植物病毒载体介导的sMMO-C在蚕豆植物中的表达

合集下载

蚕豆萎蔫病毒2号安徽分离物全基因组序列测定与分析

蚕豆萎蔫病毒2号安徽分离物全基因组序列测定与分析严丹侃;郑红英;张海珊;沈艳;顾江涛;章东方;燕飞【摘要】利用酶联免疫和RT-PCR技术对采自安徽地区的蚕豆病株进行检测,确定其病原为蚕豆萎蔫病毒2号Broad bean wilt virus 2(BBWV2).为明确BBWV2安徽分离物(BBWV2-AH)的分类地位,克隆了该分离物的全基因组序列,分析了其基因组特征.结果表明,BBWV2-AH RNA1全长为5 944 bp(GenBank登录号:KY606992),含有1个ORF;BBWV2-AH RNA2全长3 587 bp (GenBank登录号:KY606993),含有1个ORF.全序列核苷酸和氨基酸相似性分析显示,BBWV2-AH RNA1与BBWV2其他分离物的核苷酸、氨基酸相似性分别为78.4％～96％和87.1％～99％;BBWV2-AH RNA2与BBWV2其他分离物的核苷酸、氨基酸相似性分别为76.8％～95.5％和88.2％～98.3％.全基因组核苷酸序列系统发育分析显示,BBWV2-AH RNA1与中国的BBWV2-Hu-nan RNA1的亲缘关系最近,而BBWV2-AH RNA2与韩国的多个分离物聚集在一起,再与中国的分离物BBWV2-B935形成一个分支.%BBWV2 was detected from broad bean plants in Anhui Province by DAS-ELISA and RT-PCR.To further characterize the BBWV2 Anhui isolate (BBWV2-AH),complete nucleotide sequence of BBWV2-AH was determined.Sequence analysis suggested that BBWV2-AH RNA1 was comprised of 5 944 nucleotides,encoding one ORF (GenBank accession no.KY606992);BBWV2-AH RNA2 was comprised of 3 587 nucleotides,also encoding one ORF (GenBank accession no.KY606993).The comparison of nucleotide sequences suggested that RNA1 and RNA2 of BBWV2-AH shared 78.4％-96％ and 76.8％-95.5％ nucleotide sequence identity with those of other BBWV2 isolates,respectively.Furthermore,the comparison ofamino acid sequences suggested that RNA1 and RNA2 of BBWV2-AH shared 87.1％-99％ and 88.2％-98.3％ amino acid sequence identity with those of other BBWV2 isolates,respectively.Phylogenetic analysis based on nucleotide sequences showed that RNA1 of BBWV2-AH isolate was most closely related to BBWV2-Hunan isolate,while RNA2 of BBWV2-AH formed an independent branch with several Korean isolates,and was then closely related to BBWV2-B935 from China.【期刊名称】《植物保护》【年(卷),期】2018(044)001【总页数】7页(P67-73)【关键词】蚕豆萎蔫病毒2号;安徽分离物;基因组;序列分析【作者】严丹侃;郑红英;张海珊;沈艳;顾江涛;章东方;燕飞【作者单位】安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所,合肥230031;浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,杭州310021;安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所,合肥230031;安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所,合肥230031;安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所,合肥230031;安徽省农业科学院植物保护与农产品质量安全研究所,合肥230031;浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,杭州310021【正文语种】中文【中图分类】S435.23蚕豆是我国重要的经济作物,据FAO统计,我国2014年蚕豆收获面积为92.5万hm2,总产量为159.5万t,是世界蚕豆生产第一大国,产量占世界蚕豆总产量的36.7%[1]。

VIGS实验方案

VIGS实验方案VIGS（病毒诱导基因沉默）是一种基因沉默的技术，通过病毒载体介导的RNA干扰机制，靶向降低目标基因的表达。

VIGS技术广泛应用于植物研究领域，可以帮助我们理解基因与表型之间的关系。

下面是一个VIGS实验方案的示例，以帮助研究者深入了解该技术的应用。

实验目标：通过VIGS技术沉默目标基因，研究其在植物发育和抗逆过程中的功能。

实验步骤：1.构建VIGS载体：选择一个合适的病毒载体（如Tobacco Rattle Virus，TRV），并将目标基因的片段克隆到载体中，构建TRV:目标基因短暂表达载体。

