血浆游离血红蛋白检测操作规程
血红蛋白检测方法
血红蛋白检测方法
血红蛋白需要抽血进行实验室检查，常用到的测定方法就是血细胞分析仪比色法。
血红蛋白是红细胞的主要组成部分，也是红细胞内运输氧气的特殊蛋白质，其承担着向机体内各个器官、组织输送氧气、运出二氧化碳的功能。
同时，血红蛋白也是让血液呈现出红色的主要蛋白质，主要是珠蛋白和血红素两个成分组成。
血红蛋白与红细胞的检测价值相似，血红蛋白的升高和降低可参考红细胞升高与降低的临床意义。
血红蛋白在人体血液中广泛存在，因此测定血红蛋白指数需要抽血进行实验室检测，因为是色素蛋白，所以临床常用到的测定方法就是比色法。
通过血细胞分析仪，就能够自动分析出血红蛋白的浓度。
男性血红蛋白计数为120-160g/L，女性血红蛋白计数为110-150g/L、新生儿血红蛋白计数为170-200g/L。
血红蛋白的检测
一血红蛋白的提取和分离实验的方法：1：实验材料，仪器，试剂及试剂的配制（1）实验材料：新鲜的鸡血（2）实验仪器：离心机，烧杯（100ml），胶头滴管，玻璃棒，离心管架，漏斗，纱布等。
（3）实验试剂：饱和（NH4）2SO4溶液（PH=6.0~7.0），柠檬酸钠溶液，生理盐水，蒸馏水。
（4）试剂的配制：1. 饱和（NH4）2SO4溶液的配制：100ml蒸馏水中溶解76g（NH4）2SO4，用氨水滴PH值至6.5左右；2.生理盐水的配制：取9gNaCl溶于1000ml蒸馏水中。
3.柠檬酸钠溶液的配制：6g柠檬酸钠溶于100ml生理盐水中（可收集100ml鸡血）。
2：实验步骤：（1）收集并清洗鸡血：用盛有柠檬酸钠溶液的烧杯装新鲜的鸡血（防止鸡血凝固），然后将鸡血用300ml生理盐水稀释，充分搅拌后转移到50ml离心管中，离心（V=5000rpm）5min（此步可除去血清蛋白）。
（2）破碎鸡血细胞：小心倒掉上清，下层细胞加入50ml的蒸馏水，剧烈震荡10min，离心（V=5000rpm）10min.。
取上清溶液，即血红蛋白的溶液，用多层纱布过滤。
（3）盐析分离血红蛋白：向滤液中逐渐加入（NH4）2SO4饱和溶液，边加边摇，约加入与血红蛋白溶液相同体积时，溶液出现浑浊。
静止20min，离心10min(v=5000rpm).。
红色沉淀就是分离出来的血红蛋白。
血红蛋白溶液通过盐析并离心后得到红色沉淀，此时上清溶液基本无色，表明该沉淀就是我们分离得到的血红蛋白，无需用其他方式进行验证。
下面就几点进行讨论;1我们购买鸡血时，为了防止鸡血凝固，把鸡血收集到事先准备好的盛有柠檬酸钠溶液的瓶子里，可以放置一白天，若要过夜，温度须控制在4摄氏度。
2我们用蒸馏水使细胞涨破而不用甲苯（有毒），既简单又安全，同时还可以将血红蛋白溶液进行稀释。
3用盐析法进行蛋白质分离试验，比通过色谱柱，减少了实验难度，降低了试验成本，缩短的试验时间。
血红蛋白测定方法
血红蛋白测定方法
血红蛋白是人体中一种重要的蛋白质，主要存在于红细胞中。
它能够帮助携带氧气和二氧化碳，维持身体机能的正常运作。
测定血红蛋白的方法有多种，其中最常见的是血液学检查。
医生会在患者的手指或臂部皮肤上做一个小针孔，然后将一小滴血液收集在试管中。
接下来，医生会在试管中添加化学物质，使血液变色。
通过比较试管的颜色与标准颜色，医生可以确定血红蛋白的浓度。
除此之外，还有一些其他的血红蛋白测定方法。
例如，有些医生会在患者的手臂或手腕上绑上一条气压袖带，并测量血流量来确定血红蛋白的含量。
还有一些新的技术，如光学扫描和激光技术，也可以用于血红蛋白的测定。
无论是哪种方法，血红蛋白的测定对于诊断和治疗疾病非常重要。
