微流控芯片及分离多种细胞的系统的制作流程
微流控芯片加工

微流控芯片加工微流控芯片加工是一种非常重要的制造技术,在各种科学和工程领域得到广泛应用。
微流控芯片可以实现对微小尺度流体的精确操控和控制,可以用于生物医学、化学分析、环境监测、食品安全等领域的研究和应用。
微流控芯片加工的主要步骤包括:设计、制作光刻掩膜、制作芯片模具、注塑成型、表面处理、封装等。
首先是设计,根据所需的功能和性能要求,设计出微流控芯片的结构和流道布局。
然后,利用计算机辅助设计软件进行图形设计,并生成光刻掩膜。
接下来,使用光刻技术将图形模式转移到光刻胶层上,形成光刻图案。
然后,将光刻胶层通过显影、蚀刻等工艺步骤进行处理,形成芯片的流道结构。
接着,制作芯片模具,根据光刻图案制作出模具,用于后续的注塑成型。
注塑成型是将流道结构通过注塑机注塑到聚合物基片上,形成芯片的关键步骤。
注塑成型完成后,还需要进行表面处理,提高芯片的密封性和抗污染能力。
最后,将制作好的芯片进行封装,保护芯片,以便于后续的操作和应用。
微流控芯片加工的关键技术包括:光刻技术、注塑成型技术、表面处理技术和封装技术等。
光刻技术是微流控芯片加工的基础,通过控制光的传播和显影过程,实现图形的精确转移。
注塑成型技术是微流控芯片加工的核心工艺,通过注塑机将流道结构注入到聚合物基片中,形成芯片的流道结构。
表面处理技术是为了提高芯片的性能和使用寿命,如提高芯片的密封性和抗污染能力。
封装技术是将制作好的芯片进行封装,保护芯片并方便后续的操作和应用。
微流控芯片加工的优点是可以实现对微小尺度流体的精确操控和控制,并结合各种检测和分析技术,实现对生物和化学过程的研究和应用。
与传统的实验室技术相比,微流控芯片加工具有体积小、成本低、效率高、灵敏度高等优势。
微流控芯片加工在生物医学、化学分析、环境监测、食品安全等领域得到了广泛应用,为这些领域的研究和应用提供了重要的技术支持。
总之,微流控芯片加工是一种重要的制造技术,通过光刻技术、注塑成型技术、表面处理技术和封装技术等,可以制造出具有精确操控和控制流体能力的微流控芯片。
数字微流控制芯片制备

数字微流控制芯片制备工艺
数字微流控制芯片制备工艺主要包括几个步骤:
1. 芯片布局设计:根据功能要求,对微流控芯片的电路进行布局设计,安排各元件位置,并确定所需元件之间的连接方式。
2. 芯片封装:将电路布局好的芯片封装在一个固定的基板上,其中可以是有限的金属引线或者无限的平面引线。
3. 制版:利用光刻技术将芯片上的电路布局转换为实际印制电路板上的二维图形,在基板上制作出一个可以用来焊接元件的板材。
4. 电镀:将制版后的基板浸泡在电镀槽内,使基板表面均匀覆盖金属铜,以便进行焊接。
5. 焊接:将电路元件焊接在基板上,检查焊接情况,确保焊接质量。
6. 测试:通过测试机测试芯片的功能及性能,确保芯片的正常工作。
微型流控芯片的设计与制备

微型流控芯片的设计与制备随着微电子技术的不断发展,微型流控芯片的设计与制备已逐渐成为研究的热点之一。
微型流控是一种将微米级管道和微米级孔隙纳米级材料结合起来的技术。
此技术可以在极小的空间内实现多种分子分离、分析、反应和传输。
微型流控芯片是微流体芯片的一种,以微米级空间为基本单位,可以结合微制造工艺,制成实用的微型生物芯片。
本文将探讨微型流控芯片的设计与制备方法。
一、微型流控芯片的设计微型流控芯片的设计与制备需要考虑多种因素,很多设计都是结合具体实验进行的。
但是,仍然有一些基本原则可以参考。
