GC法测定丁香罗勒油中丁香酚的含量
罗勒子脂溶性成分的GC-MS法及GC法分析
罗勒子脂溶性成分的GC-MS法及GC法分析
孙莲;阿不都许库尔;符继红
【期刊名称】《中成药》
【年(卷),期】2012(034)005
【摘要】目的分析测定罗勒子脂溶性成分的组成.方法采用索氏提取法提取罗勒
子中的脂溶性成分,并用气相色谱法-质谱法分析其组成,气相色谱法测定脂溶性成分中各脂肪酸.结果气相色谱法-质谱法测得罗勒子脂溶性成分主要由软脂酸、硬脂酸、亚油酸、α-亚麻酸等组成.气相色谱法测得各脂肪酸的质量分数为软脂酸(1 65.4 mg/g)、硬脂酸(11.9 mg/g)、油酸(69.6 mg/g)、亚油酸(217.4mg/g)及亚麻酸(133.6mg/g).结论本法操作简便,灵敏度高,结果准确可靠.
【总页数】4页(P973-976)
【作者】孙莲;阿不都许库尔;符继红
【作者单位】新疆医科大学药学院化学教研室,新疆乌鲁木齐830011
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
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1.五味子藤皮脂溶性成分的GC-MS分析 [J], 王慧竹;孙玉婷;李锐;陈帅
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3.罗勒子超临界CO2萃取物的GC-MS分析 [J], 孙莲;付继红;阿不都许库尔;米吉
提
4.南五味子脂溶性成分的GC-MS分析 [J], 杨艳辉;王喆之
5.GC-MS法分析七十味珍珠丸中挥发油、脂溶性成分 [J], 付珂; 梁源; 徐敏; 刘贤武; 王张; 岳美颖; 陈璐
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GC-MS法分析新疆罗勒子挥发油的化学成分
Ａ ｂ ｕ ｄ ｕ Ｘ ｕ Ｋ ｕ Ｅ ｒ ・Ｔ ｕ Ｅ ｒ Ｘ ｕ ｎ ，Ｓ ｕ ｎ Ｌ ｉ ｎ ，Ｈ ａ ａ ｊ ｉ ｎ ｉ ｓ ｈ ａ （ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇ ｅ ｆ ｏ Ｐ ｈ ａ ｒ ｍａ ｃ ｙ ｏ ｆ Ｘ ｉ ｎ ｊ ｉ ｎｇ ａ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｗｕ ｌ ｕ ｍｕ ｑ ｉ ８ ３ ０ ０ １ １ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
一
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Ａ ｌ ｌ ｙ ｌ ａ ｎ ｉ Ｓ ｏ ｌ ｅ（ ７ ． Ｏ ４ ％） ， ｇ ａ ｍ ｍａ ．一Ｓ ｉ ｔ ｏ ｓ ｔ ｅ ｒ ｏ ｌ （ ６ ． ５ ２ ％） ， ｃ ｉ ｓ ，ｃ ｉ ｓ ，ｃ ｉ ｓ 一 ７ ，ｌ Ｏ ，１ ３一Ｈ ｅ ｘ ａ ｄ ｅ ｃ ａ ｔ ｒ ｉ ｅ ｎ ａ ｌ（ ５ ． ８ ８ ％） ，Ｎ ｏ ｎ ａ ｄ ｅ ｃ ａ ｎ ，１ ，２ ｅ ｐ ｏ ｘ ｉ（ ５ ． ０ ６ ％） ， ３一Ｍ ｅ ｔ ｈ ｙ ｌ ｂ ｕ ｔ ｎａ ａ ｌ（ ４ ． ７ ８ ％） ．Ｃ ｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ ： ４ ６ ｋ ｉ ｎ ｄ ｓ ｏ ｆ ｃ ｏ ｍ ｐ ｏ ｕ ｎ ｄ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｉ ｄ ｅ ｎ ｔ ｉ ｉ ｆ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ ｔ ｈ ｅ ｐ ｌ ｎｔ ａ ｆ ｏ ｒ ｈｅ ｔ ｉ ｆ ｒ ｓ ｔ
