壳聚糖的制备
壳聚糖的制备方法及其应用领域探析
壳聚糖的制备方法及其应用领域探析壳聚糖是一种多功能、环境友好的天然聚合物，广泛应用于生物医学、食品、纺织品等领域。
本文将探讨壳聚糖的制备方法以及其应用领域，旨在全面了解壳聚糖的价值与潜力。
一、壳聚糖制备方法1. 壳聚糖来源壳聚糖是一种从海洋生物废料中提取的天然聚合物，常见的来源包括虾、蟹、贝壳等。
这些废料经过化学处理和提取，可以得到高纯度的壳聚糖。
2. 壳聚糖提取方法壳聚糖的提取通常包括以下步骤：脱蛋白、去矿物质、去色素、去脂肪、溶解、过滤和干燥。
这些步骤可以通过酸碱处理、酶解等方法来实现。
3. 壳聚糖的化学修饰壳聚糖的化学修饰是为了改变其性质和功能。
常见的修饰方法包括磺化、羟甲基化、醛基化等。
这些修饰可以改变壳聚糖的水溶性、降解性和生物活性。
二、壳聚糖的应用领域1. 医药领域壳聚糖在医药领域具有广泛的应用。
首先，壳聚糖具有良好的生物相容性和生物降解性，可以作为药物给药载体，用于控释药物。
其次，壳聚糖作为药物包装材料，可以延缓药物的释放速度，提高药物的稳定性。
此外，壳聚糖还可以用于制备仿生组织工程材料，如人工血管、骨替代材料等。
2. 食品领域壳聚糖在食品领域具有重要的应用价值。
首先，壳聚糖作为天然的防腐剂和抗菌剂，可以用于食品的保鲜和延长货架期。
其次，壳聚糖作为食品添加剂，可以改善食品的质地和稳定性。
此外，壳聚糖还可以用于食品包装材料的制备，提高包装材料的降解性和生物降解性。
3. 环境领域壳聚糖在环境领域也有着广泛的应用。
首先，壳聚糖可以作为吸附剂，用于废水处理和重金属污染物的去除。
其次，壳聚糖可以用于制备环境友好型的农药和肥料，减少农业对环境的污染。
此外，壳聚糖还可以用于制备可降解的塑料和纺织品，减少塑料和纺织品对环境的影响。
4. 其他领域除了医药、食品和环境领域，壳聚糖还具有应用于纺织品、化妆品、印刷等领域的潜力。
壳聚糖可以用于制备具有抗菌、抗菌、UV防护等功能的纺织品；可以作为天然的护肤品原料，具有保湿、抗皱、抗氧化等功效；可以用于制备环保型的印刷油墨和染料。
壳聚糖制备实验报告
一、实验目的1. 学习壳聚糖的制备方法。
2. 掌握壳聚糖的提纯和纯度检测技术。
3. 了解壳聚糖的性质和应用。
二、实验原理壳聚糖是一种天然高分子多糖，具有优良的生物相容性、生物降解性和抗菌性能。
其制备方法主要从甲壳类动物壳中提取甲壳素，再通过脱乙酰化反应得到。
本实验采用碱法提取甲壳素，再通过酸法脱乙酰化制备壳聚糖。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：虾壳、氢氧化钠、盐酸、无水乙醇、蒸馏水等。
2. 实验仪器：电热鼓风干燥箱、烧杯、玻璃棒、布氏漏斗、抽滤瓶、电子天平、pH计、紫外-可见分光光度计等。
四、实验步骤1. 甲壳素的提取（1）称取一定量的虾壳，用蒸馏水清洗去除杂质，放入烧杯中。
（2）向烧杯中加入适量的氢氧化钠溶液，搅拌均匀，加热至沸腾，保持沸腾状态30分钟。
（3）停止加热，用布氏漏斗过滤，收集滤液。
（4）将滤液用蒸馏水稀释，调节pH值至7左右。
（5）过滤，收集滤液，得到甲壳素。
2. 壳聚糖的制备（1）将甲壳素加入适量的盐酸溶液中，搅拌均匀。
（2）加热至沸腾，保持沸腾状态30分钟。
（3）停止加热，用布氏漏斗过滤，收集滤液。
（4）将滤液用蒸馏水稀释，调节pH值至7左右。
（5）过滤，收集滤液，得到壳聚糖。
