肿瘤细胞信号转导通路

肿瘤细胞的信号转导通路

信号传导通路是将胞外刺激由细胞表面传入细胞内，启动了胞浆中的信号转导通路，通过多种途径将信号传递到胞核内，促进或抑制特定靶基因的表达。

一、MAPK信号通路

MAPK信号通路介导细胞外信号到细胞内反应。

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase，MAPK)主要位于细胞浆，很多生长因子所激活，活化后既可以磷酸化胞浆内的靶蛋白，也能进入细胞核作用于对应的转录因子，调节靶基因的表达。

调节着细胞的生长、分化、分裂、死亡各个阶段的生理活动以及细胞间功能同步化过程，并在细胞恶变和肿瘤侵袭转移过程中起重要作用，阻断MAPK途径是肿瘤侵袭转移的治疗新方向。

MAPK信号转导通路是需要经过多级激酶的级联反应，其中包括3个关键的激酶，即MAPK激酶激酶（MKKK）→MAPK激酶（MKK）→MAPK。

（一）MKKK：

包括Raf、Mos、Tpl、SPAK、MUK、MLK和MEKK等，其中Raf又分为A-Raf、B-Raf、Raf-1等亚型；

MKKK是一个Ser/Thr蛋白激酶，被MAPKKKK、小G蛋白家族成员Ras、Rho激活后可Ser/Thr磷酸化激活下游激酶MKK。MKK识别下游MAPK分子中的TXY序列（“Thr-X-Tyr”模序，为MAPK第Ⅷ区存在的三肽序列Thr-Glu-Tyr、Thr-Pro-Tyr或Thr-Gly-Tyr），将该序列中的Thr和Tyr分别磷酸化后激活MAPK。

注：TXY序列是MKK活化JNK的双磷酸化位点，MKK4和MKK7通过磷酸化TXY 序列的第183位苏氨酸残基(Thr183)和第185位酪氨酸残基(Tyr185)激活JNK1。

（二）MKK：包括MEK1-MEK7，主要是MEK1/2；

（三）MAPK：

MAPK是一类丝氨酸/苏氨酸激酶，是MAPK途径的核心，它至少由4种同功酶组成，包括：细胞外信号调节激酶(Extracellular signal Regulated Kinases，ERK1/2）、C-Jun 氨基末端激酶（JNK）/应激激活蛋白激酶（Stress-activated protein kinase，SAPK）、p38（p38MAPK）、ERK5/BMK1(big MAP kinase1)等MAPK亚族，并根据此将MAPK 信号传导通路分为4条途径。

1、MAPK /ERK通路：即Ras-to-MAPK（Ras/MAPK）通路。

细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase，ERK)包括5个亚组，ERK3/4和ERK5。ERK1/2与细胞增殖最为密切,其上游激酶为MAPK激酶(MEK1/2)，MEK1与细胞分化有关,而MEK2与细胞增殖有关。

ERK1/2是MAPK系统主要的、经典的通路，也是研究较多的一条通路，ERK1/2的活化是将细胞丝裂原信号从细胞膜表面受体转导至细胞核的关键，参与调节细胞周期及促进细胞增殖分化。

ERK1/2（ERK1/ERK2）包括两种异构体ERK1和ERK2，相对分子量分别为44kD和42kD，它们有将近90%的同源性。ERK1/2为脯氨酸导向的丝氨酸/苏氨酸激酶，可以使脯氨酸相邻的丝氨酸/苏氨酸磷酸化。

未激活的ERK1/2位于胞浆内，激活后迅速进入细胞核内，再激活与其偶联的转录因子（Elk-1、c-Myc、Jun、c-Fos、ATF2等），通过调节各自靶基因mRNA的转录及翻译过

程，引起特定蛋白的表达或活性改变，实现对细胞生长、增殖、分化、迁移以及抗凋亡的过程中起到了重要的调节作用。

活化后的ERK1/2主要磷酸化蛋白激酶p90核糖体S6激酶(RSK)、分裂素、应急活化蛋白(MSK)、MAPK相互作用激酶(MNK)、参与细胞附着和迁移的蛋白（桩蛋白、黏着斑激酶和钙蛋白酶）、Elk1、c-Fos、c-Myc和Ets等转录因子。参与细胞诸多的生理过程，如细胞运动、增殖、分化与凋亡等。

