丁香酚和BSA的荧光测定
abda单线态氧指示剂实验方案
abda单线态氧指示剂实验方案以下是一份简单的实验方案，以测定ABDA单线态氧指示剂与单线态氧的反应：一、实验目的本实验旨在研究ABDA（9,10-蒽二基-双（亚甲基）二甲酸）单线态氧荧光探针与单线态氧的反应特性，通过分光光度法和荧光光谱法监测反应过程，为进一步研究单线态氧与生物分子间的相互作用提供参考。
二、实验原理ABDA是一种水溶性的蒽衍生物，可以与单线态氧发生反应，光漂白生成对应的内过氧化物。
通过分光光度法和荧光光谱法监测400nm处光密度的降低和荧光强度的变化，可以了解ABDA与单线态氧的反应特性。
三、实验步骤1. 准备试剂和样品：ABDA、单线态氧生成剂（如空隙二氧化硅纳米颗粒、Pc4SNP等）、缓冲液（如 M磷酸盐缓冲液，pH ）。
将ABDA溶解在缓冲液中制备成适当浓度的溶液。
2. 实验操作：取适量ABDA溶液置于比色皿中，记录初始吸收光谱和荧光光谱。
然后加入单线态氧生成剂，迅速混合均匀。
记录反应过程中的光谱变化。
3. 数据处理：分析光谱数据，计算400nm处光密度的降低和荧光强度的变化。
通过对比不同浓度的ABDA和单线态氧生成剂，分析反应动力学和反应速率常数。
四、注意事项1. ABDA对光敏感，实验过程中需避免长时间直射。
2. 单线态氧不稳定，易与氧气发生反应，因此需在无氧条件下操作。
3. ABDA溶液应存放在棕色瓶中，避免长时间暴露在空气中。
4. 实验过程中需保持恒温，以减小温度对反应的影响。
5. ABDA具有一定的细胞毒性，操作时需戴好防护眼镜和实验服，避免直接接触皮肤和眼睛。
以上实验方案仅供参考，实际操作时请根据实验室条件和安全要求进行适当调整。
基于牛血清白蛋白荧光探针的盐酸特拉唑嗪含量测定
基于牛血清白蛋白荧光探针的盐酸特拉唑嗪含量测定季仁东;赵志敏;张吉华;陈梦岚;朱星玥【摘要】对牛血清白蛋白(BSA)与盐酸特拉唑嗪(THD)混合体系进行了荧光发射光谱和同步光谱实验研究.BSA溶液在340 nm处有明显荧光特征峰,当加入THD后导致牛血清白蛋白发生内源荧光猝灭.据此建立了以BSA为探针的THD含量测定方法,通过该方法所得的模型函数相关系数都高于0.99.对所得模型函数进行了实验验证,其中发射光谱模型函数回收率为96.04％～ 103.16％,同步光谱模型函数回收率为100.41％～105.58％,相对标准偏差分别为3.70％和2.42％.荧光发射光谱和同步光谱方法的检出限分别为0.64×10-8 mol/L和0.66×10-8 moL/L,定量限分别为0.21×10-7 mol/L和0.22×10-7 mol/L.【期刊名称】《发光学报》【年(卷),期】2014(035)008【总页数】4页(P1014-1017)【关键词】牛血清白蛋白;盐酸特拉唑嗪;荧光光谱;含量检测【作者】季仁东;赵志敏;张吉华;陈梦岚;朱星玥【作者单位】南京航空航天大学理学院,江苏南京210016;淮阴工学院电子与电气工程学院,江苏淮安223003;南京航空航天大学理学院,江苏南京210016;南京航空航天大学理学院,江苏南京210016;南京航空航天大学理学院,江苏南京210016;南京航空航天大学理学院,江苏南京210016【正文语种】中文【中图分类】O433.41 引言高血压病是日常生活中最常见的一种慢性病之一，是引发心、脑血管和肾病变的一个重要的危险因素，且高血压病患者在治疗期间需要长期服药，有的甚至需要终身服药。
