循环免疫复合物的检测
实验循环免疫复合物测定.PEG法测定CIC
注意事项
1.不同浓度的PEG可沉淀不同分子量的免疫复合物。 2% PEG可沉淀较大CIC，4% PEG则沉淀较小CIC， 但浓度＞5%时 PEG选择性CIC的特性即消失，可导致 假阳性结果。故一般选择 3%-4% 浓度 2.温度变化对结果影响较大。4℃时CIC沉淀最佳， 室温每升高1℃，A值下降0.2。 3.低密度脂蛋白、高g球蛋白血症或脂肪含量过高 均可使浊度增加，故应空腹采血。 4.样本陈旧或反复冻融可影响检测结果，故待检血清 要新鲜，防止污染及聚合IgG形成。通常4℃冰箱保存 不能超过3天，-20℃保存时间可适当延长。
主要试剂与器材
1、待检血清。 2、0.1mol/L pH8.4硼酸缓冲液(BBS)、 3、4.1% PEG标准溶液。 4、分光光度计、离心机、微量加样器、 试管、吸管等。
操作方法
1. 待检血清用BBS作1∶3稀释 (血清0.4ml加入BBS缓冲液0.8ml)。
2. 试剂及加入量(ml) 测定管 对照管 1：3稀释血清 0.2 0.2 41g/L PEG 2.0 -pH8.4 BBS-2.0 -2.0 3. 充分混匀，放4℃冰箱1h，取出，放室温 10min，以BBS调零，495nm波长比色。 4. 计算 待测血清浊度值= （测定管A-对照管A值）×100
记录实验结果
A测定= A对照= 血清浊度值= 正常血清CIC的参考值： A值=4.3±2.0 (X±SD）； 0.043±0.02(X±SDC检测的临床意义
1.CIC检测一般无特异性诊断意义，但对免疫性疾病 的病情监测，疗效，有一定价值 2. CIC增高：见于某些自身免疫性疾病： 如SLE、类风湿、结节性多动脉炎、小儿肾炎、 急性链球菌感染后肾炎、慢性乙肝以及肿瘤患者， 血清中可检出循环免疫复合物。 3.中等大小的可溶性免疫复合物在血管中沉积是引起 Ⅲ型超敏反应主要因素，有助于判断Ⅲ型超敏反应 的发生，发展，预防对细胞，组织的损伤。
病毒性肝炎循环免疫复合物的检测及临床意义的初步探讨
２１ ００年
第 ４免疫 复合 物 的检测及 临床 意义 的初 步探 讨
康和平
【 摘要 】 目的： 本文应用聚 乙二醇（ Ｅ ） Ｐ Ｃ 快速 比浊法对重度慢性肝 炎、 轻度 慢性肝炎 、 慢性无症状携带者 （ ｓ） 正常人检测 ＡＣ 、
［ ］ 姚光弼， １ 等。免疫复合物疾病。国外 医学参考资料《内科 学分册》 ９８ ５ １ １ ： ９ １７ ；（０—１ ）４ ８
［ ］ 黄 湘虎 ， 。 乙 型 肝 炎 循 环 免 疫 复 合 物 检 测 及 临 床 意 义 ２ 等 的探 讨 。南 京 医学 院 学报 １８ ；（ ） １ ３ ９ １ １ １ ：２—１
免疫 复合 物存 在 于 急 、 性 肝 炎 病 人 血 清 中 ， 型肝 炎 Ｈ ｓ ｇ 慢 乙 ＢＡ 复合物在病人血清、 巴结 、 淋 脾脏 、 肾小球都有发现 ， 免疫复合 物 中有 Ｉ 、ｇ Ｃ ｇ ＩＭ、 ３的 沉 积 提 示 ： 疫 复 合 物 的沉 积 与 肝 损 坏 Ｇ 免 有关 ， 并发现 ＣＣ与 ｃ Ｉ ３呈负相关 ， 即前者升高 ， 后者下降。ＣＣ Ｉ 中有 相 当部 分是 结合 了 Ｃ ３的 Ｈ ｓ ｇ和抗 一Ｈ ｓ因 此 ， 为 乙 ＢＡ Ｂ． 认 型肝 炎 ＣＣ的检 测 对诊 断 、 床分 型 及预 后有 一定 的价值 。 Ｉ 临 本 文报 道 的 ６ ６例 中 ， 度 慢 性 肝 炎 ＣＣ 阳 性 率 最 高 ， 重 Ｉ 为 １０ ； 为 轻度 慢 性 肝 炎 ６ ． ％ 、 性 无 症状 携 带 者 （ ｓ ０ ％ 依次 ６７ 慢 Ａ Ｃ） 和正 常 者分 别 为 ５ ％ 、０ 。 ＣＣ平 均 值 依 次 为 ： 度慢 性 肝 ２ ５％ Ｉ 重 炎 ＞轻度慢性肝炎 ＞ 慢性无症状携带者（ ｓ ＞正常者。