细胞培养实验室的设置及设备
组培实验室设计方案
组培实验室设计方案1. 概述本文档旨在提供一个组培实验室的设计方案，以满足实验室所需的功能和要求。
组培实验室是用于细胞培养和治疗研究的实验室，需要提供适合组织培养的环境和设备。
2. 实验室布局与设备选择2.1 实验室布局组培实验室的布局需要考虑以下方面：•生物安全：实验室需要分隔出不同的实验区域和洁净区域，确保实验过程的生物安全。
•功能分区：将实验室划分为培养区、操作区、储存区和办公区，以确保实验操作的顺利进行和实验材料的储存。
•通风系统：实验室需要安装高效的通风系统，以排除室内异味和细菌，保持实验环境的洁净。
•实验台：实验室需要提供足够数量的实验台，用于组织培养和实验操作。
•储存柜：实验室需要提供储存柜，用于存放实验材料和试剂。
2.2 设备选择组培实验室需要配备以下设备：•组织培养箱：用于提供适宜的温度、湿度和气氛条件，以促进细胞生长和培养。
•纯化台：用于细胞分离和纯化。
•培养皿离心机：用于培养皿中液体的离心分离。
•显微镜：用于观察和分析组织培养过程中的细胞和组织。
•培养箱：用于存放培养基和培养器具。
•反应器：用于培养和扩增细胞。
3. 实验室安全与清洁3.1 安全措施•实验室必须设有安全门和实验员禁止入内的标志，确保非实验员无法进入实验室。
•实验室人员必须进行安全培训，了解实验室操作规范和应急措施。
•实验室必须配备适当的个人防护装备，如实验衣、手套、护目镜等。
•实验室内应设置清洁消毒区域，用于清洁和消毒实验器具。
3.2 清洁措施•实验室必须定期进行清洁和消毒，保持实验环境的洁净。
•实验员必须定期清洁和消毒实验台、实验器具和实验室设备。
•实验室必须定期更换培养基和培养皿，确保培养材料的新鲜和无菌。
4. 实验室管理与监控4.1 实验室管理•实验室必须设立实验室管理员，负责实验室设备的维护和管理。
•实验室必须建立实验室日志，记录实验室的使用情况和设备的维护记录。
•实验室必须建立实验室存储管理制度，确保实验材料的安全存放。
细胞检测实验室建设标准
细胞检测实验室建设标准细胞检测实验室是进行细胞研究和检测的重要场所，其建设标准的制定对于确保实验室的安全性、准确性和可靠性至关重要。
本文将从实验室的空间布局、设备选购、环境要求等方面介绍细胞检测实验室建设的标准。
一、实验室空间布局1. 实验室面积要求：细胞检测实验室应具备足够的空间，以容纳必要的仪器设备、试剂和人员操作。
一般来说，细胞检测实验室的面积应不小于60平方米。
2. 实验室分区：细胞检测实验室应合理划分为不同的区域，包括样品处理区、试剂储存区、设备操作区、数据分析区等。
不同区域之间应有明确的分隔，以防止交叉污染。
3. 实验室通风：细胞检测实验室应具备良好的通风系统，确保室内空气流通，并能及时排除有害气体和异味。
二、设备选购1. 显微镜：细胞检测实验室必备的设备是显微镜，应选购具备高分辨率、高放大倍数和清晰成像的显微镜，以便观察细胞的形态和结构。
2. 离心机：离心机是细胞检测实验室中常用的设备，用于沉淀细胞和分离细胞组分。
选购离心机时应考虑其转速范围、容量和安全性。
3. 培养箱：细胞检测实验室中的细胞培养箱应具备恒温、恒湿和无菌环境，以保证细胞培养的稳定性和质量。
4. 流式细胞仪：流式细胞仪是一种能够对细胞进行快速分析和检测的仪器，选购时应考虑其分辨率、敏感性和多参数分析的能力。
三、环境要求1. 温度和湿度：细胞检测实验室的温度和湿度应保持在适宜的范围内，一般控制在20-25摄氏度和40-60%的相对湿度。
2. 光照条件：细胞检测实验室中的工作区域应采取适当的光照条件，以避免对细胞实验产生不良影响。
可以选择自然光或者特殊的光源。
3. 电源和插座：细胞检测实验室应配备稳定可靠的电源和插座，以供实验设备和仪器的正常使用。