3. 壳聚糖的纯度检测（1）称取一定量的壳聚糖，用无水乙醇溶解。
（2）将溶液转移至紫外-可见分光光度计中，测定其在特定波长下的吸光度。
（3）根据标准曲线计算壳聚糖的纯度。
五、实验结果与分析1. 甲壳素的提取实验中，通过碱法提取甲壳素，得到甲壳素含量较高的滤液。
经计算，甲壳素提取率为90%。
2. 壳聚糖的制备实验中，通过酸法脱乙酰化制备壳聚糖，得到壳聚糖含量较高的滤液。
经计算，壳聚糖制备率为85%。
3. 壳聚糖的纯度检测根据紫外-可见分光光度计测定结果，壳聚糖的纯度为95%。
六、实验结论本实验成功制备了壳聚糖，甲壳素提取率和壳聚糖制备率较高，壳聚糖纯度达到95%。
实验结果表明，碱法提取和酸法脱乙酰化是制备壳聚糖的有效方法。
壳聚糖薄膜的制备及其在食品包装中的应用研究
壳聚糖薄膜的制备及其在食品包装中的应用研究概述：壳聚糖是一种天然的多糖类物质，可由虾、蟹壳等废弃物提取得到。
壳聚糖薄膜作为一种生物降解材料，具有良好的透明性、保鲜性和抗菌性能，在食品包装中有着广泛的应用前景。
本文将重点探讨壳聚糖薄膜的制备方法，并分析其在食品包装中的应用研究。
一、壳聚糖薄膜的制备方法1. 壳聚糖的提取与纯化壳聚糖的主要来源为海洋废弃物，如虾、蟹壳等。
首先采用稀酸或碱溶液将废弃物中的蛋白质和杂质去除，然后经过多次漂洗和离心，得到纯净的壳聚糖。
2. 壳聚糖薄膜的制备方法（1）溶液浇注法：将壳聚糖溶解在适当的溶剂中得到高浓度的溶液，然后将溶液浇注在平整的基质上，通过挥发溶剂得到均匀的壳聚糖薄膜。
（2）溶液浓缩法：将壳聚糖溶解在溶剂中，利用高温蒸发的方式将溶液中的溶剂浓缩，形成薄膜。
（3）离子凝胶法：将壳聚糖溶解在弱酸性水溶液中，加入交联剂进行交联反应，形成凝胶状的壳聚糖，再通过冻干或化学固化的方法得到壳聚糖薄膜。
二、壳聚糖薄膜在食品包装中的应用研究1. 保鲜性能研究壳聚糖薄膜的透氧性能与传统塑料薄膜相比更优越，可以控制食品包装内外氧气的渗透速度，延缓食品的氧化过程，从而延长食品的保鲜期。
同时，壳聚糖薄膜还具有较好的湿度调控能力，可以防止食品因受潮而变质。
2. 抗菌性能研究壳聚糖薄膜具有良好的抗菌性能，能够抑制常见细菌的生长，包括大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等。
此外，壳聚糖薄膜还能够对食品中的霉菌和酵母菌具有一定的抑制作用，从而有效保护食品免受细菌污染。
3. 可降解性能研究相比于传统塑料薄膜，壳聚糖薄膜具有良好的可降解性能，可以被微生物分解，还原为无毒无害的物质，对环境不产生污染。
这使得壳聚糖薄膜成为一种环保的食品包装材料，在塑料污染严重的背景下具有重要的意义。
4. 其他应用研究除了在食品包装中的应用，壳聚糖薄膜还具有其他潜在的应用领域。
例如，壳聚糖薄膜可以用于药物缓释系统，可以将药物包裹在薄膜中，缓慢释放给人体，提高药物疗效。
壳聚糖制备
甲壳素的化学名称为(1,4)222乙酰胺基222脱氧2β2D葡萄糖。
当甲壳素通过脱乙酰基反应转变为壳聚糖时,由于游离胺基的产生,应用性大为增加。
壳聚糖分子链上的胺基和羟基都是很好的配位基团,使其具有很多纤维素不具有的用途,它既是一种天然的高分子螯合剂,可与重金属离子如Hg2+、Cu2+、Ag+形成稳定的螯合物,用于提取回收金属和从污水中去除有害的重金属离子[1,2],又是一种天然的阳离子型絮凝剂,能使水中的悬浮物凝聚而沉降,用于污水的净化处理[3]。
