制备优质牙本质-牙髓复合体组织切片的方法探讨
《新型牙科树脂基复合材料的制备和性能研究》范文
《新型牙科树脂基复合材料的制备和性能研究》篇一一、引言随着现代科技的发展，牙科材料的研究与开发已成为口腔医学领域的重要课题。
其中，牙科树脂基复合材料因其良好的生物相容性、优异的机械性能以及美观的外观，在牙科修复、填充及美容等领域得到了广泛应用。
本文旨在研究新型牙科树脂基复合材料的制备方法及性能表现，为未来牙科材料的进一步研究提供理论基础。
二、材料制备（一）实验原料与设备实验原料包括：新型树脂基材料、填料（如纳米级玻璃纤维、硅烷化氧化物等）、催化剂及各种添加剂等。
实验设备包括混合器、加热器、压力机等。
（二）制备工艺1. 将所需填料与树脂基材料按一定比例混合；2. 使用混合器进行均匀搅拌，使各组分充分融合；3. 将混合物加热至一定温度，使其达到可塑状态；4. 在压力机的作用下，将材料压制成型，得到新型牙科树脂基复合材料。
三、性能研究（一）机械性能通过硬度测试、抗压强度测试及弯曲强度测试等方法，研究新型牙科树脂基复合材料的机械性能。
实验结果表明，该材料具有较高的硬度、抗压强度及弯曲强度，能够满足牙科修复与填充的需求。
（二）生物相容性采用细胞毒性试验、组织相容性试验等方法，评估新型牙科树脂基复合材料的生物相容性。
实验结果显示，该材料具有良好的生物相容性，无明显的细胞毒性及组织反应。
（三）耐磨性与耐腐蚀性通过人工唾液浸泡试验、耐磨试验等方法，研究新型牙科树脂基复合材料的耐磨性与耐腐蚀性。
实验数据表明，该材料在模拟口腔环境中的性能表现优异，具有较好的耐磨性与耐腐蚀性。
（四）美学性能从色泽、光泽度、透明度等方面评价新型牙科树脂基复合材料的美学性能。
实验结果显示，该材料具有较好的色泽、光泽度及透明度，能够满足牙科美容的需求。
四、结论本文通过对新型牙科树脂基复合材料的制备工艺及性能表现进行研究，得出以下结论：1. 新型牙科树脂基复合材料具有较高的硬度、抗压强度及弯曲强度，能够满足牙科修复与填充的需求；2. 该材料具有良好的生物相容性，无明显的细胞毒性及组织反应；3. 在模拟口腔环境中，该材料具有较好的耐磨性与耐腐蚀性；4. 该材料具有较好的色泽、光泽度及透明度，能够满足牙科美容的需求。
组织切片制作
①取材：采集组织速度要快，以免组织发生死后变化。
采取的组织不宜太大，最好不要超过0.5cm，因过大的组织块在固定式药液尽头不充分。
采取组织材料动作要轻，以免挤压造成内部结构发生变化若组织上附有过多血液或其他物质应漂洗干净。
神经、肌腱等应先平摊于吸水纸上。
②固定：紧张切开皮肤，钝性分离，采集样品后在滤纸上吸干后迅速放入10%甲醛溶液中固定24h，固定液甲醛的用量应是被固定组织块容积的30~50倍。
使组织、细胞的蛋白质变性凝固，以防止细胞死后的自溶或细菌的分解，从而保持细胞本来的形态结构。
③洗涤：瓶口罩上纱布，用皮筋封牢，若组织较多则可用纱布将个组织块包好仪器放入广口瓶中，自来水接橡皮管插入瓶底，调节流量是使水从瓶底缓慢流出。
④脱水：在就进内浸泡时间是组织大小而定，一般为4~12h，无水酒精中要更短些：30%乙醇→50%乙醇→70%乙醇→80%乙醇→90%乙醇→95%乙醇→100%乙醇。
注意：①脱水必须是在有盖的瓶内进行，尤其是高浓度酒精，易吸水降低浓度（同时应注意天气）；②组织进入高一级酒精中应吸干水分后进入。
⑤透明：二甲苯透明，目的是将组织块中的无水酒精置换出来，为浸蜡做准备。
透明前先以1:1的二甲苯-无水酒精过度防止二甲苯对组织引起收缩，再用二甲苯透明，时间一般为2~3h。
⑥包埋：透明后的组织块先经1:1的二甲苯-石蜡过渡，再进入蜡杯，每个蜡杯中停留时间不超过30min，以上步骤均在石蜡融化状态下进行，严格控制温度，低于56℃。