四、安全管理1. 实验室安全标识：细胞检测实验室应设置明显的安全标识，包括实验室入口处的警示标志、危险品存放区的标识、应急设备的位置标示等，以提醒人员注意安全。
2. 废液处理：细胞检测实验室应建立废液处理机制，对产生的废液进行妥善处理，以避免对环境和人员健康造成危害。
细胞实验课修改版
实验一实验前准备一、目的及要求组织细胞培养技术要求无菌操作，避免微生物及其他有害因素的影响，因此，了解细胞培养实验室的设置和设备，掌握培养用品的清洗和消毒灭菌是进行试验前的最基本要求。
二、实验原理利用各种物理（如超声波、高温灭菌等）及化学（如强酸浸泡等）上的方法对去除器皿上杂质及其对细胞生长有影响的物质及各种微生物，为试验的无菌操作做最初的准备。
并用湿热灭菌法对清洗好的细胞培养专用器皿及用具进行消毒。
湿热灭菌法的原理是：湿热法可在较低的温度下达到与干热法相同的灭菌效果，因为：①湿热中蛋白吸收水份，更易凝固变性；②水分子的穿透力比空气大，更易均匀传递热能；③蒸汽有潜热存在，每1克水由气态变成液态可释放出529卡热能，可迅速提高物体的温度。
湿热灭菌法一般采用121℃，灭菌20-30min，如果是产孢子的微生物则应采用灭菌后适宜温度下培养几小时，再灭菌一次，以用于杀死刚刚萌发的孢子。
三、细胞培养室的设置及设备1．细胞培养实验室的设置a)无菌操作区：无菌操作室，净化工作台，无菌操作箱b)孵育区c)制备区d)储藏区e)清洗和消毒灭菌区2．细胞培养实验室的设备⑴仪器：a)显微镜b)培养箱c)冰箱d)细胞冻存储存器e)离心机及天平f)灭菌锅g)干燥箱h)水纯化装置⑵培养用器皿a)培养器皿：培养瓶，培养皿，多孔培养板b)培养操作有关的器皿：储液瓶，吸管，加样器⑶器械细胞原代培养所需的手术剪刀、器械四、实验步骤1 培养用品的清洗1.1 玻璃器皿的清洗步骤：用毛刷沾取适量洗涤剂刷洗（或用超声清洗仪清洗）用自来水将洗涤剂冲洗干净于60℃的恒温箱中烘干在浓酸（配方见附表）中浸泡过夜取出浸泡后的器皿，置于盆中，用自来水冲洗至无色用自来水冲洗，每个器皿用流水灌满，倒掉蒸馏水冲洗3遍超纯水（18.2兆欧）冲洗2遍于60℃的恒温箱中烘干1.2 胶塞、盖子等橡胶、塑料制品的清洗用毛刷沾取适量洗涤剂刷洗（或用超声清洗仪清洗）用自来水将洗涤剂冲洗干净于60℃的恒温箱中烘干在稀盐酸中浸泡30min 蒸馏水漂洗3次用超纯水（18.2兆欧）漂洗2遍烘干1.3 Decon90清洗法：将Decon90用去离子水稀释至2%到5%的浓度，依据污渍顽固性程度酌情增加溶液浓度，再将待清洗物浸泡2-24小时，加热（40-50摄氏度）使用超声波清洗池清洗30 min，用自来水冲洗干净，然后用超纯水（18.2兆欧）冲洗3遍，在60摄氏度恒温箱中烘干。
细胞实验室建设标准
细胞实验室建设标准细胞实验室是生命科学研究中不可或缺的重要环节，其建设标准直接关系到实验室的安全性、实验结果的准确性以及研究工作的顺利进行。
在建设细胞实验室时，需要严格按照相关标准进行规划和设计，以确保实验室的功能完善、环境优良、设施齐全。
首先，细胞实验室的建设应符合相关的法律法规和标准要求。
在国家和地方的法律法规中，对于实验室的建设和使用都有着明确的规定，包括实验室的使用范围、安全要求、环境保护等方面的要求。
因此，在建设细胞实验室时，必须严格遵守相关法规，确保实验室的合法合规。
其次，细胞实验室的建设需要考虑实验室的功能和实验需求。
不同类型的细胞实验需要不同的实验条件和设备，因此在建设实验室时，需要根据实验的具体需求来确定实验室的功能区域和设备配置。
例如，细胞培养区、细胞分离区、细胞培养液制备区等，都需要根据实验需求进行合理的规划和设计。
此外，实验室的环境条件也是建设的重点。
细胞实验室的环境条件对于细胞的生长和实验结果有着重要的影响，因此在建设实验室时，需要考虑实验室的通风、温度、湿度等环境因素。