ERK信号转导通路至少通过3条途径调节细胞的生长：

通过磷酸化氨甲酰基磷酸合成酶Ⅱ激发DNA合成；

通过MAPK活化的蛋白激酶(MAPK activated protein kinase，MAPKAPK)促进细胞周期的进展；

通过增强转录因子AP-1的活性间接促进细胞的生长。

Ras蛋白是MAPK通路的重要调控因素：Ras蛋白是原癌基因c-ras的表达产物，相对分子质量为21kDa，故又名P21蛋白；由于具有弱的GTP酶活性，并且其分子量小于与七次跨膜受体偶联的G蛋白，故也被称作小G蛋白；其活性则是通过与GTP或GDP的结合进行调节。Ras蛋白是MAPK通路中的分子开关，MAPK系统的主要调控者，介导生长因子等多种胞外信号转导，其活性状态对细胞的生长、分化、细胞骨架、蛋白质运输和分泌等都具有影响。Ras基因的突变会使Ras蛋白处于持续性激活，导致大约30%的恶性肿瘤发生。

成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor，FGF）超家族共有23个成员，介导中胚层和神经外胚层细胞的有丝分裂、趋化和血管生成。其中FGF-2也称为碱性成纤维生长因子（bFGF）是潜在的血管生成因子，其受体成纤维生长因子受体（FGFR）属于受体酪氨酸蛋白激酶（Receptor tyrosine kinases，RTK）家族，与FGF-2结合后发生自身二聚化和磷酸化，最终激活多种信号通路，如Ras/MAPK、JAK/STAT、磷脂酶Cγ(PLCγ) 、

PI3K信号通路。

在早期的肠道肿瘤发生过程中，MAPK途径活化促进MMP-7的表达。在大肠癌中，活化Ras-to-MAPK通路在诱导VEGF的表达起重要的作用。

IL-22也可激活3条主要的MAPK通路：MEK-ERK、JNK/SAPK和p38激酶途径。

现在能看懂RasP/RafP/MEKP/MAPK信号传导途径是什么意思吗？

2、JNK / SAPK (c-Jun N-terminal kinase/Stress-activated protein kinase)：

JNK/SAPK共有3个基因亚型，即JNK1/SAPKβ、JNK2/SAPKα和JNK3/SAPKγ,对应的表达蛋白有10余种异够体,分子量从46到55kDa,同源性高达85%以上。JNK1和JNK2在组织中广泛表达，而JNK3仅在脑、心和睾丸中表达。

JNK／SAPK可被外界刺激可通过Ras依赖或非Ras依赖的两条途径激活。

双特异性激酶（JNK Kinase，JNKK）是JNK／SAPK的上游激活物，其中MKK7／JNKK2可特异性地激活JNK，MKK4则可同时激活JNK1和p38。

JNK／SAPK通路可被细胞因子，如肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα，TNF α)、白介素1( interleukin 1，IL-1)、表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)、某些G蛋白偶联受体、应激(如电离辐射、渗透压、热休克和氧化损伤)、Fas及化疗药物等多种因素激活，参与细胞增殖与分化、细胞凋亡和细胞恶变等多种生物学反应。

JNK／SAPK信号通路功能失调可造成缺血再灌注损伤、慢性炎症、神经退行性变、糖尿病和肿瘤等多种疾病。

JNK/SAPK主要功能为激活c-Jun。

举例：

许多肿瘤中都观察到JNK活性增高，表明JNK能够促进肿瘤形成可能与其促进增殖有关。剔除c-Jun基因或JNK磷酸化的位点发生改变时，能使小鼠肠道肿瘤变小，肿瘤细胞减

少，并且延长小鼠的寿命。

在二乙基亚硝胺诱导的肝癌小鼠模型中，JNK1持久激活，而JNK1缺失大大降低二乙基亚硝胺诱发肝癌的易感性。JNK1-/-小鼠中细胞周期蛋白D和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表达下降，抑制肝细胞增殖，减少肿瘤新生血管。