待石蜡完全浸入组织块后进行包埋——将已溶化的石蜡倒入小纸盒中，迅速夹取放入冷水中冷却，凝固成块即成。
⑦切片：将包埋好的蜡块固定于切片机上，切成薄片，一般为5μm，放到加热的水中烫平，使之粘附到沾有黏附剂（少许鸡蛋清与甘油等量混合制成）的载玻片上，放45℃恒温箱中烘干。
⑧脱蜡：贴好的切片因有石蜡不能直接染色，必须先在二甲苯中脱去石蜡。
⑨染色：1:1二甲苯-无水酒精2min→无水酒精2min→95%乙醇2min→90%乙醇2min→80%乙醇2min→70%乙醇2min→50%乙醇2min→30%乙醇2min→苏木精15~20min→蒸馏水水洗→0.25%~0.5%HCl分化（即分色）→蒸馏水→自来水→蒸馏水→30%乙醇2~3min→50%乙醇2~3min→70%乙醇2~3min→80%乙醇2~3min→90%乙醇2~3min→95%乙醇2~3min→0.5%~1%伊红复染2~3min→95%乙醇2~3min→100%乙醇2~3min→100%乙醇2~3min→1:1二甲苯-无水乙醇2~3min→二甲苯10~15min，每次出瓶后在滤纸上沥一下。
第三章牙体组织PPT课件
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上皮组织
外胚层 成釉器
牙乳头
外间充质
结缔组织
牙囊
釉质
牙本质
牙 体
牙髓
组 织
牙骨质
牙周膜
固有牙槽骨
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一、概述
牙体模式图
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一、概述 二、釉 质
1. 无机物
羟磷灰石晶体 [Ca10(PO4)6(OH)2] ---------生物磷灰石 (不纯，含较多HCO3- 和微量元素） 耐龋潜能：氟、镁、锶等 使釉质不稳定：碳酸盐、铁、氯、硒、 锌等
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釉 柱 晶 体
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晶体横断面：六边形
第14页/共230页2．有机物二、釉小皮：enamel cuticle
定义：覆盖在新萌出牙表面的一 层有机薄膜，一经咀嚼即易被磨去， 但在牙颈部仍可残留。
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原因: 其结构与上皮下的基板相似，可能是成釉细
胞在形成釉质后所分泌的基板物质。
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釉小皮
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A----釉质 E----牙龈
牙齿磨片
B----牙本质 C----牙骨质
F----牙周膜
G----牙龈
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牙齿切片
D----牙髓腔
一、概述 二、釉 质
1、覆盖于牙冠，有保护作用，最先受龋病侵蚀特 殊性：是人体最硬的组织；是全身唯一无细胞性， 由上皮细胞分泌继而矿化的组织 2、特性厚度不均：切牙切缘处---2mm，磨牙的 牙尖处，自切缘或牙尖处至牙颈部逐渐 变薄，颈部呈刀刃状
牙髓-牙本质复合体再生的影响因素及其生物学策略
