实验报告六高效液相色谱法用于有机农药残留的分离和分析
高效液相色谱法检测黄瓜中的农药残留
高效液相色谱法检测黄瓜中的农药残留黄瓜是现代人餐桌上非常常见的蔬菜之一，由于其水分丰富、口感鲜嫩，深受人们喜爱。
在黄瓜的栽培过程中，为了防治害虫和病害，农民不可避免地会使用农药来保护作物的生长。
长期以来，由于农药的过量使用或错误使用，导致了农药残留的问题，对人体健康造成了潜在的威胁。
开展对黄瓜中农药残留的监测和检测工作，对于保障公众的饮食安全至关重要。
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种广泛应用的分析方法，具有高灵敏度、高精密度、高分辨能力的特点，被广泛用于农产品中农药残留的检测。
下面将详细介绍黄瓜中农药残留的高效液相色谱法检测方法。
1. 样品的准备取一定数量的新鲜黄瓜，将外皮去除，然后将黄瓜切成小块。
将黄瓜块放入离心管中，加入一定体积的乙腈，并加入适量砂糖，搅拌均匀。
然后，将样品在低温下振荡提取一段时间，使农药残留充分溶解于乙腈中。
2. 色谱柱的选择根据农药的特性和需要检测的残留物，选择合适的色谱柱。
常用的色谱柱包括C18逆相色谱柱、环己烷相色谱柱等。
3. 样品的进样将提取好的样品通过进样器注入到色谱柱中。
控制进样量恰到好处，避免过多或过少样品进入色谱柱，影响分析结果。
4. 色谱柱的分离通过控制流动相的组成和流速，使样品中的农药残留物分离出来。
常用的流动相有甲醇、乙腈、纯水等。
通过调节流动相组成的比例和梯度，可以实现农药残留物的分离。
5. 检测器的选择和检测条件的设置根据需要检测的农药残留物的特性，选择合适的检测器。
常用的检测器有紫外-可见检测器、荧光检测器等。
设置合适的波长和响应时间，确保检测器能够准确地检测到目标残留物。
6. 结果的定量分析根据标准曲线和峰面积，计算待测样品中农药残留物的含量。
通过数据处理和分析，得出准确的结果。
以上就是高效液相色谱法检测黄瓜中农药残留的方法。
通过这种方法，可以快速、准确地检测黄瓜中的农药残留物，确保食品的安全性。
高效液相色谱法检测黄瓜中的农药残留
高效液相色谱法检测黄瓜中的农药残留
黄瓜是一种常见的蔬菜，但由于生长过程中易受到害虫和病菌的侵害，因此在种植过程中需要使用农药进行保护。
然而，农药残留会对人体健康造成威胁，因此针对农药残留的检测非常必要。
本文介绍一种高效液相色谱法检测黄瓜中的农药残留的方法。
实验方法：
1. 样品处理
取黄瓜样品10g，加入100ml乙腈中，用搅拌器将其混合均匀，待其悬浮后，用袋式过滤器过滤，过滤液收集，作为样品处理液；取0.5g的样品处理液，加入40ml甲醇中，用超声波清洗器将其清洗5分钟，离心30分钟，取上清液，即为样品。
2. 仪器和试剂
(1)高效液相色谱仪（HPLC），分析柱C18。
(2)甲醇、乙腈和水。
(3)每升水中加入0.1毫升二甲基亚砜（DMSO）。
(4)3,5-二氯苯甲酸（2,4-D）、阿维菌素、维拉菌素、氯氰菊酯、苯甲酰脲、多菌灵等农药标准品。
3. HPLC分析条件
(1)流动相：甲醇/水（60：40）。
(2)检测波长：254 nm。
(3)进样体积：10 μl。
(4)流速：0.8 mL/min。
(5)柱温：25℃。
结果与分析：
在实验中，通过HPLC检测黄瓜样品，发现样品中存在多种农药残留。
其中，检测到的主要农药有氯氰菊酯、阿维菌素和2,4-D等。
实验结果表明，该方法能够有效检测黄瓜中的农药残留，具有灵敏度高、准确性高、检测时间短等优点。
结论：
本实验介绍了一种高效液相色谱法检测黄瓜中的农药残留的方法。
实验结果表明，该方法可用于快速、准确地检测黄瓜中的农药残留物，具有一定的应用前景。
高效液相色谱法实验报告
