耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药机制及流行特征研究
耐碳青霉烯肠杆菌科细菌定植与感染研究进展
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和头孢菌素酶能够 与 孔 蛋 白 的 突 变 相 结 合, 细 菌 某 种 孔 蛋
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20
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2009 年一组 新 德 里 金 属 β
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碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的分子生物学及其临床感染特征研究
碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的分子生物学及其临床感染特征研究细菌耐药性目前已成为全球性关注的问题,耐药细菌所致感染已构成新世纪抗感染治疗的新挑战,是当前人类健康和生命面临的主要威胁。
肠杆菌科细菌分布广,与人类关系密切。
在医院感染中,肠杆菌科细菌包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌等是引起医院感染最常见的病原菌,并以多重耐药菌株引起的感染为显著特点。
碳青霉烯类抗生素是目前临床治疗产超广谱β-内酰胺酶(Extended Spectrumβ-Lactamases, ESBLs)及AmpC酶等多重耐药菌株所引起感染的最有效的抗菌药。
但随着该类抗生素在临床上的广泛应用及不合理使用,临床上已出现对碳青霉烯类抗生素耐药的菌株。
目前国内外关于肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗生素的耐药机制报道主要集中在四个方面：①产生碳青霉烯酶,如IMP型和VIM型金属酶以及KPC (Klebsiella pneumoniae carbapenemase, KPC)型碳青霉烯酶等；②ESBL和/或AmpC酶过度表达同时合并外膜孔蛋白的丢失；③外排泵高表达的膜屏障机制；④药物靶位改变。
在上述几种耐药机制中,产碳青霉烯酶是肠杆菌科细菌对碳青霉烯类耐药最主要的机制。
骆俊等人对2003年6月到2004年5月华山医院临床分离的耐亚胺培南的革兰阴性杆菌中的碳青霉烯酶进行了筛查,发现细菌产碳青霉烯酶是不动杆菌和弗劳地柠檬酸杆菌对亚胺培南和美罗培南等碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因之一。
沈继录等人采用琼脂稀释法测定亚胺培南和美罗培南对199株革兰阴性杆菌的最低抑菌浓度(MIC),结果显示耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌对12种抗生素的耐药率均高于碳青霉烯类敏感革兰阴性杆菌的耐药率,而且产生多种碳青霉烯酶,如KPC、IMP、VIM和OXA型碳青霉烯酶等,并在弗劳地柠檬酸杆菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌中有产酶克隆株的流行。
在巴西,肠杆菌科细菌中对碳青霉烯耐药已成为主要问题,特别是产KPC酶的耐药株已在多个地区报道。
碳青霉烯肺炎克雷伯菌(Kpn)的分布特点及耐药性
碳青霉烯肺炎克雷伯菌(Kpn)的分布特点及耐药性陈波;易涛平【摘要】目的探讨耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(Kpn)的分布特点及其耐药性的变化.方法 5986株Kpn送检标本中筛选出247株耐碳青霉烯类Kpn作为研究对象,通过临床资料收集与试验,了解耐碳青霉烯类Kpn的分布特点及耐药性变化趋势,并应用Spearman相关性法分析耐碳青霉烯类Kpn发生的高危因素.结果耐碳青霉烯类Kpn标本来源科室主要为ICU、呼吸内科与神经内科,菌株分离途径主要为痰液与尿液;Kpn标本不仅对碳青霉烯类抗生素高度耐药,对临床常用头孢类、喹诺酮类抗生素也呈高度耐药,其检出率呈逐年上升趋势.耐碳青霉烯类Kpn的发生与高龄、合并基础疾病、侵入性操作、长期住院、抗菌药物应用时间长等因素呈正相关(r值分别为:0.218、0.354、0.268、0.270、0.319,P<0.05).