盐酸特拉唑嗪(Terazosin hydrochloride，THD)为选择性α1受体阻滞剂，它通过扩张血管降低外周阻力降低血压［1-2］，初始用药或者增加剂量时可能发生眩晕、轻度头痛或嗜睡等症状，因此为了避免药剂过量所带来的不良反应，建立一种快速有效的检测方法是有必要的［3］。
活血止痛纳米凝胶贴膏经皮渗透特性及药效评价
活血止痛纳米凝胶贴膏经皮渗透特性及药效评价目的研究微乳/醇质体对活血止痛凝胶贴膏的经皮渗透特性及对药效的影响。
方法采用改进的Franz扩散池法进行体外透皮试验，以离体小鼠皮肤为透过屏障，采用超高效液相色谱法测定指标成分丹皮酚、丁香酚、水杨酸甲酯的含量，评价活血止痛凝胶贴膏的经皮渗透效果。
并采用小鼠醋酸扭体实验比较其抗炎镇痛作用。
结果凝胶贴膏、微乳凝胶贴膏和醇质体凝胶贴膏丹皮酚24 h累计透过率分别为65.30%、61.30%、60.20%，丁香酚24 h累计透过率分别为51.08%、54.71%、55.66%，水杨酸甲酯24 h累计透过率分别为49.20%、65.17%、72.15%。
微乳凝胶贴膏大剂量组、醇质体凝胶贴膏中剂量组对减少模型动物腹腔内毛细血管的炎性渗出、降低毛细血管通透性有较好的作用（P＜0.05）。
结论基于微乳/醇质体技术的复合型纳米载体可使活血止痛凝胶贴膏中有效成分透过皮肤屏障的能力更优，从而提高药效。
标签：活血止痛凝胶贴膏；微乳；醇质体；透皮试验；抗炎；镇痛活血止痛膏由干姜、陈皮、丁香、胡椒、荆芥、牡丹皮、水杨酸甲酯等28味中药组成，具有活血止痛、舒筋活络功效，主治筋骨疼痛、肌肉麻痹、痰核流注、关节酸痛[1]。
原剂型为橡胶膏剂，上市多年，疗效确切，被广泛使用。
由于橡胶膏剂透气性差、易致敏[2]，故将其改为凝胶贴膏。
活血止痛膏处方均含有挥发油等脂溶性成分，而凝胶贴膏是以水溶性高分子材料为基质的外用贴剂，为保证处方药与基质的高度融合，提高制剂稳定性，本研究以凝胶贴膏为载体，微乳/醇质体[3-5]为释药系统，制备复合型纳米经皮给药制剂，在解决脂溶性成分与水溶性基质相容性的同时，利用微乳、醇质体纳米化的优势，促进药物经皮渗透。
以方中脂溶性成分丹皮酚、丁香酚、水杨酸甲酯为定量指标，考察体外经皮渗透特性和对药效的影响，评价微乳、醇质体在中药复方经皮给药制剂中应用的可行性。
1 仪器、试药与动物Waters Acquity HPLC H-Class Core System超高效液相色谱仪，BSA224S CW 型電子分析天平（德国赛多利斯公司），TK-20B型Franz扩散池（上海锴凯有限公司），透析袋（截留相对分子质量7000，北京经科宏达生物技术有限公司），Z92-BD多功能搅拌器（天津利华仪器厂）。
荧光光度法直接测定环境水中苯酚和十二烷基苯磺酸钠的含量
荧光光度法直接测定环境水中苯酚和十二烷基苯磺酸钠的含量王化南;梅建庭
【期刊名称】《分析化学》
【年(卷),期】1995(23)7
【摘要】本文研究了用荧光分光光度法直接测定环境水中苯酚和十二烷基苯磺酸
钠（ＳＤＢＳ）二种水中污染物。
在ｐＨ〉１１直接测定ＳＤＢＳ含量，波长为λｅｘ／λｅｍ＝２３０／２９５ｎｍ，检出限４．４ｎｇ／ｍＬ，线性范围０￣２．２μｇ／ｍｌ。
在ｐＨ＝６，波长为λｅｘ／λｅｍ＝２３０／２９５ｎｍ，测得二者合量，从合量中减去ＳＤＢＳ含量即得苯酚含量，检出限４．０ｎｇ／ｍｌ，线性范围０￣０．８５μｇ／ｍＬ，回收率达９９％￣
【总页数】3页(P787-789)
