蟾蜍坐骨神经干
实验一 蟾蜍坐骨神经
实验一蟾蜍坐骨神经--腓肠肌标本的制备〔目的要求〕1、学习蛙类动物双毁髓的实验方法。
2、学习并掌握坐骨神经--腓肠肌标本的制备。
〔动物与器材〕蟾蜍、常用手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃解剖针、咬骨钳）、蜡盘、蛙板、玻璃板、蛙钉、铜锌弓、培养皿、滴管、纱布、粗棉线、任氏液。
〔方法与步骤〕1、双毁髓方法：左手握蟾蜍，让蟾蜍趴在左手掌内，用食指按压其头部前端，拇指压住躯干背部，使头前俯；右手持毁髓针，由两眼之间沿中线向后划触及两耳后腺间的凹陷处即枕骨大孔的位置。
将毁髓针垂直刺入，即进入枕骨大孔。
然后将针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，捣毁脑组织。
此时的动物为单毁髓动物。
再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，捣毁脊髓。
此时动物四肢瘫软，为双毁髓动物。
如动物仍表现为四肢肌肉紧张或活动自如，必须重新捣毁。
2、剥制后肢标本：将双毁髓的蟾蜍背面向上放入蜡盘内。
左手捏住背部的脊柱，右手持手术剪横向剪断脊柱。
左手持手术镊提起断开的脊柱后端，右手用手术剪沿脊柱两侧剪开体壁，再剪断下腹壁肌肉，自基部剪断内脏。
然后用蘸有任氏液的左手捏住断开的脊柱后端，右手向后方撕剥皮肤。
将剥干净的后肢放入盛有任氏液的培养皿中。
清洗手术器械。
3、分离两后肢：将去皮的后肢腹面向上放于玻璃板上，左手固定，右手持手术剪剪开耻骨联合。
将分开的后肢，一只继续剥制标本，另一只放入任氏液中备用。
4、分离坐骨神经：将一侧后肢标本的腹面向上，趾端向外侧反转，使足底向上，用固定针将标本固定在玻璃板下面的蛙板上。
用玻璃解剖针沿脊神经向后分离坐骨神经。
股部在股二头肌和半膜肌之间的裂缝找出坐骨神经。
坐骨神经基部有梨状肌盖住，用玻璃解剖针轻轻挑起此肌肉，便可看清下面穿行的坐骨神经。
剪断梨状肌，完全暴露坐骨神经与其相连的脊神经。
用玻璃解剖针轻轻挑起神经，自前向后剪去支配腓肠肌之外的分支，将坐骨神经分离至腘窝处。
用剪刀剪去脊柱骨及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。
天麻素注射液对蟾蜍离体坐骨神经干动作电位的影响
Ａ ｓ ａｔ ｂ ｔ ｃ ：Ｏｂ ｅｔ ｅ Ｗｉ ｌ ｔ ｐ ｙｉ ｏ ｉ ｌ ｅｈ ｄ ， ｎ ｅｔ ａｉ ｅｅ ｅ ｔ ｆ ａ ｔ ｄｎｉ ｅｔ ｎ ｏ ｈ ｃｉ ｏ ｎｉ ｆ ｒ ｊ ｃ ｖ ： ｔ ｅ ｃ ｏ ｈ ｓ ｌｇ ａ ｍ ｔｏ ｓ ｉｖ ｓ ｇ ｔ ｇｔ ｆ ｃ ｏ ｓ ｏ ｉ ｎ ｃｉ ｎｔｅａ ｔ ｎ ｐ ｔ ｔ ｌ ｉ ｈ ｅｒ ｏ ｃ ｉ ｎ ｈ ｆ ｇ ｒ ｊ ｏ ｏ ｅ ａｏ
赵光宇 易
１ ．江西赣南 医学院基础医学院 ２ ０ ０ ７级 ，江西 赣州
恬 黄秀琼 秦ຫໍສະໝຸດ 燕 赣州 ３ １０ ； ４０ ０
大理 ６ １０ ７０ ０
３ １０ ；２ ４ ０ ０ ．江西赣南医学院第一临床医学 院 ２ ０ ０７级 ，江西
３ 大 理 学 院 基 础 医 学 院 生 理 学 与病 理 生 理 学 教 研 室 ，云 南 ．