表征壳聚糖性能的主要参数有:脱乙酰度和分子量,它们都受甲壳素脱乙酰化反应控制。
因此甲壳素脱乙酰化反应是基础性研究工作,虽然已有一些论文报道了甲壳素脱乙酰化反应的研究结果[4],但尚不系统完全。
另外由于壳聚糖的缩醛键结构,在H+的攻击下很容易水解,随着存贮时间的增长,壳聚糖溶液的粘度将发生很大的变化,给应用带来影响。
因此,对壳聚糖溶液存贮期间粘度变化的研究也是很有实际意义的。
1 实验部分111 试剂及原料所用试剂都是分析纯。
甲壳素由青岛某生化公司提供。
112 测定方法脱乙酰度测定采用线性电位滴定法[5],溶液粘度测定采用NDJ24型旋转粘度计测定[6]。
113 壳聚糖的制备将甲壳素与氢氧化钠溶液在三口烧瓶中混合搅拌,在一定温度下回流一定时间后,过滤,洗涤,烘干,产物即为壳聚糖。
114 壳聚糖的水解延缓将壳聚糖分别溶于醋酸水溶液,醋酸2乙醇水溶液,醋酸2甲醇水溶液,醋酸2丙酮水溶液,醋酸2丙酮2甲醇水溶液,常温下测定放置不同时间的上述各溶液的粘度。
2 结果和讨论211 正交实验法确定反应条件甲壳素脱乙酰化反应需在浓碱介质中进行,加温可有效地加速乙酰化反应,提高碱液浓度和延长反应时间也可以提高脱乙酰度。
但是随着脱乙酰化反应条件的强化,甲壳素主链的降解也越来越严重,这又直接影响产品的质量。
因此碱液浓度、温度和反应时间都是主要影响因素。
控制脱乙酰化反应条件,就可获得不同脱乙酰度的壳聚糖。
壳聚糖的制备方法
壳聚糖的制备方法
壳聚糖可以通过多种方法制备，以下是一些常见的制备方法：
1. 天然提取法：天然提取法是直接从自然界中提取壳聚糖的方法。
例如，从虾、蟹等甲壳类动物的外壳中提取壳聚糖。
这种方法得到的壳聚糖纯度较高，但产量较低。
2. 化学合成法：化学合成法是通过化学反应在实验室里制备壳聚糖的方法。
这种方法可以大规模生产壳聚糖，但需要使用大量化学试剂，且产物的纯度可能不如天然提取法。
3. 生物合成法：生物合成法是利用微生物发酵的方法生产壳聚糖。
这种方法可以大规模生产壳聚糖，且不需要使用化学试剂，因此对环境友好。
但需要选择合适的微生物和发酵条件，以确保产物的纯度和产量。
4. 酶促合成法：酶促合成法是利用酶催化反应制备壳聚糖的方法。
这种方法可以在温和的条件下进行，且使用的酶通常对环境友好。
但需要选择合适的酶和反应条件，以确保产物的纯度和产量。
总的来说，制备壳聚糖的方法有很多种，可以根据实际需求选择合适的方法。
壳聚糖生产工艺
壳聚糖生产工艺壳聚糖是一种由壳类动物外壳和真菌组成的聚糖，具有广泛的应用价值。
壳聚糖的生产工艺主要包括原料准备、壳聚糖提取、壳聚糖纯化和产品制备四个步骤。
首先是原料准备。
壳聚糖的原料主要是海洋生物废壳和农产品废弃物，如虾壳、蟹壳、贝壳等。
这些废壳经过清洗、去除有机物和杂质的处理，然后破碎成粉末状，以便后续的提取工艺。
接下来是壳聚糖的提取。
提取壳聚糖的主要方法是酸碱法和酶解法。
其中，酸碱法是将粉末状的废壳与稀盐酸进行反应，使壳聚糖溶解在溶液中，然后通过酸碱中和、离心、过滤等步骤将壳聚糖分离出来。
酶解法是利用壳聚糖酶将废壳中的壳聚糖水解为可溶解于水的壳寡糖，再通过膜过滤、浓缩、冷冻干燥等步骤获得壳聚糖。
然后是壳聚糖的纯化。
壳聚糖提取出来后，通常会含有一定的杂质，如蛋白质、脂质等。
为了提高壳聚糖的纯度，需要进行纯化处理。
常用的纯化方法有沉淀法、离子交换法和超滤法。
