人肺部活化调节趋化因子PAFACCL18试剂盒使用说明书

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试剂盒使用说明书

试剂盒使用说明书

人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)的含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)水平。

用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb),再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人抗乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)含量。

试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品:270IU/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

肺功能仪操作规程完整

肺功能仪操作规程完整

1.目的规范肺功能仪操作程序,确保正确使用仪器,以保证检测工作顺利进行和设备的安全。

2.适用范围适用于HI-101型肺功能仪的使用操作。

3.职责3.1 仪器操作人员应按本规程操作仪器,并对仪器进行日常维护、保养,及时作好使用记录。

3.2 仪器保管人员负责检查仪器是否正常,并对其进行定期维护和保养。

3.3科室负责人负责对仪器进行综合管理。

4.操作程序4.1 安全操作注意事项和特别提示4.1.1该仪器必须有专人保管,专人使用,使用人员必须经过专门培训,取得上岗操作证。

4.1.2本仪器使用符合相关检测要求。

4.2 使用前的准备4.2.1检查开关的接点和极性,确保设备工作正常。

在HI-101的电源开关处于关断位置时,才能接上和拔除电源线、接地线和传感器电缆。

4.2.2接地可靠。

一定要用有三相插头的电线,否则操作者有触电危险。

4.2.3 所有线缆和管子都正确和可靠地连接。

将传感器管连接器接到主机的传感器接头上,传感器管连接器A对应主机传感器接头A,传感器管连接器B对应主机传感器接头B。

将气流传感器按到手柄上,调节气流传感器和传感器手柄上的“△”“▽”标志的位置,插入传感器,“△”“▽”标志仅位于一侧。

要插到底,将呼吸过滤器和传感器相连接,将口套和呼吸过滤器相连接。

4.2.4装打印纸,打开打印机盖子,装上打印纸,注意前后,将纸拽出一点,然后关闭打印机盖,撕掉露在机外的纸。

4.3 操作步骤4.3.1接通电源,确认电源线、传感器管和其他装置是否连接正确。

4.3.2按操作面板右侧的电源开关。

在发出蜂鸣声后,<ID Input>(病人资料输入)屏将显示出来。

<ID Input>屏4.3.4输入病人资料:必须输入项为ID NO、Sex、Age、Ht、Wt。

4.3.5按要求设定配置,打印选项,如果之前已经设置好,不需要重复设置。

4.3.6接通电源后要等十分钟,待系统稳定后再进行测量。

4.3.7按[SVC]、[FVC]、[MVV]键进行测量状态选择。

M18 操作手册

M18 操作手册

Mythic 18三分类全自动血细胞分析仪使用说明第一章样品分析1.1 开机前检查Mythic 18开机前,我们应先检查试剂/废液及打印纸的量。

1.2 开机—开打印机—开血球仪—屏幕显示Mythic 18初始化菜单,系统的三个马达复位—在指示灯由红变绿前,系统不能进行其他操作—输入操作员的名字和密码—屏幕显示试剂可做的测试量—显示Mythic 18关机前没有传输的结果—按YES键传输,LATER待会传输,NO不传输1.3 换试剂—检查试剂量,按REAGENTS—如要换试剂,按1.5.2操作—AUTONOMY显示所剩最少量试剂可完成样品测试数量1.4 开机后冲洗—开始测试前冲洗系统,按START UP—在指示灯由红变绿前,仪器不执行其他操作—Mythic 18会做1—3个空白测试,值的范围如下:WBC:0.5RBC:0.1HGB:0.5PLT:10如果空白值太高,建议再做一次冲洗或退出,如用户选择退出,以后的测试结果后面都会有“START UP NOT DONE”的标记。

1.5 样品测试前的准备样品应收集在EDTA K3试管中,并保证足够的量,采血后6小时内测量结果有效。

用EDTA K2可能对结果有影响。

样品应混合均匀,建议在混匀器上在20—30T/M下混匀10分钟。

——样品量不足或混匀不好,都会影响测量结果。

1.6样品测试——一天的工作开始前建议先做质控,如有需要请做定标。

如不做质控,请做两个前一天测试中正常的标本。

注意:MYTHIC 18的所有参数出厂前以设置好。

1.6.2样品分析——在主菜单下按RUN SAMPLE即到样品分析界面——屏幕下方可输入下一个测试的样品信息ID--病人名字PD--病人信息SID--样品信息样品信息的录入:——在小键盘上输入所需信息,也可选择样品类型1.6.3样品测试——如吸样针看不到,按开始键让他下来——样品管放在吸样针下,按开始键,针上方指示灯会闪烁,有绿变红时样品即可移开——当指示灯再次变绿时,可开始下一个测试——注意:样品测试时需戴上手套,工作结束后应用清洗液洗手。

