抗生素操作 氯霉素(CAP)-------拜发
氯霉素工艺流程图
氯霉素工艺流程图氯霉素是一种广谱抗菌药物，被广泛用于医疗、养殖和农业行业。
下面是一份氯霉素的工艺流程图:一、原料准备：1. 取得氯霉素的原料，包括醋酸钠、4-氯-3-亚硝基苯甲酸、亚硝基乙酸甲酯、重铬酸钾、氢氧化钠等。
2. 对原料进行筛查和测试，确保原料的质量和纯度。
二、反应：1. 将亚硝基乙酸甲酯添加到反应釜中，然后加入亚硝基乙酸钠溶液。
2. 在搅拌下将反应釜加热至40-45℃，维持2-4小时。
3. 加热的同时，将4-氯-3-亚硝基苯甲酸逐渐加入反应釜中。
4. 反应釜中的液体继续保持在40-45℃下搅拌2-4小时，直到化合物充分反应。
三、中和：1. 将反应得到的溶液缓慢地加入到冷却器中。
2. 将冷却后的溶液进行中和，将溶液的酸性中和为碱性。
3. 使用适量的氢氧化钠溶液来中和。
四、沉淀：1. 在中和的过程中，使用重铬酸钾作为指示剂。
2. 当溶液中的重铬酸钾颜色由红变绿时，表示中和完成。
3. 停止加入氢氧化钠溶液，溶液中析出的沉淀物即为氯霉素。
五、过滤和干燥：1. 用真空过滤将溶液中的沉淀物过滤出来。
2. 将过滤后的沉淀物洗净并进行再过滤。
3. 将过滤后的沉淀物进行干燥，得到氯霉素的固体产物。
六、粉碎和包装：1. 对干燥后的氯霉素固体进行粉碎，使其具有合适的颗粒大小。
2. 将粉碎后的氯霉素进行包装，并进行质量检测。
3. 将符合质量要求的氯霉素产品进行存储和运输。
这是一种常见的氯霉素工艺流程图，具体的细节可能因不同的厂家和工艺条件而有所不同。
在实际操作中，还需要注重安全和环境保护，合理配置设备和工艺参数，确保生产质量和效率。
氯霉素性质及结构剖析.
灰色综合症。现时，氯霉素主要是用在医治细菌性结膜炎的眼药水
或药膏上。
一、理化性质
名称：氯霉素 化学名：1R,2-(-)-1-对硝基苯基-2-二氯乙酰胺基-1,3-丙二醇 结构： 名称：对乙酰氨基酚
性状：白色或微黄色的针状、长片状结晶或结晶性粉末，味苦 熔点：149~153℃ 溶解情况：易溶于甲醇、乙醇、丙酮或丙二醇中，微溶于水 比旋度：[α]=25-25.5°（乙酸乙酯）
氯霉素
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氯霉素（Chloramphenicol）是一种抑菌疹伤寒等。对百日咳、砂眼、细菌性痢疾
及尿道感染等也有效。氯霉素是世界上首种完全由合成方法大量制
造的广谱抗生素，对很多不同种类的微生物均起著作用。它因价钱 低廉的关系，现时仍然盛行于一些低收入国家；但在其他西方国家 经已甚少使用，这是由于它的副作用的关系：会引致致命的再生不 良性贫血；长期用可引起二重感染；新生儿、早产儿用量大可发生
二、结构剖析
氯霉素（上图）中C-1和C-2是两个手性中心，因而它的光学异构体 共有四种。这是种异构体为两对对映异构体，其中一对的构型为D-
苏型（1R,2R型）和L-苏型（1S,2S型）；另一对为D-赤型（1R, 2S型
）和L-赤型（1S,2R型）。未经拆分的苏型消旋体为合霉素。
氯霉素是由放线菌属的委内瑞拉链丝菌所产生的抗生素
_§7、氯霉素氯霉素是由放线菌属的委内瑞拉链丝菌所产生的抗生素。
现用化学合成法生产。
50年代，氯霉素应用甚广，它对革兰氏阴性和阳性细菌都有抑制作用，但对前者的效力较强，如用来治疗伤寒等。
由于氯霉素会抑制骨髓的造血功能，引起粒细胞和血小板减少症，或再生障碍性贫血（如急性白血病），因而后来限制它的使用。
氯霉素是第一个含硝基的天然药物。
