引起梅毒血清试验假阳性影响因素
梅毒的实验室检测与技术规范标准[详]
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梅毒概述（三）
疑似病例、确证病例诊断依据： ➢ 病史 ➢ 症状 ➢ 实验室检查
梅毒的实验室检查结果对诊断有决定性意义
梅毒实验室检测技术
• 病原学检测 • 血清学检测
梅毒血清学检测方法
梅毒血清学检测分类
(1) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验 （非特异性梅毒抗体）
(2) 梅毒螺旋体抗原血清学试验 （特异性梅毒抗体）两类方法。
处理：将血清稀释后再进行试验。
耐血清性（血清固定）
指经抗梅毒治疗后，非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时 期内不阴转。早期的耐血清性常与治疗量不足或不规则治 疗、复发、再感染或有神经系统梅毒等因素有关。
梅毒螺旋体抗原血清学试验
梅毒螺旋体抗原血清学试验方法
梅毒螺旋体颗粒凝集试验 (TPPA) 梅毒螺旋体血球凝集试验 (TPHA) 梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA） 梅毒免疫层析法-梅毒快速检测 (RT) 荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS） 化学发光免疫分析法（CLIA） 梅毒螺旋体蛋白印迹试验（WB）
TPPA
TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒，此致敏颗 粒与人血清中的抗梅毒螺旋体抗体结合，产生可 见的凝集反应，具有较高的敏感性和特异性。
TPPA是目前WHO认可的梅毒抗原血清学试验的 “金标准”，常用于新方法、新试剂评价的参照 标准。
TPPA(TPHA)试验原理示意图
梅毒螺旋体抗原血清试验的临床意义
效观察、判愈、复发或再感染的指征。 • 为什么要做定量检测？
非梅毒螺旋体抗原血清学试验临床意义
一期梅毒1年后转为阴性 二期梅毒2年后转为阴性。 晚期梅毒 治疗后血清滴度下降缓慢，2年
后约50%病人血清反应仍为阳性。Tຫໍສະໝຸດ UST结果解释示意图假阳性问题
梅毒诊治中常见问题及研究进展
2020/11/14
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晚期神经梅毒：
多在感染3-20年后发生， 无症状神经梅毒 脊髓痨及麻痹性痴呆 脑（脊髓）膜血管型神经梅毒
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先天梅毒
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早期粘膜损害：鼻炎为最常见和最特殊的表
现，可形成溃疡致鼻中隔穿孔。
早期先天骨梅毒： 骨软骨炎、骨膜炎引
起梅毒性假瘫。
吉海反应
青霉素过敏
时间 多在用药数小时发生
常发生于注射时或注射后30分钟 内
症状 寒战、头痛、呼吸加快、 舌麻、口干、恶心、呕吐、出冷汗
心动过速、全身不适、
荨麻疹、呼吸困难、血压下降昏迷
原发疾病加重。
预防 口服强的松片10mg Bid×3天 肾上腺素注射、给氧、人工呼吸、dxm
静滴
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晚期先天梅毒：＞2岁 ▲与晚期后天梅毒基本相似 ▲以角膜、骨和神经损害最为重要 ▲临床可见活动性损害及标记性损害
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标记性损伤 △哈钦森牙 △实质性角膜炎 抗梅毒治疗常无效 △神经性耳聋 多发生于学龄儿童 △其它 ： 短颌、鞍鼻、放射状瘢痕、
军刀胫等
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2、晚期胎传梅毒 普鲁卡因青霉素G，每日5万U/kg，肌注，连 续10天（对较大儿童的青霉素的用量，不应 超过成人同期患者的治疗量）。
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3、对青霉素过敏者 红霉素治疗，每日7.5-12.5mg/kg，分4
次口服，连服30天。8岁以下儿童禁用四环 素。
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102.梅毒血清学检验
