臭氧消毒效果验证方案

1 目的：对大容量注射剂车间洁净区臭氧消毒效果进行再验证，确认按《TBC-2531CHW型空调净化系统使用标准操作规程》进行清洁、消毒，能够使洁净区的卫生程度达到工艺要求。

2 范围：大容量注射剂车间洁净区臭氧消毒效果。

3 责任：验证领导小组、验证项目小组。

4方案：

4.1 概述：大容量注射剂车间，用于最终灭菌药品的生产。洁净区级别为C级，关键设备表面使用75%乙醇进行消毒，空间及非关键表面（墙壁、地面、顶棚等）使用臭氧进行消毒。臭氧通过安装于空调机组中的臭氧发生器进行发生，经空调送风系统输送至各个房间。通过臭氧分解速度及臭氧发生器发生速度，使各洁净区各功能间的臭氧浓度维持稳定在《臭氧消毒技术规范》（卫生部）中空间消毒的浓度要求5-10mg/m³的范围之内，以达到消毒效果。本次臭氧消毒验证分为两项进行：1、在距送风口最远端使用臭氧测试试管测定臭氧浓度；2、通过微生物挑战试验证明设定条件下臭氧消毒对微生物的杀灭效果。4.2 验证依据：

药品生产质量管理规范（2010年修订）

药品生产验证指南（2003年版）

中国药典2010年版

4.3 验证小组人员及职责

4.4 风险评估：

为确定大容量注射剂车间洁净区臭氧消毒效果验证的范围、程度，运用风险管理的工具，针对大容量注射剂车间洁净区臭氧消毒效果验证涉及的工艺设备及管道、物料、控制系统、关键设施、环境控制和人员操作等环节进行风险评估，并针对风险的级别采取相应措施。

4.4.1 风险评估工具：FMEA(失效模式及影响分析)

4.4.2 将影响风险的因素划分为3类：可能性、严重性、可检测性。将上述三因素进一步划分级别（见下表）

4.4.3 RPN（风险优先度） = Severity(严重程度)×Possibility(发生的可能性)×Detection(可探测性)

广东康臣药业集团内蒙古康源药业有限公司质量风险评估表

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4.5.1 验证所需文件及准备检查：验证实施前检查并确认及本次验证有关的所有文件记录应齐全。检查记录见附表1：验证文件检查确认表。

4.5.2 验证所需要的仪器、仪表、设备及检查：验证实施前检查并确认及本次验证有关的所有仪器、仪表是否校验，是否在有效期内，设备是否完好。检查记录见附表2：设备检查确认表。

4.6 验证步骤及方法：

4.6.1 大容量注射剂车间C级洁净区臭氧消毒流程简述：大容量注射剂车间C级洁净区，在《TBC-2531CHW型空调净化系统使用标准操作规程》中规定每天生产结束进行臭氧消毒，待人员全部撤出后，臭氧发生器开启90分钟（确保达到相应浓度后，维持60分钟以上），消毒结束后，进行自净，自行稀释并分解。

4.6.2 臭氧发生器选型确认：根据《药品生产验证指南》（2003年）关于臭氧发生器选择的相关说明对大容量注射剂车间所采用的GJCF-G-3-200g型臭氧发生器产量进行确认：4.6.2.1 消毒总体积计算：

以选择合适的臭氧发生器为前提，设洁净室(区)体积为V1，HVAC系统风管容积为 V2，V3 为保持洁净区正压所补充的新风的臭氧消耗量。

则消毒空间体积为：

V＝ V1+ V2+V3

V1（洁净区总体积）=洁净区面积×层高=640㎡×2.8m=1792m³

V2（风管容积）≈200m³

V3=67000m³/h（ HVAC 系统循环总风量）×45.7％(新风补充量所占比例)× 10％(保持洁净区正压需补充的新风量)×37.75％(计算应用臭氧半衰率的预算值) =1156m³V（消毒空间总体积）＝1792m³+200m³+1156m³=3148m³

4.6.2.2 臭氧发生器的选择：根据《药品生产验证指南》（2003年）相关说明，对臭氧空间消毒浓度约为10mg/m³、对表面消毒浓度应为19.63mg/立方米。臭氧发生器的发生量（W）计算公式为：

W=CV/（1-S）

C：臭氧发生器所需浓度

V：消毒空间总体积

S：1小时后臭氧衰退率

计算结果：W=（3148³×19.63mg/m³）/（1-0.6225）=163696mg/h=163.696g/h

根据设备说明GJCF-G-3-200g型臭氧发生器产量为200g/h，所以臭氧发生器产量能够满足消毒要求。

4.6.3 臭氧浓度确认：

4.6.3.1 臭氧最难到达位置确认：根据臭氧发生器安放位置，及送风管道走向，确定最远端房间为洗衣室。另外在大容量注射剂车间洁净区为矩形，在前、中、后，各设施一房间作为取样点，且取样点在房间内位置距离送风口的最远点。所以取样点共3点：分别为灌装间西南角地面（取样点1）、原辅料暂存间东南角地面（取样点2）、洗衣室西北角地面[距离臭氧发生器最远端]（取样点3）。

4.6.3.2 标准制定：根据《药品生产验证指南（2003）》相关说明，对臭氧空间消毒浓度约为10mg/m³、对表面消毒浓度应为19.63mg/立方米，臭氧浓度试管单位为ppm，所以需进行折算:根据公式：mg/m3=M/22.4·ppm·[273/(273+T)]*（Ba/101325），其中M=48、T=25℃、Ba=大气压，得出19.63mg/m³=10ppm。所以标准为≥10ppm。

4.6.3.3 取样方法：使用臭氧专属试管（定量抽气功能）在上述三位置，在开始臭氧消毒后，每隔10分钟记录进行一次监测，待达到消毒浓度后，每20分钟检测一次，直至臭氧消毒结束。《TBC-2531CHW型空调净化系统使用标准操作规程》规定消毒过程中臭氧发生器开启90分钟（发生至达到10ppm +10ppm维持时间），在实际阶段性取样检测中，如果浓度达到10ppm，而能够维持60分钟，即说明消毒过程中臭氧浓度达到要求。另外自净结束进行检测，确定臭氧无残留。

4.6.3.4 取样人员戴防毒面具进入洁净区。进入前对防毒面具进行检查。测试人员如出现身体不适，立即停止取样。

4.6.4 微生物挑战试验：

取配制好的含均浓度为10-15cfu/ml的枯草芽孢杆菌孢子悬液，在消毒前，取经灭菌的90mm平皿至于各取样点，每个取样点放置2个，每个平皿内加入枯草芽孢杆菌孢子悬液1ml，臭氧消毒接受后，盖上平皿盖，加入营养培养基15ml,摇匀，置培养箱中33℃培养3天，观察结果，同时做阳性对照及阴性对照。