氯霉素有四个光学异构体：NO 2HO C C HNHCOCHCl 2CH 2OHH NO 2C C H CH 2OHHCl 2CHCONH OH NO 2C C H NHCOCHCl 2CH 2OH H OHNO 2C HCH 2OH HCl 2CHCONH HO上面四个异构体中仅D （－）苏阿糖型有抗菌活性，为临床使用的氯霉素，因具有左旋光性，又称左旋霉素。
合成方法：O 2O 2NCOCH 2Br(CH)N . C H ClO 2NCOCH 2N 4(CH 2)6 .BrHCl . C H OHO 2N COCH 2NH 2 . HCl(CH 3CO)2O . CH 3COONaO 2NCOCH 2NHCOCH 3HCHO . C 2H 5OHO 2NC OCHCH 2OHNHCOCH 33CH 3CHOHCH 3CH CHOCH3CH 3C O O O CC CH 2HHOCHMe 23O 2NO 2NH CH 2OH3CCO 2NHO CH 2OHNHCOCH 3CCO 2NCH CH CH 2OHOHNHCOCH 3O 2NCH CH CH 2OHOHNH 2. HCl****O 2NCH CH CH 2OHNH 2O 2NCH CH CH 2OH OHNH 2**O 2NCH CH CH 2OHOHNHCOCHCl 2**O 2NCH CH CH 2OCOCH 2CH 2COONaOHNHCOCHCl 2**O 2NCH CH CH 2OCOC 15H 31OHNHCOCHCl 2诱导结晶拆分法的一个特别令人感兴趣的例子，是DL －氯霉素的母体氨基醇的拆分。
氯霉素注射液
氯霉素注射液【药品名称】通用名称：氯霉素注射液英文名称：Chloramphenicol Injection【成份】本品主要成分为氯霉素，其化学名为D-苏式-(-)-N-[α-(羟基甲基)-β-羟基-对硝基苯乙基]-2,2-二氯乙酰胺。
【适应症】1.伤寒和其他沙门菌属感染：为敏感菌株所致伤寒、副伤寒的选用药物，由沙门菌属感染的胃肠炎一般不宜应用本品，如病情严重，有合并败血症可能时仍可选用；在成人伤寒、副伤寒沙门菌感染中，以氟喹诺酮类药物为首选（孕妇及小儿不宜用该类药）。
2.耐氨苄西林的B型流感嗜血杆菌脑膜炎或对青霉素过敏患者的肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌脑膜炎、敏感的革兰阴性杆菌脑膜炎，本品可作为选用药物之一。
3.脑脓肿，尤其耳源性，常为需氧菌和厌氧菌混合感染。
4.严重厌氧菌感染，如脆弱拟杆菌所致感染，尤其适用于病变累及中枢神经系统者，可与氨基糖苷类抗生素联合应用治疗腹腔感染和盆腔感染，以控制同时存在的需氧和厌氧菌感染。
5.无其他低毒性抗菌药可替代时治疗敏感细菌所致的各种严重感染，如由流感嗜血杆菌、沙门菌属及其他革兰阴性杆菌所致败血症及肺部感染等，常与氨基糖苷类合用；6.立克次体感染，可用于Q热、落矶山斑点热、地方性斑疹伤寒等的治疗。
【用法用量】稀释后静脉滴注。
成人一日2～3g，分2次给予；小儿按体重一日25～50mg/kg，分3～4次给予；新生儿一日不超过25mg/kg,分4次给予。
【不良反应】1.对造血系统的毒性反应是氯霉素最严重的不良反应。
有两种不同表现形式：1.与剂量有关的可逆性骨髓抑制，常见于血药浓度超过25mg/L的患者，临床表现为贫血，并可伴白细胞和血小板减少。
2.与剂量无关的骨髓毒性反应，常表现为严重的、不可逆性再生障碍性贫血，发生再生障碍性贫血者可有数周至数月的潜伏期，不易早期发现，其临床表现有血小板减少引起的出血倾向，如瘀点、瘀斑和鼻衄等，以及由粒细胞减少所致感染征象，如高热、咽痛、黄疸、苍白等。
氯霉素
氯霉素简介
理化性质