统计 Ａ Ｃ） 学 处理 的结果 发 现 ： 度 慢 性 肝 炎 与 轻 度 慢 性 肝 炎 、 性 无 症 重 慢 状 携 带者 （ ｓ ）正 常 者 三 型 比较 ， 显 著 差 异 性 ， 示 ＣＣ在 ＡＣ 、 有 提 Ｉ 慢 性肝 炎 的免 疫病 理 方 面起 着 重 要 作用 。血清 Ｉ 、ｇ 与 Ｃ Ｃ ｇ ＩＭ Ｇ Ｉ 的变化 近乎 相 似 ， 二者 之 间有 无 相关 ， 尚待进 一 步 观察 。 综 上所 述 ： 肝 炎 ， 其是 重度 慢 性肝 炎 的 ＣＣ平 均值 显 慢性 尤 Ｉ 著高于其他三型人群 ， 提示 ＣＣ较高的病情可能加重。尤其是 Ｉ 在 轻度 慢性 肝 炎 的时 候 ， 如果 ＣＣ进 行性 的升 高 ， 能 在 向重 Ｉ 有可 度慢 性 肝炎 转化 ， 得 警惕 。因 此 ， Ｉ 值 ＣＣ对鉴 别 重 度 慢性 肝 炎 与 轻度 慢 性肝 炎有 重 要 意义 。为 了提高 慢 性 乙型肝 炎 ＣＣ的特 异 Ｉ 性， 除检 测 ＣＣ Ｉ ＩＭ、ｇ Ｉ Ｉ 、 Ｃ、 ｇ ｇ Ｉ ｇ Ａ、 Ｅ和 ｃ ３以外 ， 应 检 测 ＣＣ 中 还 Ｉ 的 Ｈ ｓｇＣ Ｂ Ａ 、３和 Ｉ ＩＭ等 ， ｇ ｇ Ｇ、 以免其他免疫复合物疾病 （ Ｓ Ｅ 如 Ｌ 等） 出现 的假 阳性 结 果 。 参考 文 献
12 免疫复合物及检测
三.IC检测方法的分类：
(一) 局部组织中IC的检测：
制备局部组织切片，用光学显微镜或电镜 检测IC所致典型病理改变；或用IF、免疫酶 技术检测IC在组织中的沉着。
（二）循环中IC的检测：
Circle immune complex，简称CIC。 CIC检测方法大致分为两类：
• 1.抗原特异性方法：利用IC中Ag的特 异性而设计的方法。但由于每一待测 标本中Ag的特异性是不同的，不同Ag 就需不同方法进行检测，造成方法不 统一，因此临床上使用较少。 • 2.抗原非特异性方法：利用CIC与游离 的Ag或Ab相比较，在物理性质、生物 学活性上的差异而设计的方法。
• 大分子IC：沉降系数为19S，MW>100万， 易被巨噬细胞吞噬而清除； • 小分子IC：可溶性，沉降系数<6.6S，MW <50万，易被肾小球滤过而排除； • 中等大小的IC：沉降系数在8.8S－19S间， MW在50－100万间，既不易被巨噬细胞吞 噬也不易被肾小球滤过，而沉积在血管壁、 肾小球基底膜处，形成免疫复合物病。
根据物理Байду номын сангаас质上的差异而设计的方法：
• A.根据CIC与游离的Ag或Ab分子大小不同 而设计的方法：凝胶过滤超滤法、蔗糖密 度超速离心法； • B.根据CIC与游离的Ag或Ab溶解度不同而 设计的方法：聚乙二醇（PEG）沉淀试验
根据生物学性质的差异而设计的方法：
• A.根据C1q+CIC （AgAb)而设计的方法： 抗补体试验、C1q结合试验； • B.根据IgGFc受体＋CIC （AgAb)而设计的 方法：血小板凝集试验； • C.根据C3b受体＋CIC（AgAbC)而设计的 方法：Raji细胞试验
2.抗补体试验：
免疫检验考试辅导：循环免疫复合物补体相关测定法
IgG和IgM类抗体与抗原结合后，重链CH2区的补体结合点暴露，可以固定C1q并激活补体的系列反应，这是利用补体有关技术检测免疫复合物的基础。
1.C1q结合试验：将待检血清先行加热56℃30min，以灭活其中的补体和破坏已与CIC结合的C1q，空出补体结合点。
CIC与C1q的结合可用多种方法进行检测，常用的有以下3种。
（1）液相法：先将同位素标记的C1q与灭活过的血清标本混合作用，再加入0.5%（终浓度）的PEG将结合了C1q的CIC沉淀下来，通过检测沉淀物中的放射活性来计算CIC的含量。
（2）固相法：先将C1q吸附于固相载体表面，加入待检血清使CIC与C1q结合，再加入同位标记的或酶标记的抗人IgG或SPA，最后检测其放射活性或酶活性。
（3）C1q偏离试验：先将同位素标记的C1q与灭活的血清标本混合，再加抗体致敏的绵羊红细胞，温育后离心，检测红细胞上的放射活性。
