淬灭酶AiiO-AIO6酶学性质及对嗜水气单胞菌毒力因子的表达调控
某大学生物工程学院《生物化学》考试试卷(3932)
某大学生物工程学院《生物化学》课程试卷（含答案）__________学年第___学期考试类型：（闭卷）考试考试时间：90 分钟年级专业_____________学号_____________ 姓名_____________1、判断题（95分，每题5分）1. Lys的缺乏可以通过在食物中添加相应的α酮酸加以纠正。
（）答案：错误解析：Lys为必需氨基酸，人体不能通过自身的酶类进行合成Lys，必须从外源摄入。
2. 某真核生物的某基因含有4200bp，以此基因编的肽链应具有1400个氨基酸残基。
（）答案：错误解析：3. 6磷酸葡萄糖转变为1，6二磷酸果糖，需要磷酸己糖异构酶及磷酸果糖激酶催化。
（）答案：正确解析：4. Ala和Glu是生酮氨基酸。
（）答案：错误解析：5. DNA分子中没有修饰的C发生自发脱氨基引发突变的可能性比修饰后的5甲基胞嘧啶自发脱氨基引发突变的可能性低得多。
（）答案：正确解析：DNA分子中没有修饰的C发生自发脱氨基后转变为U，很容易被细胞内的BER系统识别和修复。
5甲基胞嘧啶自发脱氨基后转变为T，而T是DNA分子中正常的碱基，不容易被识别和修复，经过一轮复制以后，将导致CG碱基对突变为TA碱基对。
6. 载脂蛋白不仅具有结合和转运脂质的作用，同时还具有调节脂蛋白代谢关键酶活性和参与脂蛋白受体的识别的主要作用。
（）答案：正确解析：7. 大肠杆菌参与DNA错配修复的DNA聚合酶是DNA聚合酶Ⅰ。
（）答案：错误解析：参与大肠杆菌DNA错配修复的DNA聚合酶为DNA聚合酶Ⅲ。
8. 若没氧存在时，糖酵解途径中脱氢反应生成的NADH＋H＋交给丙酮酸生成乳酸，若有氧存在时，则NADH＋H＋进入线粒体氧化。
（）答案：正确解析：9. 遗传密码的变偶性（可变性）是指密码子的第1位碱基比其他两个碱基在识别反密码子时具有较小的专一性，这样反密码子的第3位碱基则可有最大的阅读能力。
（）[山东大学2017研]答案：错误解析：遗传密码的变偶性（可变性）是指密码子的第3位碱基比其他两个碱基在识别反密码时具有较小的专一性，这样反密码子的第1位碱基则可有最大的阅读能力。
嗜水气单胞菌AH1全菌灭活疫苗的初步研究
关键词：嗜水 气单胞 茵；全 茵疫 苗；免疫保护
中图分类号： Ｑ ９ ３ ９ ． ９ ６ 文献标识码： Ａ
பைடு நூலகம்
Ｔｈｅ Ｐｒ ｉ ｍａ ｒ ｙ Ｓ ｔ ｕｄｙ ｏ ｆ Ｉ ｎａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ Ｗ ｈｏ ｌ ｅ Ｂａ ｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ Ｖａ ｃ ｃ ｉ ｎｅ ｏ ｆ
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２ ０ １ ３年 第 １期 （ 总第 ７ ９期 ）
漳州师范学院学报 （ １ １ 然科 学版 ）
Ｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌ ｏ ｆ Ｚｈ ａ ｎ ｇ ｚ ｈ ｏ ｕ Ｎｏ ｒ ｍａ ｌ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ（ Ｎａ ｔ ． Ｓ ｃ ｉ ． ）
Ｎｏ ． １ ． ２ ０ １ ３ｆ Ｇｅ ｎ ｅ ｒ ａ Ｉ Ｎ０ ． ７ ９
ｈ ｙｄ ｒ ｏ ｐｈｉ ｌ ａ ｉ ｎａ ｅ ｔ ｉ ｖ ｉ ａｔ ｅ ｄ ｗｈｏｌ ｅ ｂ ａｃ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｖａ ｃ ｃ ｉ ｎ ｅ．
大学微生物学最全知识点总结
