蜂胶成分检测方法进展
蜂胶中酚类化合物的分析研究进展

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养
蜂
科
技
20 年第 5 O6 期
蜂胶中酚类化合物的分析研究进展
季文静 , 胡福 良 ( 浙江大学动物科学学院, 杭州 302 ) 1 9 0
蜂胶具有广泛的生物学活性 , 被广泛应用
于 民间 医药 中。
滤, 重复以上程序 以确保酚完全收 回。另一种
方法是将样品放在 7℃下振荡溶解 3mn 过 0 0 i, 滤后在减压状态下脱水干燥 , 并再溶解。
2 分 光光度 测定法
蜂胶 的化学 成分极 为复杂 , 其组成取决于 采集地的植 物种类 以及 当地的地理和气候特
征 。据 鉴定 , 多数 的 蜂 胶 由 5%树 脂 ( 要 大 0 主
3c 4 —30 4 30 l 0 8℃,0~ 7℃。分离柱有: B 9℃, D1
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供参考。
1 样 品制 备
色谱技术 中的薄层色谱 法(L )气相色 TC 、
在分析测试前必须对蜂胶进行提纯。提纯
谱法( C 、 G )高效液相色谱法( m ) 和毛细管电 泳法( E 是酚类分析中常用的方法。 C)
在薄层色谱法 (L ) , T C 中 固相硅胶广泛用
后, 制备成精细粉末 , 然后称重 , 溶解到溶剂中。
最常用的溶剂是浓度为 7 %或 8%的乙醇, 0 0 能 提取得到富含多酚的脱蜡蜂胶 。用 8 %乙醇 0
纯天然蜂胶检测方法(HPLC)

蜂胶检测方法1仪器与材料蜂胶由上海舜夏生物科技有限公司提供,主要来自河南、浙江和福建。
槲皮素对照品(自制,经高效液相色谱分析,纯度≥98%),乙腈、甲醇均为色谱纯(Sigma公司),水为超纯水,其余试剂为分析纯。
岛津LC-10ATvp液相色谱仪(包括LC-10AT色谱泵、SPD-10Avp紫外检测器、混合器、Class-vp色谱工作站);超纯水制备仪(PALL公司);电子分析天平(METTLER AE200)。
2方法2.1色谱条件色谱柱:Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18(4.6mm×150mm,3.5μm);流动相A:乙腈-甲醇(9∶1),流动相B:20mmol/L的醋酸铵溶液(用醋酸调pH至3.5),梯度洗脱,流速0.8mL/min,检测波长360nm,柱温30℃。
梯度程序为:0~10min,从13%A线性梯度至17%A;10~50min,线性梯度至70%A;50~60min,线性梯度至100%A。
每次运行结束后以初始流动相平衡色谱柱20min,以保证出峰情况稳定。
2.2溶液的制备供试品溶液的制备:精密称取蜂胶0.5g,置25mL小烧杯中,分别用15mL甲醇超声2次(每次30min),过滤,残渣用甲醇洗涤2次,过滤,合并滤液,置50mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀。
对照品溶液的制备:精确称取槲皮素10mg,置50mL量瓶中,加甲醇使之溶解并稀释至刻度,配成0.2mg/mL的溶液。
2.3方法学考察为了考察分析方法的可靠性,以槲皮素的峰为内参比峰,其色谱峰(s)的保留时间和峰面积为l,计算其他各峰的相对保留时间和相对峰面积比值。