相反，有些实验发现JNK与抑制肿瘤有关。致癌物质TPA能诱导皮肤癌形成，剔除JNK1的小鼠对TPA诱导的皮肤癌有显著敏感性。剔除JNK1的小鼠肿瘤发生率明显高于野生型小鼠，而且肿瘤的数目、直径明显增大，这表明JNK1在皮肤癌的发生中是一个重要的抑制物。

Winn通过体外非小细胞肺癌的研究中发现，JNK激活能抑制肿瘤形成、维持上皮分化和抑制变异细胞生长。

JNK具有抑制肿瘤的作用，可能是由于JNK通过调节CD8+T细胞来进行肿瘤的免疫监控，或是与JNK激活后的促凋亡机制有关。

3、p38MAPK(p38 mitogen activated protein kinase)：

p38MAPK有4个异构体(α、β、γ和δ),家族中各亚型的功能并不完全一致,其中p38α主要参与炎症、增殖、分化和凋亡,而β、γ和δ生物学功能机制尚未能完全了解。

p38MAPK通路可被应激刺激(Uv、紫外线、DNA损伤剂、H2O2、热休克和缺氧等)、炎性因子(TNF-α、IL-1和FGF等)及LPS和革兰氏阳性细菌细胞壁成分而激活，主要诱导细胞凋亡。

p38MAPK途径通过磷酸化激活下游多种转录因子,控制其相应基因的表达活性,如

ATH-1/2、CHOP/GADD153、ELK-1、ETS-1、Max、MEF-2C、NFkB、HSF、SAP-1以及最新发现P18等。

p38MAPK可通过增强c-myc表达、磷酸化p53、参与Fas/FasL介导的凋亡、激活C-Jun 和c-fos、诱导bax转位等至少五种途径调控凋亡。

举例：

在乳腺癌中，TGF-β可刺激增殖侵袭和转移，这通过激活p38MAPK信号途径促进侵袭转移相关的基因的表达。

在卵巢癌细胞株中，TGF-β可通过激活MAPK通路上调u-PA的表达，增加肿瘤细胞的侵袭。

阻断MAPK信号通路，可抑制雌激素依赖性妇科肿瘤如子宫内膜癌、卵巢癌细胞的增殖。Hsiao通过体内和体外实验，MAPK抑制剂可使肿瘤细胞株的MMP-2和u—PA的表达下降，降低肿瘤细胞的侵袭性。

4、ERK5(extracellular regulated kinase 5)：研究较少

是与前列腺癌转移有关的关键信号分子，依据是：

与良性前列腺组织相比，前列腺癌细胞中ERK5上游激酶MEK5在表达增加；MEK5的高表达与前列腺癌细胞骨转移相关；MEK5的转染实验可以诱导前列腺癌细胞增殖、增强癌细胞活性并促进癌细胞转移。

小结：

ERK通路的激活主要促使细胞增殖、存活、抑制细胞凋亡；

JNK和p38MAPK通路的激活则主要是促进细胞的凋亡。

如：JNK、p38MAPK通过磷酸化Bcl-2家族中Bax第167位苏氨酸,使Bax在线粒体内发生易位,进而诱导凋亡的发生；

p38MAPK还能诱导下游转录因子以及Caspase-3的表达引起凋亡。

但是，ERK1/2也可通过下游转录因子调节凋亡事件中的上游因子,诱导细胞色素C的释放,通过磷酸化促凋亡蛋白Bim等下调抗凋亡蛋白Bcl-2,上调促凋亡蛋白Bax,激活并上调凋亡基因Caspase-3、8、9的表达,进而诱导凋亡。

另外，MAPK各家族发挥凋亡信号的传递可能依据细胞的类型、细胞所处状态以及刺激信号的种类不同而呈现出不同的结果。

MAPK信号通路是信号转导刺激细胞增殖、生存、分化的交汇点或共同通路。？？

MAPK信号转导的一般途径为:刺激信号→PTK→Ras→Raf-1→MEK→MAPK→c-Jun→c-Fos→转录→基因表达→生物效应。？？

细胞外生长因子与膜受体结合,引起受体二聚化,将自身的酪氨酸残基磷酸化,继而使位于膜内侧的Ras活化,活化的Ras与Raf结合,将Raf锚定于细胞膜上,使它在膜上被其他激酶磷酸化而激活,活化的Raf有丝氨酸、苏氨酸激酶活性,活化MEK,将其下游MAPK的酪氨酸与丝氨酸残基磷酸化,MAPK活化后即可进入细胞核,作用于c-Jun、c-Fos等转录因子,最终导致细胞增殖或分化。

