微生物快速检测方法进展

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临床微生物快速检验技术进展

临床微生物快速检验技术进展

临床微生物快速检验技术研究进展目前感染性疾病是危害人类健康的重大隐患,尤其是对第三世界国家更是一严重的挑战。

随着抗生素的滥用,导致了出现大量严重的耐药菌株,加上新的病原微生物的出现,给临床诊断和治疗带来了极大的困扰。

严峻的现实给病原微生物的检测和诊断提出了更高的要求。

世界卫生组织(who)对临床微生物实验室提出:临床微生物实验室尽可能把目标集中在快速诊断方面。

传统的微生物检验法的最大弱点是慢,难以实现快速诊断与治疗,已远远不能满足对各种病原微生物的诊断以及流行病学的研究。

实现更准确、更快速地检出与监测病原体成为目前临床微生物检验亟待解决的问题。

随着各种生物学技术的发展和相关学科的不断发展,特别是免疫学、生物化学、分子生物学及计算机技术的不断发展,微生物的检验速度明显加快,同时明显提高了微生物的诊断水平。

本文就对近年来微生物的快速检验技术研究进展作一综述。

1.免疫学方法在快速检测微生物抗原或抗体中的应用免疫学技术是利用特异性抗原抗体反应,检测病原微生物,简化了病原微生物的鉴定步骤,备受关注。

该方法已成为一种微生物实验室常用的成熟的快速检测技术。

应用单克隆抗体结合各种形式的放射免疫分析、酶免疫分析、荧光免疫分析、时间分辨荧光免疫分析、化学发光免疫分析、生物发光免疫分析等,足以检出临床标本中痕量微生物抗原,免去细菌或病毒培养过程,直接完成微生物感染的快速诊断。

如抗血清凝集技术、荧光抗体检测技术、协同凝集试验、酶联免疫测试技术等。

这些方法操作简单,已经被广泛应用于细菌的分型和鉴定,如沙门菌、霍乱弧菌、流感嗜血杆菌及隐球菌,短时间内就可完成鉴定[1]。

其中,应用酶联免疫技术制造的全自动免疫分析仪,使该技术进一步简化和准确。

许多疾病的检测都已有商品化的试剂盒出现。

2.分子生物学技术在快速检测微生物中的应用随着分子生物学技术的迅速发展,对病原微生物的鉴定已不再局限于外部形态结构及生理特性等一般检验上,而是立足于分子,特别是核酸水平的检测上,使人们对微生物的认识从外部表型逐渐转向内部基因结构特征,微生物的检测也从生化、免疫方法转向基因水平检测。

食品微生物快速检测技术应用进展

食品微生物快速检测技术应用进展
维普资讯
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西




食 品微生物快速检测技术应用进展
苏凤 贤 , 宝善 , 张 曹 稳 7 06 ) 10 2 ( 西师 范大 学食 品 工程 系, 陕 陕西 西安

要 : 品安全与人 类息息相 关, 品微生物检 测技 术也在不 断改进 和发展 , 食 食 以满足人 们对食 品的特
原或抗体的酶标记。根据酶反应底物显色的深浅 放大了免疫反应的结果 , 使测定具有极高 的 灵敏度 。在应用 中—般采用商品化的试剂盒进行 测定 , 其特点是将抗原或抗体制成 固相制剂 , 在与 标本 中抗体或抗原反应后 , 只需经过 固相的洗涤 , 就可以达到抗原抗体复合物与其他物质的分离 , 简化了操作步骤 。 抗体抗原反应所特有的专—性和敏感性使得 食 品在未经分离提取 的情 况下即可进行检 测分 析, 对于被检细菌而言则不需要纯培养 , 只要存在
1 免疫法快速测定食 品中的抗生素
残留
确性和特异性高、 适用范 围宽 以及费用低等优点
自上世纪 5 年代起 , 0 人们就开始在养殖业中 而在 医学以及食品领域 中倍受重视 , 为最为广 成 大量使用抗生素类药物。 抗生素是一种高效兽药 , 泛应用和发展最为成熟的生物检测与分析技术之 然而它在动物体 内大量的残留问题也 日益受到消 特别是随着蛋 白质分离纯化技术和基因工程 费者的重视 。抗生素残 留可能会导致消费者产生 技术的不断发展 , 各种高纯度抗体、 抗原和抗体复 各种不 良反应 , 使人体对抗 生素类药物 的敏感性 合物得以制备 , 单克隆抗体技术的应用 , 使得该诊