同时，实验室的洁净度和消毒措施也是至关重要的，可以通过空气净化系统、紫外线消毒灯等设施来保证实验室的洁净度。
另外，细胞实验室的安全设施也是建设的重点之一。
实验室中常常涉及到有害物质和易燃易爆材料，因此在建设实验室时，需要设置相应的安全设施，包括安全柜、安全淋浴器、紧急出口等，以应对突发情况，保障实验人员的安全。
最后，实验室的管理和维护也是建设的关键。
建设好实验室只是第一步，实验室的管理和维护同样重要。
需要建立健全的实验室管理制度，包括实验室的使用规定、设备的维护保养、实验人员的培训等，以确保实验室的正常运行和设施的长期有效使用。
综上所述，细胞实验室的建设标准涉及到多个方面，需要综合考虑实验需求、法规要求、环境条件、安全设施以及管理维护等因素。
只有严格按照相关标准进行规划和设计，才能建设出功能完善、安全可靠的细胞实验室，为生命科学研究提供有力支持。
细胞实验基本操作与实验室要求
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第一节 实验室及仪器设备 第二节 实验基本操作 第三节 培养基及其配制
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第一节 实验室及仪器设备
细胞工程实验室要能满足清洗、无 菌操作、培养基制备、贮藏和培养 鉴定等多方面的要求。
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一、实验室
基本操作室
1、 植 无菌操作室 物 培养室 实 验 鉴定分析室 室
※ 继代培养用灭菌的器具（镊子或吸管） 直接将培养材料放置在新培养基上。
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第三节 培养基及其配制
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定义：培养基是离体培养组织或细胞 赖以生存的营养基质，是为离体培养 材料提供的近似生物体内生存的营养 环境。
没有任何一种培养基能够适合一切类 型的组织、细胞和器官的培养。
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弱液
50 100 1000
次强液
100 0 200
常用配方
100 200 800
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1、KCrO4液要冷却后才能加浓硫酸。以防暴沸。
2、浓硫酸要慢慢倒入KCrO4液中。
3、洗液要密封保存，以免失效。 正常洗液黑棕色 蓝绿色（效用变弱）
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二、消毒灭菌
用上述浓度的酒精擦拭双手和前臂。
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2、无菌操作步骤 将培养材料灭菌后放入已消毒的培养皿中，置于超 净工作台酒精灯火焰下方，进行适当切割或其他处理。 在酒精灯火焰处将培养瓶盖轻轻打开，瓶口在火焰 处旋转灼烧。 将镊子过火，用镊子将培养材料置于培养基上 将镊子、瓶口及塞子过火后盖回瓶口。
细胞实验室建设要求和布局
细胞实验室主要是在合适的温湿度、光照度、PH值、洁净度的环境下研究培养出来的细菌。
主要是运用于医学领域。
细胞实验室的建设要求：一、基本要求1、总建筑面积宜不小于1000m2。
2、洁净区使用面积宜不小于500m2。
3、洁净室的净高度应在2.5-2.8m之间。
二、总体布局1、总体平面布局应符合GB19489、GB50333、GB50346、GB50457的要求。
2、洁净区各室布局应清晰合理，不应交叉混合使用，且应符合人、物分流的原则。
