食用菌生产技术 第七节 食用菌诱变育种及分离筛选
第三章 食用菌的生活史及
块菌 马勃或灰孢 竹荪 毛头鬼伞
B、主动释放： Buller理论：液滴弹射论。液滴膨大，表面张力能量将 孢子推出。
Oliver理论：气体爆炸论。泡状物内含气体，可能是 CO2，通过爆炸，将孢子推出孢子小梗。 逃离论：孢子发育到最大时，梗孢接触处，初生壁溶 化，次生壁肿胀而变圆，致使孢子跳离小梗。
单-单杂交：先获得单 孢菌落； 单-双杂交：需单孢菌落 与次生菌丝体。
（4）杂交育种的步骤
亲本菌株（培养） → 获得单孢子（用单孢分离器或 平板稀释等方法获得单孢子） → 配对杂交 （单孢子萌发 的单核菌丝配对） →杂种鉴别（通过标记鉴别杂种） → 初筛（小型栽培实验淘汰表现差的菌株） →复筛（精确 的筛选） →扩大实验→示范推广。
概念：食用菌由孢子萌发后，经历生长发育 又形成孢子的循环过程。有无性生活史和有性 生活史两个阶段组成。
1.1 初生菌丝体 孢子萌发而成的单核 菌丝体，分裂方式依种而 异。
1.2 次生菌丝体
概念：初生菌丝体配对接合而成的双核菌丝体。 大部分食用菌双核菌丝体在分裂时形成锁状联合。 1.2.1 锁状联合
1.2.3 布勒现象
同种菌株间其单核体菌株会被双核体菌株双 核化，这种交配现象被命名为布勒现象。即双-单 杂交。
1.3 子实体形成
双核菌丝体→营养生长→子实体原基→菌蕾→分化 菌盖、菌柄 菌托、菌环、假根等
多基因 控制
fi+、 fb+、 Su协同作用成 子实体
Su—菌丝体 网状化
1.4 孢子释放
第三章 食用菌的生活史及良种选育
1 食用菌的生活史 1.1 初生菌丝体 1.2 次生菌丝体 1.3 子实体形成 1.4 孢子释放 1.5 常见食用菌生活 史模式
微生物菌种分离__筛选与育种
3.1 细菌的杂交育种
细菌的杂交可以通过细菌接合、F因子转导、 R因子转移、转化和转导等方法促使基因重组。
3.2 放线菌的杂交育种
放线菌的杂交包括混合培养法、平 板杂交法和玻璃纸转移法三种：
金霉素、新霉素、红霉素和新生霉 素等抗生素产生菌的杂交育种中，都 有成功的报道。
3.3 霉菌的杂交育种
1．准性生殖 准性生殖是指真菌不通过有性生殖
融合后的原生质体具有生物活性， 但由于缺少细胞壁，不是正常的细胞， 不能在普通培养基上生长。所以要涂 布在高渗培养基上令其再生。可以增 加高渗培养基的渗透压或添加蔗糖来 增加再生率。
3) 融合子的检出
融合子是在选择性培养基上检出， 即通过两个遗传标记互补确定的，如 利用营养缺陷型互补，在基本培养基 上识别融合子。
2．3 突变菌株的筛选
诱变后，正向突变的菌株通常较少，菌 种性能有可能发生各种各样的变异，如营 养、抗性、代谢、形态、生长繁殖和温度 等。这些变异菌种可用各种方法筛选。
通过初筛和复筛后，还要经过发酵条件 优化研究，确定最佳发酵条件，使高产菌 株生产能力充分发挥出来。
1）．营养缺陷型突变菌株的筛选
一般来说，优良的生产菌种应该 具备如下的基本特性：
①具有在较短的发酵周期内产生大量发 酵产物的能力。
②在发酵过程中不产生或少产生与目标 产品性质相近的副产物及其他产物。
③生长繁殖能力强，生长速率快。
④能够高效地将原料转化为产品。 ⑤有广泛利用不同来源原材料的能力，
