植物色素的提取
《走进生物实验室》植物色素提取多彩的自然

《走进生物实验室》植物色素提取多彩的自然当我们走进生物实验室,仿佛进入了一个充满神秘和奇妙的世界。
在这个世界里,植物色素的提取实验就像是一场探索自然色彩密码的旅程。
植物,是大自然赋予我们的宝藏。
它们以各种各样的形态和色彩装点着这个世界。
而这些色彩,其实都源于植物体内的色素。
那么,这些色素是如何被提取出来的呢?首先,让我们来了解一下实验所需要的材料和工具。
通常,我们需要新鲜的植物叶片或花朵,比如菠菜叶、紫甘蓝、玫瑰花等。
此外,还需要准备研钵、杵、漏斗、滤纸、玻璃棒、酒精或丙酮等有机溶剂、量筒、烧杯以及天平等等。
在实验开始之前,要确保实验环境的整洁和安全。
将所需的材料和工具摆放整齐,以便于操作。
接下来,就可以正式开始提取植物色素啦!以菠菜叶为例,我们先将菠菜叶洗净、擦干,称取适量的叶片放入研钵中。
用杵将叶片捣碎,尽量使其破碎得更加均匀和细腻。
在这个过程中,你能感受到叶片逐渐变成了浆状,散发出淡淡的植物清香。
捣碎后的菠菜叶浆倒入漏斗中,漏斗中提前放置好滤纸。
然后,用量筒量取适量的酒精,缓慢地倒入漏斗中,让酒精透过滤纸浸润菠菜叶浆。
此时,你会发现酒精的颜色逐渐发生了变化,由无色渐渐变成了绿色。
这绿色,正是从菠菜叶中提取出来的叶绿素。
为什么要用酒精来提取色素呢?这是因为植物色素大多是脂溶性的,能够溶解在有机溶剂中,而酒精就是一种常见的有机溶剂。
通过酒精的渗透和溶解作用,植物色素就能够从细胞中被分离出来。
除了叶绿素,我们还可以从其他植物中提取出各种不同的色素。
比如从紫甘蓝中提取花青素,紫甘蓝在不同的酸碱度环境下会呈现出不同的颜色,这是因为花青素的结构会随着酸碱度的变化而改变。
在提取植物色素的过程中,需要注意一些细节。
比如,在研磨植物材料时,要尽量避免过度用力,以免破坏色素的结构;在过滤时,要确保滤纸与漏斗贴合紧密,防止色素溶液泄漏;在使用有机溶剂时,要注意安全,避免其接触到皮肤和眼睛。
通过提取植物色素的实验,我们不仅能够更加深入地了解植物的生理特性,还能感受到大自然的神奇和美妙。
绿叶中色素的提取和分离实验报告

绿叶中色素的提取和分离实验报告
实验报告:绿叶中色素的提取和分离
一、实验目的:
1.了解植物绿叶中色素的类型和组成;
2.掌握绿叶中色素的提取和分离方法;
3.学习使用色谱技术进行色素的定性和定量分析。
二、实验原理:
1.植物绿叶中主要含有叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素等色素;
2.色素的提取可采用溶剂浸提法,利用极性溶剂可溶解色素并使其析出;
3.色素的分离可采用色谱技术,利用相互溶解度差异进行分离。
三、实验步骤:
1.将新鲜的绿叶放入研钵中,加入适量的酒精,用搅拌棒搅拌植物材料,使其溶解均匀;
2.将混合溶液过滤,收集过滤液;
3.将收集的过滤液分成两部分,分别用超离心机分离沉淀和上清液;
4.取上清液,利用色谱技术进行分离和定性分析。
四、实验结果:
1.在溶剂浸提法下,绿叶中的色素溶解于酒精中,并分为沉淀和上清
液两部分;
2.通过超离心机的处理,将色素沉淀进行分离;
3.使用色谱技术后,可得到单一的色素组分,通过比色计测定其最大
吸收波长。
五、实验讨论:
1.色素的提取效果可能受到植物材料浸提时间和酒精浓度的影响;
2.色素的相互溶解度差异是进行色谱分离的关键;
3.使用色谱技术可对色素进行定性和定量分析,使实验结果更加准确
可靠。
六、实验总结:
本实验通过溶剂浸提法和色谱技术,成功提取和分离了绿叶中的色素。
通过实验,我们了解到了植物绿叶中色素的类型和组成,并学习了色素的
提取和分离方法。
同时,通过色谱技术的应用,我们还能对色素进行定性
和定量分析。
这些实验技巧和方法对于进一步研究和应用植物色素具有重
要意义。
色素分离提取实验报告

色素分离提取实验报告色素分离提取实验报告引言色素是一种常见的化学物质,广泛存在于自然界中的植物和动物体内。
色素的提取和分离对于研究其化学结构和生物活性具有重要意义。
