白带常规与BV检测
妇科联检各项指标的临床意义
妇科联检各项指标的临床意义乳酸杆菌检测乳酸杆菌为女性阴道的优势菌群，对有害菌诸如阴道加特纳氏菌等有抑制杀灭作用，过氧化氢是阴道微生态菌群中有益菌乳酸杆菌特别是产过氧化氢的乳酸杆菌的一种代谢产物，因此可以通过检测过氧化氢来反映阴道内乳酸杆菌量的多少。
白细胞检测白细胞酯酶是白细胞膜上的一种蛋白质，炎症感染时白细胞特别是多形核白细胞由于趋化作用通过阴道上皮细胞粘膜渗透到分泌物中，通过检测分泌物中的白细胞酯酶活性可间接地指示白细胞的多少。
细菌性阴道病（BV）检测 BV检测试剂有两种方法学，改良胺试验克服了传统胺试验灵敏度低、主观性强的缺点；唾液酸苷酶又称神经氨酸苷酶，在阴道环境中，唾液酸苷酶活性与BV密切相关，与检测Amsel法有较高的符合率，国内外在相关试剂的研发上都做了大量工作，并已有产品用于临床检测。
但是阴道微生态菌群中，普雷沃菌和拟杆菌是唾液酸苷酶活性增加的主要病原菌，部分加特纳氏菌有此酶活性，而动弯杆菌、消化球菌以及人型支原体的此酶活性基本不能检出。
另外，BV不是单一而是多种厌氧菌增多引起的，因此单纯依靠检测分泌物中唾液酸苷酶的活性，必然漏检唾液酸苷酶活性低的厌氧菌增多引起的BV，另有研究显示脯氨酸氨基肽酶与加德纳菌和动弯杆菌相关，可以通过脯氨酸氨基肽酶活性的增加来指示BV，但是研究表明单纯由于普雷沃菌和拟杆菌增多引起的BV不含有脯氨酸胺基肽酶，因此也存在方法学上的漏检，但是将唾液酸苷酶结合脯氨酸氨基肽酶的检测，理论上可以检测95%以上的BV阳性。
念珠菌检测随着抗生素、肾上腺皮质类固醇类药物的广泛应用，念珠菌病发病率逐年增高，白色念珠菌是最常分离到的致病酵母菌，因此，快速、准确地鉴定白色念珠菌具有重要的临床意义。
脯氨酸氨基肽酶可由多种厌氧细菌和真菌产生，其也为白色念珠菌的特异性酶，乙酰氨基葡萄糖苷酶为白色念珠菌、热带念珠菌的特异性酶，因此可以通过检测脯氨酸氨基肽酶活性和乙酰氨基葡萄糖苷酶来指示念珠菌感染。
细菌性阴道病(BV)简介ppt课件
胺实验的缺点
胺试验的特异性差，结果影响因素多，滴虫 、宫颈糜烂等都可影响导致结果阳性；众多医院 的临床对照实验评估证实 BV胺实验试剂假阳性率 分别为25%--35% ，通过与 BV确诊结果对照发现， BV胺实验试剂结果符合率分别60%--70% ，符合率 不高。假阳性的结果将导致患者接受抗厌氧菌治 疗，杀灭阴道正常菌群，造成阴道生态环境的失 调，损害身心健康。
正常菌群对人体的重要作用
乳酸杆菌是正常阴道的最主要的优势菌，占阴道菌群的
90%以上。
阴道上皮细胞中含有丰富的糖原，在阴道乳酸杆菌的作
用下，分解为乳酸，维持阴道正常的酸性环境，抑制碱 性环境中繁殖的病原体，也称为阴道的自净作用。
乳酸杆菌黏附于黏膜，形成保护屏障，竞争黏附，阻止
病原微生物定植。
3）白细胞酯酶: 检测孔不变色，白细胞酯酶阴性；
Livzon BV 四联结果判读实例
pH值的检测对照所附比色卡进行判读,正常pH≤4.4; 1）唾液酸酶项:检测孔颜色变蓝,BV弱阳性； 2）过氧化氢项:检测孔颜色不变色, H2O2≤2umol/l阳性； 3）白细胞酯酶:检测孔颜色变蓝, 白细胞酯酶阳性；
类杆菌属（Bacterides spp.）
普氏杆菌属（Prevotilla spp.） 动弯杆菌属（Mobilucus SPP.） 其它:人型支原体等
BV与常见阴道炎简介
种类