GC法同时测定丁细牙痛胶囊中4种成分的含量
2010 Plus型进样口，AOC-201+S型自动进样器， 离心，精密量取上清10 ml，减压浓缩至约0.5 ml，
Lab Solutions 5.87 色谱工作站）；梅特勒-托利多 用正己烷转移至2 ml量瓶，加正己烷至刻度，摇匀，
MS105DU/A型电子天平（d=0.01 mg，瑞士梅特勒 经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2.3 系统适用性试验
丁香酚对照品（批号：110725-201917，含量以
分别取“2.2”项下混合对照品溶液、供试品
99.1 %计），甲基丁香酚对照品（批号：111642- 溶液、阴性对照溶液，按“2.1”项下色谱条件进
200301，含量以100.0 %计）购自中国食品药品检 样测定，记录色谱图，详见图1。由图1可知，4种
异丁香酚 y=503.6x-5.024 0.9996 40.2～241.4 5.1
2.5 精密度试验
取“2.2.1”项下混合对照品溶液1 μl，按
“2.1”项下色谱条件连续进样测定5次，记录峰面 积。结果丁香酚、甲基丁香酚、黄樟醚及异丁香酚
峰面积的RSD分别为 0.59 %，0.82 %，0.65 %，0.47 %
收稿日期：2020-12-14 作者简介：陈进芳，从事药学研究工作，E-mail: 372573985@
246
食品与药品 Food and Drug 2021年第 23卷第3期
丁细牙痛胶囊是由丁香叶和细辛2味药材组成， 2 方法与结果 具有清热解毒，疏风止痛的功效，临床用于风火牙 2.1 色谱条件[8-10]
发现，丁细牙痛胶囊发挥抗菌、抗炎、镇痛和中枢 抑制作用的活性成分主要是挥发性成分[3-4]。查阅 文献虽已有报道[5-6]采用气相色谱法（GC）测定丁
8168-2丁香罗勒油检验SOP1
目的：规范药材的检验操作方法及程序。
范围：丁香罗勒油责任：质检员程序：1性状1.1取本品，观察其颜色、澄清度、状态；鼻嗅口尝其气味；露置空气中或贮存，观察颜色变化。
取本品，观察其在乙醇、乙醚、冰醋酸、水中溶解的情况。
1.2相对密度1.2.1方法按“相对密度测定标准操作程序”测定。
1.2.2计算公式m3－m1相对密度d= ×100%m2－m1m1：瓶重（g）m2：瓶+水重（g）m3：瓶+油重（g）1.3折光率1.3.1方法按“折光率测定标准操作程序”测定。
1.3.2折光率读取折光仪上数据2鉴别丁香罗勒油标准操作规程第2页2.1取本品0.5ml，加乙醇约1ml使溶解，加新制的5%香草醛盐酸溶液5∽10滴，摇匀，观察颜色变化。
3.检查3.1水溶性酚类取本品1ml，加热水20ml，振摇，放冷，用水湿润的滤纸滤过，滤液中加三氯化铁试液1滴，观察颜色变化。
3.2重金属取本品1.0g，按“重金属测定标准操作程序第二法测定”。
4.含量测定照气相色谱法(附录VI E)测定。
4.1色谱条件与系统适用性试验用甲基硅胶橡胶（SE-30）为固定相，涂布速度为10%；柱温为110℃。
理论板数按丁香酚峰计算应不低于3000。
4.2校正因子测定取水杨酸甲酯适量，精密称定，加无水乙醇制成每1 ml含20mg的溶液，作为内标溶液。
另取丁香酚对照品50mg，精密称定，置10 ml量瓶中，精密加入内标溶液2 ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取2µl注入气相色谱仪，计算校正因子。