本实验旨在通过提取和分离不同植物中的色素,探究其成分和特性。
实验材料和方法1. 实验材料:- 石榴、胡萝卜、菠菜、紫甘蓝等植物样品- 无水乙醇、醋酸乙酯、正己烷等有机溶剂- 氯化钠溶液、硫酸溶液等化学试剂- 玻璃仪器:研钵、滴管、漏斗等2. 实验方法:1) 样品制备:将不同植物样品分别洗净、切碎并研磨成细末。
2) 提取色素:取适量样品末加入研钵中,加入适量的无水乙醇,搅拌均匀,静置一段时间。
3) 分离色素:将提取液用滤纸滤去固体颗粒,得到植物色素提取液。
4) 色素分析:将植物色素提取液分别用醋酸乙酯和正己烷进行萃取,得到不同溶剂相中的色素。
结果与讨论1. 提取色素在本实验中,我们选择了石榴、胡萝卜、菠菜和紫甘蓝作为实验样品。
经过提取,我们得到了不同植物的色素提取液。
观察发现,不同植物的色素提取液呈现出不同的颜色和浓度。
这表明不同植物中的色素成分和含量存在差异。
2. 分离色素为了更好地了解不同植物中的色素成分,我们进行了色素的分离。
通过醋酸乙酯和正己烷的萃取,我们得到了不同溶剂相中的色素。
观察发现,不同溶剂相中的色素呈现出不同的颜色和特性。
这说明不同溶剂对于色素的溶解度和亲和力存在差异。
3. 色素成分分析为了进一步分析不同植物中的色素成分,我们进行了色素成分的分析。
通过将色素溶液与氯化钠溶液和硫酸溶液反应,我们观察到了不同的反应结果。
这表明不同植物中的色素成分可能包含不同的化学物质,如类胡萝卜素、叶绿素等。
结论通过本实验,我们成功地提取和分离了不同植物中的色素,并对其进行了分析。
结果显示,不同植物中的色素成分和特性存在差异。
这为进一步研究色素的化学结构和生物活性提供了基础。
此外,本实验还展示了提取和分离技术在化学实验中的应用价值,对于培养学生的实验操作能力和科学思维具有重要意义。
高一生物色素的提取知识点

高一生物色素的提取知识点一、引言色素是生物体内广泛存在的一类化合物,它们具有各种不同的颜色,并在生物体内发挥着重要的功能。
生物色素的提取是研究生物体的重要手段之一,本文将介绍高一生物中常见的色素提取方法以及其相关知识点。
二、植物色素的提取方法1. 酒精浸提法酒精浸提法是提取植物色素常用的方法之一。
首先,将待提取的植物材料切碎并浸泡在乙醇中,经过搅拌和静置,使色素溶解于乙醇中。
然后,通过过滤或离心等方式分离得到色素提取液。
2. 溶剂萃取法溶剂萃取法适用于不同极性的植物色素提取。
常用的溶剂有醇类、醚类和酮类等。
该方法主要通过萃取溶剂与植物材料中的色素相互作用,从而实现分离提取的目的。
3. 水浴提取法水浴提取法是一种温和的色素提取方式。
它通常使用水作为溶剂,将植物材料置于加热的水中,使色素在温水中溶解。
然后,通过对提取液进行过滤或离心,得到色素提取液。
三、动物色素的提取方法1. 溶剂提取法动物组织中的色素可通过溶剂提取法进行提取。
此方法与植物色素的提取类似,常用的溶剂有乙醇、乙醚和酮类等。
需要注意的是,不同类型的动物组织可能需要不同的溶剂和提取条件。
2. 蛋白酶降解法某些动物组织中的色素可能与其他分子结合较紧密,使用溶剂提取法难以获得纯净的色素。
在这种情况下,可以使用蛋白酶降解法,先将组织中的蛋白质降解,并提取纯净的色素。
四、色素提取的应用领域1. 教学实验色素提取实验是高一生物课堂常见的实验内容之一。
通过自行提取色素并观察其吸收光谱和颜色变化,可以帮助学生理解色素的特性和提取过程。
2. 医学研究生物色素在医学研究中有着广泛的应用。
例如,提取人体组织中的色素能够帮助医生进行病理诊断和研究。
3. 食品工业色素提取在食品工业中也具有重要的应用价值。
许多天然色素是通过提取植物材料中的色素获得的,用于调色或增加食品的吸引力。
五、注意事项1. 实验安全进行色素提取时,应注意实验室的安全,佩戴实验室常规防护用品,避免接触有害物质和高温热源。
色素提取的原理

色素提取的原理
色素提取是指从植物、动物或微生物等自然来源中分离出色素化合物的过程。
其原理基于色素的溶解性和物理化学性质,通常包括以下步骤:
1. 研磨/破碎:将原料(如植物叶片、果实、动物组织等)进