细菌性阴道病 Bacterial Vaginosis 霉菌性阴道炎 Volvovaginal Candidiasis
Livzon BV 四联操作注意事项
样本采集：用无菌棉拭子收集女性阴道壁
（阴道下部1/3处）尽可能多的分泌物；
阴道微生态检测解析
优势菌 病原菌
酶学指标
机体炎 症反应
常规检查内容
推荐阴道分泌物常规检查内容 (全国妇产科感染协作组)
湿片镜检
革兰氏染色
干化学酶法检测
清洁度 白细胞 滴虫 霉菌
密集度 多样性 线索细胞 Nugent评分
H202,LE,SNA, PIP,NAG,pH
临床检测方法
临床传统检测：
阴道分泌物检测（白带常规镜检）
生殖道感染危害是我国女性健康的第一条手！
女性生殖道感染性疾病是全球重大社会问题和公共卫生问题！
（中国女性生殖道感染诊治现状及研究进展 廖秦平、张岱 2011）
正常阴道微生态状况
正常育龄妇女阴道内微生物有 百余种。常见有：细菌、真菌、
病毒和原虫等
优势菌：乳酸杆菌 (95%+)
阴道微生态
厌氧菌和需氧菌 比例为5-10：1
镜检：发现真菌菌丝，白细胞少见
杂菌少见或增多、乳酸菌减少或消失
酶谱分析：
过氧化氢
阳性
凝固酶
阳性
乙酰氨基葡萄糖苷酶
阳性
葡萄糖苷酶
阳性
pH
≦ 4.6
滴虫性阴道炎(TV):
是常见的阴道炎，由阴道毛滴虫所引起，临床上以 白带增多、质稀有泡沫、秽臭，阴道瘙痒为主要表现。
滴虫性阴道炎(TV)的诊断
悬 滴 法 （60%-70%） 干化酶法（85%） 培 养 法 （78%） PCR （80%）
CV的诊断及治疗
3.诊断： ①pH3.5~4.5。 ②镜检 大量乳杆菌，阴道鳞状上皮细胞溶解后残存的上皮细胞碎 片及裸核。（假线索细胞） ③排除其他病原体的感染，如VVC、BV等。
4.解除病因： 目的在于减少阴道乳杆菌的过度增长。改善其酸性环境，局
阴道分泌物常规检测与五联检试剂检测的对比
阴道分泌物常规检测与五联检试剂检测的对比摘要：目的：对比分析阴道分泌物常规检测与五联检试剂检测效果。
方法：选取2015年11月至2017年11月在我院手术做阴道分泌物检测患者共150例，分别采用五联检试剂和常规检测方式对患者阴道分泌物实施检查，对比分析两组检测方法的检测结果。
结果：五联检试剂检测乳酸杆菌的检出率为18.67%，镜检检测乳酸杆菌的检出率为22.67%，两种检测方法在乳酸杆菌的检出率方面存在显著差异，P＜0.05；BV检出率和白细胞检出率等均高于镜检结果，但是差异不显著，P＞0.05；在滴虫和假丝酵母菌检出率方面，五联检试剂检测检出率低于镜检，无显著差异，P＞0.05；两种检测方法白细胞检验结果符合率为91.72%，细菌性阴道炎结果符合率为97.93%，滴虫性阴道炎结果符合率为93.24%，假丝酵母菌结果符合率为97.93%，以上四项检测结果符合率之间无显著差异，P＞0.05。
结论：在患者阴道分泌物检测当中，相比于常规检测方法来说，五联检查方法符合率较高，并且操作简便，影响因素较少，可以推广使用在临床检测当中。
关键词：阴道分泌物；五联检试剂；检测妇科阴道分泌物常规检测是重要的医学检查项目，可以对女性泌尿生殖健康进行有效判断。
阴道分泌物常规检查项目主要包括线索细胞，白细胞，滴虫以及假丝酵母菌检测[1]。
随着医学技术的不断发展，临床上主要采用五联检试剂进行白带常规检测，检测指标包括过氧化氢，唾液酸苷酶，白细胞酯酶，β-葡萄糖醛酸苷酶，凝固酶等[2]。
