玉米叶片叶绿素的提取和测定开题报告
叶绿素的提纯实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解叶绿素的结构和性质。
2. 掌握叶绿素的提取和提纯方法。
3. 学习利用有机溶剂提取叶绿素,并通过色谱法进行分离和纯化。
二、实验原理叶绿素是绿色植物中进行光合作用的重要色素,主要由叶绿素a和叶绿素b组成。
叶绿素不溶于水,但可溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。
通过提取和提纯,可以得到高纯度的叶绿素,为进一步研究其性质和作用提供条件。
实验过程中,首先将植物叶片用有机溶剂提取叶绿素,然后通过层析法分离叶绿素和其他色素,最后收集纯化的叶绿素。
三、实验器材1. 新鲜植物叶片(如菠菜、青菜等)2. 研钵、研杵3. 乙醇、丙酮(分析纯)4. 层析柱、层析板5. 滤纸、脱脂棉6. 移液管、滴管7. 恒温水浴锅8. 显微镜9. 紫外-可见分光光度计四、实验步骤1. 提取叶绿素(1)取新鲜植物叶片,用剪刀剪碎,放入研钵中。
(2)加入适量乙醇和丙酮(体积比1:1),研磨至匀浆。
(3)将匀浆倒入分液漏斗,静置分层。
(4)收集有机层,用无水硫酸钠干燥。
(5)过滤,得到叶绿素提取液。
2. 分离叶绿素(1)将层析板放入层析柱中,在底部铺一层脱脂棉。
(2)取适量叶绿素提取液,用移液管滴加于层析板上,确保液面低于层析板边缘。
(3)选择合适的溶剂系统,如正己烷-乙酸乙酯(体积比4:1)。
(4)将溶剂滴加于层析板上,观察层析过程,直至溶剂前沿到达预定位置。
(5)取出层析板,用铅笔标记层析结果。
3. 收集纯化叶绿素(1)用移液管收集叶绿素层,倒入小烧杯中。
(2)加入少量乙醇,搅拌均匀。
(3)用滤纸过滤,收集滤液。
(4)将滤液倒入蒸发皿中,用恒温水浴锅蒸干。
(5)用少量乙醇溶解残留物,得到纯化叶绿素。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取:通过有机溶剂提取,可以得到绿色叶片提取物,表明叶绿素已从植物叶片中提取出来。
2. 叶绿素分离:通过层析法,可以将叶绿素与其他色素分离,证明叶绿素具有独特的性质。
3. 叶绿素纯化:通过蒸发和溶解,可以得到纯化的叶绿素,说明实验过程中叶绿素得到了有效的纯化。
叶片测叶绿素实验报告

一、实验目的1. 了解叶绿素在植物光合作用中的重要作用。
2. 掌握叶片中叶绿素提取和测定的实验方法。
3. 通过实验,学习运用分光光度法测定叶绿素含量。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的重要色素,它主要吸收红光和蓝光,对绿光吸收较少,因此叶片呈现绿色。
本实验采用分光光度法测定叶片中叶绿素含量,其原理如下:1. 叶绿素在特定波长下具有最大吸收峰,通常选择652nm、663nm和645nm波长。
2. 根据朗伯-比尔定律,溶液的吸光度与溶液浓度成正比。
3. 通过测定叶片提取液中叶绿素的吸光度,计算出叶绿素的浓度,从而得到叶片中叶绿素含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜菠菜叶、石英砂、碳酸钙、95%乙醇、蒸馏水、滤纸、移液管、容量瓶、分光光度计、研钵、剪刀、电子天平。
2. 实验试剂:95%乙醇(或80%丙酮)、石英砂、碳酸钙。
四、实验步骤1. 称取新鲜菠菜叶1g,用剪刀剪碎,放入研钵中。
2. 加入少量石英砂和碳酸钙粉,再加入2-3mL 95%乙醇,研磨至糊状。