沉淀法是将提取得到的壳聚糖溶液与醇类进行混合，在醇的作用下，壳聚糖形成沉淀，然后通过离心、洗涤等步骤将沉淀分离出来。
离子交换法是利用具有特定功能团的离子交换树脂，通过溶液中不同离子的吸附和解吸，将壳聚糖从溶液中分离出来。
超滤法是利用分子筛原理，通过不同孔径的膜将溶液中的大分子杂质和壳聚糖分离开。
最后是产品制备。
壳聚糖可以根据需求进行不同形式的产品制备，如片剂、凝胶、膜等。
片剂的制备是将壳聚糖溶解在适当的溶剂中，加入助溶剂、增粘剂等辅助原料，经过混合、挤压、切割等步骤制成固体片剂。
凝胶的制备是将壳聚糖溶解在水中，并在适当的条件下进行交联反应，形成具有凝胶状的产物。
膜的制备是将壳聚糖溶解在溶剂中，加入适量的增稠剂和交联剂，经过溶液待定、膜液脱水、膜涂覆、干燥等步骤形成薄膜。
以上就是壳聚糖的生产工艺，通过原料准备、壳聚糖提取、壳聚糖纯化和产品制备四个步骤，可以将海洋废壳和农产品废弃物等废料转化为有价值的壳聚糖产品，具有较高的环境和经济效益。
壳聚糖涂层材料的制备及其防护功能研究
壳聚糖涂层材料的制备及其防护功能研究近年来，随着环境污染的不断加剧和人们对生态环境保护意识的提高，寻求环境友好、高效的涂层材料变得越来越重要。
壳聚糖作为一种天然来源的生物高分子材料，具有良好的生物相容性、可降解性和生态环保等特性，因此在涂层材料的制备和应用领域具有广阔的前景。
一、壳聚糖涂层的制备方法1. 溶液法制备壳聚糖涂层溶液法是制备壳聚糖涂层的常用方法之一。
首先将壳聚糖粉末溶解在适量的溶剂中，如醋酸、甲酸等，形成可溶性的壳聚糖溶液。
然后利用刷涂、喷涂、浸涂等方法将壳聚糖溶液涂覆在需要保护的基材表面上，通过溶剂的挥发或溶剂浓缩，形成均匀且致密的壳聚糖涂层。
2. 化学修饰法制备壳聚糖涂层通过化学修饰方法可以改变壳聚糖分子的表面性质，提高其涂层的附着力和稳定性。
例如，通过与硅烷偶联剂反应，引入硅烷基团，使壳聚糖与基材表面发生化学键结合，提高涂层的附着力。
此外，还可以通过交联剂的添加或交联反应的引入，提高壳聚糖涂层的耐磨性和耐化学腐蚀性。
二、壳聚糖涂层的防护功能研究1. 抗腐蚀性能壳聚糖涂层能有效防护金属基材，抵御酸、碱、盐等腐蚀介质的侵蚀。
研究表明，采用壳聚糖作为涂层材料可以提高金属基材的耐腐蚀性能。
这是因为壳聚糖具有含氮官能团，能够与金属表面发生配位反应，形成一层保护膜，有效防止介质的进一步腐蚀。
2. 抗磨损性能壳聚糖涂层具有较好的抗磨损性能，可以有效抵御摩擦、刮擦等物理损伤。
研究表明，壳聚糖涂层的抗磨损性能与其分子链的结晶度、交联程度以及涂层厚度等因素密切相关。
通过调控涂层的制备条件，可以优化壳聚糖涂层的抗磨损性能。
3. 抗菌性能壳聚糖涂层具有良好的抗菌性能，在医疗器械、食品包装等领域具有广泛应用前景。
壳聚糖分子表面带有阳离子官能团，能够与细菌细胞壁的阴离子脂多糖结合，破坏细菌细胞结构，发挥抗菌作用。
此外，壳聚糖涂层还具有对抗病毒、抑制真菌等作用，为防护材料提供了多重防护功能。
4. 环境友好性壳聚糖作为一种天然来源的材料，具有良好的环境友好性。
壳聚糖的合成方法及应用研究
壳聚糖的合成方法及应用研究壳聚糖是一种天然多糖，由N-乙基葡糖胺单体通过聚合反应得到。
它在生物医学工程、药物传递系统、环境保护等领域中具有广泛的应用。
本文将探讨壳聚糖的合成方法及其在不同领域的应用研究。
一、壳聚糖的合成方法1. 壳聚糖的酸性水解法酸性水解法是最常见的壳聚糖合成方法之一。
首先，将壳聚糖原料与酸性溶液（如盐酸）反应，使壳聚糖分子链中断，生成壳聚糖片段。
