早期梅毒患者血浆氧化应激指标变化及临床意义

现代医药卫生２０１７年６月第３３卷第１２期　Ｊ　Ｍｏｄ　Ｍｅｄ　Ｈｅａｌｔｈ，Ｊｕｎｅ　２０１７，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．１２　早期梅毒患者血浆氧化应激指标变化及临床意义　张丽翠　，明心亮　，张　亮　，梁　洁。，徐　潇　，方俊婷　，钟　晨　（１．石河子大学医学院第一附属医　院检验科，新疆石河子８３２００３；２．石河子大学医学院，新疆石河子８３２０００；３．石河子大学医学院第一　附属医院普外三科，新疆石河子８３２００３）　

【摘要】　目的探讨早期梅毒患者血浆氧化应激指标变化及其临床意义。方法选取２０１５年８月至２０１６年８月　在石河子大学医学院第一附属医院就诊和体检的患者及健康人群１５０例，将其分为早期梅毒组、非梅毒组和健康对照　组，其中早期梅毒组６０例，非梅毒纽５０例，健康对照组４０例。对比分析三组氧化应激指标。结果　与健康对照组比　较，早期梅毒组与非梅毒组隐性氧化蛋白产物、丙二醛、一氧化氮水平升高，超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性均降低．而早　期梅毒组谷胱甘肽（ＧＳＨ）水平降低，非梅毒组ＧＳＨ水平升高，差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。且早期梅毒组ＳＯＤ活性　下降程度高于非梅毒组，差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论　早期梅毒患者机体存在氧化应激状态．体内氧化应激　水平的检测对梅毒的早期诊断、治疗及评价预后具有一定的指导作用。　【关键词】梅毒；　早期；　超氧化物歧化酶；　氧化应激；　丙二醛；　隐性氧化蛋白产物　ｄｏｉ：１０．３９６９０．ｉｓｓｎ．１００９—５５１９．２０１７．１２．０２２　文献标识码：Ｂ　文章编号：１００９．５５１９（２０１７）１２．１８２２．０３　

