抗凝剂是否会影响交叉配血的结果(凝聚胺)
抗凝剂对血液检验结果的影响
抗凝剂对血液检验结果的影响发表时间：2012-03-21T15:59:27.560Z 来源：《中外健康文摘》2012年第4期供稿作者：邹鸿燕[导读] 综上所述，抗凝剂的种类及对检验结果的影响已非常清楚，希望大家在今后的工作中多加注意。
邹鸿燕（淄博市张店区中医院检验科山东淄博255000）【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）4-0041-02【摘要】现在医学检验中抗凝剂的应用越来越多，如何正确的应用抗凝剂，最大程度的发挥抗凝剂的作用，同时尽量减少其不利影响应该得到大家的重视。
现在就对抗凝剂的种类与应用时的注意事项作浅要的分析。
【关键词】抗凝剂anticoaqulant 血液检验blood-test 影响influence应用物理或化学方法，除掉或抑制血液中的某些凝血因子，阻止血液凝固，称为抗凝。
能够阻止血液凝固的化学试剂或物质，称为抗凝剂或抗凝物质。
对抗凝剂的一般要求是用量少、溶解度大、不影响测定。
常用抗凝剂的种类与应用。
1 乙二胺四乙酸盐EDTA是临检工作中最常用和最重要的抗凝剂和试剂之一，其机制是通过与水相中的钙离子形成稳定的螯合物而阻止血液凝固。
EDTA 的盐类有钾、钠、锂盐、均溶于水，钾盐较钠盐的溶解度大，EDTA盐对红、白细胞形态影响很小，根据国际血液学标准公委员会（International committee standard of hematology,ICSH）1993年文件建议，血细胞计数用EDTA二钾作抗凝剂，EDTA-NA与EDTA-K2对血细胞计数影响均较小，但二钠溶解度明显低于二钾，有时影响抗凝效果，其他抗凝剂不适合于血细胞计数。
EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子，故不适于制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。
EDTA还会影响血小板聚集和白细胞吞噬功能，也不适于做止血学检验和血小板功能检验。
用EDTA抗凝血制备的涂片对粒细胞形态有影响，其影响程度与抗凝血放置时间和抗凝剂浓度有关。
凝聚胺法配血不合的原因及对策分析
凝聚胺法配血不合的原因及对策分析目的为了解疑难配血类型，分析交叉配血不合的原因，来指导临床安全合理用血。
方法采用凝聚胺法进行交叉配血，11年里在我院共发现50例交叉配血不合的現象，现对这些病例进行分析总结，并结合病史进行相关讨论，找出相应的处理方法。
结果引起患者交叉配血不合的原因较多，交叉配血不合的影响因素有标本、温度、疾病、输血史、妊娠史、大剂量抗菌药物史等，发现交叉配血不合，要分析原因找到处理办法，以保证患者输血安全；另外提倡自身输血和成分输血，尽量减少异体输血，是减少配血不合的最佳方法。
标签：交叉配血；凝聚胺；输血目前，临床输血越来越受到重视，注重输血的安全性。
确保输血安全的重要环节就是交叉配血试验，主要是为了对供血者与受血者抗体抗原能否相容进行检查，避免给受血者输注不合的血型抗体以及红细胞。
为了能使临床输血水平得到提高，安全合理的输血，避免发生输血的不良反应。
本文主要对贵州省黔东南州人民医院从2009年4月到2013年4月收治的55位交叉配血不合患者进行回顾分析，具体分析如下：1 材料与方法1.1 材料50例全部来自我院2009年4月到2013年4月住院输血患者，年龄20岁至80岁。
1.2 仪器与试剂1.2.1 仪器37℃水浴箱、低速台式自动平衡离心机、血库专用离心机、TD-3A 型血型血清学用离心机和FYQ 型免疫微柱孵育器、普通光学显微镜。
1.2.2 血型鉴定作ABO正定型，ABO反定型和Rh血型，按操作规程进行，血型鉴定特别困难的送贵州省血液中心鉴定。
BaSO 凝聚胺作交叉配血，生理盐水作交叉配血，交叉配血不合时进一步作相应试验，查找交叉配血不合的原因并作出处理。
用谱细胞和抗球蛋白卡作不规则抗体试验，阳性作进一步鉴定。
1.3 方法交叉配血按《临床输血技术规范》操作：用盐水配血方法和凝聚胺配血方法进行。
两种配血方法配血相容，血液发出；有配血不合的，查找不合的原因，进行分析，并做相关试验，如37℃孵育、自身凝集、不规则抗体检测、洗涤红细胞以及4℃凝集，吸收放散试验，询问年龄、病史、疾病以及用药等。
探讨盐水凝聚胺试验在交叉配血中的临床意义.