梅毒的血清学试验参考范围：性病研究实验室试验（VDRL）阴性不加热血清反应素试验（USR）阴性快速血浆反应素试验（RPR）阴性荧光密螺旋体抗体吸收试验（FTA-ABS）阴性梅毒螺旋体血凝试验（TPHA）1：25以下为阴性梅毒螺旋体制动试验试验标本活动螺旋体数为对照标本的40%为阴性梅毒螺旋体抗体试验（TP-Ab）阴性临床评价：1．梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体，是性传播疾病梅毒的病原体。
机体对梅毒螺旋体感染可产生体液和细胞免疫反应，梅毒螺旋体血清学试验是诊断梅毒的依据之一。
血清学试验主要有两个类型，一类是VDR L，USR和RPR．属非螺旋体抗原试验，是用正常牛心类脂质作为抗原，测定血清中的反应素，为筛查试验。
另一类是FTA-ABS，TPHA和TPl，属螺旋体抗原试验，是用梅毒螺旋体作为抗原，检测血清中的特异性抗体，为确证试验。
2．非螺旋体抗原试验(VDRL，USR，RPR)敏感性高，其反应素效价与病变活动性有关。
第一期梅毒病灶出现后1～2周即可测出反应素，第二期梅毒病人血清中反应素效价最高，阳性率可达99％，经药物治疗后可转阴。
先天性梅毒80％～100％阳性。
但此类试验特异性不高，常有假阳性反应，在分析结果时应注意结合病史、临床症状及特异性试验作出正确判断。
FTA-ABS的敏感性和特异性均高，在早期梅毒首先出现阳性，病人经药物治疗后反应仍不转阴，故不能用作疗效的评价，常用于梅毒的确定诊断。
TPI是一种经典的特异性较高的梅毒血清学反应，假阳性不到1％，主要用于晚期梅毒及疑难病人的诊断。
TPHA具有敏感、快速、简便等特点，但特异性不及FTA-ABS和TPI。
采取脑脊液标本进行特异性抗体检测，对中枢神经系统的梅毒具有诊断价值。
3．暗视野检查法对梅毒的诊断有重要意义。
此法系采取病灶组织渗出液、淋巴穿刺液或组织悬液制成涂片，在暗视野显微镜下直接检查梅毒螺旋体，主要适用于初期梅毒的检查，有一定局限性。
暗视野检查法一次阴性结果不能否定梅毒的存在，一般连续检查3天阴性才能予以排除。
梅毒实验室检测课件解析PPT幻灯片课件
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荧光螺旋体抗体吸收试验 （FTA-ABS）
原理
将有完整形态的梅毒螺旋体作为抗原，加上经吸 收剂（用Reiter螺旋体制备而成）吸收过的梅毒 患者血清形成抗原抗体复合物，再加入异硫氰酸 荧光素（FTIC）标记的抗人免疫球蛋白，与抗梅 毒螺旋体抗体结合，形成荧光的抗原抗体复合物。 在荧光显微镜下，螺旋体显出苹果绿色的荧光， 即为阳性反应。
测速:100转/MIN （±2转）
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检测流程（定性）
① 加样：
吸取50μl血清（浆）放在卡片圈中，并均匀地 涂布在整个圈内。
② 加抗原：
将抗原轻轻摇匀，用试剂盒提供的针头加1滴抗 原。
③ 反应：
将卡片置梅毒自动旋转仪8分钟立即在亮光下观 察结果。
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检测流程（定量）
① 稀释液准备：
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梅毒的分期
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梅毒的诊断
梅毒的诊断
早期梅毒（一期、二期和早期隐性梅毒）和晚期 梅毒（三期和晚期隐性梅毒）
必须依靠病史、症状及实验检查进行综合分析
梅毒的实验室检查
结果对诊断有决定性意义
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常用梅毒实验室检测方法
病原学检测 血清学检测
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病原学检查
取材方法
一期、二期梅毒时，取硬下疳、扁平 湿疣、黏膜斑等皮损部位组织液或淋 巴结穿刺术得到的组织液
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TPPA/TPHA原理
TPPA试验原理与TPHA试验基本相同
TPPA试验用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒 TPHA试验中梅毒螺旋体致敏羊红细胞
