氯酸钠溶液。
氯化物能够破坏细菌的细胞膜和细胞内的蛋白质，从而杀死细菌。
这种方法适用于表面消毒和水处理等领域。
四、气体灭菌法气体灭菌法是一种常用的化学灭菌方法，常使用乙烯氧化物、过氧乙酸或氧化亚氮等气体。
这些气体能够渗透到细菌的细胞内部，对细菌的蛋白质和核酸产生氧化作用，从而杀死细菌。
这种方法适用于灭菌物品的包装和密闭空间的消毒。
五、臭氧灭菌法臭氧灭菌法是一种常用的化学灭菌方法，常使用臭氧气体进行消毒。
臭氧能够破坏细菌的细胞膜和核酸，从而杀死细菌。
这种方法广泛应用于水处理、食品工业和医疗设备的消毒。
除了上述常见的化学灭菌方法外，还有一些其他方法也被广泛应用。
例如，紫外线照射能够破坏细菌的核酸，从而杀死细菌。
电解水是一种通过电解产生氯离子的方法，也可以用于灭菌。
冷凝碘灭菌法是一种使用碘蒸气进行消毒的方法。
总结起来，化学灭菌方法是一种通过使用化学物质来杀灭或去除细菌、病毒和其他微生物的方法，包括酒精灭菌法、过氧化氢灭菌法、氯化物灭菌法、气体灭菌法、臭氧灭菌法和其他一些方法。
这些方法各有优缺点，应根据具体情况选择合适的灭菌方法。
常用灭菌方法
常用灭菌方法灭菌是指将物品或环境中的微生物全部杀灭或去除，使其不再具有生物学危害性的过程。
在医疗、食品、制药等领域，灭菌是非常重要的环节，可以有效防止病菌传播和食品变质，保障人们的健康和安全。
常用的灭菌方法主要包括物理灭菌、化学灭菌和生物灭菌。
物理灭菌是利用物理因素对微生物进行灭活的方法，常见的物理灭菌方法包括高温灭菌、紫外线灭菌和辐射灭菌。
高温灭菌是指利用高温对物品进行加热处理，常见的高温灭菌方法包括热气灭菌、蒸汽灭菌和干热灭菌。
热气灭菌是将物品暴露在高温干热空气中，通过热气的传导和对流来灭活微生物。
蒸汽灭菌则是利用高温高压蒸汽对物品进行灭菌处理，常用于医疗器械和实验室用具的灭菌。
干热灭菌是将物品置于高温干热条件下进行灭菌，适用于一些耐热的物品。
紫外线灭菌则是利用紫外线的照射来破坏微生物的DNA结构，达到灭菌的目的。
辐射灭菌则是利用电子束辐射或γ射线辐射对物品进行灭菌处理，常见于医疗器械和药品的灭菌。
化学灭菌是指利用化学药剂对微生物进行灭活的方法，常见的化学灭菌方法包括乙醛灭菌、过氧化氢灭菌和氯化物灭菌。
乙醛灭菌是利用乙醛气体对物品进行灭菌处理，适用于一些对高温敏感的物品。
过氧化氢灭菌则是利用过氧化氢溶液对物品进行灭菌处理，常用于一次性医疗器械和医疗用品的灭菌。
氯化物灭菌是利用含氯化合物的消毒剂对物品进行灭菌处理，常见于食品加工和水处理领域。
生物灭菌是指利用生物制剂对微生物进行灭活的方法，常见的生物灭菌方法包括菌素灭菌和酶灭菌。
菌素灭菌是利用一些具有抗菌活性的菌素对微生物进行灭活，常用于食品防腐和医药领域。
酶灭菌则是利用一些具有蛋白水解酶活性的酶对微生物进行灭活，常用于食品加工和酿酒领域。
总的来说，不同的灭菌方法适用于不同的场合和物品，选择合适的灭菌方法可以有效保障物品的质量和安全。
在实际应用中，还需要根据具体情况进行灭菌参数的选择和监测，以确保灭菌效果的可靠性和稳定性。
希望本文所述的常用灭菌方法对大家有所帮助，谢谢阅读。
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常见的微生物消毒与灭菌方法
物理灭菌法
（一）加热灭菌法
加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸，导致微生物死亡。
加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。
在同一温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好。
主要是因湿热灭菌时，有水分存在，蛋白质容易变性。
水分又易使微生物膜壁润湿，湿热的穿透力比干热大。
干热灭菌法常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法两种。
（二）紫外线灭菌法
是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。
一般用于灭菌的紫外线波长是200~300nm，灭菌力最强的波长是253.7nm。
紫外线作用于核酸蛋白促使其变性，同时空气受紫外线照射后产生微量臭氧，从而起共同杀菌作用。
紫外线进行直线传播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但较易穿透清洁空气及纯净的水。
因此本法适用于照射物体表面之灭菌、无菌室的空气及水的灭菌；不适用于药液的灭菌、固体物质深部的灭菌；普通玻璃可吸收紫外线，因此装于玻璃容器中的药物不能用此法灭菌。
紫外线对人体照射过久，会发生结膜炎，红斑及皮肤烧灼等现象，故一般在人入室前开启紫外线灯