第一章1、G+、G-菌结构特点、细胞壁区别G+细胞壁：肽聚糖（含量高）、磷壁酸（含量较高）、一般无类脂质磷壁酸功能：①加固细胞壁②带负电荷③储藏磷元素④调节细胞壁增长⑤形成表面抗原⑥形成噬菌体吸附的位点G-细胞壁：肽聚糖（含量低）、无磷壁酸、类脂质（含量较高）、蛋白质G-细胞壁结构：外膜（脂多糖、磷脂、脂蛋白）、肽聚糖、周质空间脂多糖功能：①是G-细菌内毒素的物质基础②吸附Mg2+、Ca2+等阳离子提高细胞壁稳定性③决定G-细菌表面抗原决定簇的多样性④对细胞起保护作用G+肽聚糖合成2、缺壁细菌是什么？自发缺壁突变：L型细菌人工方法去壁：原生质体、球状体自然界长期进化形成：支原体3、内含物是什么（PHB、异染粒等）内含物指细胞质内一些颗粒状构造，主要是核糖体、储藏性颗粒、质粒等储藏性颗粒：PHB颗粒：储藏碳源、能源，降低细胞内渗透压异染粒：储藏磷元素和能量，降低渗透压羧酶体：CO2固定中起关键作用气泡：吸收空气，空气中的氧气可供代谢需要4、细菌各特殊结构的功能？糖被：保护作用（抵御干燥、吞噬细胞、有毒化合物）、黏附作用、贮藏养料鞭毛（基体、鞭毛钩、鞭毛丝）：通过旋转推动细菌运动趋性：生物对环境中不同因子的应答运动，如趋化性、趋光性菌毛：G-致病菌较多，借助菌毛把它们牢固地黏附于宿主上，进一步定植和致病性菌毛：将遗传物质从一个细菌转移到另一个细菌芽孢：在细菌地生长发育后期，形成的壁厚、抗逆性休眠体特性：抗热、抗辐射、抗化学药物、抗静压、抗紫外线、休眠芽孢抗热机制：渗透调节皮层膨胀学说芽孢衣对于多价阳离子和水分的渗透性差，皮层的离子强度高，使皮层有极高的渗透压去夺取核心部分的水分。
造成皮层的充分膨胀，而核心部分却高度失水，产生极强的耐热性。
5、放线菌细胞形态？繁殖方式？生存环境？人类关系？细胞形态：有发育良好的分枝状菌丝体，有基内菌丝、气生菌丝、孢子丝繁殖方式：无性孢子：分生孢子（凝缩分裂、横隔分裂）、孢囊孢子菌丝断裂生存环境：含水量较低、有机物丰富、呈微碱性的土壤环境中人类关系：放线菌可生产绝大多数常用的抗生素（除青霉素、头孢）、酶类（蛋白酶等）、维生素（B12）6、蓝细菌特殊结构和功能？类囊体：含叶绿素a、藻红素等光合色素，光合作用场所异形胞：型大、壁厚，专一性固氮。
2024耐药革兰阴性菌感染治疗指南
2024耐药革兰阴性菌感染治疗指南随着抗微生物药物耐药性（AMR）问题的日益严峻，治疗耐药菌感染已成为全球公共卫生领域的一大挑战。
近日，美国感染病学会（IDSA）发布了《IDSA 2024抗微生物耐药革兰阴性菌治疗指引》，为临床医生提供了宝贵的治疗参考。
该文件主要针对产超广谱β-内酰胺酶肠杆目细菌（ESBL-E）、产AmpC β-内酰胺酶肠杆目细菌（AmpC-E）、碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌（CRE）、难治性耐药铜绿假单胞菌（DTR-PA）、碳青霉烯耐药鲍曼不动杆菌（CRAB）和嗜麦芽窄食单胞菌所引发的感染，给出了具体而全面的治疗建议。
《感染医线》特将文件中的相关建议翻译整理如下，供广大读者参考。
1一般管理建议本指南推荐的治疗方法，是建立在致病菌已确定，且抗菌药物的体外活性也已经得到验证的基础上。
在两种抗菌药物具有相同疗效的情况下，选择药物时需综合考虑的因素包括安全性、成本、便利性以及当地药物的可及性。
复杂性尿路感染（cUTI）的定义在本文件中，cUTI是指与泌尿生殖道结构或功能异常相关的尿路感染，或是指青少年及成年男性所发生的任何尿路感染。
一般而言，专家组建议使用与治疗肾盂肾炎相似的药物和相同的疗程来治疗cUTI。
对于病源已得到有效控制（如已拔除Foley导尿管）且不存在持续尿潴留或留置尿管的cUTI患者，其抗菌药物选择和疗程与非复杂性膀胱炎相似。
治疗的第1天即病源得到控制的当天。
经验性治疗经验性治疗决策不在本指南的讨论范畴之内。
然而，一般而言，在制定经验性治疗方案时，应综合考虑最可能的病原体、患者病情的严重程度、潜在的感染源，以及任何特定的患者因素（如严重青霉素过敏、严重免疫功能不全、慢性肾病等）。
在为患者制定经验性治疗方案时，临床医生还应考虑以下因素：（1）过去12个月内分离的微生物及其相关的抗菌药物敏感性试验（AST）数据；（2）过去3个月内患者的抗菌药物暴露情况；（3）当地病原体的流行情况及其对不同抗菌药物的敏感性或耐药性分布。
乳酸菌对嗜水气单胞菌体外抑制作用试验
乳酸菌（lactic acid bacteria，LAB）是一类利用可发酵糖产生乳酸的细菌的总称，能耐受动物胃肠道内的酸性环境，广泛分布在恒温动物和鱼类胃肠道中[1]。
