黑腹果蝇黑条体突变型基因的定位与克隆
果蝇基因组与功能基因研究进展_刘素宁
48 卷
上的困难，阻 碍 了 异 染 色 质 的 基 因 组 分 析，直 到 2007 年异染色质的测序成功，这些问题才得到很 好的解决。
2. 1 表达序列标签和 cDNA 资源 表达序列标签为基因的存在和基因结构提供
了 有 价 值 的 证 据。 BDGP 建 立 Drosophila Gene Collection（ DGC） ，利用表达序列标签进行计算分 析，从而鉴定假定的全长 cDNA。全长 cDNA 为确 定基因的内含子和外显子结构以及选择性剪接的 探测提供了 最 精 确 的 证 据，同 样 为 蛋 白 质 组 学 和 基因功能分析提供了重要的资源。第 1 次基因组 发布利用了大约 80 000 个表达序列标签和 2 500 个全长 cDNA，第 3 次发布增长到了约 250 000 个 表达序列标 签 和 8 921 个 全 长 cDNA （ Drysdale， 2003） 。到目前为止，根据不同的发育阶段和发育 组织，GenBank 共收录了 821 005 个黑腹果蝇表达 序 列 标 签 （ http： / / www． ncbi． nlm． nih． gov / nucest） 。
2. 3 转座因子 转座因子（ transposable elements，TEs） 是一类
可移动的重复 DNA 序列，普遍存在于真核生物基 因组中，对基 因 组 结 构、功 能、进 化 具 有 重 要 的 作 用 （ Wessler，2006） 。真核生物基因组含有大量的
重复序列，这 些 重 复 序 列 有 很 大 一 部 分 是 由 转 座 因子组成，它 们 能 插 入 到 基 因 中 或 基 因 调 控 元 件 中，从而有可能影响基因的功能，也能触发染色体 重新排列 （ Biemont and Vieira，2006） 。45% 的人 类基因组中含有转座因子，然而只有 0. 1% 的突变 是由于它们插入到基因中。而在黑腹果蝇基因组 中，只有 15% 的基因组含有转座因子，但是黑腹果 蝇 80% 的自发突变是由于转座因子插入或转座因 子引起的染 色 体 重 新 排 列 造 成 的，这 说 明 宿 主 基 因组在 控 制 转 座 因 子 活 力 上 是 不 同 的 （ Deloger et al． ，2009） 。基因组的第 3 次发布是首次精确 描绘重复序列，Kaminker 等 （ 2002） 鉴定出 1 500 多 种 转 座 因 子，几 乎 占 常 染 色 质 的 4% 。 Fontanillas 等 （ 2007） 对黑腹果蝇基因组常染色质 部分的转座 因 子 精 细 分 布 进 行 了 分 析，结 果 指 出 转座因子插 入 点 偏 向 于 生 殖 系 表 达 基 因，局 部 转 座因子密度 是 由 基 因 组 局 部 紧 密 度 决 定 的，所 以 基因组结构和基因表达对转座因子的精细分布有 重要影响。Deloger 等 （ 2009） 对已测序的黑腹果 蝇基因组进行鉴定，发现约 73% 的转座因子家族 可以进行转 录，这 说 明 黑 腹 果 蝇 基 因 组 含 有 大 量 的活性因子，他们鉴定了 202 个转座因子拷贝，发 现其中 69 个拷贝可以被准确的定位在单一基因 座上，一半的拷贝主要插入在基因的非编码区域。
黑腹果蝇抗真菌肽drs 及其同系物基因的原核表达与蛋白纯化研究
中国农业科学 2007,40(2):391-398Scientia Agricultura Sinica黑腹果蝇抗真菌肽Drs及其同系物基因的原核表达与蛋白纯化研究杨婉莹1，温硕洋2，邓小娟1，叶明强1，夏庆友3，曹 阳1，黄亚东4（1华南农业大学动物科学学院蚕丝科学系, 广州 510642; 2华南农业大学资源环境学院昆虫学系, 广州 510642; 3西南大学蚕学与生物技术学院，农业部蚕桑学重点实验室, 重庆 4007162; 4曁南大学医药生物技术研究开发中心, 广州 510632）摘要：【目的】Drosomycin（Drs）是从黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)中鉴定发现的对丝状真菌有广谱抗性的抗真菌肽因子,此外，在黑腹果蝇基因组中，还存在另外6条Drs同系物的基因序列，对它们推导的氨基酸序列具有与Drs相同的保守位点和CSαβ模体结构。