探讨盐水凝聚胺试验在交叉配血中的临床意义摘要：目的：检测盐水凝聚胺试验在交叉配血中的临床意义。
方法:对4 216例住院申请输血患者用盐水凝聚胺法做交叉配血试验,出现凝集者再用微柱凝胶卡抗体筛查试验做不规则抗体筛检。
结果: 用盐水凝聚胺交叉配血试验检测4 216例输血的血浆标本中出现凝集15例, 其中主侧出现凝集的14例、次侧凝集1例。
经用微柱凝胶卡抗体筛查试验比较，结果其中主侧出现凝集14例抗筛为阳性，另1例次侧出现凝集为供血者抗筛阳性，二法结果完全一致，抗体检测阳性率为0.33%。
结论:盐水凝聚胺交叉配血法是既能检测IgM抗体，又能检出IgG抗体的方法，且操作简便、快速、敏感性强、结果准确可靠，对临床输血的安全具有重要的意义。
关键词：凝聚胺试验；盐水法;交叉配血；不规则抗体交叉配血是输血前必不可少的,是保证输血安全的重要措施［1］。
传统的盐水介质法只能检测出完全抗体, 凝聚胺法可检测出不完全抗体,交叉配血需要2个试验来完成。
我们应用盐水凝聚胺法一个试验即可检出完全抗体和不完全抗体,经与微柱凝胶卡抗体筛查试验比较，结果表明该方法操作简便、快速、灵敏、结果准确。
现报道如下。
1 材料与方法1.1 检测对象选择2007年11月～2009年12月在我院住院申请输血患者4 216例，其中男性2 342例,女性1 874例,年龄5 d～87岁。
1.2 试剂凝聚胺试剂由珠海贝索生物技术有限公司提供；抗体筛查试验使用珠海保亚美有限公司提供的DiaMed凝胶微柱卡，标准筛查谱细胞( I、Ⅱ、Ⅲ) 由上海血液生物医药有限责任公司提供。
1.3 方法1.3.1 盐水凝聚胺交叉配血用生理盐水分别将患者和供血者的血液稀释成5%的红细胞悬液,取试管2支，标明主侧、次侧，主侧管加患者血清(血浆)2滴，加供血者5％红细胞悬液1滴，次侧管加病人5％红细胞悬液1滴，加供血者血清(血浆)2滴,混匀，3 400 r／min离心15 s。
凝聚胺法及微柱凝胶法同型交叉配血的结果分析
凝聚胺法及微柱凝胶法同型交叉配血的结果分析摘要】目的：研究两种方法同型交叉配血的结果及其对于临床安全输血的意义。
方法：分别用两种方法对360份临床受血者标本进行交叉配血，仔细观察并记录交叉配血结果。
结果：360份临床受血者标本用微柱凝胶法有349份标本配血结果相合（主侧或次则无凝集无溶血为相合），有11份标本结果为±～+的凝集，为配血不相合（主侧或次侧有凝集或溶血为不相合）；凝聚胺法有357份标本为配血结果相合，有3份标本为配血结果不相合，而这3份标本用微柱凝胶法配血其结果亦为不相合，两种方法交叉配血的结果差异有统计学意义（X2=4.16，P<0.05）。
结论：用微柱凝胶卡进行交叉配血灵敏度更高、结果更容易观察，更能减少临床输血不良反应的发生。
【关键词】凝聚胺法微柱凝胶卡同型交叉配血【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）12-0117-02Condensation amine law and the micro column gelatin card same type matches the blood alternately the result analysisJiang Youshi second people hospital inspection department YanHong, lan yu mei 621701【Abstract】Objective: Studies two methods to match the blood alternately the result and regarding the clinical security blood transfusion significance. Method: Uses two methods clinically to carry on separately to 360 the blood specimen matches alternately the blood, observes carefully and records matches the blood result alternately. Result: 360 clinical are had the blood specimen with the micro column gelatin law 349 specimens to match the blood result to coincide (host side or timedoes not have without agglutination hematolysis for to coincide), some 11 sign owner side or inferior side result for ±～+ the agglutination, for matches the blood not to coincide (host side either inferior side has agglutination or hematolysis for does not coincide); The condensation amine law has 357 specimens for to match the blood result to coincide, some 3 specimens for match the blood result not to coincide, but these 3 specimens match the blood result with micro column gelatin French penicillin blood it also for not to coincide, two methods match the blood the result difference to have statistics significance alternately (X2=4.16, P< 0.05). Conclusion: Carries on with the micro column gelatin card matches the blood sensitivity to be higher alternately,the result is easier to observe, can reduce the occurrence which the clinical blood transfusion responded not good.【Key word】 Condensation amine law The micro column gelatin card The sametype matches the blood alternately凝聚胺法交叉配血具有操作简单、快速、检测成本低且能检测受血者和供血者之间存在的IgM、IgG抗体[1]的优点，现在还在很多基层单位尤其是急诊抢救用血时广泛使用；微柱凝胶卡可检测出标本血清中的IgM和IgG型红细胞血型完全及不完全抗体[2]，具有标本用量少，灵敏度高，特异性强，操作简便，结果可长期保存等优点[3]，但由于其比凝聚胺法配血时间长，因此在急诊抢救用血进行交叉配血时存在一定的不足；在操作的方便程度上，因凝聚胺法除了加受血者及供血者血浆或红细胞悬液外，中途还要加3种检测试剂，并且每加一种试剂都要轻轻震荡混匀；凝聚胺法的操作不易标准化，受人为影响因素较大，如试管的震荡力度和对弱凝集的判定易受操作者的经验和视力等影响[4]；而微柱凝胶法只加受血者及供血者血浆或红细胞，不用加其他反应试剂，操作过程简单易标准化；因此微柱凝胶法为临床安全输血提供了更为广阔的空间。