近年来，我国梅毒发病率有逐年上升趋势。由于梅　毒在早期临床表现不明显，一期梅毒皮疹临床可表现　为单一的溃疡、硬下疳、轻度糜烂等，而二期梅毒皮疹　表现多为掌跖梅毒疹和扁平湿疣，同时呈多形性、多部　位出现，常常造成患者对病情的忽视及医生的误诊，给　患者的身心健康带来极大危害，也使梅毒的传播更为　迅速［１］。梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的一种慢性、系　统性、播散性传播疾病。梅毒螺旋体通过破损的皮肤或　黏膜入侵机体，从而侵犯机体所有组织和器官，而其所　有的临床表现都是长期慢性炎症反应的一个过程翻，处　于机体慢性氧化应激状态。而氧化应激过程中产生的　活性氧（Ｒｏｓ）具有较强的氧化活性，具有损伤细胞结　构、脂质过氧化和诱导细胞表型改变的能力。目前，有　研究表明，氧化应激参与许多疾病的病理生理发展过　程【３］，但尚缺乏对梅毒患者尤其是早期感染的人群氧化　应激状态的改变方面的研究。因此，作者通过对比分析　早期梅毒患者、非梅毒患者与健康人群，从而进一步了　解早期梅毒与机体氧化应激的相关性。为梅毒的预防、　预后评价及早期治疗提供有力证据。　１资料与方法　１．１一般资料选取２０１５年８月至２０１６年８月在石　河子大学医学院第一附属医院就诊的人员１５０例，年龄　２０～７６岁，平均（４４．５＋２５．１）岁；将其分为早期梅毒组　（６０例）、非梅毒组（５０例）和健康对照组（４０例）。早期　梅毒组中男３５例，平均年龄（４２．０±１４．０）岁；女２５例，　平均年龄（３９．２＿＋１２．０）岁；非梅毒组中男２７例，平均年　龄（３７．０＋１３．０）岁；女２３例，平均年龄（４１．６＋９．０）岁；健　康对照组中男２０例，平均年龄（３１．０＋１１．０）岁，女２Ｏ例，　平均年龄（３５．５＿＋１０．０）岁。早期梅毒组患者检测血浆快　通信作者．Ｅ・ｍａｉｌ：１１６７５４２２６０＠ｑｑ．ｃｏｍ。　速血浆反应素（ＲＰＲ）呈阳性，采用美国疾病预防控制中　心２００２年推荐的梅毒确诊试验——梅毒螺旋体颗粒凝　集试验（ＴＰＰＡ）呈阳性，临床表现一期梅毒皮疹以单一　的溃疡为主，而二期梅毒皮疹以掌跖梅毒疹为主，作为　诊断早期梅毒的确诊分期依据：非梅毒组选取与梅毒患　者具有相似临床症状且排除抗生素等药物影响，但　ＲＰＲ检测为阴性的患者；健康对照组选取同期来本院　体检的健康人群。　１．２方法　１．２．１标本采集与处理采集患者的空腹静脉血３　ｍＬ，　每例２支，共３００支，给予肝素钠抗凝，离心取血清５００　Ｌ，　用于ＴＰＰＡ、ＲＰＲ的检测，留取８００一ｌ　０００　Ｌ血浆置于　无菌ＥＰ管中。一８０℃冰箱里保存，用于后期检测丙二醛　（ＭＤＡ）、隐性氧化蛋白产物（ＡＯＰＰ）、谷胱甘肽（ＧＳＨ）、一　氧化氮（ＮＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力等指标。所有　梅毒患者的血浆经酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）和ＲＰＲ初　步筛选后，使用ＴＰＰＡ仪器（日本富士公司）进一步确诊。　１－２．２指标检测方法　采用硫代巴比妥酸比色法检测　ＳＯＤ、ＭＤＡ、ＮＯ水平，试剂盒由南京建成生物工程研究　所提供。而ＧＳＨ和ＡＯＰＰ由ＥＬＩＳＡ法检测，试剂盒由　上海西唐生物科技有限公司提供，试剂盒的各项指　标及质控参数均在允许范围内，且严格按照说明书进　行操作。　１．３统计学处理　应用ＳＰＳＳ１７．０统计软件进行数据　分析，计量资料以　表示，进行方差齐性检验，三组数　据比较采用单因素方差分析．检验水准ａ＝０．０５。Ｐ＜０．０５　为差异有统计学意义。　２结　果　与健康对照组比较，早期梅毒组与非梅毒组ＡＯＰＰ、　现代医药卫生２０１７年６月第３３卷第１２期Ｊ　Ｍｏｄ　Ｍｅｄ　Ｈｅａｌｔｈ，Ｊｕｎｅ　２０１７，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．１２　表１三组氧化应激指标比较（面±　）　