【作者】王化南;梅建庭
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】X132
【相关文献】
1.导数分光光度法直接测定环境水中的十二烷基苯磺酸钠 [J], 刘水福;司徒丽华;李茂植
2.荧光法直接测定环境水中十二烷基苯磺酸钠 [J], 梅建庭;郝炎
3.荧光光度法直接测定环境水中十二烷基苯磺酸钠 [J], 张玉新
4.荧光光度法直接测定环境水中的苯酚和苯胺 [J], 张文伟;辛长波;李晓辉;杨梅
5.荧光法直接测定环境水中邻羟基苯甲酸和苯酚混合物的含量 [J], 张文伟;杨梅;李晓辉;王化南
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生物碱类药物含量测定方法
生物碱类药物含量测定方法
生物碱是一类具有生物活性的碱性化合物，在自然界中广泛存在，尤其在植物和微生物中含量丰富。
生物碱的含量测定方法有多种，常用的方法包括比色法、紫外-可见分光光度法、荧光法、薄层色谱法、高效液相色谱法等。
1.比色法：该方法是通过生物碱与特定的显色剂发生化学反应，
生成有色离子或分子，根据颜色的深浅程度进行含量测定的方
法。
例如，苦参碱可以通过与溴甲酚绿显色剂发生反应来进行
含量测定。
2.紫外-可见分光光度法：该方法是通过测量生物碱溶液在紫外和
可见光区的吸收光谱，进而计算其含量的方法。
例如，盐酸吗
啡碱可以在254nm波长处进行含量测定。
3.荧光法：该方法是利用生物碱分子在特定波长激发下发出的荧
光强度来计算其含量的方法。
例如，荧光素钠在紫外光激发下
可以发出绿色荧光，可以用于含量测定。
4.薄层色谱法：该方法是利用生物碱在不同极性溶剂中的分配系
数差异，将样品溶液展开在薄层板上，然后用显色剂显色，根
据斑点面积或荧光强度来计算生物碱的含量。
5.高效液相色谱法：该方法是利用高效液相色谱仪对生物碱进行
分离和检测，然后根据峰面积或峰高来计算生物碱的含量。
该
方法具有分离效果好、灵敏度高、重现性好等优点，是生物碱
含量测定的常用方法之一。
浊点萃取-荧光光度法测定水中的苯酚
浊点萃取-荧光光度法测定水中的苯酚王红艳;王聪;苏永祥;许文文;章林霞【摘要】基于非离子表面活性剂Triton X-100,以浊点萃取结合荧光光度法测定水中的苯酚,考察影响浊点萃取的各种因素.在pH=3.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲溶液中,采用2.0 mL Triton X-100(5％)、82℃平衡温度、8 min平衡时间的条件下,苯酚被萃取到Triton X-100表面活性剂相与水相分开,用于环境水样中苯酚的测定,结果令人满意.【期刊名称】《中国无机分析化学》【年(卷),期】2015(005)003【总页数】5页(P11-15)【关键词】苯酚;浊点萃取;荧光光度法;环境水样【作者】王红艳;王聪;苏永祥;许文文;章林霞【作者单位】宿州学院化学化工学院,宿州学院自旋电子与纳米材料安徽省重点实验室,安徽宿州234000;宿州学院化学化工学院,宿州学院自旋电子与纳米材料安徽省重点实验室,安徽宿州234000;宿州学院化学化工学院,宿州学院自旋电子与纳米材料安徽省重点实验室,安徽宿州234000;宿州学院化学化工学院,宿州学院自旋电子与纳米材料安徽省重点实验室,安徽宿州234000;宿州学院化学化工学院,宿州学院自旋电子与纳米材料安徽省重点实验室,安徽宿州234000【正文语种】中文【中图分类】O657.34;TH744.16酚类化合物具有致癌、致畸、致突变的潜在毒性［1］。
