HPLC常见问题解析
hplc压力问题及排查方法
hplc压力问题及排查方法
HPLC(高效液相色谱)的压力问题可能包括压力过高或过低。
下面是一些常见的排查方法：
1. 检查柱连接：确保柱连接紧密，并且没有漏气或松动的地方。
可以用手轻轻转动连接处，看是否有松动。
需要重新连接的话，确保连接处干净无异物。
2. 检查管道：检查管道是否有任何堵塞或压力泄漏的情况。
可以检查压力节流阀、减压阀和调节阀等部件。
3. 检查流量设置：检查流量设置是否正确。
如果设置过高，则可能会导致压力过高。
参考仪器的操作手册，按照所需的分析条件进行设置。
4. 检查溶剂：确保使用的溶剂无杂质或气泡。
杂质或气泡可能会导致压力过高。
可以尝试更换新鲜的溶剂，或者通过过滤器除去杂质。
5. 检查柱压力：检查柱的压力是否正常。
柱的堵塞、损坏或老化可能导致压力过高。
如果怀疑柱的问题，可以尝试更换新的柱试试。
6. 检查泵：检查泵的泵头、活塞和密封环是否良好。
泵的密封环磨损或泵头松动可能导致压力问题。
7. 检查压力传感器：检查压力传感器是否正常工作。
如果压力传感器损坏或失灵，可能导致压力测量不准确。
如果以上排查方法仍然无法解决问题，建议联系仪器厂家或技术支持，寻求进一步的帮助和建议。
HPLC常见问题原因及解决方案
HPLC常见问题原因及解决方案一）压力异常操作压力的变化往往是故障的征兆。
A、没有压力显示，没有流动相流动：原因解决方法1、电源问题接通电源，开机2、保险丝被烧坏更换保险丝3、控制器设定不正确或设定失败采取恰当的设定、、修理或更换控制器4、柱塞杆折断更换柱塞杆5、泵头内有空气溶剂脱气、启动泵抽出空气6、流动相不足补充流动相、更换入口滤头7、单向阀损坏更换单向阀8、漏液拧紧或更换手紧接头B、流动相流动正常，但没有压力显示：原因解决方法1、仪表损坏更换仪表2、压力传感器损坏更换压力传感器C、压力持续偏高原因解决方法1、流速设定过高调整流速设定2、柱前筛板堵塞反冲色谱柱、更换筛板、更换色谱柱3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀使用恰当的流动相、冲洗柱塞杆。
4、色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱5、进样阀损坏清洗或更换进样阀6、柱温过低提高温度7、控制器失常修理或更换控制器8、保护柱阻塞清洗或更换保护柱9、在线过滤器阻塞清洗或更换在线过滤器D、压力持续偏低：原因解决方法1、流速设定过低调整流速2、系统漏液确定漏液位置并维修3、色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱4、柱温过高降低温度5、控制器失常维修或更换控制器E、压力波动：原因解决方法1、泵中有气体溶剂脱气、从泵中除去气体2、单向阀损坏更换单向阀3、泵密封损坏更换泵密封4、脱气不充分重新过滤一遍、溶剂脱气5、系统漏液确定漏液位置并维修6、使用梯度洗脱由于流动相粘度的变化引起的压力波动二）漏液通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。
但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。
如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题，就必须将接头取下，检查是否损坏（例如，卡套损坏、密封表面有杂质）；损坏的接头应该更换掉。
A）接头处漏液原因解决方法1、接头松动拧紧2、接头磨损更换3、接头过紧拧松，再重新拧紧、更换4、接头被污染拆下清洗、更换5、部件不匹配使用同一品牌的配件B）泵漏液原因解决方法1、单向阀松动拧紧单向阀（不必拧的过紧）、更换单向阀。
高效液相色谱常见故障及解决方案
高效液相色谱常见故障及解决方案1.压力过高或过低-压力过高可能是由于柱堵塞或流动阻力增加所致。
解决方案包括更换柱、清洗柱或检查管路是否存在问题。
-压力过低可能是由于泵的磁力搅拌器不工作或进样器封堵所致。
解决方案包括检查泵的磁力搅拌器是否工作正常，清洗进样器。