注：与健康对照组比较，　Ｐ＜Ｏ．０５；与非梅霉组比较，ｂｐ＜０．０５。　ＭＤＡ水平均升高，ＳＯＤ活性均降低，而早期梅素毒　组ＧＳＨ水平均降低，非梅素组ＧＳＨ水平升高，而ＮＯ水　平升高，差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。且早期梅毒组　ＳＯＤ活性下降程度高于非梅毒组，差异有统计学意义　（Ｐ＜０．０５）。见表１。　３讨　论　早期梅毒无明显临床症状，且症状较轻，易被患者　和医务人员忽视．但患者机体处于慢性氧化应激状　态。氧化应激是指机体在遭受各种有害刺激时，体内高　活性分子如活性氧自由基和活性氮自由基产生过多．　氧化程度超出氧化物的清除能力，氧化系统和抗氧化　系统失衡，包括引起生物大分子如蛋白质、脂类、ＤＮＡ／　ＲＮＡ的氧化，出现生物膜脂质过氧化、细胞内蛋白质及　酶变性、ＤＮＡ损害等病理状态，最后导致组织器官损伤　和疾病发生［４】。目前，针对氧化应激的临床研究大多以　检测脂质过氧化产物如ＭＤＡ或ＡＯＰＰ作为反映体内　氧化一还原状态的指标。在临床研究中，ＡＯＰＰ是反映机　体早期氧化应激状况的敏感指标，氧化应激时机体血　清中ＡＯＰＰ可呈高表达（　。ＡＯＰＰ是氧化应激作用对体　内各种蛋白质氧化后形成的蛋白氧化终末产物，可激　活单核细胞和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸　（ＮＡＤＰＨ）氧化酶，释放细胞内活性氧，在体内可正反馈　诱导或加重氧化应激反应，呈持续氧化应激状态［８１。本　研究中，早期梅毒组的ＡＯＰＰ水平显著高于健康对照　组，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），提示早期梅毒患者在　氧化应激过程中蛋白氧化损伤较为严重。且早期梅毒　组ＡＯＰＰ水平升高幅度大于非梅毒组。同时ＡＯＰＰ刺激　合成及其释放大量促炎性细胞因子，引起全身微炎症反　应，可进一步促进氧化应激的发生，引起脂质过氧化［８】。　而ＭＤＡ可反映体内自由基脂质过氧化程度。间接反映　细胞损伤的程度。　正常机体在代谢反应中会形成一些自由基．通常　这些自由基被称为ＲＯＳ。与此同时，正常机体组织含有　多种抗氧化酶和非酶系统，促进ＲＯＳ清除，阻止或限制　ＲＯＳ对机体的损伤，维持正常的细胞代谢活动［９１。当外　源性或内源性因素作用于机体时，氧化与抗氧化平衡　被打破，体内的抗氧化物质不足以对抗自由基引起的　组织损伤时，组织可能发生不可逆损伤，同时自由基的　生成增加，体内的ＳＯＤ、ＧＳＨ及ＮＯ水平也会随之发生　改变。当机体遭受到梅毒螺旋体攻击，氧化与抗氧化平　衡被打破时，检测梅毒患者循环中抗氧化水平包括血清　ＳＯＤ活性、ＧＳＨ水平等均能间接反映氧化应激状态㈣。　ＳＯＤ是细胞抗氧化酶系统中的一种酸性金属蛋白质，　存在于真核细胞胞液、线粒体和原核细胞中，可以通过　歧化作用清除体内氧自由基，维持机体的氧化与抗氧化　的平衡．保护细胞减少损伤，被认为是体内抗氧化系统　的第一道防线ｌｌ１】。ＳＯＤ活力的高低与自由基、低密度脂　蛋白的氧化损伤密切相关，测定ＳＯＤ的活力可间接反　映组织细胞抗氧化损伤、机体清除自由基的能力。本研　究中，相对于健康对照组和非梅毒组．梅毒组ＳＯＤ水平　明显降低，差异均有统计学意义（Ｐ＜０．０５），说明梅毒患　者抗氧化，清除自由基的能力降低。　作为机体的还原剂，还原型ＧＳＨ是羟基自由基和　单线态氧的清除剂，其化学结构中的巯基作为主要基团　发挥作用，通过巯基与自由基结合成酸类物质，可加速　对自由基的排泄。并且ＧＳＨ通过与过氧化物和自由基　结合后，可参与机体的氧化还原反应，参与对抗氧化剂　对巯基的破坏作用。使细胞膜中含巯基的蛋白及含巯基　的酶免遭破坏『ｌ　２ｌ，所以，ＧＳＨ是体内的重要保护因子，也　是机体重要的抗氧化物质，其水平的高低是衡量机体抗　氧化能力大小的重要因素。本研究中，早期梅毒患者ＧＳＨ　水平均低于健康对照组和非梅毒组，差异有统计学意义　（Ｐ＜０．０５），表明梅毒患者体内抗氧化保护作用能力减　弱，细胞膜含巯基的蛋白及含巯基的酶破坏增加　ＮＯ在　氧化应激过程中具有松弛血管、抑制白细胞的迁移和黏　附、减少氧自由基及氧化型低密度脂蛋白等作用口３１．可　以降低自由基对组织的损伤作用。本研究结果还显示，早期　梅毒患者体内的ＮＯ作为抗氧化物质，其水平相对于健　康对照组和非梅毒组升高，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。　总之，针对早期梅毒患者体内氧化系统与抗氧化系　统的失衡，反映机体的氧化系统的指标ＡＯＰＰ、ＭＤＡ水　平增多，反映抗氧化系统的指标ＳＯＤ活性、ＧＳＨ水平降　低，因此，测定以上氧化一抗氧化相关的酶活性和脂质　过氧化指标对研究早期梅毒患者体内氧化应激状态具　有十分重要的意义，为早期梅毒的诊断和后期治疗及预　后提供一定依据。　

参考文献　【１】　白志艺，谢震，林昭春．梅毒螺旋体耐阿奇霉素研究进展［Ｊ１．实用医　院临床杂志，２０１４，３（３）：１７３．１７６．　［２】朱琳．神经梅毒的诊断及其免疫炎症性损伤机制的研究［Ｄ】．合肥：安