牙髓-牙本质复合体再生的影响因素及其生物学策略邹杰林;毛靖;石鑫【期刊名称】《浙江大学学报:医学版》【年(卷),期】2022(51)3【摘要】再生性牙髓治疗利用组织工程方法修复缺损牙本质和牙髓组织,再生具有正常生理功能的牙髓-牙本质复合体,以期恢复牙髓的血管神经化和免疫功能并重建管样牙本质。
显著影响再生性牙髓治疗效能的因素包括干细胞、生物信号分子和生物支架材料。
根据是否来自牙源性组织,干细胞可分为牙源性干细胞(如牙髓干细胞)和非牙源性干细胞(如骨髓间充质干细胞)。
鉴于干细胞具有倾向分化为其原始来源组织的特性,牙源性干细胞在再生性牙髓治疗中展现出一定优势。
联合应用多种信号分子并通过激活信号转导通路如Wnt/β-catenin、BMP/Smad,对改善干细胞迁移、增殖、成牙本质细胞分化和血管神经再生潜能发挥关键作用。
适用于再生性牙髓治疗的生物支架材料包括自然来源材料和人工合成材料,人工合成材料应模仿天然组织进行生物仿生修饰,以营造适宜的再生微环境并实现对信号转导通路的时空调控。
牙髓-牙本质复合体再生的真正实现有赖于干细胞移植和干细胞归巢两大策略。
干细胞归巢策略因可避免干细胞的体外分离和培养而在临床操作上更具优势,但如何提高干细胞归巢成功率并促进其增殖和分化以实现牙髓-牙本质复合体真正再生仍有待解决。
本文介绍了诱导牙髓-牙本质复合体再生的影响因素,探讨其科学、可行的生物学策略,并展望再生性牙髓治疗未来的研究方向,以期为再生性牙髓治疗临床转化和推广应用提供参考。
【总页数】12页(P350-361)【作者】邹杰林;毛靖;石鑫【作者单位】华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心;华中科技大学同济医学院口腔医学院;口腔颌面发育与再生湖北省重点实验室【正文语种】中文【中图分类】R318;R781【相关文献】1.基因强化组织工程在牙髓牙本质复合体和牙周组织再生中的应用研究进展2.牙本质牙髓复合体的形成研究(四)牙本质牙髓复合体形成研究的临床应用策略3.牙髓-牙本质复合体中第三期牙本质的生物学研究4.牙髓干细胞修复再生同质异体大鼠牙髓牙本质复合体的研究5.全冠牙体预备后影响牙髓-牙本质复合体反应因素的研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
组织学切片的制备与染色技术
组织学切片的制备与染色技术组织学切片是生物学领域中重要的实验技术之一，可以用于研究生物组织的结构和功能。
组织学切片的制备和染色技术对于获得高质量的组织学图像有着至关重要的作用。
本文将介绍组织学切片的制备和染色技术，以及常用的染色剂。
一、组织学切片制备技术1. 组织定向组织定向是为了使切片能够表现出组织内部的结构和形态。
对于各种组织，都有相应的组织定向方法。
通常采用酒精和正己烷等有机溶剂来脱水，然后用对位剂和丙酮、蜡等材料浸渍固定后，最终采用微波加热等方法制备成切片。
2. 切片制备切片制备也是重要的步骤之一。
现代的组织学切片制备中，通常使用微型切片机进行切片，可以制作极薄的样本切片。
切片时要控制角度和深度，以获得高质量的切片样本。
3. 前处理前处理是为了使组织切片保持完整。
通常需要去除切片中的杂质和空气泡，以保持组织切片的完整性。
通常采用碱洗和酸洗等方法进行前处理，以便于后续染色和观察。
二、组织学切片染色技术组织学切片染色技术对于清晰地显示组织学样本的属性有着重要的作用。
常用的染色剂有甲苯胺蓝、酸性双氧水-碱性紫、荧光染色等。
1. 常规染色常规染色是最常见的组织学切片染色方法。
常用染色剂有：苏木素-伊红染色、甲苯胺蓝-苏木素染色、伊氏染色、Mallory三色染色等。
这些染色剂能够染色不同种类的细胞和组织结构，使得切片样本易于观察和分析。
2. 免疫染色免疫染色是通过抗体的特异性识别和结合目标分子进行染色的技术。