特点
梅毒螺旋体(Nichols株)全抗原
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操作步骤
1. 试剂准备：试验前将试剂和待检标本恢复到室温。 2. 加稀释液：每份样本做4孔，加标本稀释液加至微量反应板
慎重解释梅毒检验报告单
慎重解释梅毒检验报告单河南省传染病医院皮肤性病科副主任医师赵会亮小李婚后十月怀胎，即将成为人母的她沉浸在喜悦的期盼中。
但到医院产前检查中有一项化验RPR结果是阳性，医生告知小李可能感染了梅毒，可能会影响到孩子。
这可吓坏了小李，她从来没有什么不洁性行为怎么会感染梅毒呢？进一步检查证实，小李的化验属于假阳性，随后小李在医院顺利地生下一个健康的宝宝。
这件事提醒我们，梅毒以及梅毒血清学检验比较复杂，在对患者解释时应慎重。
梅毒筛查的常用指标梅毒由于临床表现多样性而被皮肤科医师称为“模拟大师”，目前诊断因暗视野或荧光显微镜等设备不太普及而主要靠血清学检测来判定。
检验方法因抗原制备方法不同分为非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试验，前者主要包括：VDRL、USR、RPR 等，后者主要包括：FTA-ABS、TPHA、TPPA等。
初筛试验中VDRL因操作麻烦在大多数医院没有开展，USR、RPR是在VDRL基础上经过改良后的实验方法，操作简单且可以肉眼判定结果，有同样的特异与敏感性，因而被广泛应用。
确认试验中由于TPHA、TPPA操作简单且特异性、敏感性优于FTA-ABS而被广泛开展。
一般来讲，排除假阳性原因，确认试验所作为抗-IgG螺旋体抗体，即使足够规范的治疗，结果仍可为阳性，因此不作为疗效观察、复发、再治疗的依据。
假阳性假阴性都很“常见”因技术原因所限，两类梅毒血清学试验都存在生物学假阳性以及假阴性问题。
如：系统性红斑狼疮、风湿性心脏病、关节炎、肝硬化、结肠癌、静脉吸毒、妊娠、糖尿病、风疹、丝虫病、结核病等急慢性感染性疾病均可以导致假阳性。
这类假阳性结果，通过倍比稀释后滴度都很低，一般在1：8以下，两类试验结合来看即可明确。
由于试验敏感性、前带现象（血清梅毒螺旋体抗体浓度过高而抑制抗原抗体凝集）、梅毒感染时间长短等原因可以导致试验结果的假阴性，如：RPR在一期、三期梅毒阳性率分别为85%、80%。
假阳性和假阴性结合临床资料以及复检，一般情况下可以排除。
血清标本中非梅毒螺旋体抗原血清学TRUST试验生物学假阳性的结果分析
血清标本中非梅毒螺旋体抗原血清学TRUST试验生物学假阳性的结果分析作者：林海雄黄利思严海燕来源：《医学信息》2017年第20期摘要：目的调查本院住院患者梅毒血清学试验TRUST生物学假阳性率并进行临床分析。
方法通过2016年10月～12月在本院搜集的10161例住院患者临床病例，结合实验室的梅毒血清学试验，分析TRUST生物学假阳性的发生是否与性别、年龄、疾病等因素相关，并进行统计学分析。
结果 10161例住院患者TRUST生物学假阳性率为38（0.37%）；男女患者（0.27% vs0.44%）以及各年龄段患者（0.33% vs0.60% vs0.18% vs.0.26% vs0.43%）之间假阳性率均无统计学差异（P关键词：梅毒；TRUST；生物学假阳性中图分类号：R759.1 文献标识码：A 文章编号：1006-1959（2017）19-0050-04Abstract：Objective To investigate the clinical significance of TRUST biological false positive rate in the hospitalized patients with syphilis serological test.Methods A total of 10161 hospitalized patients were collected from 2016 October to December in the hospital.With syphilis serological laboratory tests，analysis of the occurrence of TRUST biological false positive age and gender，disease，and other relevant factors，and analyzed statistically.Results 10161 cases