五联检试剂检测方法较为简便，但是对样本质量要求比较高，样本带血为对细菌性阴道病检测结果造成影响。
1 资料与方法1.1一般资料选取2015年11月至2017年11月在我院手术做阴道分泌物检测患者共150例，患者自诉为外阴瘙痒，有异味和白带增多，使用无菌拭子提取阴道后穹隆分泌物。
1.2方法应用试剂：阴道炎五联检试剂盒。
检测方法：使用消毒棉拭子放入子宫颈内，将深度控制在1.5cm左右，放置时间为10s左右，缓慢旋转取出。
妇科五联检培训ppt课件
2.2 方法学—干化学酶法
通过六项测定 1、过氧化氢浓度测定 2、白细胞酯酶活性测定 3、唾液酸苷酶活性测定 4、脯氨酸氨基肽酶活性测定 5、氨基葡萄糖苷酶活性测定 6、PH值
可检测五项指标 1、乳酸杆菌 2、白细胞（清洁度） 3、细菌性阴道病 4、霉菌 5、滴虫
14
2.3 图示
+ pH值结果色 黄色 ----蓝色 + 过氧化氢孔结果色 无色 ----紫红
18
2.6 结果解释
+ 第4孔（脯氨酸氨基肽酶）：不显色或浅淡色（标记 为“-”）表示阴性；显淡黄色（标记为“±”）表示弱 阳性，黄色（标记为“+”）表示阳性，该孔阳性若同 时第5孔阴性则指示可能BV感染，若同时第5孔阳性 则根据第5孔判结果。
+ 第5孔（乙酰氨基葡萄糖苷酶）：不显色或浅淡色 （标记为“-”）表示阴性；显淡黄色（标记为“±”） 表示弱阳性，显黄色（标记为“+”）表示阳性，该孔 阳性若同时pH值≥4.8指示滴虫性阴道炎感染，若同 时pH值≤4.6指示念珠菌性阴道炎感染。
缺点： 1. 漏检一部分BV; 2. 不能同时检测霉菌和滴虫，还需要做白带常规； 3. 质量不稳定，批间差大，过氧化氢孔不易判断，时间长质量问题； 4. 售后服务不好，依靠代理商就地解决。
25
三、竞争性产品介绍
3.3 细菌性阴道病联合检测试剂盒---细菌性阴道病四联检测试条
广州鸿琪仪器公司生产； + 检测pH 、过氧化氢、白细胞酯酶、唾液酸苷酶四项指标； + 4-30 ℃贮存，效期1年； + 注册材料已经递交，但目
色 + 白细胞酯酶孔 无色----蓝色 + 唾液酸苷酶孔 无色----红色 + 脯氨酸氨基肽酶及乙酰氨基葡萄糖
唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测在细菌性阴道病诊断的意义
唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测在细菌性阴道病诊断的意义摘要目的探讨唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测在妇科细菌性阴道病（BV）诊断中的价值。
方法1680例妇产科就诊的患者，对其阴道分泌物进行常规检验分析，同时做唾液酸苷酶和白细胞酯酶单项和联合检测，观察患者BV发病情况。
结果1680例患者中，BV发病率为15.5%；唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测的特异性为100.00%，准确性为97.08%，阳性预测值为100.00%，均高于单独使用一种酶检验（P＜0.001）；联合检测法与金标准结果一致性较好（P＜0.001）。
结论在BV的辅助诊断中，唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测具有较高的准确性和特异性，在BV早期诊断中具有重要临床推广价值。
