动物细胞培养和核移植技术(上课用)
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动物细胞培养和核移植技术(共36张PPT)
触抑制
代
转入培养瓶
培
细胞株：一般说
遗传物质未改变
传代10代以内，遗传物质不改变，保 分瓶传代培养 养
持正常二倍体核型。
传代10-50代左右，增长缓慢以至于 10代细胞
完全停止，部分细胞核型可能发生
传 代
变化（遗传物质可能改变）
40-50代细胞 培
继续传代培养少部分细胞获得不死性，
养
细胞突变，遗传物质已经改变，等同
-------------（ ） A
4、可以作为异种移植的供体，可以用于组织器官的移植
保证细胞顺利的生长增殖
保证细胞顺利的生长增殖
A．细胞系 体外培养的细胞需要什么样的环境条件？
检测有毒物质，判断某种物质的毒性
B．细胞株
C．原代细胞 D．传代细胞 ２、用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞，为什么？
为___________. (4)为了把B瓶原代中培的养 细胞分装到C瓶中，用_____ 处理，然后配置成___________，再分装。 胰蛋白酶 (5)在C瓶中正常培养了一细段胞悬时浮间液后，发现细胞全部死亡。
1.体积大，易操 次分裂中期 作。2.含有促使 细胞（MⅡ
细胞核表达全能 中期）为什 性的物质和营养 么？
条件。
◆促融方法：
电刺激
妊娠、分娩
◆胚胎移植至代 孕受体内
有人说它三个母亲， 对吗？
细胞核核移植
卵母细胞采集、培养
MⅡ期卵母细胞 去核
去核卵母细胞
体细胞核移植过程 （体细胞克隆动物）
供体细胞注入 去核卵母细胞
生长和繁殖。
2、原理：细胞增殖
3、过程
增殖能力强，分裂旺盛，分化程 度低，容易培养
2-2-1 动物细胞培养和核移植技术(第一课时)
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展示内容
展示组/个人
课内探究：1
课内探究：2 课内探究：3 课内探究：4（1）
1组（口头）
2组（口头） 5组（口头） 6组（口头）
课内探究：4（2）
7组（板书）
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3.关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ D ） A.用于培养的细胞大量都取自胚胎或幼龄动物 的器官或组织 B.将所取的组织先用胰蛋白酶等进行处理使其 分散成单个细胞 C.在培养瓶中要定期用蛋白酶使细胞从瓶壁上 脱离，制成悬浮液 D.动物细胞培养只能传50代左右，所培育的细 胞会衰老死亡
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2.2.1
动物细胞培养和核移植技术
第二课时
【学习目标】
和应用前景；
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1.说出动物体细胞核移植技术克隆动物的过程
2.通过阅读教材找出关键词，归纳动物体细胞 核移植技术的流程；
人教版教学课件动物细胞培养和核移植技术2
2.体细胞核移植技术的应用前景
1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病，作为供体 4.保护濒危动物
课堂小结
动物细胞培养过程 两个过程
核移植技术
自学达标练习
1. 2007年高考．（8分）[生物-现代生物科技专题]
继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生 物反应器的研究也取得了一定进展。最近，科学 家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以 合成人的生长激素并分泌到尿液中。请回答： （1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常 显微注射 。 用方法是 （2）进行基因转移时，通常要将外源基因转入 。 受精卵 中， 原因是 受精卵具有全能性， 可使外源基因在相应 组织细胞表达
3.现在对于克隆人的观点各不相同,你 支持克隆人吗?说出你的看法.
课堂作业
完成自主学习丛练习书2.2.1的所 有 利用网络查找有关动物细胞工程 前景的资料
根据动物细胞核仍具有全能性 的特点,怎样将动物细胞的全能性 表达?