of hospitalized patients with TRUST biological false positive rate was 38（0.37%）；male and female patients （0.27% vs0.44%）and the patients of all ages（0.33% vs0.60% vs0.18% vs.0.26% vs0.43%）there was no significant difference between the false positive rate（PKey words：Syphilis；TRUST；Biological false-positive梅毒（syphilis）是由梅毒螺旋体感染人体而发生的常见性传播疾病，已经问世数百年了，目前在世界范围均有分布，是严重的性传播疾病之一；可以分为获得性梅毒、先天梅毒和妊娠梅毒等[1-3]。
梅毒检测ppt课件
脑脊液检查项目
CSF-VDRL试验：
是CSF的标准试验 对神经梅毒特异性较高，偶尔也出现假阴性反应，如 脊髓痨病人。 试验阳性，对神经梅毒具有诊断意义 如果 CSF-VDRL 试验阴性，而临床考虑为神经梅毒， 可 使 用 CSF 的 梅 毒 螺 旋 体 抗 原 试 验 ( 如 FTA-ABS/ TPHA)，其敏感性高，但特异性不如CSF-VDRL 神经梅毒患者 CSF-FTA-ABS 均呈阳性，故 CSF-FTAABS为阴性，可排除神经梅毒感染
IgM- FTA-ABS：2周 IgG-TPHA/TPPA：4周 反应素-RPR/TRUST：5-7周
梅毒血清试验抗体阴转时间
IgM- FTA-ABS阴转：最快 一期梅毒治疗后3个月：100%阴转 二期梅毒治疗后9个月： 100%阴转 早期潜伏梅毒治疗后2年： 100%阴转 反应素-RPR/TRUST阴转：其次 二期梅毒治疗后9个月： 27.3%阴转 早期潜伏梅毒治疗后2年：38.4% IgG-TPHA/TPPA阴转：可终生阳性
暗视野显微镜检查
暗视野检测的优点
可立即确诊（在一期和二期梅毒） 快速检测 暗视野检测的缺点 需要有经验的专业镜检人员和专业设备（除特殊实验 室外一般不具备） 易与其他致病性和非致病性的螺旋菌混淆，一般不推 荐用来检测口腔皮损，因为口腔中存在非致病性的螺 旋菌 必须立即镜检，因为螺旋体的运动性对确诊有重要价 值，随着皮损愈合，暗视野检测的敏感性降低 局部使用香皂，水以及抗生素软膏等会增加假阴性的 可能性
引起非梅毒螺旋体抗原血清学试 验的假阳性反应的因素
慢性生物学假阳性反应的特点 可持续6个月以上，甚至终身。 滴度低，一般低于1:8 用梅毒螺旋体抗原血清试验检测呈阴性
梅毒血清学检测的操作规范
TPPA操作步骤
试剂准备：恢复室温 加稀释液：每份样本做4孔，加标本稀释液 加至微量反应板孔内，第1孔100μL，第2～4 孔各25μL 样本稀释：取血清25μL加至第1孔，混匀后 取25μL至第2孔，混匀后取25μL至第3孔，混 匀后取25μL至第4孔，混匀后弃去25μL 加对照液：第3孔加未致敏颗粒25μL，第4孔 加致敏 颗粒25μL 混合：将反应板置振荡器振荡30秒 反应：孵育2h观察结果
TPPA结果判读
观察第3孔，不出现凝集为有效试验
TPPA结果判断
观察凝集反应强度：分级如下
4+~3+：颗粒光滑覆盖整个孔底，有时边缘有折叠
2+：颗粒光滑集聚覆盖孔底，周围有一颗粒环
1+： 颗粒光滑集聚覆盖孔底，周围有一明显颗粒环
±：颗粒模糊覆盖，边缘有明显的小环
一：颗粒紧密沉积孔底中央或形成一小点
50.0
-
50.0
抗原悬液(ul) 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7
非梅毒螺旋体抗原检测意义
早期梅毒硬下疳出现1~2周后，血清学可 呈阳性 梅毒患者经治疗后血清滴度可下降并转 阴性，故可作为疗效观察、判愈、复发 或再感染的指征 为什么要做定量检测？
滴度常与病情活动相关，滴度改变4倍具有 临床意义
梅毒血清试验假阳性因素：
技术性
标本的污染 溶血 操作失误 患者有其他疾病，使梅毒血清试验出现阳性 生理机能发生变化：少数孕妇也可发生生物 学假阳性
血清标本中非梅毒螺旋体抗原血清学TRUST试验生物学假阳性的结果分析
血清标本中非梅毒螺旋体抗原血清学TRUST试验生物学假阳性的结果分析目的调查本院住院患者梅毒血清学试验TRUST生物学假阳性率并进行临床分析。
方法通过2016年10月～12月在本院搜集的10161例住院患者临床病例，结合实验室的梅毒血清学试验，分析TRUST生物学假阳性的发生是否与性别、年龄、疾病等因素相关，并进行统计学分析。