近年来，人们对生活水平的要求日益严格，在我国的大部分地区，尤其是南方的城市中，乳酸菌的应用已经成为一大热潮。
目前，乳酸菌在食品摘要［目的］探寻鱼源乳酸菌与嗜水气单胞菌二者之间的相关性。
［方法］采用琼脂扩散法开展体外抑制试验，比对法开展影响因素试验。
［结果］鱼源乳酸菌对嗜水气单胞菌有较强的抑制作用；鱼源乳酸菌产酸强度越大，抑制作用越强；嗜水气单胞菌浓度越大，抑制作用越弱。
［结论］鱼源乳酸菌可以抑制嗜水气单胞菌的生长，且对低浓度的嗜水气单胞菌抑制效果尤佳。
关键词乳酸菌；嗜水气单胞菌；体外抑制；影响因素LI Huan，DENG Shunzhou，ZHU Zhixiu*College of Animal Science and Technology,Jiangxi Agricultural University,Nanchang330045,China [Objectives]In order to explore the correlation between fish-derived lactic acid bacteria and ,the inhibitory effect of fish-derived lactic acid bacteria onin vitro was tested.[Methods]In vitro inhibition test was performed by agar diffusion method,experiment on influencing factors by comparison method.[Results]Fish-derived lactic acid bacteria had a strong in-hibitory effect on.The higher the acid production intensity of fish-derived lactic acid bacteria,the stronger the inhibition effect.The higher the concentration of A, the weaker the inhibition.[Conclusions]Fish-derived lactic acid bacteria can inhibit the growth of ,especially at low concentrations.lactic acid bacteria;;in vitro inhibition;influence乳酸菌对嗜水气单胞菌体外抑制作用试验李欢，邓舜洲，朱芝秀*江西农业大学动物科学技术学院，江西南昌330045收稿日期：2022-02-15基金项目：江西省教育厅（GJJ150416）课题；江西省科技厅(20122BBF60082)课题；江西农业大学创新课题（鱼源乳酸菌的分离鉴定及在水产中的应用）作者简介：李欢，女，2001年生，本科在读。
最新：群体感应调控细菌耐药的机制(全文)
最新：群体感应调控细菌耐药的机制（全文）细菌的抗菌素耐药已成为威胁人类健康的重大问题，亟需新策略阻控细菌耐药。
群体感应是微生物细胞间交流的一种机制，当环境中群体密度达到阈值后群体感应即被激活，调控下游基因转录。
群体感应已被证实可调控生物膜、外排泵、细菌分泌系统等抗菌素耐药机制，有望成为耐药调控靶点。
目前已有多种群体感应抑制剂通过降解信号分子、干扰信号分子与受体蛋白的识别和结合、阻断群体感应信号的合成等方式干扰群体感应。
群体感应抑制剂有望成为阻控微生物耐药的新方法。
近年来，随着抗菌素的广泛使用，细菌的抗菌素耐药已成为威胁人类健康的重大问题。
研究者们试图通过研究微生物耐药靶点、研发新型药物等方法攻克抗菌素耐药这一世纪难题，但细菌耐药率仍逐年攀升。
因此，迫切需要从新的角度研究抗菌素耐药问题。
最近，一些研究揭示了群体感应（quorumsensing）系统在细菌耐药中的作用，并深入探索了群体感应调控细菌耐药的机制，这些研究成果有望为阻控抗菌素耐药提供新的方法和靶点。
本文围绕群体感应对细菌抗菌素耐药的调控机制及干预手段进行综述。
一.细菌耐药机制目前，抗菌素的作用机制主要包括以下4个方面：（1）阻碍细胞膜合成；（2）增强细胞膜通透性；（3）影响蛋白质合成；（4）干扰DNA的复制和转录〔】】。