利用动物体细胞核移植技术
克隆动物的研究意义
1.克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 2.改良动物品种 3.治疗人类疾病，作为供体 4.保护濒危动物
资料分析
1.烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康 皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病 人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一 想如何来治疗该病人？
取该患者的皮肤进 行细胞培养,获得足 量的细胞后再移植
2.“人耳鼠”再出风头
人耳鼠
2001年，一只特别的活老鼠在 北京引起轰动——这是有着一对红 眼睛的、尾巴长长的、浑身没毛的 小白鼠。值得一提的是，这只小白 鼠的背上，竟长着一只几乎与身子 一般大小的“人耳”。这只老鼠背 上的“人耳”是由上海市第九人民 医院副院长、整复外科主任曹谊林 教授利用组织工程技术复制出来的。 在京展出的数天，尽管门票高达20元，但还是有将近20 万人，心甘情愿地掏钱一睹“人耳鼠”的风采。
动物细胞培养和核移植技术教案人教版
3. 学生通过实验操作，掌握动物细胞培养的基本技巧。
教学目标：
1. 理解动物细胞培养的概念和过程，掌握动物细胞培养的条件。
2. 理解核移植技术的原理和过程，掌握核移植技术的应用。
3. 培养学生的实验操作能力，提高学生的科学探究能力。
教学重点：
1. 动物细胞培养的概念、过程、条件及应用。
2. 核移植技术的原理、过程及应用。
- 视频资源：推荐学生观看BBC纪录片《细胞故事》和《克隆技术：生命的复制》。
2. 拓展要求：
- 请学生在阅读上述推荐书籍后，撰写读书笔记，总结所学知识，并思考动物细胞培养和核移植技术在现实生活中的应用。
- 请学生在观看上述推荐视频后，撰写观后感，分析动物细胞培养和核移植技术的原理、过程及应用。
- 鼓励学生针对本节课内容，开展小组讨论，分享自己的学习心得和疑问，共同探讨动物细胞培养和核移植技术的未来发展。
2. 对于核移植技术的原理、过程及应用，可以通过案例分析、实验模拟、小组讨论等方式，帮助学生理解和掌握。
3. 对于动物细胞培养的技术操作，可以安排实验课，让学生亲自动手操作，教师进行指导，通过实践提高学生的操作技能。
4. 对于核移植技术的原理及操作，可以通过视频讲解、实验演示、小组讨论等方式，帮助学生理解和掌握。
- 设计预习问题：围绕动物细胞培养和核移植技术课题，设计一系列具有启发性和探究性的问题，引导学生自主思考。
- 监控预习进度：利用平台功能或学生反馈，监控学生的预习进度，确保预习效果。
学生活动：
- 自主阅读预习资料：按照预习要求，自主阅读预习资料，理解动物细胞培养和核移植技术知识点。
- 思考预习问题：针对预习问题，进行独立思考，记录自己的理解和疑问。
- 请学生在拓展学习过程中，遇到问题时及时向老师提问，老师将提供必要的指导和帮助。
教学目标：
1. 理解动物细胞培养的概念和过程，掌握动物细胞培养的条件。
2. 理解核移植技术的原理和过程，掌握核移植技术的应用。
3. 培养学生的实验操作能力，提高学生的科学探究能力。
教学重点：
1. 动物细胞培养的概念、过程、条件及应用。
2. 核移植技术的原理、过程及应用。
- 视频资源：推荐学生观看BBC纪录片《细胞故事》和《克隆技术：生命的复制》。
2. 拓展要求：
- 请学生在阅读上述推荐书籍后，撰写读书笔记，总结所学知识，并思考动物细胞培养和核移植技术在现实生活中的应用。
- 请学生在观看上述推荐视频后，撰写观后感，分析动物细胞培养和核移植技术的原理、过程及应用。
- 鼓励学生针对本节课内容，开展小组讨论，分享自己的学习心得和疑问，共同探讨动物细胞培养和核移植技术的未来发展。
2. 对于核移植技术的原理、过程及应用，可以通过案例分析、实验模拟、小组讨论等方式，帮助学生理解和掌握。
3. 对于动物细胞培养的技术操作，可以安排实验课，让学生亲自动手操作，教师进行指导，通过实践提高学生的操作技能。
4. 对于核移植技术的原理及操作，可以通过视频讲解、实验演示、小组讨论等方式，帮助学生理解和掌握。
- 设计预习问题：围绕动物细胞培养和核移植技术课题，设计一系列具有启发性和探究性的问题，引导学生自主思考。
- 监控预习进度：利用平台功能或学生反馈，监控学生的预习进度，确保预习效果。
学生活动：
- 自主阅读预习资料：按照预习要求，自主阅读预习资料，理解动物细胞培养和核移植技术知识点。
- 思考预习问题：针对预习问题，进行独立思考，记录自己的理解和疑问。
- 请学生在拓展学习过程中，遇到问题时及时向老师提问，老师将提供必要的指导和帮助。
动物细胞培养和核移植技术 课件
(5)人的核移植胚胎干细胞经诱导分化，形成相应组 织、器官后，可以用于组织器官的移植。
(6)研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展 过程和治疗疾病。
4．存在问题。 (1)成功率低。 (2)绝大多数克隆动物还存在健康问题。 (3)克隆动物食品的安全性存在争议。
要点一 动物细胞培养
1．动物细胞培养时需要将细胞分散开，其方法是什 么？
(4)继植物组织培养之后，克隆绵羊的培育成功，证 明动物细胞的细胞核也具有_________________________
________________________。 解析：(1)由图示可知①为核移植过程。(2)卵母细胞
体积大、易操作，并且还含有能诱发细胞核全能性表达的
物质及丰富的营养物质，比较适于做核移植的受体细胞。
(3)在核移植时，一般不选择生殖细胞作为供核细胞， 因为生殖细胞与正常体细胞相比，遗传物质减半。
(4)克隆动物的性状与核供体生物的性状基本相同， 而不是完全相同，因为：①克隆动物的细胞质遗传物质来 自于受体卵母细胞。②生物的性状不仅与遗传物质有关， 还受环境的影响。③突变。
(5)核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核 遗传物质与供核个体的相同，属于无性繁殖，不会改变生 物体的基因型。
2．过程。
3．条件。 (1)无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进 行无菌处理。 (2)营养：合成培养基中要有糖、氨基酸、促生长因 子、无机盐、微量元素等，通常需加入血清、血浆等。 (3)温度和 pH。 ①适宜温度：36.5±0.5 ℃。 ②适宜 pH：7.2～7.4。
