微生物高考试题
（全国卷一）34．(12分)下列是与微生物培养有关的问题，请回答：
（1）某细菌固体培养基的组成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水，其中凝固剂是________，碳源是_____________,氮源是____________。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，故该培养基属于_____________培养基。按照化学成分分类，该培养基属于______________培养基。从同化作用类型看，用该培养基培养的细菌属于________________。
（2）将少量细菌接种到一定体积的液体培养基中，适宜条件下培养，定时取样测定菌体数目，以时间为横坐标，以菌体数目的对数为纵坐标，可以得到细菌的_____曲线。该曲线中以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是___________________________。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在____________期取材；在生产中，常收集培养至_________期的细菌用于次生代谢产物的提取。
解析：本题主要考查学生的理解能力，考查微生物的营养。
第（1）小题，该培养基中，琼脂为凝固剂，葡萄糖为碳
源，尿素为氮源；由于只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长，可以用来选择出能够合成脲酶的细菌，在功能上称为选择培养基；由于其化学成分明确，故又称为合成培养基；由于该培养基中存在着有机碳源葡萄糖，故可推测从同化作用类型上看，用该培养基培养的细菌属于异养型。
第（2）小题，在恒定容积的液体培养基上培养微生物，定期取样，然后以时间为横坐标，以细菌数目的对数为纵坐标，所得的曲线称为微生物的群体生长曲线，之所以以菌体数目的对数作为纵坐标的原因是菌体数目往往非常大，且变化率也很高，直接以菌体数目为纵坐标不利于作图。实验室中，为了获得形态和生理特征一致的菌体，一般应在对数期取材；在生产中，常用培养至稳定期的细菌用于次级代谢产物的提取。
答案：(1)琼脂葡萄糖尿素选择合成异养型（2）生长培养中的细菌以指数形式增长，取对数便于反映细菌群体的生长规律对数期稳定期
新课标卷39.[生物—选修1：生物技术实践]（15分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和____________。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_________________。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_____________和______________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_______________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
39．（1）原油选择
（2）平板划线法稀释涂布平板法
（3）强
（4）干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰
山东卷 34.（8分）（生物—生物技术实验）
研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。
（1）柚皮易焦糊，宜采用____________法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。
（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________接种。对新配制的培养基灭菌时所用的设备是_______________。实验前需对超净工作台进行____________
处理。
（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。电泳法纯化乳酸菌素时，若分离带电荷相同的蛋白质，则其分子量越大，电泳速度___________。
（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。
答案：（1）压榨过滤
（2）稀释涂布平板法高压蒸汽灭菌锅紫外线消毒
（3）碳源和氮源越慢
（4）大小
39（上海）．(9分)氯苯化合物是重要的有机化工原料，因其不易降解，会污染环境。某研究小组依照下图所示实验方案筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表1。
(1)配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，
还应添加1％的______________。
(2)培养基配制时，灭菌与调pH的先后顺序是
______________________。
(3)从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于
________________培养基和______________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是____________________。
(4)在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的
休眠体，这种休眠体被称为_______________。
(5)将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得
到生长曲线如下图所示。从图中可知，SP1菌在______________培养条件下最早停止生长，其原因是_____________________________。
39．(9分)
(1)琼脂
(2)先调pH，后灭菌
(3)通用选择硝酸铵