并对发酵原料成分波动敏感性较小。 ⑥对需要添加的前体物质有耐受能力，
自然选育是一种简单易行的选育方 法。但是自然选育的效率低，因此经 常与其它育种方法交替使用，以提高 育种效率。
自然选育程序:
第三章-食用菌的遗传与育种
食用菌遗传和变异的规律及分子机制 食用菌的生活史 食用菌的交配类型和繁殖模式 食用菌遗传学 有性生殖中基因的遗传分析 细胞质遗传 杂种优势的原理及应用 食用菌育种
食用菌育种的原理、技术路线和方法
第一节 食用菌的繁殖方式 第二节 食用菌的生活史 第三节 食用菌的育种技术
第一节
第二节 食用菌的生活史
一、生活史的概念
所谓生活史，是指生物一生所经历的生长发育和繁 殖阶段的生活周期(全过程)。
食用菌的生活史是指从孢子萌发，经历菌丝体、子 实体阶段，以及又由子实体产生孢子的循环过程。 多数食用菌的生活史是：
担孢子 担孢子萌发 初生菌丝（单核菌丝） 两条可亲和的初生菌丝融合 次生菌丝（双核菌 丝） 子实体原基 子实体 担孢子
异宗结合：大多食用菌的担孢子或单核菌丝有 “雌”、“雄”性之分（常用“＋”、“－” 表示）。其性别是由遗传因子控制的，只有异 性的单核菌丝，才能质配成双核菌丝，而同性 别的菌丝永不亲和，也不产生有性孢于，这种 现象称异宗结合，也称自交不育。
90％的菌类属异宗结合，有两种类型： 二极性和四极性。
二极性 ： 是由一对遗传因子 （ A—a ）所控制的，这
食用菌的繁殖方式
多数食用菌完整生活史包括 无性 及 有性 两个阶段，主要进行从担孢子萌发再到新一代 担孢子产生的有性生殖过程，其间要经过质配、 核配及减数分裂三大步骤。
一、无性繁殖
无性繁殖：不通过有性生殖细胞的结合，而由亲 代直接产生新个体的生殖方式叫无性繁殖，食用 菌的无性繁殖主要有以下几种形式： 1.以菌丝断裂的方式繁殖；
子实体 担子 核配
子实体原基
草菇的生活史： 初级同宗结合
减数分裂
双核菌丝
食用菌育种技术的研究进展
食用菌育种技术的研究进展作者：桂明英等来源：中国食用菌，2006（5）随着人们对食用菌营养价值和药用价值认识的提高以及食用菌生产所带来的经济效益的增加。
食用菌育种工作也成为食用菌科技工作者关注的热点之一。
现对食用菌育种工作的研究进展进行综述，以期为食用菌的育种工作提供参考。
一、野生食用茵驯化育种野生食用菌驯化栽培．是食用菌育种的重要内容．栽培的食用菌品种绝大部分是由野生食用菌驯化而来的。
例如：阿魏蘑的驯化工作．是中国科学院新疆生物土壤沙漠研究所于1983年开始的．当时曹玉清、牟川静、陈忠纯等在研究驯化分布于新疆托里地区的野生阿魏侧耳fP／eurotu~retainel时，对其形态特征、分类地位、氨基酸含量、生活条件(包括营养、pH值、温度、湿度、光照和通风)、菌丝培养特征、驯化栽培等进行了研究。
观察到分离的野生菌株K001、K002与K005在培养特征上的差异。
1986年他们又在新疆木垒采集到Kill标本．在进一步研究中发现．K005、Klll在子实体外部形态与菌丝培养特征上与阿魏侧耳显著不同。
经研究定名为阿魏侧耳托里变种[Pieurotus ervngii(DC．ex． Fr)0ueI．var．tuolie nsis Mou．n var]。
