埃希氏大肠菌及检验
大肠埃希氏菌检验
在临床诊断领域的应用
感染性疾病的诊断
通过检测患者体内的大肠埃希氏菌，诊断是否存在感染性疾病， 如肠道感染、尿道感染等。
抗生素敏感性试验
对分离出的大肠埃希氏菌进行抗生素敏感性试验，为临床医生提 供合理用药依据。
流行病学调查
通过检测患者和环境中的大肠埃希氏菌，了解疾病的传播途径和 流行趋势，为防控措施提供依据。
01
利用特异性抗体检测样本中的大肠埃希氏菌抗原，具有灵敏度
高、特异性强、操作简便等优点。
免疫磁珠分选技术
02
利用磁珠表面包被的特异性抗体捕获样本中的大肠埃希氏菌，
再通过磁力分选出阳性菌株。
免疫荧光技术
03
利用荧光标记的特异性抗体检测样本中的大肠埃希氏菌，通过
荧光显微镜观察结果。
分子生物学方法
聚合酶链式反应（PCR）
感染途径
通过食物、水或与动物的 直接接触传播。
检验的重要性
食品安全
诊断依据
大肠埃希氏菌检验是食品安全检测的重 要环节，确保食品中不存在致病性大肠 埃希氏菌，防止食物中毒事件的发生。
对于临床病例，大肠埃希氏菌的检测 可作为感染的诊断依据，指导治疗和 预防措施。
公共卫生
对于水源和环境中的大肠埃希氏菌检 测，有助于保障公共卫生和防止疾病 传播。
03
检验步骤
样本采集
采集方法
采集样本时应使用无菌操作，确 保采集工具和容器清洁无菌。采 集的样本应具有代表性，能够反
映待检测对象的真实情况。
采集部位
采集样本时应选择大肠埃希氏菌 容易滋生的部位，如粪便、尿液、
食品、水源等。
采集量
采集的样本量应足够进行后续的 检验操作，同时也要考虑到检验
致病性大肠埃希氏菌及其检验
致病性：（1）致 病因素
LT与ST的比较
特性
分子量 耐热性 免疫原性 B亚单位受 体
致病机理
不耐热肠毒素
耐热肠毒素
较大，73000
较小，1500-5000
不耐热
耐热
有
无
肠黏膜GM1神经节苷酯 肠黏膜GM1神经节苷酯
活化细胞腺苷酸环化酶，活化细胞鸟苷酸环化酶，
细胞内cAMP含量升高， 细胞内cGMP含量升高，
原理：伊红美蓝琼脂平板含伊红和美蓝染料，在此亦作为指示剂。 大肠菌群发酵乳糖造成酸性环境时，故可染上酸性染料伊红，又因 伊红与美兰结合（该两种染料即结合成复合物）使大肠菌群产生带 核心的、有金属光泽的深紫色的（龙胆紫的紫色）阳性菌落，从菌 落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光。在伊红美兰平板上的典 型菌落呈紫黑色，圆形，边缘整齐，表面光滑湿润，常有金属光泽。 有的由于被检样品影响，亦呈现紫色、粉紫、中心灰紫、无黑心、 湿润等，常为大肠杆菌，均应注意挑选。
革兰氏阴性杆菌
革兰氏 阳性杆 菌
大肠杆菌扫 描电镜照片源自大肠杆菌 透射电镜 照片大肠杆菌革兰氏染色照片
大肠杆菌平 板菌落照片
一、埃希氏菌属生物学特性
生化特性
一．可发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇产酸产气，有些不典型的菌株不发酵或 迟缓发酵乳糖；
二．不同菌株对蔗糖，卫矛醇、水杨苷发酵结果不一致; 三．本菌可使赖氨酸脱鞍、不能使苯丙氨酸脱羧。 四．不产生H2S，不液化明胶，不分解尿素;
二、致病性大肠埃希氏菌的检验
（二）、分离培养
将乳糖胆盐发酵阳性管液与增菌液分别划线接种于麦 康凯或伊红美兰琼脂平板上。 2、于36±1℃培养 18—24小时观察菌落对于污染严重的食品可直接按 划线法接种，不经过增菌过程。不但要注意乳糖发酵 的菌落，同时也要注意乳糖不发酵的菌落。
大肠埃希氏菌生化鉴定结果