2.3.1精密度试验取同一份供试品溶液,连续进样5次,检测指纹图谱,考察各主要色谱峰与内参比峰相对保留时间和相对峰面积的一致性,结果表明各主要色谱峰保留时间的RSD 均在1.0%以内,相对峰面积的RSD均在1.5%以内。
2.3.2稳定性试验取同一份供试品溶液,分别在0,4,8,12,24h进行检测。
蜂胶的研究应用进展_郦金龙

蜂胶(propolis)是蜜蜂从植物芽孢或树干破皮伤处采集来的树脂(树胶),并混入蜜蜂上颚腺的分泌物,与蜂蜡、少量花粉等加工而成的一种具有芳香气味和黏性的胶状固体物质。
蜂胶是蜜蜂用于维持整个群体健康的有效物质,一个5—6万只的蜂群一年只能生产蜂胶100—150g,因此被誉为“紫色黄金”。
近代研究,特别是近10年的研究证明,蜂胶所含有的丰富而独特的生物活性物质,使其具有抗菌、消炎、止痒、抗氧化、增强免疫、降血糖、降血脂、抗肿瘤等多种功能,对人体有着广泛的医疗、保健作用,是一种具有较高保健功能的产品。
本文主要对蜂胶的活性成分组成、蜂胶的提取、蜂胶品质的鉴定以及蜂胶的功能与应用等蜂胶研究的最新进展进行了综述。
1 蜂胶化学成分的多样性及功能1.1 蜂胶中的主要化学成分及差异性[1,2]天然蜂胶的基本成分一般是:树脂树香复合物39%—53%、多酚类12%—17%、多糖类2%—3%,蜂蜡19%—35%、杂质(含花粉等)8%—12%。
各类蜂胶中已知的化学成分达300余种。
主要包括高良姜素、乔松素等71种黄酮类化合物,肉桂酸、咖啡酸、阿魏酸等59种芳香酸与芳香酸酯类化合物,肉桂醇等24种酚类、醇类和17种醛与酮类化合物,25种氨基酸,50种脂肪酸与脂肪酸酯,19种萜类化合物,6种甾体化合物,9种糖类化合物,25种烃类化合物等。
同时,蜂胶中含有微量的维生素B族以及丰富的矿物质与微量元素。
摘 要:蜂胶含有丰富而独特的生物活性物质,对人体有着广泛的医疗、保健作用,现已成为各国科学研究的热点,并成为新兴的保健品。
本文主要概述了近些年来蜂胶的研究应用进展,主要包括蜂胶的化学成分以及蜂胶的提取,蜂胶中黄酮类化合物的结构、性质、功能,蜂胶中黄酮类化合物的分离提纯以及测定等,并对其研究应用作出展望。
关键词:蜂胶;提取;总黄酮;总酚;功能蜂胶的研究应用进展郦金龙1,赵文婷1,王 盼1,苏春元1,刘 欢2,李辉尚3,殷丽君1(1中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京 100083;2中国水产科学研究院质量与标准研究中心,北京 100141;3中国农业科学院农业信息研究所,北京 100081)由于蜂胶的产生受所处产地的地理环境因素影响很大,因此,来自于不同产地的蜂胶品种,在化学成分组成上也存在着细微的差异。
蜂胶的研究进展

等 用蜂胶对 乳酸杆菌进行 体外抑 菌试验 , 与 7 并 种有 抗菌作 用的 中药进行对 照。结果显示 : 蜂胶 的平均抑 菌环 明显太 于其
它 7 中药 。 种 22 抗病毒作用 . 蜂 胶能抑 制水泡性 口腔病毒 、 单纯疱疹 病毒
作用加强 , 当作用 2 时 , 4h 从低浓度 到 高浓度均呈 现 出较强 的 活化作用。李淑华 等“ 报道用单 克 隆抗体 拄术 检测 实验 小 鼠
蜂胶 的化 学成 分很复杂… , 从 中分离鉴定出的成分有黄酮类 、 已 萜烯类 、 醌类 、 酷类 、 醇类 、 酚类 、 醚类、 有机 酸和大量 的 氨基 酸、
酶类 、 维生素 B、 维生素 、 维生素 、 生素 E和维生素 A以 维 及矿物质等。含有大量 的黄 酮类 、 萜烯类化 合物是蜂 胶的重要 特征 , 已从蜂胶 中分 离鉴 定的黄 酮化合物有 3 现 0余种 , 包括 白