为鉴定Drs及其6个同系物的抗性功能差异，研究其分子结构与功能的关系，需要对这些同系物基因进行克隆表达，获得有生物学活性的纯化样品。
【方法】本文采用PCR分段互补合成的方法准确地获得了Drs同系物基因，并克隆至pET-3C载体上，转化到宿主菌E.coli Origami（DE3）中进行诱导表达，表达产物经阳离子CM Sepharose TM Fast Flow层析、凝胶过滤Sephacryl S-100 High Resolution 层析和包涵体的复性及Sephadex G-25脱盐等纯化处理后，进行抑菌活性检测。
【结果】经纯化的7个Drs同系物的短肽样品，除Drs-lI外，其它的Drs同系物样品对供试真菌水稻立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)均有较强的抑制作用。
【结论】表明本研究中使用的纯化及复性方法对具有多个二硫键的小分子多肽是比较有效的。
关键词：黑腹果蝇；抗真菌肽；Drosomycin；同系物；表达；蛋白纯化Research on Expression in E.coli and Protein Purification of the Antifungal Peptide Drs and Isoforms from Drosophila melanogaster YANG Wan-ying1, WEN Shuo-yang2, DENG Xiao-juan1, YE Ming-qiang1, XIA Qing-you3,CAO Yang1, HUANG Ya-dong4（1Department of Sericulture science, College of Animal science, South China of Agricultural University, Guangzhou 510642;2Department of Entomology, College of Natural Resource and Environment, South China Agricultural University, Guangzhou 510642; 3Key Sericultural Laboratory of Agriculture Ministry, College of Sericulture and Biotechnology, Southwest University, Chongqing, 400716; 4Biopharmaceutical Research and Development Center, Jinan University, Guangzhou 510632）Abstract:【Objective】Drosomycin (Drs) is an insect antifungal peptide from Drosophila melanogaster which has broad activity against filamentous fungi. Besides Drs, there are six gene sequences of its isoforms in the genome of Drosophila melanogaster. The deduced acid amino sequences of them have the same conservative sites and the CSαβmotif. To identify the functional divergence of Drs and its six isoforms and to study the relation between their molecular structure and function, the genes of seven isoform were expressed and the expression products with biological activity were purified.