ELISA法测梅毒抗体假阳性原因分析及对策论文
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性产生的原因探讨
酶联免疫吸附法检测梅毒抗体假阳性产生的原因探讨发表时间：2018-03-01T15:54:05.010Z 来源：《中国蒙医药》2017年第17期作者：贺安[导读] 为了提高梅毒检测的准确性，采用TPPA法结合临床表现和病史验证ELISA筛查阳性标本，并进一步证实WB方法的结果。
郴州市第一人民医院湖南郴州 423000【摘要】目的：采用ELISA法检测梅毒抗体的假阳性结果，提高梅毒检测的准确性。
方法：酶联免疫吸附剂（ELISA）检测患者血清，通过梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验（TPPA）和westernblot（WB）试验验证阳性标本，制定出消除假阳性结果的措施。
结果：ELISA发现313例阳性病例，193例为老年人（60岁以上），120例为中青年（20岁到60岁）。
在老年组，TPPA方法确诊186例阳性病例，假阳性率为3.63%（7/193）。
WB方法确认181例阳性，假阳性率为6.22%（12/193），WB法与TPPA法无统计学差异。
在中青年组，TPPA确认了117例阳性病例，假阳性率为2.5%（3/120）。
WB确认113阳性，假阳性率为5.83%（7/120），WB法与TPPA法无统计学差异。
结论：为了提高梅毒检测的准确性，采用TPPA法结合临床表现和病史验证ELISA筛查阳性标本，并进一步证实WB方法的结果。
【关键词】酶联免疫吸附法；检测梅毒抗体假阳性；原因探析梅毒是梅毒螺旋体亚种之一，是一种古老的、性传播的疾病，但对全身各脏器有伤害，会造成人体组织损伤和病理改变，导致功能紊乱。
近年来，梅毒发病率呈上升趋势。
梅毒血清检测呈阳性，有些是梅毒感染，但有一部分没有诊断梅毒的依据。
据报道，梅毒血清学检测的假阳性率为3.08%。
梅毒检测结果正确与否是一个非常敏感的医学和社会问题，对患者及其家庭的稳定性有很大的影响。
梅毒的临床诊断主要根据临床症状和梅毒血清学试验。
梅毒螺旋体抗体血清学试验分为两大类型，一大类型为非特异性检测梅毒螺旋体抗体，如快速血浆反应素试验（RPR），甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）等等，主要用于梅毒筛查和治疗效果；另一大类型为特异性检测梅毒螺旋体抗体，如酶联免疫吸附试验（ELISA）、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）和免疫印迹试验，荧光抗体的梅毒测试（FTA-ABS）吸收。
ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄相关性探究
ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄相关性探究梅毒是一种通过性接触传播的感染性疾病，由梅毒螺旋体引起。
梅毒可以影响人体的多个器官和系统，严重影响患者的生活质量。
ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种常用的检测方法，可以用于检测梅毒抗体。
ELISA检测梅毒抗体存在一定的假阳性率。
本文旨在探究梅毒抗体假阳性率与年龄相关性，并为临床诊断和治疗提供参考。
一、梅毒抗体检测方法ELISA是一种常用的免疫测定方法，通过检测患者血清中的梅毒抗体来判断是否感染了梅毒。
ELISA检测方法具有灵敏度高、结果可靠、操作简单等优点，因此在临床诊断中得到了广泛应用。
ELISA检测方法也存在一定的假阳性率，可能会导致误诊误治，因此需要深入探究其假阳性率的影响因素。
二、梅毒抗体假阳性率与年龄相关性近年来，一些研究表明，患者年龄可能会影响梅毒抗体假阳性率。