大肠埃希氏菌生化鉴定结果大肠埃希氏菌（Escherichia coli）是一种常见的细菌，可以引起多种感染性疾病，包括腹泻、尿路感染和食物中毒等。
鉴定大肠埃希氏菌的生化特征可以帮助确定病原菌的身份以及其潜在的耐药性和毒力因子。
本次实验目的是对一株致病性大肠埃希氏菌样本进行生化鉴定，以确认其菌株的性质和特征。
首先，我们进行了气体产生实验。
在Triple Sugar Iron Agar（TSI）培养基中，观察到菌落周围发生了气体产生，此结果表明该菌株具有产气性。
产气性通常意味着大肠杆菌等需要葡萄糖产生酸，进而分解产生气体的细菌。
其次，我们进行了甲烷发酵试验。
在Methyl Red（MR）试剂中，当菌液发酵产酸时，溶液颜色由黄色变成红色。
然而，该菌株在MR试剂中没有产生红色反应，这表明它无法通过甲烷发酵产酸。
这一结果与典型的大肠杆菌不同，因为大肠杆菌通常可以通过此途径产酸。
进一步，我们进行了亮氨酸脱氨酶试验。
使用亮氨酸脱氨酶（LDC）培养基，如果菌株具有亮氨酸脱氨酶活性，菌液会变色。
然而，我们观察到该菌株在培养基中没有出现任何颜色变化，这表明它不具备亮氨酸脱氨酶活性。
亮氨酸脱氨酶活性通常是大肠杆菌的典型特征之一。
此外，我们还进行了尿素酶试验。
使用尿素平板培养基，如果菌株具有尿素酶活性，培养基颜色将由黄色变为粉红色。
然而，我们观察到该菌株在培养基上未显示出任何颜色变化。
这暗示着该菌株可能缺乏尿素酶活性，与大肠杆菌的典型特征不同。
最后，我们进行了青霉素酶试验。
使用青霉素酶试纸进行反应检测，在试纸上出现蓝色点状斑点表示菌株具有青霉素酶活性。
而对于这个菌株，我们观察到在试纸上没有出现蓝色斑点。
这意味着该菌株可能对青霉素类药物敏感，这对于抗生素选择治疗提供了重要信息。
综上所述，通过对致病性大肠埃希氏菌样本进行生化鉴定，我们发现该菌株具有产气性，但与典型的大肠杆菌不同，它不表现出甲烷发酵、亮氨酸脱氨酶和尿素酶活性。
大肠埃希菌的检测
食品加工环节的监控
在食品加工过程中，大肠埃希菌检测可用 于监控生产环境的卫生状况，以及加工过 程中食品是否受到污染。通过定期检测， 可以及时发现并纠正卫生问题，确保食品 的安全性。
临床诊断领域
疑似感染的诊断
在临床诊断领域，大肠埃希菌检测主要用于 疑似感染病例的诊断。当患者表现出类似感 染的症状时，通过检测粪便、尿液等样本中 的大肠埃希菌，可以协助医生确诊是否为大 肠埃希菌感染。
企业标准
01
02
企业可以根据自身需求 和产品特性，制定适用 于自身的企业标准，对 大肠埃希菌的检测方法 和限量进行规定。这些 标准通常会高于国家和 国际标准，以确保产品 质量和消费者安全。
详细描述
03
04
05
国际标准化组织（ISO） 国内标准通常由国家卫 发布的标准是全球范围 生健康委员会或相关部 内广泛接受的大肠埃希 门制定，并强制执行， 菌检测标准，为各国制 是保障食品安全的重要 定相关标准提供了参考 措施。 依据。
抗生素敏感性测试
对于大肠埃希菌感染病例，医生通常需要根 据病菌对不同抗生素的敏感性来选择合适的 药物治疗。通过检测大肠埃希菌对不同抗生 素的敏感性，可以指导临床用药，提高治疗 效果。
环保监测领域
水质监测
在环保监测领域，大肠埃希菌检测可用于水 质监测。水中存在大肠埃希菌可能表明水体 受到污染，可能对人类健康造成威胁。通过 定期检测水源中的大肠埃希菌，可以及时发 现水质问题，并采取相应措施保护公众健康 。
免疫学检测法
总结词
利用抗原-抗体反应的快速检测方法
详细描述