氯霉素（chloramphenicol， chloromycetin）是由委内瑞拉链 丝菌产生的抗生素。氯霉素的化 学结构含有对硝基苯基、丙二醇 与二氯乙酰胺三个部分，分子中 还含有氯。其抗菌活性主要与丙 二醇有关。白色针状或微带黄绿 色的针状、长片状结晶或结晶性 粉末；味苦。在甲醇、乙醇、丙 酮、丙二醇中易溶。在干燥时稳 定，在弱酸性和中性溶液中较安 定，煮沸也不见分解，遇碱类易 失效。
+Br2
O2N
COCH2Br
+HBr
对硝基-α-溴代苯乙酮
工艺
将对硝基苯乙酮及氯苯加入溴代罐中，加入 少量溴(约占全量的2%~3%）。保持温度在 26~28摄氏度，逐渐将其余的溴加入。溴滴加 完毕后，继续反应一小时，然后升温至35~37 摄氏度，静置半小时后，将澄清的反应也送 至下一步成盐反应。
反应条件
结构式
药效
本品在体外具广谱抗微生物 作用，包括需氧革兰阴性菌 及革兰阳性菌、厌氧菌、立 克次体属、螺旋体和衣原体 属。对下列细菌具杀菌作用： 流感杆菌、肺炎链球菌和脑 膜炎奈瑟菌。对以下细菌仅 具抑菌作用：金黄色葡萄球 菌、化脓性链球菌、草绿色 链球菌、B组溶血性链球菌、 大肠杆菌、肺炎克雷伯菌、 奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、 副伤寒沙门菌、志贺菌属、 脆弱拟杆菌等厌氧菌。 本品属抑菌剂。氯霉素为脂 溶性,通过弥散进入细菌细 胞内,并可逆性地结合在细 菌核糖体的50S亚基上,使肽 链增长受阻(可能由于抑制 了转肽酶的作用),因此抑制 肽链的形成,从而阻止蛋白 质的合成.
（三）、对硝基-α-乙酰胺基羟-β-基苯 乙酮的生产及其过程
1、对硝基-α-溴代苯乙酮的制备 2、对硝基-α-氨基苯乙酮盐酸盐的制备 3、对硝基-α-乙酰胺基苯乙酮的制备 4、对硝基-α-乙酰胺基- β-羟基苯丙酮的制备
微生物实验常用抗生素浓度配制
微⽣物实验常⽤抗⽣素浓度配制微⽣物实验常⽤抗⽣素浓度配制----------四川⼤学⽣命学院-微⽣物代谢与⼯程重点实验室1、氨苄青霉素（[Amp]Ampicillin）（100mg/ml）溶解1g氨苄青霉素钠盐于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。
2、羧苄青霉素（[Car]Carbenicillin）（50mg/ml）溶解0.5g羧苄青霉素⼆钠盐于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以25ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。
3、甲氧西林（[Met]Methicillin）（100mg/ml）溶解1g甲氧西林钠于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以37.5ug/ml 终浓度与100ug/ml氨苄青霉素⼀起添加于⽣长培养基。
4、卡那霉素（[Kan]Kanamycin）（10mg/ml）溶解100mg卡那霉素于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。
5、氯霉素（[Cm]Chloramphenicol）（25mg/ml）溶解250mg氯霉素⾜量的⽆⽔⼄醇中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以12.5ug/ml～25ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。