免疫染色可以分为直接免疫荧光染色、酶免疫染色、放射性同位素免疫染色等。
免疫染色能够高度特异性地标记组织中的生物分子，因此在生物医学研究中使用得特别广泛。
三、总结组织学切片制备和染色技术是生物医学研究中不可或缺的技术之一。
本文介绍了组织学切片的制备技术，包括组织定向、切片制备和前处理等步骤，同时介绍了组织学切片染色技术，包括常规染色和免疫染色等。
通过应用这些技术，可以获得高质量的组织学图像，从而深入了解不同生物组织的结构和功能，为生物医学研究提供有力支持。
组织切片技术
组织切片技术在现代科技发展的背景下，组织切片技术作为一项先进的生物医学研究方法，在细胞学、组织学以及疾病研究等方面发挥着重要作用。
本文将介绍组织切片技术的原理、应用以及未来的发展前景。
一、原理组织切片技术是一种将组织样本切成极薄的切片，以便进行显微镜观察和进一步分析的方法。
它主要包括取样、固定、包埋、切片和染色等步骤。
首先，需要从组织样本中取得足够的细胞或组织。
然后，将样本进行固定，以保持其结构和形态的稳定性。
接下来，将固定的样本进行包埋处理，即将组织样本置于固定液中进行浸渍，再置于石蜡或树脂中固化。
之后，利用显微刀、显微镜或电子显微镜等工具将组织样本切成极薄的切片。
最后，对切片进行染色，以便观察和分析细胞和组织的结构、功能及病理变化。
二、应用组织切片技术在生物医学研究中有着广泛的应用。
主要包括以下几个方面：1. 组织学研究：组织切片技术被广泛应用于组织学研究领域，可以观察和研究各种组织和器官的结构、形态、功能以及病理变化，从而促进对生物体结构和功能的深入了解。
2. 病理诊断：组织切片技术在病理学中扮演着重要的角色。
医生可以通过观察组织切片来诊断疾病，并对患者进行治疗和预后评估。
3. 药物研发：组织切片技术可以用于药物研发中的毒性评估和药物吸收、分布、代谢和排泄等研究。
通过观察组织切片的变化，研究人员可以评估药物对组织和细胞的损伤程度，从而指导药物研发和临床应用。
4. 种植技术：组织切片技术在植物研究中也有广泛应用。
通过观察植物组织切片，可以研究植物的器官结构、细胞构成以及代谢活性等方面的信息，有助于植物遗传改良和种植技术的改进。
三、未来发展随着科学技术的不断发展，组织切片技术也将迎来更广阔的应用前景。
以下几个方面值得关注：1. 自动化和高通量技术：随着自动化和高通量技术的发展，组织切片的速度和效率将大大提高，为更快速地获取更多的组织信息提供了可能。
2. 多重标记技术：利用多重标记技术，可以对组织切片进行多种染色，从而同时观察多个细胞和结构的分布和互动，揭示更深层次的生物过程。
组织切片制作步骤
组织切片制作步骤组织病理切片的制作过程组织取材→固定→冲洗→脱水→透明→浸蜡→组织包埋→组织切片→展片附贴→切片脱蜡→染色→脱水→染片透明→封固。
一、取材切取组织块大小，以1.5×1.5×0.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。
组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。
切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。
二、固定固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。
材料取下后，应迅速固定。
固定液数量应为病理组织块的5到20倍。
由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。
因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90毫升配成。