胞外多种信号分子，从神经递质、激素、生长因子、细胞因子到各种应激刺激如辐射伤害、渗透压变化等等，都可以激活这个级联反应。

但不同MAPK激活途径中的MAPK激酶激酶(MKKK)和MAPK激酶(MKK)则不相同。因此，就形成了不同激活途径，如Raf/MAPK途径、

二、PI3K/AKT信号通路诱导癌细胞凋亡

磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3一kinase，PI3K)，是与细胞内信号传导有关的脂类第二信使。

P13K能被许多细胞因子受体活化，包括酪氨酸激酶受体、非酪氨酸激酶受体、胰岛素受体等胞外信号。酪氨酸激酶受体又叫受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase，RTK)。

PI3K活化后，催化磷脂酞肌醇PI磷酸化，生成PIP2和PIP3，后二者是细胞内重要的第二信使，能激活下游蛋白激酶。

蛋白激酶包括：

蛋白激酶B (protein kinase B，PKB／Akt, Akt-PKB)，

蛋白激酶C (Protein kinase C，PKC)

蛋白激酶A (Ptotein kinase A，PKA)

丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)：与蛋白激酶A和蛋白激酶C在结构上相似，因此又被命名为蛋白激酶B(PKB)。

Akt有3种亚型：Akt1(PKBα)、Akt2(PKBβ)和Akt3(PKBγ)，三者有80%以上的同源性，而且结构很相似。

Akt下游底物有mTOR、Bad、NF-κB、caspase-9、MMP-9、C0X-2、FOXO、GSK3β、PFK2、eNOS、p21WAF，p27Kip1和YB-1等。因此，PI3K/Akt通路可有多条作用途径，如PI3K/Akt/GSK3β信号通路。

当细胞外的细胞因子与相应的受体结合后，受体被激活或RTK自身磷酸化，PI3K被活化，从胞质转位至细胞膜，定位于磷酸肌醇依赖性激酶1 (phosphoinositide dependent kinase 1，PDK1)和PDK2附近。Akt的构象发生变化，暴露其磷酸化位点。随后，PDK1和PDK2分别磷酸化Akt的Thr308和Ser473，Akt活化进一步作用于其下游分子。

参与多种生理活动，包括细胞代谢、存活、凋亡、增殖、分化和细胞周期调节，在肿瘤发生、发展、转移及化疗耐药中扮演重要角色。包括：促进细胞的异常分化与增殖，抗肿瘤细胞的凋亡，促进肿瘤细胞的侵袭和转移，促进肿瘤新生血管形成。

Akt/PKB是P13K的主要效应分子，也以PI3K-Akt/PKB信号转导途径对凋亡的抑制作用尤其重要，并与人类多种肿瘤的发生发展密切相关。

PI3K-Akt信号通路抗细胞凋亡的机制主要有:

①直接调节作用：

BAD是Bcl-2家族成员之一,可与Bcl-2或Bcl-xl形成复合体而表现促凋亡活性。

Akt可使BAD的Ser136位点、磷酸化,阻断BAD诱导的细胞凋亡。

Akt也能使Bcl-2家族成员BAX的Ser184位点磷酸化,负调控促凋亡功能。

半胱天冬酶caspase-9是细胞凋亡的启动者和效应者，Akt可使

caspase-9Ser196位点磷酸化而失活,抑制其促凋亡作用。

Par-4是一种促凋亡蛋白,Akt能结合并磷酸化Par-4,灭活Par-4的促凋亡作用。

②影响转录因子家族调控细胞存活：

转录因子家族包括Forkhead、NF-κB、p53等，其中叉头转录因子

(Forkhead or FoxO)家族有4个亚型，即FKHR/FoxO1、FoxO2、FKHRL1/FoxO3和AFX/FoxO4。

Akt直接磷酸化FoxO家族的4个亚型，抑制促凋亡基因（FasL、TRAIL、TRADD、Bim、Bcl-6）的转录功能,负调节凋亡促进信号,促进细胞存活。

在肿瘤细胞中,NF-κB的典型功能是抗凋亡,其活性依赖于IκB激酶

(IκB Kinase,IKK)，Akt通过调节IKK的活性,导致NF-κB的磷酸化、核转位、活化，NF-κB依赖的促进存活基因（Bc1-2家族成员Bcl-xl）和抗凋亡基因的转录。