1~2小时，关闭后人才进入洁净室。
如果必须在人进去后仍要开紫外线灭菌，则人的皮肤及眼睛应有有效的防护措施。
一般在6~15m3的空间可装置30瓦紫外线灯一盏，离地面2.5~3m为宜。
用紫外线照射灭菌时要注意下列问题：
1、紫外线的杀菌力，随使用时间增加而减退，一般使用时间达到额定时间70%时应更换紫外线灯管，以保证杀菌效果。
国产紫外线灯平均寿命一般为2000h。
2、紫外线的杀菌作用随菌种不同而不同，杀霉菌的照射量要比杀杆菌大40~50倍。
3、紫外线照射通常按相对湿度为60%的基础设计，室内湿度增加时，照射量应相应增加。
4、紫外线灭菌效果与照射的时间长短有关，这需要通过验证来确定照射时间。
5、紫外照射灯的安装形式及高度，应根据实际情况,参考使用说明决定。
灭菌方法的验证采用生物指示剂挑战试验，生物指示剂多用枯草芽孢杆菌。
（三）微波灭菌法
微波是指频率在30~3000MHz之间的电磁波。
水可强烈地吸收微波，使其极性分子转动，分子间的磨擦而生热，且升温迅速，靠热力而灭菌。
在数十秒至几分钟之内可达
100～150℃，并全部杀死液体中的微生物，适于水溶性注射液的灭菌。
另外，固体药材饮片及固体制剂（丸剂、散剂、胶囊粉等）也含少量水分，微波能穿透到固体内部，由表至里被均匀加热，而起干燥、灭菌的作用。
多用于口服液体制剂的灭菌，有望用于注射液的灭菌。
但可能对某些药品的PH 值、含量、颜色有影响。
（四）辐射灭菌法
辐射灭菌是应用γ射线、β射线杀灭细菌的方法，又称电离辐射，前者由钴-60或铯-137发出，穿透力强；后者由电子加速器产生，带电荷，穿透力弱，灭菌效果差。
化学灭菌法
化学灭菌法系指用化学药品来杀灭微生物的方法。
同一种化学药品的低浓度时呈现抑菌作用，而在高浓度时则能起杀菌作用。
其杀菌机理可能是：能使微生物蛋白质变性死亡，或与酶系统结合影响代谢，或改变膜壁通透性使微生物死亡等。
常用的方法有消毒剂消毒法和化学气体灭菌法等。
（一）消毒剂消毒法
消毒是指杀死病原微生物的方法。
但化学消毒剂大多仅能杀死微生物的繁殖体而不能杀死芽孢，能控制一定范围的无菌状态。
可将消毒剂配成适宜浓度，采用喷淋、涂擦或浸泡等方法对物料、环境、器具等进行消毒。
常用的化学消毒剂有0.1%～0.2%苯扎溴铵溶液、3%～5%的酚或煤酚皂溶
液、75%乙醇等。
常用于物体表面灭菌。
但要注意其浓度不要过高，以防止化学腐蚀作用。
洁净室的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、车、桌、椅等表面以及人体双手（手套）在环境验证及日常生产时，应定期清洁并用消毒剂喷洒，无菌室用的消毒剂必须在层流工作台中，用0.22μm的滤膜过滤后方能使用。
（二）化学气体灭菌法
系指利用化学药品的气体或产生的蒸汽进行杀灭微生物的方法。
1.环氧乙烷灭菌法
环氧乙烷灭菌法是利用环氧乙烷气体进行杀菌的方法。
它是一种传统的灭菌方法，可应用于工衣灭菌、不耐加热灭菌的药品、医用器具、设施、设备等的灭菌。
环氧乙烷灭菌系统，主要有下列四项互相制约的重要因素影响灭菌效果：
1、温度；
2、湿度；
3、气体浓度；
4、灭菌时间。
因为环氧乙烷是易燃易爆物质，明火可以引起燃烧，同时由于气体分解还可能引起爆炸，环氧乙烷灭菌中应十分注意安全问题。
2.甲醛等蒸汽熏蒸法
采用甲醛、丙二醇或过氧醋酸等化学品，通过加热产生蒸汽进行空气环境灭菌。
(1)、计算房间体积，按10g/m3的比例称出甲醛。
(2)、将甲醛倒入甲醛发生器或加热盘或烧杯中，并放好加湿用水，必要时还需加入高锰酸钾（2~3g/m3），然后加热（甲醛发生器用蒸汽加热，加热盘或烧杯用热水盛入其中加热）使其蒸发成气体。
(3)、灭菌流程：空调器停止运转→启动甲醛气体发生器或在加热盘中加热甲醛→让甲醛气体扩散约30分钟→启动空调器让甲醛气体循环约30分钟→停止空调器，房间熏蒸消毒，时间不少于8小时→房间排气，用新鲜空气置换约2小时→恢复正常运行。
当相对湿度在65%以上，温度在24~40℃时，甲醛气体的消毒效果最好。
3、臭氧消毒法
臭氧（O3）的消毒原理是：臭氧在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧（O2）和单个氧原子（O），后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌内部氧化葡萄糖所必须的酶，从而破坏其细胞膜，将其杀死。
多余的氧原子则会自行重新结合成为普遍氧分子（O2），不存在任何有害残留物，故称为无污染消毒剂。
它不但对种种细菌（包括肝炎病毒、大肠杆菌、绿脓杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能力，而且对霉菌也很有效。