【Method】In this paper, the gene sequences of Drs isoforms were synthesized by two steps of PCR, cloned to the pET-3C vector and expressed in the E.coli Origami (DE3) by the induction of IPTG. The expression products were purified by Cation exchange chromatography with CM Sepharose™ Fast Flow and gel filtration chromatography with Sephacryl S-100 High Resolution. The pooled samples were treated to retrieve the dimensional structure and then loaded to Sephadex G-25 to desalt. The samples were used to determine antifungal activity. 【Result】收稿日期：2005-12-29；接受日期：2006-11-20基金项目：国家重点基础研究发展计划（973计划）项目（2005CB121000）；国家自然科学基金项目（30370716）；广东省自然科学基金项目（010294）（032256）（04020553）、广东省科学技术计划重点项目（2003C104042）作者简介：杨婉莹（1977-），女，山东日照人，讲师，博士，研究方向为昆虫分子生物学。
果蝇的性状、生活史观察及饲养
一、实验目的
1.了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点； 2.区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性 状特征； 3.掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和 技术。
二、实验材料、用具及试剂 实验材料、 果蝇：野生型，白眼黑身，白眼小翅，红眼残翅， 黑檀体。 双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板、 新毛笔、乙醚、酒精
卵：羽化后的雌蝇一般在12小时后开始交配，两天后才能 产卵。卵长0.5mm，为椭圆形，腹面稍扁平，被绒毛膜， 被绒毛膜， 被绒毛膜 在背面的前端伸出一对触丝（filament） ，它能使卵附着 （ ） 在食物(或瓶壁)上，不致深陷到食物中去。
幼虫：从卵孵化出来后，经过两次蜕皮，发育成三龄幼 幼虫 虫，此时体长可达4-5mm。肉眼可见其前端稍尖部分为头 部，上有一黑色斑点即为口器。口器后面有一对透明的唾 液腺，透过体壁可见到一对生殖腺位于躯体后半部上方的 两侧，精巢较大，外观上是一明显的黑点，而卵巢则较小， 可以此作为鉴别。幼虫活动力强而贪食，它们在培养基上 爬行时，留下很多条沟，沟多而且宽时，表明幼虫生长良 好。
思考题
1、绘制雄性果蝇性梳图。 、绘制雄性果蝇性梳图。 2、如何区分果蝇的性别？ 、如何区分果蝇的性别？ 3、简述果蝇被麻醉死亡后的状态。 、简述果蝇被麻醉死亡后的状态。
果蝇的转移 准备转移果蝇的 亲本及培养基
幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上。