通过采集患者粪便、食物、水源等样本，利用特异性抗体与大肠埃希菌抗原结 合的原理，采用免疫学技术进行检测。该方法具有快速、简便的优点，但可能 会受到交叉反应的干扰，导致假阳性或假阴性结果。
大肠埃希氏菌检验原始记录
五、革兰氏染色试验：用接种针接触菌落（典型菌落或可疑菌落）中心部位，接种至营养琼脂平板上，℃培养h，取培养物进行革兰氏染色试验。
六、鉴定：取营养琼脂培养物进行靛基质试验、MR-VP试验和柠檬酸利用试验。
大肠埃希氏菌检验原始记录
检测项目：大肠埃希氏菌检测依据：GB4789.38-2012（MPN计数法）
生产批号：样品数量：
检测日期：环境湿度：
环境温度：
大肠菌群检验过程：
1、称取样品g（ml）样品放入盛有225ml灭菌的磷酸缓冲液中，充分混匀，制成1：10的样品匀液，用1ml无菌吸管吸取1：10的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：100的样品均液，用1ml无菌吸管吸取1：100的样品匀液1ml，沿管壁缓缓注入盛有9ml生理盐水的无菌试管中，制成1：1000的样品均液。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min。
2、初发酵试验：每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液，每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白胨（LST）肉汤,每管接种1ml，℃培养h，观察倒管内产气情况，产气者进行复发酵试验，如未产气，培养至48h±2h，如产气着进行复发酵试验。如所有LST肉汤管均未产气，即可报告大肠埃希氏菌MPN结果。
三、复发酵试验：用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于已提前预稳至45℃的EC肉汤管中，放入带盖的℃水浴箱内，培养h，检查小倒管内是否有气泡产生，如未有产气则继续培养至48h±2h，记录产气的EC肉汤管数。如所有EC肉汤管均未产气，即可报告大肠埃希氏菌MPN结果；如有产气，则进行EMB平板分离培养。
大肠埃希氏菌检验PPT课件
水处理微生物
知识点 大肠埃希氏菌检验
周小林 副教授
国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库
教学内容
1. 大肠埃希氏菌的性状特点； 2.检测各环节操作规范。
大肠埃希氏菌检验
2
国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库
大肠埃希氏菌检验
教学目标
（1）知识目标
分装试管中，115℃20min。 2．无菌玻璃器皿等用具。
8
国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库
操作要求： EC-MUG结果观察： 将EC-MUG培养基管在暗处用波长为
366nm紫外灯照射，有蓝色荧光的为阳性。 其它操作要求，请参考大肠菌群的检验。
大肠埃希氏菌检验
9
国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库
一、关于大肠埃希氏菌
大肠埃希氏菌检验
大肠埃希氏菌是指能产生β－半乳糖苷酶分解ONPG使培养基呈黄色， 能产生β－葡萄糖醛酸酶分解MUG使培养液在波长366nm紫外光下产生 荧光的细菌。
