猪瘟DNA疫苗的研究进展
新型猪瘟疫苗研究进展

接触性传染 病 , 养猪业 危 害极 大 , 病 原猪瘟 病毒 对 其
( lsi ls n e e i s C F 为 单 股 正 链 Casc wie fvr vr , S V) a u R NA病毒 , 于 黄 病 毒 科 ( lvrd e 属 F a iia )瘟 病 毒 属 ( et iu ), P si r s 研究 证 明 , v 猪瘟 病 毒 的抗 原 蛋 白主要 是 E 。E 、 2 0世 纪 7 、 1 E 。2 O年 代 后 期 , 瘟 的 流行 猪 形 式发生 了很 大变 化 , 区散 发 性 流 行 及 非 典 型猪 地 瘟 症状 的发生 , 明猪 瘟病 毒 的抗 原 性 可 能 存 在 着 表 变异 , 特别是 近年来 国 内外 应 用 单 克 隆抗 体 对 C株 检 测时发现 有不 同 的反 应模 式 , 瘟 兔 化 弱 毒疫 苗 猪 免 疫失败 也有报 道 , 示 随着 传 代 次 数 的 增 加 和对 提 不 同细胞 的适 应性 繁殖 , 苗 毒 株 可 能 发 生 异质 性 疫 或抗 原漂移 。加之数 十年 来猪瘟 病 毒在 大规 模 免疫 接种 压力下 出现抗 原 变 异 , 有 的传 统疫 苗 已不 能 现 完全适 应新形 势 的需 要 , 究 和 开 发 新 型猪 瘟 疫 苗 研 成为 大势所趋 , 分子 生物 学技术 的发展 , 新 型猪 而 为 瘟疫苗 的研究和 开发奠 定 了基础L 。 1 ] 1 猪瘟 病毒基 因缺 失型弱 毒疫 苗 病毒 编码毒 力 的 基 因可 以删 除 , 当某 些 与 病毒 复制无关 的毒 力基 因缺 失突 变 后 , 毒 毒 力 丧 失 或 病 明显减弱 , 但病毒 复制能 力并 不丧 失 , 同时还保 持 着 良好的免疫 原性 , 因此 , 过基 因工 程 技术使 病 毒基 通 因组 中的毒力基 因缺 失 , 以 获 得基 因缺 失 型 弱 毒 可 疫苗株 。
猪瘟流行病学的研究进展

4 3 ;. 4 0 0 2重庆 市 畜牧 科 学 院)
文章 编 号 :0 80 1(0 0 — 0 8 3 10 — 442 1) 0  ̄ 1 4
成 , 主要 区域 在 瘟 病 毒 中极 为 保 守 . 其
同 源性 可达 9 % 以上 . N端 由N r水 I 其 po
摘 要 猪瘟是威胁我 国养猪业的重要 传染病之一 . 随着猪瘟病毒( S V 的 CF )
.
4 . 善 医研 究 8
L E T KA DP U Tt N U TI o2 9 | S OC N o LiY|D s FYN V 6
猪瘟流行病学的研究进展
胡兴 权 V的 结 构 蛋 白及 功 能
衣 壳 蛋 白C C F 编 码 的 第 一 个 是 Sv
导 机体 产 生 中和 性抗 体 1 与调 控 基 因 7 1 。 表 达有 关 I S ]
关 键 词 猪 瘟
分子流行病 学
基 因型
H ig q a Z i -u D N u cu UX n- un, HUJ n jn, I G Y - h n a
( . i lS in e a d Veeiay Sain o b i iT w s i,Z o g in 1Anma ce c n tr r tt f as o n hp h n xa , n o h
糖 蛋 白 . 2 个 氨基 酸残 基 ( l 6 一 由2 7 Gu 8 2
猪瘟病毒E2蛋白研究进展

猪瘟病毒E2蛋白研究进展江馗语【摘要】Classical swine fever(CSF)is a highly contagious, acute, hyperthermic, multi-systemic hemorrhagic viral disease of pigs, which caused by classical swine fe-ver virus(CSFV), a member of the genus Pestivirus of the Flaviviridae. CSF is preva-lent in all continents except North America and Oceania,it is distributed worldwide, and it has relapsed in some European countries(Netherlands, Belgium, Britain, Germa-ny, Italy, Spain, etc.)which had eliminated CSF. Although we have used HCLV vaccine for inoculation for a long time,but CSF still exists in our country and happens from frequency of pandemic into erratic regional dissemination. Latent and persistent in-fection has increased. Therefore, we need clear swine fever virus genome structure and the most research value immunological antigen protein structures to provide a theoretical basis for the development of new and effective vaccines and diagnostic reagents. In this paper,we have reviewed the research progress in genomic structure of CSFV,structure, function, epitopes,expression and applications of E2 protein.%猪瘟(Classical Swine Fever,CSF)是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起的一种急性、接触性传染病。