P53介导DNA损伤而引起细胞凋亡,泛素连接酶MDM2是P53的一种负性调节蛋白，Akt能使MDM2的Ser166和Ser186位点磷酸化,上调MDM2活性,进而促进P53的失活或降解,阻断P53介导的促凋亡转录反应。

③通过调节细胞周期影响细胞增殖：

Akt可使下游的雷帕霉素(the mammaliantarget of rapamycin,mTOR)磷酸化激活,通过调控核糖体激酶p70s6k和4E-BP-1两条下游通路调节蛋白质的合成,影响细胞的增殖。

PI3K的抑制剂wortmannin和LY294002可以抑制mTOR的活性，阻断其下游的p70s6k与4E-BP-1的信号通路,阻滞细胞周期在G1期,导致细胞生长停滞。

④防止线粒体释放凋亡因子：

Akt可阻止线粒体释放细胞色素C及凋亡诱导因子,而抗细胞凋亡。

举例：

在卵巢癌、宫颈癌中，PI3K/AKT存活通路失调，高表达的P13K和AKT提示预后不良和化疗多药耐药。化疗药物激活ras癌基因、细胞蛋白酪氨酸激酶受体家族(包括EGF受体家族、PDGF受体家族、VEGF受体家族)和NF受体家族、IGF受体家族，活化P13K／Akt通路，使细胞产生放疗、化疗抗拒。

高危型人乳头瘤病毒HPV16的E5通过激活PI3K／Akt通路促进子宫颈癌的发生。

E—钙黏蛋白通过PI3K／Akt途径介导子宫颈鳞癌肿瘤标志鳞癌抗原(SCCA)的合成，使细胞粘附。

PI3K pl10基因(PIK3CA)是子宫颈癌的癌基因。因为以PIK3CA作为探针，通过荧光原位杂交和RT-PCR的方法都能检测到宫颈癌细胞株C-41、CaSki和ME-180中PIK3CA拷贝数显著增加。

P13K／Akt通路在子宫内膜癌对激素治疗的敏感性方面也有重要作用。与子宫内膜癌发生密切相关的雌激素可以非转录机制快速激活细胞内的PI3K／Akt激酶级联而调节内膜细胞的增殖与凋亡。Guzeloglu等以免疫印记、免疫组化、免疫细胞化学等多种手段通过体内、外试验研究雌二醇对子宫内膜细胞Akt磷酸化的影响，证明雌二醇刺激可使培养的内膜细胞的Akt快速激活。

选择性ER调节剂他莫希芬TAM 作为ER拮抗剂长期应用会增加患子宫内膜癌的风险。TAM 活性代谢产物4-TAM(OHT)通过激活P13K／Akt通路促进子宫内膜癌细胞系

Ishikawa细胞和HEC1A细胞的生长；P13K抑制剂可拮抗OHT对子宫内膜癌细胞的生长促进作用。

三、JAK-STAT通路

JAK-STAT(Janus kinase-signal transducer and activator of transcription) 细胞因子+受体结合→激活JAK→激活STAT→靶基因

JAK是酪氨酸蛋白激酶，STATs（STAT1- STAT7）是核转录因子，其中STAT3在多种肿瘤组织中异常表达和激活，并与多种肿瘤的增殖、分化、细胞凋亡、血管生成、侵袭、转移和免疫逃避密切相关。

STAT3表达高的肿瘤细胞，MMP2表达也较高，通过转染STAT3至侵袭性较差的肿瘤细胞，观察到STAT3可直接与MMP2启动子结合并刺激MMP2表达上调。认为STAT3通过刺激MMP2的表达增加了肿瘤的侵袭和转移。