大肠埃希氏菌（Escherichia coli）通常被称为大肠杆菌，是Escherich 在1885年发现的，在相当长的一段时间内，一直被当作正常肠道菌群 的组成部分，认为是非致病菌。直到20世纪中叶，才认识到一些特殊 血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜（禽），常 引起严重腹泻和败血症。
三、任务考核
大肠埃希氏菌检验
考核内容
考核指标
培养基制作 是否规范
乳糖发酵
无菌操作、整个过程操作的规范性
EC－MUG培养
操作的规范性、荧光的观察判断是否 正确
数量检索与报告 方法是否正确
分值
大肠埃希氏菌
3 设备和材料
3.7 无菌吸管：1 mL（具0.01 mL刻 度）、10 mL（具0.1 mL刻度）或微量 移液器及吸头。 3.8 无菌锥形瓶：容量500 mL。 3.9 无菌培养皿：直径90mm。 3.10 pH计或pH比色管或精密pH试纸。 3.11 菌落计数器。 3.12 紫外灯：波长360nm～366nm， 功率≤6 W。
VRBA－MUG平板计数法
MUG对大肠埃希氏菌的生长繁殖没有抑制 作用也没有促进作用，对菌落形态也没有 影响。经实验发现，在MUG浓度从0 g/mL到200 g/mL的范围内，大肠 埃希氏菌生长繁殖率没有区别。 MUG方法有大约4%的假阴性，特别是倍 受关心的O157:H7菌株为阴性，令人感 到遗憾，但经典的常规方法也同样存在这 样的问题。
6.2 操作步骤
6.2.2.2 将10 mL～15 mL冷至 45℃±0.5℃的结晶紫中性红胆盐琼脂 （VRBA）倾注于每个平皿中。小心旋转 平皿，将培养基与样品匀液充分混匀。 6.2.2.2 …待琼脂凝固后，再加3mL～4 mL VRBA-MUG覆盖平板表层。凝固后 翻转平板，36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h。
研究还证实，大肠埃希氏菌荧光反应比产 气反应出现得更早，并且不受食品的影响， 仅发现对牡蛎直接进行的检验不适合用 MUG方法，法
本标准采用的VRBA-MUG平板计数方法， 正是以上述理论为依据，参照FDA方法而 确立的，检验时间为18 h～24 h，并能 准确测出样品中大肠埃希氏菌的CFU数值， 操作简便，但对于对染菌量低（如＜10 CFU/g）的样品不如MPN法适用。
5.2.1 样品的稀释
5.2.1.5 根据对样品污染状况的估计，按 上述操作，依次制成10倍递增系列稀释样 品匀液。每递增稀释1次，换用1支1 mL 无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品 接种完毕，全过程不得超过15 min。
致病性大肠埃希氏菌及其检验
5）在鲜血琼脂平板上生长，有些菌株可见β溶血环。 6）在远藤琼脂上长成带金属光泽的红色菌落 7）在S．S琼脂平板上多不生长，少数生长的细菌， 也因发酵乳糖产酸而形成红色菌落； 8）在伊红美兰琼脂上形成紫黑色具有金属光泽的菌 落 9）在麦康凯琼脂上培养24小时后孤立菌落呈红色 •
埃希氏菌在S．S琼脂平板上形成红色菌落
• 在麦康基培养基上培养的大肠埃希杆菌 大肠埃 希杆菌产生粉红色乳糖发酵菌落。麦康基培养基 是肠道细菌的选择培养基，含胆盐、乳糖和pH指 示剂中性红。乳糖发酵菌落产生酸，将指示剂变 红。（麦康基琼脂，18小时，37℃）
革兰氏阴性杆菌
革兰氏阳性杆菌
大肠杆菌扫描电镜照片
大肠杆菌透射电镜照片
大肠杆菌革兰氏染色照片
致病性大肠埃希氏菌的检验
