十字花科蔬菜作物自交不亲和性测定
NaCl溶液克服萝卜自交不亲和性研究
NaCl溶液克服萝卜自交不亲和性研究作者：汪骞胡靖锋朱红戴永娟吴丽艳李石开和江明来源：《长江蔬菜·学术版》2011年第07期摘要：利用不同浓度的NaCl溶液对2个萝卜自交不亲和系进行自交不亲和性研究。
试验结果表明，NaCl溶液能克服萝卜自交不亲和性，但不同浓度处理之间差异显著。
其中3%NaCl 溶液处理后，2个材料的亲和指数分别为3.08和3.32，与其他浓度处理差异达到极其显著水平，说明3%NaCl溶液克服萝卜自交不亲和性效果最好。
关键词：萝卜；自交不亲和；NaCl自交不亲和是十字花科作物普遍存在的一种现象，在生产上具有一定的利用价值。
早在20世纪80年代，胡贷泽等[1]和安彩泰等[2]就利用化学方法来克服芸薹属作物自交不亲和，取得了一定的进展。
后人发现BA、电击授粉、铁毛刷授粉等破坏柱头结构的物理方法对克服白菜自交不亲和性也具有一定的作用[3，4]。
高俊杰[5]用花粉提取液涂抹大白菜自交不亲和系材料的柱头，发现其结实能力比3%NaCl喷花处理的自交不亲和系的结实能力好。
国外利用开花期株间授粉后维持高CO2浓度若干小时，来繁种自交不亲和系，但此方法对温室或大棚密封性要求高。
以上方法都存在费工费时、成本高等缺点，难以在实际生产中利用。
目前，萝卜常用自交不亲和系繁种一代杂交种，但对克服萝卜自交不亲和的研究相对较少，为此，以2个自交不亲和系萝卜为材料，在花期用不同浓度NaCl溶液喷洒，以期获得克服萝卜自交不亲和形效果最好的NaCl浓度，从而为萝卜自交不亲和系的利用提供帮助和奠定基础。
1 材料与方法1.1 试验材料试验材料为云南省农业科学院园艺作物研究所提供的2个自交不亲和系萝卜R10068和R10077。
1.2 试验处理试验共设8个处理，处理1：1％NaCl溶液；处理2：2％NaCl溶液；处理3：3％NaCl溶液；处理4：4％NaCl溶液；处理5：5％NaCl溶液；处理6：套袋自交；处理7：剥蕾授粉；处理8：清水对照（CK）。
园艺植物育种学形考作业及参考答案
园艺植物育种学作业1绪论，第1~3章（要求：第三周末以前完成）一、名词解释1.种质资源：种质资源又称遗传资源。
种质是指生物体亲代传递给子代的遗传物质，它往往存在于特定品种之中。
如古老的地方品种、新培育的推广品种、重要的遗传材料以及野生近缘植物，都属于种质资源的范围。
2.引种：把别的地区的动植物优良品种引入本地区，选择适于本地区条件的加以繁殖推广。
把外地的优良品种引入本地种植3.光周期现象：光周期现象：是指光照周期长短对植物生长发育的反应4.选择育种：利用的是现有品种在繁殖过程中的自然变异作为选择工作的原始材料杂交育种等是用现有品种先人工创造出变异，然后进行选择工作引种是以品种或杂交组合为单位进行比较选择选种首先是以个体为单位进行选择，然后进行系统群体间比较5.遗传力：遗传力又称遗传率，指遗传方差在总方差（表型方差）中所占的比值，可以作为杂种后代进行选择的一个指标。
遗传力分为广义遗传力和狭义遗传力。
数量性状受到环境因素的影响很大，那么表型的变异可能有遗传的因素，也有环境的因素，甚至还有环境和遗传相互作用的因素。
二、填空题1．根据群体的遗传组成不同，品种可分为自交系品种、群体品种、杂交种品种、多系品种和无性系品种。
2.育种目标是指作物通过遗传改良后要达到的目的。
育种目标总的分为生物学目标和经济学目标。
3．在相当长的时期内我国植物种资源研究工作重点仍将是“广泛收集、妥善保管、深入研究、积极创新、充分利用”。