乳腺癌的发展过程中激活的STAT3与MMP-9具有明显相关性。

在原位胰腺肿瘤动物模型中，阻断STAT3的活性可明显抑制VEGF的表达、血管生成和胰腺肿瘤的肝转移。

大鼠的黑色素瘤模型中，沉默STAT3的活性可明显减少MMP-2的表达，降低黑色素瘤的肺转移。增强STAT3的活性可以使黑色素瘤细胞MMP-2。VEGF表达升高增加肿瘤的侵袭和血管生成，从而使转移能力增强。激活的STAT3蛋白在人黑色素细胞瘤脑转移灶明显高于原发灶。

在大鼠乳腺癌模型中用RNA干扰技术降低STAT3的活性，可明显抑制肿瘤的侵袭和转移。体外实验证明G-四联体寡聚脱氧核苷酸可明显抑制非小细胞肺癌细胞STAT3的结合活性，降低其下游基因Bcl-x、Mcl-1、VEGF等表达。从而促进肿瘤细胞的凋亡和血管生成。

STAT3转染入肺癌细胞株，明显降低Mcl-1、Cyclin D1、Bcl-xl的表达，认为以STAT3

为靶点对于肺癌的治疗具有巨大的潜力。

四、Wnt通路

在正常成熟细胞中，Wnt通路处于关闭状态，胞浆中的β-catenin大部分与突出于细胞膜的E-cadherin结合。当Wnt通路处于激活状态时，β-catenin不被降解，而是逐渐积聚进入细胞核，与转录因子相互作用，启动转录过程，调控相应的基因表达。人类肿瘤乳腺癌、食管癌、结直肠癌、恶性黑色素瘤、白血病、前列腺癌、子宫内膜癌、原发性肝癌、甲状腺癌、胰腺癌等均存在Wnt通路异常。

Wnt信号通路的激活有三条途径是：Wnt／Ca2+途径、平面细胞极性途径和正规Wnt 途径。

举例：

Lowy通过实验证明Wnt信号活化可以上调MMP-3，促进胃癌细胞的侵袭和转移。

Brabletz认为Wnt信号通路的活化可促进结直肠癌细胞的局部侵袭。

Neth证明了正规Wnt途径与干细胞和肿瘤细胞的侵袭密切相关。

Lindvallml在乳腺和其他组织干细胞和祖细胞的分化过程中发现，Wnt信号通路起着重要的作用，异常活化的Wnt信号通路可诱导乳腺干细胞和祖细胞分化成癌细胞。

Wnt／β-catenin信号在不同组织肿瘤细胞的发生和进展过程起着重要的作用，抑制Wnt／β-catenin信号将是合理的肿瘤治疗靶点。

Kimm3通过体内和体外实验证明，Wnt通路抑制因子可以抑制肺癌细胞的生长。说明Wnt通路在肺癌的发展中起重要作用。

Schlange研究表明，干扰Wnt信号途径可以降低乳腺癌细胞株的增殖和存活。在配体受体水平干扰Wnt信号途径联合其他靶点可以提高乳腺癌的治疗效果。

五、Notch信号传导通路

Notch信号通路是细胞间信息交流的重要通路，在组织神经发生、血管生成方面有着重要的调节作用。哺乳动物中的Notch蛋白共有4种。

Notch信号在不同的组织和器官有着不同（促进或抑制肿瘤的分化和转移）的作用，这可能与细胞所在的微环境或Notch受体、配体等信号通路中相关分子的表达量不同有关。

举例：

Notch在胰腺癌中可激活NF-kB，并使转移相关基因MMP-9、COX-2、VEGF、survivin的表达下降。

激活Notch信号可增强乳腺癌上皮细胞和角质化细胞的侵袭能力。

通过调节β-catenin的活性增强原发性黑色素瘤的侵袭能力。

研究发现Notchl可以促进成骨细胞的分化，有利于前列腺癌细胞转移到骨。在骨转移前列腺癌细胞株中Notchl表达比非骨转移前列腺癌细胞株高4-5倍”“。

近期研究发现Notch信号通路有利于肿瘤干细胞与微环境的相互作用，进而增殖分化成肿瘤细胞。

目前阻断Notch信号通路策略分为两类：

选择性抑制：反义RNA，RNA干扰和单克隆抗体，在体外及动物实验中证实有抑瘤作用。

非选择性抑制：Notchl配体封闭剂、活化Notchl必需的水解酶的抑制剂等。