2022年华南农业大学生物技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年华南师范大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年华南师范大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、在______菌中，存在一种与芽孢相类似的休眠构造，称为______，它的特点是抗______能力强。
2、包膜中的类脂来源于______。
3、ED途径的四个主要特点是______、______、______和______。
4、PA培养基通常用来培养______，其pH值为______。
5、真菌是不含有______素、______营养，以______进行繁殖的真核微生物。
6、微生物与人类关系的重要性，你怎么强调都不过分，微生物是一把十分锋利的双刃剑，它们在给人类带来______的同时也带来______。
7、在微生物培养过程中，会发生不利于其继续生长的pH变化，一般可采取两类方法作外源调节：① ______，过酸时可加入______或______ 等调节；过碱时，可加入______或______等调节；② ______，过酸时可通过______或______调节，过碱时可通过______或______调节。
8、自然界的碳素循环主要包括______和______两个过程。
9、限制性酶的命名是根据分离出此酶的______而定的，即取______的第一个字母和______的头两个字母组成3个斜体字母加以表示，遇有株名，再加在后面。
如果同一菌株先后发现几个不同的酶，则用罗马数字加以表示。
10、．常用的减毒活疫苗有______、______和______等。
二、判断题11、细菌计数板每小格的体积是1/20000mm3。
（）12、稀释测数用的无菌水通常是由自来水灭菌而成。
（）13、无氧呼吸是专性厌氧菌所特有的一种生物氧化产能方式。
（）14、病毒的早期蛋白多为参与病毒基因组复制，调节病毒基因组表达以及改变或抑制宿主分子合成的非结构蛋白。
（）15、真菌细胞壁的主要成分是肽聚糖。
（）16、DNA（G＋C）mol%值是微生物（除少数以RNA为遗传物质的病毒）的一个基本遗传特征，它通常以RNA中鸟嘌呤（G）加胞嘧啶（C）的摩尔（mo1）数的百分、比，即（G＋C）mol%来表示。
2022年中国农业大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年中国农业大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、黏细菌产生黏液，将______包裹，形成颜色鲜艳、形态各异的______。
可产生多种胞外酶，能溶解______生物和______生物。
2、血凝抑制试验是根据特异性的病毒抗体与病毒表面蛋白作用可能抑制______性质设计的。
3、光能自养微生物有产氧与不产氧两大类，前者如______等，后者如______等。
4、配制培养基时，应注意各种营养物质的配比，特别是______。
一般而言，当C:N≥5:1时，有利于______；当C:N＜5:1时有利于______。
5、霉菌的气生菌丝可分化出各种类型的子实体，如无性的______、______、______等；有性的______、______和______等。
6、微生物在能源供应方面与人类关系密切，例如______、______、______、______和______等。
7、现代发酵罐除罐体外，还要有一系列必要的附属装置，包括______、______、______、______、______和______等。
8、参与硫循环的微生物有______、______、______。
9、外源DNA导入原核细胞可以采用以下3种方法：______方法，即重组质粒载体导入感受态细胞；______方法，即重组噬菌体DNA或重组噬菌质粒导入感受态细胞；______方法，即外源DNA被包装成λ噬菌体颗粒导入宿主细胞。
10、免疫T细胞分为许多亚群，能协助特异性免疫反应的辅助T细胞是______，TS细胞叫______细胞，TM细胞又称______细胞。
二、判断题11、鞭毛和细菌的须（菌毛）都是由蛋白质构成，因此两者具有相同的生理功能。
（）12、在基团转位运输方式中，除了在运输过程中物质发生化学变化这一特点外，其他特征均与主动运输方式相同。
（）13、在光能自养型生物中，凡进行不产氧光合作用的种类必定是原核生物。