(4)气体环境：主要是 O2 和 CO2，O2 是细胞代谢所必 需的，CO2 主要维持培养液的 pH。
(3)培养首先在 B 瓶中进行，瓶中的培养基成分有 ________________________等。在此瓶中培养一段时间 后，有许多细胞衰老死亡，这时的培养称为__________。
(6)研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展 过程和治疗疾病。
4．存在问题。 (1)成功率低。 (2)绝大多数克隆动物还存在健康问题。 (3)克隆动物食品的安全性存在争议。
要点一 动物细胞培养
1．动物细胞培养时需要将细胞分散开，其方法是什 么？
(4)继植物组织培养之后，克隆绵羊的培育成功，证 明动物细胞的细胞核也具有_________________________
________________________。 解析：(1)由图示可知①为核移植过程。(2)卵母细胞
体积大、易操作，并且还含有能诱发细胞核全能性表达的
物质及丰富的营养物质，比较适于做核移植的受体细胞。
(3)在核移植时，一般不选择生殖细胞作为供核细胞， 因为生殖细胞与正常体细胞相比，遗传物质减半。
(4)克隆动物的性状与核供体生物的性状基本相同， 而不是完全相同，因为：①克隆动物的细胞质遗传物质来 自于受体卵母细胞。②生物的性状不仅与遗传物质有关， 还受环境的影响。③突变。
(5)核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核 遗传物质与供核个体的相同，属于无性繁殖，不会改变生 物体的基因型。
2．过程。
3．条件。 (1)无菌、无毒的环境：对培养液和所有培养用具进 行无菌处理。 (2)营养：合成培养基中要有糖、氨基酸、促生长因 子、无机盐、微量元素等，通常需加入血清、血浆等。 (3)温度和 pH。 ①适宜温度：36.5±0.5 ℃。 ②适宜 pH：7.2～7.4。
(4)气体环境：主要是 O2 和 CO2，O2 是细胞代谢所必 需的，CO2 主要维持培养液的 pH。
(3)培养首先在 B 瓶中进行，瓶中的培养基成分有 ________________________等。在此瓶中培养一段时间 后，有许多细胞衰老死亡，这时的培养称为__________。
动物细胞培养和核移植技术 课件
培养基 质元素、蔗糖、维生素、琼脂、盐、葡萄糖、维生素、 区
植物激素等 别
氨基酸、动物血清等
细胞
胚胎或幼龄动物组织、
离体植物器官、组织或细胞
来源
器官
过程
脱分化、再分化
原代培养、传代培养
项目
植物组织培养
动物细胞培养
大量产生细胞或细胞 结果 获得新个体或细胞产品
产物
①快速繁殖名贵花卉和果树； ①生产蛋白质制品，如
动物细胞培养和核移植技术
一、动物细胞工程 1.常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞核移植、___动__物_细__胞__ __融_合_、生产_____单__克_隆__抗_体_____等。 2.技术基础：______动_物__细_胞__培_养___技术。
二、动物细胞培养 1.概念：从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞， 然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞____生__长_和__增_殖__。 2.培养过程
(4) 治 疗 人 类 疾 病 ： 转 基 因 克 隆 动 物 细 胞 、 组 织 和 器 官 作 为 ____异__种_移__植___的供体等。
5．体细胞核移植技术存在的问题 (1)____成_功__率___非常低。
(2)绝大多数克隆动物存在健康问题。 (3)对克隆动物食品的____安_全__性___问题存在争议。
过程。
4．培养条件
(1)无菌、无毒的环境：对___培_养__液_和所盐、___微_量__元_素___等 (2)营养有机物：糖、氨基酸、促生长因子、天然成分
____血_清__、_血__浆__等
(3)温度和
温度：______3_6._5±__0_.5_℃________ pHpH：_____7_.2_～_7_.4_______
高中生物 2.1《动物细胞培养和核移植技术》教学设计 新人教版选修3-新人教版高二选修3生物教案
动物细胞培养和核移植教学设计〔第一课时〕一、概述本节是人教版普通高中课程标准实验教科书生物选修三第二章第三节《动物细胞培养和核移植》第一课时。
普通高中《生物课程标准》〔实验〕指出，高中生物课程目的之一是帮助学生理解生物科学、技术和社会的相互关系，增强学生对自然和社会的责任感，促进学生形成正确的世界观和价值观。
同时现代教育理论认为，从某种意义上说，主动参与的学习过程比单纯获得现成的结论更重要。
在学生通过对植物细胞工程的学习之后，可能会对是否能对动物细胞进行培养、克隆动物等问题产生疑问。
本节课在设置情景，介绍动物细胞工程相关技术之后，我采用自主学习的方法，先让学生自学动物细胞的培养过程，找出关键概念，画出动物细胞培养的流程图，在此基础上，再对学生的流程图进行修正，并强调重要的名词和概念。
对于动物细胞培养应注意的问题，我采用一系列问题串的形式，让学生讨论探究。
最后总结得出结论。
通过对植物组织培养和动物细胞培养的比较，实现对新知识进行有意义的构建。
最后通过介绍居里夫人的名言，进一步激励学生热爱科学，关爱生命的情感。
二、教学目标分析知识目标： 1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用；2、说出贴壁生长、接触抑制、原代培养、传代培养等基本概念；3、区分植物组织培养和动物细胞培养的异同能力目标： 1、通过自学概括出动物细胞培养的过程，积极参与小组讨论2、运用已学知识，分析动物细胞培养的条件。
情感目标： 1、培养热爱科学，关爱生命健康的情感2、关注细胞工程研究的发展和应用前景三、学习者特征分析本节课的学习者特征分析主要是根据教师平时对学生的了解而做出的：〔1〕学生是某某培元中学高二年学生；经过一年多的高中学习，已经掌握了一定的生物学基础知识,具备了独立思考和判断的能力。
〔2〕学生已经学习了基因工程、植物细胞工程的学习，对动物细胞工程的学习有较浓厚的兴趣。