相应地，细菌发展出以下5种主要抗菌素耐药机制：（1）降低细胞膜对抗菌素的通透性；（2）利用外排泵排出抗菌素；（3）基因突变或修饰抗菌素靶向基因；（4）对抗菌素的直接修饰或降解；（5）形成生物膜1W。
为克服细菌耐药，新药研发、药物联用已成为常见手段，但罕有从细菌群体角度出发制定的策略。
基于此，深入研究细菌群体感应系统，从中寻找新的耐药阻控手段已刻不容缓。
二、群体感应简介20世纪70年代，Nea1son和Eberhard等【2,3］发现费氏弧菌（Vibiofischeri）和哈维弧菌（Vibioharveyi）的发光现象可由菌群密度所调控,这是最早关于群体感应现象的文献报道。
微生物解答
第一章1.试述革兰氏染色机制：结晶紫液初染和碘液媒染：在细菌的细胞膜内可形成不溶于水的结晶紫与碘的复合物。
乙醇脱色：G＋细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密且不含类脂，把结晶紫与碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色；G-细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄和文联度差，结晶紫与碘复合物的溶出，细胞退成无色。
复染: G-细菌呈现红色，而G+细菌则仍保留最初的紫色。
2.渗透调节皮层膨胀学说是如何解释芽孢的耐热机制的？芽孢的耐热在于芽孢衣对多价阳离子和水分的渗透很差以及皮层的离子强度很高，这就使皮层产生了极高的渗透压去夺取芽孢核欣中的水分，其结果造成皮层的充分膨胀和核心的高度失水，正是这种失水的核心才赋予了芽孢极强的耐热性。
3.何为“栓菌”试验？即设法把单毛菌鞭毛的游离端用相应抗体牢固地“栓”在载玻片上，然后在光镜下观察该菌细胞的行为，结果发现，该菌只能在载玻片上不断打转而未作伸缩“挥动”，因而肯定了“旋转论”的正确性4.对细菌细胞一般构造和特殊构造设计表解。
一般构造：包括细胞壁、细胞质膜、拟核、细胞质。
特殊构造:糖被、鞭毛芽孢第二章2.试对酵母菌的方式作一表解酵母菌的繁殖方式：（一）无性：①芽殖②裂殖③产无性孢子（节孢子、掷孢子、后垣孢子）（二）有性（产子囊孢子）3.试图示酿酒酵母的生活史，并对其中各主要过程作一简述1．子囊孢子在合适的条件下发芽产生的单倍体营养细胞2．单倍体营养细胞，不断地进行出芽繁殖3．两个性别不同的营养细胞彼此接合，在质配后即发生核配，形成二倍体营养细胞4．二倍体营养细胞不进行核分裂，而是不断进行出芽繁殖5在以醋酸盐为唯一或主要碳源，同时又缺乏氮源等特定条件下6子囊经自然或人为破壁后，可释放出其中的子囊孢子4.试以表解法介绍霉菌的营养菌丝和气生菌丝各可分化成哪些特化构造，并简要说明它们的功能吸取养料假根吸器附着：附着胞、附着枝菌核特化的营养菌丝休眠（或休眠及蔓延）菌索延伸：匍匐枝菌环捕食线虫菌网菌丝体无性分生孢子头孢子囊简单有性：担子特化的气生菌丝（子实体）无性：分生孢子器、分生孢子座复杂有性（子囊果）：闭囊壳、子囊壳、子囊盘简述功能：假根：具有固着和吸取养料等功能吸器：吸取宿主细胞内的养料附着胞：用以牢固的黏附在宿主表面附着枝：将菌丝附着于宿主体上菌核：休眠菌丝组织菌索：促进菌体蔓延和抵御不良环境菌环或菌网：捕捉线虫或其他微小动物5.试列表比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌细胞壁成分的异同，并提出制备相应原生质体的酶或试剂细胞壁成分的异同：细菌分为G+和G-，G+肽聚糖含量高，G-含量低；G+磷壁酸含量较高，而G-不含磷壁酸；G+类脂质一般无，而G-含量较高；G+不含蛋白质，G-含量较高。
AI-2信号分子在细菌中调节的研究
AI-2信号分子在细菌中调节的研究1.引言群体感应（QS）是一种细胞间通信系统。
细菌能够通过这一系统根据种群密度的变化来调节生物功能，比如形成生物膜，致病因子的分泌，抗生素的生成等，从而适应环境[1、2]。
该系统由细胞外分泌的自诱导剂控制。
两种主要的自诱导剂定义为两个系统，分别称为I型QS和II型QS。
在I型QS中，自诱导分子1是N-酰基高丝氨酸内酯（AHL）衍生物。
在II型QS中，信号分子被称为自诱导分子2（AI-2）[3，4]。