2.病毒感染：将构建好的TRV:目标基因载体与辅助载体（如pTRV1）转化至Agrobacterium tumefaciens，并经过过夜培养。

3.生成病毒颗粒：分别用TRV:目标基因载体感染葡萄苗或拟南芥等模式植物的幼苗，通过渗透法或注射法将Agrobacterium harboring TRV:目标基因载体的细菌转化至植物体内。

然后将植物继续养护，直至观察到病毒症状。

4.分析基因沉默效率：在病毒感染后的适当时间点（通常是10-14天），收集叶片或其他组织样本，利用实时定量PCR或Northern blotting等方法，分析目标基因的表达水平。

与未感染的植物进行对照实验，以评估基因沉默的效率。

5.表型分析：观察病毒感染植株的表型变化，如外观、生长速度、营养状况等。

比较感染植株与对照植株的差异，以推断目标基因在发育和抗逆等生理过程中的功能。

6.RNA测序分析：收集沉默目标基因的植株样本，提取总RNA并进行测序分析。

通过与对照样本比较，鉴定沉默目标基因可能参与的信号通路和生物过程。

7.补充实验证实：根据RNA测序结果，选择一些重要的候选基因进行进一步验证实验，如RT-PCR、Western blotting以及表型复原分析等。

8.数据分析和结果呈现：对实验数据进行统计分析，使用图表、图片和表格等形式呈现实验结果。

第5章表达载体

西南大学生物技术专业基因工程
19
西南大学生物技术专业基因工程
20
第三节整合载体
整合载体 (integration vector) ：用于将某个基因或某些基因插入到宿主的染色体中去工作，按整合方式可分为定点整合和随机整合两类，按作用可分为目的基因的插入 / 敲除或随机突变体库的构建。一、基因插入/基因敲除
第五章
表达载体
第一节大肠杆菌表达载体第二节穿梭载体第三节整合载体
西南大学生物技术专业基因工程本课件是在网络资源基础上改进而成，在此对有关人士特致感谢！
1
第一节大肠杆菌表达载体
一、大肠杆菌表达载体的结构
原核表达载体：适用于在原核细胞中表达外源基因的载体。均是质粒载体，首先必然满足克隆载体的基本要求，然后增加表达元件。 1、表达元件(expression elements)： 1）启动子(promoter)：三类，即 lac 启动子、 trp 启动子和它们的杂合启动子 tac 或 trc ，都受IPTG诱导。 T7噬菌体启动子 λ 噬菌体的PL启动子。
西南大学生物技术专业基因工程
11
位相载体----含有3种读码框的系列载体
西南大学生物技术专业基因工稳定
• 易鉴定：融合蛋白分子量大，电泳可鉴定 • 易纯化：利用融合原核多肽的特性
西南大学生物技术专业基因工程
13
融合型载体----pGEX系列
Ptac：IPTG诱导 GST融合蛋白—直接纯化产物，切割方便：
西南大学生物技术专业基因工程 4
非融合型表达载体
主要元件：强启动子、SD、起始密码子ATG、万能终止密码子。
Foreign DNA

豌豆蚜Jun蛋白的原核表达与抗体制备

豌豆蚜Jun蛋白的原核表达与抗体制备苏慧迪王文涛刘彦马力*（山西农业大学植物保护学院，山西晋中030801）摘要对豌豆蚜Jun蛋白进行原核表达进而进行抗体制备，可为探究JNK通路对靶基因的调控机制奠定材料基础。

本研究提取豌豆蚜的总RNA，经反转录、PCR扩增后进行原核表达与抗体制备，并用ELASA法测定其抗血清效价、Western-Blot法检测抗体特异性。

结果表明：本文所构建的pET-28a-SUMO表达载体能在大肠杆菌体内成功表达出Jun蛋白，并通过免疫兔子成功制备了多克隆抗体，其抗血清效价良好、抗体特异性较好。