2.峰形不对称-峰形不对称可能是由于进样量不均匀或柱温度过高所致。
解决方案包括确保进样量均匀和降低柱温度。
3.峰尾或前肩-峰尾可能是由于柱温度过高、流速过快或流动相pH值不合适所致。
解决方案包括降低柱温度、减慢流速或调整pH值。
-前肩可能是由于流动相中存在杂质或柱堵塞所致。
解决方案包括更换流动相或清洗柱。
4.杂峰或基线噪声-杂峰可能是由于样品纯度不高、固定相老化或试剂污染所致。
解决方案包括提高样品纯度、更换固定相或检查试剂是否污染。
-基线噪声可能是由于进样器密封不良、流动相气泡或电噪声所致。
解决方案包括检查进样器密封情况、减少流动相中的气泡或检查电子设备是否存在干扰。
5.柱寿命短-柱寿命短可能是由于样品预处理不彻底、柱收尾不当或流动相pH值不合适所致。
解决方案包括增加样品预处理步骤、正确收尾柱或选择合适的流动相pH值。
6.流量不稳定-流量不稳定可能是由于柱堵塞、进样器密封不良或流动相流速波动所致。
解决方案包括清洗柱、检查进样器密封情况或调整流动相流速稳定性。
7.进样量偏差-进样量偏差可能是由于进样器封堵、进样器针头磨损或进样器流速不稳定所致。
解决方案包括清洗进样器、更换进样器针头或调整进样器流速稳定性。
8.柱温度不稳定-柱温度不稳定可能是由于温控系统故障或环境温度变化所致。
解决方案包括检查温控系统是否工作正常或采取措施保持恒定环境温度。
这些是HPLC常见故障及其解决方案的例子。
在实际操作中，操作人员应该根据具体情况诊断和解决故障，并遵循相关的操作规程和安全操作指南。
HPLC常见问题解读
1. 2. 3. 4. 1100/1200/1200SL 系列 1260 系列 1120/1220系列 1290
流动相系统的问题
溶剂过滤头 （脏，长菌—堵塞） 处理步骤： • 水冲洗残留的溶剂 • 浓硝酸（35％）的烧杯里浸泡2小时 • 二次蒸馏水彻底冲洗过滤器
• 不能使用超声波清洗，金属滤头可以超声
Metering device Sampling unit
准备位置
From pump 6-port valve To waste To column
调用样品瓶吸样品
进样和运行位置
ALS常见故障和解决方案
1. 自检不通过 ：传动单元是否有异常、绿色指帽是否脱落、门没 关、8位开关除尘，无水酒精擦拭传动杆 2. 漏液：检查loop和针的接头处、针和针座连接处、六通阀 3. 抓手位置偏移 ：工程师上门维修
泵常见的问题
• 单向阀的问题
主动阀： 阀芯可以使热水，甲醇，异丙醇超声或更换 被动阀 ：不建议超声 • 出口阀 ：冲洗或更换
如果不泵液体，不管是AIV还是PIV，拆下来，使用洗耳球吹 一下，再装上去，使用纯甲醇冲洗，一般10min就好
泵常见的问题
3. 泵漏液：
处理 ：
• 泵的密封圈漏液更换 （建议一年换一次） • Seal wash的二级密封圈漏液，更换
4. Seal wash 蠕动泵漏液或不能泵液
原因 ：白色蠕动泵管线老化粘连
进样器系统/手动进样G1328A/B/C
手动进样G1328A/B/C
常见的故障：“堵”、 “漏 ”
1. 堵：按照流路分段排查—loop、转子超声 2. 漏：针导入流路和转子是否磨损（状况：压力不稳，进完样有液体从 进样口流出，重现性差，残留严重） 3. 阀的清洗 a. 将进样器转至Inject位置，利用泵冲洗(冲洗样品环及沟槽） b. 用阀清洗接头和注射器冲洗
HPLC的故障诊断及其维修
HPLC的故障诊断及其维修在实验室中，高效液相色谱(HPLC)是一种常用的分析方法，但是使用过程中可能会出现一些故障。
下面将对HPLC的常见故障进行诊断和维修。
1. 压力问题如果HPLC系统的压力异常升高或降低，可能是由于柱堵塞、封口件失效或泵的问题引起的。
此时需要检查柱是否需要更换，清洗封口件或者校准泵的工作方式。
2. 色谱峰形问题如果HPLC的色谱峰出现拖尾、畸变或分离不良的情况，可能是由于进样器、柱或检测器的问题。
此时需要检查进样器的清洁程度、柱的使用寿命以及检测器的工作状态。
3. 泄漏问题HPLC系统的泄漏可能会导致试剂的浪费并且对操作人员造成危险。