行研磨或破碎,以增加溶剂与样品的接触面积,有利于色素的释放。
2. 溶剂浸提:将破碎的原料与适宜溶剂(如乙醇、甲醇、醚类、水等)进行浸提,以使色素从细胞组织中释放出来。
溶剂的选择要考虑色素对其的溶解度及对样品的腐蚀性。
3. 过滤/离心:将浸提液经过滤或离心操作,去除固体残渣和
悬浮物,得到纯净的溶液。
4. 溶剂萃取:使用相宜的通常是非极性溶剂,如正己烷、二氯甲烷等,与溶液进行反复摇匀或搅拌,以实现色素的萃取。
萃取可通过物理性质差异来分离不同色素。
5. 浓缩/蒸发:在萃取得到的有机溶剂中,通过蒸发或浓缩操作,使溶液中色素的浓度增加,以便于后续分离和纯化步骤的进行。
6. 色素分离:通过色谱技术(如薄层色谱、柱层析、高效液相色谱等)对浓缩后的色素进行分离,根据色素的特性(如极性、分子量等)来选择适当的分离方法和条件。
7. 纯化:根据色素的特性和需求,采用适当的物理化学方法(如再结晶、结晶、溶剂提取等)对分离得到的色素进行纯化,以去除杂质。
8. 干燥:将纯化后的色素溶液或固体经过干燥操作,去除溶剂或水分,使其呈现稳定的干燥状态,便于保存和使用。
通过以上步骤,可以从原料中提取出所需的色素化合物,并得到较高纯度的样品,进而用于进一步的分析、研究或应用。
菠菜色素提取实验报告

菠菜中色素的提取和色素分离绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)),差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂,也是食用的绿色色素,可用于糕点、饮料水等中,添加于胶姆糖中还可消除口臭。
植物中a的含量通常是b的3倍。
尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂。
胡萝卜素(C40H56)是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体α—,β—,和γ—胡萝卜素,其中β—异构体含量最多,也最重要。
生长期较长的绿色植物中,异构体中β—的含量多达90%。
β—具有维生素A的生理活性,其结构是两分子维生素A在链端失去两分子水结合而成。
生物体内,β—体受酶催化氧化即形成维生素A。
目前,β—体可作为维生素A使用,也可作为食品工业的色素,β一胡萝卜素还有防癌功能。
叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物,在光合作用中能起收集光能的作用。
在绿叶中通常是胡萝卜素的两倍。
较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
由此可见,叶绿素等天然色素有广泛的用途,对于色素的提取与分离就显得很重要了.本实验就提取和分离做了相关的研究。
1 实验部分1.1 仪器与试剂仪器:研钵、分液漏斗、显微载玻片、毛细管、层析柱(20×10 cm)、UV-240紫外分光光度计试剂:石油醚、乙醇(95%)、菠菜叶、丙酮(化学纯)、乙酸乙酯(化学纯)、无水硫酸钠、硅胶G、中性氧化铝(150目~160目)1.2 提取与分离1.2.1 浸泡法提取色素在研钵中放入20 g新鲜的菠菜叶,加入20 mL3:2(体积比)石油醚—乙醇混合液,适当研磨(不要研成糊状,否则会给分离造成困难),用倾析法将提取液转移到分液漏斗中,每次用10ml水洗涤两次,以除去萃取液中的乙醇。
植物色素提取常用的方法
植物色素提取常用的方法说实话植物色素提取这事,我一开始也是瞎摸索。
我试过用浸泡法,就像泡茶一样,把植物材料放到溶剂里,以为泡着泡着色素就都出来了。
我找了些菠菜叶子,把它们剪成小段,放到乙醇溶液里,就等啊等,可是等了半天,发现提取出来的色素不太纯,里面好像混着好多其他东西,可能是植物里的一些杂质。
这就是我第一个失败的教训,我知道了不能光靠简单浸泡就想得到纯净的色素。
后来我又试了研磨法。
就好比我们磨豆子做豆浆,我把植物材料放在研钵里,加了点石英砂和溶剂就开始疯狂研磨。