猪圆环病毒灭活疫苗最新研究进展

猪圆环病毒灭活疫苗最新研究进展2021年第5期猪圆环病毒灭活疫苗最新研究进展李少丽,胡晓凤,王家福,康斌,李建林,尹忠良*(杭州佑本动物疫苗有限公司,浙江杭州310018)摘要:文章主要对当前猪圆环病毒2型(PCV2)的流行现状、猪圆环疫苗的应用及发展趋势进行综述。
当前PCV2仍是导致猪群发生圆环相关疾病的主要病原,PCV2d成为优势基因亚型,疫苗免疫可显著提高母猪的繁殖性能,降低保育猪和育肥猪的病死率,提高日增重,且当前商品疫苗对流行毒株仍可起到较好的免疫保护。
关键词:PCV2;猪圆环病;PCV2灭活疫苗中图分类号:S855.3文献标识码:A文章编号:1672-9692(2021)05-0093-04The latest research progress of inactivated porcine circovirus vaccineLi Shaoli,Hu Xiaofeng,Wang Jiafu,Kang Bin,Li Jianlin,Yin Zhongliang*(Hangzhou Youben Animal Vaccine Co.,LTD,Zhejiang Hangzhou310018)Abstract:The article summarized the current epidemic situation of PCV2,the application and development trend of porcine circovaccine.It was pointed out that PCV2was still the main pathogen leading to circle-related diseases in pig population,and PCV2d became the dominant gene subtype.Vaccine immunization can significantly improve the reproductive performance of sows and reduce the case fatality rate of nursing and finishing pigs,and increase daily weight gain.The current commercial vaccine could still play a better immune protection against the epidemic strain.Key words:PCV2;Porcine circovirus disease;PCV2inactivated vaccine猪圆环病毒相关疾病(porcine circovirus associated disease,PCVD)是由猪圆环病毒(porcine circovirus,PCV)引起的一种免疫抑制性传染病,家猪和野猪是其自然宿主。
猪瘟疫苗(传代细胞源)生产工艺研究

猪瘟疫苗(传代细胞源)生产工艺研究礼颖;王春雪【摘要】猪瘟是一种传染性疾病,是目前危害我国养猪业发展的主要疫病之一.由猪瘟病毒引起,因其流行广、发病率及死亡率高,猪瘟的防控工作也变得越来越艰巨.接种疫苗是控制猪瘟的主要途径,试验通过对猪瘟传代细胞源的工艺优化研究,以获得较好的生产工艺技术参数,从而确保提高产品效价和稳定性.【期刊名称】《饲料博览》【年(卷),期】2017(000)007【总页数】4页(P26-29)【关键词】ST细胞;消化;接毒,效价【作者】礼颖;王春雪【作者单位】哈药集团生物疫苗有限公司,哈尔滨150069;哈药集团生物疫苗有限公司,哈尔滨150069【正文语种】中文【中图分类】S828;S852.65+1猪瘟由猪瘟病毒(CSFV)引起,流行广,发病率及死亡率较高,是目前危害我国养猪业发展的主要疫病之一[1-4]。
随着我国猪瘟的流行越来越复杂,猪瘟的防控工作也变得越来越艰巨。
接种疫苗是控制猪瘟的主要途径[5-12]。
猪瘟活疫苗的生产中越来越多的采用传代细胞源生产工艺方法,此方法简化生产过程,减少了动物源的原材料的使用,但在培养过程中效价的稳定性与高低成为工艺研究重点,本文主要采用一些试验方法,使抗原效价有所提高,并确定其关键工艺参数。
1.1 细胞及毒株使用细胞为ST细胞,保存液氮罐中,生产用为10代以内;种毒为猪瘟兔化弱毒株(脾毒),保存温度-80℃冰柜,生产用毒种(3代)。
1.2 主要试剂及试验动物5倍MEM溶液、7.5%碳酸氢钠溶液、犊牛血清、青链霉素溶液、EDTA-胰酶分散液;检测用培养基普通琼脂、普通肉汤、40%葡萄糖溶液、酪胨琼脂斜面(G.A)、硫乙醇酸盐酪胨汤(T.G)葡萄糖蛋白胨(G.P);试验过程中所使用动物为大耳白家兔。
2.1 细胞制备ST细胞消化5~10 min后培养48 h的形态观察见图1,细胞消化45~50 min 后培养48 h的形态观察见图2,细胞消化65~70 min后培养48 h的形态观察见图3,ST细胞传代过程中细胞生长情况记录见表1。
几种常用猪瘟疫苗免疫效果比较研究

通 过 用 不 同 厂 家 生 产 的 3种疫 苗免 疫 同 一 批 猪 后 , E A方 法检 测不 同时 间猪体 内 C F抗 体 用 US S
水平 来 比较彼 此 间的差 异
1 试 验材 料和 方法
11 试 验 材 料 .