接下来，通过调节pH 值和温度使得酸性水解的壳聚糖片段重新连接形成更长的壳聚糖链。
这种方法简单易行，但需要注意控制反应条件，以避免产生副产物或降解。
2. 壳聚糖的酶催化法酶催化法是一种环境友好的壳聚糖合成方法。
通过使用特定的酶催化剂，可以在温和的条件下将壳聚糖单体聚合成壳聚糖链。
这种方法具有高产率、高选择性和对环境友好等优点，但酶催化剂的成本较高，并且需要优化反应条件。
3. 壳聚糖的还原性修饰法还原性修饰法通过将壳聚糖中的羟基还原为胺基，从而获得更多功能化基团的壳聚糖。
这种方法可以通过氨基化剂（如戊二醛）在合成过程中引入胺基，也可以在合成后通过还原剂（如氢气、亚硫酸氢钠）来实现。
还原性修饰法可以扩展壳聚糖的应用领域，并提供更多的功能化设计空间。
二、壳聚糖的应用研究1. 生物医学工程领域应用壳聚糖在生物医学工程领域具有广泛的应用潜力。
它可以用作药物传递系统的载体，可通过控制粒径、表面修饰和药物包封来实现药物的稳定释放。
壳聚糖也可以用于组织工程和创伤修复中，作为生物可降解的支架材料。
此外，壳聚糖还可用作生物传感器和生物成像试剂，用于检测和监测生物分子。
2. 环境保护领域应用壳聚糖在环境保护领域具有一定的应用潜力。
它可以用于制备高效的吸附剂，可用于水处理中去除重金属离子、有机物污染物等。
壳聚糖还可用于制备可降解的半透膜和膜过滤器，用于废水处理和固体废物处理。
此外，壳聚糖还可用作土壤改良剂和植物生长调节剂，促进植物生长和修复受损的土壤。
3. 肥皂和化妆品领域应用由于壳聚糖具有良好的防腐性和保湿性能，它在肥皂和化妆品领域中也得到了广泛的应用。
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壳聚糖的制备
甲壳素是许多甲壳类动物(如虾、蟹)及昆虫等外壳的重要组成成分,同时也存在于菌类的细胞壁中，还可来源于有机酸类，抗生素与酶酿造副产物。
甲壳素是一种十分丰富的天然资源，在自然界蕴藏量仅次于纤维素。
它不溶于水和酸性介质，甲壳素脱乙酰后形成壳聚糖（CTS）。
其溶解性较甲壳素大。
它是生物合成的天然高分子,又可生物降解, 安全无毒, 有良好的生物相容性且化学性质稳定, 具有许多独特的优点。
壳聚糖广泛应用于纺织、印染、皮革、涂料、卷烟、塑料、化妆品食品医药保健彩色胶卷造纸、生物工程、农业植保、污水处理等。
壳聚糖的脱乙酰度是一项极为重要的技术指标之一壳聚糖的脱乙酰度的高低,直接关系到它在稀酸中的溶解能力、粘度离子交换能力、絮凝性能和与氨基有关的化学反应能力,以及许多方面的应用。
壳聚糖的英文名: chitosan, 化学名: ( 1, 4) - 二氨基 - 2- 脱氧 - B - D- 葡聚糖, 其它中英文名尚有 Deacetylated ch itin、F lonac N、甲壳胺、可溶性甲壳质、脱乙酰甲壳素、脱乙酰几丁质聚氨基葡糖可溶性甲壳素、粘性甲壳素等。
壳聚糖的脱乙酰度( DegreeofDeacetylation, 缩写为D1 D1 )可定义为壳聚糖分子中脱除乙酰基的糖残基数占壳聚糖分子中总的糖残基数的百数。
脱乙酰度
的测定方法很多,如碱量法(包括酸碱滴定法、电位滴定法、氢溴酸盐法等 )、红外光谱法、折光指数法、胶体滴定法、热分析法、气相色谱法、元素分析法、紫外光谱一阶导数、苦味酸分光光度法等。
常用的有酸碱滴定法、红外光谱法、紫外光谱法、电位滴定法等。
一、壳聚糖的制备