凝聚胺法交叉合血操作说明
凝聚胺检测试剂盒使用说明书【产品名称】通用名：凝聚胺测试剂盒英文名：Polybrene Kit【包装规格】100人份/盒【预期用途】本产品用于交叉配血、抗体的筛查及鉴定，不适用于血源筛查。
【检验原理】凝聚胺是一种多价阳离子氨基聚合物，它可以引起红细胞的可逆性凝集。
低离子介质促进红细胞与相应抗体的结合后，在凝聚胺作用下，红细胞发生凝集，加入再悬液后，如果存在不完全抗体，细胞将不会散开，发生不可逆凝集，表明交叉配血不合或存在不完全抗体；反之凝集的细胞将均匀散开，表明交叉配血相合或不存在不完全抗体。
【主要组成成份】1、凝聚胺溶液（0.5%凝聚胺、0.9%氯化钠）10mlx12、低离子介质（5%葡萄糖、0.2%乙二胺四乙酸二钠）10mlx23、再悬液(3.5%柠檬酸、2%葡萄糖) 10mlx14、阳性对照（效价为16的IgG型抗D试剂）1mlx1【储存条件及有效期】2~8℃ 保存，有效期为12个月。
试剂开封后2~8℃ 保存，自开封之日起3个月内使用。
【使用仪器】离心机离心力和离心转数的换算公式为：rpm=299√g/r（r为离心半径，单位：cm）。
【样本要求】1、交叉配血:静脉抗凝全血，抗凝剂为EDTA.Na2、柠檬酸等，2~8℃保存48小时。
2、抗体筛查：采集静脉血于血清分离管中，2000 rpm，离心5分钟，收集血清。
采集静脉血于抗凝管中，2000rpm，离心5分钟，收集血浆，抗凝剂为EDTA.Na2、柠檬酸等，2~8℃ 保存48小时，或-20℃ 保存12个月。
不能用于发生溶血、黄疸及高脂的样本检测。
【检验方法】操作前，将所有试剂平衡至室温。
一、交叉配血试验1、标识:取试管2支，分别标明主、次侧管；另取试管2支，分别标明阳性、阴性对照管。
2、加样：主侧管加受血者血浆100μl（两滴）、献血者红细胞（3~5%）50μl（一滴）、低离子介质200μl（4滴）；次侧管加献血者血浆100μl（2滴）、受血者红细胞（3~5%）50μl（1滴）、低离子介质200μl（4滴）；阳性对照管加阳性对照100μl（2滴）、O型RhD+红细胞（3~5%）50μl（1滴）、低离子介质200μl（4滴）；阴性对照管加生理盐水100μl（2滴）、O型RhD+红细胞（3~5%）50μl（1滴）、低离子介质200μl（4滴）。
抗-E引起凝聚胺法交叉配血不合的处理方法
１２ １ 血 型 鉴 定 ．．
根 据 血
型鉴定和谱 细胞反应格 局 ， 抗 ＩＧ 阴 性 ， Ｃ ｇ 抗 阳 性 ， 不 规 则 抗 体 筛 选 阳性 ， 者 血 患 型为 Ｂ， Ｃ ｅ ； 叉 配 血 不 Ｃ Ｄ ｅ交
１ 资 料与 方法
１ １ 临床 资料 ．
患 者 ， ，２岁 ， 中海 贫 血 ， 当 男 １ 地 在
生率 。
参 考文 献
［ ］ 牟姗 ， １ 张庆怡． 尿路感染的诊断 与鉴别诊 断 ［ ］ 中国实用 内科 Ｊ． 杂志 ，０ １２ （ ）２ ３２４ ２ ０ ，１ ４ ：０ －０ ． ［ ］ 董砚 虎 ， ２ 钱荣立． 糖尿病 及其并 发病 当前治疗 ［ ． Ｍ］ 山东 ： 山东 科 技 出 版 社 ，９ ４：４ —４ １ １９ １２１６ ． ［ ］ Ｊｃｂ Ａ， ｎＰ Ｄ ｔｃｉ ｆｅｔ ｄ ｄｓｅｔ ｍ ｂｔ— ｃａ ｓ ３ ａｏｙＧ Ｈａ ． ｅ ｔ ｎ ｏ ｘ ｎ ｅ — ｅ ｕ ｅ ｌ ｔｍａｅ ｅ ｏ ｅ ｐ ｒ ａａ
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沭 ２０ ０ ８年 ９月第 １ ４卷 第 ｌ ８期