2022年四川农业大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年四川农业大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、细菌细胞的内含物有______、______、______和______四类。
2、烈性噬菌体生活史可分五个阶段，即______、______、______、______和______。
3、一切自养微生物，其生命活动中的首要反应就是CO2固定。
目前知道的途径有四条，即______、______、______和______。
4、在配制异养微生物培养基时，常用的生长因子来源是______、______、______或______等。
5、蕈菌的发育过程有______个明显的阶段，其中双核菌丝细胞的增殖方式十分特殊，称为______。
6、微生物在现代生物分类系统中分别属于______界、______界、______界和______界。
7、在微生物培养过程中，会发生不利于其继续生长的pH变化，一般可采取两类方法作外源调节：① ______，过酸时可加入______或______ 等调节；过碱时，可加入______或______等调节；② ______，过酸时可通过______或______调节，过碱时可通过______或______调节。
8、植物根际微生物对植物有益的方面有______、______、______和 ______等。
9、质粒通常以共价闭合环状的超螺旋双链DNA分子存在于细胞中，但从细胞中分离的质粒大多是3种构型，即______型、______型和______ 型。
10、在补体结合实验中，无溶血现象出现称为补体结合实验______，说明样品中______抗原存在。
二、判断题11、玻璃器材洗净后在急需时可采用高压蒸汽灭菌，而不能用干热灭菌。
（）12、有些假单胞菌可以利用多达90种以上的碳源物质。
（）13、酿酒酵母只进行同型酒精发酵，而绝不存在异型酒精发酵。
（）14、DNA病毒以双链为多，而RNA病毒以单链为多。
（）15、足细胞可在曲霉和青霉的分生孢子梗的基部找到。
2022年中国农业大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年中国农业大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、细菌的鞭毛是由______构成的，它从______长出，穿过______伸出体外。
2、一步生长曲线的三个重要的特征参数______、______和______。
3、从葡萄糖开始的肽聚糖生物合成过程中，最重要的4种中间代谢物是______、______、______和______。
4、微生物的营养物可为它们的正常生命活动提供______、______、______和必要的______。
5、真菌是不含有______素、______营养，以______进行繁殖的真核微生物。
6、现代微生物学发展有以下几个特点：______，______，______，______，______，______。
7、用于微生物大规模液体培养的发酵罐，其主要作用是要为微生物提供______、______、______、______和______等最适培养条件。
8、微生物将空气中的N2还原为NH3的过程称为______。
该过程中根据微生物和其他生物之间相互的关系，固氮体系可以分为______、______ 和______3种。
9、Avery和他的合作者分别用降解DNA、RNA和蛋白质的酶作用于有毒的S型细胞抽提物，然后分别与______混合，结果发现，只有DNA被酶解而遭到破坏的抽提物无转化活性，说明DNA是转化所必须的转化因子。
10、病原菌主要通过______、______和______等的作用在宿主体内繁殖与扩散。
二、判断题11、菌毛一般着生于G＋致病细菌的细胞表面。
（）12、在基团转位运输方式中，除了在运输过程中物质发生化学变化这一特点外，其他特征均与主动运输方式相同。
（）13、硝酸细菌生命活动所需的ATP和[H]，是由水合亚硝酸（H2O·NO2－）脱氢，并分别经呼吸链和逆呼吸链传递后提供的。
（）14、植物病毒的核酸主要是DNA，而细菌病毒的核酸主要是RNA。
2022年华南农业大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年华南农业大学生物科学专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、产甲烷细菌的细胞壁不含______，它属于______。