本研究成功表达出豌豆蚜Jun蛋白，并成功制备出抗体，可用于下步试验，对进一步探究JNK通路对靶基因的调控机制具有重要意义。

关键词豌豆蚜；Jun蛋白；原核表达；抗体制备中图分类号S433文献标识码A文章编号1007-5739（2023）22-0060-05DOI：10.3969/j.issn.1007-5739.2023.22.017开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Prokaryotic Expression and Antibody Preparation of Jun Protein from Pea AphidSU Huidi WANG Wentao LIU Yan MA Li*（College of Plant Protection,Shanxi Agricultural University,Jinzhong Shanxi030801）Abstract Prokaryotic expression of Jun protein from pea aphid,followed by antibody preparation,can lay a mate-rial foundation for exploring the regulatory mechanism of JNK pathway on target genes.In this study,total RNA of pea aphid was extracted,and then prokaryotic expression and antibody preparation were performed after reverse transcrip-tion and PCR amplification,and its antiserum potency was determined by ELASA method and antibody specificity was detected by Western-Blot method.The results showed that the pET-28a-SUMO expression vector constructed in this paper could successfully express Jun protein in Escherichia coli,and successfully prepare polyclonal antibodies by immunizing rabbits,the antibodies had good antiserum potency and good antibody specificity.In this study,we success-fully expressed the Jun protein of pea aphid and prepared antibody that can be used in the next experiments,which is important to further investigate the regulatory mechanism of JNK pathway on target genes.Keywords pea aphid;Jun protein;prokaryotic expression;antibody preparation蚜虫属于昆虫纲半翅目胸喙亚目，是半翅目昆虫中的一个大类，目前世界上已知的蚜虫有4700余种[1]。

禽呼肠孤病毒σ3基因在烟草中的表达与鉴定

禽呼肠孤病毒３基因在烟草中的表达与鉴定
王盛，谢芝勋，黄莉，谢丽基，邓显文，谢志勤，刘加波，罗思思，曾婷婷
（广西壮族自治区兽医研究所／广西畜禽疫苗新技术重点实验室，南宁５３０００１）
摘要：【目的】研究禽呼肠孤病毒ｓ１基因编码的Ｇ３基因在烟草中的表达及其表达产物的反应原性。【方法ｌ根据ＧｅｎＢａｎｋ中公布的禽呼肠孤毒株ｓ１１３３的基因序列，设计特异引物扩增ｏ３基因，构建重组植物表达载体ｐＢＩ１２１－ｏ３，热激法转化农杆菌ＥＨＡ１０５感受态细胞，筛选含有重组质粒的ｐＢＩ１２１一ｏ３的阳性工程菌株ＥＨＡ１０５。采用农杆菌介导的叶盘法转化野生型烟草，卡那霉素筛选获得抗性植株。随后通过ｏ３基因的特异弓ｌ物，ＰＣＲ方法初
ＷＡＮＧＳｈｅｎｇ，ＸＩＥＺｈｉ－ｘｕｎ，ＨＵＡＮＧＬｉ，ＸＩＥＬｉ－ｊｉ，ＤＥＮＧＸｉａｎ－ｗｅｎ，ＸＩＥＺｈｉ — ｑｉｎ，ＬＩＵＪｉａ — ｂｏ，
ＬＵＯＳｉ — ｓｉ，ＺＥＮＧＴｉｎｇ — ｔｉｎｇ
（ＧｕａｎｇｘｉＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＲｅｓｅａｒｃｈｌｎｓｔｉｔｕｔｅ／ＧｕａｎｇｘｉＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｙｒｏｆＡｎｉｍａｌＶａｃｃｉｎｅｓＲｅｓｅａｒｃｈａｎｄＮｅｗＶａｃｃｉｎｅＴｅｃｈｎｉｑｕｅ

利用病毒介导基因沉默方法研究小麦抗光氧化相关基因

作物学报ACTA AGRONOMICA SINICA 2014, 40(11): 1905 1913/ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9E-mail: xbzw@ DOI: 10.3724/SP.J.1006.2014.01905利用病毒介导基因沉默方法研究小麦抗光氧化相关基因陈坤梅1,2李宏伟2,*林凡云2陈耀锋1,*李滨2郑琪2李振声21西北农林科技大学农学院, 陕西杨凌 712100; 2中国科学院遗传与发育生物学研究所, 植物细胞与染色体工程国家重点实验室, 北京 100101摘要: 为了鉴定可能的小麦抗光氧化基因, 利用大麦条斑病毒(barley stripe mosaic virus, BSMV)介导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)系统, 对6个小偃54响应强光的基因进行了沉默表达研究。