首先,需要确定微流控芯片的材料。
常见的有玻璃和硅基材料。
硅基材料可以方便地使用微制造工艺。
而玻璃材料可以更好地避免蒸发和漏失。
其次,需要确定微流控芯片的体积。
由于微型流控芯片的体积通常很小,所以需要选择合适的微米级管道和微米级孔隙。
最后,确定微流控芯片的结构和流动设计。
这里需要考虑每种设计对通量、稳定性和容易操作的影响。
二、微型流控芯片的制备微型流控芯片的制备通常需要通过微制造技术来实现,包括光刻、离子注入、蚀刻等步骤。
其中,最重要的是微米级转移工艺。
该工艺将芯片设计的图形转移到硅基或玻璃基板上。
这个过程需要利用光刻阴影模板。
首先,将阴影模板放在用来制作芯片的基板上,待银化之后,就能够形成一个正好与模板形状对应的图形。
最终,通过蚀刻过程,芯片结构得以形成。
除了基本的微制造工艺,微型流控芯片制备过程中还需要考虑控制芯片表面的化学处理和表面粗糙度。
常见的处理方法包括离子注入、热氧化和化学沉积等。
三、微型流控芯片在科研中的应用微型流控芯片在生命科学、医药和环境分析等领域应用广泛。
微型流控芯片的制备技术和高效分离性能能够实现全自动化和高效分析。
通过微型流控芯片,可以实现核酸自动分离、细胞分离、蛋白质分离和检测、药物筛选、食品安全检测和环境污染监测等。
比如,可利用微型流控芯片进行DNA修饰、荧光酶联免疫分析和药物筛选等实验。
微流控芯片设计

微流控芯片设计微流控芯片是一种基于微纳米技术的芯片,利用微小通道结构对流体进行控制和操纵,广泛应用于生物医学、微流体研究和实验室诊断等领域。
微流控芯片设计是指根据应用需求和研究目的,设计和制造微流控芯片的过程。
本文将介绍微流控芯片设计的一般步骤和相关技术。
微流控芯片设计的步骤主要包括需求分析、流体模拟、通道结构设计、流体控制设计和芯片制造等。
在需求分析阶段,首先需要明确芯片的应用目的和功能要求。
比如,如果是用于细胞分析和操纵,需要设计相应的通道结构和流体控制系统。
同时也需要确定芯片的尺寸和材料等基本参数,这将直接影响到后续的流体模拟和通道设计。
在流体模拟阶段,利用计算机辅助工具对芯片中的流体行为进行模拟和分析。
主要包括流体流动、混合、携带和分离等流体行为。
通过模拟可以得到各种参数的数值结果,从而优化芯片的设计和流体控制方案。
通道结构设计是微流控芯片设计的核心环节。
通道的设计要考虑流体的流动速度、扩散性能、可控精度和稳定性等因素。
通道的形状、尺寸和布局等都需要进行精确设计。
有各种通道结构可供选择,如直线通道、曲线通道和分叉通道等。
流体控制设计是指对流体在芯片中进行精确控制和操纵。
常用的流体控制方法有电泳、压力驱动、电极仿真和阀门控制等。
具体的方法选择要根据应用需求和实验要求来确定。
流体控制系统的设计需要考虑实验的复杂性和可操作性。
芯片制造阶段是将设计好的微流控芯片制作出来。
常用的制造方法有光刻、微流控芯片制作和流体连接等。
其中光刻是将设计好的通道结构图案转移到芯片上。
微流控芯片制作是将光刻得到的芯片玻璃芯片和流道结构与PDMS复合,从而形成最终的芯片。
流体连接是将芯片与其他设备、泵和控制系统连接起来,以便进行实验和操作。
综上所述,微流控芯片设计是一个复杂的过程,需要多学科的知识和专业的技术。
通过合理的需求分析、流体模拟、通道结构设计、流体控制设计和芯片制造等步骤,可以设计出性能优良的微流控芯片,应用于生物医学、微流体研究和实验室诊断等领域。
微流控芯片工艺流程

微流控芯片工艺流程
一、设计绘制版图
二、光刻掩模版制作