高效液相色谱法实验报告高效液相色谱法实验报告导言：高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种重要的分析技术，广泛应用于化学、生物、医药等领域。
本实验旨在通过HPLC技术对某种药物样品进行分析，并探讨其应用的可行性和优势。
实验方法：1. 仪器设备：HPLC仪、色谱柱、样品溶液、流动相、检测器等。
2. 实验步骤：a. 样品制备：将药物样品粉末溶解于适当的溶剂中，制备成一定浓度的样品溶液。
b. 色谱柱准备：根据样品特性选择合适的色谱柱，并进行柱平衡处理。
c. 流动相制备：根据样品特性选择合适的流动相组成，并进行气泡排除和气体除湿处理。
d. 参数设置：根据样品特性和实验要求，设置适当的流速、温度、检测波长等参数。
e. 样品注射：使用自动进样器或手动注射器将样品溶液注入色谱柱。
f. 数据采集：通过检测器采集样品在色谱柱中的峰值信号，并记录相关数据。
g. 数据处理：利用计算机软件对采集的数据进行峰面积计算、峰高度计算等处理。
实验结果：通过HPLC技术对药物样品进行分析，得到了以下结果：1. 样品在色谱柱中产生了明确的峰值信号，峰形对称且峰高度适中。
2. 根据峰面积计算，得到了样品的浓度为X mg/mL。
3. 通过与标准品的比对，确认了样品的成分和含量。
讨论：1. HPLC技术在药物分析中的应用优势：a. 高灵敏度：HPLC技术能够检测到极低浓度的物质，对于药物分析中微量成分的检测非常重要。
b. 高选择性：通过调整流动相的组成和色谱柱的特性，可以实现对复杂样品中不同成分的分离和检测。
c. 高分辨率：HPLC技术能够有效地分离样品中的各个成分，提供准确的分析结果。
d. 自动化程度高：HPLC仪器配备了自动进样器和数据采集系统，能够实现实验过程的自动化操作和数据处理，提高了实验效率和准确性。
2. 实验中可能存在的误差和改进方法：a. 样品制备过程中的误差：药物样品的溶解度、稳定性等因素可能会对实验结果产生影响。
农药残留分析
2021/1/16
3. 流动相及流动相的极性
（1）淋洗液，洗脱剂。
（2）流动相组成
采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流 动相的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。
(2)有机磷农药
1994年5月包宏等报道了高效液相色谱法测定西红柿 中克线磷的残留量。
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2002年9月，HenryK.ROTICH，张卓勇等报道了环 境水中甲基对硫磷、对硫磷和辛硫磷农药残留的SPEHPLC分析。
2003年4月，关玉群等应用高效液相色谱法测定蔬菜 中有机磷农药残留量 。
2005年，张浩等报道了反相高效液相色谱法测定大豆中 除草剂喹禾糠酯农药的残留量。
（5）不同种类农药的多残留检测
近年来,农药残留分析方法趋向于由单一种类农药多残 留分析向多品种农药多残留分析发展，而且对农药的代谢 物、降解物以及轭合物的残留分析给予了更多的关注。
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1994年11月，杨容、傅承光报道了基质固相分散一 高效液相色谱法测定痕量异丙威和溴氰菊酯。
按测量性质可分为通用型和选择型。
紫外光度检测器（UV）—最常用的检测器
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光电二极管阵列检测器(DAD)
光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特 定波长，计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。