在发现泄漏时，需要立即停止使用HPLC系统，并检查管路和连接件是否紧固，替换损坏的零件。
4. 溶剂问题HPLC的溶剂可能会受到污染或者流速不稳定，导致分析结果不准确。
此时需要更换新的溶剂瓶、清洗管路和泵，并重新校准流速。
以上是HPLC常见的故障诊断和维修方法，为了保证分析结果的准确性和仪器的稳定性，实验室操作人员需要定期对HPLC进行检查和维护。
高效液相色谱（HPLC）作为一种准确、灵敏和可靠的分析技术，在化学、生物和制药领域中得到了广泛的应用。
然而，HPLC分析过程中常会遇到一些故障，这些故障可能会影响分析结果的准确性和可靠性。
因此，了解常见的HPLC故障并掌握相应的维修方法对于保障实验室分析工作的顺利进行至关重要。
5. 柱温度问题HPLC柱温度的稳定对于分离和检测分析结果非常重要。
如果发现柱温度不稳定或者超出设定范围，一般可以通过检查柱箱温度控制器、换热器或者冷却器来确定问题所在，并及时调整或更换相关部件。
6. 泵的稳压性能问题HPLC泵的稳压性能直接影响流速和流量的准确性。
如果发现流速或者流量不稳定，需要检查压力传感器、活塞密封件等部件是否出现损坏或者磨损，及时更换损坏部件进行维修。
7. 检测器故障检测器在HPLC分析中起着至关重要的作用，如果出现检测信号异常、漂移或者峰形畸变，需要检查检测器灯泡是否老化，光路是否受到污染或者调整参数设置是否准确，进行相应的维修和调整。
高效液相色谱仪故障排除指南
高效液相色谱仪故障排除指南高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）作为一种常用的分析仪器，可以广泛应用于药物分析、环境检测、食品科学等领域。
然而，在使用过程中，不可避免地会出现一些故障情况。
本文将介绍一些常见的HPLC故障，并提供相应的排除方法。
一、进样器故障1. 进样器漏液若观察到进样口出现漏液现象，首先可以检查密封件是否完好，如若密封件损坏应及时更换。
若密封件完好，还可以检查进样器盖上是否存在污垢，若有，则可清洗并重新安装。
2. 进样器堵塞如果在进样过程中发现进样器堵塞，可以先使用无机溶液进行冲洗，以清除可能存在的样品残留物。
如果仍然无法解决堵塞问题，可以采取拆卸进样器进行彻底清洗的方法。
二、柱温箱故障1. 温度控制不稳定若柱温箱的温度控制不稳定，可能会导致分离信号的漂移，影响分析结果的准确性。
这时，可以首先检查温度控制仪是否设置正确，如有必要，可以重新设置。
另外，也可以检查柱温箱是否存在漏气现象，若存在，应及时修复。
2. 柱温箱泄漏柱温箱泄漏可能会导致温度失控，因而影响分析结果。
检测到泄漏时，应首先检查柱温箱的密封性能，如有必要，可以更换密封圈，确保密封良好。
三、流动相泵故障1. 流量不稳定如果在使用流动相泵时，发现流量不稳定，可能是由于空气进入了系统，导致气泡形成。
这时，可以检查胶管连接是否松动，以及胶管中是否有积气现象。
如果检查后仍然无法解决问题，可以考虑更换胶管或检修流动相泵。
2. 压力异常如果HPLC系统在运行过程中压力异常，可能是由于流动相泵的压力传感器出现问题。
此时，应检查压力传感器是否损坏，如有必要，可以进行维修或更换。
四、检测器故障1. 检测器信号异常如果在分析过程中，检测器的信号异常，可能是由于光源出现故障导致。
这时，可以检查光源是否正常工作，如有必要，可以更换光源。
另外，也可以尝试调整检测器的增益或灵敏度，以改善信号异常问题。
HPLC常见问题
问：用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决? 答：关于漂移问题：1温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定2流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡关于快速变化问题1流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定2泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。
