酶法测定糖化白蛋白的方法性能验证及其初步临床应用

酶法测定糖化白蛋白的方法性能验证及其初步临床应用

赵芳张芳邱玲程歆琦国秀芝陈雨齐志宏郝英英迟书玲【摘要】目的验证酶法检测血清糖化白蛋白（ＧＡ）性能，评价Ｉ临床应用价值。方法本研究属于验证性研究。参考美国临床和实验室标准协会（ＣＬｓＩ）ＥＰｌ７一Ｐ、ＥＰ６一Ａ、ＥＰｌ５－Ａ、ＥＰ７・Ｐ方案对该项目的定量检测下限（ｋＱ）、线性范围、精密度、干扰因素进行验证，采用制造商提供的主校准品及３份通过高压液相色谱法（ＨＰＬＣ）赋值的冻干血清验证ＧＡ％正确度。使用该方法在ＢＥＣＫＭＡＮＡｕ５４００、ＲＯｃＨＥＭＯＤｕＬＡＲＰ、ＨＩＴＡｃＨｌ７１８０及ＢＥｃＫＭＡＮＤｘｃ６００共４种不同品牌自动生化分析仪上，检测从２０１２年３月份门诊患者剩余血清标本中分类随机抽样选取５０份新鲜血清标本，并比对结果一致性。参考ｃＬＳＩＣ２８一Ａ３方案，从２０１２年２至３月查体人群中整群随机抽样选取４５２名表观健康人血清，对参考区间进行验证，分析选取２０１２年１０至１２月在北京协和医院内分泌科门诊就诊的６１例２型糖尿病（Ｔ，ＤＭ）患者经口服降糖药治疗３０～４５ｄ，比较患者血清中ＧＡ％与糖化血红蛋白（ＨｂＡ。）的相关性。结果自动生化分析仪的ＬＯＱ为０．２８ｇ／Ｌ；线性范围为Ｏ．２８～３６．１ｇ／Ｌ（Ｒ２＝０．９９９７）；重复性ｃ矿为０．６％～１．５％，实验室内再现性ｃｌ，为１，３％～２．１％，均小于试剂盒声明不精密度；３种干扰物在试验浓度内（胆红素≤６５９“ｍｏＬ／Ｌ、血红蛋白≤０．９６６ｇ／Ｌ及乳糜≤１５３０ＦＴｒＵ）的偏差分别为一３．８０％，一４．０３％及一１．３４％；正确度验证显示测定值与ＨＰＬＣ赋值偏倚为一１．２％～１．５３％；４个生化检测系统ＧＡ％结果与均值的回归方程分别为ｙ＝１．０２１６ｘ—Ｏ．０４４９（群＝０．９９９１）、ｙ＝０．９９６３Ｘ＋０．０４２３（尺２＝０．９９９０）、ｌ，＝０．９７７６Ｘ＋０．０７５（Ｒ２＝０．９９９５）、ｌ，＝１．０２４５Ｘ一０．０３６７（Ｒ２＝０．９９０６），偏差分别为０．５％～３．３％、一２．４％一１．９％、一２．９％一一０．７％、一１．９％～５．０％；４５２名表观健康人血清ＧＡ％的９５％置信区间为１１．３％～１５．６％；ＧＡ％与ＨｂＡｌ。呈显著相关（ｒ＝０．８１２，Ｐ＜０．０１），回归方程为ＧＡ＝２．３４５ＨｂＡ．，＋１．５４９。结论应用于自动化分析仪的酶法测定ＧＡ试剂盒，具有良好的灵敏度、线性范围、精密度和抗干扰能力，各检测系统间结果互通性良好；可满足ｌｆ缶床测试要求。已报道参考范围适用于本实验室。ｒ中华趁霾医学袭衣，２Ｄ口，砸：粥—辫７）

【关键词】血清白蛋白；临床酶试验；参考值；敏感性与特异性

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Ｄ０ｌ：１０．３７６０／ｃｍ丑ｊ．ｉｓｓｎ．１００９．９１５８．２０１３．０４．０１２作者单位：１００７３０中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院检验科通信作者：邱玲，电子信箱：ｌｉ“鹊ｉｕｂｊ＠ｙａｈ００．ｃｏｍ．ｃｎ

・３４３・．论著

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糖化血清白蛋白（ｇｌｙｃａｔｅｄａｌｂｕｍｉｎ，ＧＡ）是葡萄糖通过非酶促糖基化反应与血浆中白蛋白结合形成的酮胺类化合物，反映患者检测前２～３周的平均血糖水平。与血糖监测的金标准ＨｂＡｋ相比，ＧＡ可反映血糖短期波动，同时对于存在血红蛋白变异而影响ＨｂＡ。。检测的患者，ＧＡ也可作为必要补充¨引。本研究评价了日本旭化成ＧＡ测定试剂盒的主要分析性能及在４种不同分析设备上的结果互通性，验证了ＧＡ的参考范围并初步分析了其在Ｔ：ＤＭ患者血糖监测中的效能。材料与方法一、材料１．仪器：仪器Ａ（性能验证用）：ＢＥＣＫＭＡＮＡｕ５４００全自动生化分析仪，仪器Ｂ、ｃ、Ｄ（比对用）：ＲＯＣＨＥＭＯＤＵＩＡＲＰ，ＨｒｒＡＣＨＩ７１８０，ＢＥＣＫＭＡＮＤＸＣ６００。２．试剂：日本旭化成制药株式会社生产的ＬｕｃｉｃａＧＡ—Ｌ糖化白蛋白测定试剂盒（１０ｔ１１０ｌＡ），配套校准品（１０ｔ１１０１Ａ），质控品（１０ｔ１００２Ａ）。３．精密度验证混合血清：制备一份浓度介于２水平配套质控品之间的混合血清，约ｏ．７２４ｇ／ｄｌ，分装２０份于一２０℃冻存用于精密度试验。４．干扰试验：收集高、低ＧＡ浓度两份患者混合血清（约１．１ｇ／ｄｌ和０．６０ｇ／ｄ１）用于干扰试验。国际试药株式会社出品的干扰物（其中：游离胆红素３２７０¨ｍｏＬ／Ｌ，结合胆红素３３２０斗ｍｏｌ／Ｌ，Ｈｂ４８３０ｍｇ／ｄｌ，乳糜浊度１５３００ＦｆＩ＇ｕ）。５．比对血清：选取２０１２年３月门诊患者剩余血清标本５０份，ＧＡ％浓度分布为：＜１６．Ｏ％标本２０份，１６．０％～２０．０％标本１５份，＞２０％标本１５份。６．正确度验证品：由日本旭化成制药株式会社采用ＨＰＬＣ方法赋值的Ａ（１３．１％）、Ｂ（３３．４％）、ｃ（６６．ｏ％）三水平冻干血清及制造商提供的主校准品（１０ｔ１００１２１，３０．６％）。７．验证血清的制备：参照Ｃ１５Ｉ２８一Ａ２Ｈｏ文件，