关键词唾液酸苷酶；白细胞酯酶；细菌性阴道病BV是妇科最常见的感染性疾病之一，诊断不及时或不准确会导致病情加重，尤其影响育龄女性的生殖系统健康[1]。
目前实验室诊断主要是盐水涂片法找线索细胞[2]，由于取材及涂片的因素易造成漏检，同时容易受其他有形成分的干扰，病原体检出率低。
有报道，唾液酸苷酶检测BV具有简洁、快速等特点[3]，也有联合检测BV的方法报道[4，5]。
本研究拟采用唾液酸苷酶和白细胞酯酶联合检测BV，评价其在BV诊断中的价值。
现报告如下。
1 资料与方法1. 1 一般资料回顾分析2014年1～5月在本院妇产科就诊的1680例女性患者，年龄17～58岁，平均年龄35岁。
被检测者要求取样前24 h内禁止性生活、盆浴、阴道灌洗及局部上药。
1. 2 标本采集由妇科医生用无菌棉拭子取阴道壁上、子宫颈管或后穹窿分泌物置于装有0.5 ml 0.9%氯化钠溶液的一次性塑料试管中混匀送检。
1. 3 检测方法唾液酸苷酶检测试剂盒、白细胞酯酶检测试剂盒及检测仪均由珠海迪尔生物工程有限公司提供。
1. 3. 1 唾液酸苷酶检测法将分泌物置于检测反应杯中，摇匀静置10 min，终止反应观察其颜色，蓝色或绿色为阳性，无色为阴性。
阴道微生态检验报告单解读
第三部份 微生态分析
女性下生殖道感染是一种常见病、多发病。 • AV：需氧菌性阴道炎 • BV：细菌性阴道病 • CV：细胞溶解性阴道炎 • TV：滴虫性阴道直接由病原体厌氧菌群 如阴道加德纳菌等式分泌，其活 性与病原菌数量成正比。应用唾 液酸酶联合过氧化氢浓度测定可 最大程度的降低主观因素的干扰， 同时提 高准确性。
2.3唾液酸苷酶
研究表明，唾液酸苷酶联 合过氧化氢浓度测定的特 异性、阳性预测值、阴性 预测值均高于单以唾液酸 酶为标准诊断BV。
1.4 滴虫
• 滴虫呈梨形，后端尖，约为多核白细胞的2 ～3倍大小。虫体顶端有鞭毛4根，体部有 波动膜，后端有轴柱凸出。活的滴虫透明 无色，呈水滴状，诸鞭毛随波动膜的波动 而摆动，滴虫的生活史简单，只有滋养体 而无包囊期，滋养体生活力较强。
1.4 滴虫
1.4 滴虫
1.4 滴虫
• —（阴性）或 +（阳性）
1.5 真菌-菌丝
1.5 真菌-菌丝
1.5 真菌-芽生孢子
临床意义
• 正常：菌丝：（－），孢子：（－），芽 生孢子：（－） • 异常： • 1、菌丝（+），孢子（+），芽生孢子 （+）：霉菌性阴道炎（VVC）。 • 2、菌丝（－），孢子（+），芽生孢子 （－）应结合乙酰氨基糖苷酶试验和临床 作出诊断。
阴道微生态正常情况下，优 势菌为革兰氏阳性大杆菌 （乳酸杆菌），密集度为++ （Ⅱ级）—— +++ （Ⅲ级）。
菌群密集度过高++++（Ⅳ级） 应考虑涂片是否有问题或是 细胞溶解性阴道炎（CV）
安图公司阴道炎五联检试剂盒简介
安图公司《阴道炎五联检试剂盒》简介一、女性生殖道感染预防的关键是把好第一关女性生殖道感染有三方面研究：1、下生殖道2、宫颈3、盆腔，把好第一关“下生殖道感染的控制尤为重要。
二、生殖道感染的控制从以下工作入手：预防、检测、评估、诊断、修复、治疗、重建。
生殖道感染预防靠宣教指导，其它首先靠临床检测。
生殖道微生态评估诊断感染的性质及程度都需要临床检测，检测需要科学方法、准确的结果。