2 蜂 胺的生理药理作用
用 。体外实 验表 明, 能显 著的抑翻 氧 自由基在体外 引发 的 蜂胶 小 鼠肝微粒体脂质 过氧化反 应 体内实验 表 明, 蜂胶 可有效 的 抑 制四氧嘧啶引发小 鼠肝脏 自由基 的升 高 , 降低肝脏 MD A的含
量, 蜂腔对 四氧喀啶致 小鼠肝脏 损伤有 显著的保 护作 用。韩德 文等 给小鼠灌服蜂胶 黄酮后 , “ 对小鼠脑 N O含量 进行观察 , 结 果 表明: 低脑组织 N O含量 , 提示蜂胶 黄酮 可以抑制 N O的细胞
毒作用 。多数资料报道 , 蜂胶 中起抗 氧化作 用的主 要成分之 一 是黄酮类化合物 , 也有资 料显示 蜂胶 中众 多的其 它类化合 物亦 有抗氧化作用 , 阿魏酸 咖啡酸等含有酚羟基的有机酸可 消除 自 由基 , 抑制氧化反应和 自由基反应 , 具有保肝和抗肝脂质过氧化
蜂胶中杨树胶检测方法

蜂胶中杨树胶检测方法蜂胶是蜜蜂采集的植物树脂与蜜蜂分泌的酵素通过加工制成的一种物质,在中药中有着广泛的应用。
杨树胶是一种常见的成分之一,也是蜂胶中的重要成分之一,它有抗炎、镇痛、抗过敏等药理作用,同时也是保健品中的成分之一。
因此,对于蜂胶中的杨树胶的检测方法的研究具有重要的意义。
液相色谱法是常用的检测蜂胶中杨树胶的方法之一。
其基本原理是利用溶液中部分成分在一定条件下在固定相上的分配与吸附特性,通过流动相对固定相进行分离提纯,利用检测器对洗出的各组分进行检测并输出相关数据。
在液相色谱法检测蜂胶中杨树胶时,可采用C18反相柱进行分离,流动相为乙腈-水,并采用紫外检测器进行检测。
在此条件下,可实现杨树胶的分离测定。
高效液相色谱法是另一种常用的检测蜂胶中杨树胶的方法之一。
其基本原理与液相色谱法相同,但较之液相色谱法,可以更好地进行高效分离。
在高效液相色谱法中,可采用C18反相柱进行分离,流动相可选用乙腈-水、L-甲硫氨酸pH调节液等,检测器可选用紫外检测器或荧光检测器等。
气相色谱法是另一种用于检测蜂胶中杨树胶的方法。
其基本原理是将样品在高温下挥发成气体,然后在柱子中进行分离,最后通过检测器检测分离后的化合物。
在气相色谱法检测蜂胶中杨树胶时,可先用CHCl3提取蜂胶中的化合物,然后在气相色谱法中采用聚硅氧烷柱进行分离,检测器可选用热导检测器或质谱检测器进行检测。
四、紫外-可见分光光度法检测蜂胶中杨树胶紫外-可见分光光度法是另一种可用于检测蜂胶中杨树胶的方法。
其基本原理是利用溶液中化合物吸收特定波长的光线后相应的光学性质的变化,从而确定杨树胶浓度。
在紫外-可见分光光度法检测蜂胶中杨树胶时,可采用波长为220-310 nm的紫外光谱仪进行检测。
总结来看,液相色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法、紫外-可见分光光度法均是可以用于检测蜂胶中杨树胶含量的方法。
在实际的应用中,应根据实际情况选择合适的检测方法和仪器设备,从而实现准确、精准的检测。
蜜蜂蜂胶品质检测技术大全

蜜蜂蜂胶品质检测技术大全蜂胶是蜜蜂从树脂、花粉等植物物质中采集、经过加工后在巢内产生的一种具有多种生物活性成分的天然产物。
在传统医学中,蜂胶被广泛应用于保健和治疗。
然而,由于蜂胶的复杂性质和多样性成分,其品质的评估和监测一直是一个挑战。
本文将介绍蜜蜂蜂胶品质检测的各种常见技术,并总结出一套蜂胶品质检测技术大全。