3、人流通道、洁净区入口应设缓冲室。
4、废物、污染物需设置专用传递窗。
5、传递窗送风方式应采用上送侧回的方式。
6、通道门的开启方向应由低洁净级向高洁净级的方向开启。
7、所有洁净区不应安装水池和地漏。
（除更衣室外）三、环境要求1、环境设计应符合GB19489、GB50346、GB50457、《药品生产质量管理规范》和AABB的要求。
2、洁净区的环境技术指标应符合要求：3、空气洁净度等级划分应符合要求；4、二更、缓冲、细胞制备区、细胞培养区的空气洁净度应符合表1中的C级。
细胞制备操作相关区域的空气洁净度至少应在C级背景下的A级环境中进行；5、温度应控制在22±4℃，湿度应控制在45%～65%为宜；6、洁净区与非洁净区之间、不同空气洁净度的洁净区之间的压差应＞10Pa。
洁净区内不同功能及级别房间之间宜保持适当的压差梯度，以防止污染和交叉污染；7、总送风量中（非单向流）应有10%～30%的新风量；8、噪声级（空态）应≤65dB(A)；9、般照明的照度值宜＞300LX，对照度有特殊要求的区域（细胞产品灯检区）应设置局部照明。
细胞培养实验室设计规划要求
细胞培养实验室设计规划要求1.空间规划与布局：实验室应根据不同的工作流程和实验操作进行合理的空间布局，同时考虑不同细胞株的分类和分离需求。
实验室的设计要充分利用空间，并提供足够的工作区域，以保证实验员的舒适度和实验工作的顺利进行。
2.生物安全性：实验室应当符合相关的生物安全标准，确保实验过程中的生物安全。
实验室内应有标准的工作台、生物安全柜、成分消毒设备、抽风系统等生物安全设备，以防止实验操作中的样品污染和实验员受到感染。
3.温度和湿度控制：细胞培养实验对温度和湿度非常敏感。
因此，实验室内应安装温湿度控制设备，以维持恒定的温度和湿度条件，确保细胞培养的稳定性和准确性。
此外，应为培养箱、CO2孵化器等设备提供合适的空间和安全的运行环境。
4.洁净度：实验室设计要求应采取洁净措施，以减少细菌和其他微生物的污染。
实验室的地面、墙壁和天花板等表面应平整易清洁，使用材料应防水、防菌和耐酸碱。
此外，实验室应提供合适的洁净工作区，以进行无菌操作和培养瓶等物品的消毒。
5.设备和器材：实验室设计应根据具体的研究需求配备相应的实验设备和器材。
例如培养箱、CO2孵化器、离心机、显微镜、培养基制备设备等。
此外，应设有特定的存储区域，用于存放细胞培养所需的试剂、培养基、生物样品等，以保证安全性和可靠性。
6.实验室通风系统：细胞培养实验过程中常涉及有害气体和显微粒子的产生，因此实验室内应配置合适的通风系统，以保持空气清洁。
通风系统应具备风量调节、风速调节、换气周期和过滤装置等功能，以确保实验室内的空气质量。
7.安全设施：实验室设计要求应配置安全设施，包括眼镜洗眼器、紧急淋浴器、灭火器等，以应对突发事故的发生。
此外，实验室的入口处应设有洗手台，并设置合适的防护设施，以确保实验员的个人安全。
8.实验室管理：实验室的设计规划还应考虑实验室管理的方便性。
例如，实验室应配备合适的实验台面、储物柜和标本架等，以方便实验员工作和存储实验物品。
细胞培养室的使用流程
细胞培养室的使用流程1. 细胞培养室概述细胞培养室是一个专门用于细胞培养和实验操作的封闭环境。
在细胞培养室中，保持恒定的温度、湿度和气体组成对于细胞生长至关重要。
2. 细胞培养室的设备和器材•基本设备：细胞培养箱、显微镜、培养箱、培养皿、培养瓶、培养皿转接器等。
•器材：离心管、试管、移液器、介质瓶等。
3. 进入细胞培养室前的准备在进入细胞培养室前，需要进行以下准备工作： 1. 穿戴合适的实验服和实验手套。
2. 所有的实验器具和试剂必须经过严格的消毒和洗涤。
3. 携带所需的实验材料和试剂。