掩模板就是将上面设计好的特定几何图形通过一定的方法以一定的间距和布局做在基板上,制作各种功能图形并精确定位。
一般使用的方法:
1、接触式曝光机实现同比例的图形转移
2、Stepper曝光机台转移图形与版图尺寸实际比例一般是4:1或者5:1,实现将版图图形缩小4~5倍之后投射于目的片上。
3、电子束直写的技术实现表面nm图形的转移,借助掩模版对光刻胶的压力、同时辅助紫外曝光,最终实现纳米级图形的转移。
4、通过激光加工或者腐蚀的方式,实现表面镂空的图形设计
三、光刻、刻蚀
四、倒模
五、键合
回答完毕。
微流控生物芯片制备

微流控生物芯片制备
微流控生物芯片是一种利用微流控技术制备的生物分子杂凑检测芯片,它可以用于迅速、高效地同时检测众多分子物质,如蛋白质、核酸和抗原。
生物芯片的发展在整个生物领域已经发挥了非常重要的作用,特别是在快速识别药物研究和临床诊断领域。
本文简要介绍了微流控生物芯片的制备原理和工艺步骤。
首先,微流控生物芯片是由特殊微流控机构组成的,它包括一个可控制的流体阀门、一个无负载涡轮和一个流体分配器。
其次,在制备微流控生物芯片之前,需要先准备芯片上的生物材料,如多重抗原和检测因子,并将其分析后,将其涂覆在芯片表面,以形成特异性生物检测系统。
接下来,不同的生物物质会通过芯片上的流体阀门,被引入和包合到一个流体液滴里。
最后,这个流体液滴将放入微流控机构的中央,形成微流控生物芯片。
通过上述步骤,我们可以有效地制备出微流控生物芯片。
微流控生物芯片的优点在于快速、简便,而且可以同时检测并结果多种分子物质。
因此,它可以广泛应用于药物研发、抗原抗体检测、转基因食品检测等领域,发挥重要作用。
微纳米流控芯片的研究与制备
微纳米流控芯片的研究与制备随着生物医学和化学领域的不断发展,微纳米技术被越来越多地应用于这些领域。
在微纳米技术中,微纳米流控芯片是一种特殊的芯片,它可以在微米和纳米级别精确操纵生物和化学物质,因此成为了生物医学和化学分析等各个领域的重要工具。
本文将介绍微纳米流控芯片的基本原理和制备流程,同时探讨其在生物医学和化学分析领域的应用。
第一章基本原理微纳米流控芯片是一种基于微流控技术的芯片。
微流控技术是一种将流体控制在微米和纳米尺度下的技术,它可以准确控制微流体中的物质。
微纳米流控芯片就是在这种技术的基础上制成的一种集成化芯片,它可以在微米和纳米尺度下实现流体、化学物质和生物分子的分离和控制,从而实现不同领域的应用。
微纳米流控芯片的基本原理是通过微流控芯片的微米通道、微泵、微阀和微波导等器件对微流体进行控制。
其中,微泵和微阀控制液体的流动方向和速度,微波导用于检测和操纵流体中的生物分子或化学物质。
在微纳米流控芯片中,通过对这些微器件的组合使用,可以实现复杂的流体控制操作,实现以前难以想象的分析效果。
第二章制备流程微纳米流控芯片的制备流程主要分为以下几个步骤:1. 设计和制作微流控芯片的模板。
这一步骤中需要根据芯片的实际应用需求,设计出芯片的通道和器件位置等参数。
2. 制备微流控芯片的模板。
制备方法通常采用光刻技术,即将模板图案转移到光刻胶中,再通过化学反应将模板转移到芯片表面。
3. 制备微纳米流控芯片。
这一步主要是将芯片进行加工、清洗等工艺处理,最终得到微纳米流控芯片。
4. 表面修饰。
这一步骤中,可以通过在芯片表面修饰特定化合物或生物分子,以用于生物分析和检测等领域。
第三章应用领域微纳米流控芯片的应用领域非常广泛,其中包括化学分析、生物分析、环境检测等多个领域。
下面将分别介绍微纳米流控芯片在生物医学和化学分析领域的应用。