如果您需要进行血红蛋白测定，请务必与您的医生或医疗机构联系，以获得准确的结果和适当的治疗建议。
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实验诊断-临床血液学检测：溶血性贫血的实验室检测
实验诊断-临床血液学检测：溶血性贫血的实验室检测溶血性贫血的实验室检测溶血性贫血的实验室检测一、溶血性贫血的筛查检测（一）血浆游离血红蛋白测定1.参考值<50mg/L（1～5mg/dl）2.临床意义（1）血管内溶血时血浆游离血红蛋白明显增高；（2）血管外溶血时血浆游离血红蛋白不增高；（3）自身免疫性溶血性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血可轻度增高。
（二）血清结合珠蛋白测定1.参考值0.7～1.5g/L（70～150mg/dl）2.临床意义（1）各种溶血时血清结合珠蛋白均有减低，血管内溶血时减低显著；（2）肝脏病、传染性单个核细胞增多症、先天性无血清结合珠蛋白血症等可减低或消失；（3）感染、创伤、恶性肿瘤、系统性红斑狼疮、糖皮质激素治疗等可有结合珠蛋白增高。
（三）血浆高铁血红素清蛋白测定 1.检测方法生化法、电泳法 2.正常值阴性 3.临床意义阳性表示为严重血管内溶血（四）含铁血黄素尿试验（Rous试验）1.原理铁离子在酸化的亚铁氰化钾溶液中生成蓝色的亚铁氰化铁，即普鲁士蓝反应。
2.正常值阴性3.临床意义（1）慢性血管内溶血可呈现阳性，并持续数周；（2）常见于阵发性睡眠性血红蛋白尿症，在溶血初期可阴性。
（五）红细胞寿命测定1.原理用51Cr标记红细胞检测红细胞半衰期。
2.正常值正常红细胞半衰期为25～32天。
3.临床意义溶血性贫血时常小于15天，这是确定溶血性贫血的可靠方法。
二、红细胞膜缺陷的检测（一）红细胞渗透脆性试验1.原理红细胞在低渗氯化钠溶液中细胞逐渐膨胀甚至破裂而溶血。
2.参考值Ø开始溶血：0.42%～0.46%（4.2～4.6g/L）NaCl溶液Ø完全溶血：0.28%～0.34%（2.8～3.4g/L）NaCl溶液3.临床意义（1）脆性增高：遗传性球形细胞增多症、温抗体型自身免疫性溶血性贫血、遗传性椭圆形细胞增多症等；（2）脆性减低：海洋性贫血、缺铁性贫血、某些肝硬化及阻塞性黄疸等。
血红蛋白的测定
临床上最重要的是将人类血型分为Ａ、Ｂ、
原 ＡＢ、Ｏ四种（称为ＡＢＯ血型系统）。在人类
的血液里含有凝集原（又称抗原）Ａ、Ｂ和凝集 素（又称抗体）Ａ、Ｂ。
凝集原附着在红细胞表面。凝集素存在于血
浆（或血清）中。同名的凝集原和凝集素相遇 （如凝集原Ａ和抗A凝集素）会发生红细胞凝集
理 现象（溶血反应）。所以在人体的血液中，所含
3、采血时针刺的深度一定要适当，切忌穿通 耳垂。
4、必须注意区分红细胞叠连现象与凝集现象。 5、注意严防两种血清接触。
思考题
1、如何区别血液的凝集与凝固，其机 理是否一样？
2、根据自己的血型，说明你能接受何 种人的血和输血给何种血型的人，为 什么？
3、人类的血液根据什么而分为四种血 型？
4、试述血型鉴定的过程及应注意的几 个问题。
的凝集原和凝集素的类型不同,可分为A、Ｂ、Ａ Ｂ、Ｏ四种血型。
由于A凝集原只能和抗A凝集素结合，B凝集
原只能和抗B凝集素结合。因此可以利用已知的A 型（抗Ｂ凝集素）和B型标准血清（抗A凝集素） 来鉴定未知的血型。
ABO血型系统
ABO血型系统的分型标准以及它们之间的 关系比较容易记错。只要记住红细胞里 有什么凝集原它就是什么血型就可以了。 例如，有凝集原A的就是A型血液。