I型QS是用于种间交流的高度特异性系统，与之不同的是，II型QS被认为可以进行种间交流，从而使细菌不仅能够对同类的AI-2做出反应，而且还可以对其他物种产生的AI-2做出反应。
它在种内和种间交流中起着重要作用，并且在革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌中都有报道[5]。
2.1.AI-2的产生AI-2由LuxS酶产生，并将S-核糖同型半胱氨酸（SRH）转化为4,5-二羟基-2,3-戊二酮（DPD）[6]。
DPD形式不稳定，会自发环化形成呋喃糖基硼酸酯二酯（AI-2分子）。
2.2.AI-2对细菌毒素的调节细菌毒素是细菌致病力的重要因素。
在梭状菌病原体，产气荚膜杆菌，肉毒素杆菌，以及艰难杆菌属发现AI-2。
Kumar[7]等构建产气荚膜梭菌luxs突变菌株，发现其磷脂酶和鞘磷脂酶活性，胶原酶以及氧不稳定溶血素毒素类的降低。
Li[8]等研究AI-2/LuxS在乳酸菌中的作用。
两种乳酸杆菌菌株（植物乳杆菌AB-1和干酪乳杆菌LC）具有很强的抗菌活性。
之前，Chanos和Mygind（2016）曾报道过乳酸杆菌中产生AI-2。
通过研究结果表明，乳酸杆菌AB-1的AI-2活性在植物乳杆菌AB-1和干酪乳杆菌LC共培养中有所增加，特别是在指数生长期，这些结果与Moslehi-Jenabian，Vogensen和Jespersen（2011）的报道一致。
作者发现，在共培养系统中，共培养物中的luxS基因表达也增加了，这表明LAB-1和LC的合作可能与AI-2有关。
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淬灭酶AiiO-AIO6酶学性质及对嗜水气单胞菌毒力因子的表达
调控
淬灭酶AiiO-AIO6酶学性质及对嗜水气单胞菌毒力因子的
表达调控
作者：张美超;曹雅男;姚斌;白东清;周志刚
作者机构：中国农业科学院饲料研究所,农业部饲料生物技术重点开放实验室,北京100081;中国农业科学院饲料研究所,农业部饲料生物技术重点开放实验室,北京100081;中国农业科学院饲料研究所,农业部饲料生物技术重点开放实验室,北京100081;天津农学院水产科学系,天津300384;中国农业科学院饲料研究所,农业部饲料生物技术重点开放实验室,北京100081
来源：水产学报
ISSN：1000-0615
年：2011
卷：035
期：011
页码：1720-1728
页数：9
中图分类：Q786;S917.1
正文语种：chi
关键词：N-乙酰高丝氨酸内酯酶;原核表达;嗜水气单胞菌;毒力因子测定
摘要：将N-乙酰高丝氨酸内酯酶基因(aiiO-AIO6)插入表达载体pET28a构建了原核表达载体pET28a/ aiiO-AIO6.转化大肠杆菌后筛选具有活性的重组子并对纯化的目的蛋白AiiO-AIO6的酶学性质进行了研究,同时研究了纯化的酶液对嗜水气单胞菌ATCC7966溶血素( Hemolysin,Hem)、细胞肠毒素(Cytotonic enterotoxin,Ast)、胞外蛋白酶(Extracellular protease,Ep)、丝氨酸蛋白酶(Serine protease,Sp)及磷脂酶Pho( Phospholipase Al,Pho)等5个毒力因子
表达的影响.结果表明,pET28a/aiiO-AIO6在大肠杆菌中大量表达N-乙酰高丝氨酸内酯酶,纯化后的N-乙酰高丝氨酸内酯酶的最适作用条件为pH8.0,30℃,在pH 6.0 ～11.0的范围内能够稳定的存在,在80℃条件下保温30 min后酶活力能够维持在65％以上；且该酶对多种金属离子、化合物和中性蛋白酶都具有很好的抗性；该酶对多种底物都具有一定的降解作用；以3-oxo-C8-HSL为底物时的km值为0.015 mmol/L；比活力为583.33
U/mg.N-乙酰高丝氨酸内酯酶在培养8h及12 h时对嗜水气单胞菌5个毒力因子的表达量都具有明显的下调趋势(P＜0.05).本实验通过测定AiiO-AIO6的酶学性质及证明AiiO-AIO6可以通过降解嗜水气单胞菌产生的信号分子来抑制其毒力因子的表达,从而为将其应用于水产环境及致病性嗜水气单胞菌的生物防治奠定理论基础.。