红细胞的放射活性与免疫复合物的量呈负相关。
2.补体试验本法的原理类似补体结合试验。
将一定量的补体（多为混合豚鼠血清）与灭活的待检血清混合温育，反应后加入致敏绵羊红细胞。
如出现溶血表示血清中没有CIC存在；不溶血说明标本中有CIC存在医`学教育网搜集整理。
将血清标本做不同稀释，并与已知的热聚合IgG作对照，可以计算出CIC的含量。
本方法的灵敏度较高，且易于在一般实验室开展，不足之处是特异性较差。
3.胶固素结合试验胶固素（conglutinin）是牛血清中的一种正常蛋白，能与C3d特异性结合；体内与补体结合的CIC都带有C3d，因此胶固素可与CIC结合。
用一定量的胶固素包被塑料管，往管中加入稀释的血清标本，温育后再加入同位素标记或酶标记的抗人IgG抗体，最后检测各管的放射活性或酶活性，计算CIC的含量。
循环免疫复合物测定
待测血清浊度值=（测定管吸光度-对照管吸光度）×100
免疫复合物称循环免疫复合物(circulating immune 在pH、离子强度等条件固定时，蛋白质分子量越大，用以沉淀的PEG浓度越小。
在pH、离子强度等条件固定时，蛋白质分子量越大，用以沉淀的PEG浓度越小。 聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)是非离子型亲水剂，为乙二醇的聚合物。
合物，随血液循环的免疫复合物称循环免疫复合物(circulating immune complex，CIC)。
熟悉循环免疫复合物检测的临床意义
不是疾病诊断的主要指标，但在发病机制研究，了解病情进展，判断治疗效果方面能提供有意义的帮助
聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)是非离子型亲水剂，为乙二醇的聚合物。
用1％分聚光乙光二度醇计(P测Ec定Go)浊溶m度液，p可le反x映，CIC含C量I。C)。免疫复合物沉积可引起多种疾病。
试分析循环免疫复合物测定实验过程中有何因素将影响实验结果？
聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)是非离子型亲水剂，为乙二醇的聚合物。
聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)是非离子型亲水剂，为乙二醇的聚合物。
循环免疫复合物测定
目的
1.掌握循环免疫复合物测定原理 2.熟悉循环免疫复合物检测的临床意义
原理
免疫复合物(immune complex，IC) 抗原抗体复合物，在正常情况下，机体防御系统 作为清除异物抗原的一种方式，清除体内免疫复 合物对机体有利。
免疫复合物沉积可引起多种疾病。
在某些情况下，体内形成的免疫复合物不能被及时清除，沉积在机体某一部位称为局部免疫复合物，游离于体液中称为可溶性免疫复
PEG法检测循环免疫复合物 临床免疫学实验
PEG法检测循环免疫复合物【实验目的】掌握PEG法检测循环免疫复合物的实验步骤，影响因素，结果判断，结果计算方法。
【实验原理】低浓度（3~5%)的聚乙二醇（PEG) 能选择性沉淀免疫复合物。
在受检血清中加入PEG，使最终浓度为3.5%，可将血清中免疫复合物沉淀下来，需用分光光度计测定吸光度值(A)表示其相对量。
【实验材料】1.0.1mol/L硼酸缓冲液：称取硼砂0.4g，硼酸0.51g溶于100ml蒸馏水中，调PH至8.6。
2.4.166%PEG溶液：用硼酸缓冲液配制。
PEG的分子量为6000。
3.受检血清，试管，吸管，721分光光度计。
【实验步骤】1.吸待检血清0.2ml，用硼酸缓冲液0.4ml稀释（血清稀释3倍）。
2.分对照管和测定管：对照管：硼酸缓冲液2ml+稀释血清0.22ml；测定管：4.166％PEG 2ml+稀释血清0.22ml（此时PEG最终浓度为3.75％）3.混匀后两管均放4℃冰箱1h后取出，室温放置10min。