结论耐碳青霉烯类Kpn 的检出率逐年升高,临床应加强对高危科室的防控与监测,强化感染预防与控制措施,以避免耐碳青霉烯类Kpn的传播与流行.【期刊名称】《河北医药》【年(卷),期】2019(041)008【总页数】3页(P1254-1256)【关键词】肺炎克雷伯菌;碳青霉烯类抗生素;分布特点;多重耐药;变化趋势【作者】陈波;易涛平【作者单位】642150 四川省隆昌市人民医院呼吸内科;642150 四川省隆昌市人民医院呼吸内科【正文语种】中文【中图分类】R378.2碳青霉烯类抗生素是由青霉素结构改造而成的一类非典型的β-内酰胺抗菌药，其适用范围广、抗菌作用强，且毒性比较低，在临床上有着较为广泛的应用[1,2]。
但很多医院对碳青霉烯类抗生素的使用并不规范，长期、大量滥用所导致的细菌耐药问题也愈加严峻。
而肺炎克雷伯菌(Klebsiella Pneumoniae,Kpn)是一种容易感染于患者肠道、上呼吸道的肠杆菌，在泌尿道、颅脑、下呼吸道等部位也可能引起感染[3]。
耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌感染的危险因素及耐药机制的研究
耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌感染的危险因素及耐药机制的研究胡小飞厉银平刘桂霞彭清臻王锋【摘要】目的探讨耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌感染的危险因素及耐药机制。
方法对我院2018年6月1日-2019年5月31日57例耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌(CRKP)感染患者和70例碳青霉烯敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)感染患者进行回顾性分析。
结果CRKP感染患者主要分布在呼吸科31.6%(18/57)、神经内科21.1%(12/57)、神经外科14%(8/57)和ILU10.5%(6/57)，感染部位以下呼吸道感染78.9%(45/57)和泌尿道感染17.8%(8/57)为主;相比CSKP感染组,使用两种或三种抗生素患者的比例在CRKP感染组中显著增加。
多元L wp U c回归分析显示,1月内使用三代头抱/酶抑制剂、1月内使用碳青霉烯类以及留置尿管为CRKP感染的独立危险因素。
57株CRKP菌株中，有39株(68.4%)携带biKPC基因,6株(10.5%)携带bilMP基因$结论CRKP菌株日见增多，规范化使用碳青霉烯类抗生素，减少或缩短侵入性医疗操作有利于降低CRKP感染的发生率;产KPC型碳青霉烯酶是CRKP菌株对碳青酶烯类耐药的最主要耐药机制。
【关键词】肺炎克雷伯菌;碳青霉烯类耐药;危险因素;碳青霉烯酶基因Risk factors and drrg resistancc mechanism of carbapenem-resistant KUbsieea pnenmoniae infectionHU Xiao-fei,LI Yitfing,LI Gui-fi,PENG Qing-zZee,WANG FengDepartment of RespiratorS and Critical Can Medicine,Xiaogan Hospital0ffiliate0m Wuhan Universito f Science and TecCnology,Xiaogan,Hubei432000,China(Abstract]Objective To investigate the risk factors and drug resistance mechanism of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae infection.Methods A retrospective analysis was conducted on57patients with carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae(CRKP)infection and70patienO with carbapenem sensitive Klebsiella pneumoniae (CSKP)infection