1. 生物医学领域微纳米流控芯片在生物医学领域中应用最为广泛。
通过这种芯片,可以实现非常精确的生物分子检测和分析。
微流控芯片制备工艺研究及应用
微流控芯片制备工艺研究及应用一、前言微流控芯片是近年来发展较快的一种微流体控制技术,具有样品用量小、反应时间短、操作方便等优点,被广泛应用于化学分析、生物检测、药物筛选等领域。
本文旨在介绍微流控芯片的制备工艺及其应用。
二、微流控芯片制备工艺微流控芯片的制备过程可以分为两个环节,即模具制备和芯片加工。
1. 模具制备微流控芯片制备的第一步就是模具制备。
在制备模具时需要选择合适的材料,通常使用的是光刻胶、光刻硅及深刻蚀金属材料。
然后,采用光刻技术,通过曝光、显影等步骤,将芯片的设计图案转移到模具上,最后利用电极化学加工等工艺,制成微流控芯片的模具。
2. 芯片加工模具制备完成后,就需要进行芯片加工。
首先,需要选取合适的材料,如玻璃、硅片等。
然后,通过热压、蒸镀、离子注入等工艺,将模具上的结构转移到芯片上,形成芯片的微结构。
最后,对芯片进行清洗、封装等工艺,制成完整的微流控芯片。
三、微流控芯片应用微流控芯片的应用领域十分广泛,这里仅介绍其中几个重要的应用领域。
1. 化学分析微流控芯片可以实现对微小样品的检测和分析,对于化学分析领域来说具有极大的应用前景。
目前已有许多研究团队将微流控芯片应用于毒品检测、水质监测、重金属检测等领域,取得了良好的效果。
2. 生物检测微流控芯片与生物学的结合也是十分密切的。
利用微流控芯片可以很方便地进行基因检测、蛋白质检测、细胞分析等生物实验。
与传统实验相比,微流控芯片具有实验时间短、反应速度快等优点,而且不易受外界环境干扰。
3. 药物筛选微流控芯片在药物筛选方面也有着广泛的应用。
微流控芯片拥有微型反应器、组织模型等优势,可以快速筛选出特定药物,具有很高的筛选效率和准确度。
这对于新药研发具有极大的意义。
四、总结微流控芯片技术带来了分析、检测、筛选等领域的革新,具有广泛的应用前景。
在制备过程中需要注意模具制备的工艺以及材料选择问题,芯片的加工工艺也有多种选择。
在应用方面,微流控芯片可以广泛应用于化学分析、生物检测、药物筛选等领域,有着十分重要的意义。
微流控芯片制作方法详解
微流控芯片制作方法详解微流控芯片(Microfluidic chip)是一种集成了多功能微型流体通道和微型微处理器的微小化芯片,可以实现精确的流体控制和微型反应。
微流控技术在生物医学、分析化学、环境监测等领域具有广泛的应用前景。
下面将详细介绍微流控芯片的制作方法。
1.芯片设计2.光刻制作主模板微流控芯片的制作是通过光刻技术来实现的。
首先制作的是一个主模板,用于制作通道的模具。
首先在一块硅片上涂覆一层光刻胶(photoresist),然后将芯片设计中的模板图案通过光刻机进行曝光,曝光之后使用显影工艺将光刻胶进行开发,形成曝光和未曝光区域。
最后使用氧化工艺将未曝光区域的光刻胶进行去除,得到主模板。
3.制作模具将主模板受控地与PDMS(聚二甲基硅氧烷)材料接触,使PDMS材料在主模板上复制出具有相同形状的微通道结构。
首先将PDMS材料A和B按照一定的比例混合均匀,然后倒入主模板的孔洞中。
将其放入真空浸泡块中,将PDMS材料中的气泡排出。
待PDMS材料固化后,从主模板上将PDMS模具剥离下来。
4.封闭模具将PDMS模具与玻璃片或另一块PDMS片接触,形成一层封闭的通道结构。
首先将PDMS模具和底板的表面涂上适量的粘结剂,然后将其放在一起,并使用真空吸附使其粘合在一起。