2、病毒一步生长曲线有三个最重要的特征参数，即______期（包括______期和______期）和______期的长短以及______的大小。
3、一切生物，在新陈代谢的本质上既存在着高度的______，又存在着明显的______。
4、蓝细菌的培养可用______培养基。
5、酵母菌中，有性生殖可以产生的孢子有______孢子或______孢子。
6、1347年的一场由______引起的瘟疫几乎摧毁了整个欧洲，有1/3的人（约2500万人）死于这场灾难。
7、获得微生物同步生长的方法主要有两类：① ______，如______等；② ______，如______等。
8、自然界的碳素循环主要包括______和______两个过程。
9、线粒体的核糖体在大小上类似于原核生物的核糖体，线粒体与细菌之间的近缘关系，支持真核的细胞器（线粒体、叶绿体）是由______演化出来的假设。
10、IgG在木瓜蛋白酶的作用下，可产生2个相同的______（符号为______）和1个______（符号为______）。
二、判断题11、通过电子显微镜的深入研究，发现放线菌的孢子丝可通过凝聚分裂和横隔分裂两种方式形成成串的分生孢子。
（）12、实验室做固体培养基时，常加1.8%的琼脂作凝固剂，做半固体培养基时，琼脂加入量通常是0.5%。
（）13、由于固氮酶对氧的极度敏感，因此，凡能固氮的微生物都是厌氧菌。
（）14、与其他微生物相似，同种病毒粒或噬菌体个体间，也存在生长期（即年龄）和形态上的差别。
（）15、真菌的每一段菌丝都可以发展成为一个新的菌体。
（）16、在同种微生物的不同菌株间，一些非分类鉴定特征如代谢产物的种类和数量等也总是比较接近的。
（）17、至今研究过的抗生素，其效价都是定为1μg纯化合物为1个单位。
2022年华南理工大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年华南理工大学微生物学专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、细菌糖被的主要生理功能为______、______、______、______、______和______等。
2、纯化的病毒制备物应保持其______和______。
3、微生物在糖酵解生成丙酮酸基础上进行的其他种类的发酵有丁二醇发酵、混合酸发酵、______发酵和______发酵等。
丁二醇发酵的主要产物是______，______发酵的主要产物是乳酸、乙酸、甲酸、乙醇。
4、作为微生物营养要素之一的水，它的主要功能有______、______、 ______以及许多优良的物理性质，如______、______、______和______ 等。
5、真核生物细胞中核糖体附着在______的表面。
6、在微生物学历史上，固体培养基的发明人是______，用于固体培养基的优良凝固剂琼脂的发明人是______。
7、有的葡萄酒酿制，其发酵的微生物就是从其原料______而来，葡萄果皮上的微生物来自于葡萄园的______。
8、在自然界中存在许多极端环境，并进化出与这类环境相适应的各种极端微生物，如______、______、______、______、______、______和______等。
9、用现代生物学技术对苏云金芽孢杆菌进行基因改造，使重组Bt菌株具有杀灭多种害虫的δ内毒素或β-外毒素基因，或具有某些______、______产生的基因，并高效表达，生产出受环境影响小、杀虫谱广、防昆虫抗性的强效Bt杀虫剂。
10、特异性免疫具有的特点为______、______和______。
二、判断题11、在自然界中，各种细菌、放线菌都有溶源菌存在。
（）12、培养自养型微生物的培养基完全可以由简单的无机物组成。
13、酿酒酵母只进行同型酒精发酵，而绝不存在异型酒精发酵。
（）14、TMV病毒是由约50%ssRNA核心和约50%蛋白质衣壳所组成。
2022年华南理工大学生物技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案)
2022年华南理工大学生物技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、E.coli肽聚糖双糖亚单位由______、______、______和______组成。
它与金黄色葡萄球菌肽聚糖双糖亚单位组成的区别在于______和______。
2、最先发现噬菌体的是______，他在培养______时在菌苔上发现了透明斑点。
3、微生物生物氧化的过程可以分为______、______和______三个阶段。