4.根据生产实践经验，引种成功与否以引入品种表现的适应性指标、效益指标和繁殖能力作为评定引种成功的主要指标。
5.育种最基本、最重要的工作是从引种开始，其正确与否及水平高低直接影响育种进展速度的快慢和获得成果的大小。
三选择题1.观赏的花卉有时要求同一品种中有不同的花色组成（但比例可控），指的是品种的（b）。
A.特异性B.一致性C.稳定性D.优良性2.利用绝对无融合生殖所产生的种子进行繁殖的群体是（d）品种。
甘蓝利用自交不亲和系制种的技术流程
甘蓝利用自交不亲和系制种的技术流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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四个不结球白菜自交不亲和S单元型分子鉴定
四个不结球白菜自交不亲和S单元型分子鉴定作者：李霞，胡侦华，周国林，等来源：《湖北农业科学》 2015年第16期李霞，胡侦华，周国林，汪爱华（武汉市蔬菜科学研究所武汉蔬菜展示中心，４３６４００）摘要：利用已报道的ＳＲＫ及ＳＬＧ基因序列保守区设计的特异性引物，通过ＰＣＲ扩增和克隆测序，结合生物信息学分析方法对４份国外引进的不结球白菜（Ｂｒａｓｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｓｓｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＭａｋｉｎｏ）自交不亲和材料的Ｓ单元型进行分子鉴定。
结果表明，不亲和材料Ａ１包含的Ｓ位点基因序列与甘蓝（Ｂ．ｏｌｅｒａｃｅａＬ．ｖａｒ．ｃａｐｉｔａｔａＬ．）ＳＬＧ－３１的相似度为９８％（Ｅ值是０）；不亲和材料Ａ２、Ａ３包含ＣｌａｓｓＩ类及ＣｌａｓｓⅡ类２种Ｓ单元型，Ｓ位点处于杂合状态。
不亲和材料Ａ４包含的Ｓ位点基因序列与青花菜（Ｂ．ｏｌｅｒａｃｅａＬ．ｖａｒ．ｉｔａｌｉｃａＰｌｅｎｃｋ）单倍型ＢＯＩ１ＳＲＫ蛋白基因具有９８％的序列相似度，序列覆盖度达９９％。
关键词：不结球白菜（Ｂｒａｓｓｉｃａｃａｍｐｅｓｔｒｉｓｓｓｐ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓＭａｋｉｎｏ）；自交不亲和；Ｓ单元型；分子鉴定中图分类号：Ｓ６３４．３；Ｑ３２１＋．７；Ｑ５０３文献标识码：Ａ文章编号：０４３９－８１１４（２０１５）１６－３９４８－０４ＤＯＩ：１０．１４０８８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ０４３９－８１１４．２０１５．１６．０３０收稿日期：２０１４－１２－１６基金项目：国家大宗蔬菜产业技术体系项目（ＣＡＲＳ－２５－３０）；武汉市规模设施蔬菜关键技术集成与示范项目（２０１３０２１７０２０１１０５８４）作者简介：李霞（１９８１－），女，河南获嘉人，博士，研究方向为小白菜分子育种，（电话）１３２９７０１０３１７（电子信箱）ｌｉｘｉａ＿ｎａｐｕｓ＠１６３．ｃｏｍ；通信作者，汪爱华，女，高级农艺师，博士，从事蔬菜育种学与生物技术研究，（电子信箱）ｗａｎｇａｉｈｕａｌｔ＠１６３．ｃｏｍ。
《园艺植物育种学》形考2参考答案
《园艺植物育种学》形考2参考答案一、名词解释（30分）每题6分二、填空题（24分）每空3分请用给出的关键词填空。
临界剂量十字花科杂交优势明显顶交法空间隔离轮配法异花授粉致死剂量1．隔离的目的是防止外源花粉的混入，隔离的方法有很多种, 大致上可分为空间隔离、器械隔离和时间隔离三大类。