一、外观检测蜂胶的外观直接反映了其品质和可能存在的污染情况。
外观检测主要包括颜色、透明度、纯度等几个方面。
1. 颜色:正常蜂胶的颜色为琥珀色,但不同种类和产地的蜂胶颜色会有所不同。
通过目测或颜色计仪可以对蜂胶的颜色进行定量或定性的分析。
2. 透明度:蜂胶的透明度表明其纯度和过滤或精制过程的效果。
透明度可以通过目测或仪器进行定量分析。
3. 纯度:蜂胶的纯度是指其中是否含有杂质或其他成分。
可以通过视觉检查或使用显微镜来检测蜂胶中的杂质。
此外,还可以使用高效液相色谱仪等仪器对蜂胶进行定量检测。
二、理化性质检测蜂胶的理化性质对其品质和功效具有重要影响,以下是常见的几个理化性质检测项目。
1. 水分含量:水分是蜂胶中常见的污染源之一,过高的水分含量可能导致腐败和霉菌污染。
可以使用称重法或烘干法对蜂胶中的水分含量进行检测。
2. 溶解度:蜂胶的溶解度可以反映其溶解性和纯度。
可以使用不同溶剂(如乙醇、甲醇、水等)进行试验,通过观察溶液的透明度和颜色来评估蜂胶的溶解度。
3. 密度:蜂胶的密度与其质量和纯度有关。
可以使用密度计对蜂胶的密度进行测量。
4. pH 值:蜂胶的 pH 值可以反映其酸碱性质。
可以使用 pH 仪对蜂胶的 pH 值进行准确测量。
三、活性成分检测蜂胶中的活性成分是其保健和治疗作用的基础。
以下是蜂胶中常见活性成分的检测方法。
1. 黄酮类化合物:黄酮类化合物是蜂胶中的重要活性成分之一。
可以使用高效液相色谱仪对蜂胶中的黄酮类化合物进行定量测定。
2. 酚类化合物:酚类化合物在蜂胶中起到抗氧化和抗菌的作用。
蜂胶中杨树胶检测方法

蜂胶中杨树胶检测方法蜂胶是蜜蜂从杨树上采集的树脂,经过加工而成的一种天然产品。
蜂胶具有抗菌、抗炎、提高免疫力等多种功效,因此被广泛应用于医药、食品、化妆品等领域。
为了保证蜂胶产品的质量和安全性,需要对其中的杨树胶进行检测。
常用的杨树胶检测方法有物理性质检测、化学成分检测和微生物检测等。
物理性质检测是通过对杨树胶的外观、溶解性、熔点等进行检测来判断其品质。
化学成分检测则是通过测定杨树胶中的化学成分含量来评价其质量。
微生物检测则是检测杨树胶中是否存在细菌、真菌等微生物污染。
具体到各个检测方法的操作步骤和原理,下面将详细介绍。
一、物理性质检测1. 外观检测:将杨树胶取样放在观察盒中,用显微镜或放大镜观察其外观特征,包括颜色、形状、透明度等。
优质的杨树胶外观呈黄褐色或深褐色,形状规则,透明度高。
2. 溶解性检测:取一定量的杨树胶样品放入试管中,加入适量的溶剂(如水、酒精、氯仿等),摇匀后观察其溶解情况。
杨树胶在水中溶解性较差,在酒精和氯仿中溶解性较好。
3. 熔点检测:将杨树胶样品放入试管或熔化点仪中,加热至融化,观察杨树胶的熔点。
优质的杨树胶熔点较高,一般在150℃以上。
二、化学成分检测1. 提取杨树胶中的化学成分:将杨树胶样品粉碎后,加入适量的溶剂(如乙醇、醋酸酯等),经过提取和过滤,得到杨树胶中的化学成分提取液。
2. 化学成分分析:采用色谱、质谱、液相色谱等分析仪器对提取液进行分析,测定其中的有机酸、酚类化合物、黄酮类化合物等成分的含量。
三、微生物检测1. 取样:用消毒的采样器具取一定量的杨树胶样品,分别放入含有培养基的平皿中。
2. 培养:将平皿放入恒温培养箱中,保持适当的温度和湿度,使微生物在培养基上生长。
3. 计数:经过一定时间后,取出平皿,用显微镜或计数板对平皿上的菌落进行计数。