他们1983年对 K001、K002、K005菌株驯化栽培中．发现在有无寄主植物阿魏根屑添加在培养基中的情况下．用棉籽壳、云杉木屑、麸皮等原料组成的培养基上都相继长出了子实体．阿魏侧耳及托里变种自此得到推广．首先在新疆开始人工栽培。
已成为近年来大面积进行商业性栽培的一种食用菌新品种。
其菇体肥大、颜色洁白、菌肉细腻、质地脆嫩、久炖不绵、清爽滑润、味美可口、营养丰富．投入市场后深受人们的青睐。
目前我国引进和驯化栽培成功的食用菌已达80多个种。
二、孢子分离育种单孢分离就是将采集到的孢子群单个分开培养，让其单独萌发成菌丝而获得纯培养的方法。
曹裕汉通过对草菇有性分离选育种研究．表明草菇孢子分离菌株在菌丝形态、生长速率、产厚垣孢子能力、出菇、产量等性状上存在较大的差异。
食用菌育种复习资料
一章：生活史: 生物从个体发生到自然死亡所经历的全部过程。
生活循环:个体在自然死亡前，往往会产生下一代的新个体，因而生活史的全部变化过程就会构成一个循环。
食用菌生活史：食用菌孢子萌发形成初生菌丝，初生菌丝经过质配形成次生菌丝，然后扭结形成子实体，成熟子实体产生新一代孢子的过程。
子囊菌模式生物粗糙脉孢霉的生活史虫草子囊孢子→发芽成无性型菌丝（分生孢子→发芽成菌丝）→侵染鳞翅目昆虫幼虫→菌丝在幼虫体内增殖（构状细胞）→形成菌核（有性型）→冬虫夏草子座→子囊→子囊果→子囊孢子担子菌异宗结合，单因子控制，二极性子实体－担子－核配－担孢子（减数分裂）－单核菌丝－质配－双核菌丝－扭结－原基－子实体－钩形、蹄形分生孢子异宗结合伞菌单核担孢子-单核菌丝-双核菌丝-双倍体核-单核担孢子香菇同宗结合伞菌双胞蘑菇三个关键阶段及相应核期：质配—异双核期核配—双倍核期减数分裂—单倍核期自孕型：一个单核担孢子自身可孕，无需与其他基因型不同的担孢子交配即可完成有性生活史。
强制自交型：在担孢子形成过程中，两个交配型不同的可亲和的核共同进入同一担孢子中，这样的双核担孢子自身可孕，可独立完成有性生活史，从而也就失去了与其他基因型不同的担孢子进行交配的可能性。
杂交型：担孢子内含有一个具有特定交配型的细胞核（少数情况下可能含有相同交配型的两个核），此种单核担孢子自交不孕，只有与含有可亲和交配型的另一种担孢子杂交，才能完成有性生活史。
1自孕型单核担孢子自身可孕草菇2强制自交型含可亲和双核担孢子自身可孕双胞蘑菇3杂交型两个可亲和单核杂交可孕香菇、大肥菇、金针菇双孢蘑菇-单因子次级同宗银耳-双因子异宗（黑）木耳-单因子异宗平菇、香菇、金针菇-双因子异宗草菇-初级同宗二章：准性生殖是真菌独有的繁殖过程，不经过有性生殖而在有丝分裂过程中实现基因重组的过程。
它通过质配、核配和单倍体化而实现遗传物质的重组，但不发生在单一个体生活史的一个特殊时期。
单倍体来源：有丝分裂中染色体的“不分离”行为。
4 第三章 食用菌遗传育种
二、选择育种
又称自然选种 又称自然选种，是指利用自然界现有的变 自然选种， 经过选择培育获得新品种的方法。 异，经过选择培育获得新品种的方法。 包括以下步骤： 包括以下步骤： 1、品种资源的收集 品种不同地区：不同海拔高度、 品种不同地区：不同海拔高度、不同纬 不同基物上生长的野生菌。 度、不同基物上生长的野生菌。并记录采 集时间、地点、海拔、坡向、土质、 集时间、地点、海拔、坡向、土质、阴蔽 基物等。 度、基物等。 2、纯种分离
杏鲍菇同工酶酶谱
电泳