将虾壳去腿去杂质后, 流水冲洗,洗净残余的虾肉,于60℃烘箱中烘干，用研钵磨碎.称取 10 g虾壳 3份 ,于 100 mL 5 % HCl中浸泡4h至无气泡冒出 ,再补加 50 mL 5 %HCl ,浸泡 2h ,除去虾壳中的钙质和无机盐 ,抽滤用去离子水洗至中性 ,加 100 mL 10 % NaOH于50℃水浴中加热 2h ,除去蛋白 ,过滤 ,用去离子水80℃水浴中反应 4 h ,水洗至中性 ,抽滤 ,烘干后得白色粉末状甲壳素分别为2.08,2.00,2,12g，平均产率为20.6%。
二、壳聚糖制备工艺的设计
甲壳素碱液质量和体积比一般选取m甲壳素(g)∶NaOH (ml)为1∶20,碱液浓度在30 %以下,脱乙酰反应进行得非常缓慢,温度超过120℃时 ,脱乙酰虽然进行得较快 , 但是因此会造成主链的大幅降解 ,故实验中采用 30 %～60 %的浓碱 ,控温在 90～120℃进行反应。
即可的壳聚糖。
三、壳聚糖的纯化
将所得粗品壳聚糖溶于 2 %HAc水溶液中 ,配成 1. 5 %～2. 0 %的壳聚糖醋酸水溶液,滤去不溶杂质,搅拌下缓慢滴入4 %NaOH溶液,调节 pH值至 8～9 ,放各洗 2次 ,真空干燥 ,得壳聚糖纯品。
四、脱乙酰的测定
1.碱量法
甲壳质脱乙酰基后生成的甲壳素中的胺基呈游离态,属伯胺,具有阳离子性质 ,可与酸定量反应生成盐 ,且胺基特别稳定 ,即使在 50 %氢氧化钠溶液中，在150℃也不会分解,基于上述特性来测定脱乙酰度。
准确称取 0. 2 g样品置于 250 ml三角烧瓶中 ,加入 0. 2 mol/ L盐酸标准溶液 25 ml ,搅拌 0. 5～1 h完全溶解 ,以甲基橙作指示剂 ,0. 2 mol/ L氢氧化钠标准溶液滴定过量的盐酸至终点,另取1份样品于105烘箱中至恒重 ,测定样品含水量。
这种方法简单 ,但由于达到终点时 ,壳聚糖析出沉淀 ,使终点判定容易产生误差,尤其在样品摩尔质量较大情况下更是如此,从而导致实验的重复性差。
而且样品受溶解度影响较大,有时需加热才能使样品完全溶解,这样使盐酸挥发,测定结果受到影响。
但这种方法不需大型仪器,操作简便易行,经常操作,积累一定操作经验,会改善重复性差的缺点。
2. 电位滴定法
准确称取 0. 2 g壳聚糖 ,溶于 25 ml 0. 2 mol/ L氢氧化钠标准溶液回滴过量盐酸 ,作 pH - V NaOH曲线 ,用三切线法确定终点 ,按碱量法的公式计算脱乙酰度。
此方法操作简单,分析速度较快,终点判断清楚 ,精确度较高 ,对具有较高脱乙酰度的样品来说 ,应是一个较为可供选择的方法。
3. 紫外光谱法
其作用的原理是选择合适的染料使之与壳聚糖作用,在一定波长下测定吸光度,根据吸光度与浓度的关系,经简单的数学处理得到一标准曲线,利用这一标准曲线,可以测定与此壳聚糖具有同一脱乙酰度的未知壳聚糖的含量。
人们对染料的变色作用早在19世纪就有了认识。
B. D.Gummow和 G. A. F. Roberts[报道了阴离子染料酸性红 88与壳聚糖的作用。
酸性红88这种带负电荷的染料与壳聚糖大分子上
质子化的氨基以 1∶1的化学计量形成络和物 ,此时酸性红 88的最大吸收波长为505 nm ,吸光度达到最低点,可以定量利用这一变色作用。
本文用酸性红143 ,与已知含量壳聚糖作用,测定未知含量壳聚糖。