结果10161例住院患者TRUST 生物学假阳性率为38（0.37%）；男女患者（0.27% vs0.44%）以及各年龄段患者（0.33% vs0.60% vs0.18% vs.0.26% vs0.43%）之间假阳性率均无统计学差异（P ＜0.05）；TRUST假阳性多见于皮肤和皮下组织疾病（2.78%）、血液和造血器官疾病（2.17%）以及肿瘤（0.33%）等患者中，其抗体滴度均较低，不超过1：8。
结论TRUST试验生物学假阳性存在一定的发生率，对于容易出现假阳性的患者，建议与TPPA等梅毒螺旋体抗原血清学试验联合检测。
Abstract：Objective To investigate the clinical significance of TRUST biological false positive rate in the hospitalized patients with syphilis serological test.Methods A total of 10161 hospitalized patients were collected from 2016 October to December in the hospital.With syphilis serological laboratory tests，analysis of the occurrence of TRUST biological false positive age and gender，disease，and other relevant factors，and analyzed statistically.Results 10161 cases of hospitalized patients with TRUST biological false positive rate was 38（0.37%）；male and female patients（0.27% vs0.44%）and the patients of all ages（0.33% vs0.60% vs0.18% vs.0.26% vs0.43%）there was no significant difference between the false positive rate（P＜0.05）；TRUST false positive in the skin and subcutaneous tissue diseases（2.78%），disease of blood and hematopoietic tumors（2.17%）and（0.33%）patients，the antibody titers were low，not exceeding 1：8.Conclusion TRUST test biological false positive rate for a certain existence，prone to false positive patients，the suggestion and TPPA such as treponema pallidum antigen serologic test combined detection.Key words：Syphilis；TRUST；Biological false-positive梅毒（syphilis）是由梅毒螺旋體感染人体而发生的常见性传播疾病，已经问世数百年了，目前在世界范围均有分布，是严重的性传播疾病之一；可以分为获得性梅毒、先天梅毒和妊娠梅毒等[1-3]。
血清梅毒阳性什么意思
血清梅毒阳性什么意思什么是血清梅毒试验？血清梅毒试验是用于梅毒疾病的诊断试验。
妊娠梅毒不但能给孕妇健康带来影响，更能影响胎儿发育，导致流产、早产、死胎等严重后果。
即使妊娠能维持到分娩，所生婴儿患先天性梅毒的几率也很高。
有些胎儿虽然发育正常，但在通过产道时，仍有可能与生殖器病损接触而感染。
做梅毒血清试验能诊断出妊娠梅毒，及早采取措施，以免对母婴健康造成严重危害。
那么血清梅毒试验为阳性是什么意思呢?下面让妈网百科来告诉你吧。
一、梅毒血清试验的两大类型1、非梅毒螺旋体抗原血清试验，用心磷脂作抗原，测定血清中抗心磷脂抗体，亦称反应素。
本试验敏感性高而特异性较低，且易发生生物学假阳性。
早期梅毒患者经充分治疗后，反应素可以消失，早期未经治疗者到晚期，部分病人中反应素也可以减少或消失。
目前一般作为筛选和定量试验，观察疗效，复发及再感染。