比如说我用紫甘蓝做实验的时候,研磨完后看到那颜色都渗到溶剂里了,当时还挺兴奋的,觉得这次肯定行。
但在过滤的时候就遇到了麻烦,那滤纸上总是残留好多色素,结果收集到的色素量比预期的少很多。
我才明白研磨的时候虽然能把色素弄出来,但怎么完整地弄到最后成品里还是个问题。
再后来我了解到超声辅助提取法。
这个方法听起来就比较高端。
我像前面一样准备好植物材料和溶剂,然后放到超声仪器里。
就像给溶液做了个超级按摩似的。
我当时用的是月季花提取色素,发现超声这个办法真的比前面的快好多,而且提取出来的色素貌似也更纯一些,不过这个方法得有超声仪器,要是自己在家里简单提取的话,可能不太方便。
还有索氏提取法,但是这个方法我没有亲自好好试过。
听说是把植物材料放在索氏提取器里,溶剂在里面不断循环,就像一个小循环系统一样,不停地把植物里的色素带出来。
不过这个装置我觉得操作起来有点复杂,而且需要专门的设备,我就没仔细研究,也不确定在家里能不能顺利操作。
反正我经过这么多尝试。
我觉得要是简单在家里提取一些植物色素玩的话,浸泡法虽然不太完美但最简单,可以多试几次改进,多换几种溶剂。
要是想得到质量好一点浓度高一点的色素,那超声辅助提取法可能是比较好的选择,但前提是有设备。
通过这些摸索,我知道每个方法都有它的优缺点,要根据自己的实际情况来选择合适的方法。
色素提取方法
色素提取方法色素是指能够赋予物体颜色的化合物,广泛存在于植物、动物和微生物中。
提取色素是一项重要的研究工作,可以应用于食品、医药、化妆品等领域。
本文将介绍几种常见的色素提取方法。
首先,最常见的色素提取方法之一是溶剂提取法。
该方法利用不同溶剂对色素的溶解度不同的特性,通过适当的溶剂选择和提取条件,将色素从原料中提取出来。
常用的溶剂包括乙醇、丙酮、乙酸乙酯等。
这种方法操作简单,成本较低,但需要注意选择合适的溶剂和提取条件,以保证提取效果。
其次,超临界流体提取法也是一种常用的色素提取方法。
超临界流体是介于气体和液体之间的状态,在一定的温度和压力下具有较高的溶解能力。
利用超临界流体提取色素,可以避免溶剂残留的问题,提取效率高,对色素的选择性也较好。
但是该方法设备成本较高,操作技术要求较高。
另外,酶法提取是一种利用酶对废弃物中的色素进行降解和提取的方法。
这种方法不仅可以高效提取色素,还可以减少废弃物的污染,具有较好的环保效益。
但是酶法提取需要选择适当的酶种和反应条件,操作相对较为复杂。
最后,固相萃取法也是一种常见的色素提取方法。
该方法利用固相吸附剂对色素进行吸附和分离,然后通过洗脱等步骤将色素从吸附剂上提取出来。
固相萃取法操作简单,提取效率高,对色素的选择性也较好。
但是需要注意固相吸附剂的选择和提取条件的控制。
综上所述,色素提取方法多种多样,每种方法都有其适用的场合和特点。
在实际应用中,可以根据具体的情况选择合适的提取方法,以获得最佳的提取效果。
希望本文介绍的色素提取方法对您有所帮助。
植物色素制取成本
植物色素的制取成本取决于多个因素,包括所用的植物种类、生长条件、提取方法、纯度要求等等。
一般来说,植物色素的制取成本主要包括以下几个方面:
1. 原料成本:植物色素的制取过程需要大量植物材料作为原料,原料的成本取决于植物种类、生长季节、采摘和采购成本等因素。
2. 生产成本:包括对植物材料进行处理、提取、纯化等过程所需的人工、能源、设备折旧等费用。
3. 设备成本:如果需要特殊的提取设备或工艺,其成本也需要考虑在内。
4. 纯度和质量控制成本:根据最终产品的用途和质量要求,可能需要额外的纯化和质量控制过程,这些都会增加成本。
5. 市场因素:市场供求关系、植物材料的来源、当地劳动力成本等因素也会影响植物色素的制取成本。
总的来说,植物色素的制取成本因具体情况而异。
另外,随着科技和工艺的进步,植物色素的制取成本可能会随之下降。
如果您有特定的植物色素制取成本方面的需求,建议您与从事植物色素提取或相关领域的专业人士进行进一步的讨论和研究。
原理 色素的提取
原理色素的提取色素的提取是指从植物、动物或微生物中提取出色素的过程。