4.3测定法取本品约50mg，精密称定，置10 ml量瓶中，精密加入内标溶液2 ml，用无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取2µl注入气相色谱，测定，即得。
4.4计算公式：A S×C R校正因子（f）= A S、A R：为内标物质、对照品的峰面积；A R×C S C S、C R：为内标物质、对照品的浓度；Ax×C’s n含量%=f ×××100%A’s WC’s：为内标物质的浓度；Ax、A’s：为供试品、内标物质的峰面积；。
气相色谱法测定丁香油中丁香酚含量
气相色谱法测定丁香油中丁香酚含量
王海英
【期刊名称】《哈尔滨医药》
【年(卷),期】2009(029)004
【摘要】目的建立气相色谱法测定丁香油中丁香酚含量的方法.方法以PEG-20M 弹性石英毛细管柱(25m×0.20mm×0.33μm)为固定相,FID检测器,柱温175℃,载气为氮气,流速1ml·min-1.结果丁香酚进样量在0.2054μg～2.054μg范围内,其峰面积对其进样量呈良好线性关系.Y=0.9107X-0.625·10-4,r=0.9998,加样回收率为99.62%,RSD为1.23%(n=9).结论该方法灵敏、简便,结果准确可靠,可作为控制丁香油质量的方法.
【总页数】2页(P20-21)
【作者】王海英
【作者单位】黑龙江省大庆市第二医院,黑龙江,大庆,163461
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
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1.紫外分光光度法测定丁香油和风油精中丁香酚的含量 [J], 张智敏;朱倩倩
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GC-MS法分析新疆罗勒子挥发油的化学成分
Ｔ ｈ ｅｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅｓ ｔ ｕ ｄ ｙ
中国民族民间医药
Ｃ ｈ ｉ ｎ ｅ ｓ ｅｊ ｏ ｕ ｒ ｎ ａ ｌｏ ｆｅ ｔ ｈ ｎ ｏ ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅａ ｎ ｄｅ ｔ ｈ ｎ ｏ ｐ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｙ
·２ １ ·
Ｇ Ｃ－ Ｍ Ｓ 法分析新疆罗勒子挥发油的化学成分
阿布都许库尔·吐尔逊 孙 莲 哈及尼沙
新疆医科大学药学院教研室，新疆 乌鲁木齐 ８ ３ ０ ０ ５ ４ 【 摘 要】 目的：Ｇ Ｃ－ Ｍ Ｓ 法分析罗勒子挥发油的化学成分。方法：水蒸气蒸馏法提取罗勒子中的挥发油， Ｇ Ｃ－ Ｍ Ｓ法分析挥发油的 化学成分。结果：从罗勒子挥发油中共分离出 ６ ８个化合物，鉴定了 ６ ４种成分，占挥发油总成分的 ９ ６ ８ ２ ％。主要组分为三十一酸甲酯 １ ８ ５ ６ ％） ，对 － 烯丙基茴香醚 （ ７ ０ ４ ％） ， γ－谷 甾 醇 （ ６ ５ ２ ％） ，Ｚ ，Ｚ ， Ｚ－７ ，１ ０ ，１ ３－十 六 碳 三 烯 （ ５ ８ ８ ％） ，１ ，２－环 氧 十 九 烷 （ （ ５ ０ ６ ％） ，３－ 甲基丁醛 （ ４ ７ ８ ％） 。结论：６ ４种化合物均为从该植物中首次鉴定出，本研究为新疆罗勒子资源的开发利用提供了理论 依据。 【 关键词】 罗勒子；Ｇ Ｃ－ Ｍ Ｓ 法；挥发油 【 中图分类号】 Ｒ ２ ８ ４ １ 【 文献标识码】Ａ 【 文章编号】 １ ０ ０ ７－ ８ ５ １ ７（ ２ ０ １ ３ ）０ ６－ ０ ０ ２ １－ ０ ３
