β-1,3 葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-GA)试剂盒说明书
人1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-Dglucosidase)酶联免疫分析ELISA

人1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucosidase)酶联免疫分析ELISA试剂盒操作步骤本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucosidase)含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucosidase)水平。
用纯化的人1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucosidase)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucosidase),再与HRP标记的1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucosidase)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucosidase)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucosidase)浓度。
样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
_葡聚糖酶的特性_功能及应用研究

_葡聚糖酶的特性_功能及应用研究葡聚糖酶(Glucanase)是一类能够降解葡聚糖(Glucans)的酶,能够水解α-1,4-糖基键和α-1,3-糖基键。
葡聚糖是一类多糖,包括淀粉、纤维素、甘露聚糖等,在生物界广泛存在。
葡聚糖酶具有多种特性和功能,并在不同领域得到广泛应用。
首先,葡聚糖酶具有广泛的底物特异性。
由于葡聚糖酶家族的多样性,不同的葡聚糖酶可以降解不同类型的葡聚糖。
例如,α-淀粉酶(α-Amylase)能够降解淀粉,β-葡聚糖酶(β-Glucanase)能够降解纤维素。
这种底物特异性使得葡聚糖酶有很高的应用潜力,可以用于不同领域的葡聚糖降解。
其次,葡聚糖酶在生物体内具有重要的消化功能。
例如,α-淀粉酶能够在口腔和胃中降解淀粉为糖,为身体提供能量。
β-葡聚糖酶则能够在植物细胞壁中降解纤维素,帮助植物释放能量。
这表明,葡聚糖酶在生物体内起着重要的消化功能,对于食物的利用和能量供应至关重要。
此外,葡聚糖酶也具有重要的工业应用价值。
在食品工业中,葡聚糖酶可以用于面包和饼干的制作,帮助改善面团的延展性和脆性。
在饲料工业中,葡聚糖酶可以被添加到畜禽饲料中,帮助提高饲料的消化率和营养价值。
在纺织工业中,葡聚糖酶可以被用于纤维的预处理,帮助去除纤维表面的葡聚糖,提高纤维染色效果。
在生物燃料领域,葡聚糖酶可以被用于植物纤维素的降解,提取出可转化成生物燃料的糖类物质。
最后,葡聚糖酶的研究也具有重要的生物学意义。
葡聚糖作为生物体内普遍存在的多糖,其降解过程涉及到多种酶类的参与,如α-淀粉酶、β-葡聚糖酶等。
通过研究葡聚糖酶的结构和功能,可以深入了解多糖降解的分子机制和调控机制,进而为糖代谢相关疾病的研究提供理论基础。
综上所述,葡聚糖酶具有广泛的特性和功能,并在食品工业、饲料工业、纺织工业、生物燃料领域等得到广泛应用。
此外,葡聚糖酶的研究也对生物学领域有重要的意义。
通过进一步研究葡聚糖酶的结构和功能,可以为更广泛的应用和研究提供理论基础。
1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒,人ELISA试剂盒说明书

1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒,人ELISA试剂盒说明书1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒,人ELISA试剂盒说明书供应商:上海乔羽生物有限公司ELISA试剂盒规格:(1) 规格:96T 可以测90个样,5个标准孔,1个空白孔(2) 规格:48T 可以测42个样,5个标准孔,1个空白孔1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒,人ELISA试剂盒说明书calculation:The standard concentration as the abscissa, the OD value for the vertical, draw the standard curve on coordinate paper, according to the sample OD value by standardThe calculation value of the linear regression equation of the corresponding concentration curve, multiplied by the dilution factor, or the standard concentration and the standard valueThe value of the curve in the sample is in the equation, the sample density is calculated, and the dilution factor is the actual concentration of the sample.1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒,人ELISA试剂盒说明书试剂盒组成:封板膜:2片(48)/2片(96)说明书:1份密封袋:1个标准品:2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液: 3ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液: 3ml×1瓶6 ml×1瓶2-8℃保存终止液: 3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存elisa试剂盒价格,elisa试剂盒说明书,elisa检测试剂盒1,3-βDglucosidaseelisa试剂盒,人ELISA试剂盒说明书试剂的准备:按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。
β-葡聚糖酶活力测定