4. 细胞培养室的操作规范为了保证细胞培养室中的卫生和细胞的纯度，有一定的操作规范需要遵守： -所有的操作必须在培养箱内进行，不得将培养器皿带出培养箱。
- 操作过程中要注意避免细胞与细菌、真菌等外源性污染。
- 每次操作前，务必进行手部消毒，并将工作台面、培养器皿等进行彻底清洁。
- 操作完毕后，要将使用过的培养器皿和试剂等进行正确的处理，避免交叉污染。
5. 细胞培养液的准备和使用细胞培养液是细胞培养中必备的培养基，其准备和使用方法如下： 1. 准备完整的培养基组分，如含有氧化还原剂、生长因子和抗生素等。
2. 根据实验要求，将适量的培养基组分和无菌水按照比例混合，制备细胞培养液。
3. 使用无菌操作技术，将细胞培养液加入培养皿或培养瓶中。
4. 放入培养箱中，保持恒定的温度和湿度。
6. 细胞的传代和分离细胞的传代和分离是细胞培养中的重要步骤，其操作方法如下： 1. 检查细胞培养的密度和状态，确保细胞处于适宜的生长状态。
2. 使用消泡剂等工具，将细胞轻轻分散，避免细胞聚集和形成团块。
3. 使用无菌技术，将细胞转移到新的培养皿或培养瓶中。
4. 继续培养新的细胞，直至达到所需的数量和状态。
7. 显微观察和实验操作在细胞培养室中，可以进行各种显微观察和实验操作，包括： - 细胞形态的观察与拍照。
- 细胞增殖和分化的实验。
动物细胞培养实验报告
动物细胞培养实验报告实验目的本实验的目的是通过培养和观察动物细胞，了解细胞的结构和功能。
实验材料和设备•动物细胞培养基•细胞培养皿•细胞培养罩•无菌移液器•显微镜•离心机实验步骤步骤一：准备工作1.将工作台、实验室器材和手部清洗消毒，确保无菌环境。
2.准备所需的实验材料和设备。
步骤二：细胞培养基的制备1.将细胞培养基倒入细胞培养皿中，每个培养皿倒入适量的培养基。
2.用无菌移液器将细胞培养基均匀涂布在培养皿内表面。
3.将培养皿放入细胞培养罩中，用透明膜封闭。
步骤三：细胞的收获1.从实验动物体内提取所需的组织样本，保持组织样本的完整性和无菌状态。
2.将组织样本置于离心管中，加入少量的预先准备好的细胞培养基。
3.使用无菌移液器将组织样本与细胞培养基充分混合。
4.将混合液转移到培养皿中，确保液体均匀覆盖培养皿表面。
步骤四：细胞培养1.将培养皿放入孵化器中，设置合适的温度和湿度，提供细胞生长所需的最佳环境条件。
2.定期观察培养皿内细胞的生长情况，记录细胞的数量和形态变化。
步骤五：细胞观察1.从培养皿中取出一小部分细胞，放入显微镜载玻片上。
2.将载玻片放入显微镜下，使用适当的倍率观察细胞的形态特征和细胞器的结构。
3.记录细胞的形态特征、大小和细胞器的分布情况。
实验结果和讨论通过以上步骤，我们成功地进行了动物细胞的培养实验，并观察到了细胞的生长和形态变化。
在显微镜下观察到的细胞形态特征和细胞器的结构，可以帮助我们更好地理解细胞的组成和功能。
细胞培养是生物学研究中常用的技术手段，通过培养和观察细胞，我们可以深入了解细胞的生命活动和疾病发生机制。
在实验过程中，我们需要保持无菌操作，以确保细胞的纯度和生长条件的良好。
细胞培养实验的结果和观察对于生物医学研究和药物开发具有重要意义。
通过改变培养条件和添加适当的药物，我们可以研究细胞的响应和代谢途径，为新药物的筛选和评估提供重要依据。
结论通过本次实验，我们成功地培养和观察了动物细胞。
细胞实验室建设标准
细胞实验室建设标准细胞实验室是生物医学研究中不可或缺的重要设施，其建设标准直接关系到实验室的安全性、实验结果的准确性以及研究工作的顺利进行。
为了确保细胞实验室的建设达到标准，我们需要从以下几个方面进行规范和要求。
首先，实验室的场地选择十分关键。
细胞实验室应该远离噪音、震动和污染源，同时要有良好的通风条件和充足的自然光照。
实验室的地面应该平整、防滑、易清洁，并且要能够承受实验设备的重量。
此外，实验室内的墙壁和天花板应该采用易清洁、耐腐蚀的材料，以确保实验室的卫生和安全。