3流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合问：HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法答：1样品量不足：解决办法为增加样品量2样品未从柱子中流出：可根据样品的化学性质改变流动相或柱子3样品与检测器不匹配：根据样品化学性质调整波长或改换检测器4检测器衰减太多：调整衰减即可。
5检测器时间常数太大：解决办法为降低时间参数6检测器池窗污染：解决办法为清洗池窗。
7检测池中有气泡：解决办法为排气。
8记录仪测压范围不当：调整电压范围即可。
9流动相流量不合适：调整流速即可。
10检测器与记录仪超出校正曲线：解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。
问：做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在?如何解决?答：原因可能有：1泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；2比例阀失效，更换比例阀即可。
3泵密封垫损坏，更换密封垫即可。
4溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；5系统检漏，找出漏点，密封即可。
6梯度洗脱，这时压力波动是正常的。
保留时间变化1.柱温变化柱恒温2.等度与梯度间未能充分平衡至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够用>25mmol/L的缓冲液4.柱污染每天冲洗柱5.柱内条件变化稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命采用保护柱保留时间缩短1.流速增加检查泵,重新设定流速2.样品超载降低样品量3.键合相流失流动相PH值保持在3~7.5检查柱的方向4.流动相组成变化防止流动相蒸发或沉淀5.温度增加柱恒温保留时间延长1.流速下降管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡2.硅胶柱上活性点变化用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱3.键合相流失同前(二)34.流动相组成变化同前(二)45.温度降低同前(二)5出现肩峰或分叉1.样品体积过大用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%2.样品溶剂过强采用较弱的样品溶剂3.柱塌陷或形成短路通道更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件4.柱内烧结不锈钢失效更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品5.进样器损坏更换进样器转子鬼峰1.进样阀残余峰每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗2.样品中未知物处理样品3.柱未平衡重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱)4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱) 每天新配,用抗氧化剂5.水污染(反相) 通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水6:气泡干扰。
HPLC谱图异常问题与原因及解决方法
HPLC谱图异常问题与原因及解决方法液相色谱系统的许多问题都能在谱图上反映出来。
其中有一些问题可以通过改变设备参数得到解决；而其他的问题必须通过修改操作程序来解决，对于色谱柱和流动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。
