交叉配血操作规程

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交叉配血试验操作规程

交叉配血试验操作规程

交叉配血试验操作规程一、前期准备1.需准备的仪器和材料有:试剂盘、试剂套装、试管、离心机、试剂架、操作台、试剂粉末、负压孔盖垫、抗人免疫球蛋白(抗人IgG)、标注笔等。

2.确保实验室实验台面整洁干净,并消毒工作区。

3.检查试剂有效期,避免使用过期试剂。

4.根据需求确定所需血浆标本和酶抗全血标本。

二、实验步骤1.将所需血浆标本加入试管中,用离心机离心10分钟,以获得澄清的血浆。

2.将澄清的血浆转移到试剂盘中的相应位置,每个孔位加1mL。

3.将离心后的红细胞沉淀与抗人IgG直接接触15分钟,以充分吸附不特异抗体。

4.加入2mL盐水,搅拌均匀,离心5分钟,去除清液。

5.加入4mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。

6.加入2mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。

7.加入1mL试剂套装中所配的抗人IgG,共悬浮混合24次,再加入5mL盐水,振荡均匀。

8.加入2mL盐水,振荡均匀,1分钟后离心5分钟,去除清液。

9.加入2mL试剂套装中所配的抗人IgG,共悬浮混合24次,再加入5mL盐水,振荡均匀。

10.重复步骤9,使红细胞悬浮,在离心后去除清液。

三、结果判断1.观察试剂盘中悬浮混合的红细胞沉淀情况,判断是否存在凝集现象。

2.凝集现象表明供血者和受血者之间存在血型抗原-抗体反应。

四、安全注意事项1.实验操作过程中注意戴手套、口罩和护目镜,保证操作者和实验样品的安全。

2.在操作前检查仪器和试剂的完好性,并遵循试剂的保存和使用说明。

3.严禁口饮、抽烟和进食,确保操作环境清洁。

4.实验后及时清洗仪器和工作区域,妥善处理废弃物。

5.确保实验室通风良好,防止有害气体和防护物质的浓度超标。

6.在实验操作过程中,严格遵守相关的实验操作规程和实验室安全规定。

以上是交叉配血试验的操作规程,包括前期准备、实验步骤、结果判断和安全注意事项。

按照规程进行操作,可以确保实验结果的准确性和实验人员的安全。

抗人球蛋白检测卡(交叉配血)操作规程

抗人球蛋白检测卡(交叉配血)操作规程

抗人球蛋白检测卡(交叉配血)标准操作规程一、目的:为规范交叉配血试验的技术操作,保证临床输血安全有效,特制定本规程。

二、适用范围:适用于输血科进行交叉配血试验。

三、职责:输血科技术人员负责交叉配血试验四、试剂及材料(一)试剂:抗人球蛋白检测卡(二)设备:专用离心机,专用孵育器,微量移液器(5-50ul)、普通离心机、玻璃或塑料试管、0.9%生理盐水等五、标本要求:(一)抽取受血者抗凝(抗凝剂为EDTA.K2)静脉血2-3ml,在3000r/min条件下离心5分钟备用。

(二)标本保存:血液样本必须密封,2-6℃保存7天。

(三)用于交叉配血必须是2-6℃保存3天以内的标本。

六、操作步骤:(一)交叉配血前,复检患者ABO和RH血型(二)在抗人球蛋白卡片上标明患者姓名(三)将受血者和献血者的红细胞和血清分离(四)取试管两支,用低离子溶液分别配患者和献血者0.5%-0.8%红细胞悬液(取分离血清后受血者底层红细胞8ul与0.9%生理盐水1mL配成0.8%受血者盐水悬液,取分离血清后供血者底层红细胞8ul 与0.9%生理盐水1mL 配成0.8%供血者盐水悬液)(五)交叉配血:主侧:患者血清50uL+献血者红细胞悬液50uL次侧:献血者血清50uL+患者红细胞悬液50uL(六)将卡放入37℃孵育箱15分钟(七)移出放入离心机5分钟,900rmp2分钟,1500rpm3分钟,取出观察结果。