2 果蝇性状的观察
1）果蝇的麻醉处理 ） 在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等 操作中，应先将果蝇麻醉，使其保持安静状态。麻醉方 法如下： （1）准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶， 并配以脱脂棉塞。 （2）去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对，培养瓶 在上，一手稳住两瓶，另一手轻轻震拍培养瓶，使果蝇 落入麻醉瓶中。
黑腹果蝇 3 号染色体裂翅平衡致死位点的发现及 2 号、 号
DOI: 10.3724/SP.J.1005.2010.01051
研究报告
黑腹果蝇 3 号染色体裂翅平衡致死位点的发现及 2 号、 3 号染色体裂卷翅双平衡染色体的建立
2.2.3 裂翅与 3 号染色体标记杂交
黑檀体(e)是 3 号染色体上的隐性标记, 遗传学位 置为 3R: 3-70.7。裂翅与黑檀体进行杂交, F1 代产生裂 翅和野生型两种表型, 裂翅个数(184, ♀102♂82)与野 生型个数(207, ♀98♂109)的比例符合 1: 1 (P>0.05)。将 F1 代裂翅雌蝇与黑檀体雄蝇测交产生 F2 代。
表 1 果蝇品系及特征
品系名称
品系特征
裂翅(L)
红眼、灰体、翅缘后部开裂
卷翅(Cy) 红眼、灰体、卷翅
黑檀体(e) 红眼、黑檀体、直翅
982 紫眼(p) 紫眼、灰体、直翅
野生型(OR) 红眼、灰体、直翅
基因染色体位置 待定 2号 3号 2号
1.2 方法
1.2.1 裂翅遗传规律的验证
F1 代的生成: 由裂翅与野生型进行正反向杂交 产生。
对实际观察值与推断的理论值进行χ2 适合性检 验[3]。
2 结果与分析
2.1 裂翅品系基于平衡致死的杂合子纯繁
2.1.1 裂翅与野生型杂交 F1 代
裂翅与野生型进行正反交, F1 代均产生裂翅和 野生型两种表现型, ♀裂翅×野生型♂杂交, 裂翅个 数(184, ♀102♂82)与野生型个数(207, ♀98♂109)的 比例符合 1: 1 理论比(P>0.05); ♀野生型×裂翅♂杂交, 裂翅个数(162, ♀86♂76)与野生型个数(178, ♀86♂92) 的比例也符合理论比 1: 1(P>0.05)。
实验二：果蝇的双因子实验
实验二 果蝇的双因子实验一：目的1：掌握实验果蝇的杂交技术并学习记录交配结果和掌握统计处理方法2：通过双因子杂交，验证和加深理解遗传学基本规律---------自由组合规律3:验证两对非等位基因间的自由组合现象和遗传规律二：原理1）、黑腹果蝇 (Drosophila melanogaster) 是被人类研究得最彻底的生物之一。
是一种原产于热带或亚热带的蝇种。
它和人类一样分布于全世界各地，并且在人类的居室内过冬。
在遗传，发育，生理， 和行为等的研究方面，果蝇是最常见的研究对象之一。
原因是它易于培养， 繁殖快，使用经济： 它在室温条件下， 十天就可以繁殖一代； 且只有四对染色体， 易于遗传操作； 还有它有很多突变体可以利用。
中文学名： 黑腹果蝇 拉丁学名： Drosophila melanogaster 别称： fruit fly 二名法： Drosophila melanogaster 界： 动物界 门： 节肢动物门Arthropoda 纲： 昆虫纲 Insecta 亚纲： 有翅亚纲目： 双翅目 Diptera 亚目： 长角亚目、短角亚目 科： 果蝇科Drosophilidae 属： 果蝇属Drosophila 亚属： Sophophora 种： 果蝇 分布区域： 全球温带及热带气候区 2）、果蝇的生态学特性果蝇又称小果蝇（Drosophilidae 科，Drosophila 属），英文全名 fruit fly 。