b、峰前延原因解决方法1、样品溶剂选择不恰当使用流动相作为样品溶剂2、样品过载降低样品含量3、色谱柱损坏见a1、a24、出峰时间太早色谱柱没有保留，物质自然扩散，增加物质在色谱柱上的保留5、柱温低允许范围内升高柱温6、干扰峰,未分开a、使用更长的色谱柱b、改变流动相7、柱外死体积较大用细径管路和小体积流通池，各接口连接紧密原因解决方法1、保护柱或分析柱污染a、取下保护柱再进行分析；b、如果必要更换保护柱；c、如果分析柱阻塞，拆下来清洗；d、如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施；e、如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。
2、样品溶剂不溶于流动相改变样品溶剂，如果可能采取流动相作为样品溶剂。
3、保护柱填料与分析柱填料不一致更换保护柱，最好使用相同厂家相同品牌的保护柱和分析柱4、检测器出口阻塞。
（高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线） 取出阻塞物或更换管子。
参考检测器手册更换流通池窗。
5、流动相配比不当或流速变化 更改配比或流速。
为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速。
6、柱平衡慢，特别是流动相发生变化时 用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10-20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗。
7、流动相污染、变质或由低品质溶剂配成 检查流动相的组成。
使用高品质的化学试剂及HPLC 级的溶剂8、样品中有强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。
使用保护柱，如有必要，在进样之间或在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子。
原 因解决方法1、在流动相、检测器或泵中有空气流动相脱气。
冲洗系统以除去检测器或泵中的空气.2、漏液 检查管路接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。
高效液相色谱使用中常见问题及对策
高效液相色谱使用中常见问题及对策
高效液相色谱（High-Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种常用的分离和分
析技术。
在使用HPLC的过程中，可能会遇到一些常见问题，以下是一些可能的问题及对策：
1. 峰形不对称或分离不良：可能是由于柱问题引起的。
可以尝试更换柱，确保柱的性能良好，
并尽量避免超出柱的最大推荐压力。
2. 峰形峭度低：这可能意味着分离不充分。
可以尝试调整流动相的组成、pH值或流速来改善
分离。
3. 噪音较大：可能是由于进样器或检测器的问题引起的。
可以检查进样器和检测器的状态，并
确保它们正常运行。
4. 色谱柱寿命较短：这可能是由于样品中的杂质或试剂导致的。
可以尝试优化样品的准备方法，如前处理或过滤样品，以减少对柱的损害。
5. 流动相配制错误：这可能导致峰错位或分离不良。
可以仔细检查流动相的配制方法和溶剂的
纯度，确保配制正确。
6. 峰定量不准确：可能是由于进样量不准确或方法参数设置不合适引起的。
可以检查进样量的
准确性，并根据实际情况调整仪器参数。
7. 泵压过高：可能是由于管路堵塞或柱封堵引起的。
可以检查管路是否通畅，并根据需要更换
柱或清洗柱。
8. 柱渗漏：可能是由于柱端部密封不良或柱老化引起的。
可以检查柱端部的密封情况，并确保
柱处于良好状态。
针对以上问题，及时检查、调整和维护HPLC设备，并根据具体情况进行修复或更换，可以提
高HPLC分析的效果和结果的准确性。
HPLC高效液相色谱故障排除及解决办法解析
•检测器设置不正确 •进样体积太大或样品浓度太高
色谱图常见问题分析(二)
•色谱峰保留时间问题:
–保留时间飘忽不定(各次运行之间)