七.结果观察:(一)阴性结果:主侧和次侧均不凝集,红细胞完全沉于凝胶管底部,配血相合。

(二)阳性结果:主侧和次侧均凝集,红细胞位于凝胶表面或中间,配血不相合。

(三)如果发生溶血,提示为阳性结果。

八.微柱卡式法凝集强度描述。

盐水介质法交叉配血试验操作规程

盐水介质法交叉配血试验操作规程

盐水介质法交叉配血试验操作规程一.【原理】红细胞上携带有ABO抗原,当和相应的抗体结合(如A型红细胞遇到含有抗A的B型血清)之后,就会产生肉眼可见的凝集。

所以当受血者和供血者细胞经混合并离心后,如有ABO不配合问题,就会很快显示出来,所以常称为“立即离心”(immediate spin,IS)配血试验。

用来检测供者红细胞与受血者血清之间的ABO相容性。

二.【器材】0.9%生理盐水,离心机,塑料小试管三.【操作】1.用生理盐水将受血者红细胞制备2%~5%盐水悬液。

(如取分离血清后受血者底层红细胞50ul与生理盐水1mL配成5%受血者盐水悬液)2.从供血者血液保存袋上的辫子中获取少量血样,分离血清,生理盐水三洗红细胞(取红细胞以后,往红细胞内加入无菌生理盐水混匀,离心去除残余白细胞,反复洗涤3次,去除上面的血浆和其他细胞,但是使用生理盐水洗涤红细胞时,不能用力摇晃试管,以免引起红细胞破裂,导致溶血等情况,溶血会影响红细胞的使用。

),并用生理盐将供血者红细胞制备2%-5%盐水悬液。

(如取分离血清后供血者底层红细胞50ul 与生理盐水1mL 配成5%供血者盐水悬液)3.取洁净塑料小试管2支,1支标明受血者血清(PS)+供血者细胞(DC)或主侧:另1支标明供血者血清(Ds)+受血者细胞(PC)或“次侧”。

4.按标记“主侧”管加受血者血清2滴(100uL),加供血者红细胞悬液1滴(50uL)。

“次侧”管放供血者血清2滴(100uL),加受血者红细胞悬液1滴(50uL)。

混匀,离心机离心1分钟,轻轻晃动试管,肉眼观察结果。

四.【结果判定】1.肉眼观察,如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血,则判读为阳性,无凝集为阴性。

2.对于不能明显判定为阴性而并未达到阳性凝集的反应,可通过显微镜进一步判读,镜下有红细胞凝集的为阳性反应,无凝集的为阴性。

3.如果试验在室温进行,若有凝集产生,可置37℃放置2分钟后观察凝块是否散开,以排除冷凝集素造成的凝集影响测定结果。

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程

1.目的:检查受血者与献血者的抗原及抗体成分是否相容,以保证安全输血;
2.要求:
要求全科人员能够熟练掌握原理及操作;
3.
,
4.
4.1
4.2
4.3
4.4
5.
5.1 首先查看输血申请单,核对姓名、科室、床号等内容,无误后方可进行配血;★5.2盐水介质配血法
1首先对患者血样充分离心后,吸出血清于另一试管中并标记;
2取试管12支,分别标记患者细胞、患者抗A、抗B、抗D、A C、BC、O C、主侧、次侧、献血者抗A、抗B、献血者细胞管;对患者血样进行ABO血型正反定性和Rh血型检定,主侧管加受血者血清2滴,献血者2%~5%红细胞悬液1滴;次侧管加献血者血清2滴,受血者2%~5%红细胞悬液1滴,对献血者血辫进行ABO血型复查,以
1000g离心15秒,观察结果
6.结果判断
ABO同型配血,主侧和次侧均无凝集及溶血现象;为盐水介质配血结果阴性,可将原标本接着做聚凝胺法或抗人球蛋白法配血;
6.1聚凝胺法:具体方法见聚凝胺法;
6.2 抗人球蛋白法:具体方法见抗人球法;
7.
7.1
7.2
7.3,然后再离心;
7.4
误,,37℃或7.5
7.6 各医院前来配血时,要有输血申请单方可配血;
8.相关文件
8.1中国输血技术操作规程
9.相关表单
9.1 CB—004血型参比室实验记录单
9.2 CB—005青海省血液中心交叉配血报告单
起草人:批准人:审核人:。