防疫 中 , 都往 往 采 用加 大 免疫 剂 量 来 解决 这 一 不 足 。目前 市 场上 的 C F商 品疫苗 种类 主要 有 细胞 S 苗 、 织 苗 和 脾 淋 苗 三 种 , 同疫 苗 种 类 及 不 同 组 不
生 产 厂 家 之 间 的免 疫 效 果 也 有 差 异 , 因此 , 疫 在
3 4
5 6
4 . 4 . 4 . 4 . 5 . 6 . 4 . 46 21 34 45 O9 54 52 5 . 5 . 55 0 1 5 . 5 . 4 . 4 . 6 . OO 10 89 68 22
4 . 4 . 4 . 4 . 6 . 6 . 6 . 32 01 66 68 15 68 20 2 . 5 . 5 . 7 . 6 . 6 . 5 . 86 46 89 89 33 30 57
111猪 瘟 疫 苗 猪瘟 细 胞苗 A( .. 江西 某 生 物制 品 厂 , 号 : 0 9 5 1 , 称 A苗 ; 瘟 细 胞 苗 B 批 200 1 ) 简 猪 ( 广东某 生物 制 品厂 , 号 : 0 0 1 ) 简 称 B苗 ; 批 2 96 8 , 0 猪 瘟 脾 淋 苗 ( 州 某 生 物 制 品 厂 .批 号 : 福
擎 繁
单位: %
a , r n 再 经 2 0 / i i 0 0 r n离心 5 r n 静 置 后 分 离 上 a r i, a 层血 清 于 05 m P管 。2  ̄保 存备 用 。 . LE 一 0C
猪瘟病毒基因组蛋白结构及蛋白表达技术的研究进展

种 功 能 蛋 白 ,对 病 毒 的免 疫 、识 别 、吸 附 和 进 入 宿 主 细 胞
十 分 重 要 。 它 可诱 导机 体 产 生 中 和 抗 体 ,用 其 免 疫 猪 可 诱 导
产 生 对 致 死 剂 量 的 保 护 性 免 疫 反 应 .也 是 病 毒 粒 子 吸 附 进 入
pl A oy()尾 巴结 构 ,在 所 有 瘟 病 毒 中 高 度 保 守 ,其 参 与 病 毒 基 因组 的复 制 、 多 聚蛋 白 的 翻译 和 病 毒 粒 子 的装 配 。猪 瘟 病 毒 的 O F翻 译 一 个 3 9 R 8 8个 氨 基 酸 的 多 聚 蛋 白 。 该 蛋 白在 细 胞 内 蛋 白 酶 和病 毒特 异 性 的 蛋 白酶 作 用 下 裂 解 成 各 种 成 熟 的
和 性 .N 2 3蛋 白为 双 功 能 蛋 白 ,具 有 丝 氨 酸 蛋 白酶 活 性 、 S—
核苷 i磷酸酶活性及 解旋酶 活性 ,其解旋作用 依赖于 C F SV
特 异 的单 链 R A,该 蛋 白在 病 毒 的 生 命 周期 中 至关 重 要 。还 N 有 其 他 一 些 非 结 构 蛋 白 ,比如 N 4 和 N 4 、N 5 SA SB S A和 N 5 SB 这 些非 结 构蛋 白的研 究还 不 多 ,其 中 N 5 S B也 与病 毒 复制 有关 。 2 猪瘟 病 毒 蛋 白表 达 技 术 21 原核 表 达 . 在 各 种 表 达 系 统 中 ,最 早 被 采 用 进 行 研 究 的 是 原 核 表 达 系 统 .这 也 是 目前 掌 握 最 为 成熟 的 表 达 系 统 。该 项 技 术 的 主 要 方 法 是 将 已 克 隆 人 目的 基 因 D A 片 段 的 载 体 ( 般 为 质 N 一
DNA疫苗在动物医学中的研究进展

DNA疫苗在动物医学中的研究进展摘要:本文从DNA疫苗的研究历史,构建,优缺点,临床应用与安全性以及前景展望综述了DNA疫苗在动物医学中的研究进展。
关键词:DNA疫苗,应用研究进展DNA疫苗也称核酸疫苗(Nucleic Acid Vaccine),是利用基因重组技术直接将编码某种抗原蛋白的外源基因导入动物体细胞内,在宿主细胞中表达外源抗原基因,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。