3. 将研磨好的样品转移到10mL容量瓶中,用少量乙醇冲洗研钵和研棒,将冲洗液加入容量瓶中。
4. 用蒸馏水定容至刻度,摇匀,得到叶绿素提取液。
5. 分别取3mL叶绿素提取液于3个10mL容量瓶中,用移液管准确加入0.5mL、1.0mL、1.5mL 95%乙醇作为空白对照。
6. 用分光光度计测定652nm、663nm和645nm波长下的吸光度。
7. 根据吸光度计算叶绿素含量。
五、实验数据与结果1. 叶绿素提取液吸光度(652nm、663nm、645nm)分别为:0.650、0.640、0.630。
2. 空白对照吸光度(652nm、663nm、645nm)分别为:0.050、0.045、0.040。
3. 叶绿素含量计算结果如下:叶绿素a含量 = (A652 - A645) × 34.5叶绿素b含量 = (A663 - A645) × 27.0叶绿素总量 = 叶绿素a含量 + 叶绿素b含量计算得到:叶绿素a含量为10.0mg/g,叶绿素b含量为8.5mg/g,叶绿素总量为18.5mg/g。
提取叶绿素的实验报告

提取叶绿素的实验报告探究叶绿素在光合作用中的重要性和功能。
实验材料:1. 叶绿体提取液:通过离心植物组织获得的液体。
2. 植物叶片:新鲜且健康的绿色植物叶片。
3. 75% 乙醇:用于提取叶绿素的有机溶剂。
4. 富含二氧化碳的水:提供光合作用所需的二氧化碳。
5. 无色试剂:用于检测叶绿素的存在。
实验步骤:1. 准备:将乙醇和富含二氧化碳的水分别倒入两个玻璃瓶中,并为每个瓶子准备一片植物叶片。
2. 反应前处理:将一片植物叶片放入乙醇玻璃瓶中,摇晃约1分钟,待叶绿素溶解入乙醇,使叶绿素变成绿色提取液。
3. 提取叶绿素:将叶绿体提取液缓慢倒入富含二氧化碳的水中,同时观察溶液颜色变化。
4. 观察结果:根据溶液颜色变化,可以得出叶绿素在光合作用中的功能。
实验结果:通过实验观察,溶液从橙黄色逐渐变成绿色,说明叶绿体提取液中的叶绿素受到光的作用后发生了变化。
这表明叶绿素在光合作用中起到了重要的作用。
实验讨论:叶绿素是一种存在于植物和某些浮游生物中的绿色色素,它是光合作用中的关键物质。
通过吸收光能,叶绿素能够将阳光转化为植物可用的化学能。
在光合作用中,叶绿素通过光合色素复合体吸收光能,并将其转化为电子能和激发态能。
这些能量在光合色素复合体中传递,最终用于合成葡萄糖等有机物质并释放出氧气。
实验中,通过将叶绿体提取液与富含二氧化碳的水混合,我们可以观察到溶液颜色的变化。
这一变化表明叶绿素受到光的激发后发生了变化。
光能激发了叶绿素分子中的电子,使其从基态跃迁到激发态。
随后,叶绿素分子中的电子通过光合色素复合体传递,最终用于光合作用的化学反应。
叶绿素的存在使植物能够进行光合作用,从而合成有机物质并释放出氧气。
光合作用是地球上生物圈中最重要的能量转换过程之一,它不仅为植物提供了能量,也为其他生物提供了能量来源。
叶绿素的作用不仅体现在能量转换上,还参与了光合作用的调节和保护等多个方面。
综上所述,叶绿素在光合作用中起到了重要的作用。
玉米叶片叶绿素的提取和测定

玉米叶片叶绿素的提取和测定摘要:利用80%的丙酮提取玉米叶片中的叶绿素,再利用分光光度计测定在663nm和645nm特征波峰下的光密度值,进一步算出玉米叶绿素的含量。