白6， 8， 11， 13， 19， 29， 野平，杏5
三、诱变育种
概念：是利用物理或化学等因素诱使DNA分子发生变异， 是利用物理或化学等因素诱使DNA分子发生变异，
从中加以选择和利用。
原理： 诱发突变
物理诱变：采用高能量辐照引起DNA受损伤，人为地改变碱基组 物理诱变：采用高能量辐照引起DNA受损伤，人为地改变碱基组 DNA
第三章 食用菌遗传育种
主要内容 第一节 食用菌的生活史 第二节 食用菌的交配系统 第三节 食用菌育种技术
第一节 食用菌的生活史
一、 概念----食用菌孢子萌发形成初生菌丝， 概念----食用菌孢子萌发形成初生菌丝， 初生菌丝经过质配形成次生菌丝，然后扭结 形成子实体，成熟子实体产生新一代孢子的 过程。 二、 典型生活史 三、常见食用菌的生活史
化学诱变：采用化学物质引起DNA改变，引起突变， 化学诱变：采用化学物质引起DNA改变，引起突变，
创造可实用的基因的可能。 诱变因素：根据诱变因素的化学性质或作用方式，可分为3 诱变因素：根据诱变因素的化学性质或作用方式，可分为3 大类：第1类不能在立体条件下进行。后2 大类：第1类不能在立体条件下进行。后2者可离体进行。 碱基类似物：有时掺入DNA分子中，导致原碱基对在空间 碱基类似物：有时掺入DNA分子中，导致原碱基对在空间 位置上的讹误，使遗传基因突变。有5 位置上的讹误，使遗传基因突变。有5-溴脱氧尿苷、 5-溴 尿嘧啶、a 尿嘧啶、a-氨基嘌呤。 改变DNA结构的诱变剂：能和1 改变DNA结构的诱变剂：能和1个或多个碱基发生化学反 应，从而导致复制时碱基配对的转换，即A 应，从而导致复制时碱基配对的转换，即A-T与G-C的转换， 引起突变。有亚硝酸、硫酸二乙酯、甲基磺酸乙酯、亚硝 基胍。 码阻移动诱变剂：能插入DNA分子的碱基对之间，使DNA 码阻移动诱变剂：能插入DNA分子的碱基对之间，使DNA 的结构变形，从而导致DNA复制时发生突变。包括丫啶类 的结构变形，从而导致DNA复制时发生突变。包括丫啶类 类、吡啶类、多环烃、含氮杂环致癌物、真菌毒素、抗生 素，研究最多的是丫啶类化合物。
诱变育种
实验二淀粉产生菌的诱变育种及酶活力测定指导老师：xxx生命科学学院08级生物技术（三）班豆豆同组人：xx xxx摘要：诱变育种技术是提高淀粉产生菌产淀粉能力最有效的途径。
常用的诱变育种方法有自然突变育种、紫外线诱变育种、微波诱变育种、激光诱变育种。
本实验采用紫外线诱变育种的方法，对从土壤中分离提取的淀粉产生菌进行诱变，测定诱变得到的菌株的酶活力，然后从中筛选出产淀粉能力强的菌株。
关键词：淀粉产生菌，紫外线诱变育种，酶活力测定一、实验目的：1.学习紫外线诱变育种的方法；2.进一步学习酶活力测定的基本方法；3.无菌操作的进行。
二、实验原理：紫外线的光谱范围在40 ～390 nm, 而DNA的嘌呤和嘧啶可以吸收的紫外线光谱通常为260 nm。
因此能诱发生物突变的有效波长范围是200～300 nm, 最有效的波长为25317 nm, 这一波长的诱变效应相当于波长260 nm的紫外线。
当紫外线照射微生物时不能引起电离, 其作用是使物质分子或原子中的轨道从基态跃迁到激发态, 紫外光子本身作为能量被物质吸收。
由于紫外线穿透性很弱, 所以被广泛用作微生物诱变剂。