它和危害农作物的果实蝇（Trypetidae 科，Bactocera 属）不同，果实蝇危害瓜果类果实非常严重，是农业技术上的一大隐忧.刚形成的蛹呈微黄色，之后颜色逐渐加深，羽化前呈深褐色。
果蝇类昆虫在自然条件下大多数以腐烂的瓜果等为食，可为害多种瓜果蔬菜及许多植物的多汁器官，甚至连甜酒也成为取食对象n]。
研究表明，果蝇具有强烈的趋化性，嗅到水果发出的气味就会飞来取食、交尾和产卵[7]。
黑腹果蝇的分离变相因子 The Segregation Distorter inDrosophila melanogaster
． 发 Ｄ染色体与Ｓ 染色体在此区域存在明显差异， ｃ Ｉ 切，Ｄ 染色体产生７ｂ 析 现Ｓ Ｄ＋ 用Ｅｏ 酶 Ｓ Ｒ ｋ 的片段， Ｄ染 而Ｓ
４ 期
郝 莉等： 黑腹果蝇的分离变相因子
５ ９
色体则产生 １ｋ ２ｂ长片段， 进一步对其酶切鉴定， 确证 Ｓ Ｄ比Ｓ 多出一个５ｂ串联重复片段（ ） Ｄ＋ ｋ 图２０ 利用 Ｐ因子介导的种系转化（ ｒ ｉ ｔ ｎｆｒ ｔｎ将此片段引人携带Ｓ 的野生 Ｄ ｍ ｌ ｏａｔ・ Ｉ ｇ ｍｌｅ ｓ ｍａｏ） ｅ ｎ ｒ ｏ ｉ ａ Ｄ＋ ． ａ ｇｓ ｉ ｌ ｅ ｎ ｅ第Ｉ染
Ｔ ｅ ｒｇｔ ｎ ｔｒ ｒ Ｄ ｏｏｈａ ｌ ｏａｔ ｈ Ｓｇｅａｉ Ｄｓ ｔ ｉ ｒｓ ｉ ｍ ａ ｇｓ ｒ ｅ ｏ ｉｏ ｅ ｎ ｐ ｌ ｅ ｎ ｅ
Ｈ Ｑ １ ｕｇ ， Ｄ Ｉ ｏｈａ Ａ Ｌ Ｃ ｎ Ｉ ２ Ｚｕ－ｕｌ ｉ ｈ ， ＷＵ Ａ ｈ
（ Ｄ ｐｒ ｅ ｔ ｅ Ｂｏｏｙ １ ｅａｔ ｎ ｏ Ｃ ｌ ｉｌ ＆Ｇｅｅｃ， ｌｇ ｏ ＬｆＳｉ ｃｓ Ｐｋｎ Ｕ ｉ ｒ ｔ， ｉ ｇ ０７， ｉａ ． ｍ ｆ ｌ ｇ ｎｔ ｓ Ｃ ｌ ｅ ｉ ｃ ｎｅ， ｉｇ ｖ ｉｙ Ｂ ｊ １ ８ １ Ｃ ｎ ； ｉ ｏｅ ｆ ｅ ｅ ｅ ｎ ｅｓ ｅｉ ０ ｎ ｈ ２ Ｄ ｐ ｒ ｅｔ ｃｌｇ ａｄ ｏ ｔ ｎ Ｕｎ ｅｓｙ ｉ ｇ ， Ａ Ｉ ６６ ７ ． ａｔ ｎ ｏ Ｅ ｏ ｙ Ｅ ｌ ｉ ． ｉ ｒｉ ｏ Ｃｈ ａｏ Ｕ ， ０ ３） ｅ ｍ ｆ ｏ ｎ ｖ ｕ ｏ ｖ ｔ ｆ ｃ Ｓ Ｌ
实验1-5果蝇实验精选课件
一、实验目的 1.掌握果蝇常见突变类型和性别的鉴定方法； 2.了解果蝇的生活史和饲养。
坚持
二、实验原理：
• 果蝇(Drosophila )属于昆虫纲，双翅目。 • 特点：生活史短，易饲养，繁殖快，染色体少，
突变型多，个体小。
坚持
，沿对角线对折然后展平，平置 于桌面，将麻醉之果蝇倒于对角线折痕 上，以毛笔拨弄果蝇使其均匀分散于对 角线折痕上，然后沿对角线将雌雄果蝇 分类拨入各侧计数。
坚持
杂交试验基本步骤：
1、收集处女蝇：每组做正、反交各1瓶，将母本旧瓶中的果蝇全 部麻醉处死，在8-12h内收集处女蝇5只，和5只父本雄蝇转移 到新的培养瓶中，贴好标签，于25℃培养。 2、7d后，F1幼虫出现，处死杂交亲本。 3、再过4-5天，F1成蝇出现。在处死亲本7天后，集中观察记录 F1表型和性状；选取5对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25℃ 培养，贴好标签； 4、7d后，处死F1亲本； 5、再过5-7d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d。
2、挑处女蝇时，每次必须把成虫一只不留地取出，并每次间隔不 能超过12小时。
3、移入新培养瓶时，须将瓶横卧，然后将果蝇挑入，待果蝇清醒 过来后，再把培养瓶竖起，以防果蝇粘在培养基上。 4、刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，难辨♀♂，务必小心区别。 5、注意使用乙醚麻醉剂，用完后应立即盖好。实验室不能有明火。 6、本实验期间，实验室全开放，各组成员必须保持实验室的安全、 安静、整洁、有序。
坚持
果蝇的系列杂交实验
1、果蝇的单因子实验杂交组合 18＃♀ x 2 ＃♀ x 2
＃♂
(正交）
18＃♂ (反交)
2、果蝇的伴性遗传杂交组合