以BSMV:GFP植株为对照, 分析了这些基因的减量表达植株在低温强光、DCMU、MV、H2O2等处理下的PSII最大光化学效率(F v/F m)和光合性能指数(P.I.)、MDA含量及整株生物量变化。

结果显示, Ta23008和Ta92165均参与小麦对低温强光、DCMU、MV和H2O2等胁迫的响应过程; Ta106078参与小麦对DCMU、MV和H2O2等胁迫的响应过程; Ta27787参与小麦对低温强光、DCMU和H2O2等胁迫的响应过程; Ta24695参与小麦对低温强光和H2O2胁迫的响应过程; 而Ta119251仅参与小麦对DCMU的响应过程。

此外, Ta23008、Ta92165、Ta106078、Ta119251四个基因被抑制表达后, 其转化株系的生物量比对照显著降低, 推测其可能参与调控小麦生物量的积累。

关键词:小麦; 大麦条斑病毒(BSMV); 病毒介导的基因沉默; 基因功能; 光氧化Functional Analysis of Photo-Oxidative Stress Responsive Genes in Wheat Using Virus-Induced Gene Silencing SystemCHEN Kun-Mei1,2, LI Hong-Wei2,*, LIN Fan-Yun2, CHEN Yao-Feng1,*, LI Bin2, ZHENG Qi2, and LI Zhen-Sheng21 College of Agronomy, Northwest A&F University, Yangling 712100, China;2 State Key Laboratory of Plant Cell and Chromosome Engineering, Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, ChinaAbstract: Functional analysis of photo-oxidative stress responsive genes in wheat (Triticum aestivum L.) may benefit wheat im-provement for high radiation use efficiency. A Chinese variety Xiaoyan 54 developed from distant hybridization between common wheat (T. aestivum, 2n=42) and tall wheatgrass (Thinopyrum ponticum, 2n=70) shows significant tolerance to high light induced photo-oxidative stress. Based on previous transcriptome analysis of Xiaoyan 54 in response to high light stress, six genes were selected in this study to assess their possible roles in photo-oxidative stress response using barley stripe mosaic virus (BSMV) mediated virus-induced gene silencing (VIGS) system in Xiaoyan 54. The BSMV induced silencing of the targeted genes together with the BSMV:GFP control plants were exposed to low temperature and high light (LTHL), N-(3,4-dichlorophenyl)-N’,N’- dimethylurea (DCMU), methylviologen (MV), and hydrogen peroxide (H2O2) stress, respectively. The maximum photochemical efficiency of photosystem II (F v/F m), the photosynthetic performance index (P.I.), malondialdehyde (MDA) content, and biomass were evaluated. The results showed that Ta23008 and Ta92165 were involved in the responses of wheat to LTHL, DCMU, MV, and H2O2, respectively. Ta106078 was responsible for wheat tolerance to DCMU, MV, and H2O2 while Ta27787 was responsiblefor LTHL, DCMU, and H2O2 stress. Ta24695 participated in the response of wheat to both LTHL and H2O2. However, Ta119251 seemed to be only responsible for the DCMU stress in wheat. Additionally, four genes, Ta23008, Ta92165, Ta106078, andTa119251, were likely to regulate biomass accumulation because the biomass was significantly reduced when they were silencedin wheat. These results provided new hints toward understanding the molecular mechanism of tolerance to photo-oxidative stressin Xiaoyan 54.Keywords:Triticum aestivum; Barley stripe mosaic virus; VIGS; Genomic function; Photo-oxidative stress本研究由国家自然科学基金项目(31371609)资助。

CUC3基因RNA干扰载体对烟草的转化及鉴定_本科毕业论文

毕业论文（设计）题目：CUC3基因RNA干扰载体对烟草的转化及鉴定诚信声明本人郑重声明：所呈交的毕业设计（论文）是我个人在导师指导下, 由我本人独立完成。

有关观点、方法、数据和文献等的引用已在文中指出,并与参考文献相对应。

据我查证，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表和撰写的研究成果，也不包含为获得其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。