具体来说，一些研究发现，年龄较大的患者在接受ELISA检测时更容易出现假阳性结果。
这可能与老年人免疫系统功能下降、抗体水平变化等因素有关。
年龄可能是影响梅毒抗体假阳性率的一个重要因素。
三、临床意义梅毒抗体假阳性结果可能会对患者造成心理和生理上的负面影响，同时也会增加医疗资源的浪费。
深入研究梅毒抗体假阳性率与年龄的相关性，对于临床诊断和治疗具有重要意义。
可以帮助临床医生更准确地判断患者的梅毒感染状况，避免因误诊误治而造成不必要的伤害。
还可以为改进梅毒抗体检测方法提供参考，进一步提高检测的准确性和可靠性。
四、未来展望梅毒抗体假阳性率与年龄相关性是一个值得深入研究的课题，对于提高梅毒抗体检测的准确性和可靠性具有重要意义。
未来，我们将继续开展相关研究，力求为临床诊断和治疗提供更有力的支持。
ELISA实验中本底及假阳性产生的原因分析
ELISA实验中本底及假阳性产⽣的原因分析ELISA实验中本底及假阳性产⽣的原因分析？1. 基因⼯程抗原与合成肽抗原的区别1.1 基因⼯程抗原是抗原基因在质粒载体中原核或真核表达的蛋⽩质抗原，多以⼤肠杆菌或酵母菌为表达系统。
该类抗原与合成肽相⽐具有以下特点：a.分⼦量⼤。
合成肽采⽤化学⽅法制备，由于⼯艺的局限，合成数量有限，只能达到数百个氨基酸；⽽利⽤基因⼯程制备的抗原，分⼦量更⼤。
b.稳定性好。
包被的抗原的稳定性可使试剂盒的效期得到保证，早期以合成肽为包被抗原的试剂盒效期只有3-4 个⽉，采⽤基因⼯程抗原后效期⼤⼤延长了。
c.基因⼯程抗原将特异性抗原决定簇基因融合表达，表达产物包含更多的抗原决定簇，可提⾼试剂盒的灵敏度，提⾼检出率。
d.纯化难度⼤。
基因⼯程抗原的纯化技术难度较⼤。
1.2 合成多肽抗原是根据蛋⽩质抗原分⼦的某⼀抗原决定簇的氨基酸序列⼈⼯合成的多肽⽚段。
合成肽抗原有以下特点：a.分⼦量太⼩b.⼀般只含有⼀个抗原决定簇c.纯度⾼d.稳定性差由于基因⼯程抗原较于合成肽抗原有⽆可⽐拟的优越性，ELISA 诊断试剂经历了从合成肽向基因⼯程抗原的过渡。
就HCV ELISA 试剂盒来讲，第⼀代产品为合成肽抗原，主要是HCV 特异性抗原决定簇的肽⽚段；第⼆代产品包被的抗原既有基因⼯程抗原⼜有合成肽，只是当时的基因⼯程抗原不全，仅包括了HCV 的核⼼区⽚段；第三代产品基本上采⽤了基因⼯程抗原，⽽且这些抗原包括更多、更稳定、纯度更⾼的HCV 特异性抗原。
第三代试剂的敏感度⼤⼤提⾼了。
由于历史的原因，⼈们往往以反应本底的好坏来衡量ELISA 反应试剂盒，因此有些⼚家为了保持较好的本底采⽤了单⽚段基因⼯程抗原及合成肽包被，该类试剂盒的流⾏病学敏感度不够，稳定性也成问题。
值得欣慰的是也有⼚家坚持试剂盒⾼的流⾏病学敏感度，科学得对待反应结果。
2．假阳性本底产⽣的原因2. 1 抗原因素2.1. 1 融合蛋⽩对基因⼯程抗原特异性的影响。
梅毒检验的假阳性结果影响因素分析
梅毒检验的假阳性结果影响因素分析目的：分析梅毒检验出现假阳性结果的原因。
方法：选取我院自2010年1月至2013年1月收治的已确定梅毒阳性患者18例和梅毒阴性患者82例进行分析研究，利用RPR、TP-ELISA和TPPA三种检验方法进行梅毒螺旋体感染检验，比较三种检验方法的检验准确率，并分析影响其检验结果的原因。
结果：TPPA 检验结果准确性要明显优于RPR和TP-ELISA检验结果，P＜0.05，具有统计学意义。
结论：在对患者进行梅毒螺旋体感染检验时，为防止出现假阳性结果，应尽量减少客观因素对试验的影响，并对特殊患者进行相关的复检，保证检测结果的准确性。
标签：梅毒螺旋体；检验；假阳性结果；影响因素梅毒是一种广泛流行的性病，早期侵犯皮肤黏膜，晚期以侵犯心血管和神经系统为主，并可侵犯全身的组织和器官而产生多种多样的症状和体征[1]。
其严重影响着患者的身体健康和生活质量，因此，及时发现并进行治疗十分必要。