4、光能无机营养型微生物的能源是______，氢供体是______，基本碳源是______，其代表性微生物如______和______等。
5、真菌菌丝具有的功能是______和______。
6、微生物在其体制等方面具有一系列的优势，如______、______、______、______和______等。
7、若干常用抗生素的抗菌谱是：青霉素以抗革兰氏______性菌为主，链霉素以抗革兰氏______性菌和______为主，金霉素、土霉素、四环素属广谱抗生素，可抗______、______、______和______；抗真菌的抗生素有______、______和______等。
8、微生物寄生于其他微生物的例子如______、______；微生物寄生于植物的例子如______；微生物寄生于动物的例子如______。
9、外源DNA导入原核细胞可以采用以下3种方法：______方法，即重组质粒载体导入感受态细胞；______方法，即重组噬菌体DNA或重组噬菌质粒导入感受态细胞；______方法，即外源DNA被包装成λ噬菌体颗粒导入宿主细胞。
10、常用的特异性免疫治疗剂有______、______、______和______等。
二、判断题11、质粒与染色体DNA一样，失去质粒，细菌细胞就会死亡。
（）12、在配制异养微生物培养基时，实际上只要加入6种营养要素中的4～5种即可。
（）13、无氧呼吸的最终氢受体只有氧化态无机盐一种类型。
2022年广东医科大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案)
2022年广东医科大学生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、磷壁酸是______菌细胞壁的特有成分，几丁质是______细胞壁的主要成分，吡啶二羧酸钙主要存在于细菌______结构中，二氨基庚二酸主要存在于______菌的壁中，藻胆蛋白主要存在于______中。
2、病毒可分真病毒与亚病毒两大类。
从组成的化学本质来划分，真病毒至少含有______和______两种成分；亚病毒中的______只含______， ______只含______或______，而______则只含______。
3、硝化细菌是属于______营养型微生物，它们的碳源是______。
其中亚硝酸细菌能够将______氧化为______，硝酸细菌则能够将______氧化为______，从而获得能量。
它们用于还原CO2的NADH2，是在消耗大量 ______的情况下，通过______的方式而产生，这也是它们生长缓慢和生长得率低的原因之一。
4、实验室常用的培养细菌的天然培养基为______，培养酵母菌的天然培养基为______，培养放线菌的组合（合成）培养基为______等，培养真菌的组合培养基为______等。
5、真菌的特点有：①______；② ______；③ ______；④ ______；⑤ ______和⑥ ______等。
6、微生物学发展史上发展期的实质为______水平研究，其主要特征是：① ______，②______，③ ______，④ ______，⑤ ______。
7、生物效价可用______、______测定，其中以______中的______最为常用。
8、植物根际微生物对植物有益的方面有______、______、______和 ______等。
9、当细菌处于一种氨基酸全面匮乏的“氨基酸饥饿”状态时，细菌会采取一种应急反应以求生存，实施这一应急反应的信号，大量合成两种物质，它们是：______和______。
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2022年华南农业大学生物技术专业《微生物学》期末试卷B(有答案）一、填空题1、某些细菌在生长代谢过程中分泌大量黏性物质围集在细胞壁外面，使细菌与外界环境有明显的边缘，这种物质称为______，有的细菌，这种黏性物质互相融合在一起，成为______，称之为______。
2、包膜中的类脂来源于______。
3、发酵的产能机制都是______，因而产能效率极低。
4、在液体培养基中，放线菌常以______的方式繁殖，工业上的______ 就是利用这一方式进行增殖的。
5、菌物界中的菌物是指一大群______、______、______的真核微生物，一般包括______、______和______三类。
6、我国古代劳动人民在微生物应用方面的主要贡献是发明用______独特工艺加工______原料以生产______。