2．新育成的自交系、不育系等测定一般配合力时多用顶交法，一般配合力高的自交系进行特殊配合力的测定时常用轮配法。
3．优良恢复系具备的特点是品质优、配合力好、杂交优势明显。
4．自交不亲和性是植物在长期进化过程中形成的有利于异花授粉，从而保持高度杂合性的一种生殖机制。
在植物育种中，特别是在十字花科蔬菜作物中被广泛应用。
5．辐射育种中，当剂量增加到一定限度时，材料全部死亡，这时的剂量叫致死剂量。
适宜剂量一般选“半致死剂量”或“致死剂量”。
填空题(24 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)三、单项选择题（20分）每题5分1.杂交第一代及其以后世代与原始亲本之一再进行杂交的育种方式称为（B）。
单选题(5 分) A.单交B.回交 C.添加杂交D.合成杂交2.中国月季与欧洲蔷薇杂交，培育出现代杂交品种香水月季利用的亲本选配原则是( C )。
单选题(5 分)A.性状互补原则B.适应性原则C.遗传差异原则D.高配合力原则3．由于生理上的不协调而不能形成生殖器官，或在减数分裂中不能正常联会，不能产生正常配子而不能正常结籽的现象，是指远缘杂交中存在的( C )。
单选题(5 分)A.杂交不亲和性B.杂交不育性C.杂交不稔性D.杂种后代遗传变异问题4．杂种利用是利用了基因效应中的（D）。
单选题(5 分)A.加性效应B.显性效应C.互补效应D.三种基因效应均利用四、问答题（26分）请用给出的关键词填空。
目标性状及其构成优良性状多，不良性状少地方品种珍贵性状数量性状遗传力强、一般配合力高精选亲本杂交亲本选择的原则是什么？答：（1）明确亲本的目标性状及其构成（2）从大量种质资源中精选亲本（3）尽量选用优良性状多，不良性状少的种质材料（4）选用优良性状遗传力强、一般配合力高的材料（5）重视选用地方品种（6）优先考虑数量性状（7）优先考虑具稀有珍贵的材料填空题(14 分) (请按题目中的空缺顺序依次填写答案)请用给出的关键词填空。
自交亲和性的测定和自交不亲和系的筛选
自交亲和性的测定和自交不亲和系的筛选实验对象：小白菜选择前茬以小麦、玉米、豆类及瓜类为宜，避免与其他十字花科的植物连作。
播种时间成株采种：一般在9月下旬至10上旬播种。
小白菜的苗龄以35~40天为宜。
于合适天数后以50~60厘米×30~50厘米定植于田中。
小株采种：长江流域可于2月上旬至3月上旬播种，通过春化后，在高温长日照的条件下，可抽薹、开花、结籽。
播种方式：直播或育苗移栽田间管理（1）肥水管理1)苗期：出苗后及时查苗，及时进行补苗或补播。
苗齐后尽早中耕、松土。
幼苗长至4~5片叶时进行定苗。
2)抽薹期：定植浇水，及时中耕松土，进行蹲苗至植株开始抽薹现蕾。
开花后加强肥水管理。
从始花至盛花期浇水两次。
浇两次水后应及时进行叶面施肥，用0.3%磷酸二氢钾或磷酸二铵1~2次。
3)结荚期：根据土壤商情及植株长势确定浇水量。
（2）中耕、松土、除草浇水后通过中耕松土，消除土壤板结，消灭田间草害，提高土壤的通气性和温度，促进根系发育和叶片生长，增强根系吸水、吸肥能力和抗倒伏能力。
（3）整枝摘心在主花茎10~15厘米时进行。
授粉结束后摘除各侧枝顶端花枝。
种子采收收割：待全株四分之五的角果呈黄色时收获，掌握“三割、三不割”的原则，即带露水割，阴天割，早晚割；露水干后中午不割，下雨不割，青棵不割。
脱粒：在晒场上堆放后熟3~4天后进行脱粒。