我承诺，论文中的所有内容均真实、可信。

如在文中涉及到抄袭或剽窃行为，本人愿承担由此而造成的一切后果及责任。

毕业论文（设计）作者签名：签名日期：年月日摘要采用叶盘法通过已导入了构建好的表达载体的根癌农杆菌，对野生型烟草叶片进行转化。

烟草叶片在分化培养基MS + 0.1mg/L NAA + 1.0mg/L 6-BA + 50mg/L Hyg + 500mg/L Cb上4周后分化出芽；在生根培养基MS +0.2 mg/L IBA +250mg/L Cb上，1-2周后形成根；叶片β-葡萄糖甘酸酶（GUS）组织化学染色，阳性率为75%；通过PCR 检测潮霉素磷酸转移酶（HPT）基因的DNA序列，获得14个阳性株系。

在烟草转化阳性株系中获得了2种表型：叶片融合和叶片缺失。

关键词∶根癌农杆菌；GUS组织化学染色; 聚合酶链式反应( PCR)AbstractAgrobacterium with expression vector transformed the leaves of Nicotiana tabacum. Regenerated shoots were formed in 4 weeks when the leaves of N. tabacum cultured on shoot-inducing medium MS medium supplemented with 0.1mg/L NAA, 1.0mg/L 6-BA, 50mg/L Hyg and 500mg/L Cb. Shoots rooted on the root induction medium MS medium supplemented with 0.2mg/L IBA and 250mg/L Cb in 1-2 weeks. β-glucuronidase(GUS) histochemical assay indicated that the GUS positive rate was 75%. PCR analysis of gene Hygromycin phosphotransferase(HPT) gene indicated that there were 14 positive lines. There were 2 distinct phenotypes in the positive lines: leaf fusion and leaf incompleteness.Keywords：Agrobacterium tumefacien; GUS staining; polymerase chain reaction (PCR)目录第一章前言 (1)1.1烟草概述 (1)1.1.1 烟草的生物学研究 (1)1.1.2 烟草的遗传转化研究进展 (1)1.2根癌农杆菌转化体系 (2)1.2.1根癌农杆菌介导的分子机制 (3)1.2.2 用根癌农杆菌进行基因转化的植物 (3)1.3RNA干扰 (4)1.3.1 RNA干扰的定义 (4)1.3.2 siRNA基因沉默原理 (4)1.3.3 RNA干扰在植物中的应用 (4)1.3.4 CUC3（Cup-Shaped Cotyledon3）基因 (6)1.4常用分子生物学实验方法 (6)1.4.1 GUS基因检测——组织化学染色法 (6)1.4.2 基因组DNA提取（CTAB法） (7)1.4.4 PCR技术 (8)1.4.4 琼脂糖凝胶电泳 (8)1.5立题的依据及目的 (10)1.6本研究的目的及实验内容 (11)第二章材料与方法 (12)2.1材料 (12)2.1.1植物材料 (12)2.1.2菌株 (12)2.1.3培养基 (12)2.1.4试剂 (13)2.1.5实验仪器 (14)2.2方法 (16)2.2.1烟草无菌苗的培养 (16)2.2.2菌株及培养 (16)2.2.3叶盘法浸泡转化及植株再生 (17)2.2.4烟草转基因植株鉴定 (17)第三章结果与讨论 (20)3.1实验结果 (20)3.1.1转化植株的获得 (20)3.1.2 GUS组织化学染色法鉴定 (21)3.1.3 PCR扩增检测阳性转基因植株 (22)3.2转基因植株的表型特征分析 (22)3.2.1表型类型Ⅰ——叶片融合 (22)3.2.2 表型类型Ⅲ——叶片缺失 (23)3.3讨论 (24)3.3.1分化和筛选培养基的选择 (24)3.3.2 报告基因的选择 (24)3.3.3 表型分析 (25)第四章结论与展望 (26)4.1结论 (26)4.2展望 (26)致谢 ........................................................................................................... 错误!未定义书签。

TRV病毒介导的基因沉默体系在棉花中的建立及应用

作物学报 ACTA AGRONOMICA SINICA 2014, 40(8): 1356 1363/ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9E-mail: xbzw@本研究由国家自然科学基金项目(31171590)和江苏省自然科学基金项目(BK2010065)资助。