护士抽交叉配血标准操作流程

护士抽交叉配血标准操作流程

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交叉配血操作规程凝聚胺法

交叉配血操作规程凝聚胺法

交叉配血操作规程凝聚胺法交叉配血是指将一定数量的输血者的红细胞与另一组供血者的血清进行混合,通过观察混合血后是否发生凝集反应来确定血型。

交叉配血操作主要采用凝聚胺法进行,以下是交叉配血操作规程的详细步骤。

1.准备工作a.配置所需试剂,包括输入血浆、配血瓶、试剂盘、标本管、溶血酶溶液、配血盘等。

b.通过测定输血者和供血者的血型,确认双方的血型信息,并记录在相关记录表中。

2.标本采集a.采集输血者和供血者的静脉血标本,放入标本管中,避免血样凝固。

b.标本采集的相关操作要符合严格的无菌原则,确保血样的无菌及安全性。

3.标本处理a.将标本管中的静脉血标本置于冰上,在4℃下保存。

b.用溶血酶溶液处理输血者的红细胞,将3滴红细胞加入到每一个配血瓶中,轻轻摇动混合均匀。

4.试剂配置a.将配血盘中的试剂盘取出,配置新鲜的抗血型血清和已知血型标准红细胞。

5.凝胶装配a.打开凝胶洞口,将配血盘的试剂盘放入凝胶洞中。

b.确保试剂盘的位置正确,使试剂液体触及到凝胶洞的底部。

6.样本混合a.取出保存在冰上的输血者和供血者的静脉血标本,放置于试剂盘的对应位置。

b.轻轻旋转试剂盘,使血样和试剂充分混合起来,注意避免搅拌过于激烈。

7.观察凝聚反应a.在一定的时间内,观察配血盘中是否发生凝聚反应。

b.根据凝聚反应的情况,判断输血者和供血者的血型是否兼容。

8.结果判读a.若输血者的红细胞与供血者的血清发生凝聚反应,表示两者的血型不兼容,不适合进行输血。

b.若输血者的红细胞与供血者的血清没有发生凝聚反应,表示两者的血型兼容,可以进行输血。

9.记录和报告a.记录每次交叉配血的操作过程和结果,包括输血者和供血者的血型信息、配血的凝聚反应情况等。

b.报告输血者的血型结果和是否适合进行输血。

交叉配血操作规程凝聚胺法主要是通过观察凝聚反应来判定血型的兼容性,该方法操作简单、结果可靠。

但需要注意的是,交叉配血结果只能作为指导输血的参考依据,还需要综合考虑患者的临床情况和输血指征等因素,确保安全有效地进行输血操作。

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程

交叉配血操作规程交叉配血是一种常用的动物繁殖方法,通过将两个不同的个体进行交叉配对,以获得具有理想遗传特征的后代。

下面是一份交叉配血操作规程,详细介绍了交叉配血的具体步骤和注意事项。

一、前期准备1.确定需要交叉配血的两个个体,分别为雄性和雌性个体。

2.对选定的个体进行健康检查和基因型鉴定,确保它们身体健康且没有携带任何遗传疾病或缺陷。

3.确定交叉配血的时间和地点,保持环境整洁,避免外部因素对实验造成干扰。

4.准备必要的实验器材和试剂,包括培养皿、显微镜、匀浆器、移液器、生理盐水等。

二、交叉配血操作步骤1.检查个体性别:使用显微镜或基因鉴定方法,确认选定个体的性别。

2.打开个体体腔:以手术刀或麻醉剂等方法,在个体体腔中打开一个小孔,以便于之后的操作。

3.收集个体血液:用匀浆器缓慢吸取个体血液,将其置于培养皿中。

4.检查血液凝固情况:观察个体血液是否凝固,若已凝固则将其舍弃,重新收集血液。

5.将雄性血液与雌性血液混合:将取自雄性个体的血液与取自雌性个体的血液混合,保持培养皿中的血液充分混合。

6.观察交配反应:观察混合后的血液是否发生凝集或聚集,若出现凝集或聚集现象,说明雄性与雌性个体之间存在交配反应。

7.鉴定交配结果:使用显微镜或试纸等方法,对交配结果进行鉴定和记录。

8.存储交配后的血液:若需要保存交配后的血液供后续研究使用,将其分装于合适的容器中,并存放于低温环境中。

9.清理实验现场:将使用过的器材和材料进行清理和消毒,保持实验现场整洁。

三、注意事项1.交叉配血操作需要在无菌环境下进行,以避免外部微生物对实验的污染。

2.个体血液的收集应该尽量避免暴露在空气中,以免造成血液的凝固或氧化。

3.操作过程中要注意个体的安全,减少对个体的伤害。

4.需要保持操作的准确性和规范性,避免实验中出现误差。

5.实验后要对结果进行及时记录和分析,以便下一步的研究。

6.学习和了解相关法规和伦理要求,确保在动物实验中符合相关规定。

柱凝集法交叉配血试验操作规程2024

柱凝集法交叉配血试验操作规程2024

柱凝集法交叉配血试验操作规程20241.原理柱凝集法交叉配血是通过抗原-抗体在凝胶卡的反应室中反应后离心通过预先装填有抗IgG的凝胶柱。

凝集的红细胞将会被截留在凝胶柱的顶部或柱体中,而不凝集的红细胞则将在凝胶柱的底部。

2试剂柱凝集配血卡。

3.操作3.1取凝胶抗球蛋白微柱卡,标记1号(“主侧”),2号(“次侧”)。

3.2主侧:配制细胞悬液,通常清况下使用供应商提供的稀释液将献血者红细胞配成1%的悬液(根据厂商的操作说明书而定)50µ1轻轻滴人1号微管反应池中,再加25µ1受血者血清。