将其放在温烤箱中进行烘烤,以使PDMS材料与玻璃片或另一块PDMS片粘在一起。
5.接口制作为了使微流控芯片与外部仪器连接,需要在芯片上制作出接口。
接口一般包括进样口和出样口。
可以通过钻孔或者切割技术在芯片上制作出孔洞,以便于方便连接。
6.清洗制作完微流控芯片后,需要进行清洗处理。
首先将芯片放入去离子水中,去除表面的灰尘和杂质,然后将芯片放在洗涤液中进行超声波清洗,以去除残留的光刻胶和其他污染物。
7.功能化修饰为了提高芯片的稳定性和流体控制的准确性,可以对芯片进行功能化修饰。
一种常用的方法是将芯片表面进行表面处理,使其具有特定的物理化学性质,如疏水性或亲水性等。
微流控细胞芯片
微流控细胞芯片微流控细胞芯片是一种微型化人工器官,可以模拟人体微环境下的细胞相互作用,为疾病诊断、治疗和药物筛选等提供了新的途径。
它是由微制造技术、细胞生物学、材料科学和力学等学科交叉融合而成,具有高通量、高精度和可重复性等优点。
本文将从微流控细胞芯片的制备、工作原理和应用等方面进行详细介绍。
微流控细胞芯片的制备是一个复杂的工程,需要综合考虑器件设计、材料选择、制造工艺等多个因素,并将其有机地结合起来。
其主要步骤包括:器件设计、光刻制作、微流控芯片制作与包封、表面处理和细胞培养等。
器件设计是微流控细胞芯片制备的第一步,其主要任务是确定器件结构、截面尺寸等参数,以满足特定应用的要求。
例如,对于模拟微血管环境的微流控芯片,设计需要考虑管道直径、间距和流速等参数,以及对于培养细胞所需的媒体输送、通气和温控等条件。
光刻制作是微流控芯片的关键工艺之一,其作用是在平板玻璃或聚合物薄膜上生成所需的微米级结构。
光刻是一种化学刻蚀技术,在照射光的作用下,先在光阻层上形成图案,再用腐蚀液或等离子体等手段,将光阻层遮蔽的部分去除,形成所需的微米结构。
该技术可精确控制器件的形状和尺寸,且制作效率高。
微流控芯片制作与包封是将光刻制作好的微米结构拼接成三维结构,并通过微加工或粘接等手段将其封闭,使得芯片内部形成完整的微流系统。
这一步骤要求工艺精密,制作效率和产品质量必须同时考虑。
表面处理是微流控芯片制备的关键环节之一,其目的是使芯片通道表面能够与细胞相互作用。
常用的表面处理方法包括光化学接枝、聚合物修饰、原子层沉积等。
其中,最基本的表面处理方法是用生物分子修饰通道表面,如将胶原蛋白、纤维蛋白等分子修饰到芯片表面,以便于细胞黏附生长。
细胞培养是微流控芯片制备的最后一步,是将准备好的芯片放入培养皿中,添加营养液体和细胞,使得细胞能够在芯片内生长和繁殖。
细胞培养需要注意细胞的选择、密度和生长周期等因素,以保证芯片内细胞生长的稳定性和一致性。
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本技术新型提供一种微流控芯片,包括基片和盖片,基片表面一端依次设有鞘液入口及细胞悬浮液入口,基片表面中部相对设有两个连续相油入口,基片表面另一端设有五个液滴出口,鞘液入口及细胞悬浮液入口上均连接有微通道,两个连续相油入口连接的微通道与并联通道形成十字交叉,从十字交叉处连接出的微通道呈辐射状分成五条分离通道分别与五个液滴出口相连接,十字交叉端与五条分离通道的汇聚端之间连接的微通道上设有液滴观察区;五条分离通道的汇聚端的两侧相对设置有两个分离微电极。
本技术新型还提供一种使用所述微流控芯片的分离多种细胞的系统。
本技术新型能提高细胞分选效率和降低成本。