promega 实时荧光 mt 细胞活力检测试剂盒说明书

promega 实时荧光 mt 细胞活力检测试剂盒说明书

G9711, G9712 and G97132021版 CTM645原英文技术手册TM645中文说明书适用产品目录号: W6010, W6011 和 W6012Lumit™ Human IL-1βImmunoassay普洛麦格(北京)生物技术有限公司Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd 地址:北京市东城区北三环东路36号环球贸易中心B座907-909电话:************网址:技术支持电话:400 810 8133(手机拨打)技术支持邮箱:*************************CTM6452021制作1所有技术文献的英文原版均可在/ protocols 获得。

请访问该网址以确定您使用的说明书是否为最新版本。

如果您在使用该试剂盒时有任何问题,请与Promega 北京技术服务部联系。

电子邮箱:*************************1. 产品描述 (2)2. 产品组分和储存条件 (4)3. 开始实验前 (5)4. 培养细胞的直接(无转移)方案 (7)4. A. 细胞铺板和处理 (7)4. B. 制备人IL-1β标准品稀释液 (8)4. C. 将5X抗hIL-1β抗体混合物添加至检测孔 (9)4. D. 将 Lumit™检测试剂B添加至检测孔 (10)5. 可选样品转移方案 (11)5. A. 细胞铺板和处理 (11)5. B. 制备人IL-1β标准品稀释液 (12)5. C. 将2X抗hIL-1β抗体混合物添加至样品孔 (13)5. D. 将 Lumit™检测试剂B添加至样品孔 (14)6. 结果计算 (15)7. 代表性数据 (15)8. 疑难解答 (20)9. 附录 (21)9. A. 加工后的人IL-1β选择性的示例数据 (21)9. B. 炎症小体抑制多重检测的示例数据 (22)9. C. 参考文献 (23)9. D. 相关产品 (24)Lumit™ Human IL-1β Immunoassay普洛麦格(北京)生物技术有限公司Promega (Beijing) Biotech Co., Ltd 地址:北京市东城区北三环东路36号环球贸易中心B座907-909电话:************网址:技术支持电话:400 810 8133(手机拨打)技术支持邮箱:*************************CTM6452021制作21. 产品描述Lumit™ Human IL-1β Immunoassay(a,b)是可用于检测从细胞中释放的白介素1β(IL-1β)的均质生物发光检测试剂盒,操作过程中无需样品转移或洗涤。

试剂盒使用说明书

试剂盒使用说明书

人G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)含量。

实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)水平。

用纯化的人G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1),再与HRP标记的G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人G1氨基丁酸A型受体α1(GABRA1)浓度。

试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:450pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。

呼吸道感染IgM九项联检试剂使用说明终稿

呼吸道感染IgM九项联检试剂使用说明终稿

呼吸道感染IgM九项联检试剂盒(间接免疫荧光法)说明书【产品名称】通用名称:呼吸道感染IgM九项联检试剂盒(间接免疫荧光法)英文名称:PNEUMOSLIDE IgM商品名称:PNEUMOSLIDE IgM【包装规格】10人份/盒【预期用途】采用间接免疫荧光法(IFA),同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM 抗体,可检的病原体包括:嗜肺军团菌血清1型、肺炎支原体、Q热立克次体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒1、2和3型。

已报道的非典型性肺炎的病原体有很多,其中最常见的有:嗜肺军团菌人最易感染的是嗜肺军团菌血清1型,非典型性肺炎常伴随有全身症状。

10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清1型引起的。

在血清学诊断中,间接免疫荧光法(IFA)是唯一的标准技术。

肺炎支原体肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见,由于很难将其固定在载玻片上,因此先将肺炎支原体抗原固定在细胞中。

Q热立克次体Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病,会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。

血清学诊断中,IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。

肺炎衣原体肺炎衣原体极易造成呼吸系统感染,特别是支气管炎和肺炎。

在老年人中发病率较高,它所引起的肺炎占所有肺炎病例的10%。

微量免疫荧光法(MIF)是最灵敏和最特异的诊断方法。

腺病毒腺病毒是一种重要的呼吸道病原体,能引起上呼吸道疾病,伴随有急骤发热和轻度呼吸道感染。

呼吸道合胞病毒呼吸道合胞病毒(RSV)是两岁以下幼儿呼吸道感染的主要病原体,在冬季爆发流行。

流感病毒它是流感的病原体,在具有潜在病理学的患者中会产生严重的并发症。

由于它易于与其它呼吸道疾病混淆,所以在流行期临床诊断很困难。

因此,实验室诊断就显得非常重要。

副流感病毒副流感病毒1、2和3型在2-4岁儿童中能引起喉气管支气管炎(哮吼)。

3型具有流行性,1和2型具有地域性。

【检测原理】间接免疫荧光法(IFA)是基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生的反应。

人细胞角蛋白

人细胞角蛋白18-M30(CK18-M30)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中CK18-M30含量。