6、链霉素（[Str]Streptomycin）（50mg/ml）溶解500mg链霉素硫酸盐于⾜量的⽆⽔⼄醇中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以10ug/ml～50ug/ml的终浓度添加于⽣长培养基。
7、萘啶酮酸（nalidixic acid）（5mg/ml）溶解50mg萘啶酮酸钠盐于⾜量的⽔中，最后定容⾄10ml。
分装成⼩份于-20℃贮存。
常以15ug/ml 的终浓度添加于⽣长培养基。
8、四环素（[Tet]Tetracyyline）（10mg/ml）溶解100mg四环素盐酸盐于⾜量的⽔中，或者将⽆碱的四环素溶于⽆⽔⼄醇，定容⾄10ml。
氯霉素注射液的ph和含量测定
氯霉素注射液的ph和含量测定简介：氯霉素别名：左霉素，左旋霉素，氯胺苯醇，氯丝霉素试验氯霉素是一种抑菌类抗生素，由大卫·戈特利布（David Gottlieb）于1947年从南美洲委内瑞拉的土壤内的委内瑞拉链霉菌成功分离，再于1949年合成并引入临床。
氯霉素注射液为抗生素类药。
有广谱抑菌作用。
用于伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、流感杆菌、布氏杆菌、脑膜炎球菌、链球菌、肺炎球菌等感染，对多种厌氧菌感染有效，亦可用于立克次体感染。
有引起粒细胞缺乏症及再生障碍性贫血的可能，有时可引起精神症状，长期应用可引起二重感染，新生儿、早产儿用量过大可发生灰色综合症。
分子式：C11H12Cl2N2O5 分子量：323.13《药典》规定氯霉素注射液中氯霉素含量0.125mg/ml，有效范围规定含量90%-110%，ph5.0-7.5.药理：。
氯霉素能控制细菌核糖体的肽酰转移酶从而抑制细菌蛋白质生物合成。
氯霉素可以通过阻止氨基酰tRNA与核糖体50S亚基A位点的结合来抑制核糖体活动及蛋白质合成。
虽然氯霉素与大环内酯都是以影响50S亚基来发挥作用，但氯霉素不属于大环内酯。
用途：氯霉素有着很广泛的活跃性，能有效对抗革兰氏阳性菌，包括大部份的抗药性金黄色葡萄球菌、革兰氏阴性菌及厌氧性生物。
它却不能对抗绿脓杆菌或肠杆菌属的品种。
而对于类鼻疽伯克氏菌，则只有一点效用，但经已由头孢他啶及美罗培南取代。
在西方，氯霉素的使用主要限制在外用上，这是因它有导致再生不良性贫血的风险。
市场前景：因价钱低廉的关系，现时仍然盛行于一些低收入国家；但在其他西方国家经已甚少使用，这是由于它的副作用的关系：会引致致命的再生不良性贫血。
现时，氯霉素主要是用在医治细菌性结膜炎的眼药水或药膏上。
实验目的：1.ph值的基本原学习直接点位学法测理.2.学会使用酸度计测定氯霉素注射液1.3.学习紫外分光光度法测定氯霉素含量的方法.实验原理：1.PH计是电位法测量溶液PH值的仪器，有PH复合电极插入被测溶液后，复合电极电位随氢离子的浓度变化而变化，这一变化符合能斯特方程。
氯霉素制备实验报告
一、实验目的1. 了解氯霉素的制备原理和实验步骤。
2. 掌握氯霉素的提纯和鉴定方法。
3. 熟悉实验室操作技能，提高实验操作能力。
二、实验原理氯霉素（Chloramphenicol）是一种广谱抗生素，具有高效、低毒等特点。
其化学名称为β-（D-氯基）-L-苏氨酸，分子式为C11H14ClNO5。
本实验采用合成法，以L-苏氨酸为原料，通过多步反应制备氯霉素。
三、实验器材1. 仪器：反应瓶、磁力搅拌器、滴液漏斗、分液漏斗、抽滤装置、旋转蒸发仪、恒温水浴锅、分析天平、紫外可见分光光度计等。
2. 试剂：L-苏氨酸、氯仿、盐酸、氢氧化钠、无水乙醇、丙酮、活性炭、氯化钠等。