下降 , 增加病原菌对药物的耐药性 , 同时对病毒的 抵抗力降低。 故而在食品生产企业 , 尤其是畜产品 生产企业 , 寻找一种敏感性高的快速检 测方法 已 经成为他们保障无抗生素残留的肉食加工品的最 重要的手段。 国内外应用药物残留免疫分析方法 , 快速测 定食 品抗 生素 残 留技 术 , 主要 有 荧光 免疫分析

食品病原微生物快速检测技术及研究进展

食品病原微生物快速检测技术及研究进展
t c ol g ,molc l rmi og e h o o ,m ea ol y e h o o y, nsr m e t la l i e hn l y , eh n o y e u a ol y tc n lg y t b og t c n l g i tu n a naysst c o og bi e s re t c os n o t e hno og r n r uc d,a d t e p og e s oft s t c i n t c ol i s o oo l y we e i tod e n h r r s he e de e to e hn og e n f d p t og n cm ir o g n s we er v e d. a h e i c o r a im r e iwe
( n yn nr - xt n p cina dQu r ni e u eu。 n yn 5 0 1 S a d n 。 hn Do g igE ty E i I s et n a a t ra Do g ig2 7 9 。 h n o g C ia) o nB
Ab ta t s r c :Co v n i n l e h d a e t e o s m i g, o s n i v t n y o e s t i n f o n e to a t o r i -c n u n l w e s t iy a d h p s n i v t i o d m m i i y p t o e i c o r a im e e t n, t h a i e e o me to o i t n o d p o u to n a h g n c mi r o g n s d t c i o wi t e r p d d v l p n fs c e y a d f o r d c i n i h t e wo l su y a d t e e t b ih n ff o ah g n c mir o g n s a i e e t n t c n l g h rd, t d n h sa l me to o d p t o e i s c o r a i r p d d t ci e h o o y m o i c e s g y p i t n in t y v ro s c u t e . n t i a t l , h a i r cp e o si r a i l a d at t b a i u o n r s I s ri e t e b sc p i i l fi u o o n n e o o i h c n mm n l g y

流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展

流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展

流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展流式细胞术是一种通过流式细胞仪对细胞进行快速、精确、高通量的检测和分析的技术。

它具有高度的自动化和高通量性能,可以实现对微生物的快速、准确的检测,因此在食品微生物检测领域具有巨大的潜力。

本文将对流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展进行详细介绍。

1. 细菌检测食品中的微生物污染是导致食品安全问题的重要原因之一。

传统的微生物检测方法通常需要数天的时间才能得出结果,而流式细胞术可以大大缩短检测时间,同时具有更高的灵敏度和准确性。

利用流式细胞仪可以对食品中的细菌进行快速检测,包括大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌种,为食品安全提供有力支持。

2. 酵母菌和霉菌检测除了细菌,食品中也会存在酵母菌和霉菌的污染,它们可能产生毒素严重影响食品质量和食品安全。

利用流式细胞术可以对酵母菌和霉菌进行快速准确的检测,为食品质量的控制和保障提供了有效手段。

3. 总菌数检测除了对特定的致病菌种进行检测外,流式细胞术还可以用于快速检测食品中的总菌数。

这对于食品的储存和保鲜具有重要意义,可以帮助食品企业及时采取措施,保证食品的安全和卫生。

1. 流式细胞术在快速检测技术中的应用传统的微生物检测方法通常需要进行培养和分离,这些步骤需要较长的时间,无法满足快速检测的需求。

而流式细胞术可以通过对样品中的微生物进行高通量的快速检测,显著缩短了检测时间,提高了检测效率。

2. 流式细胞术在微生物分类鉴定中的应用流式细胞术不仅可以对微生物进行数量上的检测,还可以结合荧光染色技术对微生物进行分类和鉴定。

通过染色标记不同的微生物成分,流式细胞仪可以对微生物进行快速准确的鉴定,大大提高了检测的精准度。

三、流式细胞术在食品微生物检测中的挑战与展望1. 技术标准化流式细胞术虽然在食品微生物检测领域具有巨大的应用潜力,但目前还存在技术标准化不足的问题。

不同的实验室可能使用不同的流式细胞仪,使用的染色荧光物质也各不相同,这将对不同实验室的检测结果产生较大影响。

流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展

流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展

流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展流式细胞术是一种通过分析单个细胞的物理和化学特性来研究细胞群体的技术。