紫外辐射使DNA分子形成嘧啶二聚体, 阻碍碱基正常配对,并可能引起突变或死亡。
另外嘧啶二聚体的形成, 还会阻碍双链的解开, 从而影响DNA 的复制和转录。
紫外线对各种微生物的诱变效应因菌种不同而存在很大差异。
一般微生物营养体照射3～5min即可致死, 但芽孢杆菌约需10min。
另外紫外线照射微生物后还存在可见光修复的问题,故通常采用在红光下操作，减少其光恢复的机率。
利用紫外可诱变选育出大量产量高、活性强的优良微生物菌种。
三、实验材料及主要仪器和试剂：1.材料：(实验一)筛选的得到的淀粉产生菌2.仪器：超净工作台，紫外灯，红光灯，磁力搅拌器，100-1000ml移液枪，培养皿，分光光度计，恒温水浴锅。
3.试剂：碘液、2%可溶性淀粉、pH6.0磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、标准糊精溶液、0.5mol/L 乙酸、0.85%生理盐水、无菌水。
食用菌栽培技术课程标准
期末综合考核与评价方法
理论考试
评价学生对食用菌栽培技术基本理论、技术和实践方法的掌握程 度。
实践操作考试
评价学生在食用菌栽培技术实验中的技能操作是否规范、熟练， 是否能解决实际问题。
综合报告
评价学生对食用菌栽培技术课程的理解和掌握程度，以及能否将 所学知识应用于实际问题解决中。
教师教虫等生物防治技术控 制食用菌病虫害的方法。
03
教学方法
理论教学与实践教学相结合
理论教学
使学生掌握食用菌栽培的基本理论、基本知识和基本技能，了解食用菌产业的发展趋势和前沿动态。
实践教学
通过实验、实训和实习等多种形式，让学生在实践中掌握食用菌栽培技术，提高动手能力和解决问题 的能力。
VS
线下教学
进行面对面的课堂教学和实验室实践教学 ，加强师生互动和生生互动，促进学习效 果和学习质量的提高。
04
教学资源
教材与参考书籍
教材
《食用菌栽培技术》
参考书籍
《食用菌栽培原理与技术》、《食用菌育种与栽培实务》、《食用菌研究法》
网络资源与数据库
网络资源
中国食用菌协会、中国农业大学菌物研究 中心、中国农业科学院农业微生物研究中 心等网站，提供了最新的行业动态、政策 法规、科研成果等信息。
05
教学评价与反馈
学生平时表现与考核评价
课堂参与度
评价学生课堂参与的积极性，对食用菌栽培技术 的基本理论、技术和实践方法的掌握程度。
作业与小组讨论
评价学生的食用菌栽培技术课程相关作业的完成 情况和小组成员在小组讨论中的表现。
实验技能
评价学生在食用菌栽培技术实验中的技能操作是 否规范、熟练，是否能解决实际问题。
常见食用菌菌种分离与显微镜观察实验报告(一)
常见食用菌菌种分离与显微镜观察实验报告(一)常见食用菌菌种分离与显微镜观察实验报告实验目的本实验旨在让学生能够掌握常见食用菌菌种的分离方法和显微镜观察技巧。
实验材料与方法材料清单•白萝卜•蘑菇•食用菌培养基•蒸馏水•深耳瓶、玻璃移液管、显微镜等基本实验器材实验步骤1.将白萝卜和蘑菇分别取适量样本，使用手术刀和无菌铲刀将其切成1cm x 1cm的小块。
2.分别将样本置于阳极板上，使用灭菌器进行灭菌处理，待其冷却。
3.取一定量的食用菌培养基，加入适量的蒸馏水，混合均匀后倒入深耳瓶中。
4.使用无菌铲刀，将已灭菌的白萝卜和蘑菇块分别移到食用菌培养基内。