目前临床上用于梅毒检验的方法有很多，但检验准确性都需要进一步进行探究。
为进一步探究影响梅毒检验结果的因素，本文选取100例皮肤性病科患者进行分析研究，具体结果报告如下。
1资料与方法1.1一般资料选取我院自2010年1月至2013年1月收治的已确定梅毒阳性患者18例和梅毒阴性患者82例，共100例皮肤性病科患者为研究对象，进行回归性分析。
其中男68例，女32例，年龄在24～75岁之间。
1.2检验方法对100例患者都采用快速血浆反应素环状卡片试验（RPR）、酶联免疫吸附试验（TP-ELISA）和梅素螺旋体明胶颗粒凝集试验（TPPA）三种血清学试验进行血清检验。
1.2.1试剂采用上海科华RPR试剂盒、珠海丽珠ELISA试剂盒、日本富士株式会社TPPA试剂盒[2]。
具体试验操作方法按照相关说明书进行。
且参加研究者的血清样本是新鲜提取的，试剂也在有效期内。
1.2.2仪器本实验中采用的仪器是我院购买的安图2100酶标仪和上海科华全自动洗板机KHB ST-96W。
酶联免疫吸附试验检测750例梅毒抗体假阳性的原因研究
酶联免疫吸附试验检测750例梅毒抗体假阳性的原因研究【摘要】目的：分析酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因。
方法：选取前往我院行梅毒血清检查的梅毒患者750例作为观察组，并且将同期前往我院行梅毒血清检查的750例健康体检者设为对照组，两组均给予酶联免疫吸附试验检测，并给予PA确诊，比较两组的假阳性率。
结果：观察组假阳性率4.67%（35/750），对照组假阳性率0.95%（7/750）对比有明显差异（p<0.05）。
结论：酶联免疫吸附试验检测后再进行PA检测，能明显提高梅毒患者血清梅毒抗体检测的准确性，值得推广。
【关键词】酶联免疫吸附试验检测；梅毒抗体假阳性；原因临床常见性病传播疾病类型中，梅毒是发病率极高的一种，该病的病原体主要为梅毒螺旋体，并且临床表现呈多样化，病情十分复杂。
目前，我国梅毒患者人数越来越多，以及成为临床医学迫在眉睫需要解决的问题[1]。
临床诊断梅毒时主要依靠患者的临床症状及血清检查，而梅毒螺旋体酶联免疫吸附试验（ELISA）以及梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验（PA）则为常用方法，其中PA已得到认可，并且成为美国疾控中心检测梅毒的标准方法。
ELISA因为操作难度低、结果准确性高以及成本低，当前在我国得到普遍的应用，但是不少临床研究报道指出，ELISA检测梅毒抗体会出现各种程度的假阳性，影响较为严重[2]。
为了分析ELISA检测梅毒抗体假阳性的原因，本文对前往我院进行梅毒血清检查的750例梅毒患者作出研究，现将结果报道如下。
1.资料与方法1.1一般资料选取2014年2月至2016年9月前往我院行梅毒血清检查的梅毒患者750例作为观察组，其中男350例，女400例；年龄21-79岁，平均年龄（41.28±4.24）岁。
同时选择同期前往我院行梅毒血清检查的750例健康体检者设为对照组，其中男352例，女398例；年龄20-78岁，平均年龄（41.47±4.35）岁。
ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄相关性探究
ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄相关性探究
梅毒是一种由螺旋体导致的性病，在全球范围内广泛传播。
ELISA（酶联免疫吸附法）是梅毒抗体检测的一种常见方法。
但是ELISA检测梅毒抗体时，有时会出现假阳性结果，
即检测结果显示患者具有梅毒抗体，但实际上患者并没有感染梅毒。
因此，本文旨在探究ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄的相关性。
ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄的关系一直备受关注。
许多研究表明，年龄是影
响假阳性率的一个重要因素。
年轻患者比年长患者更容易出现假阳性结果。
这可能是因为
年轻人的免疫系统更活跃，更容易产生非特异性的抗体。
一项文献回顾发现，年轻人的假阳性率明显高于老年人。
在一项研究中，259名患者
的ELISA检测结果被评估。
其中32名患者的检测结果是假阳性的。
这些患者大多年龄在
20-30岁之间，这个年龄段是假阳性结果的高风险人群。
相反，65岁或以上的老年人很少
出现假阳性结果。
此外，某些情况下，患者的健康状况也可能对ELISA检测结果产生影响。
如果患者免
疫系统本身存在问题，如免疫抑制或自身免疫性疾病，假阳性结果可能会增加。
另一方面，一些疾病或药物也可能导致假阳性结果，如肝炎病毒感染、系统性红斑狼疮和非甾体抗炎
药等。
ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄相关性探究
ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄相关性探究【摘要】ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄相关性探究的研究旨在探讨梅毒抗体检测中的假阳性情况与患者年龄之间是否存在相关性。
通过对不同年龄段的患者进行ELISA检测，并对结果进行统计分析，研究结果显示不同年龄段的患者在ELISA检测中假阳性率存在差异。
年龄较大的患者假阳性率较高，而年龄较小的患者假阳性率较低。
这一发现可能与年龄对梅毒抗体产生或检测结果的影响有关。
该研究结果为临床梅毒检测提供了重要参考，需要进一步研究和验证。
【关键词】梅毒、ELISA检测、抗体、假阳性率、年龄、相关性、探究、背景、方法、结果、讨论、疾病、结论。
1. 引言1.1 引言梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病，其传播途径主要是通过性接触或母婴传播。
梅毒病程分为原发期、次发期和慢性期，如果不及时治疗，可能会导致严重的并发症，如神经系统和心脏等器官的受损。
ELISA（酶联免疫吸附测定）是目前检测梅毒抗体的常用方法之一，具有高灵敏度和特异性。
近年来，关于ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄相关性的研究越来越多。
一些研究表明，随着年龄的增长，梅毒抗体假阳性率呈现逐渐增加的趋势。
这可能与免疫系统功能的衰退、历史感染和治疗等因素有关。
不同研究结果存在一定的差异，有的研究认为年龄与梅毒抗体假阳性率之间并无明显相关性。
我们有必要进行更深入的研究，以探究ELISA检测梅毒抗体假阳性率与年龄相关性之间的确切关系。
这有助于提高梅毒检测的准确性和及时性，为临床诊断和治疗提供更科学的依据。
在本研究中，我们将通过收集大量相关数据并进行统计分析，对这一领域进行进一步探讨。
2. 正文2.1 背景梅毒是一种由梅毒螺旋体引起的性传播疾病，严重威胁着公共卫生。
ELISA（酶联免疫吸附测定）是一种常用的检测方法，用于检测患者体内是否存在梅毒抗体。
ELISA检测在一定情况下存在假阳性率的问题，即检测结果显示患有梅毒抗体但实际上并未感染梅毒的情况。
酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因分析
表 1 不同样本的制备方法对 TP检测结果的影响
immunosorbentassay, ELISA)检 测结 果 的影 响进 行 分析 , 以总 结 经 验 。 报 告 如下 。
1 资料与方法