在食品微生物检测领域,流式细胞术具有很大的潜力和应用前景。

本文将介绍流式细胞术在食品微生物检测领域的研究进展。

流式细胞术可以实现对食品中微生物的快速检测。

传统的微生物检测方法通常需要对样品进行预处理,如培养和分离,这会花费很长时间。

而流式细胞术可以直接对复杂样品进行检测,不需要复杂的处理步骤,因此可以大大缩短检测时间。

可以直接对食品样品中的细菌进行快速计数和鉴定,从而及时检测出可能存在的致病微生物。

流式细胞术可以提供更精确的微生物分析结果。

传统的微生物检测方法通常是通过培养细菌并进行可视化观察来鉴定微生物种类。

一些微生物在培养条件下可能有较低的生长率或不易培养,导致其未能被正确鉴定。

而流式细胞术可以通过测量细胞的物理和化学特性,如大小、形状、荧光等来鉴定微生物,可以避免这些问题。

流式细胞术还可以同时检测多个指标,如菌落形成单位和细胞活力等,从而提供更全面的微生物分析结果。

流式细胞术还可以结合其他分析技术进行综合分析。

流式细胞术可以提供细胞群体水平的信息,但对于单个细胞的详细分析有限。

而其他分析技术,如基因测序和质谱等,可以提供更详细的单个细胞分析结果。

流式细胞术与其他技术的结合可以实现对微生物的更全面和深入的分析。

流式细胞术在食品微生物检测领域具有研究进展。

未来,需要进一步优化流式细胞术的方法和技术,以提高其检测效率和准确性。

还需要加强流式细胞术与其他分析技术的结合,实现对微生物的更全面和深入的研究。

相信随着技术的不断发展,流式细胞术在食品微生物检测领域的应用前景将会更加广阔。

空肠弯曲杆菌快速检测方法研究进展

空肠弯曲杆菌快速检测方法研究进展

空肠弯曲杆菌快速检测方法研究进展作者:申秋平沈静怡刘晓明庄林林来源:《中国动物保健》2024年第06期摘要:空肠弯曲杆菌是一种常见的人畜共患病原菌,快速精准检测是有效控制其传播和感染的关键。

本文主要介绍了近年来发表的快速检测空肠弯曲杆菌的相关方法,包括免疫学方法(酶联免疫吸附试验、免疫层析技术)、核酸检测方法(聚合酶链式反应及其衍生技术、多种等温扩增技术等),以及其他新型检测方法(表面等离子共振技术、生物传感器、CRISPR-Cas12b检测系统)。

此外,本文还讨论了这些方法的优缺点以及在实际应用中的考虑因素,以期为行业研究者提供相对全面的空肠弯曲杆菌检测方法参考和科学依据。

关键词:空肠弯曲杆菌;快速检测;免疫学方法;核酸检测方法;生物传感器空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni,C. jejuni)是一种常见的肠道致病菌,属于弯曲杆菌属,革兰氏染色阴性[1]。

该菌多寄生于畜禽、宠物及野生动物,可通过污染的水、牛奶、禽制品等途径进行传播,其感染可引起家畜繁殖障碍、乳房炎、幼畜禽腹泻等。

人类感染则可急性胃肠炎或食物中毒,并伴发关节炎等免疫性疾病[2]。

快速、精准地检测空肠弯曲杆菌是有效控制和预防该类食源性病原菌传播的关键。

近年来,免疫学和核酸检测技术及交叉学科技术的发展为快速精准检测空肠弯曲杆菌提供了新的有力技术和工具支持。

本文就近年來国内外在空肠弯曲杆菌快速检测方法上的研究进展做一综述。

1 免疫学检测方法1.1 酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)是一种可用于检测抗原或抗体的免疫学技术。