苯酚是含酚废水中有毒有害物质的主要成分，因其来源广，危害大，国家环保局已将其列为环境监测的重要项目［2］。
测定苯酚方法主要有蒸馏萃取分光光度法、高效液相色谱法、紫外可见分光光谱法、荧光光度法、化学发光法等［3-5］，除分光光度法外，其余方法均需要复杂的样品前处理过程和昂贵的检测仪器［6-7］。
分光光度法所需仪器简单，操作简便，但它的灵敏度不佳［8］。
若结合适当的分离富集手段，则可大大提高分光光度法的灵敏度［9］。
传统的液-液萃取技术操作步骤繁琐，萃取过程中需要用有机溶剂，不仅耗费人力资源还会污染环境，浊点萃取法弥补了传统萃取技术的缺陷［10-13］。
维生素B1(硫胺素)的荧光测定法
维生素B1（硫胺素）的荧光测定法实验原理维生素B1（硫胺素）属于水溶性维生素，在碱性高铁氰化钾通夜中，能被氧化成一种蓝色的荧光化合物－硫色素，在紫外线下，硫色素发出荧光。
在给定条件下，以及没有其他荧光物质干扰时，此荧光之强度与硫色素的浓度成正比。
利用人造沸石对维生素B1的吸附作用去除样品中的干扰荧光测定的杂质，然后洗脱维生素B1, 测定其荧光强度。
试剂和器材一、试剂碱性高铁氰化钾：1mL 1％的高铁氰化钾溶液，用15％NaOH 稀释至15m L。
2.5 mmol/L无水NaAc溶液：205g无水NaAc用水溶解并稀释至1000mL。
25％酸性KCl溶液：8.5mL浓HCl用25％KCl溶液稀释至1000mL。
25%KCl溶液; 无水正丁醇; 15％NaOH溶液; 20％(w/v)连二亚硫酸钠（Na2S2O4）; 0.04%溴甲酚绿指示剂。
维生素B1标准液的配制：A) 维生素B1标准储备液（25μg/mL）：准确称取标准品维生素B1 100mg溶于0.01mmol/L盐酸中，稀释至1000mL，于冰箱中保存。
B) 维生素B1标准工作液：维生素B1标准储备液稀释100倍，用冰醋酸调至pH4.5。
避光，贮于4℃冰箱。
二、材料麸皮。
三、器材试管1.5×15cm（×4），移液管10mL（×1）, 5 mL（×4）；带塞锥形瓶250mL（×1），沸水浴，布氏漏斗，人造沸石，荧光分光光度计。
操作方法一、样品制备称取2~10g样品于100mL三角瓶中，加入50Ml 0.1mol/L盐酸，搅拌直到颗粒物分散均匀，在沸水浴中水解样品30min。
水解液冷却后，滴加2mol/L醋酸钠，用0.04%溴甲酚绿作外指示剂调至pH为4.5。
离心10min，3000r/min。
向上清液中加入人造沸石2－4g，振摇30min，用布氏漏斗抽滤，用蒸馏水洗涤沸石3次，洗液弃去。
然后用5mL酸性KCl搅拌，洗脱3次，洗脱液合并，并用25％酸性KCl溶液定容至25ML。
食用油中苯并芘的分析（紫外分光光度法）
食用油中苯并[a]芘的分析（紫外分光光度法）一、原理将食用油样品的环己烷溶解液与DMSO进行液-液分配，借助PAH与BaP 共轭体系π-键系统与DMSO分子中的S原子相互作用，使PAH与BaP富集于DMSO中，BaP在DMSO-环己烷中的分配系数为5.1，两次分配即达90%以上的富集效率。
而脂肪烃和其他脂溶性化合物仍留在环己烷中，从而达到PAH与脂肪烃的分离。
当DMSO液加水或加稀盐酸，立即使DMSO-π键离析，再用环己烷反提取PAH或BaP，制备成BaP的环己烷溶解液，部分极性化合物或非烃杂质仍留在稀的DMSO中。