18＃♀ x
果蝇实验技术
果蝇实验技术一、实验原理果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有2500个种。
通常用作遗传学实验材料的是黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）。
用果蝇作为实验材料有许多优点：1. 饲养容易。
在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。
2. 生长迅速。
十二天左右就可完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间内就可获得大量的子代，便于遗传学分析。
3. 染色体数少。
只有4对。
4. 唾腺染色体制作容易。
横纹清晰，是细胞学观察的好材料。
5. 突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察。
果蝇的生活史：果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。
一般来说，30℃以上温度能使果蝇不育或死亡，低温能使生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度为20～25℃。
生活周期长短与饲养温度的关系雌蝇→减数分裂→卵受精雄蝇→减数分裂→精子羽化（第八天）（可活26～33天）产第一批卵蛹（第四天）第二次蜕皮第一批卵孵化（第二天）（第零天）第一次蜕皮幼虫（第一天）果蝇的生活周期和各发育阶段的经过时间果蝇的性别及突变性状的鉴别：果蝇的每一体细胞有8个染色体（2n=8），可配成4对，其中3对在雌雄果蝇中是一样的，称常染色体。
另外一对称性染色体，在雌果蝇中是XX，在雄蝇中是XY。
果蝇的雌雄在幼虫期较难区别，但到了成虫期区别相当容易。
雄性个体一般较雌性个体小，腹部环纹5条，腹尖色深，第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏，称性梳（Sex combs）。
雌性环纹7条，腹尖色浅，无性梳。
实验中选用的果蝇突变性状一般都可用肉眼鉴定，例如红眼与白眼，正常翅与残翅等。
而另一些性状可在解剖镜下鉴定，如焦刚毛与直刚毛等。
现列表如下：实验中使用的果蝇突变品系二、实验材料不同品系的黑腹果蝇。
三、培养基和培养瓶1. 果蝇饲料的配制果蝇是以酵母菌作为主要食料的，因此实验室内凡能发酵基质，都可用作果蝇饲料。
黑腹果蝇中LTR逆转录转座子的分布与进化研究的开题报告
黑腹果蝇中LTR逆转录转座子的分布与进化研究的
开题报告
背景介绍：
黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）是一种普遍存在于全球各地
的果蝇，是研究生物学和基因工程的重要模式生物之一。
转座子是一类
可移动的遗传因子，能够在基因组内或基因组之间自主移动和复制。
其中，LTR逆转录转座子是一种较为复杂和广泛存在于生物体中的逆转录转座子。
现有的研究表明，黑腹果蝇中的LTR逆转录转座子具有广泛的分
布和多样性，但其进化模式与机制仍未得到深入研究。
研究目的：
本研究旨在通过对黑腹果蝇中LTR逆转录转座子的系统分析和进化
研究，探讨其分布和多样性的特征，并进一步探讨其可能的进化模式和
机制。
研究方案：
1. LTR逆转录转座子的筛选：采用生物信息学方法和实验验证相结
合的策略，对黑腹果蝇基因组序列中的LTR逆转录转座子进行筛选和鉴定。
2. 分子进化分析：通过对LTR逆转录转座子序列进行系统演化分析，探讨其进化路径和机制。
3. 多样性分析：对所筛选到的LTR逆转录转座子进行多样性分析，包括插入位点的多样性和复制速率的变化等方面。
4. 比较基因组学分析：通过比较与黑腹果蝇近缘的其他果蝇，探讨LTR逆转录转座子在不同物种中的分布和进化特点。
预期结果：