ELISA方法具有良好的灵敏度和特异性,且操作相对简单,目前已广泛应用于医学诊断、生物学研究等领域。

楼宏强等[3]以OMP18的B细胞抗原表位多肽为包被抗原,建立了一种可快速检测空肠弯曲杆菌的ELISA方法。

实验表明,当表位多肽在稀释度1:1000时,免疫反应性增高最明显。

食品中大肠杆菌生物检测方法的研究进展

食品中大肠杆菌生物检测方法的研究进展一、简述大肠杆菌作为食品中常见的微生物污染指标,其快速、准确的检测方法一直是食品安全领域的研究热点。

随着生物技术的不断发展,大肠杆菌的生物检测方法取得了显著进展。

这些方法不仅提高了检测速度和灵敏度,而且有助于更深入地了解大肠杆菌的生物学特性和污染途径。

本文将简述食品中大肠杆菌生物检测方法的研究进展,包括传统检测方法的优缺点、新型生物检测技术的开发与应用,以及未来发展方向。

传统的大肠杆菌检测方法,如多管发酵法和平板计数法,虽然操作简便、成本较低,但存在检测周期长、灵敏度低、易受干扰等缺点。

研究者们一直致力于开发新型的生物检测方法,以克服传统方法的不足。

基于分子生物学、免疫学、生物化学等原理的新型生物检测技术不断涌现,如脉冲场凝胶电泳(PFGE)、多位点可变数衔接重复序列分析(MLVA)、气相色谱(GC)和高效液相色谱法(HPLC)、ATP生物发光技术、PCR检测技术等。

这些新型生物检测方法具有检测速度快、灵敏度高、特异性强等优点,能够在短时间内实现对大肠杆菌的准确检测。

PFGE和MLVA等技术可以实现对大肠杆菌的分子分型,有助于追踪污染来源和传播途径;GC和HPLC等色谱技术则可以通过分析大肠杆菌的代谢产物来评估其污染程度;ATP生物发光技术和PCR检测技术则具有快速、简便的特点,适用于现场检测和大规模筛查。

新型生物检测方法在实际应用中仍面临一些挑战,如技术成本较高、操作复杂、对实验条件要求严格等。

未来的研究应致力于优化这些技术的性能,提高实用性。

加强食品中大肠杆菌的生态学研究和风险评估,对于制定有效的食品安全控制措施也具有重要意义。

食品中大肠杆菌生物检测方法的研究进展为食品安全领域的监测和防控提供了有力支持。

随着新型生物检测技术的不断发展和完善,相信未来我们能够更加快速、准确地检测和控制大肠杆菌污染,保障人们的饮食安全。

1. 大肠杆菌在食品安全中的重要性在《食品中大肠杆菌生物检测方法的研究进展》“大肠杆菌在食品安全中的重要性”这一段落内容可以如此撰写:大肠杆菌在食品安全中占据着举足轻重的地位,其存在与否往往直接关联着食品的卫生状况和消费者的健康安全。

流式细胞术在微生物快速检测领域的研究进展

并能 同时 测量 细胞 的 物理 或 化学 性 质 ,如粒 子 的大
定量 细胞 成 分 ;②结 合测量 值对 细胞进 行分类 。
16 9 7年 , K m m sy和 Me n d在 Mo ae aet k l e m l vn的 方 d
法基 础 』提 出细胞 分选 的方法 。1 6 二 9 9年 ,V nD l a ia l F lye 及 其 同事 们 在 L s L o ,N ( uw lr oA m s M 即现 在 的 N t n l l y m t eoreL b) 发 明 第 一 台 a o a Fo C t er R suc a s i w o y
细胞 检测 自动 化 的人 ,他试 图用 光 电仪 记 录流 过 1
d tc in ee t n
根 毛 细管 的细胞 数 量 。 13 96年 ,C seso 引 入 aprsn等
随着 市 场经 济 的快 速 发 展 和 生ห้องสมุดไป่ตู้活 水平 的提 高 , 特别 是 加入 WT O后 ,消 费者 对食 品 安全 更加 关 注 , 食 品安 全与 食 品 贸易 的关 系更 为 密切 ,提 高 我 国食
张峻 峰 刘 道 亮 赵 占民 孙 晓 霞 胡连 霞
( 北 出入 境 检 验检 疫 局 , 家庄 0 05 ) 河 石 5 0 0
Z HANG J n fn u -e g L U Da —in Z I o l g a HAO Z a - n S a - i HU L a — i h n mi UN Xio xa in xa
( b i nr E iIset n n u r t e ueuS i zu n 5 5 , hn) Hee E t — xtnpci dQ aa i ra ,h i h ag0  ̄ 0 C ia y oa nnB j a