（四）血清学试验 • 假定试验： 从平板上选菌落生长稠密处挑取培养物，用致病 性大肠埃希氏菌、侵袭性大肠埃希氏菌、产肠毒 素大肠埃希氏菌多价O血清和出血性大肠埃希氏菌 O157血清做玻片凝集试验。不凝集的培养物可做 阴性报告。当与某一种多价O血清凝集时,再与该 多价血清所包含的单价血清做实验,如与某一种单 价O血清呈现强烈的凝集反应,即为假定实验阳性. 不凝集的培养物可做阴性报告。
一、埃希氏菌属生物学特性
致病性：（2）所致疾病 • 肠外感染：泌尿系统感染最常见病原菌。还可引 起胆囊炎、肺炎、新生儿或婴儿脑膜炎。 • 腹泻：产毒素大肠杆菌是婴儿及旅游者腹泻的主 要原因；致病性大肠杆菌是婴儿腹泻的主要原因； 侵袭型大肠杆菌主要引起较大儿童和成年人腹泻。
一、埃希氏菌属生物学特性
C-枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
• 利用枸橼酸盐生长 + • 不能利用 •
致病性大肠埃希氏菌及其检验
详细描述
水源污染事件中，致病性大肠埃希氏菌的来源可能是生活污水、农业污水或工业废水等 。这种细菌可能通过污水排放进入水源，进而污染饮用水。在发展中国家或卫生条件较 差的地区，水源污染问题尤为突出，可能导致大规模的腹泻和肠道疾病流行。因此，对
控制措施
采取合理的抗生素使用策略、加强感染防控措施、提高公众 卫生意识等手段可以有效控制致病性大肠埃希氏菌的抗药性 。
04
致病性大肠埃希氏菌的预防和治疗
预防措施
保持个人卫生
经常洗手，避免接触污染水源，避免食用不洁食物。
饮食卫生
加强食品卫生监管，避免摄入污染的食品和水。
疫苗接种
针对高风险人群，如儿童和老年人，接种针对性的疫 苗。
详细描述
食源性疾病暴发通常与食品污染有关，而致病性大肠埃希氏菌是常见的污染源之一。这种细菌可能存在于畜禽、 水产以及蔬菜等食品中，导致消费者食用后出现中毒症状。在某些情况下，致病性大肠埃希氏菌还可能产生毒素 ，如志贺毒素和肠毒素，进一步增加疾病暴发的危险性。
水源污染事件中的致病性大肠埃希氏菌
总结词
培养温度
将培养基置于37℃左右的恒温 箱中培养，在24-48小时内观 察菌落形态。
菌落形态
致病性大肠埃希氏菌在显色培 养基上形成圆形、湿润、光滑 、半透明的菌落，呈紫黑色或 绿色。
染色观察
用革兰氏染色法处理菌落，可 见致病性大肠埃希氏菌为革兰 氏阴性短杆菌。
免疫学检测技术
酶联免疫吸附试验（ELISA）
THANK YOU
感谢聆听
DNA芯片技术
将致病性大肠埃希氏菌的基因片 段固定在芯片上，用标记过的探 针进行杂交检测。
大肠埃希氏菌生化鉴定结果
大肠埃希氏菌生化鉴定结果1. 引言大肠埃希氏菌（Escherichia coli）是一种常见的革兰阴性杆菌，属于肠道菌群中的一员。
它具有重要的生化特性，可以通过生化鉴定方法进行鉴定和分类。
本文将对大肠埃希氏菌的生化鉴定结果进行全面详细、完整且深入的介绍。
2. 生化鉴定方法大肠埃希氏菌的生化鉴定方法主要包括传统的碳水化合物发酵试验和生化酶试验。
2.1 碳水化合物发酵试验碳水化合物发酵试验可以通过观察菌株对不同碳水化合物的发酵能力来鉴定大肠埃希氏菌。
常用的碳水化合物发酵试验包括：•葡萄糖发酵试验：大肠埃希氏菌能够利用葡萄糖进行酸和气体的产生。
•乳糖发酵试验：大肠埃希氏菌能够利用乳糖进行酸和气体的产生。
•蔗糖发酵试验：大肠埃希氏菌能够利用蔗糖进行酸和气体的产生。
•麦芽糖发酵试验：大肠埃希氏菌不能利用麦芽糖进行发酵。
2.2 生化酶试验生化酶试验可以通过观察菌株对特定酶的产生情况来鉴定大肠埃希氏菌。
常用的生化酶试验包括：•青霉素酶试验：大肠埃希氏菌能够产生青霉素酶。