血清中的凝集素与红细胞里的凝集原相 反（如果把红细胞、血清、凝集原和凝 集素一起都记，反而容易产生混乱）。
用品
消毒干棉球、双凹片、标准血清、 75%酒精棉球、牙签、显微镜
方法与步骤
1. 取玻片，标记； 2. 加标准血清； 3. 采血； 4. 观察。
注意事项
1、对标准血清的使用一定不能弄混。
2、采血时，如果针刺后耳垂不流血，可以轻 轻地用手挤压一下，即可流出血液。采血后 要在耳垂针眼上放一块酒精棉，再用拇指与 食指压紧，使伤口上残留的血液凝固，达到 止血的目的。
血红蛋白检测方法
血红蛋白检测方法血红蛋白检测方法是用来测试人体中的血红蛋白水平的一种常规临床检验方法。
血红蛋白是红细胞中的一种含铁蛋白，它的主要功能是将氧气从肺部运输到全身各个组织器官，同时将二氧化碳从组织器官带回肺部排出。
通过血红蛋白的检测，可以了解人体血液中氧气的携带能力以及相关疾病的存在与否。
目前常用的血红蛋白检测方法主要有以下几种：1. 血常规检测血红蛋白：血常规是一种常用的临床检查方法，它可以检测全血的各项指标包括血红蛋白水平。
这种方法在实验室中通常使用自动血液分析仪进行检测，通过红细胞计数和红细胞平均体积等参数计算得出血红蛋白浓度。
2. 血气分析检测血红蛋白：血气分析是一种通过测量动脉血样品中的氧气和二氧化碳浓度来评估呼吸和酸碱平衡的方法。
在这个过程中，也可以通过检测血红蛋白浓度来评估氧气的携带能力。
检测方法一般采用电化学法或光电法。
3. 血红蛋白电泳检测：血红蛋白电泳是一种通过电泳分离血红蛋白亚型来检测血红蛋白变异的方法。
这种方法可以用于鉴定血红蛋白病变或遗传性疾病，例如地中海贫血等。
它通过将患者血液样本与已知血红蛋白亚型标准进行对比来判断血红蛋白的异常情况。
4. 血红蛋白光谱检测方法：血红蛋白光谱检测是一种利用紫外-可见光谱仪测定血红蛋白吸收光谱特性的方法。
这种方法对红细胞中的血红蛋白进行分光分析，进而获得相关的吸收光谱和浓度信息。
这种方法可以帮助鉴定血红蛋白的形态结构变化和一些遗传性疾病。
总结来说，血红蛋白检测方法有血常规、血气分析、电泳和光谱检测等。
这些方法各有特点，常用于临床医学中对血红蛋白水平及相关疾病的诊断和监测。
根据具体的临床情况和医生的建议，我们可以选择适当的方法进行血红蛋白检测。
血浆游离血红蛋白测定试剂盒（比色法）产品技术要求ruierda
血浆游离血红蛋白测定试剂盒（比色法）产品技术要求ruierda血浆游离血红蛋白测定试剂盒（比色法）适用范围：该试剂用于定量测定人血浆中游离血红蛋白的含量。
1. 产品型号/规格及其划分说明1.1试剂1（R1）：100ml×1，试剂2（R2）：100ml×1，试剂3（R3）：10ml ×12. 性能指标1、试剂空白试剂空白吸光度值≤0.18。
2、线性区间测量范围[0.025，0.400] g/L,相关系数r≥0.99；相对线性偏差≤12%。
3、准确度回收率90%～110%4、分析灵敏度血浆血红蛋白0.025g/L测定吸光度差值（△A）≥0.05。
5、精密度a）重复性变异系数≤10%。
b）批间差连续三批血浆游离血红蛋白试剂盒测定同份血浆样本，其测定值的批间差≤10%。
【包装规格】试剂1（R1）：100ml×1，试剂2（R2）：100ml×1，试剂3（R3）：10ml×1【主要组成成分】R1：TBHBA 10mmol/L，稳定剂 100mmol/LR2：4-氨基安替比林 5mmol/LR3：过氧化氢3.0%【产品性能指标】1. 试剂空白吸光度值≤0.18。
2. 线性区间测量范围[0.025，0.400 ]g/L,相关系数r≥0.99；相对线性偏差≤12%。
3. 重复性：变异系数≤10%。