DNA疫苗是继传统疫苗和基因工程亚单位疫苗之后的第三代新型疫苗。
这种疫苗不但具有灭活疫苗的优点,而且尚未发现有逆转录的危险,因此在实践应用中越来越受到人们的重视,被誉为疫苗研究的第三次革命。
就其研究进展而言,该疫苗具有很好的前景,如疟疾、乙型肝炎和人类免疫缺陷病毒HIV疫苗等已进入了临床试验。
一.DNA疫苗的发展过程1.1DNA疫苗的面世Wloff 等( 1990) 在研究体内基因转染,给小鼠的肌细胞注射未加任何化学试剂的裸露质粒DNA时,意外发现肌细胞吸收了质粒DNA, 并高水平表达了外源基因( Wloff 等, 1992) 。
Tang 等( 1992) 将表达人生长激素的基因质粒DNA 导入小鼠表皮细胞, 在小鼠血清中检测到了特异的抗生长激素抗体, 并且在给予加强剂量的质粒后可使免疫反应增强。
1992 年, UImer 等将含流感病毒核心蛋白( NP) 基因序列的重组质粒注射小鼠股四头肌, 发现的确刺激产生了特异性的CTL, 能保护小鼠抵抗不同流感病毒株感染。
此后, 在其他许多动物中都陆续观察到了外源基因的表达并被机体的免疫系统识别从而激发了免疫应答, 说明直接给动物接种编码抗原的基因可使动物获得对该抗原的免疫力。
从此宣告了基因疫苗的诞生, 为疫苗的发展开辟了一条新的思路, 被誉为开创了疫苗学的新纪元.1.2DNA疫苗的优点 A .DNA疫苗接种后,保护性抗原基因在宿主细胞内表达抗原蛋白后,其加工处理过程与病原的自然感染过程相似,两者的抗原递呈过程亦相同,因而诱导接种动物既产生细胞免疫又产生体液免疫。
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国 内外研 究者做 了许 多努力并取得 了一 定的成 果。本 文将从 猪瘟 DNA疫苗 的构建 、 免疫佐 剂、 临床 : :
:
[ 关键词】 猪瘟; DNA疫苗 ; 免 疫机 制 ; 免 疫途径 ; 安全性
:
猪 瘟 ,在欧 洲 又称 为 古 典猪 瘟 ( c l a s s i c a l 以下优点 :① 宿主体 内表达 的抗原 以天然 的构像 s w i n e f e v e r ,C S F ) , 是 由猪 瘟 病 毒 ( c l a s s i c a l 呈 递给 免疫系统p J .② 可诱 导长期或 终身免 疫[ 4 1 ; s w i n e f e v e r v i r u s ,C S F V ) 引起 的一种高度接触性 ③ 不仅可引起 体液免疫 ,更重要 的是产生强有力
重要的意义 。
的意义 ,可用 于对诸 多疾病 的早期预 防[ 8 1 ;⑧可
以将 多种 质粒 D N A混合 组成 多价 疫苗 针对 相 同
1 D N A疫 苗 简 介
D N A疫苗又称核酸疫 苗或基 因疫苗 ,是 2 O 世 或不 同病 原 体 的多种 抗 原分 子进 行 联合 接种 ; 纪9 0 年代 Wo l f等首 创 的新 型疫 苗 ,是指 将含 ⑨ 生产迅 速 、简 便 、成 本低 廉 ,易 于保 存和 运
畜 牧 兽医
l ; 宙 试 验 综 述
猪瘟 D N_ A 疫 苗 的研 究 进展
刘 军 骅
( 辽 宁省 重大动物疫 病应 急 中心 , 辽宁
中图分类号 ¥ 8 5 9 . 7 9 文献标 识码 A
沈阳 1 1 0 1 6 1 )
1 6 7 2 — 9 6 9 2 ( 2 0 1 3 ) 0 5 — 0 0 5 9 — 0 4
活体 内表 达,载体上的外源基 因在体 内持续表达 种 传染 病 的免疫研 究 ,人 们期 望用 D N A疫苗 来 出天然抗 原物质 ,产 生的抗原激活宿主 的免疫系 征服病毒感染 性、非病 毒微 生物感染性疾 病及 寄 统 ,诱 导宿 主产 生对 该抗原蛋 白的免疫应答 ,因 生虫病 ,并用 于肿瘤 、遗传病和其 它多种疾病 的