•氧化/还原酶试验：大肠埃希氏菌能够产生氧化酶和还原酶。
3. 大肠埃希氏菌生化鉴定结果根据碳水化合物发酵试验和生化酶试验的结果，可以得出大肠埃希氏菌的生化鉴定结果。
3.1 碳水化合物发酵试验结果根据菌株对不同碳水化合物的发酵能力观察，可以得出大肠埃希氏菌的碳水化合物发酵试验结果。
碳水化合物发酵情况葡萄糖阳性碳水化合物发酵情况乳糖阳性蔗糖阳性麦芽糖阴性根据以上结果，菌株对葡萄糖、乳糖和蔗糖的发酵情况均为阳性，而对麦芽糖的发酵情况为阴性，因此可以初步判断该菌株为大肠埃希氏菌。
3.2 生化酶试验结果根据菌株对特定酶的产生情况观察，可以得出大肠埃希氏菌的生化酶试验结果。
生化酶产生情况青霉素酶阳性氧化酶阳性还原酶阳性根据以上结果，菌株能够产生青霉素酶、氧化酶和还原酶，因此可以确定该菌株为大肠埃希氏菌。
4. 结论根据碳水化合物发酵试验和生化酶试验的结果，我们可以得出结论：鉴定结果表明该菌株为大肠埃希氏菌。
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埃希氏大肠菌及检验
一、定义：
大肠埃希氏菌更习惯称为大肠杆菌，分类于肠杆菌科，归属于埃希氏菌属，并且大肠杆菌株ATCC 11775是该属的模式菌种。
大肠杆菌的不同菌株间DNA相关性为80%，而与同科的志贺氏菌属（除鲍氏志贺氏菌外）的DNA相关性可达80-87%。
与人类疾病有关的大肠杆菌，统称为致泻性大肠杆菌（此名称不易与致病性大肠杆菌相混淆），一般包括五种：即肠毒素性大肠杆菌（ETEC）、致病性大肠杆菌（EPEC）、出血性大肠杆菌（EHEC）、侵袭性大肠杆菌（EIEC）和粘附性大肠杆菌（EAEC）。
文献报道还有几种，象：凝集性大肠杆菌、即产VT毒素又具有侵袭性的大肠杆菌等，但目前尚未达成统一共识。
二、生物学特性：
基本形态特征：
此菌为两端钝圆的短小杆菌，一般大小约0.5μ-0.8μm*1.0μm-3.0μm,因生长条件不同，个别菌体可呈近似球状或长丝状。
此菌多单独存在或成双，但不呈长链状排列。
约有50%左右的菌株具有周生鞭毛而能运动，但多数菌体只有1-4根，一般不超过10根，故菌体动力弱；多数菌株生长有比鞭毛细、短、直且数量多的菌毛，有的菌株具有荚膜或微荚膜；不形成芽胞，对普通碱性染料着色良好，革兰氏染色阴性。
培养特征：
由于此菌合成代谢能力强，在含无机盐、胺盐、葡萄糖的普通培养基上生长良好。
最适生长温度为37℃，在42-44℃条件下仍能生长，生长温度范围为
15-46℃。
在普通营养琼脂上生长表现3种菌落形态：（1）光滑型：菌落边缘整齐，表面有光泽、湿润、光滑、呈灰色，在生理盐水中容易分散。
（2）粗糙型：菌落扁平、干涩、边缘不整齐，易在生理盐水中自凝。
（3）粘液型：常为
含有荚膜的菌株。
此菌兼性厌氧，在有氧条件下生长良好，最适生长pH为
6.8-8.0，所用培养基pH为
7.0-7.5,若pH值低于6.0或高于
8.0则生长缓慢。
生化反应与血清学反应
大肠杆菌属于卫生学意义的大肠菌群和粪大肠菌群的范畴，因此，必须符合大肠菌群和粪大肠菌群的有关定义，在检测大肠菌群、粪大肠菌群的基础上，可以应用I（吲哚）、M（甲基红）、Vi（3羟基-2-丁酮）、C（柠檬酸）即IMViC 生化试验对大肠杆菌作进一步鉴定，其IMViC结果为++--或-+--。
生化反应是鉴定大肠杆菌的主要方法之一，然而，大肠杆菌之间生化反应的差异非常常见，象：许多菌种非/迟发酵乳糖，但并不说明它们遗传上有明显不同，生化反应非典型的大肠杆菌菌株与典型菌株的DNA相关性在85%-100%。
附表1为大肠杆菌生化反应特性表。