Ａ ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ｍｐ ｏ ｓ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎｏ ｆ Ｖ ｏ ｌ ａ ｔ ｉ ｌ ｅＯ ｉ ｌ ｆ ｒ ｏ ｍＳ ｅ ｍｅＯ ｃ ｉ ｍｉ Ｂ ａ ｓ ｉ ｌ ｉ ｃ ｉ ｂ ｙＧ Ｃ－ ＭＳ
气相色谱法测定天麻追风膏中丁香酚的含量
气相色谱法测定天麻追风膏中丁香酚的含量郭盈杉;赵晨阳;杜丽娟;刘映倩【摘要】目的建立毛细管气相色谱(GC)法测定天麻追风膏中丁香酚的含量.方法采用DB-WAX毛细管柱(30 m×0.53 mm,1 μm),柱温190 ℃,载气为氮气,进样口温度200 ℃,FID检测器温度210 ℃,乙酸乙酯为溶剂.结果丁香酚在20.1～1 006.0 μg·mL-1范围内呈线性关系,r2=0.999 9,回收率为96.4％(n=9),RSD为3.1％.结论该方法简便,结果可靠,可作为天麻追风膏质量控制标准.【期刊名称】《医药导报》【年(卷),期】2017(036)0z1【总页数】2页(P100-101)【关键词】天麻追风膏;丁香酚;含量测定;色谱法,毛细管气相【作者】郭盈杉;赵晨阳;杜丽娟;刘映倩【作者单位】河北省食品药品审评认证中心注册审评科,石家庄 050091;河北省食品药品审评认证中心注册审评科,石家庄 050091;河北华北制药华恒药业有限公司质量管理部,石家庄 050000;重庆市药品技术审评认证中心药品审评科,重庆400014【正文语种】中文【中图分类】R286.0;R927.2DOI 10.3870/j.issn.1004-0781.2017.z1.046天麻追风膏是由天麻、乌梢蛇、桂枝、松节油、桑枝、麻黄、丁香等32味药组成的复方制剂，具有追风去湿、活血通络、散寒止痛作用，主要用于风寒湿痹、风湿麻木等症的治疗[1]。
其处方中丁香所含丁香酚具有很强的杀菌力，也作为局部镇痛药，且兼有局部防腐和促进透皮吸收作用[2]。
丁香酚具挥发性，因此多采用气相色谱(gas chromatography，GC)法进行测定[3-5]。
本实验采用挥发油提取方法提取样品，排除样品基质干扰，报道如下。
1.1 仪器 Agilent6890N气相色谱仪，FID氢火焰离子化检测器，载气为高纯氮气(99.999%)，METTLE AE-163、AE-240电子天平(感量分别为0.1,0.01 mg)。
食品添加剂 丁香酚(食品安全国家标准)
食品安全国家标准 食品添加剂 丁香酚
1 范围
本标准适用于以丁香罗勒油和月桂叶油等为原料经化学法单离制得的食品添加剂丁香酚。
2 化学名称、分子式、结构式和相对分子.2 分子式 C10H12O2
2.3 结构式
OH
O
2.4 相对分子质量 164.20(按 2007 年国际相对原子质量)
GB xxxx—xxxx
3
附录 B 食品添加剂丁香酚气相色谱图
(面积归一化法) B.1 食品添加剂丁香酚气相色谱图
食品添加剂丁香酚气相色谱图见图 B.1。
GB xxxx—xxxx
图 B.1 食品添加剂丁香酚气相色谱图 B.2 操作条件 B.2.1 柱：毛细管柱，长15 m，内径0.53 mm。 B.2.2 固定相：100%聚二甲基硅氧烷。 B.2.3 膜厚：0.5 μm。 B.2.4 色谱炉温度：线性程序升温从80 ℃～200 ℃，速率5 ℃/min。 B.2.5 进样口温度：250 ℃。 B.2.6 检测器温度：250 ℃。 B.2.7 检测器：氢火焰离子化检测器。 B.2.8 载气：氮气。 B.2.9 柱前压：0.02 MPa。 B.2.10 进样量：约0.2 μL。 B.2.11 分流比：15:1。
表 2 理化指标
指标
1 mL 试样全溶于 2 mL 70%(体积分数)乙醇中
≥
98.0
≤
1.0
1.5400～1.5420