四、实验步骤1. 制备L-苏氨酸氯仿溶液将L-苏氨酸加入氯仿中，磁力搅拌至完全溶解，配制成一定浓度的L-苏氨酸氯仿溶液。
2. 合成中间体将L-苏氨酸氯仿溶液加入反应瓶中，加入一定量的盐酸和氢氧化钠，在恒温水浴锅中加热反应。
反应结束后，冷却至室温，加入适量的活性炭脱色。
3. 提纯中间体将脱色后的溶液进行抽滤，滤液用盐酸调至pH值为7，加入适量的氯化钠，使氯霉素盐析出。
抽滤得到氯霉素盐。
4. 中和氯霉素盐将氯霉素盐加入适量的氢氧化钠溶液中，中和至pH值为7，冷却至室温。
5. 结晶氯霉素将中和后的溶液用旋转蒸发仪浓缩至一定体积，冷却结晶，抽滤得到氯霉素晶体。
6. 干燥氯霉素将氯霉素晶体用无水乙醇洗涤，抽滤干燥，得到氯霉素产品。
五、实验结果与分析1. 氯霉素的制备通过以上实验步骤，成功制备了氯霉素产品，其外观为白色结晶，纯度较高。
2. 氯霉素的鉴定利用紫外可见分光光度计对氯霉素进行定量分析，结果表明，所制备的氯霉素含量符合实验要求。
六、实验总结1. 本实验采用合成法成功制备了氯霉素，实验过程操作简单，结果稳定可靠。
2. 实验过程中，应注意以下几点：（1）严格控制反应条件，如温度、pH值等；（2）选用合适的催化剂和溶剂，提高反应效率；（3）充分脱色，提高氯霉素纯度。
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氯霉素（CAP）-------拜发
一、前处理
1.称样2g+ 4ml水+ 4ml乙酸乙酯溶解
2.离心
3.取上层1ml，氮气吹干（60度）
4.加0.5ml buffer and vortex 缓冲液溶解
5.50ul 分析
二、点样
A.50ul标准样品/样品
B.加50ul酶结合物（红色冒：buffer=1:10）20-25度，1小时
C.洗板
D.加100ul显色剂，反应15分钟
E.加100ul终止液（450NM度吸光度）
（0 /25 /50/100/ 250/ 750ppb）
稀释倍数1
一、前处理（方法一）
一、
1、称1g样品加9ml提取液溶解、离心
2、C18; 2ml甲醇过----5ml水过---5ml离心样液过柱---5ml水洗----吹干----2ml
甲醇洗（地下用干净试管接）
3、水浴吹干
4、加5ml的SDB溶解液溶解
50ul用于分析（10倍稀释系数）
一、前处理（方法二）
1、1g蜂蜜样品+4ml SDB缓冲液溶解
2、静置后分层（或0.8ul滤膜过滤）、吸取1ml上层液体到4mlSDB液体中，混匀
3、50ml用于分析（25倍稀释系数）
二、点样
A、100ul零标液于孔A1、A2 (省)
B、50ul零标液于孔B1、B2
C、50ul各标准稀释液于各孔（浓度0.25、0.5、1、2、10、20ng/ml）
D、50ul各样品溶液于板孔
E、25ul酶标、抗体于各孔（除去A1、A2）
F、于2-8度下暗处反应1小时
G、洗板
H、100ul底物、室温30min
I、100ul终止液、450nm读数
提取液：1-庚烷磺酸钠10.1g
Na3PO4.12H2O 11.4g
H3PO4 调PH为2 定容1000ml
SDB缓冲液；1.15g NaHPO4
0.2g KH2PO4
0.2g KCL
30g NaCL
0.5ml 吐温80 （PH7.4）定容1000ml
一、前处理
1、0.5g样品
2、加4.5ml的8%甲醇的样品抽提缓冲液，混匀
3、离心
4、取上层水相50ul用于分析
（抽提缓冲液;0.77gNaH2PO4、0.18GKH2PO4、8.94gNaCL溶解定容1000ml）
二、点样
A、100ul零标液于孔A1、A2 (省)