4.用721 0.5×1cm比色杯，检测测定管A450nm值，（对照管调零）。
【实验结果】待测血清浊度值＝（测定管A－对照管A)×10000=540【实验讨论】1.注意在本试验中要求的PEG终浓度为3.75％。
2.受检查血清为何要一定保持新鲜，放冰箱保存不得超过一周（因为即使没有污染，也因血清中聚合IgG的形成而出现假阳性）3优缺点：①该试验不但可检测IC，还可获得IC（收集沉淀），简单，快速；②特异性差，易受血清中大分子物质干扰；③常作为IC检测的粗筛试验4.检测IC的理想方法：①操作简便，敏感；②可检测各种类型IC；③能分析IC的大小和组成成分；④能精确定量，无假阳性。
免疫复合物(Immune Complexes,IC)的检测(1)
免疫复合物(Immune Complexes,IC)的检测（1）免疫复合物在体内存在有两种方式，一是存在于血液中的循环免疫复合物（CIC），一是组织中固定的免疫复合物。
免疫复合物的检测技术可分为抗原特异性方法和非抗原特异性方法。
在大多数情况下，免疫复合物中的抗原性质不太清楚或非常复杂，所以抗原特异性方法并不常用。
一、循环免疫复合物的检测根据免疫复合物的物理学、免疫学和生物学特性，已经设计出很多检测CIC的方法（表1）。
表1 循环免疫复合物的常用检测方法类别原理方法敏感性备注物理法分子大小1、超速离心——适于研究2、分子超滤——适于研究3、凝胶过滤30μg适于研究溶解度1、PEG沉淀20μg粗定量，易推广2、冷沉淀——定性，临床应用补体法固定补体，结合C1q 抗补体试验0.1μg常用，特异性差1、C1q凝胶沉淀试验100μg定性，不易普及2、C1q偏离试验4μg不易普及3、液相法10μg不易普及4、固相法1μg不易普及胶固素胶固素结合试验3μg敏感，稳定抗Ig法结合RF1、RF凝胶沉淀试验100G定性，不敏感2、mRF固相抑制试验1～20μg不易普及3、PRF凝集抑制试验1～10μg不易普及结合Ig抗抗体法2～3μg不易普及细胞法Fc受体1、血小板凝集试验1～4μg需新鲜制备2、ADCC抑制试验5～10μg细胞活性质控难3、Mφ吞噬抑制试验0.03μg细胞活性质控难补体受体1、Raji细胞法6μg需维持细胞株2、花环抑制试验10μg影响因素多（一）物理测定法1、聚乙二醇法聚乙二醇（PEG）是乙二醇聚合而成的无电荷形多糖分子，分子量变化范围较大，常用的分子量是6000。
用3％～4％浓度的P EG可以选择性地将大分子免疫复合物沉淀下来，其作用机制尚不甚清楚。
将PEG溶液与待检血清混合，置4℃冰箱过夜后离心，将沉淀物用P EG溶液充分洗涤，重新溶解于 0.01mol/L的NaOH中，在波长280nm下测量溶液的吸光度；也可利用散射比浊法直接测定PEG沉淀的免疫复合物；以不同浓度的热聚合IgG作为参考标准来计算CIC的含量。
循环免疫复合物(CIC)
循环免疫复合物（CIC)循环免疫复合物（CIC)介绍：抗原和相应抗体结合形成的物质称为免疫复合物，免疫复合物和补体、其他免疫活性物质结合，沉积在血管壁，可导致组织损伤及血管炎，引起一系列的疾病，如红斑狼疮，由于免疫复合物能在循环血液中检测到，故称之为循环免疫复合物。
循环免疫复合物的测定虽无特异性诊断意义，但对病情的活动性判断和指导治疗有一定价值，测定循环免疫复合物的方法很多，这里仅介绍临床常用的聚乙二醇法。
循环免疫复合物与聚乙二醇作用，以浊度变化表现出来，可根据浊度的大小来反映免疫复合物的多少。
如浊度大，则说明血液中循环免疫复合物增多，病情活动，但是对诊断没有特异性价值。
循环免疫复合物（CIC)正常值：抗补体法：阴性。
PEG沉淀法：4.3±2.0。
SPA夹心酶联免疫吸附试验：小于28.4mg／L。
注意：根据不同的实验方法和条件、得出各实验室的正常参考值。
循环免疫复合物（CIC)临床意义：循环免疫复合物是体内抗原和抗体反应形成的，多数情况下对机体有利，只有少数情况下免疫复合物沉淀下来，引起组织损伤，造成疾病。