一
浓度 下，随着处理时间的延长 ，动作 电位 的幅度不断增大 ，两者问呈 明显 的正相 关关系 ；②天麻 素注射液 依次处理 １ ０、２ 、３ ｍｉｓ ， ０ ０ ｎ后
Ａ Ｐ的幅度 、神经干的传导速度均高于对照组 ，差异 显著 ，具有统 计学意 义 （ Ｐ＜００ ，而动作 电位 的持续 时间 与对照组 比较差 异较小 ， ．５） 无统计学意义 （ ０ ０ ） Ｐ＞ ．５ 。结论 ：天麻素对坐骨神经 于具有保护及兴奋作用。
Ｚ Ａ ｕｎ ｕ Ｙ ｉ Ｕ Ｇ Ｘｕｑｏｇ ，ＱＮ Ｙ ｎ Ｈ Ｏ Ｇ ａｇｙ ， Ｉ ａ ，Ｈ ＡＮ ｉ ｉｎ Ｉ ａ Ｔ ｎ
（ ． Ｇ ａ ｅ２ ０ ｆ ｌ ｉ Ｍｅ ｉ ｎ ， ｃ ｏ ｌ ｆ ａ ｉ Ｍｅ ｉｉ ，Ｇ ｎ ｎ ｎ ｍ ｄｃ ｌ ｎｖｒｉ ，Ｇ ｎ ｎ ｎ ３ １ ０ ； １ ｒｄ ０ ７ ｏ ｉ ｃ ｄｃ ｅ Ｓ ｈ ｏ ｓ ｄｃｎ ｃｎ ｉ ｏＢ ｃ ｅ ａ ａ ｅ ｉ ｉ ｓｙ ａＵ ｅ ｔ ａ ａ ４ ０ ０
生理实验：实验三 蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本制备及骨骼肌收缩性质观察
实验材料
1、实验动物（laboratory animal) • 蟾蜍（中华蟾蜍指名亚种，Zhuoshan Toad）
2、药品(drug) • 任氏液
• 任氏液由无机盐和蒸馏水配置而成，每 升溶液含NaCl 6.5g、KCl 0.14g、CaCl2 0.12g,、NaHCO3 0.20g、NaH2PO4 0.01g。 任氏液的理化特性与蛙的组织液近似。 可用于蛙的组织、器官润湿和营养。
动作电位以局部电流的形式传导
实验原理
-动作电位传导速度的测定
刺激器
输入通道
+－
R1- Rr1+ R2- R2+
S
Δt
传导速度测定 υ= SAC
Δt
实验步骤
1、制备坐骨神经干
1
• 蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上，剪去
尾椎；
• 标本腹面向上，用玻璃分针分离脊柱
两侧神经丛，用线在近脊柱处结扎，
剪断神经；
• 将神经干从腹面移向背面。标本背面
刺激神经使神经细胞产生兴奋兴奋延神经纤维传到通过神经肌接头的化学传递使肌肉终板膜上产生终板电位终板电位可引起肌肉产生兴奋即动作电位传遍整个肌纤维再通过兴奋收缩偶联使肌纤维中粗细肌丝产生相对滑动宏观上表现为肌肉收缩
实验三 蟾蜍坐骨神经-腓 肠肌标本制备及骨骼肌收
缩性质观察
实验目的
• 掌握制备具有正常收缩功能的蛙类坐骨神经腓肠 肌标本的基本操作技术。掌握蛙类手术器械的使 用方法，制备完好的坐骨神经-腓肠肌标本。
向上固定，从大腿至跟腱分离坐骨神 经。坐骨神经标本置任氏液中备用。
2
3
实验步骤
2、仪器连接和参数
• 神经干标本盒两对引导电极分别接微机生物信号处理系统1、 2通道。 开机，选择实验-肌肉神经-神经干兴奋传导速度测 定。仪器参数：1、2通道时间常数0.02s、滤波频率3KHz、 灵敏度5mV，采样频率：100KHz，扫描速度：0.2ms/div。 单刺激激方式，刺激幅度1.0V，刺激波宽0.1ms，延迟1ms， 同步触发。
生理实验报告!