色素是一种化学物质,能够吸收光的能量并反射特定颜色的光线。
色素在生物体中起着重要的作用,如吸收光能,并用于光合作用、视觉、保护等功能。
因此,色素的提取对于研究色素的性质和应用具有重要意义。
色素的提取可以通过多种方法进行,以下将介绍常见的几种提取方法。
1. 超声波提取法:超声波提取法是利用超声波在液体中产生的空化作用和涡流效应,将色素从样品中释放出来。
首先将植物组织或动物组织切碎,并加入适量的溶剂,如乙醇或醚。
然后通过超声波作用,使溶剂渗透进细胞内,溶解色素,最后用离心机将液体离心去除残渣,得到提取的色素溶液。
2. 溶剂提取法:这是一种常见的色素提取方法,适用于植物和动物组织中色素的提取。
首先将样品研磨成细粉,然后加入适量的溶剂,如醇类、酯类等,使色素溶解在溶剂中。
然后将混合液过滤,并用浓缩器或蒸发仪将溶剂蒸发,得到含有色素的溶液。
3. 萃取法:萃取法是利用物质在两段溶剂中的分配行为,将目标化合物从混合物中分离出来。
对于色素的萃取,可以使用有机溶剂和水两相溶剂。
首先将样品和两相溶剂混合,并搅拌一段时间,使色素在两相间分配均匀。
然后使用漏斗将两相分离,然后浓缩有机溶剂,得到含有色素的溶液。
4. 薄层色谱法:薄层色谱法是一种常见的色素分离和提取方法。
首先将样品中的色素溶解在适量的溶剂中,并将溶液滴在特定的吸附剂上,待溶剂升至一定高度时停止。
然后将涂在吸附剂上的混合液放入色谱槽中,加入足够的溶剂使其渗透上升,当溶剂上升到合适位置时停止。
最后,根据色素在吸附剂上的染色效应以及移动距离的差异,将各色素分离开,并用溶剂将其洗出。
以上介绍的是常见的色素提取方法,不同的方法适用于不同的样品和需要提取的色素。
在进行色素提取时,需要根据具体的实验目的和需求选择合适的方法,并对实验条件进行优化,以得到最佳的色素提取效果。
同时,色素的提取过程中需要注意安全操作,并且保证取样的准确性和可重复性。
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植物色素的提取 学院: 专业: 姓名: 学号:
2012年7月6日 植物色素的提取 摘要 波层色谱法可以很好地分离色素。因为在用抽滤法提取色素的过程中,由于抽滤时不好控制,非极性溶剂难免会被抽去。且在几次转移中损失较多,程序繁杂.用浸泡法操作简便易行,损失少,产率高。故在实验中采取了浸泡法提取色素,使用薄层色谱、柱色谱对叶绿素、胡萝卜素和叶黄素进行了分离。薄层层析时使用了石油醚-乙酸乙酯=8:2、6:4、5:5、4:6,对比展开效果。在柱层析时,用洗脱剂分离得到不同物质,结果证明石油醚-乙酸乙酯=8:2做洗脱剂分离胡萝卜素效果最好。将得到的胡萝卜素进行紫外光谱测定,检验实验成果。 薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在移动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。 关键词:菠菜色素;提取;分离;胡萝卜素;紫外光谱测定 ABSTRACT Wave layer chromatography separation can be a very good pigment.Because with suction filter method in the process of pigment extraction,when bad because smoke filter control,nonpolar solvent unavoidably would go to.And in a few times more shift of loss, and the program is multifarious. Use for easy operation method, less loss, high yield.So in the experiment method to soak extract pigment, use thin layer chromatography (TLC) column