形成免疫复合物的抗原可分为内源性和外源性，按此类不同，可将CIC疾病分类如下：(1)与内源性抗原有关者：①IgG抗原：类风湿性关节炎、混合性冷球蛋白病、高丙种球蛋白血症性紫癜。
②核抗原：系统性红斑狼疮。
③特发的细胞抗原：肿瘤、自身免疫性疾病。
(2)与外源性抗原有关者：①医源性抗原：血清病、药物变态反应。
②环境中抗原：吸入性抗原(外源性变态反应性肺泡炎)、摄入性抗原(疱疹样皮炎)。
③传染性生物性抗原：A.病毒性抗原：肝炎、登革出血热。
B.细菌性抗原：链球菌感染后肾小球肾炎、麻风。
C.原虫性抗原：疟疾、锥虫病。
D.蠕虫性抗原：血吸虫病、盘尾丝虫病。
(3)抗原性质不明者：慢性免疫复合物性肾小球肾炎，伴有或不伴有嗜酸性白细胞增多症性脉管炎。
循环免疫复合物（CIC)注意事项：一、抽血前的注意事项1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。
循环免疫复合物
免疫复合物：抗原与其相应抗体结合形成局部免疫复合物：沉积于机体某一局部的免疫复合物可溶性免疫复合物：游离在体液中的免疫复合物循环免疫复合物：血液中的免疫复合物一、循环免疫复合物抗原和相应抗体结合形成的物质称为免疫复合物，免疫复合物和补体、其他免疫活性物质结合，沉积在血管壁，可导致组织损伤及血管炎，引起一系列的疾病，如红斑狼疮，由于免疫复合物能在循环血液中检测到，故称之为循环免疫复合物。
循环免疫复合物的测定虽无特异性诊断意义，但对病情的活动性判断和指导治疗有一定价值，测定循环免疫复合物的方法很多，这里仅介绍临床常用的两种。
1、聚乙二醇法循环免疫复合物与聚乙二醇作用，以浊度变化表现出来，可根据浊度的大小来反映免疫复合物的多少。
如浊度大，则说明血液中循环免疫复合物增多，病情活动，但是对诊断没有特异性价值。
2、冷球蛋白测定亦可称冷免疫球蛋白，是在低温自然沉淀，加热后又能溶解的蛋白复合物。
当血液中出现冷球蛋白时，称冷球蛋白血症，在红斑狼疮病人中较多见。
有时见两小腿部皮下紫癜，而血小板检查正常，这是由于冷球蛋白在皮下沉淀的结果，该方法对判断病情变化和指导治疗有参考价值。
二、相关问题1、问：“红细胞免疫黏附，清除体内CIC”中的“CIC”是什么意思？答：循环免疫复合物（Circulationimmunecomplex，CIC）又称可溶性免疫复合物，分子量为50万～100万，沉降系数8.8～19S，它不易被吞噬细胞吞噬，又不能经肾小球排出，可较长时间在血液中循环，一旦大量循环免疫复合物沉积于组织中，则引起组织损伤及相关的免疫复合物病。
CIC阳性常见于：（1）部分自身免疫性疾病，如SLE，类风湿关节炎等；（2）膜增殖性肾炎，链球菌感染后肾炎；（3）传染病，如慢性乙型肝炎，疟疾，麻风等；（4）恶性肿瘤。
2、问：我想检测血中的CIC，如果溶血了，测的结果还准吗？答：我觉得CIC是用免疫的方法测定的，所以我觉得抗原抗体的反应，受溶血的影响比较小。
循环免疫复合物(CIC)的检测方法
循环免疫复合物（CIC）的检测方法循环免疫复合物（CIC）的检测方法大致可分为两类，即抗原特异性方法和抗原非特异性方法。
前者通过区别游离的抗原和与抗体结合的抗原，选择性测定含有某种特定抗原的IC。
在已知由某种抗原引起的免疫病理反应的疾病中，可应用此类方法。
抗原非特异方法，则不考虑形成IC抗原的性质，根据免疫球蛋白分子在结合抗原以后发生的物理学和生物学特性的改变进行检测。
由于体内形成的CIC可能涉及多种抗原—抗体系统。
所以临床上多采用此法。
其检测方法种类繁多。
大致可归纳为：1、物理方法根据IC分子量大小，表面电荷和溶解度等特性而设计。
例如：PEC测定法、冷沉淀法、选择性超滤、超速离心法等。
2、分子受体法根据某些活性分子上的补体和Pc受体能与IC结合的原理设计。