5.将深耳瓶盖好，置于恒温培养箱中，设定适宜的温度和湿度，进行培养。
6.培养约5天后，取出深耳瓶，使用移液管取下悬浮于其上的细胞液，进行显微镜观察。
实验结果与分析经过培养和观察，分别可见到白萝卜和蘑菇样本中所含有的菌种，观察到菌丝的形态、大小及生长情况。
同时，还可进行染色和计数等进一步的实验操作。
实验结论本实验通过常见食用菌菌种的分离和显微镜观察，使学生们对食用菌的形态、营养需求、生长条件等方面有了更深刻的认识，为以后的实践操作打下了基础。
注意事项•实验操作时需注意无菌操作，避免外界微生物的污染。
•实验器材使用后需要彻底清洗和消毒。
•实验过程中应遵守实验室安全规范，避免发生任何事故。
推广应用与展望本实验是一项基础性实验，但对于食用菌及其相关领域的研究和开发具有重要的意义和应用价值。
通过实验中的方法和技术，可以对不同种类的食用菌进行分离和鉴定，并为其后续的深入研究提供重要的基础数据和参考。
同时，还可将实验技术应用于菌类菜的生产、加工和质量检测等方面，为产业的发展提供有力的支持。
结语通过本实验的学习和实践，我们不仅掌握了基本的实验技能和方法，更深入地了解了食用菌这一特殊的生物类群的生长发育规律和特点，并且为以后的科研工作和产业发展打下了坚实的基础。
食用菌生产技术教案、改后
食用菌生产技术教案一、教学目标知识与技能：1. 了解食用菌的种类、生长条件和繁殖方式。
2. 掌握食用菌的栽培技术和管理方法。
3. 学会食用菌的病虫害防治技巧。
过程与方法：1. 通过观察、实践，培养学生的动手操作能力。
2. 采用小组讨论、案例分析等方式，提高学生的解决问题的能力。
情感态度价值观：1. 培养学生热爱科学、勇于探索的精神。
2. 增强学生对食用菌产业的认知，提高学生对食用菌生产的兴趣。
二、教学内容第一节：食用菌概述1. 食用菌的定义及分类2. 食用菌的生长条件3. 食用菌的繁殖方式第二节：食用菌栽培技术1. 食用菌栽培的基本流程2. 培养基的制备与消毒3. 接种与发菌4. 出菇与管理第三节：食用菌病虫害防治1. 食用菌常见病虫害识别2. 病虫害防治方法3. 环保型病虫害防治策略第四节：食用菌保鲜与加工1. 食用菌的保鲜方法2. 食用菌的加工技术3. 食用菌产品的市场前景第五节：食用菌产业现状与发展趋势1. 我国食用菌产业现状2. 国际食用菌产业发展趋势3. 食用菌产业的发展策略三、教学方法1. 采用多媒体教学，展示食用菌的生长过程和病虫害图片，增强学生的直观认识。
2. 实践教学：安排学生到食用菌栽培基地进行实地操作，提高学生的动手能力。
3. 小组讨论：分组讨论食用菌产业的发展现状和趋势，培养学生的团队协作能力。
4. 案例分析：分析典型食用菌病虫害案例，提高学生解决问题的能力。
四、教学评价1. 平时成绩：观察学生在课堂上的表现，包括发言、讨论、作业等，占总评的30%。
2. 实践操作：评估学生在食用菌栽培基地的操作技能，占总评的30%。
3. 期末考试：考察学生对食用菌生产技术的掌握程度，占总评的40%。
五、教学资源1. 教材：《食用菌生产技术》2. 多媒体课件：食用菌的生长过程、病虫害图片等。
3. 食用菌栽培基地：用于实践教学。
4. 网络资源：查阅相关食用菌产业的发展动态。
六、食用菌的采集与鉴定教学目标：1. 学习食用菌的采集方法。