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荧光检测器
应用范围较小 柱后衍生荧光检测
电化学检测器
检测无紫外吸收或不能发 生荧光但具有电活性的物质
2004年6月，桂文君等报道了多菌灵在柑桔及土壤中的 HPLC 残留分析方法。
高效液相色谱法检测黄瓜中的农药残留
高效液相色谱法检测黄瓜中的农药残留
黄瓜是最受欢迎的蔬菜之一，但由于农药的使用，可能会导致农药残留问题。
对黄瓜中农药残留的检测非常重要。
高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分析技术，可以高效准确地检测黄瓜中的农药残留。
准备样品。
从市场上购买的黄瓜通常是新鲜的，但农药残留的风险仍然存在。
需要选择一定数量的样品代表整个批次的黄瓜。
然后，将黄瓜样品洗净并去皮。
这是为了消除表面的农药残留，以便更准确地检测内部的残留物。
然后，将黄瓜样品切碎并加入适量的溶剂中，以提取农药残留物。
接下来，通过离心将样品与溶剂分离。
离心是将样品与溶剂分离的一种方法，可以加速分离过程。
离心后，将上层液体取出，这是含有提取的农药残留物的液体。
然后，将提取液样品净化。
使用固相萃取柱来去除样品中的杂质，并将目标农药残留物留下。
通过选择合适的萃取柱和洗涤溶剂，可以去除大部分杂质，提高检测的准确性和可重复性。
接下来，采用HPLC仪器进行分析。
HPLC是一种色谱技术，可以将样品中的化合物进行分离并定量。
在HPLC分析中，需要选择合适的色谱柱、流动相和检测器，以获得准确的分析结果。
根据农药的类型和标准，对样品进行定量分析。
通过比较样品中目标农药的峰面积或浓度与标准曲线或限量标准的对照，可以确定样品中的农药残留物的浓度。
高效液相色谱法是一种有效的方法来检测黄瓜中的农药残留。
通过样品准备、提取、净化和HPLC分析，可以准确地定量检测样品中的农药残留物。
这为保障黄瓜的质量和安全提供了有力的保证。
高效液相色谱法检测黄瓜中的农药残留
高效液相色谱法检测黄瓜中的农药残留高效液相色谱法（High-performance liquid chromatography, HPLC）是一种常用的分析方法，可用于检测食品和环境中的农药残留。
本文将介绍如何使用HPLC检测黄瓜中的农药残留。
农药是保护农作物免受害虫、病原菌和杂草侵袭的重要工具。
农药的长期使用可能会导致在农产品中残留有害物质，对人体健康造成潜在风险。
对农产品中的农药残留进行监测和控制非常重要。
1. 样品处理从市场上购买新鲜的黄瓜样品。
将样品彻底清洗，去除表面的污垢和杂质，然后剥去皮。
将黄瓜样品切碎，放入样品研磨器中。
加入适量的甲醇，使黄瓜样品完全覆盖。
使用搅拌器或均质器均匀搅拌样品，使农药残留溶解在甲醇中。
2. 提取和净化将处理后的样品倒入一个玻璃漏斗中，用滤纸滤去样品中的固体杂质。
将过滤后的提取液收集起来，转移到一个离心管中。
使用离心机将提取液离心，去除液体中的悬浮颗粒。
为了净化提取液并去除杂质，可以使用固相萃取柱（solid phase extraction, SPE）。
将SPE柱连接到一个试管夹上，加入一定量的利用有机溶剂活化的固相吸附剂。
在此之前，需要经过活化和平衡步骤。
将提取液通过SPE柱，然后用适量的纯化溶剂将柱洗净，以确保农药残留完全被吸附。
3. 色谱分析在净化后的样品中，采用HPLC进行色谱分析。
配置合适的色谱流动相。
使用双缓冲液系统，将溶剂A（如酸性水溶液）和溶剂B（如有机溶剂）按照一定比例混合，并在一定流速下通过色谱柱。
选择合适的色谱柱和检测器。
根据农药的特性和柱性能的要求，选择合适的反相或正相色谱柱。
通常，使用反相色谱柱和紫外检测器进行农药残留的分析。
将净化后的样品以一定体积注入色谱柱，并设置合适的进样体积和柱温。