in our hospital from June1,2018to May31,2019.ResUs The patients with CRKP infection weeemainiydisieibuied in eespieaioeydepaeimeni(31.6%),neueoiogydepaeimeni(21.1%),neueosuegeeydepaei-meni(14%)and ICU(10.5%).Loweeeespieaioeyieaciineeciion(78.9%)and ueinaeyieaciineeciion(17.8%) weeeihemain ineeciion paeed wiih iheCSKPineeciion geoup,ihepeopoeiion oepaiienisusingiwooeiheee aniibioiicsinceeased signieicaniiyin iheCRKPineeciion geoup.Muiiipieiogisiiceegee s ion anaiysisshowed ihaiihe use of thPd-aeneration cephalosporins/enzyme inhibitors within one month,carbapenem antibjotics within one month and indwe i ingcaiheieeweeeindependenieik eacioeeoeCRKPineeciion.Oeihe57CRKPHieainH,39(68.4%)cae-ried blaKPC gene and6(10.5%)carried blalMP gene.Conclusion The number of CRKP strains is increasing day by day,standardizing the use of carbapenem antibiotics and reducing or shortening invesive medical procedures are beneeiciaiioeeduceiheincidenceoeCRKPineeciion.Thepeoduciion oeKPCiypecaebapenem isihemosiimpoeiani mechanism oecaebapenem eesisianceoeCRKPsieains.(Keywords]Klebsiella pneumoniae;carbapenem-resistant;risk factor;carbapenemase gene肺炎克雷伯菌是医院获得性感染检出排名仅次于大肠埃希菌的革兰氏阴性杆菌,是造成呼吸道、泌尿道、血流等多个部位感染的重要致病菌之一。
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌的感染现状及治疗进展
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌的感染现状及治疗进展摘要：本文首先对耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌（CRKP）的感染现状进行了分析，其次对其抗感染治疗的最新研究进展分别按照药物种类从β-内酰胺酶抑制剂、β-内酰胺类抗生素、氨基糖苷类抗生素、甘氨酰环素类抗生素、多肽类抗生素及中西医结合治疗的角度进行了分析，现综述如下：关键词：耐碳青霉烯类；肺炎克雷伯菌；抗感染；耐药；机制由于临床抗生素的长期大量应用，耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌（Carbapenem-Resistant Klebsiella Pneumoniae,CRKP）感染发病率逐年增加，耐药性的增加，使得治疗该病可供选择的药物类型不断减少，临床治疗难度提升。
对比，本文针对CRKP的感染现状及治疗的最新进展开展综述，以期能为循证医学提供临床指导。
2.1感染现状其中CRKP占CRE菌种感染的73.9%；从国内的耐药区域分布分析，河南省最高；从感染部位上分析，下呼吸道感染占比最高。
近年来CRKP的检出率正不断上升，2014年数据为6.4%，而2019年数据则攀升至10.9%，可见细菌耐药已成为危害全球卫生健康的重大卫生问题之一[1]。
2.2治疗进展2.1 β-内酰胺酶抑制剂其中以药物阿维巴坦为代表，该药物抑酶作用较为长效。