4. 准确度：4.1 型式检验：回收率90%～110%4.2 出厂检验：检测控质控品，结果在靶值±2SD范围内。
5. 灵敏度：血浆血红蛋白0.025g/L测定吸光度差值（△A）≥0.05。
”变更为“产品技术要求1. 产品型号/ 规格及其划分说明1.1 试剂 1（R1）：100ml×1，试剂 2（R2）：100ml×1，试剂3（R3）：10ml ×1校准品：2ml×1（选配）；质控品：2ml×1（选配）1.2 组成成份：试剂 1（R1） TBHBA 10mmol/L，稳定剂 100mmol/L试剂 2（R2） 4-氨基安替比林 5mmol/L试剂 3（R3）过氧化氢 3.0%校准品：水基质，氰化高铁游离血红蛋白 0.100g/L（目标浓度）质控品：水基质，氰化高铁游离血红蛋白0.146 g -0.236g/L 。
血红蛋白分析仪怎么操作
血红蛋白分析仪怎么操作你知道血红蛋白分析仪怎么操作吗?血红蛋白检测仪用于检测血红蛋白的含量的，使用简单、方便，安全有效，那么你知道血红蛋白分析仪怎么操作吗?随小编一起来看看。
文章目录一、血红蛋白分析仪怎么操作二、血红蛋白分析仪的维护与保养三、血红蛋白分析仪检测的注意事项血红蛋白分析仪怎么操作1、血红蛋白分析仪怎么操作1.1、先将仪器后盖板上电源开关置于关端,然后插上电源,将仪器底部的支架放直支撑在工作台上,使仪器向后略有倾斜。
1.2、将仪器后盖板上电源开关置于开端,此时面析显示屏上应有数字显示。
1.3、将选择琴键抬起处于测试档。
1.4、将装有蒸馏水的试管,套在采样管上,管口须插到液体底部位置,按动一下进样键,绿色指示灯亮,采样泵吸入蒸馏水,待指示灯熄灭后,取走试管,将仪器预热30分钟。
1.5、调零:仪器预热30分钟后,先将校正旋扭大约拧到中间位置,把装有蒸馏水或HiCN试剂的试管套在采样管上,按动一下进样键吸入试剂,蠕动泵停止工作后,取走试管,然后仔细缓慢旋转“调零旋钮”,使显示数值为“000”。
校正:即用标准液定标.仪器调零后,使仪器再吸入已知血蛋白标准液,然后缓缓旋转“校正旋钮”,使显示上显示数值为已知标准液的数值,定标即结束。
2、血红蛋白分析仪的特点采用先进的光电测量系统,具有温度自动补偿功能,校对记忆具有一次校标自动功能、操作简单、测量方便、稳定性好、交叉污染小、测量准确、体积小、外形美观等特点。
3、血红蛋白测定方法与原理3.1、氰化高铁血红蛋白(HiCN)比色法:血液中除硫化血红蛋白(SHb)外的各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化为Hi,再和CN-结合生成稳定的棕红色复合物氰化高铁血红蛋白。
3.2、十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)测定法:血液中除硫化血红蛋白(SHb)外的各种血红蛋白均可与低浓度SDS 作用,生成SDS-Hb棕红色化合物,其吸收峰为538nm,波谷为500nm。
3.3、碱羟血红蛋白(AHD575)测定法:检出波长为575nm,试剂不含毒性,呈色稳定,准确性与精确性较高。
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血浆游离血红蛋白检测操作规程
1. 目的
确保血浆游离血红蛋白检测实验过程准确、规范。
2．适用范围
适用于全血及红细胞类血液制品储存末期溶血率的抽样检测过程控制。
3．职责
全血及成分血抽样检测岗负责血液制品血浆游离血红蛋白的抽样检测工作。
4. 原理
检测原理详见《紫外可见分光光度计操作规程》.