简述食品中大肠杆菌的快速检测方法相关研究进展

简述食品中大肠杆菌的快速检测方法相关研究进展摘要:大肠菌群的快速检测是食品、药品卫生监督检验迫切需求,本文从免疫学技术,酶学的技术,分子生物学技术,传统检测方法改进技术,物理化学技术,其它技术方面对大肠菌群快速检测方法研究进展进行综述,并对其存在问题及应用前景进行分析。

这些方法各有优缺点,免疫学技术和分子生物学技术灵敏度高,但假阳性率高,无法区分死活菌;酶学的技术和物理化学技术特异性好,省时省力,但这些方法成本较高,不适合基层实验室使用;传统检测方法改进技术结果准确,但费时费力。

因此,仍需要发展一种新的方法解决所存在的问题。

要真正实现大肠菌群的快速检测还需要不断进行科学研究,以寻找一种能够真正实现成本低、灵敏度好、准确性高并且检测速度快的更合适的方法。

关键词:食品;大肠菌群;快速检测;研究1引言大肠菌群为一群在37C、24h能发酵乳糖,产酸、产气,需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌的统称。

这些细菌多存在于温血动物粪便中,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然存在的主要原因。

因此,大肠菌群被国际上公认为检测各种水质、医药及食品在流行病学上安全性的指示菌。

如果检测到大肠菌群呈阳性结果,那么便表明食品、药品或者水质存在大肠菌群,已经被粪便污染。

大肠菌群的数量与受到的污染程度成正比,数量越多,受污染越严重。

目前我国国家标准主要用多管发酵法来检测大肠菌群多管发酵法作为一种传统的检测方法已沿用多年,其准确性、权威性无可质疑,但该方法费时费力,而且检测所需的费用较高,已无法满足人们对食品、药品安全现场监测的要求,因此,现在食品、药品卫生监督检验迫切需要一种更加有效、快速的大肠菌群检测方法。