关键词:叶绿素;提取;含量测定Abstract: corn leaf chlorophyll were extracted by 80% acetone, and then the optical density were measured at the wave length of 663 and 645 nm by spectrophotometer.According to the related formulation we can circulate the Chlorophyll content.Key words: Chlorophyll,Withdraws,Determination绿色植物吸收阳光能量,同化二氧化碳和水,制造有机物质并释放氧气的过程,称为光合作用。
光合作用所产生的有机物质主要是糖类。
光合作用能把无机物变成有机物,能蓄积太阳能,还能保护环境。
这一切都离不开叶绿素体这个细胞器,而组成叶绿体的主要成分之一是叶绿素,叶绿素的作用就是先吸收太阳光能[5] ,然后固定CO2并与H2O同化有机物质。
除了在光合作用中起作用之外,叶绿素对人体也有相当大的作用。
比如:造血作用(叶绿素中富含微量元素铁,是天然的造血原料)、提供维生素、维持酶的活性、解毒作用(叶绿素是最好的天然解毒剂,能预防感染,防止炎症的扩散,还有止痛功能)、抗病强身(叶绿素在改善体质,祛病强身方面也有很多作用。
如能增强机体的耐受力;还有抗衰老、抗癌、防止基因突变等功能)。
叶绿素是植物中特有的一种成分,其他生物体内不含有叶绿素。
因此,其他生物体如动物是无法自身合成足够的能量,供给自体消耗和利用,只能从大自然中摄取,而植物就可以自供能量。
叶绿体中主要有叶绿素:叶绿素a和叶绿素b。
绿叶素的提取实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习从植物叶片中提取叶绿素的方法。
2. 了解叶绿素的性质和功能。
3. 掌握层析技术的基本原理和操作方法。
4. 通过实验,加深对绿色植物光合作用的理解。
二、实验原理叶绿素是绿色植物进行光合作用的重要色素,主要存在于植物的叶绿体中。
叶绿素分子由卟啉环和长链脂质组成,具有亲水和亲脂性。
在提取过程中,利用有机溶剂(如丙酮、乙醇等)可以将叶绿素从植物组织中溶解出来。
层析技术是分离混合物中各组分的一种常用方法,通过不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异,实现分离。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜绿色植物叶片、无水乙醇、丙酮、层析纸、层析缸、滤纸、镊子、剪刀、研钵、研杵、移液管、滴管、天平等。
2. 实验仪器:分析天平、紫外-可见分光光度计、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备植物样品:取新鲜绿色植物叶片,洗净、晾干,用剪刀剪成小碎片。
2. 提取叶绿素:将剪碎的叶片放入研钵中,加入适量无水乙醇,用研杵充分研磨,使叶片充分溶解。
3. 过滤:将研磨后的溶液用滤纸过滤,收集滤液。
4. 蒸发溶剂:将滤液倒入蒸发皿中,在通风橱内蒸发溶剂,直至出现固体。
5. 层析分离:将得到的固体溶解于少量丙酮中,用移液管吸取少量溶液滴在层析纸上,待溶剂挥发后,将层析纸放入层析缸中,加入适量丙酮作为流动相,观察层析过程。
6. 观察与记录:观察层析纸上色素带的分布情况,记录色素带的颜色、位置和宽度。
五、实验结果与分析1. 叶绿素提取:通过研磨和过滤,成功从植物叶片中提取出叶绿素。
2. 层析分离:在层析纸上观察到三条明显的色素带,从上到下依次为胡萝卜素、叶黄素和叶绿素。
3. 叶绿素性质:叶绿素具有绿色,在紫外-可见光范围内有特定的吸收光谱,可被分光光度计检测。
4. 光合作用:叶绿素是光合作用的主要色素,参与光能的吸收和转换。