通过上述的物理性质检测、化学成分检测和微生物检测,可以全面评价和判定杨树胶的质量和安全性。
这些检测方法不仅可以用于蜂胶生产企业内部的质量控制,也可以作为蜂胶产品的质检标准,确保蜂胶产品的质量和安全性。
蜂胶中杨树胶检测方法

蜂胶中杨树胶检测方法蜂胶是蜜蜂所采集的树木芽、树叶的分泌物以及树干的脂质等,经过蜜蜂咀嚼、加工后形成的一种黄褐色或棕黑色的胶状物质。
蜂胶富含丰富的营养成分,具有抗菌、消炎、抗氧化等多种药理活性,并被广泛用于医药、化妆品等领域。
蜂胶中的杨树胶被认为是其主要成分之一,具有很高的药用价值。
准确快速地检测蜂胶中的杨树胶成分具有重要的科学意义。
蜂胶中杨树胶的检测方法多种多样,下面介绍一种常用的方法:一、提取蜂胶中的杨树胶1. 准备工具和试剂:甲醇、过滤纸、培养皿、玻璃棒、滤纸、石英离心管等。
2. 提取过程:将适量的蜂胶样品放入培养皿中,用甲醇进行适当的浸泡,搅拌均匀后,静置15-30分钟,使其充分溶解。
然后,用滤纸将溶液过滤,并将过滤液收集在石英离心管中。
二、纸层析法检测杨树胶1. 准备工具和试剂:滤纸、詹伯氏试剂、氯化钠等。
2. 纸层析法:将过滤的蜂胶样品滴于滤纸上,待其干燥后,浸泡在已经预先配置好的评估试剂中,如詹伯氏试剂。
在其他相同条件下准备一系列的标准品。
3. 观察结果:观察标准品与待检测样品在试剂中的行为差异,包括迁移速度以及可能出现的色斑等。
三、红外光谱法检测杨树胶1. 准备工具和试剂:红外分光光度计、KBr等。
2. 红外光谱法:将提取的杨树胶样品与适量的KBr混合,搅拌均匀后,再压成薄片。
3. 进行测试:将薄片放入红外分光光度计,测定其红外光谱图。
通过对比样品和参考杨树胶样品的光谱图差异,确定待测样品中杨树胶的含量。
以上介绍的方法只是蜂胶中杨树胶检测的常见方法之一,根据实际需求和仪器设备的不同,还可以采用其他方法,如高效液相色谱法、气相色谱法等。
这些方法的选择应根据检测目的、样品性质以及实验条件来确定,以实现更准确、快速地检测蜂胶中杨树胶的成分。
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46 中国蜂业蜂胶成分检测方法进展经现代科学分析,已从蜂胶中分离出300多种化学成分,其中有黄酮类化合物、酸、醇、酚、醛、酯、醚以及烯、萜类化合物和多种氨基酸、脂肪酸、酶类、维生素、微量元素等。
蜂胶因其化学成分复杂且生物学活性广泛而成为国内外研究与开发的热点。
1 蜂胶成分检测的标准目前,我国有关蜂胶的相关标准(见表1)。
现有的这些蜂胶相关标准主要从蜂胶形态、色泽、气味、滋味、总黄酮含量、氧化时间、乙醇浸出物、白杨素、高良姜素含量等指标评价蜂胶质量,对蜂胶质量控制起到了一定作用。
但缺少特征鉴别和特征成分含量检测指标等项目,从而影响产品质量控制和监管的有效实施。
2 蜂胶成分检测的方法2.1 蜂胶感官的判别(见表2)■ 毛日文 杨琴 蒋云云 邵兴军2.2 蜂胶中黄酮类物质的检测蜂胶总黄酮含量是一个重要的标志性成分指标。
现行蜂胶总黄酮的主要测定方法(见表3)。
对总黄酮的检测不同的企业在检测方法上存在差异,所测数据与实际含量可能存在较大的偏差。
杨琴,马海燕[1]等对蜂胶提取物及蜂胶保健食品的质量标准及质量安全控制进行了分析,用以上方法对同一批蜂胶浸膏的黄酮含量进行了检测,发现结果相差很大。
对比分析蜂胶总黄酮成分不同的检测方法,笔者认为采用高效液相色谱法测定其中某几种黄酮的含量,再以它们的总和乘以一个相应的系数,可以相对准确反映蜂胶中总黄酮的真实含量。