实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗CK18-M30抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗CK18-M30抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。

TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的CK18-M30呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。

试剂盒组成及试剂配制1.酶联板:一块(96孔)2.标准品(冻干品):2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为10ng/ml,做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释)后,分别稀释成10ng/ml,5ng/ml,2.5ng/ml,1.25ng/ml,0.625ng/ml,0.312ng/ml,0.156ng/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0ng/ml,临用前15分钟内配制。

如配制5ng/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)10ng/ml 的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。

3.样品稀释液:1×20ml。

4.检测稀释液A:1×10ml。

5.检测稀释液B:1×10ml。

6.检测溶液A:1×120μl(1:100)临用前以检测稀释液A1:100稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μl/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。

如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。

7.检测溶液B:1×120μl/瓶(1:100)临用前以检测稀释液B1:100稀释。

Calcein PI细胞活性与细胞毒性检测试剂盒说明书

Calcein/PI 细胞活性与细胞毒性检测试剂盒产品简介:碧云天生产的Calcein/PI 细胞活性与细胞毒性检测试剂盒(Calcein/PI Cell Viability/Cytotoxicity Assay Kit ,或Calcein/PI Live/Dead Viability/Cytotoxicity Assay Kit)是一种非常便捷的基于Calcein-AM (钙黄绿素)和PI (碘化丙啶)双荧光染色法检测动物细胞死活的试剂盒。

本试剂盒使用便捷,荧光染色和检测仅需约30分钟。

本试剂盒染色30分钟后,就可进行后续的荧光显微镜拍照、流式分析或者荧光酶标仪定量等荧光检测和分析。

本试剂盒的原理是两种探针可分别检测细胞内酯酶活性和细胞膜完整性,从而反映细胞活性与细胞毒性。

其中Calcein AM 染色活细胞,呈现绿色荧光;而碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色死细胞,呈现红色荧光。

本试剂盒用于检测动物细胞活性与细胞毒性效果参考图1。

图1. Calcein/PI 细胞活性与细胞毒性检测试剂盒用于HT-29(人结肠癌细胞)细胞活性与细胞毒性检测的效果图。

HT-29细胞(C6410)在明场视野下仔细观察可以看到有明显的坏死细胞(图A);绿色荧光标记的即为Calcein 染色的活细胞(图B),红色荧光标记的即为PI 染色的死细胞(图C);Calcein和PI 双染叠加(merge)后可以非常清晰地观察到活细胞和死细胞的荧光染色差别(图D)。

在本实验中,HT-29细胞经TSZ 处理4小时。

TSZ 为TNFα、SM-164和Z-V AD-FMK 组成的细胞程序性坏死诱导试剂(C1058)。

实测数据会因实验条件、检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。

Calcein AM (Calcein Acetoxymethyl Ester ,中文名称为钙黄绿素AM或钙黄绿素乙酰氧基甲酯),是一种可以对活细胞进行荧光染色的细胞染色试剂,Calcein AM 是在Calcein (钙黄绿素)的基础上增加了乙酰氧基甲酯(AM)基团,加强了疏水性,因此能够很容易穿透细胞膜。

达优人 IL-1β ELISA 试剂盒说明书

产品信息和操作指南Human IL-1β预包被 ELISA kit Cat# : DKW12-1012-048 / DKW12-1012-096本试剂盒专用于科研,而非用于诊断Human IL-1βDKW12-1012目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒提供的试剂 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (5)操作过程 (7)结果分析 (9)试剂盒的保存 (9)操作步骤一览表 (10)参考文献 (11)ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法 (12)预包被ELISA 试剂盒系列产品 (15)1、产品简介:达优®人IL-1β ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术,体外定量检测人血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的IL-1β,可同时检测天然的和重组的IL-1β。

本试剂盒为预包被板,“夹心一步”完成,整个过程孵育时间不超过4小时,洗涤6次,操作时间大大减少。

本试剂盒专用于科研,而非用于诊断。

使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分,若有任何疑问请与达科为生物工程有限公司联系,E-mail:*************.检测范围:500-15.6 pg/mL灵敏度:5 pg/mL重复性:板内、板间变异系数均<10%。