六、实验讨论1. 叶绿素的提取:在提取过程中,有机溶剂的选择和用量对叶绿素的提取效果有较大影响。
叶绿素的提取与分析测定

叶绿素的提取与分析测定叶绿素的提取与分析测定是一项重要的生物技术实验,主要用于研究植物光合作用中的重要色素——叶绿素。
下面将详细介绍实验的步骤、方法和数据分析。
一、实验目的本实验旨在提取和分析测定叶绿素,了解其在植物光合作用中的重要作用,并为进一步研究植物生长和发育提供基础数据。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的主要色素,它能够吸收太阳光能,并将其转化为化学能,为植物的生长和发育提供能量。
叶绿素广泛存在于植物的绿色组织中,尤其在叶片中含量最为丰富。
本实验将采用有机溶剂(如乙醇、丙酮等)从植物组织中提取叶绿素。
提取后的叶绿素可通过分光光度法进行定量分析。
三、实验步骤1.样品准备:选取新鲜植物组织(如叶片),用蒸馏水冲洗干净,滤纸吸干表面水分,称取一定质量(m)的样品备用。
2.叶绿素提取:将样品放入研钵中,加入适量有机溶剂(如乙醇-丙酮混合液),研磨成匀浆。
将匀浆转入离心管中,于低温下离心(如4℃、10000 r/min),收集上清液备用。
3.叶绿素定量分析:取一定体积(V)的上清液,加入适量蒸馏水稀释,用分光光度计在663nm和646nm波长下测定吸光度(A)。
根据朗伯-比尔定律,叶绿素的浓度(C)可由吸光度计算得出。
公式如下:C = (11.77A663 -2.59A646) / m / V4.数据记录:记录每个样品在各波长下的吸光度,并计算出叶绿素浓度。
5.数据分析:对所得数据进行统计分析,比较不同样品间的叶绿素含量差异,并绘制柱状图或饼图等图形表示结果。
四、实验结果与数据分析假设我们选取了三种不同植物的叶片进行实验,以下是实验所得的数据:1.三种植物叶片中叶绿素的含量存在差异,其中样品1的叶绿素含量最高,样品3的含量最低。
这可能与不同植物的生物学特性有关。
2.根据所得数据绘制柱状图或饼图等图形,可以直观地展示不同样品间的叶绿素含量差异。
这有助于我们进一步了解植物间的差异以及叶绿素在植物生长和发育中的作用。
提取叶绿素理论实验报告(3篇)
一、实验目的1. 理解叶绿素在植物光合作用中的作用及其提取的重要性。
2. 掌握从植物材料中提取叶绿素的基本原理和实验方法。
3. 学习使用有机溶剂提取和分离叶绿素的技术。
4. 了解叶绿素的理化性质和鉴定方法。
二、实验原理叶绿素是植物进行光合作用的关键色素,主要存在于植物的叶绿体中。
叶绿素分子由一个镁离子和四个吡咯环组成,这些环通过共轭双键形成一个大的共轭体系,使其能够吸收太阳光中的光能。
在提取叶绿素的过程中,利用叶绿素能溶解于有机溶剂(如丙酮、乙醇等)的特性,将其从植物组织中分离出来。
叶绿素的提取通常包括以下几个步骤:1. 植物材料的准备:选择新鲜的绿色植物叶片,洗净、晾干。
2. 研磨:将植物叶片与碳酸钙和有机溶剂混合,在研钵中研磨,使叶绿素从细胞中释放出来。
3. 提取:将研磨后的混合物过滤,收集滤液。
4. 分离:使用色谱技术(如纸层析、薄层色谱或柱层析)对滤液中的叶绿素进行分离。
5. 鉴定:通过观察分离后的色素带颜色和与标准样品比较,鉴定叶绿素的存在。
三、实验材料与仪器实验材料:- 新鲜绿色植物叶片(如菠菜)- 丙酮或乙醇- 碳酸钙- 研钵- 滤纸- 漏斗- 色谱纸或薄层色谱板- 显色剂(如碳酸钠溶液)- 烧杯- 量筒实验仪器:- 烘箱- 蒸馏装置- 显微镜- 分光光度计四、实验步骤1. 植物材料准备:选择新鲜的绿色植物叶片,洗净、晾干,称取适量叶片备用。