临床为强化该药的抗菌活性，常采用复合给药的方式，与头孢他啶相联合。
临床给药时，针对老年人，给药依据参照患者肾功能水平；而针对≥18岁以上人群，建议根据血药浓度水平及年龄调整剂量。
最新研究显示，头孢他啶-阿维巴坦杀灭肺炎克雷伯菌的效果较为显著。
数据结果显示，90%的抑菌浓度为8mg/L、50%的抑菌浓度为4mg/L[2]。
2.2 β-内酰胺类抗生素其中以美罗培南为代表，该药物的抗菌效果较为强力。
最新临床研究结果显示，针对菌群最低抑菌浓度≤8mg/L的KPC型肺炎克雷伯菌感染患者，应用美罗培南治疗，患者存活率提升较为显著。
研究者又进行了另一项实验，将菌群的最低抑菌浓度调整至≥16mg/L，结果显示美罗培南同样具备保护患者的效果。
中国碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的流行病学和防控策略ppt课件
倡导个人卫生习惯的培养，如勤洗手、不乱摸鼻子、不随地吐痰等，避免细菌传播。
社会干预
采取社会干预措施，如取消公共场所禁烟、限制抗生素滥用等，共同防控碳青霉烯类耐药 肠杆菌科细菌的传播。
04
中国碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的耐 药机制研究
细菌耐药机制概述
01
天然耐药
某些细菌本身就对某些抗菌药物有天然的耐药性，这种耐药性通常由
加强病例监测和报告，及时掌握感染情况和细菌耐药性变化。
消毒与清洁
03
医院应定期开展消毒与清洁工作，对重点区域和医疗器械进行
特别管理。
抗生素管理政策落实情况
抗生素使用规定
严格执行抗生素使用规定，限制抗生素使用量和使用范围。
抗生素采购与储存
加强抗生素的采购、储存和使用环节的管理，确保抗生素的质量和安全。
流行病学调查方法包括描述性研究、分析性研究和实 验性研究等。其中描述性研究主要是通过收集有关疾 病在时间、空间和人群中的分布情况，揭示疾病流行 的规律和特点；分析性研究主要是通过病例对照研究 和队列研究等方法，探讨疾病病因和影响因素；实验 性研究主要是通过随机对照试验等方法，评价干预措 施的效果。
调查结果
细菌染色体或质粒介导。
02
获得性耐药
细菌在长期接触抗菌药物的过程中，会发生基因突变或改变，从而获
得耐药性。
03
传播耐药基因
细菌可以通过接合、转化、转导等方式，将耐药基因在种间或种内传
播。
碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的耐药基因研究
1 2
KPC基因
KPC基因编码碳青霉烯酶，能使细菌对碳青霉 烯类抗菌药物产生耐药性。
抗生素使用培训
开展医务人员抗生素使用知识和技能的培训，提高合理使用抗生素的意识。
2015-2019年我院肺炎克雷伯菌的感染特征与耐药机制
文章编号：1001-8689(2021)05-0468-06收稿日期：2020-10-29作者简介：黄晓琳，生于1922年，女，在读硕士研究生，主要研究方向临床微生物检验和耐药机制，E-mail:********************通讯作者:E-mail:*****************2015—2019年我院肺炎克雷伯菌的感染特征与耐药机制黄晓琳1 李明2 范晓怡1 刘菊珍1 黄云祖1 李小丽1 邹海珠1*(1 暨南大学附属第一医院临床检验中心 广州 510630; 2 东莞市滨海湾中心医院 东莞 523000)摘要：目的 分析2015—2019年广州暨南大学附属第一医院肺炎克雷伯菌的感染情况和耐药性变迁，并进一步探讨其耐药机制，为临床防治肺炎克雷伯菌感染用药提供实验室依据。
方法 采用回顾性分析方法，对我院2015—2019年分离的1514株肺炎克雷伯菌进行标本来源、科室分布、耐药性变化等分析，并对其中123株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)采用改良碳青霉烯类失活法(mCIM)和EDTA 碳青霉烯类失活法(eCIM)进行碳青霉烯酶表型筛选试验，并通过PCR 方法检测bla KPC 、bla VIM 、bla IMP 和bla NDM 4种最常见的碳青霉烯酶耐药基因。
结果 2015—2019年期间我院肺炎克雷伯菌每年的平均分离率为9.44%，从临床标本分布来看，主要分离自痰液(47.36%)、尿液(23.51%)和血液(16.51%)；从临床科室分布来看，分离率最高的依次是ICU 病区(17.83%)、呼吸病房(17.83%)和神外病房(9.11%)。
肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物的耐药率相对较低(10%~30%)，但在2019年明显上升；对喹诺酮类、头孢类、单环类、四环素类、磺胺类药物耐药率较高(30%~50%)；除头孢哌酮/舒巴坦和复方磺胺甲噁唑外，对其他抗菌药物的耐药率均呈上升趋势。
肺炎克雷伯杆菌耐碳青霉烯类的机制及其防治
．综述．
肺炎克雷伯杆菌耐碳青霉烯类的机制及其防治
朱亚萍刘荣玉
【摘要】近年来耐碳青霉烯类抗生奈的肺炎克雷伯杆菌有逐年增多的趋势，其机制主要是碳青霉 烯酶的产生。其中又以肺炎克雷伯杆菌碳青霉烯酶最为多见。高产Ｃ类头孢菌素酶或超广谱１３－ｐｑ酰胺酶 同时合并膜孔蛋白的缺失也逐渐得到重视。耐碳青霉烯类肺炎克雷伯杆菌的控制面Ｉ临严峻的考验，目 前提倡防治相结合的综合措施。积极加强医院管理．严格感染控制措施。同时给予敏感药物治疗，并强调 多药联合。本文将讨论肺炎克雷伯杆菌耐碳青霉烯类药物的机制及其防治措施。
ＤＯＩｌｌｏ．３７６０／ｃｍａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３—４３６Ｘ．２０１１．００２．０１２ 作者单位一２３００３２合肥．安徽医科大学第一附属医院老年呼吸 内科 通信作者ｌ刘荣玉。Ｅｍａｉｌｌ ｒｏｎｇｙｕｌｉｕ＠ｇｍａｉ下降。现将肺炎 克雷伯杆菌耐碳青霉烯类的机制及其防治措施综述 如下。 １碳青霉烯酶的产生 １．１ ＫＰＣ ２００１年Ｙｉｇｉｔ等在美国北卡罗来纳州 分离到一株对碳青霉烯类高度耐药的肺炎克雷伯杆 菌，并发现了ＫＰＣ－１。２００３年纽约ＴＩＳＣＨ医院又 报道了１起ＫＰＣ－３引起的院内感染。２００４年以前 产肺炎克雷伯杆菌碳青霉烯酶的肺炎克雷伯杆菌 （ＫＰＣ—ＫＰ）主要局限在美国。美国以外检测到ＫＰｃ－ ＫＰ的很少。国内于２００４年由浙江大学医学院第 一附属医院首次分离出产ＫＰＣ－２的肺炎克雷伯杆 菌，之后在上海、河南、安徽等地区也报道了产 ＫＰＣ－２的肺炎克雷伯杆菌。目前已有２７个国家发 现了ＫＰＣ—ＫＰ。
（ｃａｒｂａｐｅｎｅｍ—ｒｅｓｉｓｔａｎｔ Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ，
ＣＲＫＰ）屡见不鲜，给临床治疗及院内感染的控制带 来极大的困难。其耐药机制引起了广大研究者的关 注，主要有：①碳青霉烯酶的产生，主要包括肺炎克 雷伯杆菌碳青霉烯酶（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ ｃａｒｂａｐｅｎｅｍａｓｅ．ＫＰＣ）、金属酶、苯唑西林酶 （ｏｘａｅｉｌｌｉｎａｓｅ，（）ＸＡ）ｌ②高产Ｃ类头孢菌素酶或超 广谱Ｂ一内酰胺酶合并外膜蛋白的丢失；③主动泵出 系统的活跃；④碳青霉烯类药物高亲和性的结合位
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浙江临床医学2019年6月第21卷第6期·750··论著·
【摘要】 目的 研究医院耐碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌的耐药机制和分子同源性，为医院感染的预防和控制提供可靠的研究基
础。方法 收集临床分离的碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌；琼脂稀释法测定抗生素最低抑菌浓度（MIC）；PCR特异扩增和序列比对分析研究细菌对碳青霉烯类抗生素耐药的分子机制及流行特征。结果 分离碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌共189株，均为产blaKPC-2
肺炎克雷伯菌，其对美罗培南、亚胺培南和厄他培南的MIC范围分别为2~128mg/L、4~128mg/L、4~128mg/L。其中5株细菌同时产blaVIM-1。
ERIC分型显示189株细菌分为a型、b型，其中a型较多（67.9%）。结论 院内可能有过携带blaKPC-2的肺炎克雷伯菌引起的医院内暴发流行，需要加强消毒隔离，防止进一步播散。【关键词】 肺炎克雷伯菌 碳青霉烯 KPC-2
【Abstract】 Objective To investigate the mechanism of reduced susceptibility to carbapenems of Klebsiella pneumoniae and its homology.