用乙酰化纸层分离BaP，在紫外分光光度计上进行测定。
紫外分光光度法测定BaP的原理是由于BaP或PAH分子存在着共轭双键π-电子系统，所有的π轭系统均对紫外光有不同程度的吸收。
BaP对紫外特征吸收峰为385nm，以此作为BaP的定性测定的依据。
（为进一步除去烷烃和极性较强的杂质，将BaP或PAH的环己烷液通过氧化铝柱，借助PAH与BaP分子中存在着较多的共轭双键，致使它们在氧化铝上的吸附保留特性比烷烃强。
从而换用不同的溶剂进行洗脱，使烷烃、芳烃与极性化合物再度分离。
）紫外分光光度法适用于BaP含量在76-30000μg/kg的样品。
附：◆二甲基亚砜(dimethylsulfoxide，DMSO)是一种强吸湿性液体，无色无臭，相对密度为1.100，熔点为18．45℃，沸点为189℃，折射率为1.4795。
它是一种既溶于水又溶于很多有机溶剂的非质子极性溶剂。
DMSO在芳烃抽提中作为萃取溶剂，具有对芳烃的选择性高，常温下对芳烃无限制混溶，萃取温度低，且不与烷烃、烯烃、水反应、无腐蚀、无毒，萃取工艺简单、设备少、节能，不溶于烯烃，适合含烯烃高的油料，溶剂回收可用反萃取等优点。
DMSO对烷烃不溶，因此可用于食品蜡、食用白油的精制和治癌物的检测中。
DMSO对乙炔易熔，用于石油气中乙炔回收和溶解乙炔生产中。
碱性介质中茜素黄R与牛血清白蛋白作用的荧光法研究
碱性介质中茜素黄R与牛血清白蛋白作用的荧光法研究张欢;王兴明;王清成;石荣铭;丁立生【期刊名称】《光谱学与光谱分析》【年(卷),期】2006(26)8【摘要】在碱性条件下,采用荧光光谱法研究了茜素黄R(alizarin yellow R,AYR)与牛血清白蛋白(BSA)结合反应的光谱特征.研究表明,pH 11.00,激发波长为393 nm时,BSA的发射峰位于641 nm,且AYR对BSA有较强的荧光猝灭作用,AYR在BSA分子上荧光敏感部位有五个结合位点;由温度对AYR-BSA体系荧光猝灭速率的影响和动态猝灭常数Ksv以及静态猝灭结合常数KLB的计算得出,AYR对BSA 内源荧光的猝灭机制属于形成BSA-AYR复合物的静态猝灭,荧光猝灭常数为1.6×104 L·mol-1;由反应前后热力学函数ΔHθ＜0,ΔSθ＜0以及AYR对BSA-CBBG(CBBG-考马斯亮蓝G)体系具有荧光猝灭作用推出,茜素黄R与牛血清白蛋白之间的作用力主要是氢键和范德华力.【总页数】5页(P1508-1512)【作者】张欢;王兴明;王清成;石荣铭;丁立生【作者单位】西南科技大学材料科学与工程学院化学系,四川,绵阳,621010;西南科技大学材料科学与工程学院化学系,四川,绵阳,621010;西南科技大学材料科学与工程学院化学系,四川,绵阳,621010;西南科技大学材料科学与工程学院化学系,四川,绵阳,621010;中国科学院成都生物研究所,四川,成都,610041【正文语种】中文【中图分类】O675.3【相关文献】1.茜素黄R与牛血清白蛋白光谱学及分子对接研究 [J], 吴承燕2.碱性介质中茜素黄R与牛血清蛋白相互作用研究 [J], 胡亚敏;蒋琪英;张欢;迟燕华;李小凯3.茜素黄与牛血清白蛋白相互作用特征的荧光光谱法研究 [J], 颜承农;刘晶;刘义4.酸性介质中茜素黄R与牛血清白蛋白相互作用研究 [J], 吴承燕5.荧光法研究碱性介质中吡哆醛(VB_6)与几种氨基酸及谷胱甘肽的相互作用 [J], 李萌;谢青季;姚守拙因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