生理实验报告!蟾蜍坐骨神经干动作电位的引导、传导速度和兴奋不应期的测定【实验目的】1. 观察蟾蜍坐骨神经动作电位的基本波形，加深理解兴奋传导的概念，理解可兴奋性在兴奋过程中的变化过程;2. 进一步掌握坐骨神经—腓神经标本的制备方法与引导动作电位的方法;3. 进一步熟悉实验室里仪器设备的操作。
【实验原理】1. 神经干动作电位是神经兴奋的客观标志。
当神经受到有效刺激时，处于兴奋部位的膜外电位负于静息部位，当动作电位通过后，兴奋处的膜外电位又恢复到静息时的水平。
神经干兴奋过程所发生的这种膜电位变化称神经复合动作单位。
如果将两个引导电极置于神经干表面时(双极引导)，动作电位将先后通过两个引导电极，可记录到两个相反的电位偏转波形，称为双向动作电位;2. 神经纤维兴奋的标志是产生一个可传播的动作电位。
测定神经干上的神经冲动的传导速度，可以了解神经的兴奋状态。
在示波器上测量动作电位传导一定距离所耗费的时间，便可计算出兴奋的传导速度;3. 神经与肌肉等可兴奋组织的兴奋性在一次兴奋过程中可发生一系列变化，及绝对不应期、相对不应期、超常期和低常期，组织的兴奋性才可恢复。
为了测定神经干在兴奋过程中的兴奋性变化，可用双刺激法检查刺激引起的兴奋阙值和电位变化，即可观察到神经组织兴奋性的变化过程。
【实验对象】蟾蜍【实验器材】蛙类手术器械，BL-410生物信号记录分析系统，神经屏蔽盒，任氏液(林格液)等。
【实验步骤】制备蟾蜍坐骨神经-腓神经标本，并放入神经屏蔽盒内;(一)双相动作电位1.打开BL-410?实验项目?神经肌肉实验?神经干动作电位引导?记录出双相动作电位;2.由小到大改变刺激强度，记录阈强度和最大刺激强度;3.观察双相动作电位波形，测量最适刺激强度时的潜伏期、时程和波幅; (二)引导出最大刺激强度时的动作电位波形1.BL-410仪器操作:实验项目?神经肌肉实验?神经干动作电位传导速度测定?输入两电极之间的距离分别用潜伏期法和潜峰法测量其传导速度;2.潜伏期法:测量第一个通道动作电位潜伏期的时间(t)，输入刺激电极到第一个引导电极间的距离(S)，屏幕右上角显示传导速度和根据速度的公式计算传导速度:v=S/t;3.潜峰法:测量两个通道电位的动作电位的波峰间的时间差，为(t2-t1),测量并输入两对引导电极间的距离为(S2-S1),屏幕右上角显示传导速度和用公式计算传导速度:v=(S2-S1)/(t2-t1)。
不同因素对蟾蜍坐骨神经干动作电位的影响
（ 键 词 ］ 蟾 蜍 ； 作 电 位 ； 骨 神 经 关 动 坐 ［ 章 编 号 ］ １ ７ — ０ ７ ２ １ ） ４ ０ ４ — ４ （ 图 分 类 号 ］ Ｒ３ ８ （ 献 标 识 ｒ ３ Ａ 文 ６ ２２ ２ （ Ｏ ０ ０ — １３０ 中 ３ 文 ａ ￣ ＿
随着 人类 社会 的发展 ， 人所 接触 的化 学药 品越来 越 多 ， 些 是有 利 于人 的身体 健 康 ， 有些 则 是威 胁 着 有 而
第 ９ 卷 第 ４期 太 原 师 范 学 院 学 报 （ 自然科 学版 ） ２１ ０ ０年 １ ２月 Ｊ ＵＲＮＡ Ｆ Ｔ ＹＵＡＮ ＮＯ Ｏ Ｌ Ｏ ＡＩ ＲＭＡＬ ＵＮＩ Ｒ Ｉ （ ｔ ｒｌ ｃ ｎ ｅＥ ｉ ｏ ） ＶＥ Ｓ ＴＹ Ｎａｕ ａ Ｓ ｉ ｃ ｄｔ ｎ ｅ ｉ