(4)芽孢
(5)20mg/L氯苯碳源最早耗尽
40（宁夏卷）.【生物——选修1生物技术实践】（15分）（1）在大肠杆菌培养过程中，除考虑营养条件外，还要考虑______、______和渗透压等条件。由于该细菌具有体积小、结构简单、变异类型容易选择、______、______等优点，因此常作为遗传学研究的实验材料。
（2）在微生物培养操作过程中，为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行________（消毒、灭菌）；操作者的双手需要进行清洗和______；静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能__________。
（3）若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的_______。
（4）通常，对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的____________。
（5）培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培养基应采用的检测方法是_________。
（6）若用大肠杆菌进行实验，使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。
40.【生物——选修1生物技术实践】
（1）温度酸碱度易培养生活周期短
（2）灭菌消毒损伤DNA的结构
（3）比较合适
（4）鉴定（或分类）
（5）将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间，观
察培养基上是
否有菌落产生。
（6）灭菌
33.（10分）（全国理综2）
利用微生物分解玉米淀粉生产糖浆，具有广阔的应用前景。但现有野生菌株对淀粉的转化效率低，某同学尝试对其进行改造，以获得高效菌株。
（1）实验步骤：
①配置________（固体、半固体、液体）培养基，该培养基的碳源应为________。
②将_____________接入已灭菌的培养基平板上。
③立即用适当剂量的紫外线照射，其目的是_________ ______。④菌落形成后，加入碘液，观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现_________ ______现象的菌落即为初选菌
落，经分离、纯化后即可达到实验目的。
（2）若已得到二株变异菌株I和II，其淀粉转化率较高，经测定菌株I淀粉酶的催化活性高，菌株II的淀粉
酶蛋白含量高，经进一步研究发现，突变发生在淀粉酶基因的编码区或非编码区，可推测出菌株I的突变发生在_________区，菌株II的突变发生在____________区。
33、答案：（1）①固体、玉米淀粉；②野生菌株；③（诱发野生菌株发生基因突变）对野生菌株进行诱变；④（透明圈）浅色范围大；（2）编码区、非编码区
6. （安徽）下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是
A．用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基，经高温、高压灭菌后倒平板
B．取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各，分别涂布于各组平板上
C．将实验组和对照组平板倒置，37°C恒温培养24-48小时
D．确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组
平板进行计数
3. (理综1卷)下列关于通过发酵工程生产谷氨酸的叙述，错误的是
A．发酵时需要不断通入无菌空气，否则会积累乳酸
B．发酵时常采用的培养基为液体天然培养基
C．从自然界分离的野生型菌株可直接用于生产
D．当菌体生长进入稳定期时，补充营养物可提高谷氨酸产量
3（重庆）下列有关大肠杆菌的叙述，正确的是
A．大肠杆菌以复制方式进行繁殖，其拟核是一个环状DNA 分子
B．在含葡萄糖和乳糖的培养基上，大肠杆菌首先利用乳糖作碳源
C．用大肠杆菌工程菌生产干扰素时．应及时添加核酸等生长因子
D．处于对数期的大肠杆菌．常作为生产用的菌种和科研的材料
6．D 3．C 3．D
（海南卷）25．（18分）［选修模块1：生物技术实践］
葡萄发酵可产生葡萄酒，请利用相关的知识回答问题：（1）利用葡萄制作葡萄酒的过程
中，发挥作用的微生物是
_________________。
（2）该微生物通过无氧呼吸可分解__________，产生的终产物是___________和____________。
（3）甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。据图分析，甲和丙同学的操作有误，其中甲同学的错误是_________________________________，导致发酵中出现的主要异常现象是_________________________。丙同学的错误是_________________，导致发酵中出现的主要异常现象是_______________________。上述发酵过程结束后，甲、乙、丙同学实际得到的发酵产品依次是___________、
_____________、______________。
（4）在上述制作葡萄酒的过程中，假设乙同学的某一步骤操作错误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作错误是__________________________。
解析：（1）酿酒所用的微生物主要是酵母菌，它进行无氧呼吸的产物是酒精与二氧化碳。（2）在进行酒精发酵时应为无氧的环境，所以进气口与排气口都要关闭，每隔一段时间打开排气口，以排出产生的二氧化碳。
答案：（1）酵母菌（2分）
（2）葡萄糖乙醇CO2（每空1分，共3分）
（3）未夹住发酵瓶的充气管（2分）发酵液从充气管流出，发酵液变酸（1分）
瓶中发酵液过多，淹没了排气管在瓶内的管口（2分）排气时发酵液从排气管流出
葡萄醋（或果醋）（2分）葡萄酒（或果酒）（1分）葡萄酒（或果酒）（1分）