1.063～1.068
GB xxxx—xxxx
检验方法 GB/T 14455.3 附录 A GB/T 14455.5 GB/T 14454.4 GB/T 11540
2
附录 A
丁香酚含量的测定
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GC法测定丁香罗勒油中丁香酚的含量
摘要：目的建立用GC法测定丁香罗勒油中丁香酚的含量。
方法OV-1弹性石英毛细管色谱柱（30m×0.32mm×0.25μm）为固定相，FID检测器，进样口温度230℃，检测器温度250℃，采用程序升温，柱温100℃，保持1min，然后以15℃/min的速率升至220℃保持8min；载气为氮气，以正十八烷为内标，按内标法计算丁香酚含量。
结果丁香酚进样量在0.5～4.5 mg /ml 范围内其峰面积与进样量呈良好线性关系。
y=0.1311x-0.054，（r=0.9994）；加样回收率为100.96%，RSD为0.74%（n=9）。
结论该方法灵敏、简便，结果准确可靠，可作为控制丁香罗勒油质量的方法。
关键词：GC法；丁香罗勒油；丁香酚
丁香罗勒油为唇形科植物丁香罗勒Ocimum gratissimum L. 的全草经水蒸气蒸馏提取的挥发油[1]。
参照《中国药典》2010年版一部丁香罗勒油标准，考虑到生产和检验实际，我们在方法中使用了毛细管柱，测定法为内标法。
丁香罗勒油中成分复杂，成分有三十多种以上[2]，使用了毛细管柱相对填充柱更能有效分离丁香酚，更具专属性，有效缩短了检验时间。
经实验证明该毛细管柱内标法的峰分离度、理论塔板数都符合《中国药典》2010年版要求，且优于（药典）填充柱法，本毛细管柱内标法的准确度、重复性、精密度、线性均符合要求；两方法相比：采用毛细管柱方法提高了准确度和工作效率，分析时间短、专属性强、色谱峰形良好。
1 仪器与材料
Agilent GC1790F 气相色谱仪，氢离子火焰检测器（FID）；sartorius BP211D 电子天平，丁香酚对照品批号：110725-200610，购于中国药品生物制品检定所；正己烷为分析纯（广州市化学试剂厂），正十八烷内标物[东京化成工业株式会社（TCI）]，丁香罗勒油（佛山市南海中南药化厂提供，批号：060701、060702、060703）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性
气相色谱条件：30m×0.32mm×0.25μm OV-1石英毛细管柱；程序升温：起始温度100℃，保持1min，15℃/min升温至220℃，保持8min，FID检测器温度250℃，进样器温度230℃。
理论板数按丁香酚峰计算应不低于30000（见图1）。
图1 丁香罗勒油空白溶剂、系统适用性、对照品GC图谱、供试品GC图谱
A.空白溶剂色谱图；
B.系统适用性色谱图；
C.丁香酚对照品和内标正十八烷色谱图；
D.丁香罗勒油供试品色谱图
2.2 内标液的制备
取正十八烷适量，精密称定，加正己烷溶解并稀释成每1ml含25mg的溶液，作为内标溶液。
2.3 对照品溶液的制备
取丁香酚对照品约50mg，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入内标溶液2ml，用正己烷稀释至刻度，摇匀，取1μl注入气相色谱仪。
2.4 供试品溶液的制备
取供试品约60mg，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入内标溶液2ml，用正己烷溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
取1μl注入气相色谱仪，测定，即得。
2.5 线性关系考察