南垚、周立东对蜂胶及杨树叶、芽中的水杨苷和芦丁两种糖苷的含量进行了HPLC 测定,结果在蜂胶样品中均表1 我国有关蜂胶的相关标准QUALITY CONTROL没有检测出这两种糖苷。
因此他们提出,在蜂胶中可能不含有苷类物质。
而在我国蜂胶的国家标准和行业标准中,对蜂胶中黄酮类物质的测定,采用了比色法和高效液相色谱法,都以芦丁作为标准物质,因此这些方法值得商榷。
2.3蜂胶中酚酸类化合物的检测有机酸成分也是蜂胶的成分之一,现酚酸类化合物检测方法执行的国家质检总局颁布了《GB/T23196-2008 蜂胶中阿魏酸含量的测定方法液相色谱-紫外检测法》[2]。
高效液相法近年来被应用于蜂胶中酚酸类成分的分析,索志荣[3]采用高效液相色谱分析方法测定了我国不同省份的9个蜂胶浸膏样品中咖啡酸、p-香豆酸、反式阿魏酸、肉桂酸、乔松素、白杨素和高良姜素7种多酚化合物,孟霞[4]等建立了高效液相色谱同时测定蜂胶中的苯甲酸、咖啡酸、阿魏酸、香草酸、肉桂酸、绿原酸的方法。
2.4 蜂胶中挥发性成分的检测蜂胶中挥发性成分是重要的质量指标,目前还没有统一的检测方法。
挥发性成分有萜烯类、醇、醛、酮、酯等,一般利用气相色谱以及气质联用来测定。
蜂胶中挥发APICULTURE OF CHINA 4748 中国蜂业性成分的测定逐步成为研究的热点。
马海乐[5]等利用17个共有峰来识别蜂胶CO 2萃取物的质量。
邵兴军[6]等通过GC/MS联用,对蜂胶中的萜烯类成分进行了研究,鉴定出35个萜烯类化合物,占总挥发油成分的51.03%。
贺丽苹[7]等通过GC/MS联用,对蜂胶中的萜烯类成分进行了初步研究,鉴定出12个萜烯及醇类化合物,利用固相微萃取(SPME)对蜂胶挥发性成分进行提取,采用气相色谱-质谱联用技术对提取物进行定性定量研究,并与乙醇提取法对蜂胶挥发性成分特别是萜烯类物质的提取效果进行了比较,建立了SPME-GC/MS联用技术分析蜂胶中香气挥发性成分的方法,得到较理想的结果。
2.5 有毒有害物质的检测农业部颁发的《NY5136-2002 无公害食品-蜂胶》对蜂胶中的微生物指标、重金属指标、农药残留指标等检验方法均进行了规范。
近年来,国内外对蜂胶中农药残留的检测方法研究较多。
Bononi [8]等建立了LC/MS 方法检测蜂胶乙醇提取物中的氯霉素。
Chen [9]等采用气相色谱-电子捕获检测器与双柱固相萃取串联检测蜂胶中的有机氯杀虫剂;Zhou [10]等首次采用HPLC 法测定蜂胶中的4 种四环素类残留。
2.6 蜂胶中蜂蜡及其他成分的检测蜂蜡在蜂胶中占30%-40%,农业部颁发的标准《NY5136-2002 无公害食品-蜂胶》中规定蜂蜡和75%乙醇不溶物含量≤45%。
该标准采用重量法测定75%乙醇可溶物含量后,采用减量法测定了蜂蜡和75%乙醇不溶物含量。
骆尚骅[11]采用索氏提取-重量法测定了蜡类含量。
此外,胡福良[12]等对蜂胶中的酶活力、灰分、维生素、微量元素以及矿物质等定量分析检测给出了相应的方法。
2.7蜂胶与树胶判别检测方法研究目前所有蜂胶标准中,标志性成分只有总黄酮项目,而杨树胶也含有此成分,因此,采用现有蜂胶标准无法鉴别蜂胶与杨树胶。
蜂胶与树胶的鉴别检测方法是当前研究热点,主要采用液相色谱法、液相色谱串联质谱法、气相色谱质谱法、紫外光谱法等方法。
树胶的图谱与蜂胶的图谱有许多相似性,需要大量的样品进行图谱对照才有可能做出特征图谱。