其中H2S、脲酶、阿糖酸、吲哚、ONPG试验常为首选生化反应，其余为进一步的生化试验。
大肠杆菌在赖氨酸脱羧酶、粘质酸盐、醋酸盐生化试验中，有一项或多项试验阳性，且厌氧性生长弱，有动力和吲哚试验阳性可与志贺氏菌相鉴别。
大肠杆菌的血清学反应，往往是对经分离、鉴定、确证为大肠杆菌的进一步分型，常不作为常规方法使用。
附表2所列主要致泻性大肠杆菌的血清型。
对大肠杆菌的分型鉴定工作，基层检验单位若有要求时，可与各地所属出入境检验检疫局实验室联系，委托进行血清学鉴定工作。
三、大肠杆菌的抵抗力：
此菌对理化因素的抵抗力，在无芽胞菌中是最强的一种，在室温可存活数周，在土壤、水中存活数月，耐寒力强，但是在30分钟内快速冷冻，将37℃降至4℃的过程，可杀死此菌。
加热60℃，30分钟，此菌可灭活。
对漂白粉，酚、甲醛等较敏感，水中1ppb氯可杀死此菌。
此菌耐胆盐，在一定程度上能抵抗煌绿等染料的抑菌作用，在选择性培养基配制上，常利用此菌这一性质。
四、卫生学意义与流行学
由于大肠杆菌是人及各种动物肠道中的正常寄居菌，常随粪便从人及动物体排出，广泛散播于自然界，所以一旦检出大肠杆菌，即意味着直接或间接地被粪便污染，而在卫生学上被用于饮水，牛奶或食品等的粪源性污染卫生细菌学指标；并且由于大肠杆菌在外界存活时间与一些主要肠道病原菌相近，它的出现也可能预示着某些肠道病原菌（例：沙门氏菌、志贺氏菌）的存在，因此该细菌是国际上公认的卫生监测指示菌。
近来，有些国家在执行HACCP管理中，将大肠杆菌检测作为微生物污染状况的监测指标和HACCP实施效果的评估指标。
致泻性大肠杆菌是引起人体以腹泻症状为主的全球性疾病，其中尤以EPEC、ETEC所占比例为大。
附表3是我国部分省市主要腹泻病原体检出率情况，尽管目前报道各地主要腹泻病是由志贺氏菌或轮状病毒引起的，但是，多年来，致泻性大肠杆菌引起的腹泻病例始终位于第二位，可见大肠杆菌肠道传染的广泛性。
还有，致泻性大肠杆菌亦可常年引发人体腹泻，以夏秋季为高峰，在患者感染住院率中，婴幼儿占60%以上。
近来，EHEC O157：H7为世界卫生组织（WHO）定为新的食源性致病菌，其引发的出血性肠炎的暴发或散发病例，自1983年以来在北美州（美国、加拿大）地区逐年增多，英国、日本亦有爆发和散发病例报道，我国也发现散发病例，尚未有爆发EHEC的报道。
附表4为近几年EHEC的污染状况。
五、大肠杆菌检验程序图解：
检样
↓
LST肉汤
↓37℃，48h
LST肉汤管阳性（疑似大肠菌群）
↓37℃，48h ｜
EC肉汤BGLB肉汤管阳性（证实大肠菌群）
↓44℃，24h 按BGLB肉汤产气管数，查MPN表，报告大肠菌群MPN/g
EC肉汤产气管为阳性（粪大肠菌群）
查MPN表，报告粪大肠菌群MPN/g
阳性管再培养24h
EMB平板分离
↓ 37℃，24h
黑色菌落移种营养琼脂斜面
LST肉汤IMViC生化试验革兰氏染色
产酸产气 ++--/-+-- 无芽胞G-杆菌
大肠杆菌
按EC肉汤产气管数，查MPN表，报告大肠杆菌MPN/g
说明：
1、由于大部分致泻性大肠杆菌在6℃条件中可失去活力，故大肠杆菌的定性检测比定量检测更适宜。
如果确有大肠杆菌定量检测要求的话，可用MPN法或终点稀释法进行。
2、基层单位如有大肠杆菌生化鉴定要求或大肠杆菌血清学分型要求，可委托属地出入境检验检疫局进行检验。
3、检测大肠杆菌的MUG法和膜过滤法，可参阅有关标准说明进行。
4、国标法与FDA方法，在所用培养基、检验程序上略有差异，但不影响大肠杆菌检验结果的准确性。
本章介绍的方法，可详见SN 0169-92标准。