晾晒：种子脱粒、扬净后及时晾晒，需在篷布上进行，应与其他品种保持较大的距离，同时注意防止雨淋和暴晒，隔1~2小时翻动一次。
不结球白菜自交不亲和相关基因及转录组分析
不结球白菜自交不亲和相关基因及转录组分析不结球白菜(Brassica campestris ssp.chinensis Makino),原产中国,是一种重要的十字花科蔬菜。
自交不亲和性是显花植物在长期的进化过程中形成的一种避免自交,促进异交的遗传机制。
利用自交不亲和系进行杂种生产是不结球白菜等十字花科蔬菜作物杂种优势利用的主要方式。
同时,自交不亲和系统还是研究植物细胞间信号转导的理想模型。
但自交不亲和机理在很大程度上仍然是未知的。
课题组前期鉴定了一个可能在不结球白菜自交不亲和反应中发挥重要作用的蛋白:衰老相关半胱氨酸蛋白酶(senescence-associated cysteine protease,SCP),命名为 BcSCP,本研究通过构建BcSCP的柱头特异表达载体,研究了该基因对花粉萌发的影响;对不结球白菜授粉前及授粉后的柱头进行了转录组分析;对不结球白菜自交不亲和性研究相关内参基因进行了筛选;利用大白菜基因组信息,对BrPUB基因家族进行了分析。
主要研究结果如下:1.不结球白菜SCP基因的功能分析利用柱头特异表达的SLR1(S-locus related-1)启动子构建了 SCP基因的柱头特异表达载体,酶切鉴定结果表明SCP载体构建成功,采用电转法转入农杆菌GV3101菌株,通过花序侵染法将载体进行拟南芥遗传转化,通过基因组PCR鉴定说明构建的表达载体已成功插入拟南芥基因组中。
激光共聚焦显微镜观察柱头发现绿色荧光蛋白在柱头有强烈的表达,T1代转基因拟南芥荧光显微分析显示在柱头过量表达BcSCP对花粉管萌发和延伸无明显影响。
2.不结球白菜亲和/不亲和授粉早期转录组分析为了鉴定不结球白菜花粉-柱头相互作用的关键基因,本研究以不结球白菜’矮脚黄,自交亲和系及自交不亲和系为材料,对亲和授粉和不亲和授粉10min后的柱头进行了测序,并将测序结果比对到大白菜基因组上。
平均每个样品获得65.42百万个原始标签序列,平均72.5%的序列能够比对到白菜基因组。
园艺蔬菜育种学十字花科实习报告
实习报告学院: 园艺学院课程: 园艺蔬菜作物育种学实验班级:学号:姓名:指导教师: 职称:实习时间2018年4月26日至2018年4月27日实习地点南京农业大学江浦园艺站2018 年5月20日南京农业大学教务处制１实习报告4月26号上午我们在负责人老师的带领下赴江浦基地进行课程实践教学活动，此次实习我们主要学习十字花科园艺作物套袋、自交、杂交等技术。
十字花科作物是天然异花授粉作物，这类园艺作物在花期用同一植株花粉授粉结籽很少，这种特性称为“自交不亲和性”；通过一定的方法，把具有自交不亲和性的系统选育成一个系统，也就是在同一个系统内，各植株间授粉也结籽很少，而系统间交配则能正常结实，这样的系统叫做自交不亲和系。
十字花科除花期授粉很少结籽的不亲和性外，还有蕾期自交能结籽的亲和性，因此用蕾期授粉的方法可以使自交不亲和系保存下来。
4.26上午老师先教我们如何套袋 。
本次的实验材料是萝卜，首先就是要选株，在具有优良特征的品种或优良组合中选择具有本品种特征的、生长健壮无病害的优良单株，每株选健壮枝条4枝（尽可能选主枝和第一、二侧枝），枝条选好后，用镊子把本枝上已开的花和已结的荚去掉，只留下花蕾。
每株上有两个枝条摘去顶心留花蕾20个用作自交不亲和指数；另两枝也摘顶心，最少留15个花蕾作蕾期授粉保存该株种子，然后将所选用枝条套袋。