治疗指导用药修复、重建后的效果三、下生殖道感染的最常见、多发病1、细菌性阴道病2、念珠菌性阴道病、3、滴虫性阴道病4、需氧菌性阴道炎阴道分泌物常规检测是女性生殖道感染性疾病诊断的重要检测项目，包括：清洁度、霉菌、滴虫、PH值、胺试验、线索细胞四、常规检测方法及安图公司阴道炎五联检方法比较五、阴道炎五联检试剂检测原理一）方法学——干化学酶法二）检测项目1.pH测定：一般来说，正常白带pH为3.8-4.5，BV白带pH>4.5，滴虫白带pH可大于5-6，霉菌白带pH在4.0-4.7。
2.过氧化氢浓度测定：用来表示分泌物中有益菌如乳酸杆菌的多少，阴性表明乳酸杆菌多，阳性则指示阴道环境可能处于病理或亚健康状态。
反应液中过氧化氢经过氧化物酶作用，释放出新生态氧，后者在氨基安替吡啉存在下，使TOOS氧化呈红色或紫红色，呈色深度与H2O2浓度成正比。
3.白细胞酯酶活性测定：用来表示白细胞的多少，阳性表明白细胞多于15/HP，有阴道炎。
白细胞酯酶水解X-乙酸盐，释放出溴吲哚基，后者在氧存在的条件下呈蓝色，呈色深度与白细胞酯酶活性成正比。
4.唾液酸苷酶活性测定：用来表示唾液酸苷酶活性，阳性表明有细菌性阴道病。
唾液酸苷酶水解X-乙酰神经氨酸，释放出溴吲哚基遇重氮盐起反应呈红色或紫色，呈色深度与唾液酸苷酶活性成正比。
5.脯氨酸氨基肽酶活性测定：厌氧生物以及白色念珠菌有强的脯氨酸氨基肽酶活性，水解脯氨酸对硝基苯胺，释放出黄色的对硝基苯胺，呈色深度与脯氨酸氨基肽酶活性成正比。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
四、线索细胞
•
为阴道鳞状上皮细胞黏附大量加德纳菌及其他短小杆菌后形 成。生理盐水涂片高倍镜下可见该细胞边缘呈锯齿状，细胞已有 溶解，核模糊不清，其上覆盖有大量加德纳菌及厌氧菌，使其表 面毛糙，出现斑点和大量的细小颗粒。涂片革兰染色后，显示黏 附于脱落上皮细胞内的细菌为革兰阴性或染色不定的球杆菌，其 中，柯氏动弯杆菌( M. curtisii) 是一短小的(平均约1. 5μm) 革兰 染色不定菌，羞怯动弯杆菌(M. mulieris)是一长的(平均约3.0 μm) 革兰染色阴性菌，阴道加德纳菌(Gardnerellavaginalis) 是一种微 需氧的、多形性的革兰染色不定杆菌。线索细胞是诊断细菌性阴 道病的重要指标。
白带常规与BV检测
检验科-曹均
阴道分泌物检查
• 阴道分泌物俗称“白带”，是由女性生 殖系统-阴道、子宫内膜、卵巢等分泌的液 体，其中主要是由阴道分泌的液体。
一、清洁度
取阴道分泌物，用生理盐水涂片，高倍镜检 查，根据所含白细胞(或脓细胞)、上皮细胞、杆 菌、球菌的多少，分成I-IV 度，判定结果见、建议尽量避免 • 2、不报结果或若见明显蓝色为阳性，否则 报阴性 • 3、建议结合临床症状及镜检结果做出综合 判断
• 三.反应出现阶段性的阳性率高或低？ • 1、排除是否为操作或标本问题 • 2、与病人来源有关系
• 四.检测结果与镜检结果不一致？ • 1、镜下看到线索细胞，我们的试剂检测结果为 阴性
• 清洁度 杆菌 球菌 上皮细胞 脓细胞或白细胞个数
• • • •
I Ⅱ Ⅲ IV
多 中 少 -
少 多 大量
满视野 1/2视野 少 -
0-5 个/高倍视野 5-15 个/高倍视野 15-30 个/高倍视野 ＞30 个/高倍视野
临床意义
清洁度在I - II 度内视为正常， Ⅲ、 IV 度为异 常，多数为阴道炎，可发现阴道霉菌、阴道滴虫 等病原体。单纯不清洁度增高而不见滴虫、霉菌 者，可见于细菌性阴道炎。