Ｍｅ ｉａ Ｒ ｄｃ ｌ
下 降 ， 度应 用 广谱 头孢 类 及 喹诺 酮 类 等 抗 菌 药 物 ， 过 使肠 球 菌 的感 染 率 上 升 ， 组 发 现 １例 肠 球 菌 菌 株 本 对万 古 霉素 耐药 ， 国 ２０ 我 ０ ５年 已有 万 古 霉 素 耐 药 肠
一
胞 １ ９×１ Ｌ 红 细 胞 １ ５ ． ０／ ， ． ８×１ Ｌ， 小 板 ４ 与 Ｏ、 Ｃ Ｅ ０／ 血 １× Ｃ Ｄ Ｅ在 酶 、 人 球 介 质 中反 应 ， 者 均 有 凝 抗 前 １ ｌ 尿素 氮 ２ ． ｍ ｌＬ 肌 酐 ５ ５ ８￣ ｌＬ 血 集 ， 者 均 不 凝 集 ， 明 血 清 中有 抗 ．。 吸 收 后 的 ０／Ｊ ， ５ ５ｍ ｏ ， ／ ４ ． ｍｏ ， ／ 后 说 Ｅ 尿酸 ７ ７ ６￣ ｏ Ｌ 尿 常规 ： 白 ４＋， 血 ２＋； ９． ｍｌ ； ／ 蛋 隐 血 Ｏ、 Ｃ ｅ 细 胞 放 散 液 与 Ｏ、 Ｃ ｅ ＣＤｅ Ｃ Ｄ ｅ及 Ｏ、 ｃ Ｅ Ｃ Ｄ ｅ细胞 型鉴 定 ： Ｂ型 ，ｈ Ｄ） Ｒ （ 阳性 。 因需 要 输 血 ， 凝 聚 胺 在 酶 、 人 球 介 质 中 均 无 凝 集 现 象 ， 吸 收 后 的 用 抗 而
凝聚胺交叉配血试验
1 实验原理凝聚胺试验应用于血库作业上，进行血型鉴定、交叉配血、完全抗体与不完全抗体的筛选，其灵敏度、特异性远高于其他介质1倍～250倍，方法简单快速，因此，陆续取代了盐水、木瓜酶试验。
其原理是利用低离子溶液降低离子强度，加速分子运动，减弱红细胞静电斥力，缩短红细胞间距，促进红细胞抗原和血清(血浆)中抗体结合发生非特异凝集，当附加假凝集清除液后非特异凝集立即散开，而由抗原抗体反应引起的特异性凝聚将依然存在。
由此，检出完全抗体或不完全性抗体。
2 试剂组合低离子介质-凝聚胺溶液：含葡萄糖、凝集胺、氯化钠、乙二胺四醋酸2钠及稳定剂；悬浮液：含柠檬酸钠、葡萄糖及稳定剂。
试剂由台湾贝索生物技术有限公司提供。
3 交叉配血试验取试管2支，分别标明主与次，主侧加入受(供)血清2滴，加供(受)血者3%～4%红细胞盐水悬液1滴。
各管加入低离子介质0.8 ml，混匀静置1 min，加凝聚胺1滴，混匀，以3 500 r/min离心10 s～15 s，倒出上清液(残留0.1 ml)，轻摇试管肉眼可见明显的凝集状，如无凝集须重做。
再加1滴假凝集清除液，边摇动边观察结果。
如果凝集散开为阴性，即为非特异性凝集，如不能散开为阳性，即为特异性凝集。
如反应可疑应用显微镜观察，上述凝聚胺配血方法见(输血技术学)［1］。
4 注意事项可以用含EDTA血浆代替血清进行交叉配血使用。
若使用血清可把标本放入37 ℃水浴箱,使其纤维蛋白析出后再用，否则，红细胞缠绕在纤维蛋白上造成假凝集现象。
如洗肾患者，血清(浆)中含有肝素，可出现假凝集，此时，须多加2滴～4滴凝聚胺溶液，以中和肝素。
冬天室温低，某些患者可能含有冷凝集素而导致假阳性结果出现，遇此情况，须再滴入2滴悬浮液后37 ℃水浴1 min，再观察，若凝集消失说明为冷凝集。
如盐水试验不凝集，凝集胺试验凝集说明有不完全抗体，必须进一步做抗体鉴定。
5 讨论凝聚胺交叉配血技术主要用于检测患者血清(浆)中是否有具有临床意义的红血球异体抗体。
002影响凝聚胺交叉配血结果的4种药物
影响凝聚胺交叉配血结果的4种药物
在实际工作中，一些临床上常用的药物能干扰和影响凝聚胺配血的结果，使试验失败。
为了在今后的工作中能顺利排除和避免这些干扰，使输血更加安全。