例如：根据CIq能与免疫球蛋白分子Fc段上的补体结合点结合，设计了CIq结合试验，如简便CIq结合试验、CIq偏离试验、固相CIq结合试验、PEG-CIq免疫扩散试验和CIq溶解性试验以及抗补体试验、胶固素结合试验等。
3、细胞受体法根据某些细胞上具有补体受体和/或Fc受体能与IC结合的原理设计。
例如：Raji细胞技术、巨噬细胞法、血小板凝聚试验等。
这类方法的灵敏度和特异性较好，但需进行活细胞培养或细胞分离，影响因素多，重复性较差。
4、其他方法葡萄球菌A蛋白试验，是利用PEG沉淀血清中IC，并使其吸附于富含A蛋白的金葡菌上，再用125I-A蛋白与之结合，测定125I放射活性。
但本法只能检测IgG1、IgG2和IgG4形成的IC，因葡萄球菌A蛋白分子上无IgG3的Fc受体。
抗球蛋白技术是根据CIC能与类风湿因子(R F)或抗核抗体结合的特性设计，如抗球蛋白试验。
以上方法各有其不同的影响因素，因此，不同的试验方法所得结果并不总是一致，且由于缺乏统一的标准品作为对照，各实验室的检测结果常难以比较。
故在检测CIC时，最好用几种方法同时测定。
本节主要介绍几种应用较广的CIC检测方法。
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循环免疫复合物的检测
陈凤娇09级临床生化班0925400060
【摘要】目的以PEG沉淀法检测患者血清中循环免疫复合物（CIC）的含量，从而对Ⅲ型超敏反应性疾病做出免疫学检验。
方法聚乙二醇(PEG)是一种无电荷的线形分子结构的乙二醇聚合物，有较强的脱水作用。
血清中加人终浓度为30～40g/L的聚乙二醇(PEG 6000)，能相对选择性地沉淀CIC，并能抑制CIC的解离而能促进CIC进一步聚合成更大的凝聚物，形成浊度。
利用分光光度计测定溶液的浊度可反映CIC的相对含量。
结果患者1，2，3的血清浊度值分别为0.5，0.5,0.9，正常血清浊度值为1.1。
结论患者血清中不存在CIC。
【abstract 】objective to PEG precipitation detection of patients with serum circulating immune complex (CIC) content, and the Ⅲtype allergic reactions sexual diseases make immunology examination. Methods polyethylene glycol (PEG) is a kind of no charge linear molecule structure of the polymer ethylene glycol, strong dehydration effect. Add the concentration of serum end 30 ~ 40 g/L of polyethylene glycol (PEG 6000), can relative selectively precipitation CIC, and inhibit the CIC disintegrate and can promote the CIC further polymerization into more condensed content, form the turbidity. Use spectrophotometer to measure the solution turbidities can reflect the relative content of CIC. As a result, patients were 1, 2, 3 blood QingZhuo degrees, respectively, in 0.5, 0.5, 0.9, normal blood QingZhuo degrees value is 1.1. Conclusion patients serum does not exist CIC.