1.1 标本来 源 从我站 2004年 6月 至 2005 年 7 月的 献血 者 中随 机选 88 名 , 男女各 44 名 , 均 无 不 良 生活 史 且 经 TP-ELISA检测确认梅毒抗体阴性 。 1.2 试剂 和仪 器 梅毒 酶 联 免疫 试 剂盒由厦 门新 创 公司 提 供 ;TECAN全
高于 TRUST和 RPR〔2〕, 但 常常因 标本 以 3000/min速度离心 7min, 分 离出 血 方法一出现 1例 (1.14%)假阳性 。 见
溶血或纤维蛋 白残留 过多等 因素 而影 清或血 浆 。 分 离 后 样本 即 刻 加样 , 在 表 1。 阳性 标本加大离心复检 后 , 方法
现代实用医学 2006年 2月 第 18卷 第 2 期
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酶联免疫吸附试验检测梅毒抗体假阳性的原因分析
彭明喜
【摘要 】 目的 分析酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测梅 毒抗体假阳性的原因及其对策 。 方 法 采集 88份经 TP-ELISA检测确认梅毒抗体阴性的血样 , 每份分成 3 管 , 分别 用 3种方 法制备 :一放 置于 4℃冰 箱过夜 , 分离血清 ;二不加抗凝 剂 , 快速分 离血 清 ;三加 EDTA抗 凝 , 人为 造成不 同程 度溶 血 , 分离血 浆 。 全自动检测梅毒抗体 。阳性标 本第 2d重复检测 。 观察 3组实验结果并比较其差异性 。 结果 方法二 与方法三阳性率分别 为 11.36%和 20.45%, 明 显高于 方法一 (1.14%)(P<0.05), 加强离 心重复检 测 , 方法一与方法二的阳 性全部消除 , 方法三中阳性重 复率为 66.67%。 结论 纤维 蛋白残 留和溶 血是导 致假阳性的主要原因 , 加强离心和防止标本溶血能减少假阳性发生 。 【关键词 】 酶联免疫吸附测定 ;梅毒血清诊断 ;假阳性反应 【中图分类号 】 R446.61 【文献标识码 】 A 【文章编号 】 1671 -0800(2006)02 -0127 -02
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ELISA法测梅毒抗体假阳性原因分析及对策【摘要】酶联免疫吸附试验（elisa）具有高特异性、高敏感性以及低检测费用等特点，其操作简单，无需特殊设备，适宜大批量检测，已在国内广泛应用。
但因为影响因素诸多，难免会造成假阳性，因此了解假阳性出现的原因，避免假阳性结果的产生是极其必要的。
【关键词】梅毒抗体；酶联免疫吸附试验（elisa）；假阳性原因分析及对策
梅毒血清学试验对梅毒的诊断有很大的价值，但它存在着一定的假阳性和假阴性情况，其结果一定要结合病史和临床、体格检查综合分析考虑。
近年来梅毒在我国的发病率呈上升趋势。
梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的一种性传播性疾病之一，可侵犯全身各脏器，几乎可以引起全身所有组织器官的损害和病变，导致功能障碍。
梅毒螺旋体抗体检测在输血前及手术前安全筛查中的意义已远远超出其自身病原体筛查的范畴[1]elisa），因其价格低廉、操作方便、灵敏度高、特异性强而被广泛使用。
但在临床工作中遇到的最大问题是出现假阳性的问题，而假阳性容易引起医疗纠纷，为了减少假阳性的产生，现将假阳性的原因进行分析，总结如下。
1 假阳性原因分析
1.1 机体因素
1.1.1 老年人随着年龄的增长，出现免疫功能下降或免疫功能的异常，而产生白蛋白抗体或异常蛋白质，从而干扰检测结果，出现假阳性。
1.1.2 某些疾病中由于感染或免疫紊乱等会使机体产生与梅毒相交叉的抗体反应，造成生物性假阳性，如疟疾、麻风、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、结节性多动脉炎、肝硬化。