•系统不稳定或未达化学平衡 •泵压力不稳(泵头里有气泡) •进样体积过大或样品浓度过大 •温度波动 •流动相混合不均匀 •色谱柱被污染
色谱图常见问题分析(二)(续)
–一个或几个峰是负峰
•流动相吸收本底高 •进样过程中进了空气 •离子对分离中的系统峰 •样品组分的吸收(RI或UV)低于流动相
色谱图常见问题分析(一)(续)
•色谱峰峰形异常问题:
–所有的峰均为负峰:
•信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒 •光学装置尚未达到平衡
–所有的峰都是宽峰
•系统未平衡或未达到化学平衡 •溶样的溶剂比流动相强很多 •色谱柱类型或尺寸不正确 •色谱柱或保护柱被污染或降级 •温度变化对色谱柱的影响
•色谱峰保留时间问题:
–保留时间增加或减少(各次运行之间)
•系统不稳定或化学平衡不足 •泵流速变化 •温度变化 •色谱柱污染,柱效下降 •流动相被污染 •溶剂入口过滤器堵或管路堵塞 •系统渗漏
色谱图常见问题分析(二)(续)
•色谱峰保留时间问题:
–保留时间改变到一个新的恒定值
•流动相不正确或其组成不正确 •泵流速变化 •实际输液的流速不正确(泵失灵或故障) •环境温度变化；柱温不正确 •色谱柱尺寸或类型不正确 •色谱柱被污染 •流动相含有稳定剂或稳定剂发生变化 •输液系统的梯度滞后体积不正确
• 规则四∶尝试预测将来可能发生的问题。利用成功的故 障排除经验来改善您目前的预防保养工作,使现 有问题再发率降至最低。
• 规则五∶养成记录的好习惯。一个好记录是成功地进行 故障排除的关键。
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脱气机常见问题
1. 脱气效果降低 ，通道管线内壁出现气泡，有堵塞 处理方法： • 简单处理 ：60℃热水冲洗1h，再用纯甲醇或异丙醇冲洗1h（建 议至少1个月做一次） • 深度处理：10%双氧水加1%冰醋酸冲洗 • 特殊处理 ：正相系统，可以考虑使用二氯甲烷，丙酮，正己烷 等溶剂冲洗 2. 漏液：一般都是脱气机的腔体坏了，需要上门维修
常见的问题和解决思路
4. 噪音大的问题
• 流动相引起的 ，取出流通池观察！（简单有效） • 压力不稳 • 光路污染
• 流通池污染
• 灯使用寿命到了，能量不稳
示差检测器RID
RID受温度和流动相均一性的影响很大
使用注意事项： • 溶液瓶和废液瓶应高于泵和检测器，这样使流动池产生轻微压 力有助于提高检测器的性能 • RID的耐受压力max=5bar，若要串联其它检测器，RID放在最后
• 柱温箱温度和RID温度差异较大
• 实验室温度不稳定，或靠近出风口或门口
2. 黄灯，未就绪，错误信息为光能量不足、二极管未平衡。
• 确认冲洗阀处于关闭状态，因为在冲洗参比池的时候时差永远不会 就绪的 Note：充分冲洗参比池非常重要，另外长时间的运行流动相，需要及 时重新冲洗
荧光检测器FLD
常见的问题：噪音大
检测器V题和解决思路
1. 灯不能点亮：
• • • 灯的使用时间 连接是否良好 考虑硬件故障
2. 能量测试不过：
•
• •
灯打开预热时间足够，系统使用水冲洗干净
灯使用寿命 流通池、光学单元污染
常见的问题和解决思路
3. 波长丢失，校正失败
• 何时需要校正 ：换灯，换流通池 ，更换主板 • 如何校正：开灯10min以上，纯水冲洗系统 • 为何失败 ：当0点和656nm的强度在规定范围内没有找到，显示 失败 解决思路 ： • 水不合格；流通池有气泡 ；流通池污染；光栅马达损坏或偏离， 可以做个光栅测试；主板问题 • 老的1100，建议尝试一下8位开关的除尘，再试试看
手动进样的重现性差问题
1. 防止虹吸，第五、六号放空管的出口与进样口保持在同一平面 2. 由于毛细管效应进样的体 积至少是定量环体积的3倍 3. 使用合规格的进样器，推荐
平头针，不能使用尖头针
4. 进样方法： load位置注入样品，迅速转到inject位置，稍等2S， 拔针
ALS的进样程序和系统
• 取出流通池观察，石英窗是否洁净，用超纯水冲洗并观察基线以判 断是否溶剂不纯