王小平[13]等利用HPLC指纹图谱法鉴别蜂胶和树胶,确立蜂胶13个特征峰,8号峰、10号峰较之树胶甚微,可以作为区别二者的特殊峰;盛文胜[14]等采用高效液相色谱法分析测定不同蜂胶样品,以八种黄酮和肉桂酸为考察指标,发现蜂胶与树胶在肉桂酸含量上存在一些差异;胡福良研究分析8个不同地区蜂胶,与杨树胶表现出完全不同的指纹图谱特征。
其中蜂胶中有2个共有峰是杨树胶中没有的特征指纹峰,而3个不同来源的杨树胶中有3个共有峰是蜂胶中没有的特征指纹峰,5个特征峰差异明显。
胡福良还进一步以糖苷酶研究破解真假蜂胶鉴别,通过分析11个杨树胶样本及多个国产和巴西蜂胶样本,发现杨树胶均检测到水杨苷,而中国产的蜂胶、巴西产的绿蜂胶,都检测不到水杨苷,从而认为水杨苷是鉴别真假蜂胶的一个突破口。
但所有这些方法还不能完全有效地对树胶与蜂胶做出判别,特别是蜂胶中掺入杨树胶更难鉴别,需要继续开展这方面的研究。
3 存在的问题3.1 以总黄酮为标志性成分指标过于单一目前,国内对于蜂胶及蜂胶制品的质量均以总黄酮含量来衡量,致使形成一个误区,是否黄酮含量越高,质量越好?其实蜂胶的生物作用是通过其众多有效成分协同作用的,并非仅仅是黄酮类物质具有的生理功效。
因此单独以黄酮类成分含量来判定蜂胶品质是不科学的。
蜂胶质量标准应增加多个主要的标志性成分,如酚酸类、萜烯类化合物指标等。
3.2 各成分指标检测的标准缺乏统一性蜂胶中总黄酮检测方法就缺乏统一性。
不同的企业采蜂胶中总黄酮含量的测定方法GB/T 20574-2006保健食品中总黄酮的测定《保健食品检验与技术评价规范》(2003)蜂胶中八种黄酮的含量测定方法GB/T 19427-2003表3 蜂胶总黄酮的测定方法QUALITY CONTROL含 量(%)29.815.748.216.6表4 不同总黄酮测定方法的检验结果用不同的检验方法,而且得到不同的检验结果,从而不具备可比性。
酚酸类、萜烯类物质更因为没有纳入蜂胶的标志性成分,其检验尚无统一的标准。
这样,就为根据检测指标的数据结果进行品质比较带来了困难。
4 蜂胶成分检测发展的方向随着现代各种检测技术的不断发展,光谱、薄层色谱、气相色谱、气质联用、液质联用、核磁共振、毛细管电泳质谱联用等技术,为蜂胶中的黄酮类、多酚类物质和特有的芳香性萜烯类成分进行分析和结构鉴定提供了支持。
近年来,指纹图谱技术已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效手段,也引起了蜂胶研究者的广泛关注。
巴西、乌拉圭、智利都有学者建立不同地区来源蜂胶的指纹图谱。
国内在这方面也有诸多研究,如王小平等采用高效液相色谱法建立蜂胶指纹图谱分析方法,用以鉴别蜂胶和树胶;马海乐[15]等采用气相色谱法(GC)建立蜂胶超临界CO2萃取物(SEP)的指纹图谱;江大源生态与广州中医药大学中药学院研究中心长期合作,目前已收集了中国不同地域、不同胶源植物、不同季节的蜂胶样品100多种,利用HPLC指纹技术,通过对蜂胶定性鉴别,比较液相指纹图谱中的选定共有峰的特征,经过数年的摸索,已建立了100多种的蜂胶样品指纹图谱库。
应用指纹图谱技术进行蜂胶原料及蜂胶产品的指纹图谱研究和开发,最终建立科学的蜂胶质量评价方法,这是蜂胶检测技术未来努力的方向。