分别取丁香酚5.00mg、15.00mg、25.0mg、35.0mg、45.0mg于10ml量瓶，并按本标准加入2ml内标液，用正己烷定容至10ml作供试品，取1μl注入气相色谱仪，计算丁香酚与正十八烷峰面积比值。
以丁香酚浓度（C）为横坐标，丁香酚与正十八烷峰面积比值（Y）为纵坐标绘制标准曲线，进行线性回归，结果得回归方程：y=0.1311x-0.054（r=0.9994）。
结果表明，丁香酚进样量在0.5～4.5 mg /ml范围内线性关系良好。
2.6 重复性试验
取同批样品6份（批号060701），按供试品溶液制备方法处理，在上述色谱条件下测定含量，测得丁香酚的平均值为86.73%，RSD=0.14%，结果表明本方法重复性良好。
2.7 稳定性试验
取批号060701丁香罗勒油供试品溶液在0、2、4、6、8、10小时进样，测得丁香酚与正十八烷峰面积比值，RSD为0.89%（n=6），结果表明样品溶液在10小时内稳定。
2.8 回收率试验
精密称取批号060701丁香罗勒油（本品已知丁香酚含量：86.7%）分别30.0mg 于9只10ml容量瓶中，分别加入19.0mg、19.0mg、19.0mg、24.0mg、24.0mg、24.0mg、29.0mg、29.0mg、29.0mg丁香酚对照品，分别加入2ml内标溶液，按上述色谱条件测定，结果见表1。
平均加样回收率为100.96%，RSD为0.74%。
表1 回收率实验测定结果（n=9）
取本品量mg 本品含丁香酚mg 加入丁香酚mg 实际测得总量mg 回收率% 平均回收率% RSD
%
1 29.78 25.8
2 18.87 44.68 99.95 100.96 0.74
2 29.67 25.72 19.15 44.94 100.37
3 29.89 25.91 19.06 45.1
4 100.89
4 30.43 26.38 24.43 50.81 100.00
5 30.68 26.60 24.30 51.24 101.40
6 30.78 26.69 24.28 51.36 101.61
7 29.62 25.68 28.99 54.91 100.838 29.58 25.65 29.38 55.60 101.94
9 29.70 25.75 29.03 55.26 101.65
2.9 样品测定
分别取3个批号的丁香罗勒油适量，精密称定制备供试品溶液，依法测定丁香酚含量，结果见表2。
表2 丁香油中丁香酚的含量
批号含量（%）
060701 88.0
060702 86.8
060703 86.2
3 讨论
3.1 分析方法的选择
经查阅文献，目前测定丁香罗勒油中丁香酚含量的方法主要以气相色谱法为主，气相色谱法又可分内标法和外标法，固定相有采用PEG-20M [3] [4]、SE-30[1] [5]、FFAP[6]三种毛细管色谱柱，《中国药典》2010年版丁香罗勒油方法为气相色谱填充柱[1] [3] [4]法进行分析。
本实验结合参考文献及实际操作，选择毛细管色谱柱的内标法测定丁香罗勒油中丁香酚含量，并进行研究和考察。
结果表明：选择固定液为OV-1的毛细管柱色谱条件下，分析时间短，分离度好，专属性强、色谱峰形良好。
3.2 内标物的选择
选择内标物的原则优先选择与被测成份的极性和沸点接近的物质，从而使内标峰的保留时间与被测成份的保留时间相近的，但在实际检测中发现，与被测成份的保留时间相近的位置已有很多成份，内标物不好选择，据文献资料报道，丁香罗勒油中含水杨酸甲酯[2]，但《中国药典》2010年版中气相色谱法中却用水杨酸甲酯作为内标物，因此可能会影响含量测定的准确性，本方法将水杨酸甲酯改为正十八烷作为内标物。
参考文献
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