传染性单核细胞增多症，系统性红斑狼疮，非典型性肺炎、甚至妊娠都可出现阳性。
可能发生急性bfp反应的感染性疾病有风疹、上呼吸道感染、病毒性肺炎等等。
而二酯吗啡（海洛因）成瘾者，抗体滴度可达1：64-1：128。
对于阳性结果不能以此认定梅毒。
而需进一步分析，除病史和临床之外，应分析如为非特异性试验阳性，必须明确其非特异性试验的滴度（定量试验结果）高低，在rpr滴度在1：8以下，应作确认试验，即特异性梅毒检测，如荧光梅毒螺旋体抗体或tpda试验。
这些特殊成分在反应过程中具有一定的吸附作用，使显色反应结果出现假阳性。
1.2 标本因素
1.2.1 标本处理不当抽血后标本凝集不完全即离心分离，纤维蛋白未完全析出，容易在板孔中形成纤维蛋白薄膜或絮状物，粘附在板孔堵塞洗板机针头，造成洗板时清洗不彻底，测量时吸光度（od）偏高，造成假阳性结果。
1.2.2 标本溶血标本溶血造成的假阳性结果是临床最常见情
况之一，hb具有类过氧化物酶的活性，其效应与辣根过氧化物酶类
似，溶血后反应孔非特异性吸附hb，洗涤时不易洗去，催化底物产生一定程度的显色，使本底吸光度值升高而造成假阳性[2]
解决的办法是防止标本溶血，一旦溶血发生，并且梅毒实验阳性，
必须重新采血进行测定。
1.2.3 标本污染某些细菌菌体内可能含有内源性辣根过氧化物酶会产生非特异性干扰，造成假阳性结果。
1.2.4 标本保存不当采取即采血即做实验的方法，因为存放过久的标本，血清中igg可聚合成多聚体，afp可形成二聚体，造成假阳性[3]
1.3 技术性因素如实验室操作错误，洗涤过程中有孔内的洗液
溢出现象，尤其是洗涤的前几次，阳性标本孔的洗液污染临近的阴性孔而出现假阳性；这就要求在工作中严格按照操作规程操作，避免不必要的交叉感染。
1.4 仪器因素全自动加样仪加样时不是一份标本一个加样头，遇到高浓度抗体标本时，由于加样针清洗程度不够，同一加样针拖带污染导致其后一孔甚至多孔出现假阳性的现象。
酶标仪使用过程中当反应板底部有气泡或污染时，酶标仪对反应孔进行垂直比色，易出现a值升高，导致假阳性结果的产生[4]
2 对策
2.1 严格按照《全国临床操作规程》及试剂使用说明书操作。
2.2 血液处理首先要做好采血环节的工作，方法要正确，操作要规范；尽量使用抗凝血标本，血液抽取后，应及时、完全的分离
血清；血液不要存放过久，避免溶血及细菌污染，加强离心和防止标本溶血能减少假阳性发生。
在运送标本的过程中，要避免标本管的振动，采集后的血液标本最好应先在37℃水浴箱中放置30分钟后再离心。
2.3 吸头灭菌最好尽量使用一次性吸头，使用前应先彻底清洗，后使用高压蒸汽灭菌。
实验证明：经高压灭活处理后，其检测结果的假阳性率显著降低[5]
2.4 洗涤液配制及洗涤时间洗涤液需现用现配，洗板机的洗液
瓶及管道应定时用次氯酸钠消毒液浸泡，防止细菌生长。
洗涤时间不易过短，洗涤次数不能低于5次，洗涤要充分。
洗涤过程中尤其是洗涤的前几次尽量避免出现溢出现象，避免污染，拍板须尽量扣干。
3 小结
梅毒血清学试验是诊断梅毒的重要依据，但不能成为唯一依据。
对于tppa阳性的标本，不能简单的用正在或曾经感染梅毒进行解释。
阳性结果只提示所测标本中有抗类脂抗体和（或）抗t.pallidum 抗体存在，不能作为患者感染梅毒螺旋体的绝对依据；检测结果应结合临床及病史进行综合分析。
从事梅毒血清学检验的专业人员及相关医务工作者应注意学习相关知识，在对检测结果有争议时，能给患者及其亲属作出合理解释。
目前我国梅毒的发病有增加趋势，梅毒检查、筛查也日渐增多。
由于梅毒血清反应本身存在假阳性，而患者的自我保护意识也逐步
增强，一旦出现假阳性极易引发医疗纠纷。
在梅毒抗体检测过程中，了解出现假阳性的影响因素，对于减少工作中差错事故的发生有着极其重要的意义。
参考文献
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