参考文献[1] 杨琴,马海燕,朱美玲等.蜂胶提取物及蜂胶保健食品的质量标准探讨及质量安全控制[J]. 蜜蜂杂志,2008,28(1):10-14.[2] GB/T23196-2008 蜂胶中阿魏酸含量的测定方法液相色谱-紫外检测法.[3] 索志荣,曹炜,秦海燕.蜂胶浸膏中7种多酚化合物的高效液相色谱法分析[J].食品科学,2008,29(8):496-498.[4] 孟霞,彭敬东,刘绍璞.高效液相色谱法测定蜂胶液中的6种有机酸[J].西南大学学报,2008,30(9):66-70.[5] 马海乐,邵兴军等. 蜂胶超临界萃取CO2萃取物的GC指纹图谱研究[J].养蜂科技,2005,(1):36-38.[6] 邵兴军 ,毛日文等.蜂胶流态化超临界CO2萃取工艺研究及挥发油成分分析[J].中国蜂业,2009,60(8). [7] 李雅萍,贺丽苹,陈玉芬,等.SPME-GC/S联用技术分析蜂胶中挥发性成分的研究[J].现代食品科技,2007,97(7):78-8.[8] Bononi M, Tateo F. Liquid chromatography/tandem massspectrometry Efficiency of propolis extract against mitochondrialstress induced by antineoplasic agents (doxorubicin and vinblastin)in rats.analysis of chloramphenicol in propolis extractsavailable on the Italian market. Journal of Food Compositionand Analysis, 2008, 21: 84-89.[9] Chen F, Chen LZ, Wang Q, et al. Determination oforganochlorine pesticides in propolis by gas chromatography -electron capture detection using double column series solid -phase extraction. Anal. Bioanal. Chem., 2009, 393: 1073-1079.[10] Zhou JH, Xue XF, Li Y, et al. Multiresidue determination oftetracycline antibiotics in propolis by using HPLC-UV detectionwith ultrasonic-assisted extraction and two-step solid phase extraction.Food Chemistry, 2009, 115: 1074-1080.[11] 骆尚骅.蜂胶质量控制的几个指标和检测方法[J].中国养蜂,1999,50(4):35-36[12] 章彬佳,胡福良,郑火青,等.蜂胶中酶活力的测定.中国蜂业,2008,59(6):7-9[13] 王小平,林励,白吉庆,等.利用HPLC指纹图谱法鉴别蜂胶和树胶有研究[J].陕西农业科学,2009(3):133-134.[14] 盛文胜,杜青桃,李树岚,等.蜂胶与杨树胶中八种黄酮与肉桂酸含量的测定.中国蜂业,2008,59(3):7-8.[15] 马海乐,李倩,赵杰文,等.蜂胶超临界CO2萃取物GC指纹图谱及聚类分析[J].江苏大学学报,2011,32(1):1-5.(作者毛日文,杨琴,蒋云云,邵兴军单位为江苏省超临界萃取天然药物工程技术研究中心;江苏江大源生态生物科技有限公司)(责编:高爱玲)APICULTURE OF CHINA 49。