荧光光谱标准加人法测定苯甲酸钠的含量
荧光光谱标准加人法测定苯甲酸钠的含量我国国标G B2 7 6 O一19% 规定食品中苯丙酸钠含量低于0. 2g/Kg , 苯甲酸和苯甲酸钠作为防腐剂适用范围: 碳酸饮料、低盐酱菜、酱类、蜜饯、葡萄酒、果酒、软糖、酱油、食醋、果酱(不包括罐头)、果汁(味)型饮料、食品工业塑料桶装浓缩果汁。
《绿色食品食品添加剂使用准则》中规定绿色食品中禁用苯甲酸钠和苯甲酸。
当前对苯甲酸钠的测定方法主要有: 滴定法、紫外分光光度计法、液相色谱法、毛细管电泳法等,而被研究所用的是荧光光谱法, 其优点主要是测量准确、灵敏度高、选择性强。
1 实验部分1 主要的试剂和仪器试剂: 苯甲酸钠(纯度> 9 9. 5 % , 上海来泽精细化学品研究所), NaA c·3H2O (纯度>9 9 % , 宜兴市第二化学试剂厂), 浓盐酸(纯度36 % 一38 % , 莱阳市康德化工有限公司), 饮料(市售, 密度1.00 9g/m L), 试验用水为二次蒸馏水。
仪器: 日立8 50 型荧光分光光度计, p H 计(3 20 一s , 梅特勒一托利多仪器(上海)有限公司)容量瓶(100ml) 电分析天平(0.0001g)1.2 主要方法1.2.1 N aA c 一H A C 缓冲溶液的配制精密称取2. 7 2g Na A c·3H ZO 晶体, 重蒸水溶解后转移至10 0 m L 的容量瓶中, 用1mol / L 的盐酸溶液调解p H 值为2. 5 , 加重蒸水至刻度, 即得到p H 值为2. 5 的Na A c 一HA C 缓冲溶液。
1.2. 2 标准溶液的配制精密称取0. 0 2g 苯甲酸钠晶体,蒸馏水溶解后定容于l00 m L 容量瓶中, 既可配成0. 2 g/L 的苯甲酸钠溶液。
1.2. 3.l 苯甲酸钠的荧光发射光谱的测定:以2 7 On m 为检测波长, 从260 一400n m 进行扫描, 窄缝宽度为5n m 。
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丁香酚与BSA的荧光测定
丁香酚和BSA的荧光测定
丁香酚溶液的荧光测定
仪器：RF5301pc
试剂：丁香酚、牛血清白蛋白、无水乙醇
光谱：激发光：EX 280
发射光：EM 343
测定：
结果：
管号 丁香酚 无水乙醇 去离子水 BSA
1 0.1 4.9 5 0
2 0.2 4.8 5 0
3 0.3 4.7 5 0
4 0.4 4.6 5 0
5 0.5 4.5 5 0
6 0.6 4.4 5 0
7 0.7 4.3 5 0
CK 0 5 5 0
丁香酚 荧光强度 波长 File 通道
CK 181.587 556.959 CK150903 0
0.1 218.498 557.069 15090301 7
0.2 248.487 558.007 15090302 6
0.3 269.826 559.001 15090303 5
0.4 291.741 559.056 15090304 4
0.5 315.387 560.049 15090305 3
0.6 355.757 561.042 15090306 2
0.7 389.784 562.864 15090307 1
丁香酚溶液的荧光测定