(1)壳聚糖标准溶液的配制: 准确称取0. 1504 g日本产壳聚糖,溶于 100 ml 0. 1 mol/ L HCl ,准确称取 5 ml ,10 ml ,15 ml ,20 ml ,25 ml 此溶液 ,用0. 1 mol/ L的 HAC溶液定容至 250 ml。
(2)染料标准溶液的配制 : 称取酸性红 0. 5 g143溶于 0. 1 mol/ L HAC溶液中 ,并稀释至 1 000ml。
(3)壳聚糖的测定 : 移取等份染料溶液 2 ml于 50 ml容量瓶中 ,分别从各浓度的壳聚糖标准
溶液中准确移取不同体积的标样。
用0. 1 mol/ LHAC稀释至50 ml。
以2 ml染料,用HAC定容为50 ml的溶液为空白,吸收波长为530 nm ,于Perkin - Elmer紫外分光光度计测定吸光度 ,作吸光度对各浓度的壳聚糖标样体积的曲线,分别得到两条直线,直线交点处所对体积为质子化氨基与染料离子等量反应所需相应壳聚糖标样的体积。
(4)数据处理:用已知不同量的壳聚糖为横坐标,用图1中直线交叉点处所对应的壳聚糖溶液的体积的倒数为纵坐标作图 (见图 2)。
五、分子质量的测定
目前国内外研究降解甲壳素的方法有很多，有酶降解法，化学
降解法，物理降解法等。
每种降解方法都有一定的局限性,化学降解法会对环境造成污染 ;酶的价格昂贵 ,不易得到 ,且具有选择性；物理降解法虽然对环境没有污染，但降解效率太低。
H2O2有很强的氧化性,可以氧化甲壳素主链上的壳素氧化降解法制备低分子量的甲壳素。
1.利用 H2 O2制备低分子量分布的壳聚糖
将虾皮用 HCl浸泡去除碳酸钙盐 ;再用稀碱除去蛋白质得甲壳素 ;然后浓碱在50℃与其反应,并控制反应时间,分别制备出脱乙酰度为85% , 93% , 99%的壳聚糖 ,最后用 H2 O2氧化不同脱乙酰化壳聚糖 ,得到不同低分子量的壳聚糖。
2．低聚壳聚糖的制备
取样品按壳聚糖∶水= 1∶30 (质量∶体积 )将其分散在水中。
在50℃下加热,用滴液漏斗慢慢滴加一定体积、浓度为30%的H2 O2 ,并不断搅拌 ,在 30 m in内滴加完毕。
反应 6 h后 ,抽滤得固相产品 ,水洗 ,烘干称重。
用粘度法测定相对分子量。
2. 壳聚糖粘度与分子量的关系
低粘度样品在滴定过程中呈澄清溶液状态 ,测定值偏差较小 ;而粘度较高的样品 ,在滴定过程中易出现凝集现象 ,使测定结果偏差较大。
所以在测定粘度较高的样品时 ,样品量不宜太大 ,在 0. 3 g左右即
可 ,而且用少量蒸馏水稀释。
以 85%脱乙酰度未降解 CTS为例 ,配制不同浓度的 85%脱乙酰度的CTS,用乌氏粘度计测定其粘度 ,结果见图1。
1 测定方法
准确称取 105e 烘干至恒重的样品 01 3~ 01 5 g壳聚糖样品, 置于 250 m l 三角瓶中, 加入 01 1 m ol/L 盐酸标准溶液
30 m ,l 在 20e ~ 25e 搅拌至溶解完全 ( 若粘度太大可加适量加蒸馏水稀释 ), 加入 2~ 3 滴混合指示剂 ( 1% )甲基橙+( 1% )苯胺蓝 ( 1B2 ), 用 01 1 m ol/L 氢氧化钠标准溶液
滴定游离盐酸。
式中：
C1) 盐酸标准溶液的浓度, mol/L
C2) 氢氧化钠标准溶液的浓度, mol/L
V1 ) 加入的盐酸标准溶液的体积, m l
V2 ) 滴定耗用的氢氧化钠标准溶液的体积, m l
G) 样品重, g01 016) 与 1 m l 1 m ol/L盐酸溶液相当的氨基量, g91 94% ) 理论氨基含量。