权利要求书1.一种微流控芯片,包括基片和盖片,其特征在于,基片表面一端依次设有鞘液入口(11)及细胞悬浮液入口(12),基片表面中部相对设有两个连续相油入口(13),基片表面另一端设有五个液滴出口(14),鞘液入口(11)及细胞悬浮液入口(12)上均连接有微通道(15),从鞘液入口(11)连接出的微通道(15)分成两条支路并联至细胞悬浮液入口(12)的微通道(15)的两侧,鞘液入口(11)的微通道(15)与细胞悬浮液入口(12)的微通道(15)合并形成并联通道(16),两个连续相油入口(13)连接的微通道(15)与并联通道(16)形成十字交叉,从十字交叉处连接出的微通道(15)呈辐射状分成五条分离通道(17)分别与五个液滴出口(14)相连接,十字交叉端与五条分离通道(17)的汇聚端之间连接的微通道(15)上设有液滴观察区(18),液滴观察区(18)的微通道(15)形成多通道结构;五条分离通道(17)的汇聚端的两侧相对设置有两个分离微电极(19),基片上设有微通道(15)的表面与盖片键合形成所述微流控芯片。
2.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述微通道(15)的宽度为80至380微米。
3.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述微通道(15)的深度为80至100微米。
4.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述基片采用PDMA、PDMS、COC、亚克力板或者PMMA,所述盖片采用玻璃、PDMS、PMMA或PC。
5.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述分离微电极(19)呈V形结构,V形结构的两个伸出端形成有电连接点。
6.一种分离多种细胞的系统,其特征在于,使用如权利要求1至5任一项所述的微流控芯片,该系统包括四个注射泵(3)、荧光检测器(4)、电脑(5)及可编程直流电源(6),四个注射泵(3)分别与鞘液入口(11)、细胞悬浮液入口(12)及两个连续相油入口(13)连接,以向对应入口注射对应液体,荧光检测器(4)及可编程直流电源(6)分别与电脑(5)电性连接,荧光检测器(4)用于采集液滴的荧光信号并传送给电脑(5),电脑(5)通过将对接收信号与设定的信号进行比对,判断液滴包裹的细胞的种类;可编程直流电源(6)与两个分离微电极(19)电性连接,可编程直流电源(6)针对五种细胞有五个不同的工作模式输出五种脉冲电压,以分离多种细胞;电脑(5)与每一注射泵(3)电性连接,电脑(5)设有预定程序以控制每一注射泵(3)的注射速度。
7.根据权利要求6所述的分离多种细胞的系统,其特征在于,所述荧光检测器(4)包括显微镜以及连接于显微镜上的CCD摄像头。
8.根据权利要求6所述的分离多种细胞的系统,其特征在于,每一液滴出口(14)连接有细胞收集器(7)。
9.根据权利要求6所述的分离多种细胞的系统,其特征在于,所述鞘液入口(11)、细胞悬浮液入口(12)、每一连续相油入口(13)及每一液滴出口(14)均连接有毛细玻璃管和微管。
技术说明书微流控芯片及分离多种细胞的系统技术领域本技术新型涉及微流控芯片及分离多种细胞的系统。
背景技术对于细胞分选和分析方面,流式细胞仪扮演了一个重要角色。
它是目前最为广泛利用的细胞识别及分离的手段,但是其价格昂贵。
激光光镊分选细胞的分离通量较低且系统平台搭建成本也十分高昂。