Methods The clinical isolates of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae were collected，The minimum inhibitory concentration（MIC）
of antibiotics was determined by agar dilution method. The molecular mechanism and epidemiological characteristics of carbapenem-resistant bacteria were analyzed by PCR-specific amplification and sequence alignment. Results A total of 64 carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae strains were isolated. All of them were BlaKPC-2-producing Klebsiella pneumoniae. The MIC ranges of meropenem，imipenem and ertapenem were 2~128mg/L，4~128mg/L，4~128mg/L，respectively. 2 strains of bacteria produce blaVIM-1 simultaneously. ERIC typing showed that 64 strains of bacteria were classified into type A and B，among which type A was more（67.9%）. Conclusion Hospital outbreaks caused by Klebsiella pneumoniae carrying blaKPC-2 may have occurred in hospitals，and disinfection and isolation should be strengthened to prevent further dissemination【Key words】 Klebsiella pneumoniae Carbapenem KPC-2
碳青霉烯类抗生素因其抗菌谱广、抗菌活性强、对ESBLs稳定及毒性低等优点，一直作为ESBLs菌株严重感染患者的首要选择，曾被称为临床治疗阴性菌所致严重感染的“最后一道防线”［1］。但近些年随着碳青霉烯类抗生素在临床的广泛使用，耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的报道越来越多［2］。其中KPC型碳青霉烯酶于2001年美国首先报道在肺炎克雷伯菌中发现的一种丝氨酸酶［3］，能够水解亚胺培南、美罗培南和头孢菌素等多种临床常用一线抗菌药物，从而导致细菌多重耐药，对人类健康造成了严重的威胁。有研究显示［4］，KPC基因位于质粒上，易在同一菌种不同菌株甚至不同菌种之间移动，造成局部暴发甚至世界范围内的扩散。耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（CRKP）在巴西、中国台湾、日本、古巴等多个地区均有分离［5-8］。本研究对本院临床标本中CRKP的药物敏感性进行分析，以了解其耐药机制和流行特征。
1 材料与方法1.1 菌株来源 分离本院2017年1月至2018年6月临床标本中CRKP共189株。126株分离自痰液，23株分离自分泌物，20株分离自尿液，13株分离自全血，1株分离自脑脊液，6株分离自导管尖端。
1.2 试剂和仪器 Vitek 2 Compact 全自动细菌鉴定仪（法国bioMérieux公司），PCR扩增仪、Rotaphor System 6.0 脉冲场凝胶电泳仪、UVIBand PFGE 图像分析软件及紫外成像系统（德国Biometra公司），细菌多点接种仪（日本Oriental Motor公司），Taq酶及PCR相关试剂（日本TaKaRa），亚胺培南、美罗培南、厄他培南纸片（英国Oxoid公司），琼脂糖电泳仪。1.3 菌株鉴定及药敏试验 分离的细菌由Vitek 2 Compact全自动细菌鉴定仪进行菌种鉴定及药敏试验。碳青霉烯类抗生素药敏采用琼脂稀释法测定其最低抑菌浓度（MIC）。根据美国临床和实验室标准化协会（CLSI，2016）的解释标准判断药敏试验结果。1.4 细菌耐药基因PCR扩增及序列分析 细菌基因组DNA提取：根据产品说明书，通过水浴裂解、去蛋白、异丙醇沉淀和洗脱等步骤完成基因组DNA快速抽提。PCR反应体系为：引物各10pmol，含MgCl2的dNTP8μl，10×Buffer 2 5μl，Taq酶0.5μl，0.1μg基因组DNA，无菌纯水补足至50μl。PCR反应条件为：94℃ 4min，1个循环；94℃ 1min，退火1min，72℃延伸1min，35个循环；72℃充分延伸5min，1个循环。PCR产物在含EB的1.0%琼脂糖凝胶上100V恒压电泳30min，紫外灯下观察结果。PCR产物由上海生工生物工程技术服务有限公司测序。所得DNA序列与GenBank中的数据库进行比对，确定耐药基因型。耐药基因的引物序列、扩增长度等相关信息见表1。
耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的耐药机制及流行特征研究徐伟军 潘辉 陈西佳 赵褀
作者单位：318000 浙江省台州市中医院浙江临床医学2019年6月第21卷第6期·751·表1 耐药基因PCR扩增所用序列基因引物名称引物序列（5-3）扩增长度（bp）参考文献碳青霉烯酶基因blaKPC-2KPC-2FGCTACACCTAGCTCCACCTTC10503
KPC-2RTCAGTGCTCTACAGAAAACCblaIMIIMI-FATAGCCATCCTTGTTTAGCTC
IMI-RTCTGCGATTACTTTATCCTC81810blaIMP-1IMP-1-FTGAGCAAGTTATCTGTATTC
IMP-1-RTTAGTTGCTTGGTTTTGATG74010blaIMP-2IMP-2-FGGCAGTCGCCCTAAAACAAA
IMP-2-RTAGTTACTTGGCTGTGATGG73710blaVIM-1VIM-1-FTTATGGAGCAGCAACCGATGT
VIM-1-RCAAAAGTCCCGCTCCAACGA92010blaVIM-2VIM-2-FAAAGTTATGCCGCACTCACC
VIM-2-RTGCAACTTCATGTTATGCCG86510blaNDM-1NDM-1-FCTCGCACCGAATGTCTGGC
NDM-1-RCATTGGCGGCGAAAGTCA34111blaOXA-48OXA-48-FTTGGTGGCATCGATTATCGG
OXA-48-RGAGCACTTCTTTTGTGATGGC74410其它β-内酰胺酶基因blaTEMTEM-FTCGGGGAAATGTGCG
TEM-RTGCTTAATCAGTGAGGCACC97212blaSHVSHV-FGCCTTTATCGGCCTTCACTCAAG
SHV-RTTAGCGTTGCCAGTGCTCGATCA89812blaCTX-M-2组CTX-M-2-FCTCAGAGCATTCGCCGCTCA
CTX-M-2-RCCGCCGCAGCCAGAATATCC84312blaCTX-M-9组CTX-M-9-FGTTACAGCCCTTCGGCGATGATTC
CTX-M-9-RGCGCATGGTGACAAAGAGAGTGCAA88112
2 结果
2.1 CRKP药敏结果 本研究共分离到CRKP 189株，对亚胺培南耐药或中介耐药（MIC：2~128mg/L），对美罗培南和厄他培南均为耐药（MIC：4~128mg/L）。CRKP对头孢菌素、氨曲南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、和左氧氟沙星呈高水平耐药，对多粘菌素E、替加环素敏感性较高（见表2）。表2 肺炎克雷伯菌药物敏感试验结果（%）抗菌药物敏感率中介率耐药率头孢吡肟0.00.0100.0阿米卡星11.50.088.5左氧氟沙星0.09.590.5多粘菌素E100.00.00.0头孢哌酮/舒巴坦0.020.879.2氨曲南0.00.0100.0哌拉西林/他唑巴坦0.03.396.7替加环素82.212.55.3
2.2 耐药基因检测结果 189株肺炎克雷伯菌均产KPC-2型碳青霉烯酶，未检出NDM与IMP型金属β-内酰胺酶，其中5株同时产VIM-1型金属β-内酰胺酶，blaCTX-M-9、blaTEM、blaSHV检出率均>60%。见表3。表3 耐药基因检测结果分析耐药基因种类耐药基因阳性率（%）碳青霉烯酶基因blaKPC-2100.0
blaVIM-112.5
其它β-内酰胺酶基因blaCTX-M-987.5
blaTEM64.1
blaSHV76.6
2.3 染色体DNA同源性分析 应用UVIBand软件对PFGE条带进行分析显示，共有2种分型（a型、b型），其中a型较多，占67.9%。（见图1）。
3 讨论临床研究显示，大部分产blaKPC肺炎克雷伯菌分离自入住ICU 病房、患有心脑血管疾病的老年患者，提示这类患者是感染或携带产KPC-2肺炎克雷伯菌的
高危人群［9］。本研究收集到携带CRKP的患者中106