〔3〕学生在以前较少开展课堂的自主学习和讨论，有必要加以引导四、教学策略选择与设计〔1〕情境激趣策略：通过大量动物细胞培养的图片、诗歌、名人名言激发学生的学习兴趣和热爱科学的情感〔2〕以任务驱动的自主学习策略：通过布置每位学生阅读教材相关内容，培养学生的自主学习能力。
动物细胞培养和核移植技术课件
(3)如何区分原代培养与传代培养？ 答案 ①原代培养：通常将动物组织消化后的初次培养称 为原代培养。 ②传代培养：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处 理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖，即为传代培养。
2．条件 (1)无菌、无毒的环境：培养液应进行_无__菌___处理。 (2)营养：合成培养基的成分为糖、__氨__基__酸___、促生长 因子、无机盐、微量元素、_血__清___、血浆等。 (3)温度和 pH：适宜的温度为__3_6_._5_±_0_.5__℃_____；pH 为 _7_._2_～__7_._4___。 (4)气体环境：_空__气___ 95%和 CO25%的混合气体。
【归纳提炼】 1．不同层次的克隆
(1)分子水平：如DNA复制。 (2)细胞水平：动物细胞培养。 (3)个体水平：“多利”羊的诞生。 2．动物细胞核移植的条件及结果 (1)核移植一般选择去核的卵母细胞，因为卵母细胞体 积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营 养条件。一般不选择生殖细胞作为供核细胞，因为生殖 细胞与正常体细胞相比，遗传物质减半。
【归纳提炼】 动物细胞培养与动物组织培养的比较
【活学活用】
1．判断下面关于动物细胞培养的叙述的正误。
(1)动物细胞培养的原理是动物细胞的全能性
()
(2)需要对细胞进行一次脱分化处理和两次蛋白酶处理 ( )
(3)原代培养的细胞是指从贴壁生长到发生接触抑制的细胞
()
(4)恒温条件下，细胞周期持续时间长短不随细胞培养进程而
5．应用 (1)加速家畜_遗__传___改良进程，促进优良畜群繁育。 (2)增加濒危动物数量，保护_濒__危___物种。 (3)生产医用蛋白。 (4)作为_异__种__移植的供体。 (5)用于组织器官的移植。
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抗原进行攻击。
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（1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细
胞 吸收氧气和营养物质、排出代谢废物 。
（2）气室中充入5％C02：气体的主要作用
是 维持培养液适宜的pH
。
（3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生
长，但要注意选择抗生素的 种类和剂量 ，以
保证抗生素对肝脏无害。
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08年宁夏卷回答下列有关动物细胞培养的问题：
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原代培养
• 定义：把第1代细胞的培养与10代以内的细胞 培养统称为原代培养。
•过程：从动物机体中取出组织 剪碎 加胰蛋白酶 细胞游离 加培养液 将 细胞接种到培养瓶内 培养（1—2天换一次 培养液） 细胞贴壁生长 长成单层细胞
取材（动物组织） →细胞分散→初次培养 精品文档
传代培养
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 增部分加细。胞突变，获
得不死性，向癌细 胞方向发展，糖蛋 白减少。
50代以后
接触抑制
失去接触抑制
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一、动物细胞培养过程 2、为什么要对取出的动物组织进行处理，
使细胞分散？ 分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排
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一、动物细胞培养过程 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外， 长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤 作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
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一、动物细胞培养过程
5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器 官或组织做动物细胞培养材料？
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们 的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺 盛，容易培养。
A．原代培养 B．传代培养
D
C．细胞株 D．细胞系
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6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚
胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要
原因是这样的组织细胞
D
A.容易产生各种变异
B.具有更强的全能性
C.取材十分方便
D.分裂增殖的能力强
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7.（09江苏）下图是一个新生小鼠的肝脏
小块培养装置示意图。请回答下列问题。
接触抑制
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一、动物细胞培养过程
8、传代培养中， 第10代细胞与第50 代以后细胞的主要 区别是什么？
细胞癌变,失去 接触抑制特性。
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一、动物细胞培养过程