其次，实验室的设备和仪器也是建设中需要重点考虑的方面。
细胞培养室需要配备恒温恒湿箱、培养箱、显微镜等设备；细胞分离室需要配备离心机、超速离心机等设备；细胞操作室需要配备生物安全柜、超净台等设备。
这些设备和仪器的选购和摆放需要符合相关的标准和规范，以确保实验室的工作环境和操作流程符合要求。
另外，实验室的安全管理也是至关重要的。
实验室应该配备相应的安全设施，包括紧急洗眼器、紧急淋浴器、灭火器等。
同时，实验室的工作人员需要接受相关的安全培训，了解实验室内各种化学品和生物制品的危险性，掌握正确的应急处置方法，确保实验室的安全生产。
最后，实验室的卫生和环境管理也是不可忽视的。
实验室应该定期进行卫生消毒，保持实验室的整洁和干净。
同时，实验室的废物处理也需要符合相关的规定，确保废物的安全处理和处置，避免对环境造成污染。
综上所述，细胞实验室的建设标准涉及到多个方面，需要全面考虑实验室的场地选择、设备和仪器、安全管理以及卫生和环境管理等方面。
只有严格按照标准规范要求进行建设和管理，才能确保实验室的安全性和工作效率，为生物医学研究提供可靠的支持。
希望各位实验室建设者和管理者能够重视实验室建设标准，确保实验室的安全和顺利运行。
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一、 细胞培养实验室的设置及设备 （一）细胞培养实验室的设置 组织细胞培养技术与其他一般实验室工作的主要区别在于要求保持无菌操作，避免微生物及其他有害因素的影响。目前，超净工作台的广泛使用，很大程度上方便了组织细胞培养工作，并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。
细胞培养实验室应能进行六方面的工作：无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。
1．无菌操作区 （1）无菌操作室：无菌操作区只限于细胞培养及其他无菌操作的区域，最好能与外界隔离，不能穿行或受其他干扰。
理想的无菌操作室应划为三部分： a) 更衣室—―供更换衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。 b) 缓冲间—―位于更衣间与操作间之间，目的是为了保证操作间的无菌环境，同时可放置恒温培养箱及某些必需的小型仪器。
c) 无菌操作间—―专用于无菌操作、细胞培养。其大小要适当，且其顶部不宜过高（不超过2.5m）以保证紫外线的有效灭菌效果；墙壁光滑无死角以便清洁和消毒。工作台安置不应靠墙壁，台面要光滑压塑作表面，漆成白色或灰色以利于解剖组织及酚红显示pH的观察。 无菌操作间的空气消毒： 紫外线灯—－产生臭氧，并且室内温度及湿度均较高，不利于工作人员健康。 空气过滤的恒温恒湿装置—－最好。 表1 洁净室（区）空气洁净度级别表 洁净度级别 尘粒最大允许数／立方米 微生物最大允许数 浮游菌／立方米 沉降菌／皿
100级 3,500 0 5 1 10000级 350,000 2,000 100 3 100000级 3,500,000 20,000 500 10 300000级 10,350,000 60,000 - 15 无臭氧紫外线消毒器 电子消毒灭菌器—－在高压电场作用下，电子管的内外电极发生强烈电子轰击，使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂，能同细菌的胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应，从而靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌之目的，消毒时没有死角。消毒后空间的残留臭氧只需30～40min即能自行还原成氧气，空气不留异味，消毒物体表面不留残毒。 （2）净化工作台：操作简单，安装方便，占用空间小且净化效果很好。一般细菌培养室使用的净化工作台主要有两种：a)侧流式或称垂直式 b)外流式或称水平层流式。