*通讯作者(Corresponding author): 王心宇, E-mail: xywang@, Tel: 025-********Received(收稿日期): 2014-01-10; Accepted(接受日期): 2014-06-04; Published online(网络出版日期): 2014-06-12. URL: /kcms/detail/11.1809.S.20140612.1637.002.htmlDOI: 10.3724/SP.J.1006.2014.01356TRV 病毒介导的基因沉默体系在棉花中的建立及应用王心宇1,* 吕坤1 蔡彩平2 徐君2 郭旺珍21南京农业大学生命科学学院, 江苏南京210095; 2南京农业大学农学院 / 作物遗传与种质创新国家重点实验室, 江苏南京210095摘要: 以陆地棉CLA1基因为标记基因, 利用烟草脆裂病毒(tobacco rattle virus, TRV)载体建立基于病毒介导的棉花基因沉默体系(virus-induced gene silencing, VIGS)。

病毒RNA2的RT-PCR 分析证明, 棉花子叶接种TRV 病毒后, 该病毒可高效扩散到受体的根、茎、叶等器官。

利用TRV-VIGS 体系同时诱导34份不同来源棉花材料CLA1基因沉默, 尽管不同材料间的抑制程度有差异, 但均可有效抑制CLA1基因的表达, 说明该体系在棉花研究中的广谱利用性。

GhMAPKKK 基因受黄萎病菌诱导表达, 接种后96 h 表达量达到高峰。

利用TRV-VIGS 体系, 成功抑制了棉花GhMAPKKK 基因的表达, 与对照株相比, 抑制后的棉花植株接种黄萎病菌后更易感病, 说明GhMAPKKK 参与了棉花对黄萎病菌的抗性反应。