启动HPLC系统，调整流速和检测器参数，开始采集数据。
数分钟后，农药化合物将逐个通过色谱柱，并在检测器中检测到其信号。
根据标准品的峰面积和保留时间，可以通过对比法定量分析样品中的农药残留。
农药残留量的分析方法
农药残留量的分析方法1.高效液相色谱法（HPLC）高效液相色谱法是目前最常用的农药残留分析方法之一、该方法可将样品中的农药化合物与特定的色谱柱相互作用，通过色谱柱进行分离，最后再通过紫外检测器等进行测量，以得到农药的残留量。
由于其分离效果好、灵敏度高、选择性强等特点，HPLC已成为农药残留分析中的主要方法之一2.气相色谱法（GC）气相色谱法是一种常用于农药残留检测的方法。
该方法将样品中的农药化合物蒸发至气相，然后经过柱分离，并通过检测器进行测量。
与HPLC相比，GC法具有检测灵敏度高、分离效果好、分析速度快等优点，但对于具有高极性的农药分析能力较差。
3.液质联用技术（LC-MS/MS）液质联用技术是高效液相色谱（LC）和质谱（MS）的联用技术，是目前最常用的农药残留分析方法之一、通过将HPLC与质谱仪相连，可实现对样品中农药化合物的分离和测量。
与单独应用HPLC或GC相比，该方法能够提高测定的准确性和选择性，并且适用于多种农药化合物的同时检测。
4.酶联免疫分析法（ELISA）酶联免疫分析法是一种基于抗原与抗体特异性结合原理的快速检测方法。
通过将样品中的农药残留物与特定的抗体结合，再加入化学发光物质，通过测量发光信号的强度来判断样品中农药残留的含量。
该方法具有分析速度快、操作简便、灵敏度较高等优点，但受到检测物质种类的限制。
5.转基因技术近年来，转基因技术被广泛用于农药残留分析中。
通过将灵敏度较高的荧光基因或报告基因引入目标作物中，当作物暴露于农药时，报告基因会发生表达变化，从而监测农药残留的程度。
这种方法具有非破坏性、高灵敏度、迅速等优点，但仍处于研究阶段，尚未广泛应用。
除了上述分析方法外，还有一些其他方法也被用于农药残留的检测，如电化学检测、光声光谱法、电喷雾质谱法等。
各种方法在农药残留分析中都有其特点和适应范围，因此在实际应用中需要根据样品的不同特性和需求选择合适的方法。
在农药残留分析中，仪器设备的选择和操作准确性至关重要，同时需要严格遵守相关的实验室规范和操作规程。
猪肉和牛奶中氯霉素残留的高效液相色谱检测实验报告
猪肉和牛奶中氯霉素残留的高效液相色谱检测实验报告
实验目的:
本实验旨在通过高效液相色谱法检测猪肉和牛奶中氯霉素残留的含量。
实验器材:
1. 高效液相色谱仪(HPLC)及相应的色谱柱和检测器。
2. 液相色谱样品准备仪。
3. 氯霉素标准品。
实验步骤:
1. 准备样品: 取一定量的猪肉和牛奶样品，精确称量，并将其加入样品准备仪中。
2. 提取样品: 使用合适的提取液对样品进行提取，待提取液达到一定浓度后进行离心分离。
3. 过滤样品: 将分离后的提取液进行滤过，以去除杂质并获得纯净的提取液。
4. 准备标准曲线: 取氯霉素标准品系列浓度，分别进行色谱分析，得到各浓度下的峰面积值。
5. 测定样品: 将经过提取和过滤的样品注入HPLC，通过比对样品中峰面积值与标准曲线，可以计算出样品中氯霉素的残留含量。
实验结果:
通过HPLC的分析，得到了猪肉和牛奶样品中氯霉素的残留含量。
根据标准曲线进行计算。
讨论与结论:
通过实验结果可以得出猪肉和牛奶样品中氯霉素的残留含量。
如果残留超过国家标准限量，则表明样品不符合食品质量安全要求。
实验注意事项:
1. 在操作中要注意个人的安全，避免直接接触有毒的样品或溶液。
2. 严格按照实验步骤进行操作，避免污染或误操作导致结果的偏差。
3. 在实验过程中，注意仪器的正常运行和维护，确保结果的准确性和可靠性。
4. 样品的存储和保存要符合相应的要求，避免样品损坏或变质影响结果。
高效液相色谱法分析食品中的残留农药