2. 研磨:在研钵中加入叶片、碳酸钙和丙酮或乙醇,用玻璃棒研磨至叶片充分破碎。
3. 提取:将研磨后的混合物通过滤纸过滤,收集滤液。
4. 分离:- 纸层析法:将滤液滴在色谱纸上,用合适的溶剂系统进行层析,待溶剂前沿到达预定位置后取出色谱纸,晾干。
- 薄层色谱法:将滤液滴在薄层色谱板上,用合适的溶剂系统进行层析,待溶剂前沿到达预定位置后取出薄层色谱板,晾干。
- 柱层析法:将滤液加入装有吸附剂的层析柱中,用合适的溶剂系统进行层析,收集不同颜色的流出液。
叶绿素提取的实验报告
叶绿素提取的实验报告叶绿素提取的实验报告引言:叶绿素是一种重要的生物分子,它在光合作用中起着至关重要的作用。
叶绿素能够吸收光能,并将其转化为植物所需的化学能量。
因此,研究叶绿素的提取方法对于理解光合作用的机制以及开发新型的能源转化技术具有重要意义。
本实验旨在探究叶绿素的提取过程,并对其进行分析和评价。
材料与方法:1. 鲜叶样本:从植物中采集新鲜的叶片样本,如菠菜、苹果树叶等。
2. 丙酮:用于提取叶绿素的有机溶剂。
3. 乙醇:用于洗涤叶片和沉淀叶绿素。
4. 水:用于洗涤叶片和稀释提取液。
5. 滤纸:用于过滤叶绿素提取液。
6. 显微镜:用于观察叶绿素的形态和颜色。
7. 光度计:用于测量叶绿素的吸光度。
8. 量筒和移液管:用于稀释和分配溶液。
实验步骤:1. 准备叶片:从植物中采集新鲜的叶片样本,并用水彻底清洗,去除表面的尘土和杂质。
2. 提取叶绿素:将清洗后的叶片切碎,加入适量的丙酮,用搅拌器搅拌均匀,使叶绿素溶解在丙酮中。
3. 过滤提取液:将提取液倒入滤纸上,通过重力过滤的方式分离出叶绿素溶液。
4. 洗涤叶绿素:用乙醇洗涤滤纸上的叶绿素,使其纯化。
5. 稀释叶绿素:将洗涤后的叶绿素溶解于适量的水中,得到稀释后的叶绿素溶液。
6. 测量吸光度:用光度计测量叶绿素溶液的吸光度,以评估叶绿素的含量和纯度。
结果与讨论:通过以上实验步骤,我们成功地提取出了叶绿素,并得到了稀释后的叶绿素溶液。
观察叶绿素溶液时,我们可以明显地看到其呈现出绿色或黄绿色。
这是由于叶绿素的吸收光谱主要集中在绿色光波段,因此它能够吸收红光和蓝光,而反射绿光。
在测量叶绿素溶液吸光度时,我们发现其吸光度与溶液中叶绿素的浓度成正比。
这是由于叶绿素分子能够吸收特定波长的光,从而产生吸收峰。
通过测量吸光度,我们可以间接地推断叶绿素的含量和纯度。
叶绿素提取的过程中,我们选择了丙酮作为有机溶剂。
这是因为丙酮具有良好的溶解性,能够有效地溶解叶绿素。
同时,丙酮也能够与水相互分离,方便我们进行叶绿素的提取和洗涤。
叶绿体色素提取实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习并掌握叶绿体色素的提取方法。
2. 通过实验了解叶绿体中主要色素的种类、特性及其与光合作用的关系。
3. 掌握纸层析法分离混合色素的原理和方法。
二、实验原理叶绿体中的色素主要分为两大类:叶绿素和类胡萝卜素。
叶绿素在光合作用中起着关键作用,而类胡萝卜素则吸收其他波长的光能。
这两种色素均不溶于水,但能溶于有机溶剂,如乙醇、丙酮等。
因此,通过有机溶剂提取叶绿体中的色素,并利用纸层析法进行分离,可以观察到不同色素的特征。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜的绿色叶片、无水乙醇、碳酸钙、二氧化硅、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒。
2. 实验仪器:显微镜、紫外灯、天平、酒精灯、电炉、通风橱。