近年来,世界各国针对大肠菌群的快速、定量检测技术都进行了专门的研究,本文综述了大肠菌群快速检测技术的研究进展,并对其存在问题及应用前景进行分析。

2大肠菌群主要的快速检测方法2.1免疫学技术免疫学方法检测原理是依据抗原和抗体特异性反应。

微生物检测技术的发展与挑战

微生物检测技术的发展与挑战在我们生活的这个世界里,微生物无处不在。

它们既可以是我们的朋友,如参与发酵制作美食的有益菌;也可能是我们的敌人,如引发疾病的病菌。

为了更好地了解这些微小却影响力巨大的生物,微生物检测技术应运而生,并在不断地发展和演进。

微生物检测技术的发展历程可以追溯到很久以前。

早期的方法相对简单和粗糙,主要依靠显微镜观察和培养技术。

科学家们通过在特定的培养基上培养微生物,然后观察它们的形态、生长特性等来进行初步的鉴定和分析。

这种方法虽然在一定程度上能够帮助我们了解微生物的存在和基本特征,但它存在着诸多局限性。

例如,培养过程耗时较长,有些微生物难以在常规培养基上生长,导致检测结果不够全面和准确。

随着科学技术的不断进步,微生物检测技术也取得了显著的突破。

分子生物学技术的出现为微生物检测带来了新的机遇。

聚合酶链式反应(PCR)技术使得我们能够快速、特异地检测出特定微生物的基因片段,大大提高了检测的灵敏度和准确性。

通过设计针对特定微生物基因的引物,PCR 可以在短时间内从复杂的样品中检测到微量的目标微生物。

而且,实时荧光定量 PCR 技术还能对微生物的数量进行定量分析,为研究微生物的分布和动态变化提供了有力的工具。

除了 PCR 技术,基因测序技术的发展也为微生物检测带来了革命性的变化。

全基因组测序可以获取微生物的完整遗传信息,不仅能够准确鉴定微生物的种类,还能发现其潜在的致病性基因和耐药基因,对于疾病的诊断、治疗和防控具有重要意义。

比如,在传染病爆发时,通过对病原体进行全基因组测序,可以快速追溯感染源,了解病原体的传播途径和进化规律,从而采取有效的防控措施。

免疫学检测技术也是微生物检测中的重要手段。

酶联免疫吸附试验(ELISA)通过检测微生物抗原或抗体的存在来确定是否感染。

这种方法具有操作简便、快速、成本低等优点,在临床诊断和食品卫生检测中得到了广泛应用。

此外,免疫磁珠分离技术可以特异性地捕获和富集目标微生物,提高检测的灵敏度和特异性。

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微生物快速检测方法进展
【关键词】 微生物;快速检测;应用进展
doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x).2012.06.566 文章编号:
1004-7484(2012)-06-1685-02
有些微生物是有益的,也有些微生物的存在可引起多种应变性疾
病和传染性疾病,会对人身体健康产生不良的影响;还会使食品及
原料腐烂和变质。在空气或液体中,对于微生物的采集,选择合适
的试验仪器发挥着不可磨灭的作用。1 微生物检测的必要性
1.1 食品因含有微生物可依赖生长的营养成分,因此食品会受到
微生物不同程度的污染。食品质量安全关系到人民群众的身体健
康,生命安全及社会经济。为了食品的安全,人们的健康,微生物
检测极其必要。
1.2 医院感染都和微生物有着极为密切的关系。加强医院的微生
物检验与监测,对于预防和控制医院感染起着十分重要的作用。
1.3 空气室内空气是微生物污染的重要传播途径。室内舒适的温
度,湿度等环境条件以及相对密闭的室内更为各种有害微生物滋生
创造了条件。只有有效地检测微生物的含量,才能采取有效地措施,
保证人体健康不受外源入侵物的侵害。2 微生物快速检测方法及应
用进展
2.1 即用型纸片法由3m公司研发的perrifilmtmplate系列微生
物测试片能够对菌落总数、大肠菌群、霉菌和酵母进行分别计数。
运用快速检验制片对霉菌进行检验,具有操作便捷的优点,其操作
环境仅需要维持在36℃即可,无需进行低温培养;这种检验方法还
具有快速的优点,培养2天后就能够得到结果,远小于国家标准检
验法的3-4天的检验时间,大大缩短了工作时间。纸片法和国家标
准检验法在霉菌检验率上效果接近,结果明显可知。而制片荧光法
的应用原理则是细菌产生的代谢酶或其他产物能够进行酶底物反
应。这种方法只需要对大肠菌群、大肠杆菌中相关酶的活性进行检
测,并将荧光产物置于365nm紫外光下进行观察即可。纸片检验法
采用高压灭菌方法,能够减少实验准备以及操作步骤。但是纸片的