【关键词】 PEG沉淀循环免疫复合物
免疫复合物（IC）是抗原-抗体结合物。
在正常情况下，机体完全可以清除这些复合物，当发生Ⅲ型超敏反应时，机体的这种清除功能发生障碍，循环免疫复合物增多，同时，沉积于局部，激活补体，吸引和活化中性粒细胞，造成局部组织的损伤和炎症，引起许多免疫复合物病。
因此，检测循环免疫复合物对于诊断免疫复合物并有着重要意义。
检测循环免疫复合物的方法已经有20余种，但绝大多数为生物学方法，一般操作较复杂，重复性差，不适合于临床化验使用。
而PEG沉淀法是根据免疫复合物的理化性质而设计的理化技术，方法操作简便易
行，国内已经广泛使用，但特异性交差。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1硼酸缓冲液（0.1mol/L,PH 8.4）
1.1.2PEG6000（成都市科龙化工试剂厂，批号：20070318）
1.1.3羊抗人全血清（批号：2011111，有效期2年）；人血清（来源：
实验室自制）
1.1.4紫外分光光度计（型号：Alpha-1506,产品编号：1561011002，上
海谱元仪器有限公司），微量加样器（20~200ul，沪制01150222
号；100-500ul上海求精生化试剂有限公司），塑料试管（规格
12×100，出产日期2011.2.2 江苏天力医疗器械有限公司），电
热恒温箱（型号：S648,上海）
1.2方法
1.2.1 血液，放入试管中。
抽取2ml待血液凝聚（37℃水浴30分钟）析出血
清后离心， 3000rpm，10分钟，取上清放入试管中备用；
1.2.2 取4支试管，分别标记为正常、患1、患2、患3，分别加入上述血清
160µl、140µl、120µl、80µl，再分别加入抗血清0µl、20µl、40µl、80µl；
1.2.3 各管分别用BBS做1:3稀释(加入BBS 320µl)；
1.2.4 将上述4支试管37℃孵育15~20分钟。
1.2.5 取小试管8支，标记管号1~8,管1~4为测定管，管5~8为对照管，
如下表所示。
1.2.6 加样后充分混匀，置4℃冰箱1h后取出，室温下静置10~15min。
1.2.7 用分光光度计在495nm比色，在检测测定管A值前，均应先用BBS校
正零点。
2 结果
用分光光度计在495nm处比色测得A值。
在计算待测血清值：
待测血清浊度值=（A测定管-A对照管）×100；
根据以下标准进行判断循环免疫复合物的存在与否：如A测定管浊度/A正常管浊度≥2时为阳性，表示患者血清中存在CIC；若A测定管浊度/A正常管浊度≤2时为阴性，表示患者血清中不存在CIC。
本实验测得各管的A值如表所示：
根据上述数据：
患者1的血清浊度值=（0.082-0.077）×100=0.5
患者2的血清浊度值=（0.086-0.081）×100=0.5
患者3的血清浊度值=（0.126-0.117）×100=0.9
正常血清浊度值=（0.080-0.069）×100=1.1
因此：
A患者1血清浊度值/A正常血清浊度=0.5/1.1=0.45<2,表示患者血清中不存在CIC;
A患者2血清浊度值/A正常血清浊度=0.5/1.1=0.45<2,表示患者血清中不存在CIC;
A患者3血清浊度值/A正常血清浊度=0.9/1.1=0.82<2,表示患者血清中不存在CIC;
3 讨论
循环免疫复合物的检测，对于了解免疫复合物病的发病机理及临床诊断有着重要意义。
集体经常遭受抗原的入侵或者出现自身抗原，引起免疫应答和形成免疫复合物，但后者讯即被吞噬细胞所吞噬，消化和消除。
经为机体的正常免疫应答，故不至于引起疾病，只有当形成的免疫复合物不能被及时清除并沉积于局部时，才有致病作用。
吞噬细胞吞噬和清除免疫复合物的效能与免疫复合物的大小及形成的数量有关。
当抗原分子数稍稍超过抗体时，形成中等大小，19S左右的可溶性免疫复合物，后者既不容易被吞噬和消除，有较容易沉积于局部的毛细血管壁，具有致病的可能性。
循环免疫复合物常见的沉积部位是肾小球，关节，心肌和其他毛细血管。
【参考文献】
[1] 张子康，循环免疫复合物的检测，医学微生物学和免疫教程，第一版，四川，科学技术出版社，1989，233.
[2] 武爱民，于爱莲，朱长义，魏绪庭，循环免疫复合物的检测，泰山医学院.。