人类 的健康 ． 蟾蜍 神 经干纤 维是 多条单 纤 维的复 合干 ， 比较 容 易识 别 及剥 制 ， 同时神 经 干 的 动作 电位 特 点 也 符合 “ 全或 无” 象Ⅲ ， 现 我们应 用 电生理 实验方 法观 察 了不 同物 质对 蟾蜍 离 体 坐 骨神 经 干 的一 些 电生 理 特性 （ 包括 动作 电位 幅度 、 导速 度 ） 传 的影 响 ， 旨在 为进 一步 了解各 物质 对神 经系 统 的影 响提 供一定 的实验依 据．
１ 材 料 与 方 法
１ １ 实 验 动 物 ．
健康 蟾蜍 ８ Ｏ只 ， 雌雄 不拘 ， 体重 约 ５ ， 自山西 医科 大 学 实验 动 物 中心提 供 ． 常规 方 法制 备蟾 蜍 坐 ０ｇ 由 按
骨 神经标 本 ． ］ １ ２ 实验 材料 ． 葡萄糖 溶液 ： 天津 药业集 团新 郑股 份 有 限公 司 ， 号 ０ ０ ０ ５ 甘 露 醇溶 液 ： 西 裕 源药 业 有 限公 司 ， 批 ９１４ ； 广 批 号 ：９２ １ ； ０ ０ ０ ３ 山梨 醇 ： 天津市 光 复精 细 化工研 究所 ， 号 ：０ ８ ９ ３ 神经 标 本屏 蔽 盒 ， Ｌ 批 ２０ ００ 。 Ｂ 一４ ０ ２ Ｅ＋生 物信 号
蛙坐骨神经
【思考题】
1．解释引导双相或单相动作电位原理 2．坐骨神经干动作电位的产生是否符合动 作电位的“全或无”的规律，为什么？
【实验步骤】
一、制备坐骨神经干标本 二、连接标本与仪器装置 三、神经干动作电位的测定 四、神经干兴奋传导速度的测定 五、神经干不应期的测定
一、制备坐骨神经干标本
(一)制备坐骨神经——小腿标本 ①破坏脑和脊髓；②剪除躯干上部及内脏；③剥皮； ④分离两腿；⑤游离坐骨神经。
破坏脑和脊髓
游离坐骨神经
（二）制备坐骨神经干标本
三、神经干动作电位的测定
1．打开BL－420生物机能实验系统，在“实验项目” 菜单中选择的“肌肉神经实验”菜单项，在“肌肉神经实 验”子菜单中选择“神经干动作电位的引导”实验模块。 根据信号窗口中显示的动作电位波形，再适当调节实验参 数以获得最佳的实验效果。 2．观察双相动作电位 （ 1 ）使仪器处于触发采样状态，然后按上述条件给予 一次外来阈上刺激。 （2）仔细观察神经干动作电位的双相动作电位波形。 （ 3 ）改变刺激强度，观察刺激强度与动作电位幅度的 关系。找出引起最大动作电位幅度的最小刺激强度（最大 刺激强度），即能够使神经干中全部纤维兴奋的最小有效 刺激。 3．观察单相动作电位 用镊子将两个记录电极之间的 神经夹伤，可观察到单相动作电位。
剥离蛙或蟾蜍一侧后肢的坐骨神经。坐骨神经下行至 腘窝除分为两支：内侧为胫神经，走行表浅；外侧为腓神 经。沿胫、腓神经走向分离至踝部，尽量将神经干标本剥 离长一些，要求上自脊神经发出部位，下沿腓神经与胫神 经一直分离到踝关节附近剪断侧支。尽量将神经干周围的 组织剔除干净，结扎坐骨神经干的脊柱端及胫、腓神经的 足端，游离神经干。然后将坐骨神经干标本置于盛有任氏 液的培养皿中备用。
蟾蜍老母鸡治疗坐骨神经痛验方偏方单方
蟾蜍老母鸡治疗坐骨神经痛验方偏方单方
蟾蜍老母鸡治疗坐骨神经痛验方偏方单方，医者父母心，毕生经验，诚心奉献，请关注作者、赞赏、转藏等（体质不同、仅供参考）。
治坐骨神经痛验方：组成：21只蟾蜍（俗叫癞蛤蟆）,3只老母鸡，4.5斤红高粱。
制作方法：以上原料各三等分，分三次制作，每次为一料。