现将这些药物介绍入下：①KCI与VitC：这两种药物是临床上常用的补液辅助药物，在凝聚胺交叉配血中干扰红细胞的非特异性可逆凝集，也可对红细胞与相应的特异性凝集有干扰作用，而且其干扰作用与加入的量成正比；②止血敏：是消化道出血患者常用的止血药，武建曾证实用止血敏治疗过患者的标本，在手工凝聚胺配血中，加入凝聚胺后不出现非特异可逆凝集；③肝素：临床上既是常用的检验标本抗凝剂，也是肾病透析患者及外科断肢再植手术中为防血栓形成常用的抗凝药，笔者曾通过试验证实，用肝素做抗凝剂的标本，在凝聚胺交叉配血中红细胞也不出现非特异性可逆凝集，而用3.8%枸橼酸钠及EDTA-K2做抗凝剂的标本，无此影响。
凝聚胺配血是通过红细胞表面的唾液酸，使红细胞产生一种可逆的非特异性凝集。
KCl、VitC、止血敏、肝素均能干扰和影响这种凝集，患者标本中如含有这些药物，在凝聚胺交叉配血时，当加入凝聚胺离心后，主测管即出现不凝集现象，而导致试验失败[/color]。
KC1、VitC、止血敏对凝聚胺配血的影响，也属常见，在
今后的配血工作中，应加注意。
肝素则是常用的检验标本抗凝剂，在交叉配血的标本中应避免使用。
因凝聚胺试剂具有中和肝素的作用，若遇到用肝素治疗过患者的标本，配血时可加大凝聚胺的用量。
对使用过止血敏患者的标本，因止血敏在体内的维持有效时间为4～6h，因此可在药物有效期后抽标本，或用泰胃酶去除干扰后再观察结果，以确保凝聚胺配血结果的准确性，保证安全输血。
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抗凝剂是否会影响交叉配血的结果
在交叉配血操作过程中发现，不加抗凝剂吸取红细胞是比较困难。
在病人的标本中加入抗凝剂后就比较容易了。这样是否会对结果有什
么 影响呢？ 如果可以用，用什么样的比较好呢？
最好使用加有抗凝剂的标本,因为不加抗凝剂,血液容易凝固,如果
采用机械破坏已经凝固的细胞,可能会由于破坏不完全导致有小凝
块 ,从而干扰结果的判断：
1.若不加抗凝剂,血液中纤维蛋白原,转变为纤维蛋白,网状纤维蛋
白收缩的同时,其网络的大量血球块亦收缩变小,这就是血液凝
固现象.
2.血型不合而造成的凝集,是血浆中抗体和血球上的相应抗原发生
特异性抗 原、抗体结合，而使血球凝结在一起。
3.常用抗凝剂不干扰和影响抗原、抗体反应，所以抗凝剂不影响
交叉配血结果，
4.最后一个有利的依据，库存血袋血液，供配血用“小辫”中的
血样都是防凝血。 结论：抗凝剂不影响交叉配血结果！
但有的抗凝剂能影响聚凝胺的第一步，要注意到啊！并非不能用抗
凝血，不过不用抗凝血血也没有什么！ 3%的血球你可以发管子让抽
血时配搞好！
我的意见是用EDTA抗凝剂。因为其对于凝聚胺配血法没有影
响，而且可以避免激活补体造成的干扰，如溶血以及抗人球时的假阳
性。
含肝素的血标本对凝聚胺交叉配血试验的干扰
和处理
在临床输血中，影响交叉配血的因素很多，其中肝素抗凝剂的影
响是常见因素之一。我曾经遇到过妇科DIC高凝期抗凝治疗、内科
血栓性疾病肝素抗凝治疗合并消化道出血的几例病人，当用凝聚胺法
做交叉配血试验时，直接反应管离心后不显示凝集，试验无效，间接
反应管呈现凝集，有效。向临床询问病人的情况得知，均系用肝素进
行抗凝治疗后采集的血标本。遂进一步进行直接反应测定试验，在加
入凝聚胺试剂时多加3~4滴，离心后红细胞呈现凝集，试验有效，配
合试验结果相容。各位病人输血后均无不良反应。
发生此结果的原因，是由于肝素带有高价的负离子，可以中和凝聚胺
的正电荷，增加红细胞表面负电荷电位，使红细胞之间非特异性反应
减弱，所以对凝聚胺交叉配血试验造成干扰。
为此，我们在输血的过程中，应该全面了解病人的各种情况，
如输血史、妇女妊娠史、用药情况等。遇有用过肝素的病人，或紧急
情况下使用肝素抗凝标本的情况，最简便的方法是在配血时于直接反
应管内多加几滴凝聚胺试剂，以中和肝素的作用；或使用硫酸鱼精蛋
白凝固血标本（适用于后者）。这样就能获得准确、快速的交叉配血
结果。