高效液相色谱法分析食品中的残留农药第一章：引言在食品安全问题日益引起人们的关注的背景下，残留农药成为一个备受关注的话题。
近年来，残留农药对食品安全和人体健康造成了一定的威胁。
因此，分析食品中的残留农药的方法和技术变得至关重要。
本文将介绍一种常用的分析方法——高效液相色谱法（HPLC），并探讨其在食品中检测残留农药方面的应用。
第二章：高效液相色谱法概述2.1 高效液相色谱法原理高效液相色谱法是一种基于分离技术的分析方法，其原理是将待分析的混合物溶解在溶剂中，并通过高压将其进样到色谱柱中，然后使用流动相沿着色谱柱进行分离，最后通过检测器进行定量分析。
高效液相色谱法具有分辨率高、灵敏度好、选择性强等特点，被广泛应用于各个领域，特别是食品检测领域。
2.2 高效液相色谱法的仪器设备高效液相色谱法依赖于多种仪器设备，包括进样器、色谱柱、流动相泵和检测器等。
其中，进样器用于将待分析样品引入色谱柱，色谱柱用于样品的分离，流动相泵用于提供流动相进行分离过程，检测器则用于定量分析分离后的化合物。
第三章：高效液相色谱法在食品中的应用3.1 高效液相色谱法分析食品中的残留农药的流程在分析食品中的残留农药时，首先需采集样品并根据需要进行前处理以去除可能的干扰物，然后将样品溶解于适当的溶剂中，通过进样器将样品引入色谱柱进行分离，最后通过检测器进行定量分析。
3.2 高效液相色谱法在不同食品中的应用高效液相色谱法广泛应用于各类食品中残留农药的分析。
例如，在蔬菜中，可以使用高效液相色谱法对杀菌剂、除草剂等农药进行分析。
在水果中，可以使用高效液相色谱法对杀虫剂、杀菌剂等农药进行分析。
此外，高效液相色谱法还可以应用于粮食、肉类等食品中残留农药的分析。
3.3 高效液相色谱法的优势和不足高效液相色谱法在食品中分析残留农药方面有许多优势。
其具有分离效果好、灵敏度高、重现性好等优点。
然而，高效液相色谱法也存在一些不足之处，如需要专业的仪器设备和技术支持，分析周期长等。
高效液相色谱法测定蔬菜与水果中拟除虫菊酯类农药残留量
高效液相色谱法测定蔬菜与水果中拟除虫菊酯类农药残留量摘要：本实验采用超声分散，液相萃取，柱子吸附分离技术，结合高效液相色谱法测定蔬果中拟除虫菊酯类农药的含量可以取得较满意的结果。
此方法操作便捷可广泛应用于蔬果中农药含量的测定。
关键词：拟除虫菊酯高效液相色谱农药含量引言农药是当前农业生产用于防治病、虫、杂草对农作物危害不可缺少的物质，对促进农业增产有极重要的作用。
随着农业科学技术的发展，化学农药的品种和数量不断增加，已成为防治病虫害的主要手段。
农药施用到农作物上以后，一部分因多种原因而转移到环境水体中，对人、畜产生一定的危害。
鉴于此，为保障我国人民的身体健康、有效对农药在环境水体中的残留量进行监控，大力开展农药残留量检测技术以及相关的前处理技术的研究是非常必要的。
拟除虫菊酯类农药具有高效、低毒以及生物降解快的特点，广泛用于蔬菜、茶叶等农作物种植中害虫的防治。
已报道的拟除虫菊酯类农药残留量测定方法主要有气相色谱法( G C ) [ 1 - 4 3 ，由于一些拟除虫菊酯具有热不稳定性，而 G C法需要较高的汽化温度，它们会发生一定的分解，从而对分析产生影响。
因此，我们考虑采用高效液相色谱法 ( HP L C ) 分析拟除虫菊酯类农药。
在我国制定的蔬果中拟除虫菊酯类的农药最高残留量国家标准为：氯氰菊酯0.2mg/kg(GB 4829.4-1994);氰戊菊酯0.2mg/kg（ＧＢ14928.5-1994）；溴氰菊酯0.2mg/kg （GB4828.4-1994）本实验直接采集新鲜的的蔬菜与水果样品，样品经过制备提取，净化和浓缩等预处理过程制备成为样品测试液以后，用液相色谱外标法（标准曲线法)测定以上三种拟除虫菊酯类农药的残留量。
正文1 实验部分1.1 仪器高效液相色谱仪，马弗炉，剪刀，电子天平，超声波提取器，离心机，恒温水浴槽。