其方法是：先把7只蟾蜍放人锅内，加水两碗熬。
当水熬到只剩半碗时，把蟾蜍捞出，用熬的汤水拌1.5斤红高粱喂2只母鸡。
每天早、中、晚各喂一次，五天喂完。
当鸡把高粱吃完后杀掉。
用大锅炖熟，早、中、晚吃了次，每次一碗，约3~5天将汤肉吃完。
当第一只鸡吃完后，依次吃第二只鸡、第三只鸡（喂法、吃法与第一只相同）。
此方简单易办，有坐骨神经痛病者，不妨一试。
说明：煮后的蟾蜍不能食用。
蟾蜍实验报告
蟾蜍的解剖与观察生命科学院张茜 111070094一、实验目的意义两栖动物绝大多数都是对人类有益的，例如消灭害虫、作药用资源等等。
蟾蜍作为医学、生理学重要的实验动物则使用更为广泛。
通过观察两栖类外形、皮肤、消化、呼吸、泄殖和循环等系统，了解两栖动物z 在生理学、药理学、毒理学等实验中常用组的准确取材。
重点：了解在摄食方式、营养、呼吸、排泄、生殖及血液循环器官系统的形态特征。
难点：理解两栖动物了解两栖动物由水生发展到陆地生活的各个器官结构与功能的适应性。
二、实验对象的获得与麻醉获得途径主要是由野外捕获或从特种养殖场购买(如牛蛙养殖场)。
抓取方法: 抓住其后腿，有经验者也可抓住其身体或借助一块布来抓，因蛙体表粘滑且蟾蜍体表有毒液分泌。
麻醉：两栖类皮肤有渗透性，放入含麻醉剂的溶液中就很容易麻醉。
0.1％的甲磺酸—三卡因(ms—222)水溶液在几分钟内即可麻醉动物，所需时间因身体大小而异。
也可用呼吸性麻醉剂，将蛙或蟾蜍放进玻璃罩或标本瓶内，同时放人浸有乙醚的棉花，几分钟后，即可发生作用。
三、实验操作与观察(一)外形观察将活蛙(或蟾蜍)静伏于解剖盘内，观察蛙(蟾蜍)的身体，可区分为头部、躯干和四肢三部分。
1．头部头：呈扁等腰三角形。
眼睛：在头两侧，稍向背部突出，有上下眼睑。
瞬膜：在下眼睑的内侧，为一半透明的薄膜，该膜向上延展可覆盖眼球。
外鼻孔：两眼的前方，近于头的前端的一对小孔内鼻孔：拉开下颌，在口腔顶壁的前端有一小孔鼻膜：在外鼻孔外缘的一对瓣状膜口：头端腹面有一很大的横裂鼓膜：眼后有一明显的褐色而稍下凹的圆形膜，是中耳腔与外界接触的地方。
蟾蜍的鼓膜较小，不明显耳后腺：蟾蜍鼓膜后上方有一对椭圆形的隆起，是由若干毒腺集合而成的，故又叫毒腺。
在受到压挤时，可分泌出一种乳白色的粘稠液，经加工之后即为中药“蟾酥”舌：在下颌前端内侧着生一柔软粘滑的舌，折向口腔内部，用镊子轻轻将舌拉出展平，可以看到蟾蜍的舌尖钝圆状。
神经干动作电位传导速度的测定
神经干动作电位传导速度的测定实验对象：蟾蜍一实验目的掌握坐骨神经标本的制备方法。
掌握引导神经干复合动作电位和测定其传导速度的基本原理。
二相关知识（一）兴奋及兴奋性的概念（二）动作电位的潜伏期、动作电位时程和幅值1、动作电位：各种可兴奋细胞在受到刺激而兴奋时，可以在细胞膜静息电位的基础上发生一次短暂的，可向周围扩布的电位波动。
这种电位波动称为动作电位。
（三）、动作电位的传导局部电流的形式1、细胞外记录2、神经干的动作电位神经干是由许多粗细不等的有髓和无髓神经纤维组成的混合神经，故神经干动作电位与单根神经纤维的动作电位不同，它是由许多神经纤维的动作电位合成的一种复合电位。
三实验原理（一）、单根神经纤维动作电位的引导及其传导1、记录出了一个先升后降的双相动作电位的原理当神经纤维未受刺激时，膜外与电极所接触的两点之间没有电位差，所以两电极之间也无电位差存在，扫描线为一水平基线。