2、知识背景:白细胞介素-1(Interleukin-1,IL-1)家族蛋白包括IL-1α、IL-1β和IL-1受体拮抗物。

除了皮肤角质化细胞、一些上皮细胞和中枢神经系统的一些细胞之外,IL-1并不在健康个体的未经刺激的细胞中分泌。

生理条件下IL-1的浓度仅在10-12-10-14M之间。

然而,为了应对刺激(如炎症物质、感染、细菌性内毒素),巨噬细胞和各种其它类型的细胞的IL-1分泌量将大大增加(1-4)。

3、试剂盒提供的试剂:试剂规格配制Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状,按瓶上说明操作Biotinylated antibody 2/1瓶* 1:50用Dilution buffer R(1×)稀释Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1:100用Dilution buffer R(1×)稀释Dilution buffer R(1×) 3/2瓶* 即用型Washing buffer(50×)1瓶 150∶用蒸馏水稀释TMB 1瓶即用型Stop solution 1瓶即用型Precoated ELISA plate 8×12或8×6*即用型封板膜 2/1张* 即用型说明书1份*:96/48 Tests4、需要实验者自行准备的试剂与仪器:1.酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)2.微量加液器及吸头:P10,P50,P100,P200,P1000 3.蒸馏水或去离子水4.全新滤纸5.旋涡振荡器和磁力搅拌器5、注意事项:1.试剂应按瓶上标签说明储存,使用前室温平衡20-30分钟。

人转化生长因子β1(TGF-β1)elisa检测试剂盒使用说明书

人转化生长因子β1(TGF-β1)elisa检测试剂盒使用说明书人转化生长因子β1(TGFβ1)elisa检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。

往预先包被转化生长因子β1(TGFβ1)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻di洗涤。

用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的转化生长因子β1(TGFβ1)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。

2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。

3000转离心30分钟取上清。

3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。

3000转离心10分钟取上清。

5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品1. 酶标仪(450nm)2. 高精度加样器及枪头:0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3. 37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃,使用前室温平衡20分钟。

从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。

实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。

严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

所有液体组分使用前充分摇匀。

试剂盒组成名称 96孔配置 48孔配置备注微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条无标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管无样本稀释液 6mL 3mL 无检测抗体HRP 10mL 5mL 无20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释底物A 6mL 3mL 无底物B 6mL 3mL 无终止液 6mL 3mL 无封板膜 2张 2张无说明书 1份 1份无自封袋 1个 1个无注:标准品(S0S5)浓度依次为:0、3、6、12、24、48 ng/mL试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

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人肺部活化调节趋化因子(PAFA/CCL18)试剂盒使用说明书
Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置
标准品稀释液:1.5ml×1瓶
酶标试剂:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)
【人肺部活化调节趋化因子(PAFA/CCL18)试剂盒】本试剂仅供研究使用
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值
由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线
的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为
样品的实际浓度。
试剂盒组成:
封板膜:2片(48)/2片(96)
说明书:1份
密封袋:1个
标准品: 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存
样品稀释液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肺部活化调节趋化因子(PAFA/CCL18)IgG水
平。用纯化的人肺部活化调节趋化因子(PAFA/CCL18)IgG抗体包被微孔板,制成固相抗体,
往包被单抗的微孔中依次加入肺部活化调节趋化因子(PAFA/CCL18)IgG,再与HRP标记的
肺部活化调节趋化因子(PAFA/CCL18)IgG抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过
彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化
成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肺部活化调节趋化因子(PAFA/CCL18)IgG呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肺部活化调节
趋化因子(PAFA/CCL18)IgG浓度。
目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中肺部活化调节趋化因子
(PAFA/CCL18)IgG的含量。
服务承诺:
供货期:款到发货。
工作时间内免费的技术咨询和指导 。请来电咨询
为客户提供来样检测服务,最大限度实验结果的有效性(免费代测)。
保存条件及有效期:
试剂盒保存:2-8℃| 有效期:6个月
【人肺部活化调节趋化因子(PAFA/CCL18)试剂盒】样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心
20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次
离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程
中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/
分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞
浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分
钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备
用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器
将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待
检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上
进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标
准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二
孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,
混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔
中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各
取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混
匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准
品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,
浓度分别为1800ng/L,1200ng/L ,600ng/L,300ng/L, 150ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样
品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混
匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
【人肺部活化调节趋化因子(PAFA/CCL18)试剂盒】注意事项:
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未
用完,板条应装入密封袋中保存。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好
控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值
大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计
算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
0.2IU/L - 6IU/L

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