9、动物细胞培养能否象植物组织培养那 样获得克隆个体？需要诱导其脱分化的过程吗？
不可以，因为高度分化的动物细胞的全能 性受到抑制。
不需要诱导其脱分化。
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
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一、动物细胞培养过程
阅读“动物细胞培养过程”并思考：
1、动物细胞培养的概念是什么？该技术实 施的原理是什么？ 特点是什么？
2、为什么要对取出的动物组织进行处理，使 细胞分散？
3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细 胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？
出代谢废物；而用大块组织培养时，内部细胞的 营养供应和代谢废物的排出都较困难。
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一、动物细胞培养过程
3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因 为细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？
细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤 维）。
胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6 时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜 环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH 为7.2～7.4。
原代培养 10代细胞
遗传物质 细胞株
未改变
50代细胞
动物细遗已胞传改培物变养质不细能胞系
最终培养成生物体
无限传代
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传代培养
一、动物细胞培养过程
7、什么是原代培 养、传代培养？为什么 要进行传代培养？
原代培养：
取材（动物组织） →细胞分散→初次培养
传代培养：
培养的细胞→细胞分散→继续培养
进行传代培养的原因：
细胞系： 传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了
变化，带有癌变的特点，可能在培养条件下无限 制的传代下去，这种传代细胞称为细胞系。
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二、动物细胞培养条件
1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.保4 证生细长胞增顺殖利的 4、气体环境：
⑴在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂 生长到细胞表面 相互接触 时，细胞会停止分
裂增殖，这种现象称为细胞的 接触抑制 。此时，
瓶壁上形成的细胞层数是
单层，要使贴壁的细
胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶
是
胰蛋白酶。
⑵随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停 止，进而出现 衰老甚至死亡的现象；但极少数
原理是细胞增殖 （有丝分裂） 。
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动物细胞生长特点：
细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，
称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、
易于贴附。 细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细 胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞 的接触抑制。
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动物细胞生长特性
1、说出动物细胞培养的过程？ 2、简述动物细胞培养的条件？ 3、说出动物细胞培养的应用？ 4、对比说出动物细胞培养与植物组织培养 原理、条件、结果、培养目的
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巩固练习：
1.用动、植物成体的体细胞进行离体培养，
下列叙述正确的是
C
A．都需用培养箱
B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行外界条件适 D．都可体现细胞的全能性宜，植物细
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愈伤组织 条件适宜 可以传代 培养不分
化。
4、细胞株的特点是
C
A．遗传物质没有改变，可以无限传代
B．遗传物质发生改变，不可无限传代
C．遗传物质没有改变，不可无限传代
D．遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以
无限传代
5、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养
条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为:
2.2 动物细胞工程
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学习目标：
1、简述动物细胞培养的过程、条件及 应用 2、对比说出动物细胞培养与植物组织 培养原理、条件、结果、培养目的
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复习：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？
植物组织培养技术、 植物体细胞杂交技术
动物细胞工程常用的技术手段：