常发生免疫 失败 ,弱毒 疫苗在野 外也存在着毒力 量 易 于控制 和 评价 ,D N A序 列清 楚 ,纯 化技 术 反强 的可 能性 ,从而影 响猪瘟传统疫 苗的使用Ⅲ 。 简便 ,可避免 污染[ 6 1 ;⑦D N A疫苗不 受或很少 受 因此 ,研 制 出有 效 的猪 瘟 D N A疫苗 将 克服猪 瘟 母源抗体 的影 响,在新 生动物 可诱 导出较 强的免 传统疫苗 的缺 点,对猪瘟 的控制和净 化有着十分 疫反应 ,对于幼龄动物 的早期 免疫具有十分 重要
而 另外 两 头猪 获得 了完 全 的保 护 。免 疫后 攻 毒 转 录成 R N A 【 1 。李娜等构 建了基于 S F V复制子载 前 ,在 猪体 内并未 检测 到抗 C S F V抗 体 的存在 , 体 、表 达 C S F V E 2基 因 的 新 型 D N A疫 苗 p S —
体 ;质粒 p c D C W 对兔 和猪 进行 免疫后 可使 其抵
2 01 3 . D 5 盘
畜 牧 兽医
试验综述
抗强毒 的攻击” ” 。G a n g e s 等用 质粒 p C D N A — E 2 装 于病毒样 颗粒 ;二是体外 转录成裸 R N A ( R N A ( T MR + E 2 ) 对猪进行 免疫 ,攻 毒后只有 一头猪 出 载体 ) ;三是将复制 子置于 R N A聚合酶 Ⅱ启动子 现 了轻 微 的临床 症状 ,剖检有 轻微 的病理变 化 , 控 制下 ( D N A载 体 ) , 由细 胞 R N A聚 合酶 I I 体内 文章编号 Nhomakorabea:
[ 摘
要】从 2 0 世纪9 0 年代 DNA疫 苗 出现 至今 , 许 多研究者构建 了不同种 类的 D NA疫苗 , 它具 :
: 有 经济实用、 工艺 简易及安全 高效等特 点 , 因此 D NA疫苗 已迅速成为疫 苗研 究领域 的热点。这些真 : : 核表 达栽体 能够诱 发机体产 生特 异性 的体 液和细胞介 导的免疫应 答。对 于猪 瘟DNA疫苗的研 究 ,
传染病 ,该病遍布世界各 国,对养猪业造成 了巨 的细胞 免疫 ,保护 力强 】 ;④ 对不 同亚型 的病原
大 的经济 损失 。在猪瘟 的防治 中,猪瘟兔化弱毒 体 有交叉抵抗作用 ] ;⑤ 外源 D N A不 能整合 到宿 疫苗 出现 过免疫效果不理想 ,而组织弱毒苗也经 主 细胞 的染色体上 ,使用 比较安全 稳定【 7 】 ;⑥ 质
[ 收稿 日期] 2 0 1 3 — 0 4 — 0 1 [ 作者 简介] 刘军骅 ( 1 9 7 8 一 ) , 男, 本科 , 兽医师 , 主要从事物 资储 备、 行业考试等方面 工作 。
真核 表达 质粒 ,其 中质 粒 p c D S W 肌 肉注射 小 鼠
后可诱 导小 鼠体 液免 疫应答 ,产 生抗 C S F V的抗
0 】 。 而起 到 免疫 保 护和 预 防疾病 的作用 。D N A疫 苗 基 因水 平 治 疗
被称 作 “ 疫苗 的第 三次革命 ” ,是极 有发展潜 力 2 猪瘟 DN A疫苗的构建
的一种新型疫苗 。 目前 ,国 内外 均 有关 于猪 瘟 D N A疫苗 的报
与传 统猪 瘟 疫苗 相 比,猪 瘟 D N A疫 苗会 有 道 。余 兴龙 等构 建 了 4 种包 含 E 2 全基 因序 列 的
有编码 某种抗原蛋 白的外源基 因与真核表达质粒 输,无 须冷藏 。 重组 后作 为疫 苗 D N A( 有 时也 可 能是 R N A ) ,采 近 年 来 ,D N A疫 苗对 动物 或 人类 疾 病预 防 用某种 方法直接注射 到动物体 内,使外源基 因在 及 治疗 方面 的研 究报道 不 断增加 , 已用于 5 O 多