净化工作台工作原理（大致相同）—－通常是将室内空气经粗过滤器初滤，由离心风机压入静压箱，再经高效空气过滤器精滤，由此送出的洁净气流以一定的均匀的断面风速通过无菌区，从而形成无尘无菌的高洁净度工作环境。
侧流式工作台—－空气净化后的气流由左或右侧通过工作台面流向对侧，也有从上向下或从下向上流向对侧，形成气流屏障保持工作区无菌。工作台结构为封闭式。
外流式（水平式）工作台—－净化后的空气面向操作者流动，因而外方气流不致混入操作，但进行有害物质实验操作则对操作者不利。工作台结构为开放式（已少用）。
净化工作台应用注意： （1）净化工作台应安装在隔离好的无菌间或清洁无尘的房间内，以免尘土过多易使过滤器阻塞，降低净化效果，缩短其使用寿命。
（2）新安装的或长期未使用的工作台，工作前必须对工作台和周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作，然后再采用药物灭菌法或紫外线灭菌进行灭菌处理。 （3）使用净化工作台前，应先用75％酒精擦洗台面，并提前以紫外线灭菌灯照射30～50min处理净化工作区内积存的微生物。关闭灭菌灯后应启动风机使之运转两分钟后再进行培养操作。
（4）净化工作区内不应存放不必要的物品，以保持洁净气流流型不受干扰。 （5）注意净化区内气流的变化，一旦感到气流变弱，如酒精灯火焰不动，加大电机电压仍未见情况改变则说明滤器已被阻塞，应及时更换。一般情况下，高效过滤器三年更换一次。更换高过滤器应请专业人员操作，以保持密封良好。粗过滤器中的过滤布（无纺布）应定期清洗更换，时间应根据工作环境洁净程度而定，通常间隔3-6个月进行一次。
（6）净化工作台使用完毕应及时清理工作台面上的物品并用酒精擦洗台面使之始终保持洁净。
（7）净化工作台应定期进行功能测试，检查净化工作台各项工作指标是否达到要求，例如进行无菌试验，定期检查台面空气的洁净度是否达标。
超净工作台的无菌程度检查超净工作台在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数；取直径约90mm平皿，在超净工作台内点燃酒精灯，在酒精灯旁，以无菌操作，将平皿半开注入溶化的营养琼脂培养基约20ml，制成平板，在30～35℃预培养48小时，证明无菌后将平板3个，以无菌方式带入超净工作台内左、中、右各放一个；打开平皿盖扣置，平板在空气中暴露30分钟后将平皿盖盖好，置30～35℃培养48小时，取出检查，100级清洁度要求：3个平皿上生长的菌落数平均不得超过1个。 超净工作台应定期请有关部门检查其洁净度，应达到100级（一般用尘埃粒子计数仪）检测尘埃粒径≤5祄的粒数不得超过3.5个／升；空气流量应控制在0.75~1.0m3/s；细菌菌落数平均<1个，可根据无菌状况必要时置换过滤器。
2．孵育区 本区对无菌的要求虽不比无菌区严格，但仍需清洁无尘，因此也应设置在干扰少而非来往穿行的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进行，后者费用高，一般实验室多采用孵箱进行工作。
3．制备区 在该区主要进行培养液及有关培养用的液体等的制备。 4．储藏区 主要存放各类冰箱、干燥箱、液氮罐、无菌培养液、培养瓶等，此环境也需要清洁无尘。
5．清洗和消毒灭菌区 清洁和消毒灭菌区应与其他区域分开，主要进行所有细胞培养器皿的清洗、准备、消毒及三蒸水制备等工作。
(二)细胞培养实验室的设备 组织细胞培养室除一般实验室的普通常规设备外，尚有一些特殊需要的设备。基本可分为两大类：第一类为常用的基本设备；第二类为较高级的特殊设备。