动物细胞培养技术、 动物细胞核移植技术、 动物细胞融合技术、 生产单克隆抗体技术
4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什 么？
5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或 组织做动物细胞培养材料？
6、简述动物细胞培精养品文的档 操作过程
动物细胞培 养过程：
原代培养
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传代培养
聚焦一、动物细胞培养过程
1、动物细胞培养的概念是什么？该技术 实施的原理是什么？
从动物机体中取出相关组织，将它分散成 单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞 生长和繁殖。
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四、植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理
细胞的全能性 细胞增殖
培养基状态 固体培养基
液体培养基
培养基特有 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 成分
培养结果 植物体
细胞株、细胞系
培养目的 快速繁殖、培育 获得细胞或细胞分
无病毒植株
泌蛋白
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你达到学习目标了吗？
细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发
生改变而变成
不死性细胞，该种细胞的黏
着性
降低 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）
的量
减少。 精品文档
⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最 好选用细胞分裂到 中期的细胞用显微镜进行观 察。 ⑸在细胞培养过程中，通常在 冷冻 条件下保存 细胞，因为在这种条件下，细胞中 酶 的活性降 低，细胞的 新陈代谢 速率降低。 ⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生 了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作
（1）液体培养基 与植物培养基相比其特点是：
（2）含有动物血清
无机盐、蔗糖 、维生素、生 长调节质、植物激素精品文档三、动物细胞培养的应用
1、获得细胞产物，如蛋白质生物制品 －病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等
2、获得烧伤病人植皮所需的细胞 3、获得细胞用于检测有毒物质 4、为治疗及预防疾病提供理论依据。
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6、动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动
传代培养一般传至10代直至50
物的组织、器官
代就不能再分裂了，这时细胞
胰蛋白酶
核内遗传物质未发生变化，形
成的细胞群
单个细胞
传代培养过程中有个别细胞 传至50代以后，由于遗传物 质改变，失去控制，成为无
加培养液
细胞悬浮液
限增殖的不死的癌症细胞， 形成的细胞群
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
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思考：动物血清的作用？ 主要是：提供有利于细胞生长增殖所需的 激素、生长因子或提供合成培养基所缺乏 的营养物质等。
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成分比较：
动物细胞培养液的主要成分： 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
植物组织培养呢？ 动物体细胞大都生活 在液体的环境
• 定义：当原代培养的细胞生长停止，这 时如果要使细胞继续生长，就要及时用 胰蛋白酶等，使细胞从瓶壁上解离下来， 然后加入新的培养液，将细胞分离稀释， 并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内， 这个过程称传代培养
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（1）肝脏切成小薄片，这有利于肝脏细
胞 吸收氧气和营养物质、排出代谢废物 。
（2）气室中充入5％C02：气体的主要作用
是 维持培养液适宜的pH
。
（3）培养液中添加抗生素是为了抑制细菌生
长，但要注意选择抗生素的 种类和剂量 ，以
保证抗生素对肝脏无害。
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08年宁夏卷回答下列有关动物细胞培养的问题：
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原代培养
• 定义：把第1代细胞的培养与10代以内的细胞 培养统称为原代培养。
•过程：从动物机体中取出组织 剪碎 加胰蛋白酶 细胞游离 加培养液 将 细胞接种到培养瓶内 培养（1—2天换一次 培养液） 细胞贴壁生长 长成单层细胞
取材（动物组织） →细胞分散→初次培养 精品文档
传代培养
接触抑制：细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分 裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细 胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再 增部分加细。胞突变，获
得不死性，向癌细 胞方向发展，糖蛋 白减少。
50代以后
接触抑制
失去接触抑制
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一、动物细胞培养过程 2、为什么要对取出的动物组织进行处理，
使细胞分散？ 分散的单个细胞容易摄取所需的营养，排