三、冲洗固定后的组织块，应将固定液洗去。
一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。
及时冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色四、脱水经过固定的组织，冲洗后要进行脱水。
脱水的目的在于将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来，为石蜡等其他包埋剂浸入组织创造条件。
五、透明透明的目的是将组织内的酒精用矿物油或植物油置换出来，并溶解石蜡，帮助石蜡浸透组织。
由于经过透明剂处理的组织块用肉眼观察呈透明状，故称这一过程为透明。
六、浸蜡浸蜡是指组织经过透明作用以后，放入溶化的石蜡中浸渗，使石蜡浸入组织块中，冷却后，才能进行切片。
七、包埋包埋就是将已浸渗好的组织包埋于浸渗剂中。
根据需要，包埋的方法常有石蜡包埋法和火棉胶包埋法。
石蜡包埋法：八、组织切片不同的切片制备方法，其切片方法也有较大差别，组织切片法包括石蜡切片法、冰冻切片法、火棉胶切片法、石蜡包埋半薄切片法、树脂包埋薄切片法和大组织石蜡切片法等。
常用的切片工具包括组织切片机、切片刀和自动磨刀仪器等。
生物活性玻璃脱敏材料的制备及其在牙本质过敏症中的应用
摘要龋病、楔状缺损、牙周萎缩等牙体疾病都可能使牙本质暴露，引发牙本质过敏症，影响天然牙的健康和功能。
根据流体动力学理论，有效治疗牙本质过敏的方法是封闭牙本质小管，促进修复性牙本质的形成。
目前，常见的脱敏材料有氟化物、氯化锶、钙磷酸盐材料和生物活性复合材料等，但这些材料都存在不足。
因此，研发一种可以诱导牙本质再矿化，有效堵塞封闭牙本质小管，同时操作简单、作用快而持久、不影响牙齿美观的脱敏材料具有重要意义。
生物活性玻璃具有良好的生物相容性和较高的生物活性，能够在体液环境下矿化形成羟基磷灰石、与骨组织形成化学键合，还有一定的抑菌作用，其在齿科修复方面的应用越来越受到关注。
本文围绕生物活性玻璃在牙本质过敏症治疗方面的应用展开实验，内容主要分为两部分：制备化学组分均匀、分散性良好、颗粒形貌尺寸可控的生物活性玻璃并研究其相关性能；研究不同粒径、不同孔结构的生物活性玻璃体外诱导牙本质再矿化、治疗牙本质过敏症的效果。
具体研究内容和结论如下：结合溶胶-凝胶技术和模板剂自组装技术，采用十二胺（DDA）作为模板剂和催化剂，制备不同粒径的微纳米生物活性玻璃球。
调节DDA用量、前驱体加入量均可以控制玻璃微球的尺寸，粒径较大的MNBGs体外矿化性能较好。
研究不同尺寸的微纳米生物活性玻璃球在模拟唾液中矿化形成羟基磷灰石堵塞封闭牙本质小管、诱导牙本质切片再矿化形成修复性牙本质的能力。
结果表明，颗粒尺寸与牙本质小管口径相匹配的生物活性玻璃能更好的填充、封闭牙本质小管。
采用两相分层体系，以表面活性剂与有机溶剂在两相界面形成的O/W半乳液胶束为孔道模板，制备树枝状介孔生物活性玻璃微球。
该材料分散性良好、介孔较大、比表面积较高，具有较高的蛋白装载能力和较好的缓释效果，是较好的大分子蛋白载体材料。
研究不同孔结构的生物活性玻璃在模拟唾液中封闭牙本质小管、诱导牙本质再矿化的能力。
结果表明，介孔生物活性玻璃和非介孔生物活性玻璃都能较好的诱导牙本质再矿化形成修复性牙本质层。
牙体组织
第三章牙体组织牙体组织即构成牙的所有组织的总称，包括釉质、牙本质、牙骨质三种硬组织和一种软组织——牙髓。
从发育的角度讲，釉质来源于外胚层，而牙本质、牙骨质和牙髓则来自于外胚间叶组织。
牙本质构成牙的主体，釉质覆盖在牙冠的表面，牙骨质则覆盖于其牙根部表面。
牙中央有一空腔，称为髓腔，充满疏松的牙髓结缔组织，牙髓的血管和神经通过狭窄的根尖孔与牙周组织相通连。