2、镜下看不到线索细胞，我们的试剂检测结 果为阳性？ • ①标本取样不一致导致；②线索细胞与唾 液酸酶活性并不是一一对应的关系，尤其 是一些属于初期感染的患者，BV致病菌进 居但未大量繁殖时，初期感染的很多在镜 下都看不到线索细胞。此种情况建议报阳 性。③操作；④病人用药、性交、阴道冲 洗、经期等。
唾液BV相关问题
• 一、阳性率低？ 1、标本取样部位不正确（宫颈口/阴道壁） 2、取样量少（尽可能多取） 3、标本用生理盐水浸泡取干标本，先用于镜 检（滴生理盐水于玻片上，标本涂片镜检 后用于BV检测） 4、生理盐水加入反应管：（不可取） 5、洗涤标本，丢弃棉签：（不可取）
6、没有搅拌：（唾液BV底物包被在反应管底 部，需搅拌3-5次） 7、反应温度太低：（需调节温度，39-40度） 8、反应时间太短：（反应时间应在15-20min）
• 五.结果观察及判断 • 注意观察的是棉签头的颜色，反应后棉签只 要有变蓝色（包括浅蓝）都判为阳性。颜色 的深浅与唾液酸酶的活性及量成正比，颜色 越深表示活性越强。
唾液酸酶法：操作最简单，但由于BV 是多细菌混合感染，因而测定某一种细菌 的特异性酶的方法漏诊率较高。研究表明 普雷沃菌、部分加德纳菌有此酶活性，但 动弯杆菌、消化球菌导致的BV容易漏检。
标本：
• 1、尽量多取 • 2、不能用生理盐水浸泡
操作：
• • • • 1、提取液加量不能太多，以棉签充分润湿为准 2、注意搅拌； 3、不能将生理盐水加入反应管； 4、保留棉签
反应温度：37-40度 反应时间：15分钟 结果观察：以棉头的颜色变化为准，棉签 头变为蓝色或淡蓝色为阳性，不变色为阴 性。
二、滴虫检查
阴道滴虫呈梨形，比白细胞大2 倍，顶端有鞭 毛4 根，在25 -42 ℃温度下可活动。因此，在寒 冷天，标本要采取保温措施。滴虫活动的最适pH 为5.5 - 6.0 。
三、霉菌检查
• 在湿片高倍镜下见卵圆形于孢子，革兰 染色油镜下可见革兰阳性孢子或假菌丝与 出芽细胞相连接，成链状及分枝状。找到 阴道霉菌是霉菌性阴道炎的诊断项目。
• ①标本取样不一致导致； • ②线索细胞虽然有一定的特异性，但碎片及退化的细胞 有时被误认为是线索细胞。识别更有赖于标本的采集和 操作者对线索细胞的识别、计数能力的共同影响。③作 ，取样时是否粘生理盐水；④病人用药、性交、阴道冲 洗、经期等。⑤根据文献报道由于各种因素差异存在镜 检结果与试剂盒检测结果的符合率一般在80%以上。
BV检测（唾液酸法）
• 细菌性阴道病（BV)是已婚妇女最常见 的下生殖道感染之一，是指一类在细菌学 上表现为生殖道下常菌群（产H2O2的乳酸 杆菌）减少，代之以一组厌氧菌群（类杆 菌属族，加德纳菌、莫比伦氏菌属、人型 支原体菌属和消化链球菌属等）数量增加 所致的临床症候群。
唾液BV产品技术要求及要点
注：具体操作与注意事项待试剂购买到位后再统一讲解！
五、淋菌性阴道炎
• 可在涂片中找到G—双球菌。此方法为 诊断淋病性阴道炎的手段之一，淋球菌呈 肾形成对排列、凹面相对，革兰染色呈阴 性，图片中可见大量细菌被白细胞吞噬（ 图4-10）
六、纤毛菌及细菌
• 有时在阴道分泌物涂片中可见到肠杆 菌、链球菌、纤毛菌等，其中很多都是细 菌性阴道炎的病原体。其诊断主要依靠细 菌培养，涂片直接查菌，主要用于筛查时 参考（图4-11~图4-14）。