1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

沈阳农业大学学报，００１，１５：７－７２１— ０４（５５５９）
０ｒａ０ｈｎａｌＡｒｕｕａＵｉｅｓｙ２二Ｑ（）２二２ｕｎ１ｆＳｅｖｌ￣ｉｈｒｌｎｖｒｔ，０：；ｇｃｉ１
病毒ｆｏｅｖ１ｗｅｇｖｒｅｏｉｉ，ＩＶ）侵染性植物表达载体ｐ１Ｖ／ＰＷ的ＮｂＣｌ１ｍｓＣＹＶＣＹＶＣ／Ｉ／Ｐ基因之间，构建了侵染性重组病毒克隆
ＤＶｍｍＣＧＰ￥５。ＴＰＲ检测结果表明，Ｃ — ｏ／Ｆ一６ＴＲ — ＣｓＭＭＯＣＧＰ￥５ — ／Ｆ一６Ｔ在子代病毒基因组中获得了转录。ＧＰ抗体进行蛋白质杂用Ｆ交（ｅｔｎｂ０ｔｇＷＢ，测到２ｋａ左右的ＧＰ蛋白，一结果表明，）检ｅｔｎ５ＤＦ这ＦＣ — ｍｏ／Ｆ－６Ｔ侵染的寄主植物
ＣＥｈｏｌａＺＮｎ，ＨＮＣａ—ｉ，ＨＡＧＭｉ￣ＷＡＮ — ｉＭＥｅｘｎｈＷＡＧＺｅ— ｏｇ术ＧＬ。，ＮＫ —ｉ ’ Ｎｈｎｄｎｋ
ｆａｌｇｆＢｉｓｉｎｅｎｃｎｌｇ，ｂ１ＣｏｌｅｏｏｃｅｃａｄＴｅｈｏｏｙ．ＤｅａｔｎｆＦｒｉｎＬｎｕｇａｈｎ，ＳｅｙｎｒｕｔｒｌＵｎｖｒｉｙｈｎａｇ０６，ｅｐｒｍｅｔｏｏｅｇａｇａｅＴｅｃｉｇｈｎａｇＡｇｉｌａｉｅｓｔ，Ｓｅｙｎ１８６ｃｕ１
中获得了表达．被病毒自身编码的Ｎａ蛋白酶从病毒聚合蛋白及ｓ并ＩＭＭＯＣＧＰ￥５ — ／Ｆ一６Ｔ融合蛋白中自动切断。可见，ＭＭＯＣ亚ｓ —
单位蛋白在植物中获得了表达，因在ｓＯＣＧＰ￥５ＭＭ — ／Ｆ一６Ｔ中ｓＭＭＯＣ位于ＧＰ上游。－Ｆ关键词：物病毒载体；达；Ｆ植表ＧＰ；ｓＯＣＭＭ — 中图分类号：２Ｑ８文献标识码：Ａ
ＡｂｔａｔＭＭＯ— ／Ｐ￥５，ｔｅｆｓｏｅｅｏｈｓｓｒｃ：ｓＣＧＦ一６ＴｈｕｉｎｇｎｆｔｅＭＭＯ— （ＳｌｂｅＣｏｕｌｍｅｈｎｎｘｇｎｓ — ｃｍｐｎｎ）ｎｈＰｔａｅｍｏｏｙｅａｅＣｏｏｅｔａｄｔｅＧＦ一￥５ｆｅｎｌｏｅｃｎｅｒｔｉ￥５）ｅｅａｃｎｔｕｔｄａｄｔｅｕｉｎｅｅＭＭＯ — ／Ｐ一６Ｔ６ＴＧｒｅｆｒｓｅｃｐｏｅｎ一６ｇｎｗｓｏｓｃｅ，ｎｈｆｓｏｇｎｓｕｒｒＣＧＦ￥５ｗａｃｏｅｂｔｅｎｓｌｎｄｅｗｅｎｃｅｒｉｅｕｉｎＮｂｎｃａｒｔｉｆＰｏｎｅｔｕｖｒｌｖｃｏｐＹＶＶＣＰＷｄｒｅｒｍｌｖｒｅｌｗｅｎｉｓｕｌａｎｌｓｏｂｆＩ）ａｄｏｔｐｏｅｎＣ）ｆｉｆｃｉｓｉｅｔｒＣ１ｏａ／／ｅｖｄｆｏｃｏｅｙｌｖｉｖｒｉｏｕ
植物病毒载体介导的ｓＭＭＯ— Ｃ在蚕豆植物中的表达
陈超力ｈ张敏２王丽，可心ｌ振东ｈ，，孟ｂ王冰
ｆ．阳农业大学ａ生物科学技术学院，．１沈．ｂ外语教学部，阳１０６；．圳市九升生物制品有限公司，东深圳５８２；沈１８６２深广１０９３南阳师范学院生命科学与技术学院，南南阳４３６）河７０１摘要：建ｒ可溶性甲烷单加氧酶Ｃ亚单位（ｏｂｅｍｔｎｏｏｙｅａｅＣｃｍｏｅｔｓＯＣ）因和绿色荧光蛋白一￥５构ｓｌｌｅｈｅｍｎｘｇｎｓ－ｏｐｎｎ，ＭＭ — 基ｕａ６Ｔｆｅｎｔｏｅｃｎｅｐｏｉ，Ｆ一６ＴｇｅｕｒｓｅｃｒｔｎＧＰ￥５）基因的融合基因ｓｒｌｅＭＭＯＣＧＰ￥５。融合基因ｓ — ／Ｆ一６Ｔ将ＭＭＯＣＧＰ￥５－／Ｆ一６Ｔ克隆到三叶草黄脉
Ｃｉａ２Ｓｅｚｅａｏ（ｉｓｅｇｉｌｉｌＰｏｕｔＣ．Ｌｄ，ｈｎｈｎＧａｇｏｇ５８２，ｈｎ；３ｃｏｌｏｉｃｅｃｎｅｈｏｏｙｈｎ；．ｈｎｈｎＪｓｎＪｕｈｎ）Ｂｏｏｃｒｄｃｓｏ，ｔ．Ｓｅｚｅｕｎｄｎ１０９Ｃｉａ．ＳｈｏｆＬｆＳｉｅａｄＴｃｎｌｇａｅｎｇＮｎａｇＮｒｌＵｉｅｓｙａｙｎｎｎ４３６，Ｃｉａａｙｎｏｍａｎｖｒｉ，ＮｎａｇＨｅａ７０１ｈｎ）ｔ
文章编号：１０ —１０２０）５０７－５００７０（０１０ — ５５０
ＥｘｅｓｏｏｈｅｓＭＯ－ＣｎｔｏｄＢｅｎＰｌｎｔｂｈｅＰｌｎｔＶｉｕｓＶｅｔｒｐｒｓｉｎｆｔＭｉｈｅＢｒａａａｙｔａｒｃｏ