• 灯能量问题，换灯观察，氙灯一般可以使用4000h以上
• 光路污染
Note: • 由于FLD是使用电子倍增器放大信号的，所以同一个实验室的两台 FLD的响应有差异很正常，没有可比性，只要同一台的重现性良好 就可以了 • FLD的流通池只能耐压20bar，同样安装在液相系统的末端
Metering device Sampling unit
准备位置
From pump 6-port valve To waste To column
调用样品瓶吸样品
进样和运行位置
ALS常见故障和解决方案
1. 自检不通过 ：传动单元是否有异常、绿色指帽是否脱落、门没 关、8位开关除尘，无水酒精擦拭传动杆 2. 漏液：检查loop和针的接头处、针和针座连接处、六通阀 3. 抓手位置偏移 ：工程师上门维修
4. 堵：压力高或进样前后压力差超过10bar
• 按照流路分段排查，反冲
• 大部分堵的地方都在针、针座、六通阀等部分 （针、针座可以反冲或拆下来超声；六通阀可以考虑“对特定的点”反接 冲洗，但最彻底的办法是拆开超声清洗转子、定子、阀头）
ALS常见故障和解决方案
5. 峰面积重现性不好 解决思路 ： • 样品粘稠，抽吸速度不合适 • 计量泵密封圈磨损
泵常见的问题
• 单向阀的问题
主动阀： 阀芯可以使热水，甲醇，异丙醇超声或更换 被动阀 ：不建议超声 • 出口阀 ：冲洗或更换
如果不泵液体，不管是AIV还是PIV，拆下来，使用洗耳球吹 一下，再装上去，使用纯甲醇冲洗，一般10min就好
泵常见的问题
3. 泵漏液：
处理 ：
• 泵的密封圈漏液更换 （建议一年换一次） • Seal wash的二级密封圈漏液，更换
泵常见的问题
1. 压力高： 流路分段拆开排查
•
•
使用水，无毒，经济
首先考虑过滤白头 所有堵的处理方法都是一样：合适的溶剂合适的位置反冲
泵常见的问题
2. 压力不稳或不能泵出液体
原因： a. 气泡 b. 比例阀 c. 单向阀 d. 泵头密封圈磨损 处理思路： • 气泡引起的：100%纯甲醇冲洗系统（不建议异丙醇，粘度过大， 后续工作繁琐 ） • 比例阀内漏或堵塞引起的：可以先使用溶剂冲洗方法，（50℃度 热水，纯甲醇，或10%双氧水）。如果不行则建议工程师上门更 换维修了。
HPLC常见的机型
1. 2. 3. 4. 1100/1200/1200SL 系列 1260 系列 1120/1220系列 1290
流动相系统的问题
溶剂过滤头 （脏，长菌—堵塞） 处理步骤： • 水冲洗残留的溶剂 • 浓硝酸（35％）的烧杯里浸泡2小时 • 二次蒸馏水彻底冲洗过滤器
• 不能使用超声波清洗，金属滤头可以超声
• 开启控温功能令光路恒温，最好将温度设置至少高于室温5℃以 上
• 使用合适的response time通常用4S
• 一定要预先混合好流动相，如果是四元泵，请将比例阀旁路
RID常见的问题
1. 基线漂移：
• 通常是溶剂变化引起的，如，乙腈/水混合，乙腈会挥发；四氢呋喃 (THF)会形成过氧化物；某些吸水溶剂等
4. Seal wash 蠕动泵漏液或不能泵液
原因 ：白色蠕动泵管线老化粘连
进样器系统/手动进样G1328A/B/C
手动进样G1328A/B/C
常见的故障：“堵”、 “漏 ”
1. 堵：按照流路分段排查—loop、转子超声 2. 漏：针导入流路和转子是否磨损（状况：压力不稳，进完样有液体从 进样口流出，重现性差，残留严重） 3. 阀的清洗 a. 将进样器转至Inject位置，利用泵冲洗(冲洗样品环及沟槽） b. 用阀清洗接头和注射器冲洗
• 转子密封圈磨损
• 进样系统堵塞：针、针座、4号排空管路
ALS常见故障和解决方案
6. 进样残留大
• 洗针瓶的瓶盖
• 进样针外壁和针座接触处 • 六通阀管线接头处存在死体积 • 转子面
柱温箱注意事项
• 左右加热快体积不一样，左边3ul，右边 6ul。一般首选左侧加热块 以减小延迟体积和死体积 • 当使用温度比室温低，或者夏天的时候，仪器报警，泄露，考虑关 闭冷凝水功能，或者直接关闭泄露传感器 • TCC堵了，反冲 • RID分析乳糖(药典方法)如果有噪音大的问题，需要对TCC就行改造。