3.3次侧:配制细胞悬液,通常清况下使用供应商提供的稀释液将受血者红细胞配成1%的悬液(根据厂商的操作说明书而定)50µ1轻轻滴人2号微管反应池中,再加25µ1献血者血清。

3.4阴印捆:配制细胞悬液,通常情况下使用供应商提供的稀释液将受血者红细胞配成1%的悬液50µ1轻轻滴入2号微管反应池中再加25µ1AB型血清。

3.5将已加好反应物的凝胶卡放入37°C孵育15分钟。

3.6取出凝胶卡,立即用专用离心机离心,通常离心的速度被设定在1000r/min (80x g~100x g离心10分钟后,观察结果。

4结果判定4.1若对照管细胞沉淀在管底,检测管凝集块在胶上或胶中判读为阳性。

结果判断参照图示(见图1-5-1).图片4.2若对照管和检测管的细胞沉淀均在管底判读为阴性。

4.3若对照管细胞在胶上或胶中说明试验失败应重新试验。

5注意事项5.1每种柱凝集卡都分为反应室和凝胶柱两部分操作时,向反应池内要先加红细胞悬液,后加血清或抗体。

5.2不同的厂商所提供的柱凝集试验要求的细胞与血清的比例不同,一般50µ11%红细胞悬浮加25µ1血清;50µ10.8%红细胞悬浮加40µ1血清。

5.3除上述两种配血方法之外,常用的还有快速的聚凝胺介质配血、LISS 介质配血以及增强反应的酶法配血等。

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交叉配血操作规程
[原理]
凝聚胺试验是利用低离子溶液促进红细胞抗原与血清(浆)中的抗体反应,再利用凝聚胺引起红细胞间非免疫性的凝集,让已有抗体(IgG)反应的红细胞间的距离缩短。

距离缩短后更能引起已反应的抗体和别的红细胞产生反应形成免疫性的凝集。

而由凝聚胺所引起的非免疫性红细胞凝集反应可被后来加入的复悬液所中和而散开,如有免疫反应,凝集就不会散开,为阳性反应。

如没有免疫反应,凝集就会散开,为阴性反应。

交叉配血试验是在盐水介质的基础上加入凝聚胺,检测供患之间是否相合,患者血清(浆)中是否含有具临床意义的红细胞异体抗体。

[试剂组成]
1.洁净试管,离心机,显微镜。

2.0.85% 氯化钠溶液:准确称取氯化钠(AR)8.5 g,用蒸馏水溶解并定容至 1000 ml。

试剂启用后,有效期为:二周。

3.凝聚胺试剂
①低离子介质溶液:含葡萄糖,乙二胺四醋酸-2 钠及稳定剂。

②凝聚胺溶液:含凝聚胺,氯化钠及稳定剂。

③复悬液:含柠檬酸钠,葡萄糖及稳定剂。

④阳性对照血清:含抗D 血清,氯化钠及稳定剂。

4.抗人IgG 血清。

[试剂保存和稳定性]
1.凝聚胺试剂须保存在2-25℃。

2.有效期内可使用。

3.抗人IgG 血清低温冰箱保存。

复溶后放2—4℃冰箱保存。

[标本收集和准备]
1.抽取受血者静脉血3-4ml(操作中小心防止红细胞破损),放入一已贴标签干燥洁净的试管中为血清管(也可用EDTA-K2 抗凝血液),并将注射器中余下的少量血液配成2%红细胞生理盐水悬液,放入另一已贴标签干燥洁净的试管中为红细胞悬液管。