7、巴氏消毒法的具体方法很多，主要可分为两类，即______和______。
8、海洋细菌有______、______、______和______等共同特征。
9、采用紫外线杀菌时，以波长为______的紫外线照射最好。
10、T细胞在识别抗原的同时也识别自身______。
二、判断题11、在自然界中，各种细菌、放线菌都有溶源菌存在。
（）12、所有碳源物质既可以为微生物生长提供碳素来源，也可以提供能源。
（）13、组成肽聚糖的前体物N-乙酰胞壁酸-UDP是在细胞膜上合成的。
（）14、在昆虫颗粒体病毒的每一个蛋白质包含体中，都包裹着数量很多的杆状病毒体。
（）15、酵母菌是一类只发酵糖类且细胞都呈单细胞的真菌。
（）16、碱基排列顺序差异越小，它们之间亲缘关系就越近，反之亦然。
（）17、多数消毒剂可兼作防腐剂。
（）18、嗜酸微生物之所以具有在酸性条件生长的能力是因为其胞内物质及酶是嗜酸的。
（）19、F因子是一种属于附加体的质粒。
（）20、DNA疫苗是指由任何DNA的片段制成的疫苗，用以提高机体的非特异性免疫水平。
（）三、选择题21、在G－细菌的细胞壁中，有一种三聚体蛋白——孔蛋白位于（）上。
A.LPS层B.脂蛋白层C.肽聚糖层D.细胞膜22、在基质脱氢和产能的四条途径中，有CO2释放的途径有（）两条。
A．EMP和HMPB．HMP和TCAC．EMP和TCAD．EMP和ED23、接合菌亚门的主要特征是（）。
A．菌丝无隔，有性生殖产生接合孢子B．菌丝有隔，有性生殖产生接合孢子C．菌丝有隔，有性生殖产生卵孢子D．菌丝有隔，有性生殖产生子囊孢子24、描述螺旋对称壳体特征的参数有（）。
A．核酸的相对分子质量B．螺旋长度与直径C．螺旋的外观D．蛋白质亚基大小25、下列物质属于生长因子的是（）。
A．葡萄糖B．蛋白胨C．NaClD．维生素26、在细菌接合实验中，发现不同性别的菌株经接合后，罕见有受体细胞改变性别的是（）。
A．F＋×F－B．F′×F－C．F＋×HfrD．Hfr×F－27、出芽的过程发生在（）。
A．病毒中B．形成分支的细菌中C．原生动物中D．酵母菌中28、微生物五大共性的基础是（）。
A．体积小，面积大B．吸收多，转化快C．生长旺，繁殖快D．适应强，易变异29、在几种淋巴细胞中，有一种要通过IgG的Fc片段作媒介才触发其杀伤活性的是（）。
A．T淋巴细胞B．B淋巴细胞C．NK细胞D．K细胞30、一类可充分发挥秸秆等生物物质中蕴藏的饲料、燃料和肥料潜能的方法是（）。
A．燃烧发电B．填埋肥田C．堆肥利用D．沼气发酵四、名词解释31、原体和始体32、核衣壳（tmcleocapsid）33、光介导紫膜ATP合成34、斜面菌种保藏法35、侵袭力五、简答题36、请描述真核生物细胞中的溶酶体，并说明它的功能。
37、以大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统（PTS）为例解释基团转位。
38、一个良好的微生物培养装置的基本条件是什么？39、嗜酸性微生物有什么特点。
40、克隆载体和表达载体有何不同？各有哪些必需元件？六、论述题41、以测苏云金杆菌工业菌粉中的活菌数为例，试述稀释平板计数的基本方法。
参考答案一、填空题1、【答案】荚膜；一团胶状物；菌胶团2、【答案】宿主的细胞膜3、【答案】底物水平磷酸化4、【答案】菌丝断裂后的片断形成新的菌丝体；液体发酵5、【答案】无叶绿素；依靠细胞表面吸收有机养料；细胞壁一般含有几丁质；真菌；粘菌；假菌（卵菌）6、【答案】制曲；淀粉质；酒类7、【答案】低温维持法；高温瞬时法8、【答案】嗜盐；嗜冷；耐压；繁殖慢9、【答案】260nm左右10、【答案】MHC分子二、判断题11、【答案】对12、【答案】错13、【答案】错14、【答案】错15、【答案】错16、【答案】错17、【答案】错18、【答案】错19、【答案】对20、【答案】错三、选择题21、【答案】A22、【答案】B23、【答案】A24、【答案】B25、【答案】D26、【答案】D27、【答案】D28、【答案】A29、【答案】D30、【答案】D四、名词解释31、答：原体是指衣原体生活史中具有感染力的细胞，呈小球状（直径小于0.4μm），细胞厚壁、致密，不能运动，不生长，抗干旱，有传染性。
始体是指原体经空气传播，遇到合适的新宿主后通过吞噬作用进入细胞并在其中生长，转化成无感染力的细胞。
32、答：核衣壳是病毒的核酸和衣壳的合称，是任何真病毒都具有的基本结构。
有些较复杂的病毒，其核衣壳外覆盖一层被称为包膜的、内含蛋白质或糖蛋白的类脂双层膜。