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一、动物细胞培养过程 4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？
胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外， 长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤 作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。
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一、动物细胞培养过程
5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器 官或组织做动物细胞培养材料？
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们 的细胞分化程度低，增殖能力强，分裂旺 盛，容易培养。
A．原代培养 B．传代培养
D
C．细胞株 D．细胞系
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6、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚
胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要
原因是这样的组织细胞
D
A.容易产生各种变异
B.具有更强的全能性
C.取材十分方便
D.分裂增殖的能力强
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7.（09江苏）下图是一个新生小鼠的肝脏
小块培养装置示意图。请回答下列问题。
接触抑制
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一、动物细胞培养过程
8、传代培养中， 第10代细胞与第50 代以后细胞的主要 区别是什么？
细胞癌变,失去 接触抑制特性。
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一、动物细胞培养过程
9、动物细胞培养能否象植物组织培养那 样获得克隆个体？需要诱导其脱分化的过程吗？
不可以，因为高度分化的动物细胞的全能 性受到抑制。
不需要诱导其脱分化。
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
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一、动物细胞培养过程
阅读“动物细胞培养过程”并思考：
1、动物细胞培养的概念是什么？该技术实 施的原理是什么？ 特点是什么？
2、为什么要对取出的动物组织进行处理，使 细胞分散？
3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因为细 胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？
出代谢废物；而用大块组织培养时，内部细胞的 营养供应和代谢废物的排出都较困难。
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一、动物细胞培养过程
3、用胰蛋白酶对动物组织进行处理是因 为细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？
细胞间的物质主要是蛋白质（胶原纤 维）。
胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6 时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜 环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH 为7.2～7.4。
原代培养 10代细胞
遗传物质 细胞株
未改变
50代细胞
动物细遗已胞传改培物变养质不细能胞系
最终培养成生物体
无限传代
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传代培养
一、动物细胞培养过程
7、什么是原代培 养、传代培养？为什么 要进行传代培养？
原代培养：
取材（动物组织） →细胞分散→初次培养
传代培养：
培养的细胞→细胞分散→继续培养
进行传代培养的原因：
细胞系： 传到40-50代后有部分细胞遗传物质发生了
变化，带有癌变的特点，可能在培养条件下无限 制的传代下去，这种传代细胞称为细胞系。
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二、动物细胞培养条件
1、无菌、无毒的环境 （添加一定量的抗生素，定期更换培养液）
2、营养 （葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。） 3、温度和PH
36.5+（-）0.5度, 7.2-7.保4 证生细长胞增顺殖利的 4、气体环境：
⑴在动物细胞培养的过程中，当贴壁细胞分裂 生长到细胞表面 相互接触 时，细胞会停止分
裂增殖，这种现象称为细胞的 接触抑制 。此时，
瓶壁上形成的细胞层数是
单层，要使贴壁的细
胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶
是
胰蛋白酶。
⑵随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停 止，进而出现 衰老甚至死亡的现象；但极少数
原理是细胞增殖 （有丝分裂） 。
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动物细胞生长特点：
细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，
称为细胞贴壁。 要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、
易于贴附。 细胞的接触抑制：
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细 胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞 的接触抑制。