1.2 试剂l)有机溶剂:丙酮(农残级)，正己烷(农残级)。
2)层析剂:无水硫酸钠(A. R. )，层析中性氧化铝(A. R.),60~100目佛罗里(Florisil)硅藻土，玻璃棉。
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华南师范大学实验报告 学生姓名 学号 ： 专业：化学师范 年级、班级：09级化四 课程名称：近代有机分析方法和实验实验 时间：2011年11月9日
实验六：高效液相色谱法用于有机农药残留的分离和分析 【实验目的】 1、 应用高效液相色谱法对磺胺类抗生素的定性和定量检测 2、 学习谱图和数据的处理方法
【实验原理】 磺胺族抗生素包括磺胺嘧啶，磺胺二甲嘧啶，磺胺甲噁唑，等, 被广泛应用到水产、畜禽类养殖中。它们被添加到动物饲料中, 以促进动物的生长以及防治各种疾病, 如果不能严格控制停药期, 很容易造成在动物肉和组织中残留, 给人体健康带来危害, 因此世界各国对畜禽肉中的磺胺族残留都有严格的限量要求。GB/T 5009.116- 2003 用液相色谱法检测畜禽肉中的磺胺类药物残留量, 操作简单快速,但是该方法灵敏度比较低。
【实验仪器与试剂】 仪器：岛津液相色谱仪，SPD-20A检测器，LC-20AT泵，微量进样器，C18色谱柱 试剂：磺胺嘧啶标准溶液，磺胺吡啶标准溶液，磺胺嘧啶-磺胺吡啶混合液（1：1），乙腈（AR），0.05%甲酸溶液 样品部分物理参数： 样品 分子式 分子量 熔点 外观 溶解性
磺胺嘧啶 C10H10N4O2S 250.28 252-258℃ 白色或类白色结晶或粉末，无臭无味，遇光色渐变暗 溶于稀盐酸，微溶于乙醇或丙酮，几乎不溶于水，易溶于氢氧化碱溶液或氨溶液 磺胺吡啶 C11H11N3O2S 249.49 191-193℃ 黄棕至白色粉末 微溶于水
【实验步骤】 1、准备 1.1准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气20min。（这里用的是流动相是乙腈(B)和0.05%甲酸溶液(A)，分别用有机相系和水相系的0.45µm滤膜过滤，超声脱气20min。） 1.2根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）和定量环。 1.3配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用合适的0.45μm滤膜过滤。（即分别称取0.10g的磺胺嘧啶、磺胺吡啶用甲醇定容至100.0 mL，用0.45µm滤膜过滤（先在一次性注射器加上0.45µm滤膜，然后把活塞杆拉出来，把要过滤的溶液倒进去再把杆精品文档 。 2欢迎下载
推进滤出溶液。）得到磺胺嘧啶和磺胺吡啶的标准液分别为1 mg/mL（1000ppm）。分别吸取磺胺嘧啶和磺胺吡啶标准溶液各5mL，置于10 mL容量瓶中磺胺吡啶和磺胺嘧啶-磺胺吡啶混合0.5 mg/mL（500ppm）。 1.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。 2、开机 接通电源，依次开启不间断电源、B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后，打开打印机、电脑显示器、主机，最后打开色谱工作站（即电脑桌面上的CS-Light Real Time Analysis）。 3、参数设定 3.1波长设定：在检测器显示初始屏幕时，按[func]键接着按[Enter]键，用数字键输入所需波长值281nm，按[Enter]键确认。按[CE]键退出到初始屏幕。 , w4 3.2流速设定：在A泵显示初始屏幕时，按[func]键，用数字键输入所需的流速（柱在线时流速一般不超过1.0 mL/min），按[Enter]键确认。