B、50ul零标液于孔B1、B2
C、50ul各标准稀释液于各孔（浓度0.157、0.316、0.625、1.25、2.5、5ng/ml）
D、50ul各样品溶液于板孔
E、25ul酶标、抗体于各孔（除去A1、A2）
F、于2-8度下暗处反应1小时
G、洗板
H、100ul底物、室温30min
I、100ul终止液、450nm读数
磺胺（SAS）----绿诗源
（0ppb/0.4ppb/1.2ppb/3.6ppb/10.8ppb/32.4ppb）
一、前处理
1、1g蜂蜜样+1ml 的0.5M的HCL溶解置于37度30min
2、加入2.5ml的0.2M的NaOH (PH调至5左右)
再加入4ml的乙酸乙酯混匀离心
3、吸取上层2ml有机相于50度水浴吹干
4、加0.5ml已稀释好的复溶液溶解
5、取20ul用于分析
（稀释倍数1）
二、点样
1、加标样/样品20ul+50ul酶标+80ul抗体25度室温反应40min
2、洗板
3、A液50ul+B液50ul 25度避光显色20-30min
4、50终止液450nm/630nm
0.5M 的HCL液： 4.3ml浓盐酸加水定容100ml
0.2M的NaOH液: 0.8g的氢氧化钠加水定容100ml
硝基咪唑类--------北京望尔
（0ppt/50ppt/150ppt/600ppt/2400ppt/9600ppt）
一、前处理
1、3g样+3ml碳酸盐缓冲液(配液1)充分溶解
2、加9ml乙酸乙酯振荡，离心
3、取上层有机相6ml+2ml乙酸乙酯+2ml 2M的氢氧化钠（见配液2）混匀，离心，
4、取上层4ml置玻璃试管，吹干
5、加入1ml正己烷涡动30S,加入0.5ml复溶工作液，涡动1min,离心
6、出去上层，取下层50ul用于分析
（稀释倍数0.5）
一、前处理(减半)
1、1.5g样+1.5ml碳酸盐缓冲液(配液1)充分溶解
2、加4.5ml乙酸乙酯振荡，离心
3、取上层有机相3ml+1ml乙酸乙酯+1ml 2M的氢氧化钠（见配液2）混匀，离心，
4、取上层2ml置玻璃试管，吹干
5、加入1ml正己烷涡动30S,加入0.5ml复溶工作液，涡动1min,离心
6、出去上层，取下层50ul用于分析
（稀释倍数1）
二、点样
A、标准品/样品50ul+50ul抗体工作液(4度冰箱保存)、混匀于4度反应1h
B、洗板
C、加100ul酶标二抗25度30min
D、洗板
E、加50ul底物A+50ul底物B 25度30min
F、50ul终止液
配液1: 1M碳酸钠缓冲液：0.5gNaHCO3+4.66g无水Na2CO3 定容500ml 配液2：2M氢氧化钠溶液：40gNaOH 定容500ml
呋喃唑酮（AOZ）------粤尔
一、前处理
1、1g+4ml水+0.5mld的1M的盐酸溶液和100ul的衍生化试剂
2、37度过夜孵育（大约16h）或56度水浴中孵育2h
3、分别加入5ml 0.1MK2HPO4 和0.4ml 1M的氢氧化钠和5ml的乙酸乙酯，振荡，离心
4、取上层2.5ml的有机层，56度吹干
5、加1ml的正己烷溶解，加1ml已稀释好的复溶工作液充分混合03S,室温下离心
6、取50ul下层有机相用于分析
（
二、点样
A、标准品/样品50ul+50ul抗体工作液，25度反应1h
B、洗板
C、加100ul酶标25度反应30min
D、洗板
E、加50ul底物A+50ul底物B 25度30min
F、50ul终止液
配液：1、1M盐酸8.6ml的浓盐酸定容100ml
2、1M氢氧化钠4g的氢氧化钠溶解定容100ml
3、0.1M的K2HPO4 22.8g的K2HPO4.3H2O 定容1000ml。