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动物细胞生长特性
1、说出动物细胞培养的过程？ 2、简述动物细胞培养的条件？ 3、说出动物细胞培养的应用？ 4、对比说出动物细胞培养与植物组织培养 原理、条件、结果、培养目的
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巩固练习：
1.用动、植物成体的体细胞进行离体培养，
下列叙述正确的是
C
A．都需用培养箱
B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行外界条件适 D．都可体现细胞的全能性宜，植物细
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愈伤组织 条件适宜 可以传代 培养不分
化。
4、细胞株的特点是
C
A．遗传物质没有改变，可以无限传代
B．遗传物质发生改变，不可无限传代
C．遗传物质没有改变，不可无限传代
D．遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以
无限传代
5、在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养
条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为:
2.2 动物细胞工程
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学习目标：
1、简述动物细胞培养的过程、条件及 应用 2、对比说出动物细胞培养与植物组织 培养原理、条件、结果、培养目的
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复习：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？
植物组织培养技术、 植物体细胞杂交技术
动物细胞工程常用的技术手段：
动物细胞培养技术、 动物细胞核移植技术、 动物细胞融合技术、 生产单克隆抗体技术
4、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什 么？
5、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或 组织做动物细胞培养材料？
6、简述动物细胞培精养品文的档 操作过程
动物细胞培 养过程：
原代培养
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传代培养
聚焦一、动物细胞培养过程
1、动物细胞培养的概念是什么？该技术 实施的原理是什么？
从动物机体中取出相关组织，将它分散成 单个细胞，然后在适宜的培养基中，让这些细胞 生长和繁殖。
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四、植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养
原理
细胞的全能性 细胞增殖
培养基状态 固体培养基
液体培养基
培养基特有 蔗糖 植物激素 葡萄糖 动物血清 成分
培养结果 植物体
细胞株、细胞系
培养目的 快速繁殖、培育 获得细胞或细胞分
无病毒植株
泌蛋白
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你达到学习目标了吗？
细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发
生改变而变成
不死性细胞，该种细胞的黏
着性
降低 ，细胞膜表面蛋白质（糖蛋白）
的量
减少。 精品文档
⑷检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最 好选用细胞分裂到 中期的细胞用显微镜进行观 察。 ⑸在细胞培养过程中，通常在 冷冻 条件下保存 细胞，因为在这种条件下，细胞中 酶 的活性降 低，细胞的 新陈代谢 速率降低。 ⑹给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生 了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作
（1）液体培养基 与植物培养基相比其特点是：
（2）含有动物血清
无机盐、蔗糖 、维生素、生 长调节质、植物激素精品文档三、动物细胞培养的应用
1、获得细胞产物，如蛋白质生物制品 －病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等
2、获得烧伤病人植皮所需的细胞 3、获得细胞用于检测有毒物质 4、为治疗及预防疾病提供理论依据。
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6、动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动
传代培养一般传至10代直至50
物的组织、器官
代就不能再分裂了，这时细胞
胰蛋白酶
核内遗传物质未发生变化，形
成的细胞群
单个细胞
传代培养过程中有个别细胞 传至50代以后，由于遗传物 质改变，失去控制，成为无
加培养液
细胞悬浮液
限增殖的不死的癌症细胞， 形成的细胞群
O2和CO2（95%空气和5% CO2 ）
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思考：动物血清的作用？ 主要是：提供有利于细胞生长增殖所需的 激素、生长因子或提供合成培养基所缺乏 的营养物质等。
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成分比较：
动物细胞培养液的主要成分： 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。
植物组织培养呢？ 动物体细胞大都生活 在液体的环境
• 定义：当原代培养的细胞生长停止，这 时如果要使细胞继续生长，就要及时用 胰蛋白酶等，使细胞从瓶壁上解离下来， 然后加入新的培养液，将细胞分离稀释， 并从原培养瓶内转接到新的培养瓶内， 这个过程称传代培养