33、答：光介导紫膜ATP合成是指嗜盐菌在无氧条件下，利用光能所造成的紫膜蛋白上视黄醛辅基构象的变化，使质子不断驱至细胞膜外，从而在膜两侧建立一个质子动势，再由它来推动ATP酶合成ATP的过程。
34、答：斜面菌种保藏法是指将菌种在适宜的斜面培养基上培养成熟后，移入4～6℃的低温下保藏，以后每隔3～5个月转管一次的保藏方法。
但此方法易发生培养基干枯、菌体自溶、基因突变、菌种退化、菌株污染等不良现象。
35、答：侵袭力是指病原体具有突破宿主防御功能，并在其中进行生长繁殖和实现蔓延扩散的能力。
侵袭力是决定病原体致病力的一个重要方面。
五、简答题36、答：（1）溶酶体的描述溶酶体是由单层细胞膜包裹、内含多种酸性水解酶的小球形、囊泡状细胞器。
（2）溶酶体的功能①主要功能是在细胞内起消化作用，是细胞内的消化器官；②具有自体吞噬作用，清除细胞中无用的生物大分子，衰老的细胞器等；③防御功能，如巨噬细胞可吞入病原体，在溶酶体中将病原体杀死并降解；④参与分泌过程的调节；⑤参与精子的顶体反应。
37、答：基因移位是一种既需特异性载体蛋白又须耗能的运送方式，溶质在运送前后会发生分子结构的变化，主要用于运送各种糖类、核苷酸、丁酸和腺嘌呤等物质。
大肠杆菌通过磷酸转移酶系统（PTS），即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸转移酶系统，来完成一些营养物质的运输。
具体的运送分以下两步进行：（1）热稳载体蛋白（HPr）的激活 HPr是一种低分子量的可溶性蛋白，它结合在细胞膜上，具有高能磷酸载体的作用。
细胞内高能化合物磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）的磷酸基团可通过酶Ⅰ的作用而把HPr激活。
（2）糖经磷酸化后运人细胞膜内膜外环境中的糖先与外膜表面的酶Ⅱc结合，再被转运到内膜表面。
这时，糖被P～HPr上的磷酸被激活，并通过酶Ⅱc的作用将糖-磷酸释放到细胞内。
38、答：研究微生物的结构、功能与环境的交互作用涉及到许多不同的应用，一个良好的微生物培养装置的基本条件要具备如下几点：（1）按微生物的生长规律进行科学的设计；（2）能提供丰富而均匀的营养物质的基础；（3）保证微生物获得适宜的温度和良好的通气条件（只有厌氧菌例外）；（4）为微生物提供一个适宜的物理化学条件和严防杂菌的污染等。
39、答：（1）嗜酸性微生物的定义嗜酸微生物，又称嗜酸菌，是指只能生活在低pH（＜4）条件下，在中性pH下即死亡的微生物；嗜酸微生物的细胞内pH仍接近中性，各种酶的最适pH也在中性附近。
专性嗜酸微生物是一些真细菌和古生菌。
（2）嗜酸性微生物的嗜酸机制该类微生物的细胞壁和细胞膜具有排阻外来H＋和从细胞中排出H＋的能力，且它们的细胞壁和细胞膜还需要高H＋浓度才能维持其正常结构。
40、答：（1）克隆载体和表达载体的功能不同：①克隆载体是在克隆过程中用到的各种质粒，比如为了扩增目的基因的高拷贝质粒、为了方便测序的测序质粒、为了连接PCR产物的TA质粒、为了重组的穿梭质粒等等。
克隆载体一般有较强的复制能力，利于基因的保存和扩增，而且提供丰富的酶切位点等等。
它不必有强启动子，因为不重于表达。
②表达载体是基因克隆结束后，为了在特定细胞内表达而构建的。
它重点在于表达，有各种各样的启动子适应于不同种类的细胞，并且有各种各样，如诱导等可控的表达调控方式。
（2）克隆载体和表达载体必需元件的原件如下：①克隆载体所具备的元件：目的基因、复制子、多克隆位点、标记基因。
②表达载体所具备的元件：目的基因、启动子、终止子、标记基因。
六、论述题41、答：（1）测数前先准备好测数用的1ml无菌吸管，9cm无菌平皿，9ml 试管无菌水和牛肉膏蛋白胨琼脂培养基；（2）称取10g工业菌粉加入90ml无菌水中置摇床上或用手振荡20～30min，让菌体分散；（3）将上述振荡过的菌液按无菌操作法进行十倍稀释直到10－3；（4）取9cm无菌平板皿9套用记号笔在平皿底编号，10－8编3套，10－7编3套，10－6编3套；（5）用1支1ml的无菌吸管，取1ml 10－8的稀释菌液放入编号10－8的平皿中，如此将三个重复做完。
同法取10－7稀释菌液放入三个编号为10－7 平皿中。
同法取10－6稀释菌液放入三个编号为10－6平皿中（均要按无菌操作法做）；（6）将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基熔化冷至45～50℃后，在酒精灯火焰边按无菌操作法倒入上述9套平皿中，每个加入量大约15～20ml，边加边摇动乎皿，使培养基与菌液充分混匀；（7）待培养基凝固后，将平板倒过来，置28～30℃下培养48h后计数。