釉质和牙本质相交的面称釉质牙本质界，釉质和牙骨质相交的面称釉质牙骨质界，而牙本质和牙骨质相交的面称牙本质牙骨质界。
第一节釉质釉质（enamel）为覆盖于牙冠的高度矿化的硬组织，是龋病最先侵及的组织，所以受到特殊的关注。
釉质是全身唯一无细胞性、由上皮细胞分泌继而矿化的组织，而且其基质由单一的蛋白质构成而不含胶原。
釉质对咀嚼压力和摩擦力具有高度耐受性。
釉质的基本结构釉柱及其内部的晶体的有序排列使其脆性降低并且有一定的韧性。
釉质内的微量元素和非羟基磷灰石可改变釉质对酸侵蚀的敏感性，而釉柱中晶体的排列方向也与龋病过程中脱矿方式有关。
一、理化特性切牙的切缘处釉质厚约2mm，磨牙的牙尖处厚约2.5mm，釉质自切缘或牙尖处至牙颈部逐渐变薄，颈部呈刀刃状。
釉质外观呈乳白色或淡黄色。
其颜色与釉质的矿化程度有关，矿化程度越高，釉质越透明，其深部牙本质的黄色易透过而呈淡黄色；矿化程度低则釉质透明度差，牙本质颜色不能透过而呈乳白色。
乳牙釉质矿化程度比恒牙低，故呈乳白色。
釉质是人体中最硬的组织，其硬度约为洛式硬度值340KHN，相当于牙本质硬度（70KHN）的5倍，因此对咀嚼磨耗有较大的抵抗力，同时是深部牙本质和牙髓的保护层。
由于其无机物含量高，所以有很高的脆性并且易于折断，釉柱中的晶体排列和位于其深部的有一定的弹性牙本质可降低其易折性。
同时，由于釉质无机物含量、硬度都很高，无法用常规组织学方法观察，一般采用磨片观察其组织结构。
成熟釉质重量的96%～97%的无机物，其余的为少量有机物和水。
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结 果
针对 这一 问题 ， 我们 对 改 善 牙本 质 牙 髓 组织 切 片 的 制 备技术 、 高制 片质量 进行 了探讨 。 提
材料 和方 法
１ Ａ组切 片 ： ． 牙本 质与牙 髓之 间 常见分 离 ， 造牙 本 质细 胞空 泡变性 ， 至造 牙本 质细胞 自溶 消失 ， 甚 细 胞 结构 不清 ， 细胞 核不 着色 ， 片粉染 （ １ 。 切 图 ）
ｄ。
及时和完全的组织 固定能真实地保持其形态和 结 构 ， 制备 优 质组 织 切 片 的基 础 。如 果离 体 组 织 是 不 能及 时得 到完 全 固定 ， 织 在 自身 的溶酶 体 酶 等 组
酶 的作 用下 ， 发 生 组 织 细 胞 溶 解 和 破 坏 ， 分 变 会 成 性， 丧失原 有 的形 态 和结 构 。这 是 以后 制 片过 程 中无 法进行 纠 正 的 。 由于 牙齿 的特 殊 解 剖结 构 ， 牙
２ Ｂ组切 片 ： 本质 与牙 髓之 间 常见 分离 ， 牙 ． 牙 成
１ 标 本 的选 择 ： 择 患 者正 畸减 数拔 除 的恒 牙 ． 选
本 质细 胞多 有空 泡 变性 ， 至造 牙 本 质 细胞 自溶 消 甚 失， 细胞 结 构不 清 （ ２ 。 图 ）
２ 。入选 牙 条 件 ： 冠 完 整 ， 龋 ， 裂 隙 ， 根 ４颗 牙 无 无 牙
所（ 葛丽华 、 汤晓飞、 李玉晶） 牙体牙髓科（ ， 方碧松 ）
固定 不充 分 的表现 ； 时也 可 见 成 牙 本质 细 胞 空 泡 同 变性 ， 细胞 结 构不 清 ， 核丧失 或着 色浅 等细胞 溶解 胞 破 坏 的现象 。本研 究 中截根 后 固定 的标本 因切 除了
通 讯 作 者 ： 丽 华 ， － ａ ：Ｇｈ ９４＠ ｙｈｏｃ ，电话 ： １ － 葛 Ｅｍ ｉ ｌ ６ ｌ １ ａｏ． ｎ ０ ０
发育完 成 。
３ Ｃ组 切片 ： ． 牙本 质与 牙髓 之 间结合 紧密 ， 细胞 核着 色浅 ， 浆核 分界 不清 ， 片粉染 （ ３ 。 切 图 ） ４ Ｄ组切 片 ： 本质 与牙 髓之 间结 合 紧密 ， ． 牙 成牙 本质 细胞 排列 整 齐 ， 细胞 核 易 着 色 ， 核 分界 清 晰 ， 浆