在神经干左端给予电刺激后，则产生一个向右传导的冲动（负电位），当冲动传到1电极（负电极）下方时，此处电位较2处为低，产生了电位差，扫描线向上偏转，记录出一个向上的波形（在电生理实验中，为了便于观察，习惯上规定负波向上）。
随后，冲动继续向右侧传导，离开1电极传向2电极处。
当它到达2电极（正电极）下方时，因1电极处神经差不多已恢复到原来的状态，于是2电极处又较1电极处为负，引起扫描线向下偏转，记录出一个向下的波形。
这样，在神经冲动向右传导的过程中，就记录出了一个先升后降的双相动作电位。
负电极在前时，它首先记录到神经干表面由正变负的电位变化，经历了由正到负再到正的过程，因此记录出动作电位的上相。
当在后的正电极记录到这种同样的电位变化过程时，显示相反的情况，记录出动作电位的下相。
如果互换正、负电极的位置，则记录到先降后升的双相动作电位。
C. A点神经纤维多于B点（次要原因）。
（二）、神经干动作电位的引导及其传导四实验步骤（一）、制备蛙类坐骨神经-胫腓神经标本通过观看录象让学生学习制作方法（二）、连接实验装置注意电极的安装，正负不要接反。
生理实验报告神经干复合动作电位
人体解剖及动物生理学实验报告实验名称神经干复合动作电位姓名学号系别组别同组姓名实验室温度20℃实验日期2015年4月24日一、实验题目蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（CAP）A蟾蜍坐骨神经干CAP阈值和最大幅度的确定B蟾蜍坐骨神经干CAP传导速度的确定C蟾蜍坐骨神经干CAP不应期的确定二、实验目的确定蟾蜍坐骨神经干复合动作电位（CAP）的（1）临界值和最大值（2）传导速度（3）不应期（相对不应期、绝对不应期）三、实验原理神经系统对维持机体稳态起着重要作用，动作电位（AP）是神经系统进行通信联系所采用的信号，多个神经元的轴突集结成束形成神经，APs沿感觉神经有外周传向中枢或沿运动神经由中枢传向外周。
坐骨神经干由上百根感觉神经和运动神经组成，分别联系腿部的感受器和效应器（骨骼肌）。
如果电刺激一根离体的坐骨神经干，通过细胞外引导方式，就能记录到神经干复合动作电位（CAP）。
一个CAP是一系列具有不同兴奋性的神经纤维产生的多个AP的总和。
刺激强度越爱，兴奋的神经纤维数目就越多，CAP 的幅度也就越大。
与胞内引导得到的单细胞AP相比，CAP是双相电位，逐级递增（非全或无），并且幅度较小。
阈电位是指一个刚刚能观测到的CAP，所对应的刺激为阈刺激。
在一定范围内增加刺激强度，CAP幅度相应增大。
最大CAP所对应的最小刺激电位即最大刺激。
动作电位可以沿神经以一定的速度不衰减地传导，传导速度的快慢基于多种因素，这些因素决定了生物体对其坏境的适应性。
它们包括神经的直径、有无髓鞘、温度等等。
神经在一次兴奋过程中，其兴奋性将发生一个周期性的变化，最终恢复正常。
兴奋的周期性变化，依次包括绝对不应期、相对不应期等等。
绝对不应期内，无论多么强大的刺激都不能引起神经再一次兴奋；相对不应期内，神经兴奋性较低，较大的刺激能够引起兴奋。
绝对不应期决定了神经发放冲动（动作电位）的最高频率，保证了动作电位不能叠加（区别于局部电位），以及单向传导（只能有受刺激部位向远端传导，不能返回）的特性。