5.设备、材料与试剂
5.1仪器：紫外可见分光光度计、微量移液器、37℃恒温水浴箱、台式离心机。
5.2材料: 洁净试管、试管架、一次性吸头、一次性手套。
5.3试剂：血浆游离血红蛋白检测试剂盒（R1、R2、R3、标准液）。
6．检测环境条件
实验室温度18～27℃、湿度30～70%
7．步骤与方法
7.1 检测前准备
７.１.1 仪器设备准备：执行《紫外可见分光光度计操作规程》。
７.１.2 试剂准备：检查试剂盒内试剂瓶是否完好、有无渗漏，瓶内试剂有无浑浊、沉淀、变色及异物，容量是否满足工作需要。
查看批号和有效期，确保在有
效期内使用。
７.１.３其他物品准备：检查EP管、一次性吸管、硬塑试管无破损、变形及污染，整齐摆放于实验台上；用记号笔在3支硬塑试管壁上分别标识“测试管”和“标准管”、“空白管”。
7.2 标本处理
打开离心机，将容量相近标本试管对称放入离心机转子内，3000r/min，离心5分钟，吸取上层血浆，将获得的血浆再次离心，吸取不含红细胞的血浆待用。
7.3 检测
7.3.1加样
7.3.1.1用微量移液器按照表21-1所示步骤，将试剂和标本分别加入对应的硬塑试管内。
表21-1 血浆游离血红蛋白检测加样步骤
测试管标准管空白管
1．血浆（μl）100 －－
2．Hb标准液（μl）－100 －
3．生理盐水（μl）－－100
4．R1（μl）1000 1000 1000
5．R2（μl）1000 1000 1000
6．R3（μl）100 100 100
7.3.1.2加样完毕，取三支试管帽，将3支试管盖上，手持试管两端，来回颠倒3～5次，混匀，放于试管架上；打开37℃恒温水浴箱，将试管连同试管架一起放入水浴箱中，孵育20分钟。
水浴箱内水位应高于试管内液面高度，但不得超过试管管口。
7.3.2 检测
从水浴箱中取出试管及试管架。
将“空白管”、“标准管”、“测试管”中的反应液倒入预先准备好的比色皿中，倒入量以稍超过比色皿体积的2/3为宜。
在505nm波长处进行比色。
打开样品槽，放入“空白管”比色皿调零。
然后依次放入“标准管”、“测试管”进行比色，读取各管吸光度。
检测剩余标本进行后续实验，如时间不允许，将标本连同试管架一起暂放入标本冰箱保存。
7.3.3计算
利用所测得的数据计算每袋全血或红细胞类血液制品的游离血红蛋白含量及
溶血率，计算公式如下：
（1）血浆/上清液游离血红蛋白浓度计算公式：
游离血红蛋白浓度(mg/L)=
100
⨯标准管吸光度
测定管吸光度
（2）每袋血液中血浆/上清液游离血红蛋白含量计算公式：
游离血红蛋白含量（mg ）=游离血红蛋白浓度(mg/L)×血液制品容量（ml ）/1000 （3）溶血率计算公式：
溶血率（%）=
容量
血红蛋白浓度
蛋白浓度
血浆或悬浮液游离血红
容量红细胞比容
⨯⨯⨯-)1(
8．结果的判定
储存末期溶血率＜红细胞总量的０.８％；游离血红蛋白含量≤１ｇ／Ｌ。
抽样检测合格率应≥75%。
9．分析和报告
将检测结果记录于《血液质量检测记录》中，分析血液制品血浆/悬浮液中游离血红蛋白含量或储存末期溶血率是否符合全血及成分血质量标准。
打印《血液质量检测报告》。
出现不符合全血及成分血质量标准的结果，质量控制部门进行原因调查分析，提出纠正、预防措施，通知相关科室实施改进，并将结果报告质量管理部门及站领导。
10．质量控制
仪器使用前应对其状态进行确认,项目检测严格执行标准操作规程 11. 相关文件
《血液常规抽检控制程序》 《紫外可见分光光度计操作规程》 12. 相关记录
《血液质量检测记录》 《血液质量检测报告》。