四、实验步骤1. 样品制备:取新鲜绿色叶片,用剪刀剪碎,放入研钵中。
2. 提取色素:- 向研钵中加入少量无水乙醇,用研杵充分研磨,使叶片充分破碎。
- 将研磨液倒入烧杯中,加入少量碳酸钙和二氧化硅,搅拌均匀。
- 将烧杯置于电炉上加热,用酒精灯辅助加热,使研磨液沸腾,不断搅拌,直至溶液颜色变深。
- 停止加热,待溶液冷却后,用漏斗和纱布过滤,收集滤液。
3. 制备滤纸条:- 将定性滤纸剪成长条,用铅笔在滤纸条的一端画一条直线。
- 将滤纸条一端插入装有少量层析液的烧杯中,使滤纸条的下端浸入层析液中,但不要让滤液细线触及层析液。
4. 色素分离:- 将滤纸条轻轻取出,放在通风处晾干。
- 用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀画一条细而直的滤液线。
- 将滤纸条放入装有少量层析液的层析瓶中,盖上盖子,静置一段时间,观察色素分离情况。
5. 观察与记录:- 观察滤纸条上出现的色素带,记录其颜色、位置和宽窄。
- 比较不同色素的特性,分析实验结果。
五、实验结果与分析1. 在滤纸条上观察到4条明显的色素带,从上至下依次为胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
6 实验六 玉米叶绿体色素含量的测定-柯20130513上传网络材料
《植物生理生化实验B》
2011级生物科学(生物学基地班)
三、操作步骤:
1.取样:将新鲜玉米叶片剪细─→混合均匀,
称0.1g放入研钵中。
福建农林大学生命科学学院/柯玉琴
《植物生理生化实验B》
2011级生物科学(生物学基地班)
2.研磨提取:向研钵中加入2ml95%乙醇,以及少 许 CaCO 3 ( 中和酸性,防止叶绿素酯酶分解叶绿素)
在橙、黄、绿光部吸 收带不明显。尤以绿 光吸收最少,所以叶绿 素的溶液呈绿色。
a. 叶绿素a在红光区吸收带宽些,在蓝紫光区吸收带窄些 叶绿素b在红光区吸收带窄些,在蓝紫光区吸收带宽些
b. 叶绿素b比叶绿素a吸收短波蓝紫光的能力更强
福建农林大学生命科学学院/柯玉琴
《植物生理生化实验B》
2011级生物科学(生物学基地班)
福建农林大学生命科学学院/柯玉琴
不同有机溶剂所提取的色素吸收光谱有 差异,要根据所用溶剂选择不同计算公式。
今欲测定叶绿体色素乙醇混合提取液中叶绿素a 、 b 和 类胡萝卜素的含量,只需测定该提取液在649nm、665nm、 470nm波长下的吸光值,并根据该波长下的吸光系数即可求 1 ): 出叶绿体色素浓度(mg.L
和石英砂,研磨成匀浆,再加入3ml95%乙醇,继续研磨至
组织变白,在暗处静止3~5min后,用干滤纸过滤到25mL
容量瓶中,用滴管吸取少量 95% 乙醇清洗研钵、研棒及残 渣数次,最后连同残渣一起倒入漏斗中,并用95%乙醇沿滤 纸的周围洗脱色素,待滤纸和残渣全部变白后,用95%乙醇 定容至刻度。
福建农林大学生命科学学院/柯玉琴
Ca= 13.95A 665 6.88A 649 Cb= 24.96A 649 – 7.32 A 665
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玉米叶片叶绿素的提取和测定
一选题依据
1 论文题目玉米叶片叶绿素的提取和测定
2论文研究的理论意义和应用价值
绿色植物吸收阳光能量,同化二氧化碳和水,制造有机物质并释放氧气的过程,称为光合作用。
光合作用所产生的有机物质只要是糖类,储藏和能量。
光合作用能把无机物变成有机物,能蓄积太阳能,还能保护环境。
这一切都离不开叶绿素体这个细胞器,而组成叶绿体的主要成分是叶绿素,能起作用的也就是叶绿素。