切 片色彩 鲜 明 （ ４ 。 图 ）
讨 论
２试 剂 ：０ 中性 福 尔马林 固定 液 ，０ 甲酸 脱 ． １％ ３％ 钙液 ，０ Ｅ Ｔ １％ Ｄ Ａ脱 钙 液 。 以上 试 剂 购 置 于北 京 化
学试 剂公 司 ， 为分析 纯 。 均
３ 方法 ． 分组 ： 随机 化 原 则将 ２ 按 ４颗 牙 标 本 分 为 ４组
各个 部位 ， 常导致 牙 髓 组 织 和 牙本 质 基 质 固定 不 常
完全 Ｊ如本 文 中 Ａ Ｂ组切 片 可见 冠髓 与 牙本 质分 ， 、
离， 成牙本 质 细胞 间 出现 间隙 ， 细胞 形态 改变 等组 织
作 者单位 ： ０ ５ １ ０ ０北京 首都医科 大学 口腔医学院 口腔医学研究 ０
脱 矿 ： 本 固定 ４ｄ后 ， Ｃ两组标 本置 于 ３ ％ 标 Ａ、 ０
甲酸脱 矿液 中室 温下 震 荡 脱 矿 ， ２天 换 一 次脱 矿 每 液 ， 续约 ３～ 持 ４周 。Ｂ、 两组 标本 置 于 １ ％Ｅ Ｔ Ｄ ０ ＤＡ 脱矿 液 中 室 温 下 震 荡 脱 矿 ， ３天 换 一 次 １％ 每 ０
石蜡包 埋 ， 片 ， Ｅ染 色 。 切 Ｈ
察。以完善的病理技术制备优质的牙齿软硬组织联
合切 片是进 行牙髓 一 本质 组织 病 理学 研究 的基 础 。 牙 但是 这类切 片 的制备 常常 因牙齿 的特殊 结 构造成 牙 髓组 织 固定 不完 全 ， 因 使用 硝 酸 等 强 酸性 溶 液 脱 或
京 口腔 医学
２１ ００年第 １ 第 ６期 ８卷
Ｂ ｉｎ ｏｒａ ｏ ｔｍ ｔｏ３ Ｄ ｃｍ ｅ ０ ０． ０．１ ．Ｎ ． ｅｊ ｇＪｕ ｌ ｆｏ ａｏ ｇ ｉ ｎ Ｓ ｌ ， ｅｅ ｂ ｒ １ ｖ １ ８ ｏ６ ２
．
实 验 室 技 术 ．
制 备 优 质 牙 本 质 一 髓 复 合 体 组 织切 片 的方 法 探讨 牙
葛丽华 方 碧松 汤 晓飞 李玉 晶 龋 病治 疗学 、 牙体 修 复学 和 口腔材 料 学 等 研究
领域都 离不 开对牙 本质 和牙髓 组织 病理 学变 化 的观 观察标 本 ， 以标 本变 软 ， 橡皮 感 时结 束脱 矿 。脱矿 有
后 四组 所 有标本 自来 水 冲洗后 ， 常规 脱 水 、 明 ， 经 透
（ Ｂ、 Ｄ组 ）每 组 ６颗 。 Ａ、 ｃ、 ， 固定 ： Ｂ两 组牙拔 除后 立 即 置人 １％ 中性 福 Ａ、 ０ 尔 马林 固定液 中 ； Ｄ两 组 牙拔 除后 用 金 刚砂 切 片 Ｃ、
在 牙根颈 １３处 高速切 除牙 根尖 部 ， 即置入 １ ％ ／ 立 ０ 中性福 尔马林 固 定液 中。４组 标 本 固定 时 间均 为 ４
钙造 成牙髓 组 织损 伤 ， 致 牙髓 细 胞 形 态 和结 构 破 导 坏 ， 响此 类 切 片 的 质 量 和 观 察 结 果 的准 确 性 。 影
观察 ： 用光 学显 微镜 观察 各组标 本切 片 ， 析各 分
组切 片质 量 ， 组 织 细胞 形 态 结 构 及染 色 效 果 进行 对
６ ０ ９ １ ７ ９ ３ １
京 口腔 医学
２ １ 第 １ 第 ６期 ０ ０年 ８卷
Ｂ ｒｎ ｏｒＭ ｆ ｔ ｔｌ ｙ Ｄ ｃｍｂｒ １ ｅ ｉｇＪｕｎ ｏ ｏ ｏｏ ｅｅ ｅ ０ Ｓ ｍａ ｇ
ＥＴ Ｄ Ａ脱矿 液 ， 续 约 ８～１ 持 ０周 。脱 矿 过 程 中不 断
髓只 有通过 细 窄 的 根尖 孔 与 牙 外 组织 相 连 。 因此 ， 固定 离体 牙时 ， 固定 液 也 只能 从 根尖 孔 进 入 根管 和 髓腔 ， 扩散 速度 很慢 ， 能及 时快 速 的渗 透到冠 髓 的 不