从单细胞层面研究细胞生物过程有着重要的意义,能够从本质上揭示癌症发病机制,理解小分化与组织发育原理,识别基因表达特性与细胞特征。
因此,有效且成本低廉从血液当中区分不同细胞已成为了一个热门的研究方向。
实用新型内容鉴于以上所述,本技术新型提供一种微流控芯片,以提高细胞分选效率和降低成本。
本技术新型涉及的技术解决方案:一种微流控芯片,包括基片和盖片,基片表面一端依次设有鞘液入口及细胞悬浮液入口,基片表面中部相对设有两个连续相油入口,基片表面另一端设有五个液滴出口,鞘液入口及细胞悬浮液入口上均连接有微通道,从鞘液入口连接出的微通道分成两条支路并联至细胞悬浮液入口的微通道的两侧,鞘液入口的微通道与细胞悬浮液入口的微通道合并形成并联通道,两个连续相油入口连接的微通道与并联通道形成十字交叉,从十字交叉处连接出的微通道呈辐射状分成五条分离通道分别与五个液滴出口相连接,十字交叉端与五条分离通道的汇聚端之间连接的微通道上设有液滴观察区,液滴观察区的微通道形成多通道结构;五条分离通道的汇聚端的两侧相对设置有两个分离微电极,基片上设有微通道的表面与盖片键合形成所述微流控芯片。
进一步地,所述微通道的宽度为80至380微米。
进一步地,所述微通道的深度为80至100微米。
进一步地,所述基片采用PDMA、PDMS、COC、亚克力板或者PMMA,所述盖片采用玻璃、PDMS、PMMA或PC。
进一步地,所述分离微电极呈V形结构,V形结构的两个伸出端形成有电连接点。
一种分离多种细胞的系统,使用所述的微流控芯片,该系统包括四个注射泵、荧光检测器、电脑及可编程直流电源,四个注射泵分别与鞘液入口、细胞悬浮液入口及两个连续相油入口连接,以向对应入口注射对应液体,荧光检测器及可编程直流电源分别与电脑电性连接,荧光检测器用于采集液滴的荧光信号并传送给电脑,电脑通过将对接收信号与设定的信号进行比对,判断液滴包裹的细胞的种类;可编程直流电源与两个分离微电极电性连接,可编程直流电源针对五种细胞有五个不同的工作模式输出五种脉冲电压,以分离多种细胞;电脑与每一注射泵电性连接,电脑设有预定程序以控制每一注射泵的注射速度。
进一步地,所述荧光检测器包括显微镜以及连接于显微镜上的CCD摄像头。
进一步地,每一液滴出口连接有细胞收集器。
进一步地,所述鞘液入口、细胞悬浮液入口、每一连续相油入口及每一液滴出口均连接有毛细玻璃管和微管。
本技术新型微流控芯片采用“十字交叉型”液滴生成结构实现细胞的包裹并利用鞘液聚焦的方法使细胞有序的排列,从而提高单颗包裹的成功率;此外,本技术新型分离多种细胞的系统有效利用液滴自充电的现象,实现对包裹细胞的液滴分选,最终达到分选多细胞的目的;此外,本技术新型提供了一套简单可行且适用于多种细胞的分选系统,同时,其具有效率高、耗时短、成本低廉、无污染、适用范围广等优点。
附图说明图1为本技术新型微流控芯片的流道结构示意图;图2为分离多种细胞的系统结构示意图。
具体实施方式下面结合本技术新型实施例中的附图,对本技术新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
应当理解,此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本技术新型,并不用于限定本技术新型保护范围。