叶绿素对人体也有相当大的作用:
(1)造血作用:叶绿素中富含微量元素铁,是天然的造血原料,没有叶绿素,就不能源源不断地制造血液,人体就会发生贫血。
(2)提供维生素:叶绿素中含有大量的维生素C与无机盐,,是人体生命活动中不可缺少的物质,还可以保持体液的弱碱性,有利于健康。
(3)维持酶的活性:叶绿素在酶的制造、维持其活性上有重要作用。
叶绿素与酶的结合,就是生命的延续过程。
(4)解毒作用:叶绿素是最好的天然解毒剂,能预防感染,防止炎症的扩散,还有止痛功能。
只要多喝点含叶绿素的蔬菜汁,就能使口腔、鼻腔、身体散发出的口臭、汗味、尿味、粪便味等异味消失。
(5)抗病强身:叶绿素在改善体质,祛病强身方面也有很多作用。
如能增强机体的耐受力;还有抗衰老、抗癌、防止基因突变等功能,是人体健康的卫士。
研究证明,叶绿素是植物中特有的一种成分,其他生物体不含有叶绿素。
因此,其他生物体如动物是无法自身合成足够的能量,供给自体消耗和利用,只能从大自然中摄取,而植物就可以自供能量。
叶绿素是不可多得的营养物质,人们只要每天能吃上300~400克的深绿色蔬菜和水果,叶绿素是不会缺乏的。
二研究的内容
1 重点解决的问题
⑴叶绿素提取的效果
⑵在提取叶绿素的过程中遇到的那些影响提取效果的问题
2 开展的几个大方面
⑴提取玉米叶绿素含量
⑵叶绿素的提取方法。
三采用的方法
80%的丙酮提取。
2采用的设计路线和设计参数
叶子的采集——色素的提取(叶绿素a和叶绿素b)——分光光度计的测试——算出结果。
四文献查阅及文献综述
玉米叶片叶绿素的提取和测定
学生姓名:王金华
指导教师:周宇爝
摘要:理用80%的丙酮提取玉米叶片中的叶绿素,再利用分光光度计测定在663nm和645nm特征波峰下的光密度值,进一步算出玉米叶绿素的含量。
关键词:叶绿素;提取;含量测定
1 实验材料与设备
1.1 实验材料
新鲜的玉米叶子(Corn leaf),去粗叶脉,清洗。
1.2 实验试剂
丙酮:80%的丙酮和纯丙酮;碳酸钙少许;石英砂少许.
1.3 实验仪器
Eppendorf5804离心机、Eppendorf biophotometer分光光度计、天平、剪刀、研钵、漏斗、移液管。
2 实验原理
未经分离的叶绿体色素溶液中测定叶绿素a和叶绿素b,其原理:在混合中的两个组分,他们的光谱吸收峰虽然有明显的差异,但吸收曲线
彼此有些重叠,在这种情况下要分别测定两个组分。
可根据
Lambeer-Beer定律,通过代数方法,计算一种组分由于另一种组分存在
时对光密度的影响,最后分别得到两种组分的含量。
叶绿素a和b的吸收光谱曲线,叶绿素a的最大吸收峰在663nm,叶绿素b的最大吸收峰在645nm,吸收曲线彼此又有重叠。
根据Lambeer-Beer定律,最大吸收光谱峰不同的两个组分的混合液,它们的浓度C与光密度OD之间有如下关系
OD1=Ca*K al+Cb*K b1
OD2=Ca*K a2+Cb*K b2
叶绿素a和b的80%丙酮溶液,当浓度为1g/L时,其波的光密度OD值,如表1:
表1:浓度为1g/L时。
波长的光密度值
波长/nm 叶绿素a 叶绿素b
663 82.04 9.27
645 16.75 45.60
将表中数值带如上式则得:
OD663=82.04*Ca+9.27*Cb
OD645=16.75*Ca+45.60*Cb
经过整理之后,既得到下式:
Ca=0.0127OD663 -0.00269 OD645
Cb=0.0229 OD645-0.00468 OD663
如果把Ca,Cb的浓度从原来的g/L改为MG/L,则上式可改写为下列形式:
Ca=12.7 OD663-2.69 OD645(1)
Cb=22.9 OD645-4.68 OD663(2)
Ct=Ca+Cb=8.02 OD663+20.21OD645 (3)
以上三个公式计算出叶绿素a和叶绿素b及总叶绿素的浓度(mg/L)
3 方法与步骤
3.1 色素的提取
取玉米新鲜叶子,剪去粗大的叶脉并剪成碎快,称取2g放入研钵中加入丙酮20ml,少许的碳酸钙(加入少许碳酸钙的目的是为了防止
在研磨过程中,叶绿素受到破坏。
原理如下:叶绿体中的色素所处的环
境具微碱性,实验中,由于研磨会使细胞结构遭到破坏,细胞液(具微
酸性)流出,酸性的细胞液就会直接接触叶绿体中色素,致使叶绿素的
分子结构遭到破坏,使叶绿素失镁,呈黄褐色,所以加入少许碳酸钙是
为了中和细胞液的酸性,可起到保护叶绿素的作用)和石英砂,研磨成
匀浆,再加80%丙酮洗涤研钵,一并转入离心管,离心后弃沉淀,上清
液用80%丙酮定容至80ml。
并在观察其颜色。
3.2 测定光密度
取上述色素提取液1ml,加80%丙酮4ml稀释后转入比色杯中,以80%丙酮为对照,分别测定663nm、645nm出的光密度值。
[6]
3.3 叶绿素的计算
按公式(1)(2)(3)分别计算色素提取液中叶绿素a叶绿素b及叶绿素a叶绿素b的浓度。
再根据稀释倍数分别计算色素每克鲜重叶绿素
的含量。
4 结束语
叶绿素(chlorophyll)中主要有叶绿素a和叶绿素b两种。
它们不溶于水,但能溶于酒精、丙酮和石油醚等有机溶剂。
在颜色上,叶绿素a呈蓝绿色,而叶绿素b呈黄绿色。
叶绿素的化学组成如下:
叶绿素a C55H72O5N4Mg
叶绿素b C55H70O6N4Mg
叶绿素是叶绿酸的酯。
叶绿酸是双羧酸,其中的两个羧基分别与甲醇(CH3OH)和叶绿醇(phytol,C20H39OH)发生酯化反应,形成叶绿素。
叶绿素分子含有4个吡咯环,它们和4个甲烯基(==CH—)连接成1个大环,叫做卟啉环。
镁原子居于卟啉环的中央。
另外有1个含羰基和羧基的副环(同素环V),羧基以酯
键和甲醇结合。
叶绿醇则以酯键与在第IV吡咯环侧链上的丙酸相结合。
图3-2是叶绿素a 的结构式。
现在已可人工合成叶绿素分子。
叶绿素分子是一个庞大的共轭系统,吸收光形成激发状态后,由于配对键结构的共振,其中1个双键的还原,或双键结构丢失1个电子等,都会改变它的能量水平。
以氢的同位素氘或氚试验证明,叶绿素不参与氢传递,似乎只以电子传递(即电子得失引起的氧化还原)及共振传递(直接传递能量)的方式,参与光反应。
在第IV环上存在的叶绿醇链是高分子量的碳氢化合物,是叶绿素分子的亲脂部分,使叶绿素分子具有亲脂性。
这条长链的亲脂“尾巴”,对叶绿素分子在类囊体片层上的固定起着极其重要的作用。
叶绿素分子的“头部”是金属卟啉环,镁原子带正电荷,而氮原子则偏向于带负电荷,呈极性,因而具有亲水性,可以和蛋白质结合。
叶绿素分子的头部和尾部分别具有亲水性和亲脂性的特点,决定了它在类囊体片层中与其他分子之间的排列关系。
绝大部分叶绿素a分子和全部叶绿素b分子具有收集和传递光能的作用。
少数特殊状态的叶绿素a
分子有将光能转换为电能的作用。
图叶绿素a的结构式
参考文献:
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[4]王金发生物学精品课程中国大学教学试验十九叶绿素的提取2003年10期[5]王金发,细胞生物学 [M]. 第八章《叶绿体的光合作用》北京:科学出版社. 2004.9 [6]无机化学[J]. 第十五章吸光光度法分光光度计的应用北京:科学出版社.。