chromatography, of chlorophyll and carotene and lutein was isolated.When the thin layer chromatography use petroleum ether-ethyl acetate = ", so, 50, because, on contrast effect.In the column chromatography, with different separation with agent get material,The results prove petroleum ether-ethyl acetate = "do elution agents separation carotene best effect.Will get carotene on ultraviolet spectrum determination, the test results. Thin layer chromatography (TLC) is a kind of adsorption thin-layer chromatography separation,It uses the same ingredients on the absorbent adsorption ability is different,Make in the mobile phase (solvent), which flows through the stationary phase (adsorbent), in the process of continuous adsorption, desorption with produce, and adsorption, desorption with again,So as to achieve the purpose of the composition of the separated from each other. Keywords:Spinachpigment;extraction;Separation;Carrotelement;Ultraviolet
spectrometry
一、引言 绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素(绿)、胡萝卜素(橙)和叶黄素(黄)等多种天然色素。 叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)),差别仅是a中一个甲基被b中的甲酰基所取代。它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物,是植物进行光合作用所必需的催化剂,也是食用的绿色色素,可用于糕点、饮料水等中,添加于胶姆糖中还可消除口臭。植物中a的含量通常是b的3倍。尽管叶绿素分子中含有一些极性基团,但大的烃基结构使它易溶于石油醚等一些非极性溶剂。 胡萝卜素(C40H56)是具有长链结构的共轭多烯。它有三种异构体α—,β—,和γ—胡萝卜素,其中β—异构体含量最多,也最重要。生长期较长的绿色植物中,异构体中β—的含量多达90%。β—具有维生素A的生理活性,其结构是两分子维生素A在链端失去两分子水结合而成。生物体内,β—体受酶催化氧化即形成维生素A。目前,β—体可作为维生素A使用,也可作为食品工业的色素,β一胡萝卜素还有防癌功能。 叶黄素(C40H56O2)是胡萝卜素的羟基衍生物,在光合作用中能起收集光能的作用。在绿叶中通常是胡萝卜素的两倍。较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。 由此可见,叶绿素等天然色素有广泛的用途,对于色素的提取与分离就显得很重要了.本实验就提取和分离做了相关的研究。