本研究预计能够对黑腹果蝇中LTR逆转录转座子的多样性和进化机制进行深入探讨，揭示其在黑腹果蝇基因组演化和适应性进化中的作用和贡献。
同时，还能够为相关基因工程和转基因研究提供理论基础和实验依据。
例谈CIB法在筛选和鉴定果蝇突变体中的应用[权威资料]
例谈CIB法在筛选和鉴定果蝇突变体中的应用摩尔根利用突变果蝇发现了伴性遗传，但定量筛选和鉴定果蝇，还依赖于摩尔根的学生Muller所发展的ClB法。
1 ClB法简介ClB系果蝇中，X染色体上有三个特殊序列：C为染色体某片段位置颠倒的区段，可以抑制带有ClB的X染色体与另一X染色体交叉互换；隐性致死突变基因l，致使该基因的纯合果蝇致死；显性棒眼基因B，有ClB的X染色体的雌蝇具备棒眼性状。
检测的方法是让经X射线照射的受检雄蝇与具有ClB的X染色体和普通X染色体的雌蝇交配（图1），产生的F1棒眼雌蝇再与正常眼雄蝇杂交（图2），观察子二代的性状。
（1）如果F2中没有雄蝇，则受检雄蝇的X染色体产生了隐形致死突变基因l；（2）如果F2中，雌蝇∶雄蝇=2∶1，则受检雄蝇的X染色体没有产生隐形致死突变基因l。
如果不是致死变异，只是普通的隐性突变，则F2雄蝇都表现为隐性突变性状。
因此，可以让F1全部雌蝇分别与正常眼雄蝇交配，调查F2中不出现雄蝇或突变性状的雄蝇，可检测各种突变的频率。
2 例题（2014年江苏卷第33题改编）有一果蝇品系，其一种突变体的X染色体上存在ClB区段（用XClB表示）。
B基因表现显性棒眼性状；l基因的纯合子在胚胎期死亡（XClBXClB 与XClBY不能存活）；ClB存在时，X染色体间非姐妹染色单体不发生交换；正常果蝇X染色体无ClB区段用（X+表示）。
果蝇的长翅（Vg）对残翅（vg）为显性，基因位于常染色体上。
图3是研究X射线对正常眼果蝇X染色体诱变示意图。
请回答下列问题：为了鉴定X染色体上正常眼基因是否发生隐性突变，需用正常眼雄果蝇与F1中果蝇杂交，X染色体的诱变类型能在其杂交后代果蝇中直接显现出来，且能计算出隐性突变频率，合理的解释是；如果用正常眼雄果蝇与F1中果蝇杂交，不能准确计算出隐性突变频率，合理的解释是。
参考答案：棒眼雌性；雄性；杂交后代中雄果蝇X染色体来源于亲代雄果蝇，且X染色体间未发生交换，Y染色体无对应的等位基因；正常眼雌性；X染色体间可能发生了交换。
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黑腹果蝇黑条体突变型基因的定位与克隆
金珊曾庆韬
(
湖北大学生命科学院武汉400632
黑条体突变型是1991年本实验室从野外采集的黑
腹果蝇中发现的一种新的突变体通
过常规杂交和互补实验技术将黑条体突变型的产生的基因进行分析定位发现引起黑
条体
突变型的基因很可能是黑檀体突变基因(e)的等位基因位于第三染色体93D2区定名
为bsr基因为了进一步的研究bsr基因的结构与功能的变异根据e基因的序列我们设
计了一系列的特异性引物对黑条体突变型的bsr基
因
的DNA序列及cDNA进行克隆和
测
序发现bs:的编码序列较e基因很相似没有明显的大的片段的变异变异仅存在于数
个氨基酸位点且均不位于基因产物的关键序列通过结构模拟得出的蛋白质的立体结构
也没有明显的变异虽然不能确定这数个氨基酸的变异最终导致了
黑条体突变体的出
现
但是根据三级结构模型和关键序列的位置很可能这几个位点的氨基酸的变化没有影响基
因的功能只是蛋白质多态性的表现同时我们还发现在基因的DNA序列的5端有一
个
954个碱基的大片段的缺失其中包括e基因的mRNA的283个核昔酸先导序列后端的2
1
个核普酸和与之相邻的第一个内含子的73个核
普酸(如下图
)
1234567
匕习/l}口
l
一』
曰
匕
口!一一一刁
i
A为e基因结构图B
为黑条体的bsr突变基因结构图
方形表示外显子实线条表示内
含
子
通常情况下先导序列存在有mRNA翻译的调控位点由此我们认为黑条体突变型的产
生可能和e基因的mRNA的先导序列缺失有关因此进一步的了解该基因
的先导序列对基
因转录及翻
译的影响将是非常有意义的
刃