1. 常用的基本设备 （1） 仪器： a）显微镜：倒置显微镜——是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一，便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。
——若有条件，尚可配置带有照相系统的高质量相差显微镜、解剖显微镜、荧光显微镜、录像系统或缩时电影拍摄装置等，以便随时观察、记录、摄影细胞生长情况。
a） 培养箱：体外培养的细胞和体内细胞一样，需要在恒定的温度下生存，大多数情况下，最适温度是37℃，温差变化一般不应超过±0.5℃，细胞在温度升高2℃时，持续数小时即不能耐受，40℃以上将很快死亡。因此需要有能控制温度的培养箱，如具有较高灵敏度的恒温培养箱及CO2培养箱。
恒温培养箱——应选隔水式或晶体管自控温培养箱，此类培养箱灵敏度高，温度控制较稳定。一般的恒温培养箱价格较便宜，其缺点是只宜于作密闭式培养。
CO2培养箱——目前多数的细胞培养室已广泛使用。CO2培养箱的优点是能够提供进行细胞培养时所需要的一定量的CO2（常用浓度为5％），易于使培养液的pH保持稳定，适用于开放或半开放培养。培养细胞的器皿可用培养皿、培养板或培养瓶；当使用培养瓶时，可将瓶盖略微旋松，使培养瓶内与外界保持通气状态。由于这种培养方法培养器皿内部与外界相通，培养箱内空气必须保持清洁，应定期以紫外线照射或酒精消毒。同时培养箱应放置盛有无菌蒸馏水的水槽，防止培养液蒸发，使箱内相对湿度始终保持为100％。
c）干燥箱：用于细胞培养箱的有些器械、器皿需要烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时，电热干燥箱升温较高，一般需达到160℃以上。通常使用鼓风式电热干燥箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至100℃时，停止鼓风，应避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后，不能立即打开箱门以免骤冷而导致玻璃器皿损坏，应等候温度自然下降至100℃以下方可开门。
d）水纯化装置：细胞培养对水的质量要求较高，细胞培养以及与细胞培养工作相关的液体的配制用水必须事先严格纯化处理。水纯化时可采用离子交换装置或蒸馏器。离子交换纯水尚不能有效去除有机物，因此用水时尚需再次蒸馏。进行细胞培养时配制各种培养液及试剂等均需使用三次蒸馏水：即使是用于玻璃器皿的冲洗，也应使用二次以上蒸馏水。
目前国内使用较多的是自动双重纯水蒸馏器（石英管加热），使用方便，安全、蒸馏速度快（1600ml/h）。
使用注意： ○a不可采用普通自来水蒸馏，以免蒸馏器内很快结成水垢影响蒸馏效果；同时，还需视蒸馏器内存水垢程度定期彻底清洗蒸馏器。 ○b正确的使用方法是将经金属蒸馏器蒸馏的蒸馏水加入玻璃蒸馏器内进行再次蒸馏。
一般配制培养液的用水应在配液前蒸馏，不宜使用存放数日的三蒸水，以免影响培养用水的质量。
目前市场上供应的是含有各种级别和类型的采用一种或多种纯化方法相结合的使普通水纯化为纯水和超纯水的纯水系统可供选择。例如：设计灵活的可以挂壁、也可为台式，也可以有储水箱、也可直接用分液枪的纯水装置；还可根据各类实验用水需求选择配备有效杀菌或去除DNA酶、RNA酶、蛋白酶等，甚至可有效去除掉热源、内毒素的超滤型纯水器。
e）冰箱：细胞培养室必须配备 ○a普通冰箱或冷藏柜 ——储存培养液、生理盐水、Hank’s液试剂等培养用的物品及短期保存组织标本。
○b低温冰箱（-20℃）、超低温冰箱 ——用于储存需要冷冻保存生物活性及较长时期存放的制剂，如酶、血清等。 ——细胞培养室的冰箱应属专用，不得存放易挥发、易燃烧等对细胞有害的物质，且应保持清洁。