缺点就是成本过高,因此实践中基层单位较少采用。
2.2 生物化学技术
2.2.1 pcr技术 pcr技术的原理就是体外酶促反应可以合成特异
性dna片段,对其扩增物的识别就能够检测菌群。pcr技术具有灵
敏度高的优点,甚至能够检测出细菌的拷贝基因,因此在检测过程
中甚至可以不增加菌群数量就能够使用pcr技术进行筛选,能够大
大提高筛选效率。但是pcr技术存在的缺点也很明显,即对tap酶
具有抑制作用的成分如食物成分、增菌培养基成分或者其他微生物
dna,会诱发检验结果呈现假阴性。pcr的操作过程也十分严格,即
使有微量的外源性dna进入pcr,都会导致结果出现假阳性。甚至
扩增过程中的装配误差也会影响结果的准确性。基于此,pcr技术
的高要求也是基层单位排斥其使用的重要原因,且这样技术的经济
效益与社会效益见效慢,也影响了其在基层单位的推广使用。
2.2.2 基因探针技术 基因探针技术的作用原理是同源序列的核
酸链在一定条件下能够形成稳定的互补dna、rna或dna、dna链条,
此时可以利用具备高度特异性片段制成的基因探针来对不同细菌
进行识别。基因探针具有减少因基因片段长度的多态性导致的分析
条带数的增多,例如法国生物一梅里埃公司的gen、probe基因探
针检测系统,对特定菌落进行分离并进行确证试验仅需要30分钟。
这项技术的缺点是对目标菌以外的细菌无法检测识别。
2.3 选择、鉴定用培养基法 这种方法的原理就是通过在培养集
中介入特异性的生化反应底物、抗体、荧光暗影第五、酶反应底物
等,能够对目标培养菌进行一次性选择与分离,例如生物一梅里埃
公司的bp+rpf(兔血浆+纤维蛋白原)培养基对金黄色葡萄球菌的选
择、鉴定可在24小时内完成。在merk公司的chro mocult coliform
agar培养基中,大肠杆菌的颜色从墨绿色过渡到紫色,沙门菌的颜
色从淡绿色过渡到蓝绿色,橙红色至红色的菌落是柠檬酸杆菌、克
雷伯杆菌,其他的肠道菌则是无色的。这种方法对操作者要求较低,
使用者经过短期培训就可以上岗,其发展前景十分可观,能带来良
好的经济效益和社会效益。
2.4 免疫学技术 免疫学技术的原理是利用抗原与抗体的特异性
结合,加之免疫放大技术来对细菌进行鉴别。免疫学技术的特长是
不需要分离增加的细菌,操作方法简便。免疫法的优点是灵敏度高,
抗原与抗体的结合反应时间较短,因此检验的时间跨度也较小。例
如以免疫磁珠法对副溶血性弧菌能够快速、有效收集,还能够对特
定环境与食品中的目标菌群进行高效率的检验。采用胶金体免疫法
对金黄色葡萄球菌不仅能够进行快速、准确的鉴别,还能够对乙型
肝炎的表面抗原进行快速检测。近年来,atp生物发光法在实践中
越来越普及,主要用于食品加工设备的洁净度进行快速检测。这种
方法配合体细胞清除技术,能够对细菌atp和体细胞tap进行快速
检测。原理就是细菌atp的数量与细菌的数量成一定比例,atp生
物发光法就是利用这个原理对肉类食品细菌的污染状况或者食品
容器进行快速、高效的现场卫生学检查。微型自动荧光酶标分析法
(mini vidas)的作用机制是抗原与抗体之间会出现特异反应,进而
利用酶联荧光免疫分析技术对目标细菌进行检测与分离。因为荧光
的强弱可以辅助设备对样品的阴阳性进行自动判断,这种方法鉴别
沙门菌的灵敏度与准确度特别高。这种方法在实践中多用于出口冻
肉的检验,能够有效提高通关的速率。
2.5 细菌直接计数法 这种方法主要包括流式细胞仪(flow
cytometry,fcm)和固相细胞计数(solid phase cytometry,spc)
法。这种方法的原理就是利用激光作为发光源,光束在聚焦、调整
后对样品流进行垂直照射,这样被荧光染色的细胞就能够产生散色
光和激发荧光。光散射的信号能够标志细胞体积的大小,信号强度
则是细胞膜表面抗原的轻度或者核内物质浓度的反应,基于此散射
光信号和荧光信号就能够对微生物的大小、数量、形状进行预估。
这种方法的优点是灵敏度高,且可以对细菌的性质与数量同时鉴
定。目前这项技术可以对细菌总数、致病性沙门菌、大肠埃希氏菌
等进行检测。对特定细胞进行技术统计,就能够对不同细胞进行精
确度较高的检测。进行过滤样品的操作之后,实验者可以存留的微
生物进行荧光标记,用激光扫描仪就可以对其鉴别。这种方法的优
点就是对生长速度慢的微生物能够进行快速检测,其检测速度能够
远高于传统的平板计数法,缺点是成本较高,因此推广使用具有一
定困难。

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