（4）未及时排气（2分）
（山东卷）34. 【生物—生物技术实践】生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗，科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）。
（1）用于生产生物柴油的植物油不易发挥，宜选用_____、_____方法从油料作物中提取。
（2）筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中的添加的植物油为微生物生长提供__________，培养基灭菌采用的最适方法是____________法。
（3）测定培养液中微生物数量，可选用_____法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测______，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产技术，可利用______技术使脂肪酶能够重复使用。
（4）若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____技术。
解析：（1）因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，
应用压榨法或萃取法提取。（2）植物油中不含矿物质元
素，只为微生物提供碳源。培养基适合用高压蒸汽灭菌
发进行灭菌。（3）测定微生物的数量，可以用显微镜直
接计数。分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定
其实用价值。可以利用酶固定技术重复使用脂肪酶。（4）
利用PCR技术可以扩增基因。
答案：（1）压榨；萃取（注：两空顺序无先后）
（2）碳源高压蒸汽灭菌
（3）显微镜直接计数酶活性（或：酶活力）固定化酶
（或：固定化细胞）
（4）PCR（或：多聚链式反应，聚合酶链式反应）
（2011海淀区期中）4．泡菜（如四川泡菜）在腌制时，抑制有害菌繁殖是关键。下列与此有关的叙述，不利于抑制有害菌繁殖的是
A．接入含有菌种的“老汤”
B．适量加入盐、酒和调料油
C．利用无氧环境抑制有害菌
D．利用发酵产物抑制有害菌
B
2.某学者欲研究被石油污染过的土壤中细菌数量，并从中筛选出能分解石油的细菌。下列操作错误的是
A．利用平板划线法对细菌进行计数
B．以石油为唯一碳源的培养基筛选
C．采用稀释涂布平板法分离菌种
D．称取和稀释土壤时应在火焰旁
A
191.（新课标卷39）[生物—选修1：生物技术实践]（15分）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以__________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，
该培养基属于________培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和____________。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力_________________。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_______和__________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯___________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
191.（新课标卷39）（1）原油选择（2）平板划线法稀释涂布平板法
（3）强（4）干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰
31（18分）
利用农作物秸秆等纤维质原料生产的乙醇，经加工可制成燃料乙醇。使用燃料乙醇减少了对石油的依赖。下列为生产燃料乙醇的简要流程，请据图回答：
（１）欲从土壤中分离获取微生物Ａ，应采用具有__________功能的培养基。调整pＨ值后的培养基还需尽快进行__________处理，方能使用。
（２）图中①过程需要利用微生物Ａ所产生的
______________酶对纤维质原料进行水解。可溶解复合
物的产量与该酶活性有直接关系，衡量此酶活性的指标
可用_______________表示。
（３）图中②过程常用的微生物是______________，此时其细胞呼吸类型是____________。细胞呼吸既能为微生物的
生长提供物质，还能提供______________。
（４）通过图中微生物的分解作用，不仅增加了人类对纤维质原料中能量的利用途径，还促进了生态系统的物质在
________________和________________之间不断地循
环往返。
31．
（1）选择灭菌
（2）纤维素（质）单位时间内产物的增加量（生成速率）底物的减少量(速率)
（3）酵母菌无氧呼吸╱厌氧呼吸能量
（4）生物群落（群落）无机环境（非生物环境）
（2009年海淀期中）21．关于菌落的叙述，错误的是（）
A．一个菌落往往是一个细胞在固体培养基上克隆的结果 B．菌落的特征可作为鉴定菌种的重要依据
C．划线分离，可在培养基上获得均匀分布的单个菌落
D．将单菌落接种至固体斜面培养基上，可进一步纯化菌种
（2009年海淀期中）23．“筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段，下列有关技术中不．能筛选成功的是（）
A．在全营养的LB培养基中，筛选大肠杆菌
B．在尿素固体培养基中，筛选能够分解尿素的微生物
C．用纤维素为唯一碳源的培养基，筛选能分解纤维素的微生物
D．在培养基中加入不同浓度的氯化钠，筛选抗盐突变体植物
C A
44．（12分）某中学杨老师自制大蒜提取液，希望这种简便、经济的提取液能够高效的杀灭餐具上的细菌，杨老师完成了下面的探究实验：
（1）制作提取液：杨老师将大蒜榨汁后制成提取液，具体做法如下表所示。请根据表中数据，在表中的括
号内填出1#提取液应加入的冷开水量。