按[CE]键退出。 3.3流动相比例设定：在A泵显示初始屏幕时，按[conc]键，用数字键输入流动相B乙腈的浓度百分数(17%)，按[Enter]键确认。按[CE]键退出。 4、更换流动相并排气泡 4.1将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中； 4.2逆时针转动A/B泵的排液阀180°，打开排液阀； 4.3按A/B泵的[purge]键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止； 4.4将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。 4.5如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。 4.6如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按[pump]键，冲洗3min后再按[pump]键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。 5、平衡系统 5.1按《N2000色谱数据工作站操作规程》打开"在线色谱工作站"软件，输入实验信息并设定各项方法参数后，按下"数据收集"页的 [查看基线] 按钮。 5.2等度洗脱方式 ; g5 J; Q 5.2.1按A泵的[pump]键，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。按A泵的[pump]键，A、B泵将同时启动，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积的流动相。 5.2.2检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。 5.2.3观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按4.6操作。 5.2.4观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min，噪声为<0.001mV时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。 6、进样 6.1进样前在CS-Light Real Time Analysis中:(1)点击“单次分析”，接着点击“样品记录”，在样品记录名称中输入所要检测得样品名称，然后点击“数据文件”选择该样品储存在哪里，最后在“数据储存的文件夹”后面输入该样品名称，点击确定。(2)在信号采集菜单中设定停止时间和延迟时间。 6.2进样前按检测器[zero]键调零，按软件中 [零点校正] 按钮校正基线零点，再按一下 [查看基线] 按钮使其弹起。 精品文档 。 3欢迎下载
6.3用试样溶液清洗注射器，并排除气泡后抽取20 L。 7、数据处理 7.1在桌面双击“CS-Light Postrum Analysis”，点击确定按钮后，在“文件夹目录中”选中该样品记录双击鼠标，在谱图上单击鼠标右键的“显示设置”，在“显示设置”中选择“展开色谱”的“时间”“0”到“20”后点击确定 7.2用鼠标点击“编辑”选择“积分”中的“最小峰面积/高”输入“最小峰面积值”，然后又点击“定量”在“定量方法”中选择“面积归一法”，然后点击查看。 7.3复制谱图到Word文档，在谱图中点击鼠标右键选择“复制”；复制数据，单击鼠标左键全选，然后鼠标右键“复制表格到剪贴板（b）”。 8、关闭仪器 分析完毕后，关闭色谱工作站，再自上而下关闭仪器。
【数据记录与分析讨论】 磺胺嘧啶谱图
0.05.010.015.020.0min