请参阅图1,本技术新型提供一种微流控芯片,包括基片和盖片,基片表面一端依次设有鞘液入口11及细胞悬浮液入口12,基片表面中部相对设有两个连续相油入口13,基片表面另一端设有五个液滴出口14,鞘液入口11及细胞悬浮液入口12上均连接有微通道15,从鞘液入口11连接出的微通道15分成两条支路并联至细胞悬浮液入口12的微通道15的两侧,鞘液入口11的微通道15 与细胞悬浮液入口12的微通道15合并形成并联通道16,两个连续相油入口13 连接的微通道15与并联通道16形成十字交叉,从十字交叉处连接出的微通道 15呈辐射状分成五条分离通道17分别与五个液滴出口14相连接,十字交叉端与五条分离通道17的汇聚端之间连接的微通道15上设有液滴观察区18,液滴观察区18的微通道15形成多通道结构,以降低生成液滴的速度,使不同的细胞在液滴观察区18形成差速流动,保证不同大小的细胞可以初步分离;五条分离通道17的汇聚端的两侧相对设置有两个分离微电极19,以供液滴内的五种细胞在电压作用下偏转进入对应分离通道17;基片上设有微通道15的表面与盖片键合形成微流控芯片。
微通道15的宽度为80至380微米,深度为80至100微米。
基片可采用PDMA、PDMS、COC、亚克力板或者PMMA,盖片可采用玻璃、PDMS、 PMMA或PC。
本实施例中的基片采用PDMA,盖片采用玻璃。
分离微电极19呈V形结构,V形结构的两个伸出端形成有电连接点,以提供稳定的电连接。
请参阅图2,本技术新型还提供一种应用上述微流控芯片的分离多种细胞的系统,该系统包括四个注射泵3、荧光检测器4、电脑5及可编程直流电源6,四个注射泵3分别与鞘液入口11、细胞悬浮液入口12及两个连续相油入口13 连接,以向对应入口注射对应液体,荧光检测器4及可编程直流电源6分别与电脑5电性连接,荧光检测器4用于采集液滴的荧光信号并传送给电脑5,电脑 5通过将对接收信号与设定的信号进行比对,判断液滴包裹的细胞的种类;可编程直流电源6与两个分离微电极19电性连接,可编程直流电源6针对五种细胞有五个不同的工作模式输出五种脉冲电压,以分离多种细胞;电脑5与每一注射泵3电性连接,电脑5设有预定程序以控制每一注射泵3的注射速度。
本领域技术人员应当理解,荧光检测器4包括显微镜以及连接于显微镜上的CCD摄像头。
该系统还包括与每一液滴出口14相连接的细胞收集器7,以供收集分离出来的细胞。
鞘液入口11、细胞悬浮液入口12、每一连续相油入口13及每一液滴出口14均连接有毛细玻璃管和微管并用AB胶进行固定,以供连接注射泵3与细胞收集器7。
使用时,把2×106细胞放置在1mLPBS缓冲液并进行荧光染色,然后,将其以1:1比例和2%的海藻酸钠溶液充分混合,用注射泵3以3μl/h从细胞悬浮液入口12进样;同时,1%海藻酸钠溶液以8μl/h从鞘液入口11进样;油相以 190μl/h从两个连续相油入口13进液,通过油相的剪切作用形成100μm的油包水液滴;在微流控芯片的液滴观察区18,液滴会减速并通过荧光检测器4激发荧光,荧光信号传送到电脑5进行信号分析;电脑5会把处理好的信号发送到可编程直流电源6;可编程直流电源6依据信号输出合适波形的脉冲信号,使包裹细胞的液滴的运动状态发生改变,从而使分选好的液滴从微流控芯片的液滴出口14排出并进入细胞收集器7。
本技术新型微流控芯片采用“十字交叉型”液滴生成结构实现细胞的包裹并利用鞘液聚焦的方法使细胞有序的排列,从而提高单颗包裹的成功率;此外,本技术新型分离多种细胞的系统有效利用液滴自充电的现象,实现对包裹细胞的液滴分选,最终达到分选多细胞的目的;此外,本技术新型提供了一套简单可行且适用于多种细胞的分选系统,同时,其具有效率高、耗时短、成本低廉、无污染、适用范围广等优点。