二、实验部分 2.1实验目的 1.掌握薄层色谱法和柱谱法分离色素的原理和基本操作。 2.掌握减压蒸馏、色谱板的制备等基本操作 2.2实验原理 薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。 吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面,吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上,都可能发生吸附现象。 例如用硅胶和氧化铝作支持剂,其主要原理是吸附力与分配系数的不同,使混合物得以分离。当溶剂沿着吸附剂移动时,带着样品中的各组分一起移动,同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。由于各组分在溶剂中的溶解度不同,以及吸附剂对它们的吸附能力的差异,最终将混合物分离成一系列斑点。如作为标准的化合物在层析薄板上一起展开,则可以根据这些已知化合物的Rf值(后面介绍Rf值)对各斑点的组分进行鉴定,同时也可以进一步采用某些方法加以定量。 柱色谱法的简介 柱色谱法又称柱层析。固定相装于柱内,流动相为液体,样品沿竖直方向由上而下移动而达到分离的色谱法。它既区别于用于分离分析的GC和HPLC法,也区别于样品在平面形固定相内移动的纸层析和薄层色谱法。本法主要用于分离,有时也起到浓缩富集作用。在环境分析测试中,本法广泛用于样品的前处理,如在水和气溶胶的有机污染分析中,将萃取液转移到层析柱内,而后用环己烷洗脱烷烃部分,用苯洗脱多环芳烃类污染物,用乙醇洗脱极性组分;在土壤分析中,用氧化铝柱捕集分离稀土元素钍、铊等。吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。当待分离的混合物溶液流过吸附柱时,各种成分同时被吸附在柱的上端。当洗脱剂流下时,由于不同化合物吸附能力不同,往下洗脱的速度也不同,于是形成了不同层次,即溶质在柱中自上而下按对吸附剂的亲和力大小分别形成若干色带,再用溶剂洗脱时,已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集;或将柱吸干,挤出后按色带分割开,再用溶剂将各色带中的溶质萃取出来。柱色谱法column chromatography 将色谱填料装填在色谱柱管内作固定相的色谱方法。根据色谱柱的尺寸、结构和制作方法的不同,又可分为填充柱色谱和毛细管柱色谱。本实验成败的关键是:装柱要紧密,要求无断层、无缝隙;在装柱、洗脱过程中,始终保持有溶剂覆盖吸附剂;一个色带与另一色带的洗脱液的接受不要交叉。 2.3仪器和药品 玻璃片(10cm×3cm),展缸,毛细管,分液漏斗,锥形瓶,底烧瓶,玻璃棒, 色谱柱,分液漏斗,烧杯,量筒,减压抽滤机,UV-240紫外分光光度计
新鲜菠菜,硅胶G,羧甲基纤维素钠,乙醇,石油醚,乙酸乙酯,无水硫酸钠圆 2.4实验步骤和实验现象 1.薄层色谱板的制备 (1)制备薄层载片 如是新的玻璃板(厚约2.5mm),切割成150*30*2.5mm或100*30*2.5mm的载玻片,水洗,干燥。如果重新使用的载玻片,要用洗衣粉和水系,用水淋洗,用50%甲醇溶液淋洗,让片完全干燥。取用时应让手指接触片的边缘,因为指印沾污片的表面上将使吸附剂难于铺在片上。 (2)制备浆料 容器:带螺旋盖的广口瓶。 操作:制成浆料的要求要均匀,不带团块,粘稠适当。为此,应将吸附剂慢慢地加至溶剂中,边加边搅拌。如果将溶剂加至吸附剂中常常会出现团快状,加料毕,剧烈搅拌,保证充分混合。量取30ml 0.5%的羧甲基纤维素钠,和水混合后用加热装置加热至70℃,溶解后抽滤,吸取10ml滤液加入4g硅胶G,充分混合后研磨。 铺制薄层板操作是:在带有螺旋盖的瓶子中盛满浆料(1g硅胶G需要3ml氯仿或需要3ml氯仿-乙醇混合物(体积比为2:1),在不断搅拌下慢慢蒋硅胶加入于氯仿中,盖紧,用力振摇。使之成均匀糊状),选取大小一致的载玻片紧贴在一起,两块同时浸涂。因为浆料在放置时会沉积,故浸涂之前均应将其剧烈振摇。用拇指和食指捏住玻璃片上端缓慢地均匀地将片浸入浆料中并取出多余的浆料任其自动滴下,直至大部分溶剂已挥发后将两块分开,放在水平板上晾干。