袋子选用隔离硫酸纸袋，用大头针别住袋口，防止昆虫进入，套袋后立即将纸牌挂于所选花枝下方。
牌子上写明品种编号、日期、姓名。
（17-5936 T 、17-5885 T 、17-659 T 、17-659 T 、17-659 T 、17-6022 T 、17-6020 T 、17-5992 T 、17-5995 T 、17-5989 T ）4.26下午学习萝卜同一品种之间自交（蕾期授粉）。
由于十字花科园艺作物具有“自交不亲和性”，往往自然自交结籽率很低，蕾期柱头已有受粉能力，故可采用蕾期授粉获得自交种子。
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四、注意事项
1．在选授粉花枝时，应注意不要选第一花枝， 因此时温度较低，结籽效果不好。
2．在做花期授粉、蕾期授粉时一定要将原有开 过的花摘掉，再套袋。
3．蕾期授粉应注意不要碰伤柱头。
五、作业
就十字花科蔬菜作物自交不亲和性的测定写一 份实训报告。
珍贵的雄性不育材
再见！
花椰菜盛花期植株
十字花科蔬菜作物 自交不亲和性的测定
徐真 2010年4月
《蔬菜种子生产技术》课程组
－、实训目的
目的：了解测定甘蓝、白菜自交不亲和性的方 法和意义，掌握杂交授粉技术。
要求：完成十字花科蔬菜花期授粉和蕾期授粉 操作过程。
二、材料与用具
甘蓝、白菜采种母株、温箱、镊子、授粉盒、 纸牌、细铁丝、硫酸纸、脱脂棉、无水酒精、 95％酒精等。
亲和指数＝结实粒数/授粉总花数
选开成喇叭口状的花朵取花粉
毛笔涂抹
取花药涂抹
（五）蕾期授粉
将选作蕾期授粉的两个花枝上的纸袋去掉，用镊子将开花前 2～4 d的花蕾挑开，使柱头裸露，但不要伤着柱头，然后将预 先收集的本株花粉和同系内混合花粉或袋内新开花花粉分别授 在两枝花蕾的柱头上，然后套袋挂牌，注明授粉株系号、授粉 日期、花数及人名，按此法每隔两天作一次，直到袋内的蕾全 部做完。
三、实训内容与方法
（一）株选 （二）选花枝 （三）整理花枝 （四）花期授粉 （五）蕾期授粉
（一）株选
在具有优良பைடு நூலகம்征的品种或优良组合中选择具有 本品种特征的、生长健壮无病害的优良单株， 作为授粉株。
（二）选花枝
在每株中央花柱上，选 第一次分枝4枝。
（三）整理花枝
将选好的花枝上已开的花全部去掉， 同时摘心，留中部一段花蕾20朵左 右，选两个花枝作测定不亲和性指 数用（其中一枝作花期自交，另一 枝作花期混交），另两枝作蕾期授 粉保存该株种子用（其中一枝作蕾 期自交，另一枝作蕾期混交），然 后将选用的花枝套袋。
全株花坐荚后去袋，种子成熟后分别采种，计算蕾期授粉结实 率，并保存好种子。
蕾期授粉结实率（％）＝（结实总粒
数/授粉总花数）x 1 00%
选择花蕾
拨开花蕾或去掉花蕾上部1/3。
（同花期授粉）
挂牌标记
套袋隔离
自交完毕！
一个好的自交不亲和系，要求花期授粉结 实率低，亲和指数小，而蕾期授粉结实率高， 亲和指数，白菜要求小于“2”；甘蓝要求小 于“1”。
选择花枝，摘心。
摘除下部已开放花朵
套袋隔离
（四）花期授粉
套袋后1～2 d，留作亲和指数测定的花枝已有3～5朵开放时， 去袋，取当天的同一株花粉和同系内异株混合花粉（10株左右） 分别授在两枝盛开花的柱头上，挂牌注明花期自交和花期混交 的日期、系号、授粉人名、授粉花数，并立即套袋，按照此法 每天或隔天授粉一次。 袋内花全部授粉完毕，坐荚后立即把袋 去掉，荚内种子膨大后即可计算亲和指数。