1。
1性病研究实验室试验（VDRL）；用心磷脂、卵磷脂及胆固醇为抗原，可作定量及定性试验，试剂及对照血清已标准化，费用低。
此法常用，操作简单，需用显微镜读取结果，缺点是一期梅毒敏感性不高。
1。
2快速血浆反应素试验（RPR）：是VDRL抗原的改良，敏感性及特异性与VDRL相似，优点是肉眼即可读出结果。
1。
3不加热血清反应素玻片试验（USR）也是VDRL抗原的改良，敏感性及特异性与VDRL 相似。
2、梅毒螺旋体抗原血清试验：用活的或死的梅毒螺旋体或其成分来作抗原测定抗螺旋体抗体。
这种试验敏感性和特异性均高，一般用作证实试验。
这种试验是检测血清中抗梅毒螺旋体IgG抗体，即使患者经过足够治疗，仍能长期存在，甚至终身不消失，血清反应仍持续存在阳性，因此，不能用于观察疗效。
二、梅毒血清试验假阳性（如RPR阳性、TPPA阴性）1、技术性假阳性：标本的采取、保存、运送和实验室操作的误差而产生的，可重复试验即可证实为阴性。
2、生物学假阳性：事实上不存在梅毒感染而是其他非技术性因素所产生的阳性反应，这种情况在“正常”的人群中发生率约为1/4000。
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引起梅毒血清试验假阳性影响因素
用TRUST及TPPA做梅毒血清学检测。
结果 4913例TRUST试验，57例发生生物学假阳性反应，麻风发生率最高，占麻风病例的31.82%，依次为类风湿关节炎17.78%，系统性红斑狼疮（SLE）17.02%，变应性血管炎6.67%，乙型肝炎5.43%，硬皮病3.33%，皮肌炎3.13%，活动性肺结核1.82%，孕妇0.68%，正常人0.08%。
结论所有生物学假阳性反应的TRUST定量试验，滴度均≤1:8，其中91.23%
的TRUST定量为1:2，而未经治疗的二期显发梅毒TRUST定量一般≥1:16。
4913例TRUST试验，发生57例生物学假阳性反应，麻风发生率最高，占麻风病例的31.82%，依次为类风湿关节炎17.78%，SLE 17.02%，变应性血管炎6.67%，乙型肝炎5.43%，硬皮病3.33%，皮肌炎3.13%，活动性肺结核1.82%，孕妇0.68%，正常人0.08%。
所有生物学假阳性反应的TRUST定量试验均≤1:8，其中91.23%的TRUST定量为1:2。
61例二期显发梅毒（未经治疗）患者的TRUST定量试验均≥1:16,其中67.2%的TRUST定量试验≥1:32。
目前国内最常用的梅毒血清学初筛试验是以心拟脂为抗原的非特异性梅毒血
清学试验，简称TRUST，中文名称为苯甲胺红不加热血清反应素试验。
其所检测的抗体并非抗梅毒螺旋体抗体，而是梅毒螺旋体感染人体以后分解破坏人体组织，其分解产物释放到血液中，使人体产生抗体。
分解释放的产物即是心拟脂，所产生的抗体即是反应素。
据文献记载，除梅毒外尚有其他一些感染和免疫性疾病也可使人体组织受损释放心拟脂到血液中，使人体产生反应素，而使TRUST 出现生物学假阳性反应［1，2］。
并将生物学假阳性反应分为急性和慢性两种。
急性生物学假阳性反应见于病毒性疾病，如风疹、麻疹、水痘、传染性单核细胞增多症、病毒性肝炎；其他如疟疾、活动性肺结核、丝虫病、鼠咬热、回归热、钩端螺旋体病等，多于6个月内消失。
慢性生物学假阳性反应常见于麻风、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、干燥综合征、桥本甲状腺炎、结节性多动脉炎、风湿性心脏病以及海洛因吸毒成瘾者等，反应持续时间可长达数年或终身［3，4］。
从我们的研究结果可以看出，4913例TRUST试验，发生57例生物学假阳性反应，麻风发生率最高，为31.82%，其后依次为类风湿关节炎17.78%，系统性红斑狼疮17.02%，变应性血管炎6.67%，乙型肝炎5.43%，硬皮病3.33%，皮肌炎3.13%，活动性肺结核1.82%。
所有生物学假阳性反应的TRUST定量试验均
≤1:8，其中91.23%的TRUST定量为1:2。
61例二期显性梅毒（未经治疗）患者的TRUST定量试验均≥1:16,其中67.2%的TRUST定量试验≥1:32。
均经过TPPA 证实试验确定。
提示生物学假阳性反应的TRUST定量滴度一般≤1:8，而未经治疗的二期显发梅毒TRUST定量滴度一般≥1:16。
两者有一个明显的定量滴度不同，非常有利于临床的鉴别诊断，为临床医师正确判断化验结果提供了有利的手段。
对一些无条件做TPPA、FTA-ABS等梅毒证实试验的医院的医师在梅毒的诊断上无疑也是有很大帮助的。