0.01.02.03.04.05.06.07.08.0μV(x100,000)050100150200250300350400℃ 峰号 保留时间 面积 面积% 峰高 1 9.039 12591994.5 100.0000 501938.0 精品文档
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混合样谱图 0.05.010.015.020.0min
0.01.02.03.04.05.06.07.08.0μV(x100,000)050100150200250300350400℃ 峰号 保留时间 面积 面积% 峰高 1 8.963 5190936.8 45.3724 251662.7 2 10.087 6249787.5 54.6276 300993.2
实验结果分析讨论： 本实验所检测样品为已知样品磺胺嘧啶、磺胺吡啶标准溶液及磺胺嘧啶-磺胺吡啶混合液，实验中采用进一单一标准样品，得到其谱图后再对混合样品液进行检测，根据保留时间做定性分析，从而确定另一待测物的谱峰。在定性分析后，由于本实验中待测物只有两种，且样品液能保证待测物均能出峰，故定量分析采用简便，准确，操作条件对结果影响较小面积归一化法（此方法在实验四中曾被运用）。 定性分析：查阅资料可得，磺胺嘧啶及磺胺吡啶两者的结构如下：
磺胺嘧啶 磺胺吡啶 实验中，流动相A为0.05%的甲酸溶液，流动相B为乙腈，两者之比是：83:17。实验开始时首先进样的样品为磺胺嘧啶单样，因此得到磺胺嘧啶单样的谱图，其保留时间为9.039min；第二次进样的是混合样品，所得谱图出项两个谱峰，出峰时间分别为8.693min和10.087min。根据第一次进样所得的磺胺嘧啶的保留时间可判断，在混合样品谱图出现的两个谱峰中，第一个应为磺胺嘧啶的峰，第二个为磺胺吡啶的色谱峰，即磺胺吡啶保留时间为10.087min。从实验结果中可以看到，磺胺嘧啶在前后两个谱图中所得到的保留时间并不是完精品文档 。 5欢迎下载
全一致，此现象很可能是因实验人员操作过程中出现少许偏差。而从第二个谱图中我们看到，两待测物所得到的色谱峰相当接近，保留时间差仅为一分钟左右，若当某待测物在单样谱图和混合样谱图所得的保留时间出现了较大偏差（就如上述提到的磺胺嘧啶出现的小小偏差），而两种待测物之间保留时间又相差很小的情况下，该定性分析就会面临做出准确判断的局面。所以，应对该实验条件进行少许改进，通过改变流动相比例等实现使得待测物达到很好的分离效果。 定量分析：（面积归一化法）由定性分析实验结果我们知道，在混合样品溶液中磺胺嘧啶与磺胺吡啶所占比例为别为45%:55%，即两者浓度比为9：11。
【思考题】 1、高效液相色谱法用于有机农药残留分析中的应用的发展前景如何？ 答：高效液相色谱用于农药及其残留物的分析有其独特优势,如何快速、准确地进行农药残留特别是多种残留成分的分析测定,是农药残留分析亟待解决的问题。随着科学技术的发展,分析手段与方法得到不断改进和提高,高效液相色谱技术也在不断发展,例如,引入3μm 填料的色谱柱及能分离几何异构体和光学异构体的手性柱。在检测方法方面有液相色谱- 质谱联用技术、光电极组合检测器以及液相色谱法与原子吸收光谱的联用。后者可以测定以砷、铅及汞等有机金属化合物形式存在的污染物。含有毒金属的不同结构有机化合物具有明显不同的毒性,单一测定无机元素总含量不能真实地反映其毒性程度。同时还有报道用直接光谱分析,毛细管区带电泳来检测农药的。随着计算机的普及,实验室自动化检测以及在线快速检测技术也得到了较快的发展。
【实验结论】 高效液相色谱法能快速、准确地进行农药残留成分的分析测定，在本实验中对磺胺嘧啶及磺胺吡啶进行了定性定量测定分析，得到较好的结果。
【参考文献】 [1]朱正斌.高效液相色谱法在农药残留分析中的应用.化学工业与工程技术，Dec.,2004:Vol.25 No.6