β-葡聚糖酶活力测定方法• 1 原理•β-葡聚糖酶(EC.3.2.1.6)水解1,3(4)-β-D-葡聚糖苷键,放出还原糖基团与3,5-二硝基水杨酸(DNS试剂)发生显色反应,其颜色的深浅与还原糖的含量成正比关系,在540nm测其光的吸收值,查标准曲线(以葡萄糖计),可得到还原糖的量,据此计算β-葡聚糖酶的活力。
• 2 仪器和设备• 2.1 分析天平:精度0.0001g• 2.2 恒温水浴:精度±0.2℃• 2.3 计时表• 2.4 分光光度计• 2.5 沸水浴器• 2.6 振荡混合器• 2.7 pH计: 精度0.01pH单位• 3 试剂和溶液• 3.1 0.1M乙酸-乙酸钠缓冲溶液(pH5.0)•溶液A:量取冰醋酸6ml,定容至1000ml,制成0.1M醋酸溶液。
•溶液B:称取8.2g醋酸钠,溶解定容至1000ml,制成0.1M醋酸钠溶液。
•使用时以A:B =3:7的比例混合,低温冷藏备用。
• 3.2 1%的β—葡聚糖溶液的配制•准确称取0.25gβ—葡聚糖放入100ml锥形瓶中,加2ml无水乙醇摇匀到无可见颗粒。
加20ml无离子水混合15分钟,盖紧塞子在沸水中煮5分钟,放置室温自然冷却,或用自来水流水降温。
将已冷却到室温的底物溶液倾入一只25ml容量瓶中,加入2.5ml1M醋酸缓冲液(pH5.0),并用无离子水定容到25ml。
• 3.3 3,5—二硝基水杨酸(DNS)溶液•溶液A:称分析纯的NaOH 104g溶于1300ml水中,加入30g分析纯3,5-二硝基水杨酸。
•溶液B:称分析纯酒石酸钾钠910g,溶于2500ml水中,再称取25g重蒸苯酚和25g无水亚硫酸钠加入酒石酸钾钠溶液。
•将A、B溶液混合,加入1200ml水,定容5000ml,贮存于棕色瓶中,暗处放置一星期后过滤使用。
• 3.4 0.1%苯甲酸• 0.1g苯甲酸加入大约80ml无离子水中溶解,用无离子水定容至100ml。
真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测操作SOP文件

声明本产品属精密光学仪器,在日常使用中,应严格按照我公司出具的操作流程进行试验操作,并确保工作环境正常。
本试验的操作者必须为经我公司培训合格的微生物实验室检验人员,如需更换操作者,请做好交接工作,确保新的操作者了解仪器特性、熟悉操作流程。
为避免试验结果不准确,请操作者认真阅读操作注意事项及操作流程,并严格遵守。
如有任何疑问,请联系我公司售后服务部。
售后服务部电话:400-811-9958北京金山川科技发展有限公司真菌(1-3)-β-D葡聚糖测定1.目的建立真菌(1-3)-β-D葡聚糖检测标准操作规范,保证实验结果的准确性。
2.授权操作人经培训合格的微生物实验室检验人员。
3.实验原理(1-3)-β-D葡聚糖检测原理:真菌(1-3)-β-D葡聚糖激活酶反应主剂中的G因子后形成凝固蛋白,根据其所引起的浊度变化对真菌(1-3)-β-D葡聚糖浓度进行定量测定。
(1-3) -D-Glucan活化因子G 因子G凝固酶原凝固酶凝固蛋白原凝固蛋白(凝胶)4.产品性能指标4.1 灵敏度最小检出值5pg/ml5.实验组成5.1实验仪器及器具:MB-80微生物快速动态检测系统、洁净工作台、低速离心机、恒温仪, 20~200ul 加样器、100~1000ul加样器、旋涡混合器、定时器。
5.2实验耗材:200ul无热原吸头、1000ul无热原吸头、无热原平底试管、无热原真空采血管。
5.3试剂盒组成:真菌(1-3)-β-D 葡聚糖检测试剂盒(光度法):试剂盒包括反应主剂和样品处理液。
6.工作环境相对湿度:20%~80%;温度控制:10~30℃;电源电压:220V±10%,50Hz±2%。
7.标本采集、处理及保存7.1检测样本:血液、肺泡盥洗液、胸腔积液、腹水、脑脊液、尿液(无菌取中段尿或穿刺尿)7.2采集要求:采样过程要求无菌操作,用专用的无热原真空采血管(肝素类抗凝)。
常规病人早上用药治疗前空腹采血/取样(血透患者透析前采血)。
β葡萄糖苷酶β-glu酶联免疫分析

β葡萄糖苷酶(β-glu)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T1.2IU/L –42IU/L使用目的:本试剂盒用于测定土壤样本中β葡萄糖苷酶(β-glu)的活性。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中β葡萄糖苷酶(β-glu)水平。
用纯化的β葡萄糖苷酶(β-glu)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β葡萄糖苷酶(β-glu),再与HRP标记的β葡萄糖苷酶(β-glu)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的β葡萄糖苷酶(β-glu)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中β葡萄糖苷酶(β-glu)活性浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶AaBglu12A的表达、酶学性质及应用

泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶AaBglu12A的表达、酶学性质及应用泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶AaBglu12A是一种具有重要应用潜力的酶。
本文将从表达、酶学性质及其应用等方面进行介绍。
泡盛曲霉(Phanerochaete chrysosporium)是一种常见的木材腐朽菌,具有较强的生物降解能力。
在其生长过程中,泡盛曲霉会分泌一系列的纤维素降解酶,其中包括β-1,3-1,4-葡聚糖酶AaBglu12A。
这种酶能够降解木质素中的β-1,3-1,4-葡聚糖,对于木质素的降解起着重要作用。
在研究中,泡盛曲霉基因组中的Bglu12A基因被克隆并在大肠杆菌中表达,得到了大量的重组酶。
通过对重组酶的纯化和酶学性质研究发现,该酶的分子量约为45 kDa,最适温度为50°C,最适pH为6.0。
酶活受到金属离子的抑制,其活性可通过EDTA等螯合剂解除抑制。
此外,该酶具有良好的耐温性和耐酸碱性,可在较宽的温度和pH范围内保持一定的活性。
β-1,3-1,4-葡聚糖在食品工业、酿造业和纺织工业等领域有广泛的应用价值。
泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶AaBglu12A作为降解这种多糖的高效酶,在这些领域中具有广泛的应用前景。
例如,在食品工业中,β-1,3-1,4-葡聚糖酶可以用于改善面包品质,增加面包的体积和口感。
在酿造业中,该酶可用于麦芽糖的制备和啤酒酿造等工艺中。
此外,该酶还可以用于纺织工业中的脱胶和印染等过程中,提高处理效果和工艺效率。
除了上述应用领域外,泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶AaBglu12A还具有潜在的生物能源利用价值。
随着生物能源的快速发展,将木质纤维素转化为生物燃料成为可持续能源的重要途径之一。
泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶AaBglu12A通过降解木质素中的β-1,3-1,4-葡聚糖,可以促进木质纤维素的降解,提高生物燃料的产量和质量。
综上所述,泡盛曲霉β-1,3-1,4-葡聚糖酶AaBglu12A是一种具有重要应用潜力的酶。
β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法

β-葡萄糖醛酸苷酶(β-GD)活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号:BC1910规格:50T/48S产品内容:提取液:液体60mL×1瓶,4℃保存;试剂一:液体5mL×1瓶,4℃保存;试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入5mL蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂仍-20℃保存;试剂三:液体37.5mL×1瓶,4℃保存;试剂四:1μmol/mL标准储备液10mL,4℃保存;产品说明:β-GD广泛存在于动物组织中,是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶,具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。
该酶在肝细胞中含量较高。
此外在胃癌组织中含量丰富,测定胃液β-GD活性对于研究胃癌具有重要的意义。
β-GD催化苯酚β-D-葡萄糖醛酸产生游离的酚酞,通过测定苯酚含量反应该酶活性高低。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤:一、样品测定的前处理按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
2、样本测定(在EP管中加入下列试剂)试剂名称(μL)加样孔测定管标准管空白管试剂一100100100试剂二100100100样本501μmol/mL50蒸馏水50混匀后,37℃水浴30min试剂三750750750混匀,540nm下测定各管吸光值注意:标准管和空白管只需测一次。
三、β-GD活性计算(1)按样本鲜重计算:单位定义:每小时每g鲜重样品中催化产生1μmol酚酞的量为一个活力单位。
β-GD(μmol/h/g鲜重)=(C标准管×V1)×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷(W ×V1÷V2)÷T=2×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)÷W(2)按样本蛋白浓度计算:单位定义:每小时每mg组织蛋白催化产生1μmol酚酞的量为一个活力单位。
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货号:QS2611 规格:50管/24样β-1,3 葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-GA)试剂盒说明书
可见分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
β-1,3-GA(EC 3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。
在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
测定原理:
β-1,3-GA水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率来计算其酶活性。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入3mL蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存;
试剂二:液体30mL×1瓶,4℃保存;
粗酶液提取:
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL 提取液),进行冰浴匀浆。
12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至550nm,蒸馏水调零。
A,
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如果吸光值大于2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式乘以相应稀释倍数),ΔA=A测定-A 对照。
每个测定管需设一个对照管。
β-1,3-GA活性计算:
1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0958x -0.0192;x为标准品浓度(mg/mL),y为吸光值。
2、血清(浆)β-1,3-GA活力的计算
β-1,3-GA(mg/h/mL)=[( ΔA +0.0192)÷0.0958×V1]÷V1=10.438×(ΔA +0.0192)
3、细胞、细菌和组织中β-1,3-GA活力的计算
(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(mg/h/mg prot)=[( ΔA +0.0192)÷0.0958×V1]÷(V1×Cpr)=10.438×(ΔA +0.0192) ÷Cpr
(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(mg/h /g 鲜重)=[( ΔA +0.0192)÷0.09585×V1]÷(W×V1÷V2)=10.438×(ΔA +0.0192) ÷W
(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(mg/h /104 cell)= [( ΔA +0.0192)÷0.0958×
V1]÷(500×V1÷V2)=0.0208×(ΔA+0.0192)
V1:加入反应体系中样本体积,0.1mL;V2:加入提取液体积,1mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本鲜重,g;500:细菌或细胞总数,500万。
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