以上标本有效期为三天;若受血者抽取标本后,输用过血液或血液制品,且输用时间超过12 小时的,必须重新采集标本。

2. 2% 红细胞悬液:用生理盐水洗涤红细胞3 次。

根据下表进行红细胞悬液的配制。

悬液浓度(%)压积红细胞(滴)盐水(滴)
----------------------------------------------------------------
2 1 2ml(40)
5 1 0.8ml(16)
----------------------------------------------------------------
[操作步骤]
1.取出3 支试管分别标记主,次及对照测试:
主测管:加入病人血清(浆)2 滴,再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴,次测管:加入供血者血清(浆)2 滴,再加入病人3-5%红细胞悬液1 滴,对照管:加入2 滴*4 阳性对照血清,再加入供血者3-5%红细胞悬液1 滴。

2.各加入①低离子介质溶液0.6ml,轻轻混匀,于室温下静置1 分钟。

3.再滴入2 滴②凝聚胺溶液,轻轻混匀,于室温下静置15 秒。

4.3400rpm 离心1 分钟,然后把上清液倒掉,管底保留大约0.1ml 的液体。

5.目测红细胞有无变成凝块,如果没有凝块,则必须重做,(请看注意事项6)。

重做后仍然没有凝集现象出现,可能试剂失效。

6.各滴入2 滴③复悬液,并轻轻混匀,观察结果。

若为凝聚胺引起的非免疫性凝集,应该在1 分钟内散开;若是异体抗体所引起的免疫性凝集,则不会散开。

7.倒在玻片上用显微镜观察有无凝集。

如有凝集反应,表示不合,此供血者的血液不适合病人使用;如无凝集反应,表示供血者的血液适合病人输注。

[结果判断]
1.ABO 同型配血,主侧和次侧均无溶血及凝集表示无输血禁忌,可以输血。

2.如急需输血但一时无同型血液,作异型配血时(指O 型血输给A,B 或AB 型,或A,B 型血输给AB 型时),主侧无溶血及凝集,但次侧必然有凝集或溶血。

[质量控制与附注]
1.试剂超过有效期或有污染现象出现,即不可使用,必须更换。

2.检验人员必须熟悉操作步骤,尤其是凝聚胺所引起的凝集反应,更要特别注意。

3.中国人极少有Anti-K 抗体,但其他人种比例较高,尤其是白种人,所以,当病人是其他人种时,为求安全起见,加做辅助性抗球蛋白试验。

4.加做辅助性抗球蛋白试验是为了增加检测Anti-K 抗体的敏感度,对检测其他的抗体无帮助。

所以,除非想进一步检测Anti-K 抗体,否则不须做到辅助性抗球蛋白试验。

5.在冬天气温极低的情况下,操作交叉配血试验,某些病人血清(浆)中可能含有寒冷凝集素等因子而导致假阳性的结果出现。

若有此怀疑,请再滴入2 滴*3 复悬液,将试管立即置入37 C 水浴中轻轻混匀,并在一分钟内观察结果。

6.如果不凝集,可能是标本中含有肝素。

如洗肾病人的标本或其他干扰存在,此时需多加2-4 滴*2 凝聚胺溶液以中和肝素或干扰因子。

7.0.85% 氯化钠溶液启用时,及时贴上启用时间;超期的溶液要及时更换。

使用过程中,怀疑污染到溶液时或配血结果可疑时,必须更新该溶液。

8.受血者标本有效期为三天;若受血者抽取标本后,输用过血液或血液制品,且输用时间超过12 小时的,必须重新采集标本。

2%红细胞悬液要求准确,必要时用生理盐水洗涤红细胞后重新配制。

9.进行交叉配血前逐项核对输血申请单、受血者和供血者血样,复查受血者和供血者ABO 血型(正、反定型),并常规检查患者Rh(D)血型,正确无误时可进行交叉配血。

10.操作过程中,①必须先排好试管,并做好标记;②每进行一步操作,必须进行一次核对。

11.结果判断必须先肉眼观察,再进行显微镜观察。

注意观察弱凝集和排除非特异性凝集。

12.交叉配血试验中发现有不配合时,首先应考虑受血者和供血者的ABO 血型和Rh(D)血型定型是否错误,必要时进行抗体筛检。

其次,应注意有无特异性同种抗体,特异性未知的同种抗体存在,或者患者的血清在室温37℃或抗球蛋白血清中凝集所有的其他红细胞,造成交叉配血的困难,应进一步作有关试验进行鉴定。

13.两人值班时,交叉配血试验由两人互相核对;一人值班时,操作完毕后自己复核,并填写配血试验结果。

(按“交叉配血核对制度”进行)。

14.各供血者间需进行交叉配血;已经输注的血液不足24 小时的,供血者间也需进行交叉配血。

15.交叉配血后的所标本加盖后,冰箱保存不少于7 天。

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